CN102369189B - 氟喹诺酮羧酸分子晶体 - Google Patents

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Abstract

(R)-(+)-7-(3-氨基-2，3，4，5，6，7-六氢-1H-氮杂-1-基)-8-氯-1-环丙基-6-氟-1，4-二氢-4-氧代喹啉-3-羧酸的分子晶形，其特征在于以下特征中的至少一种：(a)X-射线粉末衍射(“XRPD”)光谱包含在2θ角10.6、15、19.7、21.1和22°±0.2°的峰；(b)DSC熔融峰在288℃；(c)13C NMR光谱具有在23.3、27.7、41.1、54.5、116.6和153.5ppm的峰；以及(d)pKa值为5.65和9.91。

Description

氟喹诺酮羧酸分子晶体
技术领域
本发明涉及氟喹诺酮羧酸分子晶体。具体地，本发明涉及(R)-(+)-7-(3-氨基-2，3，4，5，6，7-六氢-1H-氮杂-1-基)-8-氯-1-环丙基-6-氟-1，4-二氢-4-氧代喹啉-3-羧酸的分子晶体。
背景技术
合成抗微生物剂如萘啶酸、吡咯米酸等已知为治疗由革兰氏阴性微生物引起的感染性疾病的药物。但是，它们对难控制的疾病如假单胞菌病等仅呈现出不足的效应。
在另一方面，已开发在6位由氟原子取代的喹诺酮羧酸衍生物，例如诺氟沙星、氧氟沙星和环丙沙星，或者在8位由氯原子取代的喹诺酮羧酸衍生物(日本专利特开(ko-kai)225181/1986、90183/1984)，并且由于它们的强抗微生物活性而在临床上使用。
这些常规合成抗微生物剂的缺点在于活体内吸收率不足，仅提供低生物利用度，并且对革兰氏阳性微生物的抗微生物活性不高。
因此，期望开发这样的抗微生物剂，其对包括抗性细菌在内的革兰氏阳性和革兰氏阴性微生物具有强抗微生物活性，并且具有优异的活体内吸收率。
活性药物成分(“API”)通常是有机分子，取决于它们的制备方法，可以不同有机晶形存在。这样的不同分子晶形可实际上影响包含这些API的药物组合物，例如它们的加工性、物理和化学性质、稳定性等。
因此，期望提供具有优异性质的API的分子晶形。具体地，非常期望提供用于制备新抗感染药物组合物的具有有利性质的氟喹诺酮羧酸的分子晶形。
发明内容
概括而言，本发明提供氟喹诺酮羧酸的特定分子形式。
在一方面，本发明提供(R)-(+)-7-(3-氨基-2，3，4，5，6，7-六氢-1H-氮杂-1-基)-8-氯-1-环丙基-6-氟-1，4-二氢-4-氧代喹啉-3-羧酸的特定分子形式。
在另一方面，本发明提供(R)-(+)-7-(3-氨基-2，3，4，5，6，7-六氢-1H-氮杂-1-基)-8-氯-1-环丙基-6-氟-1，4-二氢-4-氧代喹啉-3-羧酸的稳定分子形式。
在另一方面，本发明提供(R)-(+)-7-(3-氨基-2，3，4，5，6，7-六氢-1H-氮杂-1-基)-8-氯-1-环丙基-6-氟-1，4-二氢-4-氧代喹啉-3-羧酸的分子晶形，其特征在于X-射线粉末衍射(“XRPD”)光谱包含在2θ角10.6、15、19.7、21.1和22°±0.2°的峰。
在另一方面，本发明提供(R)-(+)-7-(3-氨基-2，3，4，5，6，7-六氢-1H-氮杂-1-基)-8-氯-1-环丙基-6-氟-1，4-二氢-4-氧代喹啉-3-羧酸的分子晶形，其特征在于DSC(示差扫描量热法)熔融峰在288℃。
在另一方面，本发明提供(R)-(+)-7-(3-氨基-2，3，4，5，6，7-六氢-1H-氮杂-1-基)-8-氯-1-环丙基-6-氟-1，4-二氢-4-氧代喹啉-3-羧酸的分子晶形，其特征在于13C NMR光谱具有在23.3、27.7、41.1、54.5、116.6和153.5ppm的峰。
在另一方面，本发明提供(R)-(+)-7-(3-氨基-2，3，4，5，6，7-六氢-1H-氮杂-1-基)-8-氯-1-环丙基-6-氟-1，4-二氢-4-氧代喹啉-3-羧酸的分子晶形，其特征在于pKa值为5.65和9.91。
在另一方面，本发明提供包含(R)-(+)-7-(3-氨基-2，3，4，5，6，7-六氢-1H-氮杂-1-基)-8-氯-1-环丙基-6-氟-1，4-二氢-4-氧代喹啉-3-羧酸的分子晶形的药物组合物，所述分子晶形的特征在于X-射线粉末衍射(“XRPD”)光谱包含在2θ角10.6、15、19.7、21.1和22°±0.2°的峰；或者DSC熔融峰在288℃；或者13C NMR光谱具有在23.3、27.7、41.1、54.5、116.6和153.5ppm的峰；或者pKa值为5.65和9.91。
在另一方面，本发明提供包含(R)-(+)-7-(3-氨基-2，3，4，5，6，7-六氢-1H-氮杂-1-基)-8-氯-1-环丙基-6-氟-1，4-二氢-4-氧代喹啉-3-羧酸的分子晶形的药物组合物，所述分子晶形的特征在于X-射线粉末衍射(“XRPD”)光谱包含在2θ角10.6、15、19.7、21.1和22°±0.2°的峰；DSC熔融峰在288℃；并且13C NMR光谱具有在23.3、27.7、41.1、54.5、116.6和153.5ppm的峰。
在另一方面，本发明提供包含(R)-(+)-7-(3-氨基-2，3，4，5，6，7-六氢-1H-氮杂-1-基)-8-氯-1-环丙基-6-氟-1，4-二氢-4-氧代喹啉-3-羧酸的分子晶形的药物组合物，所述分子晶形的特征在于X-射线粉末衍射(“XRPD”)光谱包含在2θ角10.6、15、19.7、21.1和22°±0.2°的峰；DSC熔融峰在288℃；13C NMR光谱具有在23.3、27.7、41.1、54.5、116.6和153.5ppm的峰；并且pKa值为5.65和9.91。
由以下详述和权利要求及附图显而易见本发明的其他特征和优点。
附图说明
各图的简述如下。
图1表示贝西沙星(besifloxacin)HCl的结构。
图2表示贝西沙星HCl，批次050956330的pH-溶解度曲线。
图3表示贝西沙星HCl盐，批次050956330的吸湿性。
图4表示贝西沙星游离碱，批次2325-288的吸湿性。
图5表示贝西沙星HCl，批次051157469的示差扫描量热法。
图6表示贝西沙星游离碱，批次2325-282-0的示差扫描量热法和热重分析。
图7表示贝西沙星HCl盐，批次051157469的X-射线粉末衍射分析总结。
图8表示贝西沙星游离碱，批次2325-293的X-射线粉末衍射分析总结。
图9表示贝西沙星HCl盐和游离碱的X-射线粉末衍射分析图样的叠加。
