CN102395548A

CN102395548A - 全氟化碳类乳液

Info

Publication number: CN102395548A
Application number: CN201080017461XA
Authority: CN
Inventors: 理查德·凯瑞; 德宝·P·汤普森; 格瑞·克劳森
Original assignee: Oxygen Biotherapeutics Inc
Current assignee: Tenax Therapeutics Inc
Priority date: 2009-04-15
Filing date: 2010-04-15
Publication date: 2012-03-28
Also published as: CA2756685A1; CA2756685C; WO2010121082A3; IL215516A; US20160243237A1; WO2010121082A2; EP2419392A2; EP2419392A4; US20140066522A1; US20100267842A1; IL215516A0

Abstract

本申请提供了一种乳液，它包含一定量的作为颗粒分散在连续液相中的全氟化碳液体，其特征在于，该分散的颗粒具有单峰粒径分布，以及乳液的应用。本申请也提供了一种生产全氟化碳乳液的方法，一种制备含有PFC乳液的药物产品的方法，以及验证一个批次的乳液用于药物使用的方法。

Description

全氟化碳类乳液

本申请要求2009年11月13日提交的美国专利，专利临时申请号(U.S.Provisional Application No.)为61/281,191，2009年10月19日提交的美国专利，专利临时申请号为61/279,359，2009年4月29日提交的美国专利，专利临时申请号为61/214,992，和2009年4月15日提交的美国专利，专利临时申请号为61/212,689的优先权，每一项申请被全文纳入本申请作为参考。

贯穿本申请，参考了各种出版物，发表的专利申请和专利。为了更加完整地描述有关本发明所属的技术发展水平，这些公开文件的全文被纳入本申请作为参考。

背景技术

已知的全氟化碳(PFCs)是化学和生物学惰性的物质，它们能够溶解包括氧气和二氧化碳的很大体积的气体，达到的浓度远高于气体溶解在水，盐水和血浆中的浓度。此外，PFC类能输送这些气体扩散穿越一段距离。因此，PFC类可以成为将高浓度的氧气或者其它治疗气体传递给细胞组织和器官系统的合适工具。由于它们独特的性质，结果PFC类已经在治疗许多急性医疗处境的继发性缺氧时作为输送气体成份的首选(Spahn，1999；美国专利，专利公告号(Patent ApplicationPublication No.)为2009-0202617)。

通常用于医学研究的PFC类是室温下生物学惰性的，有生物稳定的(biostatic)液体，其密度约为1.5-2.0g/mL，并且对于氧气和二氧化碳有高的溶解度。但是，纯的PFC液体不适合于注入血流中，这是由于它们的疏水性导致它们与血液不溶混的缘故。将纯的全氟化碳液体移置到小血管中去会产生血管梗阻和死亡。因此，对于需要血管内注射的医疗应用，必须将全氟化碳分散在生理上可接受的水性乳液(aqueous emulsion)中。参见，例如L.C.Clark，Jr.et al.，“Emulsions of PerfluorinatedSolvents for Intravascular Gas Transport”，Fed.Proc.，34(6)，pp.1468-77(1975)；K.Yokoyama et al.，“A Perfluorochemical Emulsion As An Oxygen Carrier”，Artif.Organs(Ceve)，8(1)，pp.34-40(1984)；以及美国专利，专利号(U.S.Pat.No.)为4,110,474和4,187,252。

美国专利，专利号为5,514,720，5,684,050，5,635,539，5,171,755，5,407,962和5,536,753披露了包括全氟化碳的各种高度氟化化合物的乳液，它们被全文纳入本申请作为参考。

全氟化碳乳液被视为有前景的技术，具有广泛的用途(参见，例如，Spiess，2009；Spahn，1999；Mason，1989)。但是，在本申请中所讨论的许多有关安全性和效能的问题以前并未被识别和解决，使得全氟化碳乳液可用于临床。

发明综述

本申请提供了一种包含一定量的全氟化碳液体的乳液(emulsion)，全氟化碳液体作为颗粒分散在连续液相中，其特征在于，该分散的颗粒具有单峰粒径分布(monomodal particle size distribution)，以及乳液的应用。本发明还提供了一种生产全氟化碳乳液的方法，它包含步骤：a)将乳化剂(emulsifier)与水一起混合；b)将全氟化碳加到步骤a)的混合物中；c)混合步骤b)的混合物以形成粗乳液(coarse emulsion)；d)获得步骤c)粗乳液的样品，测定该样品的粒径分布(particlesize distributio)；e)如果步骤d)的样品具有单峰粒径分布(monomodal particle sizedistribution)，则使步骤c)的粗乳液均质化；以及f)获得该乳液。本发明还提供了一种制备含有PFC乳液的药物产品(pharmaceutical product)的方法，该方法包含：a)获得一批PFC乳液或者粗乳液；b)1)测定该批次的粒径分布；2)测定存在于该批次中的残留氟化物(residual fluoride)的总量；或者3)测定存在于该批次中的溶血磷脂酰胆碱(lysophosphatidylcholine)(LPTC)的总量；以及c)仅当1)该批次被测定具有单峰粒径分布；2)按乳液的重量计，该批次被测定含有少于40ppm的残留氟化物；或者3)按乳液的重量计，该批次被测定含有少于7g/L的溶血磷脂酰胆碱(LPTC)时，由该批次制备药物产品。本申请还提供了一种验证乳液批次可用于药物使用(pharmaceutical use)的方法，该方法包含：a)1)测定该批次的样品的粒径分布；2)测定该批次的样品中残留氟化物的总量；或者3)测定该批次的样品中溶血磷脂酰胆碱(LPTC)的总量；以及b)仅当1)该批次被测定具有单峰粒径分布；2)按乳液的重量计，该批次被测定含有少于40ppm的残留氟化物；或者3)按乳液的重量计，该批次被测定含有少于7g/L的溶血磷脂酰胆碱(LPTC)时，验证该批次可以用于药物使用。

附图的简要说明

图1显示生产权利要求乳液的生产流程图。

图2A)显示加入PFC后不合格的粗乳液百分粒径分布(percentile sizedistribution)(PSD)；B)显示高剪切混合后不合格的粗乳液PSD。

图3A)显示图2B的粗乳液在9000psig下均质化过程后的PSD；B)显示图2B的粗乳液在15000psig下均质化过程后的PSD。

图4A)显示图2B的粗乳液在20000psig下均质化过程后的PSD；B)显示图2B的粗乳液在25000psig下均质化过程后的PSD。

图5A)显示合格粗乳液的PSD；B)显示高压均质化过程后合格粗乳液的PSD。

图6显示典型的均质化装置的示意图。

发明的详细说明

发明的实施例

本申请提供了一种包含一定量的全氟化碳液体的乳液，全氟化碳液体作为颗粒分散在连续液相中，其特征在于，该分散的颗粒具有单峰粒径分布。

在一个实施例中，乳液含有少于40ppm的按乳液重量计的残留氟化物。在另一个实施例中，按乳液的重量计，存在于全氟化碳乳液中的残留氟化物的量少于40ppm。在另一个实施例中，按乳液的重量计，乳液含有少于30ppm的残留氟化物。在另一个实施例中，按乳液的重量计，乳液含有少于20ppm的残留氟化物。在另一个实施例中，按乳液的重量计，乳液含有10ppm-40ppm的残留氟化物。在另一个实施例中，按乳液的重量计，乳液含有20ppm-30ppm的残留氟化物。

在一个实施例中，按乳液的重量计，乳液含有少于7g/L的溶血磷脂酰胆碱(LPTC或LPC)。在另一个实施例中，存在于全氟化碳乳液中的溶血磷脂酰胆碱(LPTC)的量，按乳液的重量计，少于7g/L。在另一个实施例中，按乳液的重量计，乳液含有少于3g/L的溶血磷脂酰胆碱(LPTC)。在另一个实施例中，按乳液的重量计，乳液含有少于2g/L的溶血磷脂酰胆碱(LPTC)。在另一个实施例中，按乳液的重量计，乳液含有少于1.5g/L的溶血磷脂酰胆碱(LPTC)。按乳液的重量计，乳液含有1.2g/L-7g/L的溶血磷脂酰胆碱(LPTC)。按乳液的重量计，乳液含有2g/L-6g/L的溶血磷脂酰胆碱(LPTC)。按乳液的重量计，乳液含有3g/L-5g/L的溶血磷脂酰胆碱(LPTC)。

在一个实施例中，按分散的颗粒的体积计，总量的90％或者更多具有颗粒尺寸小于700纳米(nm)。在另一个实施例中，按分散的颗粒的体积计，总量的90％或者更多具有颗粒尺寸小于600纳米(nm)。

在一个实施例中，按分散的颗粒的体积计，总量的50％或者更多具有颗粒尺寸小于400纳米(nm)。在另一个实施例中，按分散的颗粒的体积计，总量的50％或者更多具有颗粒尺寸小于300-350纳米(nm)。在另一个实施例中，按分散的颗粒的体积计，总量的50％或者更多具有颗粒尺寸小于200-300纳米(nm)。在另一个实施例中，按分散的颗粒的体积计，总量的99％或者更多具有颗粒尺寸小于1微米(μm)。

在一个实施例中，分散颗粒的D(0.9)约为700纳米(nm)。在另一个实施例中，分散颗粒的D(0.9)约为600纳米(nm)。在另一个实施例中，分散颗粒的D(0.5)约为150-400纳米(nm)。在另一个实施例中，分散颗粒的D(0.5)约为200-330纳米(nm)。在另一个实施例中，分散颗粒的D(0.99)约为1微米(μm)。在另一个实施例中，分散颗粒的平均尺寸(mean size)约为200-400μm。

在一个实施例中，分散颗粒的平均直径(mean diameter)约为0.20-0.25μm。在另一个实施例中，分散颗粒的平均直径约为0.20μm。在另一个实施例中，分散颗粒的粒度中值(media size)约为180-300nm。

在一个实施例中，全氟化碳是全氟(叔丁基环己烷)，全氟萘烷，全氟异丙基萘烷，全氟三丙基胺，全氟三丁基胺，全氟甲基环己基哌啶，全氟辛基溴，全氟癸基溴，全氟二氯辛烷，全氟己烷，十二氟戊烷，或者它们的混合物。

在一个实施例中，全氟化碳含有按全氟化碳重量计的少于5ppm的残留共轭烯烃(conjugated olefin)。在另一个实施例中，存在于全氟化碳中的残留共轭烯烃的量，按全氟化碳重量计，少于5ppm。在另一个实施例中，全氟化碳含有按全氟化碳重量计的少于3ppm的残留共轭烯烃。在另一个实施例中，全氟化碳含有按全氟化碳重量计的少于1ppm的残留共轭烯烃。

在一个实施例中，全氟化碳含有按全氟化碳重量计的少于1ppm的残留氟化物。在另一个实施例中，存在于全氟化碳中的残留氟化物的量，按全氟化碳重量计，少于1ppm。在一个实施例中，全氟化碳含有按全氟化碳重量计的少于0.7ppm的残留氟化物。

在一个实施例中，全氟化碳含有按全氟化碳重量计的少于20ppm的残留有机氢(organic hydrogen)。在另一个实施例中，存在于全氟化碳中的残留有机氢的量，按全氟化碳重量计，少于20ppm。在另一个实施例中，全氟化碳含有按全氟化碳重量计的少于10ppm的残留有机氢。在一个实施例中，全氟化碳含有按全氟化碳重量计的少于5ppm的残留有机氢。

在一个实施例中，乳液包含20-80％w/v的全氟化碳。在另一个实施例中，乳液包含60％w/v的全氟化碳。

在一个实施例中，乳液还包含乳化剂。在另一个实施例中，乳液包含1-10％w/v的乳化剂。在另一个实施例中，乳液包含2.5-4.5％w/v的乳化剂。在另一个实施例中，该乳化剂是表面活性剂。在还有另外一个实施例中，该表面活性剂是蛋黄磷脂(egg yolk phospholipid)。

在一个实施例中，乳液包含40-80％w/v的水。在另一个实施例中，乳液包含50-70％w/v的水。在还有另一个实施例中，该水是注射用水。

在一个实施例中，乳液还包含水介质(aqueous medium)。在另一个实施例中，该水介质是等渗的。在另一个实施例中，该水介质被缓冲至pH为6.8-7.4。在还有另一个实施例中，该乳液还包含维生素E。

本申请还提供了一种治疗受试者患有的镰状细胞病，减压病，气泡栓塞或者一氧化碳中毒方法，它包含给予受试者这里描述的乳液，以有效治疗受试者的镰状细胞病，减压病，气泡栓塞或者一氧化碳中毒。在一个实施例中，该乳液通过血管内(IV)或者鞘内给予。

本申请还提供了一种在移植前保存器官的方法，它包含将器官与这里描述的乳液接触，以有效延长器官存活时间。在一个实施例中，用该乳液灌注该器官。

本申请还提供了一种治疗受试者患有的创伤，烧伤，痤疮或者酒糟鼻的方法，它包含局部给予受试者的皮肤这里描述的乳液，以有效治疗受试者的创伤，烧伤，痤疮或者酒糟鼻。

本申请还提供了一种提高受试者的皮肤紧致或者减少受试者的细纹，皱纹或者瘢痕出现的方法，它包含局部给予受试者的皮肤这里描述的乳液，以有效提高受试者的皮肤紧致或者减少受试者的细纹，皱纹或者瘢痕出现。

本申请还提供了一种生产全氟化碳乳液的方法，它包含步骤：a)将乳化剂与水介质一起混合；b)将全氟化碳加到步骤a)的混合物中；c)混合步骤b)的混合物以形成粗乳液；d)获得步骤c)粗乳液的样品，测定该样品的粒径分布；e)如果步骤d)的样品具有单峰粒径分布，则使步骤c)的粗乳液均质化；以及f)获得该乳液。

