CN102369018B - 糖尿病和代谢综合征的治疗 - Google Patents

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Abstract

经肠施用的除胰淀素(amylin)外的降钙素家族成员(尤其是降钙素本身)有效治疗I型糖尿病、II型糖尿病或代谢综合征，减轻胰岛素抵抗以及降低血清葡萄糖水平。

Description

糖尿病和代谢综合征的治疗
本发明涉及用于治疗糖尿病(I型和II型)和代谢综合征的材料和方法。
全世界大约有2.5亿糖尿病患者，预计该数字在未来二十年将翻倍。超过90％的该人群患有2型糖尿病(T2DM，type2diabetesmellitus)。据估计，对患有T2DM的或处于显性T2DM前的阶段的人，目前仅诊断出其中的50-60％。
T2DM是异质性(heterogeneous)疾病，其特征为糖和脂肪代谢异常。T2DM的病因是多因素的，包括影响β-细胞功能和组织(例如肌肉、肝、胰和脂肪组织)中胰岛素敏感性的遗传和环境要素两者。因此，观察到胰岛素分泌的减少，并伴有进展性的β-细胞功能降低和慢性胰岛素抵抗。胰内分泌无力补偿外周胰岛素抵抗导致了高葡萄糖血症和临床上糖尿病的发病。目前认为，组织对胰岛素介导的葡萄糖摄取的抵抗是T2DM的主要病理生理决定因素。
最佳T2DM干预的成功标准是血液葡萄糖水平的降低，其可以是血液葡萄糖水平的长期降低和耐受食物摄入后高血液葡萄糖水平的能力提高两者，它们由较低的葡萄糖水平峰值和较快的清除来描述。在这两种情况下，对β-细胞胰岛素输出与功能的压力都较小。
控制T2DM的一种方法是使用肠促胰岛素激素(incretinhormone)、胰高血糖素样肽1(glucagon-likePeptide1，GLP-1)和葡萄糖依赖性胰岛素释放多肽(glucose-dependentinsulinotropicpolypeptide，GIP)，它们是摄入食物后由肠的内分泌细胞产生的，它们刺激胰岛素的产生。GLP-1作为糖尿病的临床治疗是无效的，因为它的体内半衰期非常短。肠促胰岛素的药理合成的例子是艾塞那肽(Exenatide)和利拉鲁肽(Liraglutide)，其表现出类似于人GLP-1的生物学特性，但半衰期更长。然而，这些GLP-1类似物与几种副作用相关，例如，罕见但却危险的患胰腺炎的副作用和心血管作用。
1988年提交的EP0309100指出胰淀素(amylin)可与胰岛素一起分泌，并根据其提出了用于治疗I型糖尿病的包含胰淀素激动剂(例如胰淀素本身和胰岛素)的肠胃外组合物。所提出的胰淀素的作用是防止作为胰岛素治疗作用而发生的低血糖。据称胰淀素降低糖原合成的速率。
Gomez-Foix等报道，胰淀素和CGRP在分离的大鼠肝细胞中发挥抗胰岛素作用，补充了之前胰淀素和CGRP抑制胰岛素分泌的报道。
WO89/06135提出，阻断胰淀素作用的化合物(胰淀素拮抗剂)在治疗II型糖尿病中有用。可用作胰淀素拮抗剂的化合物是胰淀素激动剂的交联形式。据称胰淀素具有使胰腺β细胞释放更少胰岛素的作用，并且通过使肌肉细胞对胰岛素信号不应答，胰淀素还使骨骼肌的基础糖原合成和胰岛素刺激糖原合成均大幅减少。
WO93/10146公开了某些用于治疗I型糖尿病和低血糖的用作肠胃外试剂的胰淀素激动剂。据称在I型糖尿病中，胰淀素水平严重降低或不存在。同样，建议用胰淀素激动剂来预防胰岛素治疗所引起的低血液葡萄糖。
EP0717635B1/WO95/07098提出胰淀素具有升高血糖的作用，但公开了其也可降低胃动力和减缓胃排空，从而降低而非提高餐后血浆葡萄糖水平。因此，该文件教导了用于该目的的胰淀素激动剂，但特别排除了降钙素。
US7399744公开了胰淀素或胰淀素激动剂用于调节身体脂肪的用途。在测试中，用渗透泵给大鼠递送的胰淀素使高脂饮食喂养大鼠的体重增加减少。给出降钙素(包括硬骨鱼降钙素)作为适合的激动剂实例，但没有给出与其用途相关的数据。
因此，目前认为可注射的胰淀素是T2DM血糖控制的可行方法，因为其潜在地抑制餐后胰高血糖素分泌和胃排空，减少食物摄入，并因此生理性调节糖的吸收。一种胰淀素类似物普兰林肽(Pramlintide)(或Symlin)已被批准用于治疗也使用胰岛素的1型和2型糖尿病患者。普兰林肽治疗降低平均血糖水平，并显著降低了糖尿病患者餐后血糖的病理性升高。普兰林肽治疗也使体重降低，并允许患者使用更少的胰岛素。US2009/0018053简要地提出了在胃肠道中释放普兰林肽用于治疗糖尿病的普兰林肽肠溶包衣制剂。
胰淀素是降钙素家族的一部分，降钙素家族由降钙素、α-降钙素基因相关肽(α-calcitoningene-relatedpeptide，αCGRP)、βCGRP、肾上腺髓质素和胰淀素组成。这组独特的肽共有具有N末端二硫桥环的保守三级结构[Hay2003BrJPharmacol]。在哺乳动物中，这些肽通过两个密切相关的II型GPCR(降钙素受体和降钙素受体样受体)和三个独特的受体活性调节蛋白(receptoractivity-modifyingprotein，RAMP)进行信号传导[HayRegulPept2003]。因此，由于受体共享和趋异进化，使用这些小信号分子的任一种可对多种器官产生更多效的作用。
降钙素(calcitonin，CT)是由甲状腺的滤泡旁细胞(C细胞)产生的天然肽激素，其分泌应答于血清中的钙过量。CT通过直接结合到破骨细胞表面上其的受体来减少破骨细胞重吸收。CT被批准用于骨质疏松、恶性肿瘤相关高钙血症、佩吉特氏病(Paget’sdisease)的治疗，所述疾病都涉及加速的骨转换。最近在文献中描述了降钙素的一种口服形式。
已有很多关于在动物和人中(可能除了在I型糖尿病患者中)施用降钙素产生致糖尿病作用的报道。
首先对于动物和体外研究，Lupulescu在1974年报道，无论是每天一次施用或三次施用一个月，给兔注射施用大剂量(600MRCU/月或50MRCU/单剂量)的合成鲑鱼降钙素引起禁食后测定的葡萄糖水平显著降低。其机制目前未知，并且尚无在葡萄糖耐量测试后或正常饲喂期间/之后对葡萄糖水平的作用的研究。他们提出当给大鼠、兔或小鼠施用猪降钙素时，Aldred等1968未观察到类似结果。
Greeley在1989年报道，对大鼠脑室内施用鲑鱼降钙素增加葡萄糖刺激的胰岛素释放，然而，葡萄糖的血浆水平不只依赖于胰岛素，其他研究(如下)提示，除了增加胰岛素之外，降钙素也增加胰高血糖素水平，其超过了胰岛素增加的影响从而造成葡萄糖水平的升高。
Pittner在1997年报道，对大鼠肝细胞和其他细胞测试胰淀素、降钙素基因相关肽或者大鼠或鲑鱼降钙素时几乎没有作用。
Young等在1995年报道，在大鼠和小鼠中，以静脉内推注注射鲑鱼降钙素导致空腹血浆葡萄糖的升高，大鼠降钙素的作用较小。在低血糖大鼠中，降钙素比胰高血糖素产生更大的血糖恢复，而联合使用时，其协同增加胰高血糖素所产生的血糖恢复。
Young在2005年总结了在动物中胰淀素(详细总结)和鲑鱼降钙素(总结内容较少)对葡萄糖和乳糖水平的作用。他报道了对禁食动物肠胃外施用胰淀素和鲑鱼降钙素均导致葡萄糖水平升高，降钙素产生更强的葡萄糖增加作用，但该作用在人类中轻微或不存在。他还报道，在临对大鼠进行口服糖耐量测试之前肠胃外施用胰淀素降低葡萄糖的增加。因此在这方面显然的是，胰淀素和鲑鱼降钙素在大鼠中表现不同，如已公认的那样，肠胃外施用降钙素在口服糖耐量测试中产生增加的葡萄糖最大值。
Chelikani等在2007年报道，通过输注或重复注射对动物慢性施用食欲抑制物对食物摄入或体重未产生持久的作用。尽管急性肠胃外施用鲑鱼降钙素在大鼠或小鼠中诱导了短期食物摄入的强降低，但该作用仅持续了3天。
然而Bello等在2008年报道，在恒河猴中，肠胃外施用的鲑鱼降钙素在整个5天施用期间的确降低了食物摄入。
然后对于在人中进行的研究，Ziegler等(1972)报道，在健康的受试者中，输注合成的人降钙素对葡萄糖吸收和胰岛素产生有显著的减弱。
Blahos等在1976年报道，对健康志愿者肌肉内施用鲑鱼降钙素在早晨禁食期间抑制血液葡萄糖的降低，并使得葡萄糖耐量测试结果变差。
Petralito等(1979)报道，在人隐性糖尿病的病例中，证实输注鲑鱼降钙素能够降低血清胰岛素水平并增加血液葡萄糖。
Giugliano等在1980年报道，尽管之前认为急性施用降钙素在正常、肥胖和糖尿病前的人对象中有损葡萄糖耐量，但是对胰岛素依赖的糖尿病患者静脉内输注施用鲑鱼降钙素消除了正常情况下在精氨酸耐受测试中所见葡萄糖升高，并且一旦停止降钙素的输注，葡萄糖水平立即反弹。