图10表示由有机溶剂平衡样品(贝西沙星HCl盐)获得的过量固体的X-射线粉末衍射分析图样。
图11表示由有机溶剂平衡样品(贝西沙星游离碱)获得的过量固体的X-射线粉末衍射分析图样。
图12表示配制的贝西沙星眼用混悬剂中的贝西沙星游离碱(0.6％)的X-射线粉末衍射分析鉴定。
图13表示X-射线粉末衍射分析检测ISV-403药品中的贝西沙星HCl的灵敏度的图。
图14表示第二实验室生产的批次14104J的贝西沙星HCl参照标准品的2-40度2θ的X-射线粉末衍射分析图样。
图15表示第二实验室生产的贝西沙星HCl和Bausch & Lomb生产的贝西沙星游离碱的3-40度2θ的X-射线粉末衍射分析图样。
图16表示第一实验室生产的贝西沙星HCl批次、第二实验室生产的贝西沙星HCl参照标准品和Bausch & Lomb生产的贝西沙星游离碱的4-16度2θ的X-射线粉末衍射分析图样。
图17表示第二实验室生产的贝西沙星HCl批次和Bausch & Lomb生产的贝西沙星游离碱的4-16度2θ的X-射线粉末衍射分析图样。
图18表示用于掺加(spiking)研究样品的X-射线粉末衍射分析图样，其中将贝西沙星游离碱批次2325-293掺加入第一实验室生产的贝西沙星HClBL8/R&D/07/001批次2中以确定指示渐增的游离碱含量的峰。
图19表示用于掺加研究的样品的X-射线粉末衍射分析图样，其中将贝西沙星游离碱批次2325-293掺加入第二实验室生产的贝西沙星HCl参照标准品中。
图20表示贝西沙星HCL盐和贝西沙星游离碱的C NMR谱图。
图21表示三个批次的贝西沙星游离碱的平均X-射线粉末衍射分析图样。
图22表示贝西沙星HCl参照标准品和贝西沙星游离碱的X-射线粉末衍射分析图样。
图23表示贝西沙星游离碱，批次2325-293的X-射线粉末衍射分析峰表。
图24表示贝西沙星HCl参照标准品和贝西沙星游离碱批次2325-293的X-射线粉末衍射分析图样的比较。
图25表示贝西沙星游离碱的主X-射线粉末衍射分析峰的表。
图26为微粉化贝西沙星HCl参照标准品(B&L批次050148473和第二实验室批次14104J)的X-射线衍射峰报告。
图27为贝西沙星游离碱(B&L 2325-293)的X-射线衍射峰报告。
图28为微粉化贝西沙星HCl(B&L批次070876736和第一实验室批次BL8/R&D/07/001批次I)的X-射线衍射峰报告。
图29为微粉化贝西沙星HCl(B&L批次070876768和第一实验室批次BL8/R&D/07/001批次II)的X-射线衍射峰报告。
图30为微粉化贝西沙星HCl(B&L批次050956330和第二实验室批次01085J)的X-射线衍射峰报告。
图31为微粉化贝西沙星HCl(第二实验室批次03063J)的X-射线衍射峰报告。
图32为微粉化贝西沙星HCl(B&L批次051157469和第二实验室批次30095J)的X-射线衍射峰报告。
图33为微粉化贝西沙星HCl(第二实验室批次05126J)的X-射线衍射峰报告。
发明详述
用于本文时，术语“控制”还包括降低、缓解、改善和预防。
用于本文时，术语“稳定”指在初始制备材料后2周时间，如XRPD图样中的多个峰显示，晶体结构不发生改变。
概括而言，本发明提供(R)-(+)-7-(3-氨基-2，3，4，5，6，7-六氢-1H-氮杂-1-基)-8-氯-1-环丙基-6-氟-1，4-二氢-4-氧代喹啉-3-羧酸的稳定分子晶体。
在整个本公开和权利要求书中，(R)-(+)-7-(3-氨基-2，3，4，5，6，7-六氢-1H-氮杂-1-基)-8-氯-1-环丙基-6-氟-1，4-二氢-4-氧代喹啉-3-羧酸也称为贝西沙星。
(R)-(+)-7-(3-氨基-2，3，4，5，6，7-六氢-1H-氮杂-1-基)-8-氯-1-环丙基-6-氟-1，4-二氢-4-氧代喹啉-3-羧酸的合成公开于美国专利5,447,926中，通过援引全文并入本文。
据观察，贝西沙星HCL盐(贝西沙星的HCl加成盐)略溶于水，微溶于甲醇和乙醇，不溶于乙腈和异丙醇。贝西沙星具有2个在整个2-12的pH范围中可离子化的官能团，即羧酸和伯胺。这些官能团在pH 5.5-9.0离子化形成两性离子，其结晶为极微溶(约0.1mg/mL)的固体。因此，观察到贝西沙星HCl在水性介质(pH＞4)中转化成不含相反离子的新晶相(以下称为“游离碱”)。独立的光谱研究证实该游离碱是两性离子分子晶体。在pH＞9和pH＜5时，贝西沙星的溶解度作为pH的函数增加至最大约10mg/mL(pH 3)。将pH-溶解度曲线拟合入Henderson-Hasselbach方程，假定固有溶解度为0.074mg/mL，并且羧酸和伯胺基团的pKa分别估计为5.65和9.91。
鉴定了贝西沙星游离碱和HCl盐特有的粉末X-射线衍射(XRPD)图样。根据DSC(示差扫描量热法)检测，这些形式还具有特有的熔融温度。据观察，游离碱的熔融峰在288℃，相比之下，HCL盐则在321.5℃。两种固体的熔融均伴有分解。根据药品的XRPD分析，未观察到HCl盐的迹象，然而，始终存在与游离碱相伴的峰。在pH 6.5(产品pH)的溶液中，贝西沙星游离碱具有最低溶解度。因此，可能在产品生产期间所有HCl盐转化成游离碱。这些研究表明贝西沙星的游离碱是药品中的主要晶相。
贝西沙星是目前开发用于治疗眼感染的抗生素的氟氯喹诺酮。用贝西沙星的HCl加成盐作为活性药物成分(“API”)原料生产药品。贝西沙星HCl盐的分子量为430。贝西沙星HCL的结构示于图1。研究了贝西沙星HCl盐的物理-化学性质，并且阐明了在药物组合物中含有贝西沙星的固相。
将贝西沙星HCl盐批次050956330和051157469用于配制药物组合物。这二个批次被认为是在许多研究中用于配制药品的代表性材料，并且满足所有规定。此外，使用下述方法制备游离碱的若干实验室批次。这些批次指定为2325-293、2325-288和2325-282号。
仪器
Burrell Wrist Action摇床，75型
色谱系统：HP 1100配有光电二极管阵列检测器。HP chemstation软件差示扫描量热仪(DSC)，Perkin Elmer，Pyris
Mettler天平，AE160型
Accumet 925 pH/离子计
Rigaku Miniflex XRPD单位CuKα源(30kVI15rnA)
热重分析仪，TA Instruments
吸湿分析仪，MB-300W型，VTI corporation