在一个实施例中，在步骤a)中，乳化剂与水介质一起在2,000-7,000rpm的条件下混合。

在一个实施例中，在步骤c)中，步骤b)的混合物在高于8,000rpm的条件下混合。

在一个实施例中，在步骤e)中，步骤c)的粗乳液在高压下被均质化。

在一个实施例中，在步骤d)中，粒径分布采用激光散射粒径分布分析仪来测定。在另一个实施例中，在步骤e)中，仅当步骤d)的样品的中值粒径(median particlesize)小于20μm时，步骤c)的混合物才被均质化。在另一个实施例中，在步骤e)中，仅当步骤c)的混合物的pH值为6.8-7.4时，步骤c)的混合物才被均质化。在另一个实施例中，在步骤e)中，粗乳液在7000psi或高于7000psi下被均质化。在还有另一个实施例中，在步骤f)中，在预先确定好的一段时间后获得了乳液。该预先确定好的一段时间可以是乳化作用时间，它取决于批量的大小和通过均化器的流量大小。乳化作用时间可以通过连续流计算来确定，可以利用Leviton和Pallansch披露的计算方法来计算。(Leviton，1959)

本申请还提供了一种制备含有PFC乳液的药物产品的方法，该PFC乳液具有单峰粒径分布，该方法包含：a)获得一批全氟化碳乳液或者粗乳液；b)测定该批次的粒径分布；和c)仅当该批次经测定具有单峰粒径分布时，由该批次制备药物产品。

在一个实施例中，在步骤b)中，粒径分布采用激光散射粒径分布分析仪来测定。

本申请还提供了一种制备含有PFC乳液的药物产品的方法，按乳液重量计，该PFC乳液含有少于40ppm的残留氟化物，该方法包含：a)获得一批全氟化碳乳液或者粗乳液；b)测定存在于该批次中的残留氟化物总量；和c)仅当确定按乳液重量计，该批次含有少于40ppm的残留氟化物时，由该批次制备药物产品。

本申请还提供了一种制备含有PFC乳液的药物产品的方法，按乳液重量计，该PFC乳液含有少于7g/L的溶血磷脂酰胆碱(LPTC)，该方法包含：a)获得一批全氟化碳乳液或者粗乳液；b)测定存在于该批次中的溶血磷脂酰胆碱(LPTC)总量；和c)仅当确定按乳液重量计，该批次含有少于7g/L的溶血磷脂酰胆碱(LPTC)时，由该批次制备药物产品。

本申请还提供了一种验证乳液批次可作为药物使用的方法，该方法包含：a)测定该批次的样品的粒径分布；和b)仅当该批次的样品具有单峰粒径分布时，才验证该批次可以用于药物使用。

在一个实施例中，在步骤a)中，粒径分布采用激光散射粒径分布分析仪来测定。

本申请还提供了一种验证乳液批次可用于药物使用的方法，该方法包含：a)测定该批次的样品中的残留氟化物总量；和b)仅当按乳液重量计，该批次样品含有少于40ppm的残留氟化物时，才验证该批次可以用于药物使用。

本申请还提供了一种验证乳液批次可用于药物使用的方法，该方法包含：a)测定该批次的样品中的溶血磷脂酰胆碱(LPTC)总量；和b)仅当按乳液重量计，该批次样品含有少于7g/L的溶血磷脂酰胆碱(LPTC)时，才验证该批次可以用于药物使用。

在一个实施例中，在步骤a)中的该批次的样品已经接受过稳定性的测试。

在这里描述的各种要素的所有组合都在本发明的范围之内。

创伤愈合的生物化学和创伤治疗的策略由Chin等人，(2007)陈述在“Biochemistry of Wound Healing in Wound Care Practice”Wound Care Practice，2^nded.，Best Publishing，AZ.，文章在此被纳入作为参考。痤疮治疗见The Merck Manual，17^th Edition(1999)，Merck Research Laboratories，Whitehouse Station，NJ，U.S.A.第116章第10节，811-813页的描述，文章在此被纳入作为参考。镰状细胞病的治疗见The Merck Manual，17^th Edition(1999)，Merck Research Laboratories，WhitehouseStation，NJ，U.S.A.第127章第11节，878-883页的描述，文章在此被纳入作为参考。

术语

除非另有说明，如这里所使用的，下述术语的每一项具有如下陈述的定义。

“约”在一个数值或者范围的上下文中意味着所列举或声称的数值或者范围的±10％。

“加速愈合”意指与未经治疗的对照受试者的组织修复和愈合速度相比，组织修复和愈合速度加快。

“给予受试者”意指给受试者给予，发放，或者敷用药品，药物以缓解或者治愈一种病理状况。局部给予是将即时的化合物和组合物(instant compounds andcompositions)给予受试者的一种途径。给予也可以通过，例如，静脉内或者动脉内来进行。

“改善”一种状况或者状态意味着减轻那种状况或者状态的症状。有关皮肤粉刺，脓包或者丘疹的“改善”指的是减少由粉刺，脓包或者丘疹引起的不适和/或减少他们的出现和/或实际尺寸大小。

“抗菌剂”指的是杀菌的化合物，像硝酸银溶液，醋酸甲磺米隆，或磺胺嘧啶银，或者指的是抗生素。根据本发明，抗菌剂可以存在于“Curpon^TM”产品中。“Cupron^TM”产品利用铜的性质，将铜结合到纺织纤维中用以制造含浸渍有铜的纤维的纺织品，针织品和无纺布，起到抗菌效果，抵抗像细菌和霉菌那样的微生物。

“生物活性试剂”指的是对于生命物质具有有益效果的物质。

“烧伤”指的是有烧伤引起的创伤，它是由于热，辐射，电或者化学热所造成的一度，二度或三度伤害，例如在，The Merck Manual，17^th Edition(1999)，Merck ResearchLaboratories，Whitehouse Station，NJ，U.S.A.第276章，第20节，第2434页的描述。

“一氧化碳中毒”或者“CO中毒”指的是因受试者暴露在一氧化碳中引起的中毒。一氧化碳的毒性随受试者的暴露时间长短，CO浓度，呼吸和循环的速率的不同而变。一氧化碳的中毒症状随血液中的碳氧血红蛋白百分比不同而异，可以包括头疼，眩晕，呼吸困难，精神错乱，瞳孔放大，惊厥和昏迷(其中的部分是脑部受损引起)。CO中毒的标准治疗方法是通过呼吸面罩给予100％氧气(The Merck Manual，1999；Prockop，2007)。

“中枢神经系统”或者“CNS”指的是受试者的脑和脊髓。

“闭合性颅脑(Closed head)”损伤或者“非穿通性(non-penetrating)”损伤是一种颅脑内的损伤，未发生头颅穿通。

如在有效达到一个目标的量中的“有效”指的是按照本发明的方式使用的某一成分的量足以实现期望的治疗应答，并且具有合理的利益/风险比例。例如，有效加速伤口愈合而又不会产生过分的有害副作用的量。具体的有效量随着一些因素的不同而变化，像接受治疗的个别状况，患者的身体状况，接受治疗的哺乳动物的类型，治疗的持续时间，并行治疗(如果有的话)的实际情况，以及采用的具体处方和化合物或者其衍生物的结构。

“乳化剂”意指使乳液稳定的物质。

“乳液”意指两种不溶混液体的混合物。乳液是胶体，其中，胶体的两个相(即分散相和连续相)都是液体，一种液体(分散相)被分散在另一种液体(连续相)中。如在PFC中经常碰到的，分散相液体可以”颗粒”的形式悬浮在连续相液体中。这里每次使用的术语”颗粒”意在把它用于在连续液相和微气泡中的液体PFC微球或者滴(这样使乳液呈胶体悬浮液状态)。在本发明的一个实施例中，该乳液是全氟化碳乳液，该全氟化碳乳液的两种不溶混的液体是全氟(叔丁基环己烷)和蛋黄磷脂。这里所说的“颗粒”也可以指一种物质在气相中的微泡沫，例如，以微泡沫形式出现的PFC蒸气。

“D(0.5)”是以微米表示的粒径，发现50％的总体体积分布在D(0.5)以下。“D(0.9)”是以微米表示的粒径，发现90％的总体体积分布在D(0.9)以下。

“减压病”即“DCS”指的是周围压力的降低所带来的功能紊乱(例如，潜水后上浮，从沉箱或者高压仓里出来，或者上升到一定高度)，归因于溶解在血液或组织中的气体形成气泡，通常的特征表现为疼痛和/或神经病学的表现形式(The MerckManual，1999)。

“吸入的氧气分数(Fraction of Inspired Oxygen)”或“FiO₂”是指空气中传递给受试者的氧量。FiO₂用从0(0％)到1(100％)的一个数字来表示。正常室内空气的FiO₂是0.21(21％)，即，正常室内空气的21％是氧气。

如在这里使用的那样，说一种组合物”无”某一种化学个体指的是，意在分离该化学个体与该组合物的肯定行动采取之后，该组合物不可避免地含有，即使有也是极少，一定量的该化学个体。

“格拉斯哥昏迷计分表(Glasgow Coma Scale)”或“GCS”指的是用于测定最好的眼反应(Best Eye Response)，最好的言语反应(Best Verbal Response)，最好的运动反应(Best Motor Response)的神经病学计分表(见Teasdale G.，Jennett B.，LANCET(ii)81-83，1974.)。它是一种应用广泛的评分系统以量化外伤性的颅脑损伤后的知觉水平。

“氧合障碍(Impaired oxygenation)”指的是，关于组织或者细胞，该组织的氧合水平低于正常生理条件下存在于相同组织或者细胞内的氧合水平。

如用于有关痤疮丙酸杆菌(Propionibacterium acnes)“感染”指的是痤疮丙酸杆菌在(宿主)对象体内的有害植入和生长，引起受试者的炎症反应。

“局部缺血疼痛(Ischemic pain)”指的是患有镰状细胞病受试者的局部缺血所引起的疼痛或者不适。

“单峰粒径分布(Monomodal particle size distribution)”意指一群颗粒(例如，液体微球，小滴，粉末，粒料，珠粒，晶粒，丸粒等)，它们的粒径分布曲线上具有单个清晰可辨识的最大值(纵坐标或Y轴为重量百分数或者强度，横坐标或X轴为粒径大小)。单峰粒径分布不同于双模态粒径分布(bimodal particle size distribution)，它指的是一群颗粒，其粒径分布曲线上具有两个清晰可辨识的最大值。单峰粒径分布也不同于多模态粒径分布(multimodal particle size distribution)，它指的是一群颗粒，其粒径分布曲线上具有三个或更多的清晰可辨识的最大值。

“氧张力(Oxygen tension)”或者“组织氧张力(tissue oxygen tension)”是在特定组织上直接测定到的局部氧分压。

“氧合的全氟化碳(Oxygenated perfluorocarbon)”是在饱和或者亚饱和水平上携带了氧气的全氟化碳。

“外周阻力(Peripheral resistance)”指的是体循环的外周血管阻力。

“药物可接受的载体(Pharmaceutically acceptable carrier)”指的是载体或者助剂，它们适用于人类和/或动物，不会产生过分有害的副作用(像毒性，刺激作用，和过敏反应)，与合理的利益/风险比例相称。它可以是药用可接受的溶剂，悬浮剂或者赋形剂用以给受试者输送即时化合物。载体可以是液体或者固体，根据考虑好的计划给予方式来加以选择。

“药物有效化合物(Pharmaceutically active compound)”指的是药物处方中的有效药物成分的化合物。“有效药物成分(Active pharmaceutical ingredient)”或“API”是由美国食品药物监督局(U.S.Food and Drug Administration)界定的作为设计用于药品生产过程中的任何物质或者这些物质的混合物，当被用于药物生产过程中时，它们成为药品中的有效成分。这样的物质被设计成为诊断，医治，减轻，治疗或者防止疾病提供药理学的活性或者其它的直接效果，或者影响身体的结构与功能。

“原发的(Primary”)和“继发的(secondary)”是颅脑损伤发生过程的分类。在外伤性脑损伤(TBI)中，原发性损伤发生在最初的伤害过程中，起因于颅脑物理结构的位移。继发性损伤逐步产生，可能涉及一系列的细胞病变。非由于最初的机械损伤引起的继发性损伤可以是起因于原发性损伤，或者可以与原发性损伤无关。因此，“原发性缺血(primary ischemia)”是血流不足(导致供氧受限)，直接起因于最初的脑颅损伤，而“继发性缺血(secondary ischemia)”是血流不足(导致供氧受限)，起因于由最初损伤启动的病变，例如，起因于最初损伤的并发症，并且可以涉及在最初损伤中未受伤害的组织。有关TBI的原发性和继发性分类在Silver，J.，et al.(2005)“NeuralPathology”Textbook Of Traumatic Brain Injury.Washington，DC：AmericanPsychiatric Association.Chap.2，pp.27-33中有详细讨论。

“促进减轻疼痛(Promotes alleviation of pain)”指的是减轻受试者由于伤口，损伤，例如烧伤或者其它的病理性状况所引起的疼痛感觉。

“性器官”(Sex organ)或者“生殖器”(sexual organ)指的是涉及到有性生殖和/或性满足并且构成复杂生物体生殖系统的身体上任何解剖学部位。在本发明的一个优选实施例中，该性器官是受试者的生殖器。如在这里所说的，“生殖器(genitalia)”指外面看得见的性器官：男性是阴茎，女性是阴蒂和外阴。

“镰状细胞病(Sickle Cell Disease)”是一种由Hb S的同型接合遗传所致的慢性血红蛋白病。

“稳定性试验(Stability testing)”指的是在特定的时间间隔和各种环境条件下(例如，温度和湿度)所进行的试验以观察一种药物在指定的的货架期内是否降解和降解到何种程度。特定的条件和试验的时间是加速药品在货架期内估计会遇到的条件。例如，成品药稳定性试验的各项要求被整理在21 C.F.R§211.166中，它的全部内容被纳入本申请作为参考。

“局部给予(Topical administration)”一种组合物用在这里指的是将该组合物敷贴在受试者的皮肤或者粘膜上。在一个实施例中，局部给予一种组合物是将该组合物敷贴在受试者的表皮上。