Gattereau等(1980)报道，给骨佩吉特氏病患者注射施用鲑鱼降钙素或人降钙素引起了血清葡萄糖的立即中度增加和血清胰岛素的轻微降低。
Passariello等(1981)报道，对人肌肉内施用合成的鲑鱼降钙素在正常人中引起对葡萄糖耐量测试应答的减弱，并在患有IGT的对象中引起对葡萄糖耐量的进一步削弱。观察到了血浆葡萄糖曲线下总的葡萄糖面积约加倍。
Starke等在1981年报道，输注了鲑鱼降钙素的正常人志愿者产生了循环胰高血糖素水平的降低和血清胰岛素的降低，由于胰高血糖素降低被胰岛素降低的作用所掩盖，净效应预期是葡萄糖降低。然而，在胰岛素依赖的糖尿病患者中，鲑鱼降钙素引起了葡萄糖水平的降低和胰高血糖素的降低。
Giugliano等(1982)报道了对患有骨佩吉特氏骨病或明显骨质疏松的患者长期(2个月)施用100MRC单位/天的鲑鱼降钙素的结果。伴随治疗，葡萄糖糖耐量没有显著恶化(尽管观察到葡萄糖峰值的非显著升高)，但是基础血浆葡萄糖显著增加。胰岛素对葡萄糖施用应答的第一个10分钟中所述应答被降钙素削弱。
Giustina等(1985)调查了对患有骨佩吉特氏病、特发性骨质疏松或Sudeck氏骨营养不良的患者中每天两次肌肉内施用100MRC单位鲑鱼降钙素的短期(15天)作用。所述患者中有些是非胰岛素依赖性糖尿病患者，也接受抗糖尿病治疗。混合餐刺激后，未观察到短期肌肉内sCT治疗引起糖代谢的明显变化。在包括的三个糖尿病患者中在晚间观察到了葡萄糖水平的非显著性降低。
Zofkova(1987-Exp.Clin.Endocrinol)发现，在OGTT中通过静脉内输注给以100U的降钙素引起血糖在最初较慢的上升之后维持高血糖。将此解释为是由于对肝中葡萄糖吸收和代谢的干扰。还观察到了降钙素对胰岛素分泌的抑制作用。
Zofkova(1987-Horm.Metabol.Res.)研究了在健康志愿者中两种剂量(50和100U)的鲑鱼降钙素对血液葡萄糖水平的作用，并发现在两种剂量水平下与上述结果相似的结果。
Mangiafico(1988)发现，在一个三周的方案中对患有高血压或患有非胰岛素依赖性糖尿病或糖耐量受损的对象以100U/天联合施用硝苯地平和鲑鱼降钙素，在所有的时间中均产生统计学显著的血糖升高。
Jonderko(1989)发现，在患有十二指肠溃疡的患者中，62.26pmol/kg的鲑鱼降钙素消除了餐后胰岛素的释放，并伴有降钙素的输注期间血清葡萄糖的相应升高。
Young(2005)报道，在大鼠、犬和人中，伴随膳食施用胰淀素抑制血浆葡萄糖的升高，但在没有膳食的情况下，在啮齿动物中胰淀素的施用与血浆葡萄糖升高有关，但在人中不是这样。
总之，上述对患有非胰岛素依赖性糖尿病或葡萄糖耐量受损的人肠胃外施用的作用的研究确凿地证实施用降钙素没有治疗效益。
我们调查了经肠施用CT是否能够改善高血糖状态，并提供改善的血糖控制。在表现出T2DM几种特征的膳食诱导肥胖(DIO，dietinducedobese)大鼠中，我们比较了鲑鱼CT口服制剂的推定作用与公认的PPAR-γ激动剂罗格列酮的作用。最后，我们调查了健康成体大鼠中降钙素对葡萄糖控制的作用。我们意外地发现如在下文中进行描述和说明的，口服施用降钙素与以前公开的注射或输注的降钙素产生基本相反的作用。相反，胰岛素(例如其也能口服或注射施用)无论使用哪种途径都提供相同类型的作用。
因此，本发明提供用于经肠施用的药物制剂，其用于治疗I型糖尿病、II型糖尿病或代谢综合征，或用于减轻胰岛素抵抗，或用于降低不期望的高空腹血清葡萄糖水平，或用于降低不期望的高峰值血清葡萄糖水平，或用于降低不期望的高峰值血清胰岛素水平，所述制剂包含活性化合物，其是除胰淀素外的降钙素家族成员、除经修饰胰淀素外的经修饰降钙素家族成员或降钙素受体激动剂。所述制剂还可包含能使所述活性化合物进行有效经肠施用的载体。
优选地，所述制剂配置成用于口服施用至消化道。
优选地，所述活性化合物是降钙素，最优选是鲑鱼降钙素。
所述活性化合物可以是经修饰的降钙素家族成员，其与除胰淀素外的降钙素成员有至少75％的氨基酸同源性，并通过相对于所述降钙素家族成员添加、取代或删除氨基酸而被修饰，且保留结合并激活降钙素受体的能力。
优选地，所述载体包含5-CNAC。
本发明包括I型糖尿病、II型糖尿病或代谢综合征的治疗方法，其包括向需要用其治疗所述病症的患者经肠施用药学有效量的药物制剂，所述药物制剂包含活性化合物，所述活性化合物是除胰淀素外的降钙素家族成员、除经修饰胰淀素外的经修饰降钙素家族成员或降钙素受体激动剂，以及任选地包含能使所述活性化合物进行有效经肠施用的载体。所述方法可包括确定患者是否患有所述病症的预备步骤，和/或确定在所述患者中何种程度的所述治疗能有效减轻所述病症的后续步骤，例如，在每个病例中，进行口服葡萄糖耐量测试或检测静息血糖水平(restingbloodsugarlevel)。
为改善对患者体重的控制，以达成体重降低或避免体重增加，优选每天至少施用两次所述活性化合物，例如，每天2至4次。所述活性化合物的制剂可包含适于该施用方案的单位剂量。可施用所述活性化合物以期控制正进行糖尿病或代谢综合征治疗之患者的体重。
口服经肠制剂通过吞咽摄入，以在胃以下的肠中进行后续的释放，并由此通过门静脉递送到肝，这与含于口中使其通过舌下或颊粘膜途径转运到血流的制剂不同。
不受理论的限制，我们推测，我们在本文中所报道的降钙素作用根据是肠胃外施用还是经肠施用的显著改变可能由以下原因引起：经肠施用使降钙素在胃吸收后立即通过门静脉进入肝，使肝中的受体暴露于比静脉内或肌肉内施用时高得多的降钙素浓度。尽管降钙素的半衰期短(与GLP-1的类似)，直接途径后经肠施用降钙素至肝使得抗高血糖作用得以实现。注射和口服施用降钙素之间的作用逆转的潜在机制可能是足够高浓度的降钙素能够作为激动剂而作用于正常情况下被胰淀素所作用的受体，并因此可产生胰淀素样作用，而在较低浓度下，降钙素仅对产生高血糖作用的其他受体有效。不过其他解释是可能的。例如，可能是口服施用这些制剂直接作用的降钙素受体不同于那些注射的降钙素所作用的受体，例如，在肠道本身上的受体。
降钙素在众多物种中是高度保守的。降钙素的示例序列如下：
人CGNLSTCMLGTYTQDFNKFHTFPQTAIGVGAPSEQIDNO：1
鲑鱼CSNLSTCVLGKLSQELHKLQTYPRTNTGSGTPSEQIDNO：2
小鼠CGNLSTCMLGTYTQDLNKFHTFPQTSIGVEAPSEQIDNO：3
鸡CASLSTCVLGKLSQELHKLQTYPRTDVGAGTPSEQIDNO：4
鳗鱼CSNLSTCVLGKLSQELHKLQTYPRTDVGAGTPSEQIDNO：5
大鼠CGNLSTCMLGTYTQDLNKFHTFPQTSIGVGAPSEQIDNO：6
马CSNLSTCVLGTYTQDLNKFHTFPQTAIGVGAPSEQIDNO：7
犬-1CSNLSTCVLGTYSKDLNNFHTFSGIGFGAETPSEQIDNO：8
犬-2CSNLSTCVLGTYTQDLNKFHTFPQTAIGVGAPSEQIDNO：9
猪CSNLSTCVLSAYWRNLNNFHRFSGMGFGPETPSEQIDNO：10
因此，本发明中使用的优选物质具有通式：
CX1X2LSTCX3LX4X5X6X7X8X9X10X11X12X13X14X15X16X17X18X19X20X21GX22X23X24PSEQIDNO：11
其中：
X1是A、G或S；优选S；
X2是N或S；优选N；
X3是M或V；优选V；
X4是G或S；优选G；
X5是T、K或A；优选T或K；最优选K；
X6是L或Y；优选L；
X7是T、S或W；优选T或S；最优选S；
X8是Q、K或R；优选Q；
X9是D、E或N；优选D或E；最优选E；
X10是F或L；优选L；
X11是N或H；优选H；
X12是K或N；优选K；
X13是F或L；优选L；
X14是H或Q；优选Q；
X15是T或R；优选T；
X16是F或Y；优选Y；
X17是P或S；优选P；
X18是Q、G或R；优选Q或R；最优选R；
X19是T、I或M；优选T；
X20是A、N、D、S或G；优选N；
X21是I、T、V或F；优选T，
X22是V、S、A或P；优选V、S或A；最优选S；
X23是G或E；优选G；
X24是A或T；优选T。
因此，优选所述物质具有式：
CSNLSTCVLGX5LX7QX9LHKLQTYPX18TNTGX22GTP
SEQIDNO：12
其中：
X5是T或K；更优选K；
X7是T或S；更优选S；
X9是D或E；更优选E；
X18是Q或R；更优选R；