高效液相色谱(HPLC)法
使用反相梯度HPLC法分析贝西沙星溶解度样品。以下列出条件：
评价贝西沙星HCl在若干有机溶剂中的溶解度。在室温(24±3℃)下，使用小磁力搅拌器或Burrell Wrist Action摇床，用10mL每种溶剂平衡过量的药物24-48小时。视觉检查样品，若需要，加入更多药物直至搅拌后持续存在过量固体。然后通过0.45μm Nylon或PVDF过滤器过滤样品，或者在10,000RPM下离心样品15分钟。按需要，使用HPLC稀释剂稀释滤液或上清，并通过HPLC分析。当溶解度大于100mg/mL时，不测定平衡溶解度，并按照USP定义将化合物描述为″易溶″。
通过用1N NaOH调整pH，测定贝西沙星HCl批次050956330在蒸馏水中的溶解度随pH的变化。使用Burrell摇床，使药物的悬浮液(约50-150mg在10mL蒸馏水中)平衡72-96小时。实验室温度为22±2℃。在取样前，在过量固体存在下测定悬浮液的pH。在Enprotech ISS-I13离心机中以10,000RPM离心样品15分钟，或者通过0.45～Nylon或PVDF过滤器过滤样品。当过滤样品时，弃去一定体积的滤液以允许过滤器的饱和。在分析前，按需要用HPLC稀释剂稀释上清或滤液。以不同时间间隔监测样品浓度以确保完全平衡。另外，样品浓度报告为贝西沙星游离碱浓度而不是HCl盐。
为了测定与观察到的溶解度行为相符的pKa，将pH-依赖性溶解度拟合入以下表达式：
S＝So*(10pKa1-pH+10pH-pKa2+1)
其中
S＝溶解度
So＝固有溶解度(两性离子和中性物质的总和)
pKa1＝羧酸部分的解离常数
pKa2＝伯铵离子部分的解离常数
示差扫描量热法(DSC)和热重分析(TGA)
在Perkin-Elmer Pyris 7DSC上进行DSC实验，并用Pyris软件7.0.0.0110版来分析结果。将少量细磨的粉末(约1.5-3mg)精确称量入50μL铝锅中。用针孔盖卷边密封该锅。以20℃/min，从50℃至340℃扫描样品。从熔融曲线外推固体的熔融起点。此外，记录其他事件，例如分解时的放热量，以表征此材料。
使用TA Instruments Q50型进行热重分析。将重约15mg的样品装载于配衡的铂容器中。以10℃/分钟将样品从室温加热至350℃。在加热期间，用氮气以40mL/min吹扫样品。监测样品的重量损失随温度的变化。
吸湿分析
使用VTI吸湿天平，监测作为相对湿度的函数的水分吸收和损失。将30-40mg样品装载入配衡的玻璃样品容器中。精确记录样品的初始重量。然后于40℃下在氮气稳定流中将样品干燥2小时。初步干燥后，在25℃下用干燥氮气平衡样品，并在受控条件下将样品暴露于逐步不断增加的湿度。在每个新相对湿度下平衡样品2小时。以10％RH间隔，在10％-90％RH下监测吸湿行为，并从90％至10％RH监测解吸。对应于％RH，记录％水分增加/损失。
制备固体贝西沙星游离碱
通过将贝西沙星HCl盐溶于水并用1N NaOH调节至pH＞10来分离其游离碱。用1N HCl将该溶液的pH温和地降至～9-10。在室温下搅拌所得浆状物1小时，并使用膜过滤器通过过滤分离沉淀。在真空烘箱中于室温下将固体干燥24-48小时。
粉末X-射线衍射
将约20-100mg粉末装载入低本底样品容器中。在Rigaku Miniflex(扫描配置)上分析样品，以1°2θ/分钟的速率从5-60°的2-θ进行扫描，取样速率为0.02秒。使用由Materials Data Inc.提供的Jade软件7.5版来分析图样。
分析贝西沙星眼用混悬剂(0.6mg/g)中的晶体固体
贝西沙星混悬制剂是粘性溶液，其含有固体药物颗粒在水合聚卡波非中的悬浮液。通过过滤或离心分离固体的尝试失败。为了确定贝西沙星在混悬制剂中的晶相，在真空烘箱中于RT下干燥约5克悬浮液。从多个批(ISV批次J04Q、E06Q、965701、E04Q和D05Q)中取样以评价批次间一致性。干燥后，在研钵中碾碎材料并通过XRPD分析。通过将5-20％w/w贝西沙星HCl盐掺入干燥的无效对照剂(批次AAP-020)，研究此方法对固体贝西沙星HCl的灵敏度。通过XRPD分析这些混合物以确定可检测到的贝西沙星HCl的最低浓度。
结果
溶解度
贝西沙星HCl盐和游离碱(批次2325-293)的溶解度示于表1中。从平衡的样品分离过量的固体并通过XRPD分析。在有机溶剂中，未观察到形式转化。但是，在水性pH溶解度样品中，过量的贝西沙星HCl固体在pH＞3.5-4.0的条件下转化成不同的晶相。正如下文(XRPD部分)中所述，这种相鉴定为晶体贝西沙星游离碱。
贝西沙星是含有羧酸和伯胺的可离子化的化合物，并且这两种可离子化基团都促成水性介质中观察到的溶解度行为。表2中列出作为pH函数的溶解度值。将此数据适当地拟合入Henderson-Hasselbach方程。为了达到最佳拟合，将羧酸和伯铵基团的pKa值分别估算为5.65和9.91，固有溶解度(So)估算为0.074mg/mL。实验数据和拟合曲线示于图2中。如图2中所示，在整个5.5-9的pH范围中，分子的溶解度相对恒定(约0.1mg/mL)，其中羧酸和伯胺官能团均被离子化。因此，贝西沙星的“游离碱”实际上是从得自贝西沙星HCl中的羧酸去质子化的溶解性差的两性离子沉淀的固体。羧酸的去离子化变得足够显著以使贝西沙星游离碱在pH超出约3.5的水溶液中主导溶解度平衡。在酸性pH(pH＜5)和碱性pH(pH＞9)下，随着羧酸或伯胺的pKa附近的范围中的pH变化，贝西沙星游离碱的溶解度随双重带电但呈中性的两性离子与单重离子化物质的平衡而增大。
贝西沙星HCl的吸湿分析：
贝西沙星HCl批次050956330和贝西沙星游离碱批次2325-288的吸湿数据分别示于图3和4中。贝西沙星HCl不是吸湿的。贝西沙星游离碱在所有RH条件下吸收水分，并且在90％RH下高达5％w/w。
贝西沙星HCl和贝西沙星游离碱的热分析：
贝西沙星HCl(批次051157469)典型样品的示差扫描量热法(DSC)结果示于图5中。该图显示对应于熔融的吸热，并且外推的起始温度为315.7℃。因为熔融吸热被突发的不规则放热/吸热所中断，这看起来是由于伴随的熔融相分解，所以不能测定峰熔融温度和熔融热的积分值。
如图3中所示，对于HCl形式，敞口锅中的TGA显示熔融前的显著重量损失。正如预期的，不存在与溶剂化或水合的固体相关的突发性重量损失事件的证据。高于熔融温度下发生的质量损失与伴随有分解的熔融的推定一致。低于熔融温度下的质量损失可能与脱氯化氢化相关。