“外伤性脑损伤(Traumatic Brain Injury)”或“TBI”指的是源自冲击的中枢神经系统损伤，即CNS神经元的，轴索的，神经胶质的和/或血管的阻塞。这样的冲击包括钝器撞击，子弹杀伤或者爆炸杀伤。

“血管闭塞危象(Vaso-occlusive crisis)”指的是临床上识别的状况，源自镰状红细胞阻塞毛细血管，限制了血液流向组织和/或器官，尤其导致缺血和疼痛。

“w/v”意指重量/体积比，典型地用于表征生物溶液。一种1％w/v溶液是1g的溶质溶于100mL最终溶液体积中。

PFC乳液的特征

由于PFC液体与包括血液和其它体液的水系统不溶混，所以，它们应该先被配制成生理上相容的乳液才能静脉内给予。

在配制血流中注射用的PFC乳液时应该考虑若干因素，包括但不限于，存在于乳液中的杂质，乳液颗粒尺寸，乳液粒径分布以及乳液的稳定性。理想的PFC乳液应当具有以下的特征而不论用于乳液中的PFC是哪种化合物。

存在于PFC乳液中的杂质受到限制

理想的PFC乳液中的杂质应该在最低水平上。理想的PFC乳液应当具有以下的具体特征：

1.按乳液重量计，全氟化碳乳液含有少于40ppm的残留氟化物，优选地，按乳液重量计，含有少于20ppm的残留氟化物；

2.全氟化碳乳液含有少于7g/L的溶血磷脂酰胆碱(LPTC)，它已经被牵涉到作为有关糖尿病性视网膜病变，动脉粥样化形成和神经变性有力的炎性脂质；

3.按全氟化碳重量计，全氟化碳乳液含有少于5ppm的残留共轭烯烃，优选地，按全氟化碳重量计，含有少于1ppm的残留共轭烯烃；

4.按全氟化碳重量计，全氟化碳乳液含有少于1ppm优选地，少于0.7ppm的残留氟化物；

5.按全氟化碳重量计，全氟化碳乳液含有少于20ppm的残留有机氢，优选地，按全氟化碳重量计，含有少于5ppm的残留有机氢。

小的颗粒尺寸

非常小的颗粒尺寸是需要血流中注射的PFC乳液的一个理想特性。业已表明，颗粒尺寸是决定颗粒从循环中的清除率(clearance rate)，初期清除的位点(the site ofprimary clearance)以及补体激活程度的一个主要因素。

PFC是不产生代谢变化的，它们不溶于水或者脂质中。因此，它们不会在尿液或者粪便中被排泄出去，但是通过肺部作为排除的途径被呼出去。业已表明，静脉注射后PFC乳液从血液腔(blood compartment)中的清除率与剂量有关，并且受到乳液组合物的影响。从血流中清除出去的占支配地位的手段是通过网状内皮系统(RES)的巨噬细胞对乳液颗粒的吞噬作用，即主要是通过脾脏和肝脏中的固定的巨噬细胞(fixed macrophages)的吞噬作用。

粒径分布是通过单核吞噬细胞系统的颗粒清除率和居留巨噬细胞(residentmacrophages)的伴随激活潜势的主要决定因素。它也是有害效应的一个主要原因。小颗粒可能允许颗粒躲避开RES，较长时间地留在脉管系统中，副效应较低。

颗粒尺寸也直接与乳液毒性相关。较大颗粒的分布与较高的毒性相关联：即使平均颗粒尺寸＜0.3微米，较大颗粒的存在增加了产生有害效应的机会。

有关各种脂质体处方的研究已经指出，颗粒直径≥0.3微米的颗粒容易受补体的调理素作用，比颗粒直径≤0.2微米的颗粒更快地从循环中被清除出去。较大的颗粒好像被脾脏清除，而小颗粒主要被肝脏所清除。

单峰粒径分布

在PFC乳液生产过程中，具体地说，在生产过程的高速混合步骤之后和均质化步骤之前，可以利用激光散射粒径分布分析仪来分析粗乳液的粒径分布。借助激光散射粒径分布分析仪，可以看到颗粒具有单峰，双模态或者多模态的粒径分布。

发明者令人惊讶地发现，只有在这个中间步骤具有单峰粒径分布的粗乳液才能导致形成最终乳液具有单峰粒径分布。也就是说，如果第二个峰不在生产过程中的这个阶段消除掉，它就会保留在最终乳液中。因此，只有在粗乳液在激光散射粒径分析仪下呈现单峰粒径分布时才可从高速混合机转移到均质化器去。

免疫活性

理想的乳液不应该是免疫活性的。

业已发现一些早期的PFC乳液(例如，日本Green Cross公司的Fluosol DA和俄罗斯Perftoran公司的Perftoran)具有免疫活性。已经发现了这些PFC乳液中所使用的表面活性剂(Pluronic F68和Proxanol-268)激活了免疫系统的补体旁路。

PFC乳液的高稳定性

理想的乳液应当在指定的货架期内连续满足所有最初的验收指标。颗粒尺寸和粒径分布有别于其它指标，这是因为随着乳液的陈化它们会发生变化的缘故。由于根据定义，乳液是热力学不稳定的，所以这个结果是不可避免的。即使是一个好的乳液在其指定的货架期内颗粒尺寸会呈现出一些增长，不论是由于Ostwald熟化，聚集，絮凝还是沉降所引起。但是，如果乳液配制恰当，生产过程经过优化，则颗粒尺寸的增长率应该相当小，粒度中值应该维持在200-400nm的范围，粒径分布应该保持相当狭窄。

已知的PFC乳液有若干稳定性的问题。Fluosol DA(20％)：P-F68非常不稳定，该乳液需要冷冻储藏；Perftoran：重建后只能稳定8小时；Oxygent^TM：花生四烯酸的降解产物可能引起类似流感的反应；OxyFluor

：非冷藏条件下只能储存一年)。与这些PFC乳液相比，这里披露的PFC乳液是高度稳定的。

PFC乳液的其它特性

在配制PFC乳液时其它要考虑的因素包括：

1.乳液对血小板减少发展的效应：血小板减少是一种血液中血小板数量不足的病症；

2.乳液对血小板凝集的抑制效应：已经发现一些现有的PFC乳液抑制血小板凝集，它使创伤病人不易形成威胁生命的血凝块，但是也可能会增加颅内出血的风险；

3.乳液对PMN粘连在内皮细胞上的抑制效应：中性白细胞(PMN)粘连在内皮细胞上被认为是在导致脉管内皮损伤顺序中的早期事件。

4.乳液对激活巨噬细胞的效应：被激活的巨噬细胞的吞噬细胞的活性有所提高，尤其是对于李斯特菌属种和沙门菌属种(Listeria and Salmonella)。但是，被激活的巨噬细胞也能刺激产生有破坏性的炎性细胞活素(cytokine)。例如，兴奋的人牙槽巨噬细胞在体外暴露在Oxygent^TM下时减少了细胞活素的产生，提示Oxygent^TM，而且同样Oxycyte

，可能具有抗炎活性。

5.乳液对免疫活性，血小板功能，和血小板存活的效应：优选的PFC乳液不影响受试者的免疫活性和血小板功能，而且不应该缩短受试者的血小板存活。

全氟(叔丁基环己烷)

PFC普遍被认可为生物惰性的分子，由于它们的广泛卤化形成了抵抗代谢降解作用的电子构型。因此，传统的起源于生成反应性代谢物或者PFC直接与生物大分子的相互作用所产生的毒性形式对于这一类化合物来说已经不成问题。同样，未曾鉴别出有关PFC类的遗传毒性。但是，用于氧传递(oxygen delivery)应用所需要的PFC剂量的典型范围为每公斤体重2-3克，这显著高于常规药品。因此，通过静脉内注射PFC类输送足够的氧有可能要求通过静脉内传递相当大量的颗粒悬浮物。因而，PFC类对组织形态学的效应就成为选择它作为这种用途时的一个重要考虑因素。

全氟化碳的恰当选择应该提供必要的效能以及合适的安全曲线。除了对于其指定用途是安全和有效的之外，该全氟化碳也应当能经济地与稳定的产品处方结合。为了要达到这些目标，该全氟化碳应当满足以下标准的绝大部分，最好是全部满足：

1.该全氟化碳应该能溶解和释放出大量的气体，尤其是血液气体氧和二氧化碳。

2.该全氟化碳最好仅由碳和氟组成。

3.该全氟化碳最好是单一的化学体，没有多少异构体和非异构体的杂质。残留的杂质，像共轭烯烃类，有机氢化物类，和氟化物应当维持在ppm水平上。

4.该全氟化碳应当没有化学活性，直至并且包括用于典型的蒸汽灭菌过程温度下应当是热稳定的。

5.该全氟化碳应当是代谢惰性的。

6.该全氟化碳应当能被配制成亚微粒尺寸小滴的稳定乳液，它能被持续一段时间储存而不会因为凝聚或者扩散控制的机理产生显著的小滴增长。优选地，该处方仅含有单一的全氟化碳。

7.该全氟化碳应当具有可接受的安全曲线，无毒性。

8.在乳液形态中，该全氟化碳应当在血液中具有可观的停留时间，以及从身体主要的网状内皮器官中清除出去的可接受的时间范围。

理想地，被选择的PFC也会具有两项令人满意的特征：迅速RES清除和引起过度充气(hyperinflation)的可能性最低。

PFC通过RES的清除率和正常RES组织形态学恢复率与PFC的亲脂性成正相关，其次与PFC的蒸气压正相关。虽然PFC乳液颗粒被RES巨噬细胞的吞噬作用对摄取的主要器官并无害处，但在临床上有源自该过程的影响后果。在PFC乳液产品的临床研究中表征得最好的是常见的类似流感的症状。因此，迅速的RES清除对于一种PFC被选作静脉内乳液应用时是一种令人满意的特性。

在已知处方中悬着了某些PFC类部分地是以他们在RES中较短的停留时间为依据。两种这样的PFC类是全氟萘烷(PFD)和全氟辛基溴(PFOB)，前者是日本Green Cross公司的Fluosol DA中的主要成分，该产品是FDA批准的首个血液代用品，后者是加利福尼亚(California)，圣地亚哥(San Diego)Alliance Pharmaceutical公司，的血液代用品Oxygent^TM中的主要成分。PFD和PFOB的蒸气压分别约为13和10torr。

由于认识到PFC类的肺呼出并非一个有益健康的过程，这些年来，选择具有较短RES停留时间的PFC类的倾向性已经有所缓和。一种被称为”肺过度充气(pulmonary hyperinflation)”的现象首次在兔子身上被证明。这个状况的特征在于双肺未缩回到它们的正常”静息容积(resting volume)”。在接受了单一剂量的某些PFC乳液处理的兔子身上，双肺不仅未缩回到它们的静息容积，而且看起来扩张到超过了它们的正常肺部功能残气量(functional residual capacity)(即，过度充气)。在其极端形态下，呼吸动力学受到影响，气体交换被累及，该状况有可能威胁生命。决定不同的PFC类诱发肺部过度充气倾向的唯一最重要的因素是PFC往气腔的迁移速率，它主要依赖于蒸气压，以及其次，它的亲脂性。

选择一种具有最合适性质的PFC的困难在于，两项最期望的特性，即，迅速的RES清除和引起过度充气的可能性最低，是相互对立的。选择一个几乎很少或者没有引发过度充气可能性的具有低蒸汽压的候选物可能会导致RES半衰期长得不可接受。而它可能受到有力地争辩，认为这个较慢的RES清除并非是重要的有关安全的关注点，持续的器官肿大和相关的病理组织学从制定规章的立场出发可能被认为是不可接受的。

60％和20％w/v浓度的全氟(叔丁基环己烷)(Perfluoro(tert-butylcyclohexane))都已经在鼠和猴的身上进行了对照，单剂量的良好药品实验研究管理规范(GoodLaboratory Practice(GLP))毒性研究试验。与其它的PFC类相比较，在用全氟(叔丁基环己烷)处理过的过度充气的程度远低于在用PFOB处理过的猴身上所见到的，以及先前未发表的在用全氟萘烷处理过的兔身上所见到的。全氟(叔丁基环己烷)在体内的吸收普遍与已经报告的其它PFC类的类似。但在肝脏和脾脏内的持续保留时间稍长于已经报告过的PFOB。尽管如此，全氟(叔丁基环己烷)在持续保留时间与产生过度充气，肺部未缩回的倾向性之间比已经报告过的PFOB和全氟萘烷的表现出更好的平衡。

除此之外，与其它试验过作为氧载体的全氟化碳类相比，根据动物试验结果，全氟(叔丁基环己烷)显示出较好的安全曲线，它不含溴或者氯，因而没有臭氧消耗的风险。另外，可以大量制造生物医学等级的化合物。

根据前边所说，在这里披露的全氟(叔丁基环己烷)具有各性质之间的最适平衡。其RES半衰期稍长于作为全氟化碳基准点的PFOB，但它引起肺部过度充气的倾向相应地较低。总的来说，全氟(叔丁基环己烷)看来是用于静脉内PFC乳液的一个良好的备选化合物。

全氟(叔丁基环己烷)(C10F20)有市售，例如，加利福尼亚州(California)，科斯塔梅萨(Costa Mesa)的Oxygen Biotherapeutics公司出品的Oxycyte

。

Oxycyte是一种全氟化碳乳液氧载体。Oxycyte

中的有效成分，全氟(叔丁基环己烷)(C10F20，MW＝500.08)，也称之为F-叔丁基环己烷或者FtBu，是一种饱和脂环族PFC。全氟(叔丁基环己烷)是无色，完全惰性，不溶于水，非亲脂的分子，密度是水的2倍，沸点是147℃。

FtBu的CAS登记号为84808-64-0。CAS名称为1-(1，1-二(三氟甲基)-2，2，2-三氟乙基)-1，2，2，3，3，4，4，5，5，6，6-十一氟环己烷。由于FtBu分子是非对称的，在环己烷环上只有单一的非氟取代基，该分子不可能有异构体，因此以如下所示的单一构型存在：