X22是V、S或A；更优选S。
鲑鱼降钙素是最优选的。
另外，降钙素被公认为肽激素家族的成员，该家族包括胰淀素、降钙素基因相关肽、肾上腺髓质素、垂体中间叶激素、降钙素基因相关肽II和降钙素受体刺激肽-1、降钙素受体刺激肽-2、降钙素受体刺激肽-3、降钙素受体刺激肽-4和降钙素受体刺激肽-5。其中，相对于其他降钙素受体刺激肽，优选用于本发明的是CRSP-1。
这些降钙素家族成员具有显著程度的氨基酸序列同源性和结构相似性。这些包括氨基末端的6或7个氨基酸的二硫桥环、存在于羧基末端的C-末端酰胺化的芳香残基和8-18或8-22位残基的预测的两亲α-螺旋结构区域。
来自多个物种的降钙素家族其他成员的氨基酸序列是：
胰淀素
人KCNTATCATQRLANFLVHSSNNFGAILSSTNVGSNTYSEQIDNO：13
小鼠KCNTATCATQRLANFLVRSSNNLGPVLPPTNVGSNTYSEQIDNO：14
降钙素基因相关肽
人ACDTATCVTHRLAGLLSRSGGVVKNNFVPTNVGSKAFSEQIDNO：15
猪SCNTATCVTHRLAGLLSRSGGMVKSNFVPTDVGSEAFSEQIDNO：16
肾上腺髓质素
人
TQAQLLRVGCVLGTCQVQNLSHRLWQLMGPAGRQDSAPVDPSSPHSYSEQIDNO：17
猪
YRQSMNNFQGLRSFGCRFGTCTVQKLAHQIYQFTDKDKDGVAPRSKISPQGYSEQIDNO：18
垂体中间叶激素
VGCVLGTCQVQNLSHRLWQLMGPAGRQDSAPVDPSSPHSYSEQIDNO：19
降钙素基因相关肽II
牛ACNTATCVTHRLAGLLSRSGGMVKSNFVPTNVGSKAFSEQIDNO：20
人ACNTATCVTHRLAGLLSRSGGMVKSNFVPTNVGSKAFSEQIDNO：21
降钙素受体刺激肽-1
人ACNTATCMTHRLAGWLSRSGSMVRSNLLPTKMGFKIFNGPRRNSWFSEQIDNO：22
山羊ACNTATCMTHRLAGWLSRSGSMVRSNLLPTKMGFKIFSGPRKNFWFSEQIDNO：23
犬SCNSATCVAHWLGGLLSRAGSVANTNLLPTSMGFKVYNSEQIDNO：24
绵羊ACNTATCMTHRLAGWLSRSGSMVRSNLLPTKMGFKIFSGPSEQIDNO：25
牛ACNTATCMTHRLAGWLSRSGSMVRSNLLPTKMGFKIFNGPSEQIDNO：26
猪SCNTATCMTHRLVGLLSRSGSMVRSNLLPTKMGFKVFGSEQIDNO：27
马SCNTASCLTHRLAGLLSSAGSMANSNLLPTEMGFKVSSEQIDNO：28
降钙素受体刺激肽-2
犬SSCKDGPCVTNRLEGWLARAERMVKNTFMPTDVDPEAFGHQHKELAASEQIDNO：29
山羚羊SCNRATCVTHKMAGSLSRSGSEIKRNFMSTNVGSKAFGQSEQIDNO：30
猪SCNTASCVTHKMTGWLSRSGSVAKNNFMPTNVDSKILSEQIDNO：31
降钙素受体刺激肽-3
犬SSCKDGPCVTNRLEGWLARAERMVKNTFMPTDVDPEAFGHQHKELAASEQIDNO：32
猪SCNTAICVTHKMAGWLSRSGSVVKNNFMPINMGSKVLSEQIDNO：33
降钙素受体刺激肽-4
犬SSCKDGPCVTNRLEGWLARAERMVKNTFMPTDVDPEAFGHQHKELAASEQIDNO：34
降钙素受体刺激肽-5
犬SSCKDGPCVTNRLEGWLARAERMVKNTFMPTHVDPEDFGHQHKELAASEQIDNO：35
可以注意到，尽管由不同的基因表达且源自不同的前体肽，来自犬的成熟肽CRSP-2、CRSP-3和CRSP-4是相同的。
降钙素家族的几个成员的序列也在图6和7中列出。在图6中，空白表示相关的氨基酸与所示大鼠胰淀素序列相同，印出的氨基酸代码表示该序列在所示位置具有该氨基酸，而灰色框表示所述降钙素没有对应于胰淀素23-27残基的氨基酸。在图7中，框出的区域是完全同源的(缺失除外)，且灰色区域表示在给定序列的那些位置不存在氨基酸。
不同家族成员很大程度上能够结合并激活被降钙素激活的相同受体，即能作为降钙素受体(CT受体)的激动剂。与大多数G-蛋白偶联受体不同，CT受体可通过与三种单次跨膜的受体活性修饰蛋白(RAMP，receptoractivitymodifyingprotein)中的一种结合而被修饰。
在本说明书中，术语“CT受体激动剂”是指能够以如下定义的至少一种“测试方案”所证实的方式结合并激活所述CT受体的任何化合物，但尤其是肽。
术语“降钙素家族成员”是指在任何物种中天然存在的降钙素、胰淀素、降钙素基因相关肽、肾上腺髓质素、垂体中间叶激素、降钙素基因相关肽II和降钙素受体刺激肽-1中的任一种。
术语“经修饰的降钙素家族成员”是指这样的化合物，其具有相对于天然序列经修饰的任何降钙素家族成员的氨基酸序列，但所涉及化合物是CT受体激动剂。修饰可出于多种原因进行，包括为了增加化合物对CT受体的激动剂作用、增加所述化合物的生物半衰期或帮助配制所述化合物以用于药用(例如，通过增加其储存稳定性)。
除非另有说明，单个降钙素家族成员的名称(例如，“降钙素”)是指来自任何物种(包括以上给出降钙素序列的每一种物种)的任何天然的该家族成员。
后接单个降钙素家族成员名称的术语“经修饰的”是指这样的化合物，其具有相对于天然序列被修饰的所涉及降钙素家族成员氨基酸序列，但所涉及化合物是CT受体激动剂。
用于本发明的经修饰降钙素家族成员不包括经修饰的胰淀素，并因此应该与胰淀素有不超过50％同源性，优选不超过30％。从图5中会观察到，鲑鱼降钙素在其32个氨基酸的组成上仅具有降钙素的37个氨基酸中的10个，并因此与胰淀素具有10/32*100％同源性，即27％。排除那些修饰程度使其变得“过于胰淀素样”的降钙素的修饰。
在经修饰的降钙素家族成员中，接受上述氨基酸序列修饰可以是通过添加、缺失或用天然或非天然氨基酸替换。优选地，所述经修饰的序列与所涉及降钙素家族成员的天然序列有至少75％的同源性，更优选至少90％的同源性，更优选至少95％的同源性。
因此，本发明包括其中的活性化合物是经修饰的降钙素成员的制剂，所述经修饰的降钙素成员与除胰淀素外的降钙素成员有至少75％的氨基酸同源性，并相对于所述降钙素家族成员通过添加、替换或缺失氨基酸进行修饰，并保留其结合并激活降钙素受体的能力。
在物种中，用于本发明的降钙素家族成员的优选顺序是硬骨鱼＞鸟类＞非人哺乳动物＞人。
降钙素家族成员如果天然存在，则可以是天然的或是合成的(包括重组的)，而如果不是天然存在的，则可以是合成的。
鲑鱼降钙素在天然降钙素中尤其优选。
测试方案
为了确定候选化合物是否是降钙素受体激动剂，开发了四种测试方案。
在75cm2培养瓶中将COS-7细胞培养至80％汇合度。用来自Invitrogen的pcDNA3.1(+)将受体编码序列转染入细胞。使用7.8μLFuGene6试剂，以300ng的单独的pcDNA-CTR构建体转染细胞(测试方案1)，或以300ngpcDNA-CTR构建体和1μgpcDNA-RAMP-1共转染细胞(测试方案2)，或以pcDNA-RAMP-2转染细胞(测试方案3)，或以pcDNA-RAMP-3转染细胞(测试方案4)。
整合进入pcDNA-CTR构建体中的CTRDNA的序列是genebank编号CALCR：NM_001742中给出的人降钙素受体cDNA序列。整合进入pcDNA-RAMP构建体的RAMP1DNA、RAMP2DNA和RAMP3DNA的序列是如下具体genebank编号中给出的人RAMP序列。
RAMP1：NM_005855
RAMP2：NM_005854
RAMP3：NM_005856
48小时后，通过胰酶处理将细胞消化下来，以500×g离心，并重悬于环化酶缓冲液(含有0.1％(重量/体积)BSA和1mMIBMX的DMEM)中。将细胞(5×105)等分入1.5ml的Eppendorf管中，并在37℃下预孵育20分钟。随后，在不存在(基础)或存在浓度递增(100微摩尔浓度、1微摩尔浓度、0.01微摩尔浓度)的激动剂的条件下孵育18分钟。在该系统中包含1mM毛喉素(Forskolin)，其作为阳性对照来测定最大cAMP累积。
孵育后，根据cAMP-EIA试剂盒(AmershamBiosciences，US)提供的方案对细胞内第二信使cAMP进行反应定量。