从pH-溶解度实验(批次2325-282)分离晶体贝西沙星游离碱，并通过DSC进行分析。如图6中所示，该材料的峰熔融温度为288.1℃，并且外推的起始熔融温度为279.0℃。在高于峰熔融温度的温度下发生额外的热事件，大概是因为热分解。由于不能分辨这种热事件与熔融转变，因此熔融热的积分是可变的。示于图6中的热重数据显示熔融前在运行(run)之间的0.3％-0.6％变化的少量重量损失。就大小和起始温度而言，这种重量损失谱(profile)对吸收的水更加典型，而对与化学计量水合物相关的重量损失的类型并非典型。
X-射线粉末衍射分析(“XRPD”)
对于贝西沙星HCl(批次051154769)和贝西沙星游离碱(批次2325-293)，观察到独特的XRPD图样。这些样品中的每一个的峰列表示于图7和8中。它们衍射图样的叠加示于图9中。
对于贝西沙星HCl，在甲醇、乙醇、乙腈、异丙醇和水中平衡的过量固体的XRPD图样示于图10中，而来自贝西沙星眼用混悬剂(0.6％)的固体的贝西沙星游离碱XRPD示于图11中。
批次965701、J04Q、E04Q、E06Q和D05Q的贝西沙星眼用混悬剂(0.6％)的XRPD分析一致地显示了对应于贝西沙星游离碱的衍射峰，并且不存在可检测的来自贝西沙星HCl的峰。衍射图样示于图12中。在分析时，这些批次的出厂龄(age)为17-25个月，这总结于表3中。这些信息表明对于药品出厂龄，游离碱形式在药品中是稳定的。
如图13中所示，XRPD证实在无效对照剂中检测到5-10％w/w的总贝西沙星HCl盐。基于这种灵敏度，不大于25-50％的总贝西沙星可作为固体盐酸盐存在于产品中。在pH 6.5下，任何固体HCl盐不大可能存在于制剂中，其中盐是可溶的，但是固体游离碱的溶解度远低于该制剂的标称w/w浓度。在pH溶解度实验中，在中性至碱性pH下观察到HCl盐快速转化成游离碱。因此，基于产品的这些XRPD分析和观察到的贝西沙星HCl盐在中性pH下的水性行为，游离碱可能是贝西沙星眼用混悬剂中固体药物的主要形式。
结论
对于贝西沙星HCl盐，用于制备贝西沙星HCl眼用混悬剂的起始API形式，已观察到晶形。观察到HCl盐在水性介质(pH＞4)中溶解并以不同的晶形沉淀。这种新形式鉴定为晶体贝西沙星游离碱。光谱学研究表明，固体贝西沙星游离碱含有作为基本分子组分的两性离子型贝西沙星。对于贝西沙星的固体游离碱和HCl盐均鉴定出独特的XRPD图样。虽然这些形式具有通过DSC检测的独特熔融温度，但是熔融看起来导致快速分解。根据TGA，没有存在贝西沙星游离碱水合形式的证据。
贝西沙星HCl盐略溶于水，微溶于甲醇和乙醇，不溶于乙腈和异丙醇。该化合物具有两个可离子化的官能团，即羧酸和伯胺。由于这些官能团的离子化状态，在pH 5.5-9.0下主要是两性离子，并且该两性离子是极微溶的(～0.1mg/mL)。在pH＞9和pH＜5时，贝西沙星的溶解度作为pH的函数增加至最大～10mg/mL(pH 3)。通过将pH-溶解度曲线拟合入Henderson-Hasselbach方程，两性离子的固有溶解度确定为0.074mg/mL，并且羧酸和伯胺基团的pKa分别估计为5.65和9.91。
基于药品的XRPD分析，固体悬浮颗粒是贝西沙星游离碱，而不是贝西沙星HCl。这种观察与pH 6.5(产品pH)溶液中的溶解度行为一致，其中贝西沙星的游离碱在水性介质中的溶解度为约0.1mg/mL，该值远低于贝西沙星眼用混悬剂中的标称浓度6mg/mL。在混悬剂生产期间，固体HCl盐看起来转化成游离碱形式。这些研究表明贝西沙星的固体游离碱是贝西沙星眼用混悬剂(0.6％)中的主要药物相。
表1：贝西沙星HCl盐(批次051157469)和游离碱(批次2325-288)于22℃±2℃下在各种溶剂中的溶解度
  溶剂   HCl盐溶解度**(mg/mL)  USP定义   游离碱溶解度**(mg/mL)  USP定义
  水*   10.635   略溶   0.079   不溶
  甲醇   9.898   微溶   0.135   极微溶
  乙醇   1.122   微溶   0.033   不溶
  乙腈   0.012   不溶   0.005   不溶
  异丙醇   0.089   不溶   0.004   不溶
*观察到贝西沙星HCl盐在水中的饱和溶液的pH为3.6，游离碱形式为8.1
**游离碱的溶解度
表2：22℃±2℃下在水中平衡的贝西沙星HCl盐
(批次050956330)的pH-依赖性溶解度
  pH   mg/mL
  3.54   10.63
  3.58   10.19
  3.72   10.29
  3.95   4.18
  4.58   0.71
  4.87   0.59
  5.15   0.24
  5.17   0.27
  5.43   0.22
  5.95   0.12
  6.31   0.10
  6.45   0.10
  6.49   0.08
  6.72   0.08
  8.14   0.08
  9.11   0.08
  9.59   0.10
  9.63   0.10
  10.37   0.27
  10.85   0.85
表3：测试药品中的药物形式时贝西沙星眼用混悬剂(0.6％)的出厂龄
  批次   生产日期   XRPD分析时的出厂龄(月)   药品中鉴定的形式*
  D05Q   4/2004   25   游离碱
  E04Q   5/2004   24   游离碱
  E06Q   5/2004   24   游离碱
  J04Q   9/2004   20   游离碱
  批次965701   12/2005   17   游离碱
*XRPD图样示于图12中
已研究贝西沙星HCl是否可以以多于1种的晶形存在。根据晶形筛查研究、生产贝西沙星HCl的化学方法和贝西沙星药品的生产方法，已观察到贝西沙星HCl的晶形和贝西沙星游离碱的晶形。发现这两种晶形具有独特的x-射线衍射图样，由图1可见。
将微粉化的贝西沙星HCl用作药品生产的原料。在生产过程中，HCl盐转化成贝西沙星游离碱。在pH约6.5的产品溶液中，贝西沙星游离碱是有利的形式。由测试干燥的药品得到的粉末X-射线衍射表明，缺少HCl盐的衍射峰，并且存在游离碱的特征性衍射峰。
实验
样品
用玛瑙研钵和杵温和地碾磨贝西沙星HCl和游离碱样品以确保每个样品相似的API粒度并避免优选的取向。将样品粉末置于矩形“零本底”样品容器中的样品孔的中心附近。为了获得适当高度的平滑粉末床，将粉末铺展在孔的中心上，然后用称量纸包覆的载玻片向下挤压。