全氟(叔丁基环己烷)的物理性质如下：

分子式：C₁₀F₂₀

分子量(g/mol)：500.08

室温下的物理形态：液体

密度(g/mL)：1.97

沸点(℃)：147

25℃下的蒸气压(mmHg)：3.8

37℃下的蒸气压(mmHg)：4.4

动力粘度(cP)：5.378

20℃下的折射率：1.3098

计算偶极矩(Debye)：0.287

计算表面张力(dyne/cm)：14.4

体温下，全氟(叔丁基环己烷)可以携带约43mL氧/100mL PFC，196mL的CO₂/100mL PFC。

室温下的FtBu是无色无嗅的液体，憎水(几乎不溶于水)和憎油的，在溶剂中，像2，2，4-三甲基戊烷(异辛烷)中有极微的溶解度。FtBu最可溶于像异氟烷(isoflurane)那样的卤化溶剂中。因此，FtBu应当配制成水乳剂用于静脉给予。

FtBu能够溶解和释放大量的气体，包括血液气体氧和二氧化碳。但是，FtBu并不表现出血红蛋白结合氧的性质，而只是简单地作为气体的溶剂。因而，没有遇到正弦样的氧释放曲线。通过FtBu输送和释放氧气只是一个被动的过程，溶解的气体量与其分压线性相关，基本上遵从亨利定律(Henry’s Law)。

全氟(叔丁基环己烷)乳液

在本发明的一个实施例中，根据上述讨论过的标准选择的PFC，即，全氟(叔丁基环己烷)利用提纯过的表面活性剂在缓冲的，等渗水介质中被乳化。该乳液可含有如表1所示的成分。

配制生产的Oxycyte

是灭菌的，不引起发热的乳液，它由全氟(叔丁基环己烷)在一种等渗的并且温和缓冲至中性pH范围的水介质中的亚微细颗粒(中直径(medium diameter)为200-300纳米)所组成。为了生理学的相容，Oxycyte

中的PFC用蛋黄磷脂乳化。表1-6显示出PFC乳液的有代表性的组成。

表1：有代表性的PFC乳液1(60％w/v)

表2：有代表性的PFC乳液2(60％w/v)

表3：有代表性的PFC乳液3(60％w/v)

表4：有代表性的PFC乳液4(60％w/v)

表5：有代表性的PFC乳液5(60％w/v)

表6：有代表性的PFC乳液6(60％w/v)

用于生产高质量乳液的优选的表面活性剂是一种衍生自鸡蛋黄的磷脂混合物。在生产过程的提取和提纯阶段，使卵磷脂不会引起发热。卵磷脂作为表面活性剂安全地用于静脉内类脂乳液已有很长的历史，这里患者的安全要求是极高的。

对于这个特定的磷脂组合物，选择了卵磷脂来确保在乳化过程中所形成的界面有足够的稳定性。(单靠纯的磷脂酰胆碱(PC)可能不足以稳定该界面)存在小百分比的其它类脂类，尤其是溶血磷脂酰胆碱(LPC)和神经鞘髓磷脂(SPH)以使小滴的凝聚减少到最低程度和维持乳液的稳定性。乳化剂组合物对于乳液稳定性的这种影响先前对于一般的油乳胶和不经肠的脂肪乳剂已有明确证实。在这个处方中，可以采用低至约2.5％的较低浓度的卵磷脂，同时伴随着调整该处方中的水含量。

磷酸二氢钠一水合物和磷酸氢二钠七水合物是用于控制乳液处方pH值的化学品。选择这两种化学品是由于磷酸盐缓冲剂是与可以得到的不经肠的缓冲剂最生理学相容的缘故。另外，处方剂量的磷酸盐所提供的最低缓冲能力足以将乳液的pH值维持在稳定的范围内而又不会影响血液的固有的缓冲能力。重要的是将乳液的pH值保持在一个指定的范围里以使蛋黄磷脂发生水解的程度最低，使乳液稳定，且提供生理学相容的产品。

该温和缓冲的处方的pH值范围在6.8-7.4。之所以选择该pH值范围是因为它体现了对于乳液整个货架期内磷脂的稳定性和血液pH中位值7.2-7.4的良好兼顾。

美国药典(USP)甘油被用在处方中调节乳液的张力。对于静脉内输注，重要的是乳液的张力与血液张力在相同的生理范围内。选择甘油是由于它有用于不经肠乳液的很长历史，而且它不是可电离的成分，可电离的成分通过干扰颗粒周围的带电层(ζ电位(zeta potential))而有助于乳液颗粒的凝聚。发明者们已经做了实验表明，就乳液的机械稳定性而言甘油和甘露醇优于氯化钠。

处方中加入了美国药典无水乙二胺四乙酸钙二钠(或者美国药典乙二胺四乙酸钙二钠)以清除可能会加速蛋黄磷脂氧化降解，因而使乳液失去稳定性的的任何微量金属。

美国药典维生素E(dl-α-生育酚)被用来溶解缓冲剂，张力调节剂和螯合剂以形成乳液的连续相。维生素E属于天然和合成化合物生育酚家族。α-生育酚是这一类化合物中最丰富的形态。这一类的其它成员包括α-，β-，γ-和δ-生育三烯酚。生育酚类还包括α-生育酚的衍生物，像醋酸生育酚，磷酸生育酚，琥珀酸生育酚，烟酸生育酚，和亚麻酸生育酚。

PFC乳液在体内能够比血液更有效地加载和卸载氧气和二氧化碳，(在FtBu浓度为60％w/v时，Oxycyte

能够溶解氧气的量是血红蛋白在正常生理条件下能够卸载量的3-4倍)这个过程是浓度梯度介导的(亨利定律)。由于PFC小滴的粒度中值约比红细胞小40-50倍，所以，Oxycyte

能够利用变窄的毛细血管对组织加氧，如在脑挫伤时发生的那样。约10小时之后，3mL/kg的静脉内剂量的一半保留在循环中。当巨噬细胞清除类脂颗粒时，PFC类从血液中消失。这与Intralipid如何由血流输送相当类似。PFC类沉积在肝脏和脾脏里。类脂乳液缓慢地被破坏，慢慢释放出PFC，PFC又负载在不同的蛋白和类脂上返回到肺部，它们在那里作为无色，无嗅和无味的蒸气被呼出去。在非人类的灵长类动物中，发现PFC在肝脏和脾脏里的半衰期与剂量有关；剂量为1.8g/kg(3mL/kg)时，半衰期约为12天。

这里披露的PFC乳液可以用作将养传递给各组织的媒介物。为了进一步提高氧浓度，可以预先往PFC组合物里加分子氧。

已知细胞需要氧来再生和繁殖。因此，这里描述的PRC乳液有许多用途，可以用于期望将氧传递到一个组织的细胞中去的地方。

镰状细胞

如讨论过的那样，这里描述的PFC乳液有许多用途。例如，PFC乳液可用于治疗镰状细胞病。

镰状细胞病(SCD)是一组遗传畸形，主要损害祖籍是非洲和地中海血统的患者。它是由于在β珠蛋白链的第6位点上以缬氨酸替代了谷氨酸所致(Agarwal，2002；Fixler，2002；Ingram，1956；Serjeant，1997)。疾病的变异包括纯合的镰细胞贫血(HbSS)，HbS和地中海贫血(HbS-thal)的化合物杂合的结合，以及杂合的(HbS-HbC)疾病(HbSC)。聚合物可以改变红细胞的形状以及膜性质，导致红细胞与血管内皮之间异常和复杂的相互作用(Evans，1987；Noguchi，1993)。这些效应的结合产生了溶血性贫血和疑似微血管功能障碍，降低了微血管血流，其结果是严重的局部缺血性疼痛。疼痛的这些发作有个术语叫血管闭塞危象(VOC)。VOC的反复发作导致急性和慢性的感觉神经终器(end-organ)损伤，这在病理学上与局部缺血和局部缺血-再灌注损伤一致(Bookchin，1996；Garrison，1998)。

这种贫血，微血管血流减少，和微血管功能障碍的结合看来应当会让SCD有可能接受像输血，流变学矫正，通过血管舒张的微血管推拿等的治疗。尽管有这些假设，迄今还没有SCD患者在基线上和VOC过程中有氧输送(oxygen transport)特征的报道。

实施例4显示镰状细胞病常伴有微循环水平上的氧传递不良。因此，这里披露的PFC乳液增强了给组织的氧传递，意味着是一种改善SCD症状的方法，从而治疗SCD。

减压病

减压病(DCS)描述了起因自减压时溶解在体内的气体沉淀到气泡中去的状况。(Vann，1989)DCS最普通的是指一种特定类型的潜水危害，但可以在其它减压经历中遭受到。DCS效应可以不同，从关节痛和疹到麻痹和死亡。治疗是通过在再压缩舱内的高压氧疗法(患者完全被关闭在压力舱内呼吸高于1.4倍大气压的100％氧气)。(The Merck Manual，1999；Leach，1998；U.S.Navy Diving Manual，2008)治疗早的话，成功的机会非常之高。

DCS是由身体周围的环境压力降低所致，当离开一个高压的环境，从深处上浮或者升到海拔高的地方就可能发生。身体减压造成过量的在身体处于较高压力下溶解在体内液体和组织中的惰性气体在压力降低时从物理溶液中释放出来，在体内形成气泡。呼吸空气的人来说，主要的惰性气体是氮气。气泡导致减压病的症状，它包括皮肤瘙痒，疹，局部关节疼痛和神经紊乱。形成在皮肤和关节中的气泡导致较轻微些的症状，而在静脉血中的大量气泡可以引起肺部损伤。最严重的DCS类型阻断和伤害了脊髓神经功能，导致麻痹，感觉系统衰竭和死亡。(The MerckManual，1999；Vann，1989；U.S.Navy Diving Manual，2008)

传统上一直用氧既预防又治疗DCS。高海拔DCS研究最显著的突破之一是预先吸氧。在暴露于低气压环境之前呼吸纯氧减少了高海拔DCS发病的风险。预先吸氧降低了氮气在身体组织内的负载。还有，几乎所有的DCS病例都是一开始用100％氧治疗直至可以提供高压氧疗法。(The Merck Manual，1999；Leach，1998；Dehart，2002；U.S.Navy Diving Manual，2008)

这里披露的PFC乳液可以通过同样的机理来预防或者治疗DCS，即，迅速将氧输送到组织中去，降低氮在体内的负载。

空气栓塞

这里披露的PFC乳液可以用于治疗栓塞，例如，外科医源性的空气栓塞。

空气栓塞，或者更普通地，气体栓塞，是由在血管系统中的气泡引起的一种生理状况。在人体内，空气栓塞指的是在血流中的气泡(在医学范围内，栓塞指的是血流中任何大的移动的团块或者缺损)。有若干原因造成空气栓塞，例如，外科医源病发生。

少量的空气在手术或者其它医疗过程中往往偶然地进入血液循环中，例如，进入静脉输液线(intravenous fluid line)的气泡。但是，大部分的这些空气栓子进入静脉并被挡在肺部。因此，静脉空气栓塞罕见表现出症状。

但是，静脉中较大的空气泡或者动脉中的空气栓塞就更严重了。对于很大的静脉空气栓塞，如果一个大气泡进入心脏而固定下来就可能发生死亡，阻止了血液从心室流向肺部。对于动脉气体栓塞(AGE)，气泡可能直接造成血液通过动脉流向一个区域床的截断，如果脑子或者心脏分别受损的话则引起中风或者心脏病发作。

高压氧是气体栓塞传统的急救疗法。高压条件下，氧扩散进气泡里，将氮从气泡中置换出来进入血液中的溶液中去。氧气泡更容易被容忍。空气由21％的氧和78％的氮以及微量的其它气体组成。此外，氧在高压下扩散到血液和组织中去支撑了身体上那些当动脉被气泡阻断时失去血液流动的区域。这有助于减少局部缺血性疼痛。最后，高压氧的作用中和了白细胞介导的局部缺血-再灌注的伤害。

因此，将全氟化碳给药与氧气结合起来，能够将养更快地输送到组织中去，因而治疗了空气栓塞。

一氧化碳中毒

一氧化碳中毒在美国是中毒死亡的主要原因。每年约有4000人因一氧化碳中毒去求医，2000多人看急诊，4000多人住院。每年有3800多人因一氧化碳中毒意外死亡和自杀身亡，400多个美国人死于无意识的一氧化碳中毒。

大容量的暴露可以造成中枢神经系统和心脏明显的中毒，而且可导致死亡。急性中毒之后，往往存在长期的后遗症。但是，慢性的暴露在低水平一氧化碳下也能导致抑郁，精神错乱，和记忆丧失。

红细胞(RBCs)结合一氧化碳比它们结合氧快。RBCs与CO的亲和力比与O₂的亲和力高约200倍，如果空气中有有很多的CO，人体可用CO替代血液中的氧，阻断氧进入身体，造成组织受损或者死亡。

另外，CO通过与血红蛋白结合在血液中形成碳氧血红蛋白(HbCO)，使血红蛋白中毒，给人造成有害效应。这就阻碍了氧与血红蛋白的结合，降低了血液的携氧能力，导致缺氧。HbCO可以回复到血红蛋白，因为HbCO复合体非常稳定，所以要花很长时间。一氧化碳中毒的症状往往随着血液中HbCO的百分比的不同而改变，包括头疼，眩晕，呼吸困难，精神错乱，瞳孔放大，惊厥，和昏迷。(The Merck Manual，1999)

CO中毒目前的疗法由施与100％氧气(利用呼吸面罩)或者提供高压氧治疗(在加压舱内)组成。(The Merck Manual，1999；Leach，1998)氧提高了一氧化碳从血红蛋白卸载的速度。当有PFC存在时，可使血液中的氧浓度提高，这可以加速CO的卸载。通过将全氟化碳给药与氧相结合，氧可以更快地输送到被夺去氧的组织中去。

此外，在救出一名不再呼吸CO的中毒者后，可以采用PFC乳液给药。由于CO中毒不是在细胞内而是在血红蛋白的水平上，所以PFC不应当会增加CO的传递，这是因为一旦CO不被吸入，其分压就应当降低的缘故。因此，PFC不会结合CO从肺部把CO携带走。相反，PFC应当会携带氧，尽管血红蛋白中毒了。