如果在4个测试方案中的任一个中，其在10微摩尔浓度的浓度下诱导的cAMP产生比载剂对照(含有0.1％(重量/体积)BSA和1mM异丁基甲基黄嘌呤(IBMX)的DMEM)多50％，则认为受试化合物是CTR激动剂。当以甚至1微摩尔浓度使用时，sCT会产生(至少在测试方案1中)多于阴性对照10倍的诱导。因此优选地，本发明中使用的化合物在至少一个测试方案中提供至少100％(即，2×)的诱导，优选至少5倍的诱导。或者，本发明中使用的化合物在至少一个所述方案中提供至少25％的sCT所给出的诱导，优选至少50％的sCT所给出的诱导。
优选的CTR激动剂在至少两个所述测试(优选测试方案1和2或1和4)中产生阳性结果，优选在三个测试方案(优选1、2和4)并且最优选在全部4个测试方案中产生阳性结果。或者，优选测试方案1中的测试化合物提供的反应比测试方案2至4任一个中测试化合物的反应大至少25％，更优选至少50％，更优选至少100％。
在US5,536,812中会找到可以在本发明中使用的经修饰的降钙素的例子。因此，可用高丝氨酸酰胺(Hse-NH2)替换(代替)降钙素的C-末端脯氨酸-酰胺。尤其优选如此修饰的鲑鱼或鳗鱼降钙素。
可如GB1,590,645中教导的那样通过用更稳定的结构替代Cys-Cys环元件来修饰降钙素或其他降钙素家族成员，所述稳定结构如通过用氨基辛二酸替代这些Cys残基的第一个和第二个(一般为第一个和第七个氨基酸)来提供，这样sCT变成：
SEQIDNO：36
如在EP0464549所述，发挥降钙素受体激动剂之作用的降钙素类似肽可具有通式：
CX1NLSTCX2LGX3X4X5GX6X7X8LX9X10TX11PX12TX13X14GX15GX16P-X17
SEQIDNO：37
其中X1为Ser、Gly或Ala；X2为Val或Met；X3为Thr或Lys；X4为Tyr或Leu；X5为Thr或Ser；X6为Asp或Glu；X7为Phe或Leu；X8为Asn或His；X9为Tyr、Phe或Leu；X10为His或Gln；X11为Tyr或Phe；X12为Gln或Arg；X13为Ala、Ser、Asn或Asp；X14为Ile、Thr或Val；X15为Val、Ser或Ala；X16为Ala、Thr或Val；和X17为酰胺化的高丝氨酸，与包含1至20个碳原子的烷基伯胺反应的高丝氨酸-内酯，或任选的多肽链，并在C-末端包含酰胺化的高丝氨酸。
或者，降钙素类似物可具有序列PO-1(CGNLSTCMLGKLSQELHKLQTYPQTAIGVGAP-NH2SEQIDNO：38)，其具有人降钙素N-和C-末端的10个氨基酸的序列以及鲑鱼降钙素的12个氨基酸的中央区域，或PO-23([环-Asp1、Lys7]-[des-Gly2]-[Leu8]-PO-1)或PO-29([Asp15、Asn17、Phe19、His20]-PO-23)。PO-23用Asp-Lys肽键构成的环结构替代PO-1N-末端Cys-Cys的S-S键以增强物理化学稳定性。在PO-29中修饰了PO-23分子的中心区域，使其更接近于人降钙素。
文献中已知很多其他具有降钙素受体激动剂特性的经修饰降钙素。
本发明所用的降钙素受体激动剂包括“小分子”(非肽)激动剂。这些例如为满足经典的成药性规则是优选的，因此其优选具有如下5项中的至少4项：分子量≤500、logP(其在正辛醇和水中分配系数的对数，log(c辛醇/c水))≤5、氢键供体≤5、H-键受体(N和O原子的总数)≤10和任选地一个或两个极性表面的面积≤140A2(或氢键供体和受体的总数≤12)和可旋转键≤10。
适于本发明使用的剂型包括片剂、小片剂(minitablet)、胶囊、颗粒剂、丸剂、粉剂、泡腾固体和可咀嚼固体制剂。所述制剂可包含明胶，优选为水解明胶或低分子量明胶。所述制剂可这样获得：对包含降钙素或其片段或缀合物和水解明胶或低分子量明胶的均质水溶液进行冷冻干燥，并进一步将所得的固体材料加工成所述口服药物制剂，并且其中所述明胶可具有1000至15000道尔顿的平均分子量。所述制剂可包含保护性载体化合物，例如，5-CNAC或本文中公开的其他化合物。
尽管优选口服制剂(例如片剂和胶囊)，用于本发明的组合物可以采用栓剂等形式。降钙素(例如鲑鱼降钙素)的口服递送是通常选择的递送途径，因为相对于其他递送模式，其方便、相对容易且一般无痛，患者的顺应性更好。然而，生物、化学和物理屏障(例如胃肠道中变化的pH、强消化酶和活性剂不能渗透的胃肠道膜)使对哺乳动物口服递送降钙素(例如，鲑鱼降钙素)存在问题，例如，起初由于(至少部分因为)降钙素在胃肠道中的稳定性不足和降钙素不易通过肠壁转运入血流，降钙素(其为长链多肽激素，由哺乳动物的甲状腺滤泡旁细胞和鸟类与鱼类的后腮腺分泌)的口服递送被证明是困难的。而下文描述了适合的口服制剂。
降钙素和其他家族成员可通过与适合的载体化合物混合配制而用于经肠(尤其是口服)施用。以其自身或在水溶液/悬浮液中口服施用时不能有效地产生骨修复作用。适合的载体化合物包括US5,773,647和US5866536中描述的那些，其中5-CNAC(N-(5-氯代水杨酰)-8-氨基辛酸，通常以其二钠盐使用)尤其有效。其他优选的载体或递送剂为SNAD(10-(2-羟基苯甲酰氨基)癸酸的钠盐)和SNAC(N-(8-[2-羟基苯甲酰基]氨基)辛酸的钠盐)。
此外，WO00/059863公开了式I
的二钠盐以及对活性剂(例如降钙素(例如，鲑鱼降钙素))的口服递送尤其有效的其水合物和溶剂化物，这些可用于本发明，其中R1、R2、R3和R4独立地为氢、-OH、-NR6R7、卤素、C1-C4烷基或C1-C4烷氧基；
R5为取代或未取代的C2-C16亚烷基、取代或未取代的C2-C16亚烯基、取代或未取代的C1-C12烷基(亚芳基)或者取代或未取代的芳基(C1-C12亚烷基)；R6和R7独立地为氢、氧或C1-C4烷基。
优选的鲑鱼降钙素和任选地微粒化的5-CNAC的肠制剂可以是WO2005/014031中描述的那样。
可以使用BoneMedicalLimited的Capsitonin产品中采用的方法配制用于口服施用的降钙素和其他家族成员。其可包括整合进入Axcess制剂的方法。更特别地，所述活性成分可被包封入能承受通过胃的转运的肠胶囊中。其可包含所述活性化合物和亲水的芳香醇吸收增强剂，如WO02/028436所述。在已知的方式中，肠溶包衣可以以pH敏感的方式(例如pH从3至7时)变为可渗透。WO2004/091584中也描述了使用芳香醇吸收增强剂的适宜的配制方法。
可使用UnigeneEnteripep产品中采用的方法配制降钙素或其他家族成员。这可以包括US5,912,014、US6,086,918或US6,673,574中描述的方法。特别地，其可以包括使用降钙素或其他家族成员与膜转位蛋白(例如，HIVTAT蛋白的蛋白转导结构域)的缀合物，并与一种或多种蛋白酶抑制剂和/或pH降低剂和/或抗酸保护性载剂和/或吸收增强剂(其可为表面活性剂)共同配制。
可以使用Oramed产品中的方法配制降钙素或其他家族成员，其可以包括用WO2007/029238或US5,102,666所述的ω-3脂肪酸进行的配制。
一般来说，可使用这些载体或递送剂的可药用盐(尤其是单或二钠盐)、溶剂化物(例如，醇溶剂化物)和水化物。
本发明的药物组合物一般包含递送有效量的载体(例如，5-CNAC)，即足以递送降钙素以产生所期望效果的量。一般地，所述载体(例如5-CNAC)存在的量为总组合物重量的2.5wt％至99.4wt％，更优选为25wt％至50wt％。可以规律地(例如每天或每周一次或多次)；间歇地(例如，在一天或一周中不规律地)或周期地(例如几天或几周的时间内规律地施用，而后一段时间不施用)进行本发明药物组合物的口服施用。本发明药物组合物的剂型可为任何已知的形式，例如，液体或固体剂型。所述液体剂型包括溶液乳剂、悬浮剂、糖浆和酏剂。除了降钙素和载体(例如5-CNAC)之外，所述液体制剂还可包含本领域常用的惰性赋形剂，例如增溶剂(例如乙醇)；油(例如棉籽油、蓖麻油和芝麻油)；润湿剂；乳化剂；悬浮剂；甜味剂；调味剂和溶剂(例如水)。所述固体制剂包括胶囊、软凝胶胶囊、片剂、囊片剂、粉末剂、颗粒剂或其他固体口服剂型，所有这些都可用本领域公知的方法制备。所述药物组合物可另外包含习惯用量的添加剂，其包括但不限于pH调节剂、防腐剂、调味剂、味道掩盖剂、香味剂、湿润剂、张力调节剂(tonicifier)、着色剂、表面活性剂、增塑剂、润滑剂(例如硬脂酸镁)、助流剂、压片助剂(compressionaid)、增溶剂、赋形剂、稀释剂(例如微晶纤维素(例如，FMC公司提供的AvicelPH102))或任何其组合。其他添加剂可包括磷酸缓冲盐、柠檬酸、二醇类和其他分散剂。所述组合物还可以包含一种或多种酶抑制剂，例如放线酰胺素(actinonin)或epiactinonin及其衍生物；抑肽酶、Trasylol和Bowman-Birk抑制剂。另外，转运抑制剂(即[ρ]-糖蛋白如Ketoprofin)可存在于本发明的组合物中。可用常规方法制备本发明的固体药物组合物，例如，通过掺合降钙素、载体(例如5-CNAC)和任何其他成分的混合物，捏和，并填充入胶囊，或不填充进入胶囊，而是模塑然后进一步的压片或压缩模塑得到片剂。此外，可通过已知的方法形成固体分散体，然后进一步的加工形成片剂或胶囊。优选地，本发明药物组合物的成分在整个固体剂型中是均质的或均一混合的。