粉末X-射线衍射
使用Rigaku MiniFlex台式x-射线衍射仪(系列#CD016610)采集粉末X-射线衍射图样。MiniFlex具有垂直取向的测角仪(150mm半径)和铜密封的x-射线管，其在30kV/15mA下以6°出射角操作。仪器使用可变的(θ补偿)发散狭缝系统和镍Kβ.滤波器(filter)。闪烁计数器用作检测器。Materials Data，Inc.的Jade 7.5版软件用于评价图样和产生图。
在2-40°的2θ范围内以1.5°度/分钟和0.05°/步的步长，或者在7-23°的2θ范围内以0.5°度/分钟和0.03°/步的步长扫描样品。通过将每个批次的衍射图样与贝西沙星HCl参照标准品和贝西沙星游离碱的衍射图样对比，定性地确定Neuland生产的批次的物理形式。
通过在28-29°的2θ范围内以1.0°度/分钟和0.02°/步的步长每日测定硅标准品，检查MiniFlex x-射线衍射仪的系统适合性。当硅标准品的d111衍射的最高值测定为28.44±0.02°的2θ时，达到系统适合性。
样品制备
用玛瑙研钵和杵温和地碾磨贝西沙星HCl和游离碱样品以确保每个样品相似的API粒度并避免优选的取向。将样品粉末置于矩形“零本底”样品容器中的样品孔的中心附近。为了获得适当高度的平滑粉末床，将粉末铺展在孔的中心上，然后用称量纸包覆的载玻片向下挤压。
结果
第一实验室生产的贝西沙星HCl、第二实验室生产的贝西沙星HCl参照标准品和Bausch & Lomb生产的贝西沙星游离碱的X-射线衍射图样示于图14和26-29中。第一实验室批次R&D/BL/07/001、BL8/R&D/07/001批次1和BL8/R&D/07/001批次2中的主衍射峰与Bausch & Lomb贝西沙星HCl参照标准品(批次14104J)中的主衍射峰匹配，这证实第一实验室批次与贝西沙星HCl参照标准品是相同的晶形。第一实验室生产的批次的x-射线衍射图样还与来自第二实验室的所有其他贝西沙星HCl批次的x-射线衍射图样匹配良好(图15和30-33)。
将三个第一实验室批次与贝西沙星HCl参照标准品的x-射线衍射图样比较，观察到在约10.3°的2θ的极小峰的小差异(图16)。该小衍射峰看起来还存在于第二实验室生产的一些批次中(图15和17)。将贝西沙星游离碱掺加入第一实验室生产的贝西沙星HCl(BL8/R&D/07/001批次2)的样品中以确定在10.3°的2θ的衍射峰是否会随粉末的游离碱含量升高而强度增强。图18表示来自该第一掺加研究的样品的x-射线衍射图样。增加掺加研究样品中的贝西沙星游离碱的水平使在10.3°(d＝8.6)、12.0°(d＝7.4)和21.2°的2θ(d＝21.2)的衍射峰强度增强。因此，在10.3°的2θ的小衍射峰证实为存在贝西沙星游离碱的指示。将贝西沙星游离碱掺加入贝西沙星HCl参照标准品中进行第二掺加研究。图19表示第二掺加研究样品的x-射线衍射图样。“原样”贝西沙星参照标准品没有显示出在10.3°的2θ的可检测衍射峰。在将5％的少量贝西沙星游离碱加入贝西沙星HCl参照标准品中后，可检测到在10.3°的2θ的小峰。仅使用来自第二研究的两个掺加水平(5％和10％游离碱)，并且假定贝西沙星HCl参照标准品和贝西沙星游离碱是纯的，粗略估算三个第一实验室批次中的游离碱的量。表4总结第二掺加研究结果，并且提供粗略估算的第一实验室微粉化贝西沙星HCl批次中的游离碱含量。使用在10.2-10.3°的2θ的衍射峰的峰高，估计第一实验室生产的微粉化批次BL8/R&D/07/001批次1和BL8/R&D/07/001批次2含有5-9％贝西沙星游离碱。在第二实验室生产的批次中，仅未粉碎的批#10含有可检测的游离碱。但是，第二实验室微粉化批次05126J、03063J和01085J都显示出在10.3°的2θ范围内的小基线标志(blip)，这可能表明这些批次含有一些贝西沙星游离碱，但是可能≤5％。
表4.掺加研究#2的结果：掺加入贝西沙星HCl中的游离碱
NA＝不适用
在另一方面，本发明提供药物组合物，其包含贝西沙星((R)-(+)-7-(3-氨基-2，3，4，5，6，7-六氢-1H-氮杂-1-基)-8-氯-1-环丙基-6-氟-1，4-二氢-4-氧代喹啉-3-羧酸)的分子晶体，所述分子晶体的特征在于X-射线粉末衍射(“XRPD”)光谱包含在2θ角10.6、15、19.7、21.1和22°±0.2°的峰。
在另一方面，本发明提供药物组合物，其包含(R)-(+)-7-(3-氨基-2，3，4，5，6，7-六氢-1H-氮杂-1-基)-8-氯-1-环丙基-6-氟-1，4-二氢-4-氧代喹啉-3-羧酸的分子晶体，所述分子晶体的特征在于DSC(示差扫描量热法)熔融峰在288℃。
在另一方面，本发明提供药物组合物，其包含(R)-(+)-7-(3-氨基-2，3，4，5，6，7-六氢-1H-氮杂-1-基)-8-氯-1-环丙基-6-氟-1，4-二氢-4-氧代喹啉-3-羧酸的分子晶体，所述分子晶体的特征在于13C NMR光谱具有在23.3、27.7、41.1、54.5、116.6和153.5ppm的峰。
在另一方面，本发明提供药物组合物，其包含(R)-(+)-7-(3-氨基-2，3，4，5，6，7-六氢-1H-氮杂-1-基)-8-氯-1-环丙基-6-氟-1，4-二氢-4-氧代喹啉-3-羧酸的分子晶体，所述分子晶体的特征在于pKa值为5.65和9.91。
在另一方面，本发明提供药物组合物，其包含(R)-(+)-7-(3-氨基-2，3，4，5，6，7-六氢-1H-氮杂-1-基)-8-氯-1-环丙基-6-氟-1，4-二氢-4-氧代喹啉-3-羧酸的分子晶形，所述分子晶形的特征在于X-射线粉末衍射(“XRPD”)光谱包含在2θ角10.6、15、19.7、21.1和22°±0.2°的峰；或者DSC熔融峰在288℃；或者13C NMR光谱具有在23.3、27.7、41.1、54.5、116.6和153.5ppm的峰；或者pKa值为5.65和9.91。
在另一方面，本发明提供药物组合物，其包含(R)-(+)-7-(3-氨基-2，3，4，5，6，7-六氢-1H-氮杂-1-基)-8-氯-1-环丙基-6-氟-1，4-二氢-4-氧代喹啉-3-羧酸的分子晶形，所述分子晶形的特征在于X-射线粉末衍射(“XRPD”)光谱包含在2θ角10.6、15、19.7、21.1和22°±0.2°的峰；DSC熔融峰在288℃；并且13C NMR光谱具有在23.3、27.7、41.1、54.5、116.6和153.5ppm的峰。