外伤性脑损伤和脊髓损伤

已知在外伤性脑损伤(TBI)和脊髓损伤发生之后随着时间的推移有一系列进行中的活动会导致组织损伤。一开始的损伤产生钙流出(calcium flux)，离子渗漏(ionleakage)，细胞凋亡，血管功能不全，中性白细胞激活，形成血块，水肿等细胞活动。所有这些机制进一步反馈到神经元凋亡和细胞死亡机制中维持循环。介入和抢救各个神经元和轴突的关键在于损伤后尽可能快地给处于危险中的组织提供充分的氧。随着细胞死亡，肿胀，凋亡，水肿等循环连续不断地继续下去，越来越多的细胞受损死亡。因此，通过将氧传递给处于危险中的细胞来介入得越早，细胞抢救得越快越多。在中枢神经系统(CNS)中，当所有的氧都消除时，组织细胞迅速死亡。每个死亡的细胞可以变成一个不能够结束的回路。CNS组织目前还不能通过医学介入获得再生。早期介入抢救出最大数量的细胞代表一种降低损伤严重性和改善患者预后的途径。

大约1/3的头部严重损伤的患者在受伤后开始6-24小时内表现出氧张力降低，这往往是由于例如因变窄的脉管引起的大脑血流(CBF)的减少，它可以导致外伤后的脑损伤和非常糟的预后(Zauner，1997；Zauner，1997)。因而，通过促进早期的O₂传递来防止继发性的局部缺血应该带来很大的益处(Kwon，2005)。

PFC乳液能显著地促进氧从红细胞往组织的传递。PFC乳液也是由在类脂膜内颗粒尺寸远小于红细胞的纯PFC形成的。由于颗粒尺寸小，连同增高的氧扩散系数，氧可以很低的流量慢慢地传递给组织。已知PFC提高了大脑血流，而且还降低了炎性反应。PFC还提高了携带CO₂气体和氧化氮气体的能力。这些在研究中所观察到的结果可以在抢救受损的中枢神经系统细胞时发挥作用。

应该注意的是在冷却时PFC乳液甚至传递更多的气体。因此，在输注进人体之前或者在输注进人体过程中，采用将PFC乳液冷却的方法也可以是本发明披露内容的附属内容和部分。

器官保存和器官功能恢复

由于器官短缺，越来越多的尸体器官正被用于移植。器官保存在冰上没有供血的持续时间应当维持在最短，但是这个时间常常变得漫长，器官的存活下降。利用这里描述的PFC组合物灌注器官使器官在没有供血的情况下能存活较长一段时间，在移植之前被较好地保存。

在运输中/手术前，可以用该乳液浸泡器官，也可以灌注通过器官，由此提供了稳定的氧源，这有助于器官保存并且降低了一旦器官被移植时再次灌注损伤的发生率。由于许多这里讨论的同样原因，该乳液应该帮助移植合格率，例如，促进更快的细胞修复和血管生成。

局部适应症(topical indication)

虽然这里描述的PFC乳液主要是配制来用于静脉内的，它们也可以用于局部适应症。这些局部适应症包括：创伤和烧伤愈合，瘢痕防止和减少，增强性器官功能，治疗痤疮和酒渣鼻，以及用于美容，包括促进抗衰老。

其它适应症和应用

这里描述的PFC乳液的其它适应症和应用包括：作为空气除臭剂，治疗复发性口溃疡，治疗蛀牙，用于化疗和放疗，治疗便秘，用于成像对比剂，治疗褥疮，用于解毒和结肠清洗，糖尿病足护理的处理，治疗气体坏疽，治疗痔，用于抗艰难梭状芽胞杆菌(Clostridium difficile)引起的肠感染，治疗人和动物的肠寄生虫，治疗肌肉疼痛/疼痛的肌肉，治疗夜间腿痛性痉挛，用于减轻瘙痒和提供受刺激皮肤较快的治疗，用于洗发水，定型剂，去头皮屑或者生发产品给头发供氧，用于加速皮肤移植的吸收/提高皮肤移植存活。

用于这里描述的组合物和方法中的全氟化碳可以存在于组合物中，该组合物还可以进一步包含药物可接受的载体或者美容载体和适合于静脉内，动脉内，血管内，鞘内，气管内或者局部给予的助剂。适合于这些给药模式的组合物是药物学和化妆品行业里所熟知的。这些组合物可适应包含全氟化碳或者氧合的全氟化碳。用于这里描述的方法中的组合物也可以包含药物可接受的添加剂。

这里披露的全氟化碳乳液可以包含辅料，像改变溶解度的剂(例如，乙醇，聚乙二醇和蔗糖)和聚合物(例如，聚辛内酯类(polycaprylactones)和聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA’s))以及药物可接受的活性化合物。

本发明的方法，应用和药物组合物的全氟化碳乳液可包括全氟化碳在水中的乳液，它包含一个连续的水相和一个非连续的全氟化碳相。该乳液典型地包括乳化剂，缓冲剂，渗透剂，和电解质。全氟化碳存在于乳液中从大约5％至大约130％w/v。实施例包括至少约40％，45％，50％，55％，60％，65％，70％，75％，80％和85％w/v。一种60％w/v F-叔丁基环己烷乳液可以用作一个实施例中的全氟化碳乳液。实施例还包括缓冲在等渗介质中的蛋黄磷脂乳液，其中，全氟化碳存在于乳液中从大约5％至大约130％w/v。

形态的多样性配置可以含有另外的有益的生物活性剂，它们进一步提升组织的健康。

本发明的组合物可以这里详述的形式给予。全氟化碳的应用可以是一种联合疗法或者一种附属治疗的一种成分。该联合疗法可以是按顺序的或者同步的。根据所用的剂型，化合物可以按同样途径或者两种，多种途径独立地给予。治疗中化合物给药的剂量变化取决于一些因素，像具体治疗剂的药效学特性及其给予的方式和途径；受体的年龄，性别，代谢率，吸收效率，健康状况和体重；症状的性质和程度；正在施行的并行治疗的种类；治疗的频率；以及期望的治疗效果。

化合物的剂量单位可包含单一化合物或者其与别的化合物的混合物。可以将化合物直接引入到目标组织，采用美容业和药物行业技术人员所熟知的剂型。

化合物可以与合适的药物稀释剂，膨胀剂，赋形剂，或者载体(总起来说，这里指的是药物可接受的载体)掺合起来给药，根据打算要采取的给药方式来恰当选择这些载体，并与常规的药物学和美容业操作规程相一致。化合物可以单独给予，但是一般都与药物可接受的载体混合。这个载体可以是固体或者液体，载体类型的选择通常是根据所采用的给予类型。合适的液体剂型的例子包括溶液或在水中的悬浮液，药物可接受的油脂类，醇类或者其它的有机溶剂，包括酯类，乳液，糖浆或者酏剂，混悬液，溶液和/或由非泡腾的颗粒重新构成的混悬液以及由泡腾颗粒重新构成的泡腾制剂。这样的液体剂型可以含有，例如，合适的溶剂，防腐剂，乳化剂，悬浮剂，稀释剂，甜味剂，增稠剂，和助熔剂。

制造用于本发明的剂型的工艺与组合物见下述的参考资料：ModernPharmaceutics，Chapters 9 and 10(Banker & Rhodes，Editors，1979)；PharmaceuticalDosage Forms：Tablets(Lieberman et al.，1981)；Ansel，Introduction to PharmaceuticalDosage Forms 2nd Edition(1976)；Remington’s Pharmaceutical Sciences，17th ed.(Mack Publishing Company，Easton，Pa.，1985)；Advances in Pharmaceutical Sciences(David Ganderton，Trevor Jones，Eds.，1992)；Advances in Pharmaceutical SciencesVol 7.(David Ganderton，Trevor Jones，James McGinity，Eds.，1995)；AqueousPolymeric Coatings for Pharmaceutical Dosage Forms(Drugs and the PharmaceuticalSciences，Series 36 James McGinity，Ed.，1989)；Pharmaceutical Particulate Carriers：Therapeutic Applications：Drugs and the Pharmaceutical Sciences，Vol 61(AlainRolland，Ed.，1993)；Drug Delivery to the Gastrointestinal Tract(Ellis Horwood Booksin the Biological Sciences.Series in Pharmaceutical Technology；J.G.Hardy，S.S.Davis，Clive G.Wilson，Eds.)；Modern Pharmaceutics Drugs and the PharmaceuticalSciences，Vol.40(Gilbert S.Banker，Christopher T.Rhodes，Eds.).

所有的PFC组合物可能都含有使用时无害的抗菌剂，例如，硫汞撒，苯扎氯铵，对羟基苯甲酸甲酯和丙酯，溴化苄基十二烷基鎓，苄醇，或者苯基乙醇。

PFC组合物还可以含有缓冲组分，像醋酸钠，葡糖酸缓冲剂，磷酸盐，碳酸氢盐，柠檬酸盐，硼酸盐，ACES，BES，BICINE，BIS-Tris，BIS-Tris丙烷，HEPES，HEPPS，咪唑，MES，MOPS，PIPES，TAPS，TES，和Tricine。

PFC组合物还可以含有无毒的药物有机载体，或者带有无毒的药物无机载体。典型的药物可接受的载体有，例如，水，水和与水混溶的溶剂(像低级链烷醇类或者芳烷醇类)的混合物，植物油，花生油，聚亚烷基二醇类，石油基的胶，乙基纤维素，油酸乙酯，羧甲基纤维素，聚乙烯吡咯烷酮，肉豆蔻酸异丙酯和其它常用的可接受的载体类。

PFC乳液还可以含有无毒的乳化剂，防腐剂，湿润剂，增稠剂，如举出的例子，聚亚烷基二醇200，300，400和600，聚乙二醇1,000，1,500，4,000，6,000和10,000，使用时无害的抗菌成分，像季铵盐化合物，已知具有冷杀菌性质的苯基汞盐类，乙基汞硫代水杨酸钠(thimerosal)，对羟基苯甲酸甲酯和丙酯，苄醇，苯基乙醇，缓冲成分，像硼酸钠，醋酸钠，葡糖酸盐缓冲剂，以及其它常规的成分，像山梨糖醇单月桂酸酯，三乙醇胺，油酸酯，聚氧乙烯山梨糖醇酐单棕榈酸酯，二辛基磺基琥珀酸钠，一硫代甘油，硫代山梨糖醇，乙二胺四乙酸。

PFC组合物还可以含有可以使用的表面活性剂，像聚山梨醇酯表面活性剂，聚氧乙烯表面活性剂，磷酸盐类，皂草苷类和聚乙氧基化的蓖麻油类，但是优选聚乙氧基化的蓖麻油类。这些表面活性剂都有市售。例如，BASF出售的聚乙氧基化的蓖麻油类商品名为Cremaphor。

PFC组合物还可以含有普遍用于滴眼液的湿润剂，像羧甲基纤维素，羟丙基甲基纤维素，甘油，甘露醇，聚乙烯醇或者羟乙基纤维素，稀释剂可以是水，蒸馏水，消毒水，或者人造眼泪，其中湿润剂的含量约为0.001％至约10％。

本发明的处方可以变化包括酸类和碱类以调节pH值；张力赋予剂(tonicityimparting agent)，像山梨糖醇，甘油和葡萄糖；其它的粘性赋予剂(viscosity impartingagent)，像羧甲基纤维素钠，微晶纤维素，聚乙烯吡咯烷酮，聚乙烯醇和其它的胶类；合适的吸收增强剂，像表面活性剂，胆汁酸类；稳定剂，像抗氧化剂，如亚硫酸氢盐类和抗坏血酸盐类；金属螯合剂，像乙二胺四乙酸钠盐；和药物溶解度促进剂，像聚乙二醇。这些辅助的成分有助于使商品液具有合适的稳定性，这样，一经要求就无需再掺合。

其它材料以及加工工艺等在Remington’s Pharmaceutical Sciences，17th edition，1985，Mack Publishing Company，Easton，Pa.，第8篇以及国际化学品安全规划(International Programme on Chemical Safety(IPCS))中有陈述，它在这里被纳入作为参考。

当然，在规定一个参数的范围时，所有的整数都在那个范围内，本发明也规定了它们的十分之一。例如，“20-80％w/v”包括20.0％w/v，20.1％w/v，20.2％w/v，20.3％w/v，20.4％w/v等直至80.0％w/v。

设想了在这里描述的方法的各种要素的所有组合以及局部组合(sub-combinations)，它们都在本发明的范围之内。

参考以下的实验细节可以更好地理解本发明，但是，本领域技术人员容易意识到，特定详细说明的实验只是说明本发明，在后面的权利要求书中将更完整地描述本发明。

实验的详细说明

实验1：生产PFC乳液

极其重要的是计划用于静脉内给予的乳液颗粒尺寸小且均匀以使颗粒能穿过微循环。发明者们发现，用于生产乳液的过程步骤对于尺寸小，稳定的，和生理学相容的颗粒的粒径分布的实现是至关重要的。因而，颗粒尺寸和粒径分布是乳液的重要特征。为了能重复地获得这些特征，应该控制两个乳化步骤，即，粗乳化步骤和高压乳化步骤。这些乳液的特征强烈地依赖于粗乳化过程的能量学，而该过程本身又非常取决于乳化设备的大小尺寸和速度以及往水分散体中加入PFC的加料速度。发明者们已经发现，理想的粗乳液是单峰的，中值粒径小于20微米。

发明者们也已发现，这样的一种具有理想特征的粗乳液是优选的，因为在进一步利用高压均质化加工时，很可能产生一个稳定的”最终”乳液。这样的一种乳液的特征是单峰窄分布，集中在约200-300纳米，实质上没有不希望的大尺寸颗粒(＞10微米)的总体(population)存在。

