CN102419324A - 喹乙醇流动注射分子印迹-化学发光在线联用检测方法 - Google Patents
喹乙醇流动注射分子印迹-化学发光在线联用检测方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN102419324A CN102419324A CN2011102657885A CN201110265788A CN102419324A CN 102419324 A CN102419324 A CN 102419324A CN 2011102657885 A CN2011102657885 A CN 2011102657885A CN 201110265788 A CN201110265788 A CN 201110265788A CN 102419324 A CN102419324 A CN 102419324A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- olaquindox
- chemiluminescence
- solution
- mol
- flow injection
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Images
Landscapes
- Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)
Abstract
本发明涉及一种喹乙醇流动注射分子印迹-化学发光在线联用检测方法，包括分子印迹聚合物的制备、流动注射分子印迹-化学发光在线联用体系的建立、流动注射分子印迹-化学发光在线联用检测等步骤；本发明以制备的对喹乙醇具有高选择性的分子印迹聚合物作为吸附剂，避免了传统吸附剂选择性差等缺点，是将流动注射分子印迹在线富集与化学发光联用，建立对喹乙醇具有广泛检测范围的快速灵敏检测方法。本发明成本低廉，实验操作简单，灵敏度高，适用于各种农产品中痕量喹乙醇的快速检测。
Description
技术领域
本发明涉及一种喹乙醇流动注射分子印迹-化学发光在线联用检测方法，属于食品安全检测术领域，特别是一种喹乙醇的快速检测方法。
背景技术
喹乙醇（Olaquindox，2-[N-(2-羟基-乙基)-氨基甲酰]-3-甲基-喹恶啉-1,4-二氧化物）因其具有良好的广谱抗菌效果并且有促进畜禽对饲料的消化利用，提高生长速度；是一种低毒、高效、用量少的抗菌促生长剂，被广泛用于多种兽药及饲料添加剂中。
目前国内外食品中喹乙醇的检测大都采用液相色谱及液相色谱质谱联联用的方法进行定性和定量检测，但上述几种检测方法所使用的设备价格昂贵且在喹乙醇含量较低时很难检出，需要复杂样品前处理技术。分子印迹-化学发光联用检测方法将分子印迹技术的高特异性识别作用与化学发光的高灵敏度相结合，避免了传统检测中复杂的样品前处理过程，使检测过程简单、快速且具有高的灵敏度，对保证我国食品中喹乙醇的有效检测和监控监管，尽快提升我国的食品安全性和食品安全的控制能力将发挥重要作用，具有十分重要意义。
发明内容
本发明的目的在于克服传统的喹乙醇检测方法存在的检测时间长、仪器价格昂贵、准确度差、前处理烦琐等缺陷，提供一种喹乙醇流动注射分子印迹-化学发光在线联用检测方法。
一种喹乙醇流动注射分子印迹-化学发光在线联用检测方法，是按以下步骤完成的：
1）分子印迹聚合物的制备：在甲醇溶液中，将喹乙醇、功能单体3-氨基丙基三乙氧基硅烷、交联剂四乙氧基硅烷以1:3:8的摩尔比例混合均匀，然后加入活化硅球作为支持载体，0.1 mol L-1醋酸作为催化剂进行聚合反应；用1:3（v/v）冰乙酸-甲醇溶液连续洗脱8h以除去喹乙醇，再用100%甲醇洗至中性，干燥后得分子印迹聚合物（MIP）；
2） 流动注射分子印迹-化学发光在线联用体系的建立
向一根6 mm ×5 cm 的玻璃管内填充步骤1制备的100 mg分子印迹聚合物，两端塞少许玻璃棉制成MIP柱；将MIP柱放在化学发光仪的检测光窗上，建立流动注射分子印迹-化学发光在线联用体系；将化学发光体系溶液（3.0×10?4 mol L?1高锰酸钾溶液、1.5 mol L?1硫酸溶液和5.0×10?4 mol L?1硫代硫酸钠）分别通过三条流路同时流动注射流过MIP柱，除去MIP柱上的杂质直至基线平稳；
3）流动注射分子印迹-化学发光在线联用检测流程（图1）：
a 富集喹乙醇：
把喹乙醇标准溶液流动注射入分子印迹-化学发光在线联用体系4 min，当喹乙醇标准溶液流经MIP柱时，溶液中的喹乙醇被MIP柱选择性吸附；
b 清洗除去杂质：
把蒸馏水注入体系2 min，清洗并除去MIP柱上除喹乙醇以外的杂质；
c 化学发光信号产生：
将化学发光体系溶液（3.0×10?4 mol L?1高锰酸钾溶液、1.5 mol L?1硫酸溶液和5.0×10?4 mol L?1硫代硫酸钠）分别通过三条流路同时流动注射入体系与MIP柱上吸附的喹乙醇反应产生光信号，记录光信号响应值；
d 清洗MIP小柱：
把蒸馏水注入体系2 min，清洗并除去MIP柱上喹乙醇反应后残留的杂质，进行下一次实验；
4) 以步骤3）中喹乙醇标准溶液浓度为横坐标，以对应浓度产生的光信号响应值为纵坐标，绘制标准曲线；
5)将含喹乙醇的分析物粉碎，按重量体积比（g/mL）1:5加入乙腈溶液超声提取三次，合并提取液，定容；3000 r min-1 离心30min，得样品提取液；