在另一方面，本发明提供药物组合物，其包含(R)-(+)-7-(3-氨基-2，3，4，5，6，7-六氢-1H-氮杂-1-基)-8-氯-1-环丙基-6-氟-1，4-二氢-4-氧代喹啉-3-羧酸的分子晶形，所述分子晶形的特征在于X-射线粉末衍射(“XRPD”)光谱包含在2θ角10.6、15、19.7、21.1和22°±0.2°的峰；DSC熔融峰在288℃；13C NMR光谱具有在23.3、27.7、41.1、54.5、116.6和153.5ppm的峰；并且pKa值为5.65和9.91。
通过向个体给予本发明的药物组合物，这样的组合物可用来治疗感染，例如细菌感染。
这样的药物组合物可适应于通过适当的途径给药，例如通过口服(包括面颊或舌下)、直肠、鼻、局部(包括面颊、舌下或透皮)、阴道或胃肠外(包括皮下、肌肉内、静脉内或皮内)途径。这样的组合物可通过药学领域中已知的任何方法制备，例如使贝西沙星(或者其盐或酯)与载体或赋形剂混合。
适用于口服给药的药物组合物可作为分离的单元存在，例如胶囊或片剂；散剂或颗粒剂；水性或非水性液体中的溶液或混悬剂；可食用的泡沫或糊(whip)；或者水包油液体乳剂或油包水液体乳剂。
适用于透皮给药的药物组合物可作为意图持久地与接受者的表皮保持紧密接触的分离贴剂存在。例如，可按照Pharmaceutical Research，3(6)，318(1986)中的概述通过离子电渗疗法从贴剂递送活性成分。
适用于局部给药的药物组合物可配制成软膏剂、乳膏、混悬剂、洗剂、散剂、溶液、糊剂、凝胶、喷剂、气雾剂或油。
为了治疗眼或其他外部组织如皮肤，组合物在适当时可作为局部用的溶液、混悬剂、乳剂、分散剂、软膏剂或乳膏施用。当配制成软膏剂时，活性成分可与石蜡或水溶混性软膏基质一起使用。或者，活性成分可与水包油乳膏基质或油包水基质一起配制成乳膏。
适用于对眼局部给药的药物组合物包括滴眼剂，其中活性成分溶于或混悬于适合的载体，特别是水性溶剂中。
适用于口中局部给药的药物组合物包括锭剂、软锭剂和漱口剂。
适用于直肠给药的药物组合物可作为栓剂或灌肠剂存在。
适用于鼻给药的药物组合物，其中载体为包含粒度为例如10-500微米的粗粉的固体，其以吸入的形式给药，即从接近鼻子的散剂容器中通过鼻道快速吸入。适用于作为鼻喷剂或滴鼻剂给药且其中载体是液体的组合物包含活性成分的水性或油性溶液。
适用于通过吸入给药的药物组合物包含细粒粉末或喷雾，其可利用各种定量加压的雾化器、喷雾器或吹入器产生。
适用于阴道给药的药物组合物可作为阴道栓剂、卫生棉塞、乳膏、凝胶、糊剂、泡沫或喷雾组合物存在。
适用于胃肠外给药的药物组合物包括水性和非水性无菌注射溶液，其可含有抗氧化剂、缓冲剂、抑菌剂及使所述组合物与预期的接受者的血液等渗压的溶质；以及水性和非水性无菌混悬剂，其可包含悬浮剂和增稠剂。组合物可在单次剂量或多次剂量容器如密封安瓿和小瓶中提供，并且可在冷冻干燥(冻干)的条件下储藏，仅需在使用前即刻加入无菌液体载体如注射用水。临时注射溶液和混悬剂可由无菌散剂、颗粒剂和片剂配制。
优选的单位剂量组合物是含有上文所述的日剂量或分剂量或其适当分数的活性成分的组合物。
在一实施方案中，这样的药物组合物包含水性载体。
在另一实施方案中，这样的药物组合物包含有机载体，例如疏水或亲水有机材料。
适合的浓度为总组合物的约0.001重量％-约10重量％(或约0.01重量％-约5重量％，或约0.01重量％-约2重量％，或约0.01重量％-约1重量％，或约0.001重量％-约1重量％，或约0.05重量％-约1重量％，或约0.05重量％-约2重量％，或约0.1重量％-约0.5重量％，约0.5重量％-约1重量％，约1重量％-约2重量％)，并且被认为足以提供抗感染的治疗价值，例如由革兰氏阳性、革兰氏阴性细菌或这二者引起的细菌性感染。
在一实施方案中，本发明的组合物是混悬剂或分散剂的形式。在另一实施方案中，混悬剂或分散剂基于水溶液。例如，本发明的组合物可包含悬浮或分散于无菌盐水溶液中的活性成分的微米或纳米大小的颗粒。在另一实施方案中，混悬剂或分散剂基于疏水介质。例如，活性成分(或者其盐或酯)的微米或纳米大小(例如约0.1-约10μm)的颗粒可悬浮于疏水溶剂如硅油、矿物油或任何其他适合的非水性介质中用于递送至眼。在又一实施方案中，活性成分(或者其盐或酯)的微米或纳米大小的颗粒可用生理学可接受的表面活性剂(以下公开的非限制性实例)包衣，然后将包衣的颗粒分散于液体介质中。包衣可使颗粒保持在混悬剂中。可以选择此类液体介质以制备缓释混悬剂。例如，液体介质可以是略溶于要给予混悬剂的眼环境中的液体介质。在又一实施方案中，活性成分(或者其盐或酯)悬浮或分散于疏水介质如油中。在又一实施方案中，这样的介质包含疏水材料和水的乳液。在又一实施方案中，本文公开的不溶性活性成分(或者其盐或酯)可通过任何常规的药物递送媒介物给药，其包括但不限于在脂质体组合物中(脂质体壁内部和外部或者严格地脂质体中心的外部)，在乳剂或微乳剂的连续相中，在乳剂的油相中，或者在使用带电或不带电的表面活性剂的胶束溶液中的混悬剂。优选胶束乳溶液，其中表面活性剂是胶束形成剂和本文公开的活性成分(或者其盐或酯)的阴离子。
在另一方面，本发明的组合物还可包含非离子型表面活性剂，例如聚山梨酯(例如，聚山梨酯80(聚氧乙烯山梨醇酐单油酸酯)、聚山梨酯60(聚氧乙烯山梨醇酐单硬脂酸酯)、聚山梨酯20(聚氧乙烯山梨醇酐单月桂酸酯)，以它们的商标名Tween80、Tween60、Tween20公知)、泊洛沙姆(环氧乙烷和环氧丙烷的合成嵌段聚合物，例如以它们的商标名Pluronic公知的那些；例如PluronicF127或PluronicF108)，或者泊洛沙胺(与乙二胺相连的环氧乙烷和环氧丙烷的合成嵌段聚合物，例如以它们的商标名Tetronic公知的那些；例如Tetronic1508或Tetronic908等)，其他非离子型表面活性剂例如Brij、Myrj和具有约12或更多个碳原子(例如约12-约24个碳原子)的碳链的长链脂肪醇(即油醇、硬脂醇、肉豆蔻醇、二十二碳六烯醇(docosohexanoyl alcohol)等)。这样的化合物描述于Martindale，34th ed.，pp.1411-1416(Martindale，“The Complete Drug Reference，”S.C.Sweetman(Ed.)，Pharmaceutical Press，London，2005)和Remington，“TheScience and Practice of Pharmacy，”21st Ed.，p.291及第22章的内容，Lippincott Williams & Wilkins，New York，2006)。当存在时，非离子型表面活性剂在本发明的组合物中的浓度可以为约0.001重量％-约5重量％(或者约0.01重量％-约4重量％，或约0.01重量％-约2重量％，或约0.01重量％-约1重量％，或约0.01重量％-约0.5重量％)。任何这些表面活性剂还可用来包覆上文公开的微米或纳米大小的颗粒。