生产PFC乳液时使用了专门的设备。生产过程的步骤按照特定的顺序进行以生产出具有令人满意的/最佳的特征的乳液。

按照下述的方法中生产出了这里披露的中试规模(pilot-scale)的8升批量的PFC乳液：

生产设备

PFC加料容器(vessel)：使用一台PFC加料容器使全氟化碳脱氧，将该全氟化碳转移至一台含有乳液处方中的剩余成分的加工设备中。

混合容器：混合容器是一台容器，处方中的所有成分都加到一起，溶解或者分散，在高剪切下混合形成粗乳液。优选的容器是一种带水夹套的不锈钢圆筒形容器，其温度通过来自一台恒温水浴的循环水流过容器夹套来控制。混合容器顶部中央有开口以安装高剪切混合轴和叶片。

高剪切混合机：优选装有转子/挡板分散用部件的高剪切混合机用于处方成分的高剪切混合，于高压均质化过程之前在该混合容器中形成含有全部处方成分的粗乳液。

均质化容器：对于乳液生产中的均质化步骤，使用两台装有机械搅拌器的加工容器，以两种排列方式中的任意一种进行操作。在第一种排列方式中，一台容器作为循环容器(circulation vessel)。另一台容器作为灌装容器(filling vessel)。在第二种排列方式中，以两台加工容器都用作独立通道装备(a discrete pass setup)的方式，两台设备交替往均质化机的入口加乳液和接受来自均质化机出口的物料。

均质化机：在乳液生产过程的均质化阶段优选使用安装恰当的两段式均质化机。

输料管线和配管：对于所有与乳液接触的输料管线应当采用不锈钢，高密度聚乙烯或聚丙烯配管。因为与全氟化碳有潜在的不相容性，有机硅配管不可接受用于生产过程。

管线中的工艺过滤器：采用一台10-μm筒式过滤器在加料前过滤掉乳液中的微粒物质。这些过滤器应当与乳液相容，使剪切力减少到最低，剪切力会去掉乳液颗粒外的部分的表面活性剂涂层。

灭菌器(高压釜)：FDA要求所有计划用于静脉内给予的乳液必须是灭菌的。因为发现全氟化碳乳液中的小滴粒径分布较宽，当小滴在压力下被强制通过细的过滤器时潜在的脆性，所以不采用装有0.22微米过滤器的灭菌过滤工艺。因此，该乳液在一台蒸汽高压釜中接受最终的热力灭菌。由于全氟化碳的热容与乳液处方中的水的热容差异很大，因为这是最终的灭菌，所以优选转鼓式蒸汽高压釜以确保乳液产物均匀的热分布。

实施例1A-FtBu乳液

生产过程步骤

这里描述的PFC乳液(60％w/v)按照图1所示的过程来生产。

在生产过程中采用像氮气那样的惰性保护气体覆盖乳液，在小瓶加盖之前用氮气覆盖产品小瓶液面上的空间以使货架储存期内的磷脂降解减低到最小程度。

全氟化碳脱氧

在一个单独进行的先于将处方成分混合起来的步骤中，将称重过的全氟化碳置于PFC加料容器中，用氮气通过一根伸进全氟化碳底部的多孔玻璃管或者多孔不锈钢管连续鼓泡以去除溶解的氧。

成分的加料和分散

在氮气保护下，将所需量的灭菌注射用水(WFI)加到带水夹套的不锈钢混合容器中，混合容器中装有高剪切混合机和转子/挡板分散用部件。然后，在讲任何剩余的处方成分加进去之前将WFI加热到50-55℃。当WFI温度达到要求的温度时，启动高剪切混合机，转速设定在低档。然后，往混合容器中的WFI里按以下顺序加入处方成分：NaH₂PO₄·H₂O，Na₂HPO₄·7H₂O，CaNa₂EDTA·2H₂O，和甘油。

在整个加入和分散剩余的处方成分过程中，连续用氮气覆盖容器液面上方的空间并混合成分。

在过程的这一时刻将蛋黄磷脂从冰箱里取出来，迅速在一个事先已经冷却至-20℃或以下的转移容器中称重，并且迅速加到混合容器中去。采取这些小心的步骤以使卵磷脂暴露在热和氧气下减少至最低程度，使得磷脂在吸收水分变得粘稠之前被有效地转移。

现在称重过的维生素E，并加到混合容器中去。

蛋黄磷脂和维生素E加料后，高剪切混合机的速度提高到中档，继续混合直至磷脂充分分散。

全氟化碳的加入和高剪切粗乳化

高剪切混合机的速度设到高档，混合容器内容物的恒温(thermostatted)在50-55℃。将全氟化碳从PFC加料容通过一根不锈钢输料管以大约50-100mL/分钟(或更低)的流量加到混合容器中，该输料管在靠近混合机的转子-挡板叶片处终止。在氮气保护下继续混合以充分将全氟化碳分散并形成粗乳液。在此混合时间内，取出粗乳液样测定粒径分布(PSD)。

在这一刻粗乳液的PSD应该是单峰的，中值粒径小于20微米。粗乳液的PSD的判据很重要，因为发明者们已经发现，较大颗粒的第二总体的存在即使在高压均质化之后还会持续存在，结果导致不能符合生理学要求的颗粒尺寸标准。各个粗乳液的PSD如图2-5所示。

图2A显示的是PFC加料后不合格的粗乳液。图2A显示双模态分布，在8.2微米和65微米有峰。

图2B显示的是同样的粗乳液在接受了另外的高剪切混合。不受欢迎的较大尺寸的颗粒数量已经能够减少但未消失。

图3A显示在图2中见到的粗乳液在接受了高压均质化后的PSD。集中在4微米附近的第二总体仍然存在。

如图3-4所示，另外的均质化时间没有消除这个第二总体，提高均质化压力也不能消除它。

图5A显示在高压均质化之前一种合格的粗乳液。该分布是单峰的，一个峰集中在6微米。该粗乳液在高压均质化之后得到如图5B所示的单峰，小的粒径分布。

高剪切混合结束后，在继续高压均质化过程之前进行过程中的粒径分布和粗乳液pH值的检查。测定小滴尺寸以确定下一步的均质化步骤产生小尺寸的乳液小滴，分布竟可能的窄，保持批次与批次之间的一致性。pH值范围应当在6.8-7.4，因为当乳液小滴尺寸减小时，它们将氢氧离子吸附到近膜层(near-film layer)里，这会影响稳定性。在此范围外的pH值可能对磷脂是不利的，最终会有损乳液的稳定性。

均质化

粗乳液最好通过不锈钢管线在氮气压力下从混合容器被转移到一个不锈钢的接收容器中。该接收容器是再循环方式均质化装备中的一个单元(装备例如图6所示)，或者是独立通道方式装备中的一个单元。这两种装备方式在均质化器的出口与该接收容器的入口之间都采用一台换热器。

循环容器装有低速搅拌机，该容器液面上部空间一直用氮气保护。换热器中冷却水的温度维持在11-15℃。发明者们已经发现，非常低的温度不利于获得小颗粒的乳液。粗乳液连续循环通过压力为8,000-9,000psi的均质化器(阶段2的阀门设定在800-900psi)，循环时间相当于至少3-6个独立通道(pass)。循环容器中的乳液在整个均质化过程中低速下被搅拌以防止沉降。

乳化时间取决于批量的大小和通过均质化器的流量，可根据连续流计算法来确定(Leviton，1959)。采用独立通路装备的均质化过程通常所需要的加工时间少于连续通路的方式。

在连续循环装备中，过了计算出的时间量后，产物流向不锈钢灌装容器，均质化器被用作一台泵将乳液转移到该容器中准备灌装。在转移过程中，对乳液在低速下进行连续搅拌，容器的气氛连续地用氮气保护。

灌装和加盖

灌装容器用氮气加压，乳液从氮气加压的灌装容器流经一台10微米的在管线中的工艺过滤器(以去除微粒)到达一个灌装管口(filling nozzle)并进入去热原的玻璃瓶(depyrogenated glass bottle)中。该过滤器应当与乳液相容，并且使剪切力减低至最小程度，剪切力可能让部分的表面活性剂涂层从乳液小滴上剥离下来。

最佳的灌装体积这样选择以至1)塞子在高压灭菌时不会伸出去2)足够的液面上方空间以防止全氟化碳在高压灭菌时”微量蒸馏(microdistillation)”。瓶子的液面上方空间用氮气保护，瓶子被塞住，采用合格的压盖机用铝卷曲密封(crimpseals)封住。

灭菌

灌装结束后，灌装好的瓶子被放进灭菌器的架子里，最终在旋转蒸气高压釜中灭菌，灭菌周期是定制的，它被证实可以确保产品的无菌同时又保持产品的完整性。

PFC乳液稳定性

理想的乳液应当在其计划的货架期内继续符合所有最初的验收指标。颗粒尺寸和粒径分布与其它指标不同，因为他们会随着乳液陈化而发生改变。这种增大是必然发生的，因为根据定义，乳液是热力学不稳定的。即使是好的乳液在其计划的货架期内也会表现出一些粒径的增大，不论是由于Ostwald熟化，凝聚，絮凝，还是沉降引起。但是，如果乳液处方恰当，生产过程经过优化，则粒径的增大速率非常小，中值粒径应当维持在200-400纳米的范围，粒径分布应当保持十分狭窄。

图5显示了一种好的PFC乳液有代表性的粒径分布(60％w/v)，利用激光散射技术(Malvern Mastersizer)液相光沉降技术(liquid-phase photosedimentation)(HoribaCAPA 700)测定。

粒径数据的这些图解表示提供了全氟化碳乳液亚微粒特性的清晰证据。此外，由激光衍射和光相关光谱(photocorrelation spectroscopy)所获得的测量数据表明99％以上的乳液颗粒直径小于1微米。发明者制出的显微照相术数据也支持了没有较大粒径的颗粒。

因而，按照上述步骤生产的FtBu乳液相当稳定，具有如下的特征：

1.按乳液重量计，该FtBu乳液含有低于20ppm的残留氟化物；

2.按乳液重量计，该FtBu乳液含有低于7g/L的溶血磷脂酰胆碱(LPTC)；

3.按FtBu重量计，该FtBu乳液含有少于1ppm的残留共轭烯烃；

4.按FtBu重量计，该FtBu乳液含有少于0.7ppm的残留氟化物；

5.按FtBu重量计，该FtBu乳液含有少于5ppm的残留有机氢；

6.该FtBu乳液具有约600纳米的D(0.9)值；以及

7.该FtBu乳液具有约200-330纳米的D(0.5)值。

实施例1B-全氟萘烷乳液

包含全氟萘烷的乳液按照实施例1A中所描述的步骤生产。所得到的全氟萘烷乳液相当稳定，具有下述特征：

1.按乳液重量计，该全氟萘烷乳液含有低于20ppm的残留氟化物；

2.按乳液重量计，该全氟萘烷乳液含有低于7g/L的溶血磷脂酰胆碱(LPTC)；

3.按全氟萘烷重量计，该全氟萘烷乳液含有少于1ppm的残留共轭烯烃；

4.按全氟萘烷重量计，该全氟萘烷乳液含有少于0.7ppm的残留氟化物；

5.按全氟萘烷重量计，该全氟萘烷乳液含有少于5ppm的残留有机氢；

6.该全氟萘烷乳液具有约600纳米的D(0.9)值；以及

7.该全氟萘烷乳液具有约200-330纳米的D(0.5)值。

实施例1C-全氟辛基溴乳液

包含全氟辛基溴的乳液按照实施例1A中所描述的步骤生产。所得到的全氟辛基溴乳液相当稳定，具有下述特征：

1.按乳液重量计，该全氟辛基溴乳液含有低于20ppm的残留氟化物；

2.按乳液重量计，该全氟辛基溴乳液含有低于7g/L的溶血磷脂酰胆碱(LPTC)；

3.按全氟辛基溴重量计，该全氟辛基溴乳液含有少于1ppm的残留共轭烯烃；

4.按全氟辛基溴重量计，该全氟辛基溴乳液含有少于0.7ppm的残留氟化物；

5.按全氟辛基溴重量计，该全氟辛基溴乳液含有少于5ppm的残留有机氢；

6.该全氟辛基溴乳液具有约600纳米的D(0.9)值；以及

7.该全氟辛基溴乳液具有约200-330纳米的D(0.5)值。

实施例1D-十二氟戊烷(DDFP)乳液

包含DDFP的乳液按照实施例1A中所描述的步骤生产。所得到的DDFP乳液相当稳定，具有下述特征：

1.按乳液重量计，该DDFP乳液含有低于20ppm的残留氟化物；

2.按乳液重量计，该DDFP乳液含有低于7g/L的溶血磷脂酰胆碱(LPTC)；

3.按DDFP重量计，该DDFP乳液含有少于1ppm的残留共轭烯烃；

4.按DDFP重量计，该DDFP乳液含有少于1ppm的残留氟化物；

5.按DDFP重量计，该DDFP乳液含有少于10ppm的残留有机氢；

6.该DDFP乳液具有约600纳米的D(0.9)值；以及

7.该DDFP乳液具有约200-300纳米的D(0.5)值。

实施例2

在不同的剂量下通过静脉内给予Oxycyte

乳液(60％w/v PFC)在斯-道鼠(Sprauge Dawley rats)，食蟹猴(Cynomolgus Monkeys)，和人身上进行了系统的试验。

发现该Oxycyte

乳液耐受性良好，无毒性。

实施例3：测量组织中的氧张力

一种结合氧的材料(荧光标记物)被注射进皮肤组织中去。该结合物是有荧光的，存在的氧越多，荧光信号(代表组织中的氧张力)就越强。

首先确定了荧光化学不受PFC类和泊洛沙姆(poloxamers)类的影响。然后，作为对照，该荧光标记物被注射进皮肤中，得到了氧张力。最后，该同样区域用PFC，PFC乳液或者PFC凝胶处理，又得到了氧张力。

结果：在该标记物被注入到用PFC处理过的区域后，氧张力读数形成峰值，随着PFC从组织中清除掉，然后读数开始下降。

结论：结合氧的PFC，像FtBu或者APF-200的吸收显著地提高了组织中局部的氧张力。局部氧浓度所获得的提高可以有助于提高伤口愈合的速度以及自由基去活化的速度。