6)将步骤5）中得到的样品提取液代替喹乙醇标准溶液，重复步骤3）操作，根据化学发光信号响应值由标准曲线计算出分析物中喹乙醇含量。
本发明的优点和积极效果是：
1. 本发明以制备的对喹乙醇具有高选择性的分子印迹聚合物作为吸附剂，避免了传统吸附剂选择性差等缺点，避免了样品繁琐的前处理过程。
2. 本发明将分子印迹技术与化学技术联用建立对喹乙醇具有高灵敏度的检测方法，实现了对喹乙醇的在线富集检测，大大缩短了分析时间，适用于快速检测。
3. 本发明成本低廉，灵敏度高，实验操作简单，适用于各种农产品中喹乙醇的快速检测。
本发明与现有其他检测方法的比较：
附图说明：
图1为流动注射在线富集分子印迹化学发光联用检测体系：(a) KMnO4溶液；(b) 硫酸; (c) 硫代硫酸钠; (d) 喹乙醇; (泵 A, 泵 B) 蠕动泵; (V) 六通阀; (W) 废液池 (D) 检测器。
具体实施方式
下面结合实施例，对本发明进一步说明；下述实施例是说明性的，不是限定性的，不能以下述实施例来限定本发明的保护范围。
本发明是将喹乙醇分子印迹技术与化学发光联用，从而建立对喹乙醇具有高灵敏度的快速检测方法。其具体实施例为：
1. 以甲醇为溶剂，分子印迹聚合物的制备过程如下：在100 mL 带塞的圆底烧瓶中加入45 mL纯甲醇溶液、0.9 g喹乙醇固体粉末，回流加热溶解；溶解后加入2.34 mL 3-氨基丙基三乙氧基硅烷，磁力搅拌，反应20 min；加入0.5 g活化硅球，搅拌5 min，加入6.24 mL四乙氧基硅烷，搅拌10 min；再加入4.0 mL 0.1 mol L-1醋酸，50℃水浴孵化24 h；用1:3（v/v）冰乙酸-甲醇溶液连续洗脱8h以除去喹乙醇，再用100%甲醇洗至中性，80℃真空干燥10 h后得分子印迹聚合物MIP。
2. 流动注射分子印迹-化学发光在线联用体系的建立
向一根6 mm ×5 cm 的玻璃管内填充步骤1制备的100 mg分子印迹聚合物，两端塞少许玻璃棉做成MIP柱，将MIP柱放在化学发光仪的检测光窗上，建立流动注射分子印迹-化学发光在线联用体系；将化学发光体系溶液（3.0×10?4 mol L?1高锰酸钾溶液、1.5 mol L?1硫酸溶液和5.0×10?4 mol L?1硫代硫酸钠）分别通过三条流路同时流动注射流过MIP柱，除去MIP柱上的杂质直至基线平稳；
3. 流动注射分子印迹-化学发光在线联用检测流程（图1）：
（1）富集喹乙醇：
把0.02 mg L-1喹乙醇标准溶液流动注射入体系4 min，当溶液流经MIP柱时，溶液中的喹乙醇被MIP柱选择性吸附；
（2）清洗除去杂质：
把蒸馏水注入体系中2 min，清洗并除去MIP柱上除喹乙醇以外的杂质；
（3）化学发光信号产生：
将3.0×10?4 mol L?1高锰酸钾溶液、1.5 mol L?1硫酸溶液和5.0×10?4 mol L?1硫代硫酸钠分别通过三条流路同时流动注射入体系与MIP柱上吸附的喹乙醇反应产生光信号，记录光信号响应值；
（4）清洗MIP柱：
把蒸馏水注入体系中2 min，清洗并除去MIP柱上喹乙醇反应后残留的杂质；
再依次改变喹乙醇标准溶液浓度为0.004、0.08、0.10、0.16和0.50 mg L-1，分别重复上述操作，记录喹乙醇标准溶液对应浓度所产生的光信号响应值；
4. 以步骤3中不同喹乙醇标准溶液浓度为横坐标，以对应浓度所产生的光信号响应值为纵坐标，绘制标准曲线；
5．准确称取2.0 g鸡饲料于烧杯中，加入10.0 mL乙腈，超声提取三次，每次10 min，合并提取液，定容至30 mL；3000 r min-1 离心30 min，得样品提取液；
6．将上述样品提取液代替步骤3（1）喹乙醇标准溶液，重复步骤3操作，根据化学发光信号响应值由步骤 4绘制的标准曲线计算出样品提取液中喹乙醇浓度为5.0 mg L-1，可知分析物中喹乙醇含量为0.075 mg g-1。
Claims (1)
1.一种喹乙醇流动注射分子印迹-化学发光在线联用检测方法，其特征在于包括以下步骤：
1）制备分子印迹聚合物：在甲醇溶液中，将喹乙醇、功能单体3-氨基丙基三乙氧基硅烷、交联剂四乙氧基硅烷以1:3:8的摩尔比例混合均匀，然后加入活化硅球作为支持载体，0.1 mol L-1醋酸作为催化剂进行聚合反应；用1:3（v/v）冰乙酸-甲醇溶液连续洗脱8h以除去喹乙醇，再用100%甲醇洗至中性，干燥后得分子印迹聚合物MIP；
2）建立流动注射分子印迹-化学发光在线联用体系
向一根6 mm ×5 cm 的玻璃管内填充步骤1制备的100 mg分子印迹聚合物，两端塞少许玻璃棉制成MIP柱；将MIP柱放在化学发光仪的检测光窗上，建立流动注射分子印迹-化学发光在线联用体系；将3.0×10?4 mol L?1高锰酸钾溶液、1.5 mol L?1硫酸溶液和5.0×10?4 mol L?1硫代硫酸钠溶液分别通过三条流路同时流动注射流过MIP柱，除去MIP柱上的杂质直至基线平稳；
3）流动注射分子印迹-化学发光在线联用检测：
a 把喹乙醇标准溶液流动注射入分子印迹-化学发光在线联用体系4 min，当喹乙醇标准溶液流经MIP柱时，溶液中的喹乙醇被MIP柱选择性吸附；
b 把蒸馏水注入体系2 min，清洗并除去MIP柱上除喹乙醇以外的杂质；