或者，所述活性化合物可作为与所述载体形成的缀合物配制，其可为US2003/0069170中描述的寡聚体，例如
当其用鲑鱼降钙素形成时被称为CT-025。如其所述，该缀合物可与脂肪酸和胆汁盐联合施用。
如在Mansoor等中描述的那样，可使用与聚乙二醇(PEG)形成的缀合物。
或者，活性化合物可与亚硝基-N-乙酰基-D，L-青霉胺(SNAP)和卡波普(Carbopol)溶液混合，或与牛磺胆酸盐和卡波普溶液混合形成粘膜粘着乳剂。
可以通过载入Prego等公开的壳聚糖纳米胶囊(任选地如PregoPregoC、TorresD，Fernandez-MegiaE、Novoa-CarballalR、AlonsoMJ所述修饰PEG)或Garcia-Fuentes等中公开的壳聚糖或PEG包被的脂质纳米颗粒来配制所述活性化合物。用于该目的的壳聚糖纳米颗粒可为如Guggi等所述经亚氨基硫烷修饰。如在Dogru等所述它们可在水/油/水型乳剂中配制。可以如Sinko等或Song等所述通过使用牛磺脱氧胆酸盐或月桂酰肉碱来提高活性化合物的生物利用度。一般地，delaFuente等讨论了合适的纳米颗粒，并且其可在本发明中使用。
其他合适的用于口服制剂的策略包括使用ChiasmaLtd.的WO2005/094785中描述的瞬时渗透增强剂(TPE，transientpermeabilityenhancer)系统。TPE利用固体亲水颗粒在疏水介质中的油性悬浮液来保护药物分子不被不利的胃肠(GI，gastrointestinal)环境所失活，并同时作用于GI壁来诱导其所载药物分子的渗透。
还包括的是使用如US2008/0200563所述的谷胱甘肽或包含多个巯基的化合物以抑制粘膜膜上的外排泵的作用。这样的技术的应用实例还在如下文献中描述：Caliceti，P.Salmaso，S.，Walker，G.和Bernkop-Schnürch，A.(2004)‘Developmentandinvivoevaluationofanoralinsulin-PEGdeliverysystem.’Eur.J.Pharm.Sci.，22，315-323；Guggi，D.，Krauland，A.H.和Bernkop-Schnürch，A.(2003)‘Systemicpeptidedeliveryviathestomach：invivoevaluationofanoraldosageformforsalmoncalcitonin’.J.Control.Rel.92，125-135；和Bernkop-Schnürch，A.，Pinter，Y.，Guggi，D.，Kahlbacher.H.，G.，Schuh，M.，Schmerold，I.，DelCurto，M.D.，D′Antonio，M.，Esposito，P.和Huck，Ch.(2005)‘Theuseofthiolatedpolymersascarriermatrixinoralpeptidedelivery’-Proofofconcept.J.Control.Release，106，26-33。
可在WO2004/084870所述的无缝微球中配制活性化合物，其中所述活性药物成分溶解成为乳剂、微乳剂或悬浮剂，配制成为小球；并用常规或新的包被技术多样地包被。得到的是“预先溶解”形式包封药物，当口服施用时，其沿胃肠道以特定的速率提供所述活性药物向特定位置的预定的立即或持续释放。本质上，所述药物的预先溶解增强了其动力学特性的可预测性，同时增强了渗透性和药物稳定性。
可应用US2009/0074824所述的壳聚糖包被纳米胶囊。用该技术施用的活性分子在纳米胶囊中被保护，因为纳米胶囊对于胃液作用来说是稳定的。另外，该系统的粘膜粘着特性延长了粘附到肠壁的时间(已证实，这些系统在胃肠道转运中有延迟)，这有助于更有效地吸收活性分子。
可使用TSRlInc.开发的方法。这些包括亲水增溶技术(HST，HydrophilicSolubilizationTechnology)，其中明胶(带有正和负电荷的天然来源的胶原提取物)包被包含在卵磷脂胶束中的活性成分颗粒，并阻止其聚集或结块。这通过极性相互作用导致了改善的疏水药物颗粒可湿性。此外，两亲的卵磷脂降低了溶解液体和颗粒表面之间的表面张力。
可用葫芦脲(cucurbiturils)作为赋形剂来配制活性成分。
或者，可以使用MerrionPharmaceuticals的GIPET技术来生产肠溶包衣片，其包含活性成分和吸收增强剂，所述吸收增强剂可为US2007/0238707中描述的中链脂肪酸或中链脂肪酸衍生物，或US7268214中描述的膜转位肽。
可以采用GIRESTM技术，其由可膨胀袋中的控制释放剂型组成，所述可膨胀袋放置在用于口服施用的药物胶囊中。胶囊溶解时，产气系统在胃中膨胀所述袋。在临床试验中，证明该袋在胃中存留16至24小时。
或者，活性物可缀合到使其抵抗胃的酶降解并便于其吸收的保护性调节剂上。所述活性物可与单分散性短链甲氧基聚乙二醇糖脂衍生物共价缀合，其在纯化后结晶并冷冻干燥成为干的活性药物成分。US5438040和www.biocon.com描述了该方法。
还可采用肝靶向囊泡(HDV，hepatic-directedvesicle)来进行活性物的递送。HDV可由包封活性物的脂质体(直径≤150nm)组成，在其脂质双层中还包含肝细胞靶向分子。所述靶向分子引导包封的活性物到肝细胞的递送，因此起效所需的活性物的量相对小。US2009/0087479描述了该技术，并在www.diasome.com进一步地描述。
如与胰岛素相关的US2002/0115592所述，可以将活性物与中链偏甘油酯以及任选地混合的长链PEG类整合入另外地包含基本无水的亲水基质(包含醇和共溶剂)的组合物中。
或者，可使用ShenZ，MitragotriS，PharmRes.2002Apr；19(4)：391-5“Intestinalpatchesfororaldrugdelivery”中描述的肠贴片(intestinalpatch)。
如US7189414所述可将活性物整合进入易侵蚀基质，所述基质是通过将水凝胶与疏水聚合物混合形成。
用于待治疗成人的适宜降钙素口服剂量水平可在0.05至5mg的范围内，优选约0.1至2.5mg。
降钙素受体激动剂的剂量可为以上对降钙素所述的那样，任选地根据上述测试方案中所述激动剂与降钙素本身相比的相对激动剂效力来调整所述剂量。
患者的治疗给药频率可为每天1至6次，例如每天2至4次。理想的是维持至少6周的长时间治疗，优选至少6个月，优选至少1年，并任选地终生治疗。
相关病症的联合治疗可使用本发明组合物来进行，并另外独立地施用一种或多种其他疗法。或者，可以将本发明组合物与一种或多种其他疗法整合进行联合使用。
本发明的联合治疗包括将所述活性化合物与胰岛素、GLP-2、GLP-1、GIP或胰淀素联合，或通常与其他抗糖尿病药联合。因此包括共制剂(co-formulation)的联合治疗可以采用如下药物：胰岛素增敏化剂，包括双胍类(例如，二甲双胍、丁双胍和苯乙双胍)、TZD(PPAR)(例如，吡格列酮、来格列酮、罗格列酮和曲格列酮)、双PPAR激动剂(例如，阿格列扎、莫格他唑和替赛格列他)或促分泌素(包括磺酰脲类，例如氨磺丁脲、氯磺丙脲、格列齐特、甲苯磺丁脲、妥拉磺脲、格列吡嗪、格列本脲、优降糖、格列喹酮、格列吡脲和格列美脲)、美格列奈类/格列奈类(K+)(例如，那格列奈、瑞格列奈和米格列奈)、GLP-1类似物(例如，艾塞那肽、利拉鲁肽和阿必鲁泰)、DPP-4抑制剂(例如，阿格列汀、利拉利汀、沙格列汀、西他列汀和维格列汀)、胰岛素类似物或特别的制剂(例如，(快速起效的)赖脯胰岛素、门冬胰岛素、赖谷胰岛素，(长效的)甘精胰岛素、地特胰岛素，吸入性胰岛素-Exubra和NPH胰岛素)，以及其他，包括α-葡萄糖苷酶抑制剂(例如，阿卡波糖、米格列醇和伏格列波糖)、胰淀素类似物(例如，普兰林肽)、SGLT2抑制剂(达格列净、Remogliflozin和舍格列净)和另外的(包括苯氟雷司和托瑞司他)。