实施例4：镰状细胞病局部缺血

实施例4A

采用若干新的无创性测量局部的(local)和总体的(global)氧输送被认为是对镰状细胞病(SCD)和血管闭塞危象(VOC)的更好表征。这些测量包括同时测量氧传递(DO2)，和组织氧合以及氧耗的替代指标，像氧提取率(OER)。这些技术与常规的血流动力参数，像心率和血压一起使用来测量和比较基线SCD患者，处于VOC的SCD患者，和无SCD的患者的氧输送和血流动力学。

研究对象群(Study Population)

研究对象群由三组构成。第一组是20名非洲-美洲血统的正常健康对照组，以前没有镰状细胞病史或者遗传性状。这些患者也报告了过去没有包括高血压，糖尿病，或者冠状动脉病的慢性病病史，在任何状况下未服药。第二组由44名SCD患者组成，他们已知有纯合的Hb SS或者双重杂合的Hb S-βThal或者Hb SC病，在评估时未报告有疼痛。最后一组是17名镰状细胞病患者，他们有经鉴定过的Hb SS或者Hb SC病史，在评估时报告的症状与VOC一致，需要在急症室接受治疗。基因型通过图审查来鉴定。

无创血流动力学和氧利用率测量

皮肤组织血红蛋白氧饱和度测量(CtSO₂)：采用差示吸收光谱来测量在组织的选定体积内的集合血红蛋白氧饱和度。CtSO₂的测量是利用可见光(500-700nm)的分光光度监测器(Wolff，1998；Woff，1996)来检测CtSO₂(O₂C：LEA，Inc.，Gieβen，Germany)。氧饱和度通过当氧合血红蛋白和脱氧血红蛋白经过一定体积的组织时对光的差示吸收光谱来测定。分布在任何组织中的血液体积大约是80％静脉，10％毛细血管，和10％动脉(Guyton，1981)。于是，所得到的CtSO₂表现出主要是静脉血红蛋白和因而是该组织提取后的隔室(post-extraction compartment)。这又表现出在组织水平上氧传递的充足。这是目前近红外吸收光谱技术测量周围组织和大脑血红蛋白氧饱和度的基础(Ward，2006)。所采用的光波长以及光极间距(optodespacing)二者的结合将返回信号源限制在2毫米的深度。在这个深度上，皮下组织(subcutaneous tissue)受到质询而非像肌肉那样更深的组织。在记录CtSO₂数据过程中，一个扁平探头被紧固在一只手的手掌面的鱼际区(使以前评估时提到过的色素和脂肪的任何影响减少到最小)。连续测量CtSO₂，每5秒钟记录一次数值(以百分饱和度报告出来)，平均测量时间10分钟。CtSO₂被报告成％血红蛋白氧饱和度。

动脉血红蛋白氧饱和度：动脉血红蛋白氧饱和度(SpO₂)采用脉搏血氧计(General Electric Procare Auscultaroy 400)来测定。采用SpO₂来代替实际的动脉血红蛋白氧饱和度。每5秒钟测量一次SpO₂，平均监测时间为10分钟。

组织微血管氧提取率(OERM)：OERM是氧被提取程度的一项标志，因而，是标志氧传递与氧消耗之间的平衡。它可以用几种方法局部地(regionally)和总体地(globally)来测定。整体地，该数值通常用VO₂/DO₂来计算，或者更普通地，用混合的静脉血红蛋白氧饱和度除以动脉血红蛋白氧饱和度。对于本研究，利用CtSO₂作为组织静脉血红蛋白氧饱和度的标记，利用SpO₂作为组织动脉血红蛋白氧饱和度的标记来测定OERM。为了计算静脉血在接受质询的组织体积中的分布采用了下面的公式：0.8x CtSO₂/SpO₂，式中的0.8是一个计算在组织中血液体积分布在静脉中的比例用的系数(Guyton，1981；Ward，2006；Hogan，2007)。

心指数(CI)：指向体表面积(BSA)的心指数采用阻抗心动描记术(Pennock，1997；Van De Water，2003)(Medis Medizinische Meβtechnik，Thueringen，Germany)来测量。每个受试者身上按照制造商指导地放上8个标准电极。颈部和胸部的各一侧放上两个这样的电极。所使用的电极是标准的连续ECG监测电极。每5秒钟测量一次CI，这些数值被用于得到10分钟时间内的平均CI。利用阻抗心动描记术测量的变量包括心排血量，心每搏排血量，和心搏指数(也指向BSA)。

氧传递：氧传递通过(DO2I＝CI*(13.4*Hgb*O₂SAT))来计算(Tobin，1998)。血红蛋白作为门诊病人或者急诊病人常规化验的一部分。对照受试者没有得出血红蛋白水平。对于对照对象采用了标准血红蛋白值12或者14。对于女性的血红蛋白值选取12，对于男性则选取14来计算氧传递，因为这个值代表了正常血红蛋白水平的低范围，可能会低估我们对照患者的氧传递。

生命体征(Vital Sign)：标准生命体征(心率，血压，体温和呼吸率)由急症室医护人员或者研究会员按照临床上认可的标准采用若凡自动化仪器进行测量。

统计分析

利用JMP 4.0(SAS Institute，Cary NC)进行数据输入和数据分析。在叙述性的分析之后进行标准的学生氏t-检验(standard student t-test)以确定在研究组别中有任何显著差异。血液动力学测量值和氧输送测量值的比较在三个研究组中的两个组之间进行(即，对照组与SCD基线，对照组与SCD危象，以及SCD危象与基线)。显著水平被设定在α＝0.05。

结果

有20名自诉健康的非洲-美洲裔对照组受试者，和61名SCD患者。健康对照组的中位年龄为26±10岁，SCD患者的中位年龄为34±11岁(表7)。

表7.SCD患者和健康对照的人口统计

^*女性Hgb 12和男性Hgb 14作为低的正常标准

多数SCD患者为Hgb SS，第二个最普通的基因型为Hgb SC(表7)。半数以上的对照组受试者为男性。在SCD患者组中的性别分布几乎平均(表7)。接着对5名SCD基线受试者进行同VOC对象的研究。要进一步作分析，这5名的样本量太小。

表8表明心的血流动力学曲线(CI，SV，SI)在对照人群与SCD受试者之间不是基线的就是有VOC的在统计学上没有显著差异(55％±12)。如表上所示，有一个朝着差异的趋势。

表8：氧传递，氧消耗，氧提取率，和皮肤饱和度的比较

表8还表明DO₂I和SI测量值对于健康对照受试者，基线的SCD患者，和VOC阶段的SCD是有差异的。DO₂I，以ml O₂/min/m²表示，对照受试者为566.7，基线SCD患者为368.4，有VOC的SCD患者为379.3。这些差异在健康对照受试者与基线SCD患者或者有VOC的SCD患者之间有统计意义上的显著性。它们在基线SCD患者和有VOC的SCD患者之间没有统计意义上的显著差异。

表8进一步显示出对组织氧合与氧提取来说，在组别之间有统计意义上的差异。平均浅表CtSO₂对于对照患者为66.9±8.5％，而对比基线SCD患者，它为57.5±14.4％。在对照受试者与有VOC的SCD患者之间，发现CtSO₂有类似的显著差异(CtSO2＝55.2±12.1％)。在对照受试者与SCD基线患者之间，以及在对照受试者与有VOC的SCD患者之间，OERM有类似的统计意义上的显著差异，而在SCD基线患者与有VOC的SCD患者之间，没有OERM差异。

最后，在健康对照受试者与基线SCD患者或者有VOC的SCD患者之间没有标准生命体征(血压，心率，体温，呼吸率，和SpO₂)上的统计意义上的差异。

讨论

本研究是首次同时报告了SCD患者中枢的和组织水平上的氧输送和血流动力学测量值。这些数据提供了深入的了解，它有助于制定可以改善氧传递的对SCD的疗法。

利用无创血流动力学监测方法发现SCD患者与对照人群相比，没有显著差异的心指数，心搏指数，心率，血压，呼吸率，或者SpO₂。也没有发现这些参数在基线SCD患者与有VOC的那些SCD患者之间有显著的差异。这与传统的将SCD作为高动力状态的，高输出心脏状态的理解相对立，传统认为这种状态是由于源自镰状细胞和受损红细胞的慢性溶血造成了极度贫血所致。

但是，本发明者们发现了在基线的或者有VOC的SCD患者与非洲-美洲对照人群之间在氧输送参数DO₂I，CtSO₂，和OER上有显著差异，SCD患者在每一项上都表现出氧输送的减退。在比较基线SCD患者与有VOC的SCD患者时，发现有进一步的氧输送减退。

在探讨可能的解释为什么SCD患者(基线的或者有VOC的)与对照人群之间在DO₂I，CtSO₂，和OERM上有差异时，贫血程度本身看似是最有可能的解释。尽管未测量过实际的组织氧传递，但是不难想象，DO₂I的整体下降会导致局部组织氧传递的下降，尤其是传递给像真皮那样的次要组织，真皮被用作CtSO₂监测位点的器官。如果尽管组织氧传递下降而组织氧消耗仍然未降低，则由组织的静脉血红蛋白饱和度就会降低。这种情况的发生是因为或者穿过组织的过渡时间增加了，组织中全部有效氧含量降低了，或者出现了二者结合在一起的情形。因而，在本研究中这三个数值一起变化就不足为奇了-它们在生理学上是联系的。虽然血红蛋白水平在测定DO₂I时与心指数有数学上的联系，但是CtSO₂的数值与该公式无关。

令人惊讶的是，SCD患者即使在他们的基线状态也并未表现出代谢补偿他们的DO₂下降，尽管一生患有慢性溶血性贫血。这样的补偿来使OERM”正常化”可以或者被组织在长时间内降低它们的代谢需求，或者被SCD患者在微血管水平上具有血管舒张的慢性状态以改善局部组织氧传递来预见。虽然不能排斥二者中的任何一方正在发生，从这些发现中可以推断补偿是不足以使CtSO₂或者OERM正常化的。第二个令人吃惊的发现是，从氧输送观点出发，在VOC当中的SCD患者看来并未进一步代偿失调。数据表明CtSO₂和OERM或许并不因为VOC而发生改变。处于VOC的患者显示出一种提高他们的DO₂I的趋向，很可能因为CI的提高。这个发现受以下讨论的限定所支配。

已知资料(Given the data)中，血管闭塞的镰状细胞病或许可以被视为休克的一种亚临床的补偿状态，如被组织氧传递在微循环水平上的下降所定义(Noguchi，1993；Ince，1999；Kumar，1996；Mentzer，1980)。引入局部测量技术已经使由氧合的总体测量所积累的信息不足变得突出，像动脉血红蛋白氧饱和度以及传统的体检所发现的，像血压，心率，甚至心排血量。

因此，应当考虑强调如在组织氧合中反映出来的基础的微循环(Krejci，2000；Zhao，1985)作为诊断的和治疗的终点。

利用球结膜的活体显微镜检查，Cheung等人已经证实SCD患者在基线和VOC状态下与对照人群相比较时有严重的微血管畸形(Cheung，2002；Cheung，2001)。所指出的畸形包括微血管分布下降(毛细血管丧失)，受损的和扩张的脉管，红细胞速度降低，和微血管淤积的结合。但是，这些研究没有检验中枢的或者组织的氧输送的测量值。

利用可见参考高光谱(visible reference hyperspectral)技术，先前的研究已经证实，在基线阶段RBC流量以及组织血红蛋白氧饱和度下降，该技术也是基于差示光谱学和组织中的血液体积分布(Zuzak，2003)。但是，该研究室在基线而不是VOC状态下进行的。另外，它没有同时检验总体氧传递的参数。

其他人在一组有和没有肺动脉血压过高的SCD患者中进行了肺动脉导管插入术。他们发现，有肺动脉血压过高的SCD患者与没有肺动脉血压过高的SCD患者相比，心排血量和混合的静脉血红蛋白氧饱和度显著降低(Anthi，2007)。还发现了有肺动脉血压过高的SCD患者预计的氧消耗水平非常低。但是，该研究没有进行任何局部组织氧输送的测量。我们的SCD患者以前有肺动脉血压过高达到的程度不知道，观察采用CtSO₂作为那些可能处于危险之中的人或者那些因肺动脉血压过高应该被研究的人的一项指数很有趣。

结论

镰状细胞病(SCD)是一种慢性微循环疾病病变，常有急性的加重。血管闭塞危象(VOC)是最最常见的并发症。这种病变导致经常利用健康护理的资源，并且明显地影响着镰状细胞病患者的社会心理状况。确证镰状细胞病是一种微循环水平上的复杂的多因素病变。炎性细胞活素之间复杂的相互作用，RBC和RBC之间的相互作用，RBC与WBC的粘连，局部组织缺血，和疼痛都与微循环功能障碍有关。在VOC患者中，最终的途径是由血管介体，炎性介体和缺血所介导的血管闭塞。如在动物模型中被证实的那样，血管闭塞的性质是可逆的和部分的。Kaul等人的研究调查了氟碳乳液对镰状红细胞诱导梗阻的效应，发现经PFC乳液处理的红细胞回归到基线氧合值(Kumar，1996)。根据以上所介绍的调查研究，结合氧化氮的生物活性和PFC有益的消炎和抗血栓形成的作用使得这个成为一种新颖的对SCD的疗法。在急性发作时，这是一个获得比鸦片制剂和液体更好的疗法的机会。

实施例4B

一名患有镰状细胞病和缺血疼痛的受试者接受通过静脉内或者动脉内给予这里描述的一定量的全氟化碳乳液组合物。该受试者感受到缺血疼痛有所减轻和缓解。

实施例4C

一名患有镰状细胞病和外周脉管系统阻力增加的受试者接受通过静脉内或者动脉内给予这里描述的一定量的全氟化碳乳液组合物。该受试者感受到外周阻力的下降。

实施例4D

一名患有镰状细胞病和组织氧合障碍的受试者接受通过静脉内或者动脉内给予这里描述的一定量的全氟化碳乳液组合物。全氟化碳或者氧合全氟化碳给予有效地增加了给组织的氧传递。