c 将3.0×10?4 mol L?1高锰酸钾溶液、1.5 mol L?1硫酸溶液和5.0×10?4 mol L?1硫代硫酸钠分别通过三条流路同时流动注射入体系与MIP柱上吸附的喹乙醇反应产生光信号，记录光信号响应值；
d 把蒸馏水注入体系2 min，清洗并除去MIP柱上喹乙醇反应后残留的杂质；
4）以步骤3）中喹乙醇标准溶液浓度为横坐标，以对应浓度产生的光信号响应值为纵坐标，绘制标准曲线；
5）将含喹乙醇的分析物粉碎，按重量体积比（g/mL）1:5加入乙腈溶液超声提取三次，合并提取液，定容；3000 r min-1 离心30min，得样品提取液；
6）将步骤5）中得到的样品提取液代替喹乙醇标准溶液，重复步骤3）操作，根据化学发光信号响应值由标准曲线计算出分析物中喹乙醇含量。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN 201110265788 CN102419324B (zh) | 2011-09-08 | 2011-09-08 | 喹乙醇流动注射分子印迹-化学发光在线联用检测方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN 201110265788 CN102419324B (zh) | 2011-09-08 | 2011-09-08 | 喹乙醇流动注射分子印迹-化学发光在线联用检测方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN102419324A true CN102419324A (zh) | 2012-04-18 |
| CN102419324B CN102419324B (zh) | 2013-03-27 |
Family
ID=45943836
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN 201110265788 Expired - Fee Related CN102419324B (zh) | 2011-09-08 | 2011-09-08 | 喹乙醇流动注射分子印迹-化学发光在线联用检测方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN102419324B (zh) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106770210A (zh) * | 2016-11-22 | 2017-05-31 | 无锡艾科瑞思产品设计与研究有限公司 | 一种喹乙醇快速检测方法 |
| CN110346359A (zh) * | 2019-07-26 | 2019-10-18 | 国家海洋局南海环境监测中心（中国海监南海区检验鉴定中心） | 一种流动分析防吸附方法 |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2007525570A (ja) * | 2003-12-08 | 2007-09-06 | ザ リサーチ ファウンデイション オブ ステイト ユニバーシティー オブ ニューヨーク | センサー利用のための、部位選択的にタグ付および鋳造された分子インプリントポリマー |
| CN101308066A (zh) * | 2008-06-12 | 2008-11-19 | 济南大学 | 痕量真菌毒素分子印迹柱制备方法及应用 |
| CN101644680A (zh) * | 2009-09-01 | 2010-02-10 | 济南大学 | 检测痕量农药残留物的分子印迹化学发光传感器及其应用 |
| US20110003397A1 (en) * | 2009-07-01 | 2011-01-06 | City University Of Hong Kong | Solvatochromic functional monomer and the use thereof for chemosensing by solvatochromic molecular imprinting |
-
2011
- 2011-09-08 CN CN 201110265788 patent/CN102419324B/zh not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2007525570A (ja) * | 2003-12-08 | 2007-09-06 | ザ リサーチ ファウンデイション オブ ステイト ユニバーシティー オブ ニューヨーク | センサー利用のための、部位選択的にタグ付および鋳造された分子インプリントポリマー |
| CN101308066A (zh) * | 2008-06-12 | 2008-11-19 | 济南大学 | 痕量真菌毒素分子印迹柱制备方法及应用 |
| US20110003397A1 (en) * | 2009-07-01 | 2011-01-06 | City University Of Hong Kong | Solvatochromic functional monomer and the use thereof for chemosensing by solvatochromic molecular imprinting |