我们假设，经肠施用降钙素家族成员(尤其是降钙素本身)来提高胰岛素抵抗患者的葡萄糖水平的作用可基于以下解释：对于升高或降低血清葡萄糖，降钙素对骨骼肌和对肝分别发挥相反的作用，且经肠施用优选递送降钙素到肝，而肠胃外施用偏好作用于骨骼肌。我们认为当作用于骨骼肌时，降钙素促进葡萄糖的消耗，所以产生乳酸，乳酸传送到肝并发出信号使肝产生葡萄糖。另一方面，降钙素作用于肝使糖原产生以存储葡萄糖。
这个理论可以解释Lupulescu中报道的反常结果，其中非常高的降钙素注射剂量导致血浆葡萄糖的降低，与所有其他报道的动物研究的结果相反。我们认为所使用的非常高的剂量足以激活肝中的降钙素受体，所以掩盖了见于其他研究的骨骼肌反应。
所述活性化合物可为降钙素受体激动剂。其中很多是本领域中已知的，它们在性质上不是肽而是合成的小分子。其他已知的降钙素受体激动剂是降钙素模拟肽。以下讨论这两种类型的实例。
本发明使用的降钙素受体激动剂包括JP2001294574中的那些，其包括如下通式的激动剂及其可药用盐，
其中，R1为H、羟基、1-4C烷氧基或7-10C芳烷氧基；R2和R3各自为1-4C烷基；和R4和R5各自为H、卤原子、羟基、1-4C烷基、7-10C芳烷基、1-4C烷氧基、7-10C芳烷氧基、1-7C酰氧基、氨基、1-4C烷基氨基、17-10C芳烷氨基、1-7C酰氨基、羧基、1-4C烷氧基羰基、7-10C芳烷氧基羰基、允许有至少一个取代基的氨基甲酰基、酰基或氨磺酰基。
优选的化合物(SUNB8155)是下式中的一种
本发明使用的降钙素模拟物包括WO99/37604中描述的那些。所描述的为下式的化合物
其中
R1和R2各自独立地选自：氢、具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烯基、芳基、取代的芳基、烷基芳基、取代的烷基芳基、碳环、取代的碳环、杂环、取代的杂环及其组合，所述组合是稠合的或共价连接的，且取代基选自：卤素、卤代烷基、羟基、芳氧基、苄氧基、烷氧基、卤代烷氧基、氨基、单烷基氨基、二烷基氨基、酰氧基、酰基、烷基和芳基；
R3是2，5二取代芳基；
R4和R5各自独立地选自：氢和具有1至6个碳原子的烷基，或一起形成选自以下的环：饱和或不饱和五元环、饱和或不饱和六元环和饱和或不饱和七元环；
Z和X各自独立地选自：NH、O、S或NR，其中R是1至6个碳原子的低级烷基；和
n和m各自独立地为0至6的整数。
这些包括下式的化合物
其中，
R1和R2各自独立地选自：氢、具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烯基、芳基、取代的芳基、烷基芳基、取代的烷基芳基、碳环、取代的碳环、杂环、取代的杂环及其组合，所述组合是稠合的或共价连接的，且取代基选自：卤素、卤代烷基、羟基、芳氧基、苄氧基、烷氧基、卤代烷氧基、氨基、单烷基氨基、二烷基氨基、酰氧基、酰基、烷基和芳基；
S1、S3和S4各自独立地选自：氢、卤素、卤代烷基、羟基、芳氧基、苄氧基、烷氧基、卤代烷氧基、氨基、单烷基氨基、二烷基氨基、酰氧基、酰基、烷基、芳基；并且S2和S5各自独立地为烷基或芳基。
特别地，适合的R1是4-乙氧基苄基、1-乙基-吲哚基甲基、苄基、4-烯丙氧基苄基(4-alloxybenzyl)、1-烯丙基-吲哚基甲基、4-氯代苄基、4-氟代苄基、4-碘代苄基、2-萘基甲基或苯基；
R2是乙基、烯丙基、苄基或2-萘基甲基；
并且，S2和S5是叔丁基。
可以使用的化合物的其他实例在US7,396,936中。这些包括下式的化合物其立体异构体、其互变异构体、其溶剂化物、其前药及其可药用盐：
其中
X是N或NO；
Y是二价取代或未取代的芳基、杂环基或环烷基；
Z是-C(O)OR5、-C(O)NR6R7、-NR6C(O)R5、-NR6C(O)NR6R7、-C(O)R5、-NR6R7、-OR8、-SO2NR6R7、-NR6SO2R5或-S(O)mR5；
R1是-H、-C(O)OR9、-C(O)NR10R11、-CN、-C(O)R9或-NR10C(O)R9；
R2是-(C1-2烷基)-R12，其中C1-2烷基是取代或未取代的；
R3是C2-6分支或不分支的烷基，其任选地被一个或多个F取代；
R4a和R4b各自独立地为-H或者取代或未取代的C1-4烷基；
R5是取代或未取代的芳烷基、杂芳烷基、杂环烷基或环烷基烷基基团；
R6和R7各自独立地为-H或取代或未取代的芳烷基、杂芳烷基、杂环烷基或环烷基烷基基团；或当连接到相同原子上时，R6和R7一起形成取代或未取代的杂环基团；
R8是取代或未取代的、分支或不分支的C2-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基或C7-10芳烷基；
R9是-H或取代或未取代的烷基、杂烷基、烯基、炔基、芳基、芳烷基、杂环基或杂环基烷基；
R10和R11各自独立地为-H或者取代或未取代的烷基、杂烷基、烯基、炔基、芳基、芳烷基、杂环基或杂环基烷基；或当连接到相同原子上时，
R10和R11一起形成取代或未取代的杂环基；
R12是取代或未取代的环烷基、芳基、杂芳基，或是未取代的烷基；并且m是0、1或2。
实例包括5-氨基甲酰基-2-[2-(4-氟代-苯基)-乙基]-4-{4-[(呋喃-2-基甲基)-氨基甲酰基]-苯基}-6-丙基-烟酸乙酯；
5-氨基甲酰基-2-(2-环己基-乙基)-4-{4-[(呋喃-2-基甲基)-氨基甲酰基]-苯基}-6-异丁基-烟酸乙酯；
5-氨基甲酰基-2-[2-(4-氟代-苯基)-乙基]-4-{4-[(呋喃-2-基甲基)-氨基甲酰基]-苯基}-6-异丁基-烟酸乙酯；
5-氨基甲酰基-2-(2-环己基-乙基)-4-{4-[(呋喃-2-基甲基)-氨基甲酰基]-苯基}-6-丙基-烟酸乙酯；
5-氨基甲酰基-2-[2-(4-氟代-苯基)-乙基]-6-丙基-4-{4-[(吡啶-3-基甲基)-氨基甲酰基]-苯基}-烟酸乙酯；
5-氨基甲酰基-2-(2-环己基-乙基)-6-丙基-4-{4-[(吡啶-3-基甲基)-氨基甲酰基]-苯基}-烟酸乙酯；
2-[2-(4-氟代-苯基)-乙基]-4-{4-[(呋喃-2-基甲基)-氨基甲酰基]-苯基}-6-异丁基-吡啶-3，5-二羧酸二酰胺；
5-氨基甲酰基-6-乙基-2-[2-(4-氟代-苯基)-乙基]-4-{4-[(呋喃-2-基甲基)-氨基甲酰基]-苯基}-烟酸乙酯；和
5-氨基甲酰基-2-[2-(4-氟代-苯基)-乙基]-6-异丁基-4-{4-[(吡啶-3-基甲基)-氨基甲酰基]-苯基}-烟酸乙酯。
此外，所述活性化合物可以是WO98/37077中描述的化合物。因此，其可以为下式：
其中
A和B各自独立地选自：芳基、取代的芳基、碳环、取代的碳环、杂环、取代的杂环及其组合，所述组合是稠合的或共价连接的，且所述取代基选自：卤素、卤代烷基、羟基、芳氧基、苄氧基、烷氧基、卤代烷氧基、氨基、单烷基氨基、二烷基氨基、酰氧基、酰基、烷基和芳基；R1和R2各自独立地选自：氢和具有1至6个碳原子的烷基，或一起形成选自以下的环：饱和或不饱和五元环、饱和或不饱和六元环和饱和或不饱和七元环；Y1和Y2各自独立地为选自以下的键或二价基：-CH2-、-NHC(O)-、-NRC(O)-、-NHC(S)-、-NRC(S)-、-NHC(＝NH)-、-OC(O)-、-C(O)-和-C(S)-，其中R是1至6个碳原子的低级烷基；n是0至4的整数。
适合的实例包括
在基于肽的模拟物中可以使用的是US5,698,521中的那些，包括乙酰基-Trp-Xaa1-Gln-Xaa2-Ile-Thr-Xaa3-Leu-Xaa4-Pro-Gln-Xaa5-Pro-Xaa6-Xaa7-Phe-Gly-COOH和乙酰基-Trp-Xaa1-Gln-Xaa2-Ile-Thr-Xaa3-Leu-Xaa4-Pro-Gln-Xaa5-Pro-Xaa6-Xaa7-Phe-COOH(SEQIDNO.2)的任一个；其中，乙酰基是CH3CO-，Xaa1是异缬氨酸，Xaa2、3、4、5和6是2-氨基异丁酸，而Xaa7是4-甲基脯氨酸。
将参照附图通过以下实施例进一步描述和说明本发明，附图中：
图1显示研究中所有处理组的重量变化；a)-载剂和罗格列酮组；b)降钙素和5-CNAC处理组；