此外，本发明的组合物可包含添加剂，例如缓冲剂、稀释剂、载体、佐剂或其他赋形剂。可使用适合施用于眼的任何药理学可接受的缓冲剂。为了各种用途，其他试剂可用于组合物中。可使用例如缓冲剂、防腐剂、共溶剂、油、保湿剂、软化剂、稳定剂或抗氧化剂。
可使用的水溶性防腐剂包括亚硫酸氢钠、硫酸氢钠、硫代硫酸钠、苯扎氯铵、氯丁醇、硫柳汞、乙醇、对羟基苯甲酸甲酯、聚乙烯醇、苄醇、苯基乙醇、过氧化物(例如过氧化氢、过氧化氢脲或者产生过氧化物化合物的来源例如过硼酸盐)、双胍化合物和季铵化合物(例如聚季铵盐(polyquat)-1、聚季铵盐-10等)。这些试剂可各自以约0.001重量％-约5重量％(优选约0.01重量％-约2重量％)的量存在。
可使用的适合的水溶性缓冲剂是美国食品药品管理局(“US FDA”)认可用于期望给药途径的碳酸钠、硼酸钠、磷酸钠、乙酸钠、碳酸氢钠等。这些试剂可以为足以使系统的pH保持约5-约8的量。因此，缓冲剂可以占总组合物的约5重量％。组合物还可包含电解质，例如但不限于氯化钠和氯化钾。生理学可接受的缓冲剂包括但不限于，磷酸盐缓冲剂或Tris-HCl缓冲剂(包含三(羟甲基)氨基甲烷和HCl)。例如，pH为7.4的Tris-HCl缓冲剂包含3g/l的三(羟甲基)氨基甲烷和0.76g/l的HCl。在另一方面，缓冲剂是10X磷酸缓冲盐水(“PBS”)或5X PBS溶液。
在一些情况中，其他缓冲剂也可以是适合或期望的，例如基于以下物质的缓冲剂：HEPES(N-{2-羟乙基}哌嗪-N’-{2-乙磺酸})，其在25℃下pKa为7.5并且pH的范围是约6.8-8.2；BES(N，N-双{2-羟乙基}2-氨基乙磺酸)，其在25℃下pKa为7.1并且pH范围是约6.4-7.8；MOPS(3-{N-吗啉代}丙磺酸)，其在25℃下pKa为7.2并且pH范围是约6.5-7.9；TES(N-三{羟甲基}-甲基-2-氨基乙磺酸)，其在25℃下pKa为7.4并且pH范围是约6.8-8.2；MOBS(4-{N-吗啉代}丁磺酸)，其在25℃下pKa为7.6并且pH范围是约6.9-8.3；DIPSO(3-(N，N-双{2-羟乙基}氨基)-2-羟基丙烷))，其在25℃下pKa为7.52并且pH范围是约7-8.2；TAPSO(2-羟基-3{三(羟甲基)甲基氨基}-1-丙磺酸))，其在25℃下pKa为7.61并且pH范围是约7-8.2；TAPS({(2-羟基-1，1-双(羟甲基)乙基)氨基}-1-丙磺酸))，其在25℃下pKa为8.4并且pH范围是约7.7-9.1；TABS(N-三(羟甲基)甲基-4-氨基丁磺酸)，其在25℃下pKa为8.9并且pH范围是约8.2-9.6；AMPSO(N-(1，1-二甲基-2-羟乙基)-3-氨基-2-羟基丙磺酸))，其在25℃下pKa为9.0并且pH范围是约8.3-9.7；CHES(2-环己基氨基)乙磺酸)，其在25℃下pKa为9.5并且pH范围是约8.6-10.0；CAPSO(3-(环己基氨基)-2-羟基-1-丙磺酸)，其在25℃下pKa为9.6并且pH范围是约8.9-10.3；或者CAPS(3-(环己基氨基)-1-丙磺酸)，其在25℃下pKa为10.4并且pH范围是约9.7-11.1。
在一方面，组合物的pH适合于向个体给药；例如使所述组合物不具有刺激性。例如，对于局部眼给药，期望的pH为约5-约8(或者约6-约7，或者约6.4-约6.8)。
在一方面，组合物的pH为约7。或者，组合物的pH为约7-约7.5。
在另一方面，组合物的pH为约7.4。
在另一方面，组合物还可包含调节粘度的化合物以促进所述组合物给药入个体中或者提高在个体中的生物利用度。在另一方面，可选择调节粘度的化合物从而在将组合物给药入眼环境(例如眼表面、结膜或玻璃体)后其不易分散。这样的化合物可提高组合物的粘度，并且包括但不限于：单体多元醇，例如丙三醇、丙二醇、乙二醇；聚合多元醇，例如聚乙二醇；纤维素家族的各种聚合物，例如羟丙基甲基纤维素(“HPMC”)、羧甲基纤维素(“CMC”)钠、羧丙基纤维素(“HPC”)；多糖，例如透明质酸及其盐、硫酸软骨素及其盐、葡聚糖例如葡聚糖70；水溶性蛋白，例如明胶；乙烯基聚合物，例如聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、聚维酮；卡波姆，例如卡波姆934P、卡波姆941、卡波姆940或卡波姆974P；以及丙烯酸聚合物。一般，期望的粘度可以为约1-约400厘泊(“cp“或mPa.s)。
在另一方面，本发明提供制备包含贝西沙星(或者其盐或酯)的组合物的方法，所述方法包括：(a)提供所述贝西沙星(或者其盐或酯)；和(b)将一定量的所述贝西沙星(或者其盐或酯)分散于足量的所述介质中以制备所述组合物从而实现所述贝西沙星(或者其盐或酯)在所述介质中的预定浓度。或者，在所述贝西沙星(或者其盐或酯)与所述介质接触后，部分贝西沙星(或者其盐或酯)在固相中保留比2天、或1周、或1个月、或2个月、或3个月、或4个月、或5个月、或6个月、或1年、或2年更长的时间段。在一实施方案中，所述方法可任选地包括在将贝西沙星(或者其盐或酯)分散于介质中之前降低所述贝西沙星(或者其盐或酯)的大小的步骤。
在另一方面，本发明提供制备贝西沙星的分子晶体的方法。所述方法包括：(a)将期望量的贝西沙星的可溶性盐溶于溶剂(例如水)中以形成溶液；(b)将所述溶液的pH调至约6.2-约6.8的范围中的值；以及(c)允许足够的时间以形成所述贝西沙星的分子晶体。所述方法还可以包括经或未经进一步干燥贝西沙星的分子晶体而回收所述分子晶体。所述方法还可以包括将回收的分子晶体的大小降至纳米或微米大小颗粒的步骤。
在以下实施例中公开本发明的一些组合物。应理解可针对具体情况调整所列成分的比例。
实施例1
表5
  成分   量
  卡波普934PNF   1g
  丙二醇   5g
  EDTA   0.1mg
  贝西沙星微粒   0.6g