| CN101644680A (zh) * | 2009-09-01 | 2010-02-10 | 济南大学 | 检测痕量农药残留物的分子印迹化学发光传感器及其应用 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| ZHIXIANG XU, ET AL: "Molecularly imprinted solid phase extraction coupled to high-performance liquid chromatography for determination of trace dichlorvos residues in vegetables", 《FOOD CHEMISTRY》 * |
| 宋春美,等: "喹乙醇的危害及检测方法研究进展", 《河南农业科学》 * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106770210A (zh) * | 2016-11-22 | 2017-05-31 | 无锡艾科瑞思产品设计与研究有限公司 | 一种喹乙醇快速检测方法 |
| CN110346359A (zh) * | 2019-07-26 | 2019-10-18 | 国家海洋局南海环境监测中心（中国海监南海区检验鉴定中心） | 一种流动分析防吸附方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN102419324B (zh) | 2013-03-27 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN103920307B (zh) | 一种高效分离富集样品中碘的方法 | |
| CN101762647B (zh) | 一种采用高效液相色谱测定啤酒中2-糠醛的方法 | |
| CN107255690A (zh) | 一种液相色谱测定孔雀石绿的方法 | |
| CN103713077A (zh) | 高效液相色谱法测定红曲中γ-氨基丁酸含量的方法 | |
| CN104297367B (zh) | 在线光解渗析/色谱分离安培检测废水总氰及硫化物装置与方法 | |
| CN105424829A (zh) | 水体的沉积物中多种酸性药物的检测方法 | |
| CN102419324B (zh) | 喹乙醇流动注射分子印迹-化学发光在线联用检测方法 | |
| CN105974018A (zh) | 基于多功能净化柱-高效液相色谱法检测食品中毒黄素的方法 | |
| Shao et al. | Rapid determination of levofloxacin in pharmaceuticals and biological fluids using a new chemiluminescence system | |
| CN107868164B (zh) | 一种亚硝胺类消毒副产物分子印迹聚合物的制备方法及应用 | |
| CN106770210A (zh) | 一种喹乙醇快速检测方法 | |
| CN101747513A (zh) | 一种富集痕量莱克多巴胺的高分子聚合物的制备方法 | |
| CN106383187A (zh) | 一种植物油中玉米赤霉烯酮的检测方法 | |
| Yang et al. | Molecularly imprinted on-line solid-phase extraction combined with chemiluminescence for the determination of pazufloxacin mesilate | |
| CN102507820A (zh) | 一种同时检测敌百虫和久效磷的方法 | |
| CN102565208A (zh) | 一种硫酸依替米星新的检测方法 | |
| CN105738514A (zh) | 一种搅拌棒吸附萃取检测农药残留的方法 | |
| CN104101634A (zh) | 一种基于合成氧化锌纳米棒的电化学传感器的制备方法 | |
| CN111579675B (zh) | 饲料中脂溶性维生素的检测方法 | |
| CN109507151B (zh) | 基于表面等离子体共振技术的四环素检测方法 | |
| CN103048407A (zh) | 一种复方a 酮酸片中赖氨酸的含量检测方法 | |
| CN109507306B (zh) | 一种水基胶中乙酰柠檬酸三丁酯的测定方法 | |
| CN104458390A (zh) | 一种基于盐辅助-氧化石墨烯分散固相微萃取方法 | |
| CN102393424A (zh) | 橡胶硫化促进剂n-环己基-2-苯并噻唑次磺酰胺纯度的分析方法 | |
| CN104020159A (zh) | 一种检测四羧基苯基卟啉的方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| C17 | Cessation of patent right | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20130327 Termination date: 20130908 |