图2显示(图a和d)对a)载剂和罗格列酮处理组以及d)降钙素和5-CNAC处理组进行的经120分钟的口服葡萄糖耐量测试(OGTT，oralglucosetolerancetest)的结果；(图b和e)120分钟的OGTT中b)载剂和罗格列酮处理组和e)降钙素和5-CNAC处理组中归一化到t＝0的葡萄糖水平的相对改变。柱状图(图c和f)显示积分AUC；
图3显示(图a和d)在经120分钟的OGTT中，对处理组a)载剂和罗格列酮和d)5-CNAC和降钙素中的DIO大鼠测得的总胰岛素水平；(图b和e)在120分钟的OGTT中，DIO大鼠处理组b)载剂和罗格列酮和e)5-CNAC和降钙素从t＝0开始胰岛素水平的变化。柱状图(图c和f)显示积分AUC；
图4显示用降钙素和5-CNAC处理健康对照动物的OGTT结果。a)5-CNAC和降钙素处理组中监测的总葡萄糖水平。b)在120分钟的OGTT中，在5-CNAC和降钙素处理组中监测的归一化至t＝0的葡萄糖水平的相对变化。c)积分AUC；
图5显示图4的OGTT中的胰岛素水平。a)在5-CNAC和降钙素处理组中监测的总胰岛素水平。b)在120分钟的OGTT中，在5-CNAC和降钙素处理组中监测的归一化至t＝0的胰岛素水平的相对变化。c)积分AUC；
图6显示与胰淀素(SEQIDNO1、2、6、10、48-56)相比较的几个胰淀素样肽的氨基酸序列；
图7显示与胰淀素(SEQIDNO：39-47)相比较的几个胰淀素受体激动剂的氨基酸序列；
图8显示来自实施例4的结果，显示了在8周的处理期中，口服鲑鱼降钙素对正常大鼠体重增加的作用。以数据的平均值+/-标准误作图；
图9显示来自实施例4的结果，显示了在7周的处理期中，口服鲑鱼降钙素部分防止OVX-诱导体重增加的作用。以数据的+/-标准误作图；和
图10显示来自实施例4的结果，显示了在8周的处理期中，每天一次给药的口服鲑鱼降钙素并未防止OVX-诱导的体重增加。以数据的+/-标准误作图，并归一化初始体重。
图11，图A至D显示实施例5中产生的数据，说明了与SNAC一起配制的sCT的口服生物利用度。
图12进一步说明了实施例5的数据，说明了与SNAC一起配制的sCT的口服生物利用度。
实施例1：与罗格列酮相比，鲑鱼降钙素与5-CNAC联合对DIO大鼠中口服葡萄糖耐 量测试之响应的作用
材料和方法
动物
使用总共48只选择性繁育的DIO雄性大鼠。实验开始时，动物已达到35周龄，其中有31周饲喂高脂饮食。将罗格列酮悬浮于10％羟丙基β-环胰淀素(Cat.no.A0367.0100)中。将鲑鱼降钙素(CT)和5-CNAC(N-(5-氯代水杨酰)-8-氨基辛酸)悬浮于MilliQ水中。对动物进行以下处理：每天用150mg/kg/天的5-CNAC，或联用该剂量的5-CNAC和2mg/kg/天的降钙素处理动物一次，处理5周，或以3mg/kg或10mg/kg罗格列酮(已知的抗糖尿病药，用作阳性对照)处理。
在第-7、21和42天，收集空腹血清和尿样品，通过MR扫描来评价全身组织构成。在第42天，进行口服葡萄糖耐量测试(OGTT)以评价大鼠的葡萄糖体内平衡。在第-1天，根据体重和全身脂肪重量(通过四合一EchoMRI扫描仪来评价)将动物分入不同的处理组。按体重将所述组随机分成三队。
给药的第一天为第0天。动物以5ml/kg口服给药。在整个研究期间(0-42天)，每天早晨7:00-下午2:00通过连接到5ml注射器(IuerlockTM.Becton)上的胃管口服灌胃施用一次化合物溶液。
体重增加
因为已知格列酮类诱导体重增加，对动物连续称重，如图1.a和1.b所示，载剂组动物的体重在整个研究中保持稳定。相反，在研究过程中，治疗开始后用3mg/kg罗格列酮处理的大鼠立即表现出显著(p＝0.05)的体重增加。与仅接受载剂的动物相比，用10mg/kg罗格列酮处理的动物的体重也显著增加(p＝0.0001)。CT处理组和5-CNAC组都没有表现出任何体重改变(p＝0.8)。
为评价处理方案中增加体重的分布，终止后对动物进行MR分析。调查了两个参数：1)脂肪重量的改变，和2)总含水量的改变。
与载剂组和5-CNAC组的大鼠相比，罗格列酮的两个剂量引起总脂肪显著增加(p＜0.0001)。然而，与罗格列酮组相比，CT处理组的脂肪含量增长显著更低(p＜0.0001)(见表2)，但与5-CNAC和载剂组相比，却显著增加。没有处理表现出对水积累的诱导。对食物摄入的监测显示体重的增加不是由食物摄入的增加引起的(未显示数据)。
口服葡萄糖耐量测试(OGTT)
为了检测不同处理组的葡萄糖处理，进行了口服葡萄糖耐量测试(OGTT)。仅接受载剂的动物基线血浆葡萄糖水平显著高于罗格列酮处理组的水平(ANOVAp＝0.0005；Dunnett校正：载剂相对于3mg/kg罗格列酮p＝0.006；载剂相对于10mg/kg罗格列酮p＝0.0003)，这表明罗格列酮的确降低基础葡萄糖水平(图2a)。如对作为该模型的一个特征展现出缺陷的葡萄糖清除率的DIO大鼠所预期的，在OGTT期间，载剂组的血浆葡萄糖水平增加至10.1mmol/L葡萄糖，并在整个OGTT期间保持高水平，建立了高血糖状态。相反，接受罗格列酮处理的动物在基线和在OGTT期间(图2a和2b)，如所预期地表现出较好的葡萄糖调节。当对比CT处理的动物和5-CNAC组时，CT强烈降低了峰值葡萄糖水平(图2c和2d)。在CT组，OGTT后15分钟，血液葡萄糖水平增加到最大8.2mM，在OGTT过程中保持该水平，而在5-CNAC组中，60分钟时葡萄糖水达到峰值水平9.8mM，且在整个OGTT中保持所述增加。
血浆葡萄糖清除率净变化的曲线下面积(AUC)被用于比较不同处理策略的效果。OGTT中，罗格列酮和CT处理都引起显著增加的葡萄糖清除率。与3mg/kg罗格列酮的作用相比，10mg/kg罗格列酮的处理表现出显著更快的葡萄糖清除率。CT对变化的AUC的作用比罗格列酮组中所见的改变明显更大。
计算不同处理组中所有动物的血浆胰岛素响应曲线，这反映了OGTT过程中不同时间点时它们的血浆胰岛素的水平。罗格列酮的载剂组具有更高的基础胰岛素水平(大约5.34μg/L)，且输注葡萄糖后15分钟，胰岛素响应增大在11.97μg/L达到峰值。初始响应之后，胰岛素水平降低到大约8.40μg/L，且在剩余的OGTT期间，该高血液胰岛素状态保持不变(图3)。当与载剂组相比时，罗格列酮剂量依赖性地降低基础的和OGTT诱导的胰岛素水平(图3a和b)。当与5-CNAC组相比时，CT处理导致减弱的胰岛素响应，其中葡萄糖输注后15分钟观察到胰岛素水平峰值，此后胰岛素水平恢复至4.53μg/L的基础水平，而5-CNAC处理组也在15分钟后达到峰值，但在整个OGTT中其水平保持在高血液胰岛素状态。
图3.e中进一步地反映了上述结果，该图中说明了变化的AUC，其中CT处理导致胰岛素水平的最低变化，该作用显著大于罗格列酮的作用。
实施例2：在SpragueDawley大鼠中，与5-CNAC联合的鲑鱼降钙素对口服葡萄糖耐 量测试之响应的作用
健康大鼠的OGTT
为了进一步调查CT是否具有降低葡萄糖的特性，我们在20只(年龄和性别匹配)清瘦对照SpragueDawley大鼠中进行了OGTT，其中10只被分配到5-CNAC组，10只分配到CT处理组。使用与DIO大鼠相同的剂量处理大鼠5周，每天两次。在这些动物中，CT处理降低了基础葡萄糖水平(图4a)。OGTT中，15分钟后，载剂组表现出10.1mmol/L的葡萄糖水平峰值，随后，葡萄糖水平恢复至接近基线。在CT处理组中，CT处理阻止了这种急剧的升高，并保持导致更快清除的较低的葡萄糖水平，对血糖控制和血液葡萄糖清除显示有益作用。应注意，在实验结束时(t＝120分钟)载剂和CT处理的动物均达到基础血液葡萄糖水平。OGTT期间变化的AUC的计算证实了CT处理强烈降低了葡萄糖水平(图4c)。
另外，我们还监测了OGTT过程中CT对胰岛素水平的作用。在OGTT中，载剂处理组通过增加胰岛素水平到2.5μg/L来响应，该水平持续大约30分钟。120分钟后，载剂处理组的胰岛素水平恢复至基础水平。CT处理的动物通过约0.5μg/L的小量增长来响应OGTT，仅60分钟后胰岛素水平恢复至基础水平。在0至120分钟内，与对照相比，载剂处理动物的胰岛素水平改变并不显著(p＝0.53)，而两组之间变化的AUC是显著的(p＝0.08)。图5a和5b显示该结果。
实施例3：筛选降钙素受体激动剂
降钙素和胰淀素受体激动剂测定