  纯净水   补齐(q.s.)至100g
将适当比例的EDTA(如表5中所示)加入配有搅拌装置的不锈钢夹套容器中的纯净水中。加入适量的卡波普934P NF，在5-10分钟内形成基本上均匀的分散体。将丙二醇加入所得混合物同时混合3-10分钟。然后，将可预先微粉化的适量贝西沙星在3-5分钟内加入容器的内容物中，同时继续混合直至化合物基本上被分散。使用1N NaOH将混合物的pH调至6.4-6.7。使用例如加热或辐射将最终组合物灭菌，然后包装在适当的容器中。
实施例2
使用与实施例1中所述相似的方法制备含有表6中所列成分的本发明的组合物。
表6
  成分  量(重量％，除了指出“ppm”之外)
  聚维酮   1.5
  HAP(30％)   0.05
  丙三醇   3
  丙二醇   3
  贝西沙星微粒   0.7
  阿来西定2HCl   1-2ppm
  纯净水   补齐至100
注释：“HAP”表示羟烷基膦酸酯，例如已知商标名为Dequest的那些。
HAP可用作螯合剂，并且据证实抑制细菌和真菌细胞复制。
实施例3
使用与实施例1中所述相似的方法制备含有表7中所列成分的本发明的组合物。
表7
  成分  量(重量％，除了指出“ppm”之外)
  丙三醇   3
  丙二醇   3
  贝西沙星微粒   0.4
  聚季铵盐-1   1-10ppm
  向日葵油   补齐至100
实施例4
使用修改的实施例1中所述方法制备含有表8中所列成分的本发明的组合物。
将适当比例的聚山梨酯80(如图26中所示)加入配有搅拌装置的不锈钢夹套容器中的约20％的期望最终体积的纯净水中。然后将丙三醇和丙二醇加入混合物中同时再继续混合5分钟。向加热至约80℃并配有搅拌装置且含有约70％的期望最终体积的纯净水的灭菌第二容器中，在3-5分钟内加入适量的CMC-MV，同时继续混合直至CMC形成基本上均匀的溶液。将第二容器的内容物冷却至约室温，然后将第一容器的内容物转移至第二容器中。将剩余期望体积的纯净水加入第二容器中。然后，将适量的贝西沙星和第二抗感染药(如环丙沙星)在3-5分钟内加入第二容器的内容物中，同时继续混合直至药物基本上均匀地分散。使用1N NaOH将混合物的pH调至6.5-6.7。使用例如加热或辐射将最终组合物灭菌，并包装在适当的容器中。
表8
实施例5
使用与实施例1相似的方法制备含有表9中所列成分的组合物。
表9
实施例6
使用与实施例4相似的方法制备含有表10中所列成分的组合物。
表10
  成分  量(重量％，除了指出“ppm”之外)
  CMC(MV)   0.5
  丙三醇   3
  丙二醇   3
  贝西沙星微粒   0.75
  莫西沙星微粒   0.25
  泰洛沙泊(表面活性剂)   0.25
  阿来西定2HCl   1-2ppm
  纯净水   补齐至100
实施例7
使用与实施例1相似的方法制备含有表11中所列成分的组合物。
表11
  成分  量(重量％，除了指出“ppm”之外)
  HPMC   0.5
  丙三醇   3
  丙二醇   3
  贝西沙星微粒   0.5
  加替沙星微粒   0.2
  阿奇霉素微粒   0.2
  泰洛沙泊(表面活性剂)   0.25
  苯扎氯铵   100ppm
  纯净水   补齐至100
或者，纯净水可由油如鱼肝油、花生油、芝麻油、椰子油、向日葵油、玉米油或橄榄油替代来制备包含贝西沙星分子晶体的基于油的组合物。
虽然上文中已描述本发明的具体实施方案，但本领域技术人员应理解在不脱离所附权利要求书中限定的本发明的精神和范围的情况下可进行许多等效方案、修改、替换和改变。

Claims (7)

1.(R)-(+)-7-(3-氨基-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-氮杂-1-基)-8-氯-1-环丙基-6-氟-1,4-二氢-4-氧代喹啉-3-羧酸的分子晶形，其特征在于该分子晶形的X-射线粉末衍射光谱包含在2θ角10.6、12.2、13.8、15、15.9、16.7、17.9、19.1、19.7、21.1、22、23.2、23.9、24.7、25.5、25.9、27.4、28.2、29.6、31.8、32.4、34.2和35.1°±0.2°的峰，其中所述X-射线粉末衍射光谱是通过Rigaku MiniFlex X-射线衍射仪，使用以30kV/15mA操作的铜密封的X-射线管获得的，并且其中在2-40°的2θ范围内以1.5°/分钟和0.05°/步的步长扫描所述分子晶体的样品。
2.如权利要求1所述的分子晶形，其特征还在于该分子晶形的示差扫描量热法熔融峰在288℃，其中所述示差扫描量热法扫描通过Perkin-ElmerPyris7示差扫描量热法获得，并且其中从50℃至340℃以20℃/分钟扫描所述分子晶体的样品。
3.药物组合物，其包含如权利要求1或2所述的氧代喹啉羧酸的分子晶形。
4.配制为药物组合物的权利要求1或2所述的氧代喹啉羧酸的分子晶形在制备用于治疗个体的细菌感染的药物中的用途。
5.制备化学名称为(R)-(+)-7-(3-氨基-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-氮杂-1-基)-8-氯-1-环丙基-6-氟-1,4-二氢-4-氧代喹啉-3-羧酸的贝西沙星的分子晶体的方法，其包括：
(a)将期望量的贝西沙星的可溶性盐溶于水中以形成溶液；
(b)将所述溶液的pH调至6.2-6.8的范围中的值；以及
(c)允许足够的时间以形成所述贝西沙星的分子晶体，所述分子晶体的特征在于其X-射线粉末衍射光谱包含在2θ角10.6、12.2、13.8、15、15.9、16.7、17.9、19.1、19.7、21.1、22、23.2、23.9、24.7、25.5、25.9、27.4、28.2、29.6、31.8、32.4、34.2和35.1°±0.2°的峰，其中所述X-射线粉末衍射光谱是通过Rigaku MiniFlex X-射线衍射仪，使用以30kV/15mA操作的铜密封的X-射线管获得的，并且其中在2-40°的2θ范围内以1.5°/分钟和0.05°/步的步长扫描所述分子晶体的样品。
6.如权利要求5所述的方法，其还包括回收所述贝西沙星的分子晶体。
7.如权利要求6所述的方法，其还包括将回收的分子晶体的大小降至纳米或微米大小颗粒的步骤。
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