实施例4E

一名患有镰状细胞病和组织发炎(炎症是镰状细胞病的效应)的受试者接受通过静脉内或者动脉内给予这里描述的一定量的全氟化碳乳液组合物。全氟化碳或者氧合全氟化碳给予有效地降低了发炎组织的炎症。

实施例4F

一名患有血管闭塞危象的受试者接受通过静脉内或者动脉内给予这里描述的一定量的全氟化碳乳液组合物。全氟化碳或者氧合全氟化碳给予有效地改善了血管闭塞危象的症状。

实施例5：减压病

实施例5A

一名患有减压病的受试者接受通过静脉内或者动脉内给予这里描述的一定量的全氟化碳乳液组合物。PFC乳液给予有效地改善了该减压病的症状。

实施例5B

一名受试者在经历减压之前接受通过静脉内或者动脉内给予这里描述的一定量的全氟化碳乳液组合物。PFC乳液给予有效地防止了减压病。

实施例6：空气栓塞

实施例6A

一名患有空气栓塞的受试者接受通过静脉内或者动脉内给予这里描述的一定量的全氟化碳乳液组合物。PFC乳液给予有效地改善了空气栓塞的症状。

实施例6B

一名患有空气栓塞的受试者接受通过静脉内或者动脉内给予这里描述的一定量的全氟化碳乳液组合物。PFC乳液给予有效地治疗了空气栓塞。

实施例7：CNS创伤包括外伤性脑损伤和脊髓损伤

实施例7A

一名受到外伤性脑损伤的受试者在伤害发生后尽可能快地接受了全氟化碳给予。可选地，该受试者接受全氟化碳乳液给予，它可以含有氧或者被氧饱和。可选地，该受试者可以通过吸入接受50％或者100％氧气给予。该全氟化碳乳液是Oxycyte

或者是类似的第三代全氟化碳。与未接受全氟化碳乳液的受到类似伤害的受试者相比较，该受试者的神经组织丧失较少。

实施例7B

或者是类似的第三代全氟化碳。与未接受全氟化碳乳液的受到类似伤害的受试者相比较，该受试者的缺血性大脑损伤较少。

实施例7C

或者是类似的第三代全氟化碳。与未接受全氟化碳乳液的受到类似伤害的受试者相比较，该受试者的继发性缺血较少。

实施例7D

或者是类似的第三代全氟化碳。与未接受全氟化碳乳液的受到类似伤害的受试者相比较，该受试者的神经组织中(大脑和脊髓)的氧张力升高。

实施例8：一氧化碳中毒

一名患一氧化碳中毒的受试者接受通过静脉内或者动脉内给予这里描述的一定量的全氟化碳乳液组合物。

PFC乳液提高了受试者血液中的氧水平，并且加快了一氧化碳从受试者血红蛋白中卸载的速度。PFC乳液给予有效地治疗了一氧化碳中毒。另外，全氟化碳有良好的耐受性，而且无毒。

实施例9：器官保存

实施例9A

一种这里描述的全氟化碳乳液组合物被注射入移植前的器官。

PFC乳液提高了器官组织中的氧水平和氧张力。该器官的存活期限延长了。另外，全氟化碳有良好的耐受性，而且无毒。

实施例9B

待移植的器官在移植前被浸泡在这里描述的全氟化碳乳液组合物中。

实施例10：伤口和烧伤愈合以及防止和减少瘢痕

实施例10A

一名受试者接受一种这里描述的全氟化碳乳液组合物局部给予。具体地，在受试者的伤口上进行该乳液的局部给予。

PFC乳液提高了伤口组织中的氧水平和氧张力。而且，该乳液加速了伤口的愈合。另外，全氟化碳有良好的耐受性，而且无毒。

实施例10B

一名受试者接受一种这里描述的全氟化碳乳液组合物局部给予。具体地，在受试者的烧伤伤口上进行该乳液的局部给予。

PFC乳液提高了烧伤组织和周围组织中的氧水平和氧张力。而且，该乳液加速了烧伤伤口的愈合。另外，全氟化碳有良好的耐受性，而且无毒。

实施例10C

一名受试者接受一种这里描述的全氟化碳乳液组合物局部给予。具体地，在受试者的伤口或者瘢痕上进行该乳液的局部给予。

PFC乳液提高了伤口组织或者瘢痕的组织中的氧水平和氧张力。而且，该乳液加速了伤口的愈合并且改善和减少了瘢痕的出现。另外，全氟化碳有良好的耐受性，而且无毒。

实施例11：促进防老化

实施例11A

一名受试者接受一种这里描述的全氟化碳乳液组合物局部给予。具体地，在受试者的皮肤上进行该乳液的局部给予。

PFC乳液提高了皮肤组织中的氧水平和氧张力。而且，该乳液减少了与老龄化有关的包括细纹和皱纹的皮肤缺点的出现。乳液也改善了抹药处皮肤的紧緻。另外，全氟化碳有良好的耐受性，而且无毒。

实施例11B

一名受试者接受一种这里描述的混合有咖啡因的全氟化碳乳液组合物局部给予。具体地，在受试者的受脂肪团影响的皮肤上进行该乳液混合物的局部给予。

PFC乳液提高了皮肤组织中的氧水平和氧张力。而且，该乳液混合物减少了抹药处脂肪团的出现。另外，全氟化碳有良好的耐受性，而且无毒。

实施例12：痤疮和酒渣鼻的治疗

实施例12A

一名患有痤疮的受试者在痤疮部位的皮肤接受一种这里描述的全氟化碳乳液组合物局部给予。PFC乳液的局部给予有效地治疗了受试者的痤疮。痤疮显著地减少了，如与痤疮有关的皮肤外貌特征的减少。

实施例12B

一名患有寻常痤疮的受试者在寻常痤疮部位的皮肤接受一种这里描述的全氟化碳乳液组合物局部给予。通过降低受试者现有寻常痤疮的严重程度和防止或者降低进一步的寻常痤疮的严重程度，PFC乳液的局部给予有效地减少了受试者的痤疮-瘢痕。

实施例12C

一名患有皮肤毛囊痤疮丙酸杆菌感染的受试者接受一种这里描述的全氟化碳乳液组合物局部给予。组合物被涂抹在皮肤毛囊上或者该皮肤毛囊的周围皮肤表面上。PFC乳液的局部给予有效地减少了该受试者皮肤毛囊的痤疮丙酸杆菌感染。

实施例12D

一名患有真皮痤疮丙酸杆菌感染的受试者的皮肤接受一种这里描述的全氟化碳乳液组合物局部给予。该组合物被涂抹在包含受感染的真皮的皮肤上。PFC乳液的局部给予有效地减少了该受试者真皮的痤疮丙酸杆菌感染。

实施例12E

一名易感染痤疮的受试者的皮肤接受一种这里描述的全氟化碳乳液组合物局部给予。PFC乳液的局部给予有效地防止和减少了该受试者的痤疮。

实施例12F

一名在皮肤中或者皮肤上有痤疮丙酸杆菌的受试者的皮肤接受一种这里描述的全氟化碳乳液组合物局部给予。PFC乳液的局部给予有效地杀死了受试者皮肤中或者皮肤上的痤疮丙酸杆菌。

上述实施例中组合物的为每天一次，两次，或者三次给予。可以一周，两周，三周或者四周，或者更长时间每天重复给予。可以根据需要连续数月或者数年给予。

实施例12G

一名患有酒渣鼻的受试者在酒渣鼻部位的皮肤接受一种这里描述的全氟化碳乳液组合物局部给予。PFC乳液的局部给药有效地治疗了受试者的酒渣鼻。酒渣鼻显著地减少了，如与酒渣鼻有关的皮肤外貌特征的减少。

实施例13：增强性功能

实施例13A

一名男性受试者的性器官接受一种这里描述的全氟化碳乳液组合物局部给予。对局部氧张力和夜间勃起进行了评估。收集和评估了生活质量(QOL)改变的数据。

组织中的氧水平和氧张力有所提高。此外，受试者的生活质量得到了改善。另外，全氟化碳有良好的耐受性，而且无毒。

实施例13B

男人和女人受试者的性器官接受一种这里描述的全氟化碳乳液组合物局部给予。PFC乳液每天进行一次或者两次给予。对局部氧张力和夜间勃起(男性的)进行了评估。收集和评估了生活质量(QOL)改变的数据。

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Claims

1.一种乳液包含一定量的作为颗粒分散在连续液相中的全氟化碳液体，其特征在于，所述分散的颗粒具有单峰粒径分布。

2.如权利要求第1项所述的乳液，其特征在于，含有按乳液重量计的低于40ppm的残留氟化物。

3.如权利要求书第1或者第2项所述的乳液，其特征在于，含有按乳液重量计的低于7g/L的溶血磷脂酰胆碱(LPTC或LPC)。

4.如权利要求书第1-3项任意一项所述的乳液，其特征在于，按分散的颗粒体积计，总量的90％或者更多的颗粒尺寸小于700nm。

5.如权利要求书第1-4项任意一项所述的乳液，其特征在于，按分散的颗粒体积计，总量的50％或者更多的颗粒尺寸小于400nm。

6.如权利要求书第1-5项任意一项所述的乳液，其特征在于，所述全氟化碳是全氟(叔丁基环己烷)，全氟萘烷，全氟异丙基萘烷，全氟三丙基胺，全氟三丁基胺，全氟甲基环己基哌啶，全氟辛基溴，全氟癸基溴，全氟二氯辛烷，全氟己烷，十二氟戊烷，或者它们的混合物。

7.如权利要求书第1-6项任意一项所述的乳液，其特征在于，所述全氟化碳含有按该全氟化碳重量计的低于5ppm的残留共轭烯烃。

8.如权利要求书第1-7项任意一项所述的乳液，其特征在于，所述全氟化碳含有按该全氟化碳重量计的低于20ppm的残留有机氢。

9.如权利要求书第1-8项任意一项所述的乳液，其特征在于，所述乳液包含20-80％w/v的全氟化碳。

10.如权利要求书第1-9项任意一项所述的乳液，其特征在于，还包含乳化剂。

11.如权利要求书第10项所述的乳液，其特征在于，包含1-10％w/v的乳化剂。

12.如权利要求书第1-11项任意一项所述的乳液，其特征在于，所述乳化剂是表面活性剂。

13.如权利要求书第12项所述的乳液，其特征在于，所述表面活性剂是蛋黄磷脂。

14.如权利要求书第1-13项任意一项所述的乳液，其特征在于，还包含水介质。

15.如权利要求书第14项所述的乳液，其特征在于，所述水介质是等渗的。

16.如权利要求书第14或者第15项所述的乳液，其特征在于，所述水介质被缓冲至pH值为6.8-7.4。

17.如权利要求书第1-16项任意一项所述的乳液，其特征在于，所述乳液还包含维生素E。

18.一种治疗受试者患有的镰状细胞病，减压病，空气栓塞或者一氧化碳中毒的方法，其特征在于，包含给予受试者如权利要求书第1-17项任意一项所述的乳液，以有效治疗受试者的镰状细胞病，减压病，空气栓塞或者一氧化碳中毒。

19.一种在器官移植前保存器官的方法，其特征在于，包含让该器官与如权利要求书第1-17项任意一项所述的乳液接触，以有效延长器官生存期。

20.一种治疗受试者患有的创伤，烧伤，痤疮或者酒渣鼻的方法，其特征在于，包含局部给予受试者的皮肤如权利要求书第1-17项任意一项所述的乳液，以有效治疗受试者的创伤，烧伤，痤疮或者酒渣鼻。

21.一种提高受试者的皮肤紧致，减少受试者皮肤细纹，皱纹或者瘢痕出现的方法，其特征在于，包含局部给予受试者的皮肤如权利要求书第1-17项任意一项所述的乳液，以有效提高受试者皮肤紧致，减少受试者皮肤细纹，皱纹或者瘢痕出现。

22.一种生产全氟化碳乳液的方法，其特征在于，包含步骤：

a)将乳化剂与水介质一起混合；

b)将全氟化碳加到步骤a)的混合物中；

c)混合步骤b)的混合物，形成粗乳液；

d)获得步骤c)的粗乳液的样品，测定该样品的粒径分布；

e)如果步骤d)的样品具有单峰粒径分布，则使步骤c)的粗乳液均质化；以及

f)获得所述乳液。

23.如权利要求书第22项所述的方法，其特征在于，在步骤e)中，只有当步骤d)的样品的中值粒径小于20μm时，才对步骤c)的粗乳液均质化。

24.如权利要求书第22或者第23项项所述的方法，其特征在于，在步骤e)中，该粗乳液在7000psi或高于7000psi的压力下被均质化。

25.一种制备含有PFC乳液的药物产品的方法，其特征在于，所述方法包含：

a)获得批次的全氟化碳乳液或者粗乳液；

b)1)测定该批次的粒径分布；

2)测定存在于该批次中的残留氟化物总量；或者

3)测定存在于该批次中的溶血磷脂酰胆碱(LPTC)总量；以及

c)只有当1)确定该批次具有单峰粒径分布；2)确定该批次含有按该乳液重量计的低于40ppm的残留氟化物；或者3)确定该批次含有按该乳液重量计的低于7g/L的溶血磷脂酰胆碱(LPTC)时，由该批次制备该药品。

26.一种验证一个批次的乳液用于药物使用的方法，其特征在于，所述方法方法包含：

a)1)测定该批次样品的粒径分布；

2)测定存在于该批次样品中的残留氟化物总量；或者

3)测定存在于该批次样品中的溶血磷脂酰胆碱(LPTC)总量；以及

b)只有当1)该批次样品具有单峰粒径分布；2)该批次含有按该乳液重量计的低于40ppm的残留氟化物；或者3)该批次含有按该乳液重量计的低于7g/L的溶血磷脂酰胆碱(LPTC)时，验证该批次用于药物使用。

27.如权利要求书第26项所述的方法，其特征在于，步骤a)1)-a)3)在该批次的样品接受过稳定性测试后执行。