为鉴定降钙素受体(CTR)和胰淀素受体激动剂，我们使用了COS-7细胞，其在受体扩增蛋白(RAMP，Receptoramplifyingprotein)不存在或存在时被CTR转染。CTR是G-蛋白偶联受体(GPCR，G-proteincoupledreceptor)，有很多测定GPCR激动剂的方法(1-12)，其中cAMP的诱导是潜在的候选测定。选择COS-7细胞是因为其缺乏表型显著水平的内源RAMP、CT受体和CL(13-15)。没有所述受体组分的显著背景表达，可以精确地比较指定的受体亚型。
我们进行了4种测定。
1.通过在不存在RAMP1、RAMP2或RAMP3时过表达CTR而对CTR特异的测定。
2.通过在存在RAMP1但不存在RAMP2或RAMP3时过表达CTR而对激活胰淀素受体特异的测定。
3.通过在存在RAMP2但不存在RAMP1或RAMP3时过表达CTR而对激活胰淀素受体特异的测定。
4.通过在存在RAMP3但不存在RAMP1或RAMP2时过表达CTR而对激活胰淀素受体特异的测定。
化合物对cAMP的显著诱导与载剂对照相比超过50％(存在或不存在1mMIBMX)，则该化合物被认为是特定受体的特异诱导剂。
已知多种物种中不同剪接变体的降钙素受体序列和胰淀素受体序列(16；16-35)。
为检测受体激动作用，将细胞在75cm2培养瓶中培养至80％汇合度。使用7.8μL的FuGene6试剂，用300ng的pcDNA-CTR构建体和1μg的pcDNA-RAMP-1、pcDNA-RAMP-2或pcDNA-RAMP-3对细胞进行共转染。48小时之后，用胰酶处理将细胞消化下来，500×g离心，重悬于环化酶缓冲液(含有0.1％(重量/体积)BSA和1mMIBMX的DMEM)中。将细胞(5×105)等分入1.5mlEppendorf管中，并在37℃预孵育20分钟。随后，在不存在(基础的)或存在浓度递增的激动剂的情况下孵育细胞18分钟。肽。该系统中包括毛喉素作为阳性对照来测定最大cAMP积累。孵育后，4℃下在Beckman微型离心机中以12,000×g离心反应物1min。用PBS清洗细胞并再次离心。用0.5ml纯乙醇提取cAMP。蒸发样品至干燥，并在缓冲液(50mM醋酸钠，1mM茶碱)中重构。使用检测cAMP的特异性测定来测定cAMP水平。例如，根据EIA试剂盒的操作方案(AmershamBiosciences，US)对细胞内的第二信使cAMP进行定量，或者，样品经乙酰化之后用RIA法定量。在4℃下，用1ml分离缓冲液(100mM磷酸氢二钾、100mM磷酸钾，pH7.4，含有0.25％(重量/体积)BSA和0.2％(重量/体积)木炭)提取未结合的放射活性物15分钟，并通过4,000×g离心15分钟而与抗体结合的放射活性物分离。吸出上清，用Packardγ-计数器对沉淀进行计数。
文献中已经大量描述了用于鉴定GPCR激动剂的可选测定技术，最近的文献包括1-12，这些技术可由本领域专业人员实施。
实施例4：在健康的Sprague-Dawley大鼠和用卵巢切除术诱导体重增加的 Sprague-Dawley大鼠中，口服鲑鱼降钙素均减少体重增加
总共40只大鼠被分成4组，两个双侧卵巢切除(OVX，ovariectomy)组和两个正常组。以剂量为150mg/kg/天的5-CNAC处理，或联合该剂量的5-CNAC与剂量为2mg/kg/天的鲑鱼降钙素处理正常和OVX组的动物，1天2次给药，持续7或8周，其间每周一次监测动物的体重。
给药的第一天为第0天。动物以5ml/kg口服给药。在整个研究期间，一天两次施用化合物溶液，第一次给药在早晨7:00，第二次给药为8小时以后(下午3至4点间)。通过用连接到5ml注射器上的胃管口服灌胃给药。自由取食。
如图8所示，正常大鼠一天两次口服鲑鱼降钙素的处理使自然体重增加(处理期间对对照组观察到的体重增加)的减少。另外，如图9所示，在OVX组中，口服鲑鱼降钙素处理部分防止了OVX诱导的体重增加。因此，当每天两次给药时口服鲑鱼降钙素处理使体重增加减少，该作用很可能通过食欲调节来介导。
通过对比类似的每天给药一次的研究，显示了与对照相比没有体重的降低。对总共20只大鼠进行双侧卵巢切除(OVX，ovariectomize)。每天一次以剂量为150mg/kg/天的单独的5-CNAC处理，或联合该剂量的5-CNAC与剂量为2mg/kg/天的降钙素处理动物8周，其间每周一次监测动物的体重。同样自由摄食。
给药第一天为第0天。动物以5ml/kg口服给药。在整个研究期间，每天早晨7:00至8:00之间，使用连接到5ml注射器上的胃管口服灌胃施用一次化合物溶液。
如图10所示，当对动物每天给药一次时，未观察到对OVX诱导的体重增加的影响，这与来自实施例1中的数据很好的对应，其中当其每天处理一次时，DIO大鼠中没有显示体重增加。
实施例5：通过II型胶原重吸收的降低证明与SNAC一起配制的鲑鱼降钙素是可生 物利用的
为检测观察到的口服sCT的作用是否特异性地依赖于含有载体5-CNAC的口服制剂，用两种口服载体(5-CNAC和SNAC)进行了对比研究。其中，通过CTX-II测得的软骨重吸收的降低被用作口服生物利用度的替代标志物，并因而作为血糖控制有效性的替代标志物。
对禁食的大鼠口服给予单独的载体(5-CNAC或SNAC)、单独的sCT或与载体(5-CNAC或SNAC)联合的sCT。在基线、口服给药后1、3和6小时取血液样品，分离血清。随后测量血清样品中的CTX-II的浓度。
根据体重将大鼠随机分成五组并禁食过夜。向大鼠口服给以单独的载体(150mg/kg)(5-CNAC或SNAC)、单独的鲑鱼降钙素(2mg/kg)或一起给以载体(150mg/kg)和鲑鱼降钙素(2mg/kg)。在基线、口服给药后1、3和6小时尾静脉取血。从血液样品中分离血清，并在未稀释的血清样品中测量CTX-II浓度。图11中，图A至D显示了指定时间点的CTX-II浓度。图12显示所有处理组随时间的联合结果。每组包括6只动物。用单因素ANOVA和Bonferroni多对比检验进行统计学分析，以校正多次检测。误差线表示平均值的标准误(SEM)。星号表示：**＝p＜0.01，***＝p＜0.001。
发现口服给药后1小时，与单独的载体的两组相比，单独的sCT、与5-CNAC联合的sCT和与SNAC联合的sCT都显著地降低了CTX-II浓度(图11，图B)。口服给药后3小时和6小时，发现单独给以sCT使CTX-II的浓度恢复至基线水平(图11中的图C和D，和图12)。相反，当sCT与5-CNAC或SNAC一起给药时，在口服给药后3和6小时都观察到了CTX-II浓度的继续降低(图11中的图C和D，和图12)。
一个重要的观察结果是：与5-CNAC联合的sCT和与SNAC联合的sCT都同样良好地降低CTX-II水平，且在任何指定的时间点这两个组之间都没有观察到显著性差异。这些结果说明所报道的sCT的作用并不特异性地依赖于5-CNAC。可以得到这样的结论：口服sCT的显著长效作用是依赖于包含载体的口服制剂的。然而，如图11和12所示，与sCT联合的两种不同的口服载体(5-CNAC和SNAC)产生等效的结果。这说明所观察到的sCT的作用并不限于一种特定的口服剂型，且预计该发现可扩展到sCT的血糖降低作用上。
在本说明书中，除非另外明确地指出，使用词语“或”的意义是当满足所陈述条件之一或都满足时，返回一个真值的操作，而不是要求只满足一个条件的“排他的或”的操作。使用的词语“包含”的意义是“包括”而不是“由......组成”。上文提及的所有现有技术通过参考并入本文。本文中未指明的任何在先发表的文献应被理解为所述文献的教导在澳大利亚或其它地区在其发表之日为公知常识。
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Claims (7)

1.经肠制剂在制备用于降低不期望的高空腹血清葡萄糖水平的药物中的用途，所述制剂包含活性化合物，其中所述活性化合物为下式所示的化合物：
CSNLSTCVLGX5LX7QX9LHKLQTYPX18TNTGX22GTP
其中
X5是T或K；
X7是T或S；
X9是D或E；
X18是Q或R；
X22是V、S或A。
2.权利要求1的用途，其中所述药物被配制用于口服施用至消化道。
3.权利要求1的用途，其中所述活性化合物是降钙素。
4.权利要求3的用途，其中所述降钙素是鲑鱼降钙素。
5.权利要求1的用途，其中所述活性化合物与载体一起配制以用于口服施用。
6.权利要求5的用途，其中所述载体增加所述活性化合物的口服生物利用度。
7.权利要求5的用途，其中所述载体包括5-CNAC、SNAD或SNAC。
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