CN102349936B - 一种三七总皂苷冻干粉及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种三七总皂苷冻干粉及其制备方法。本发明提供了一种性能更加优良的三七总皂苷冻干粉。无论使用注射用水、氯化钠注射液还是葡萄糖注射液，都可以快速溶解本发明的三七总皂苷冻干粉，且溶解速度快、不溶性微粒少。另外，使用本发明优选的技术方案所制备三七总皂苷冻干粉，不会产生大量的细粉，不会和容器壁之间发生粘连。本发明还提供了一种制备上述三七总皂苷冻干粉的方法。

Description

一种三七总皂苷冻干粉及其制备方法

本申请是申请日为2009年01月19日，申请号为200910000859.1的分案申请。

技术领域

本发明属于中药技术领域，更具体地说，是涉及一种三七总皂苷冻干粉及其制备方法。

背景技术

众所周知，三七总皂苷冻干粉针剂在使用之前需要使用溶剂溶解。有的产品使用注射用水或氯化钠注射液作为溶剂。但是这种用法存在溶解速度慢，不溶性微粒多的问题，因此使得用药风险增加。

具体而言，静脉注射剂中的不溶性微粒是肉眼看不见且不可代谢的有害粒子，直接关系到药品的质量。含大量不溶性微粒的输液进入人体可直接造成热原质样反应，主要表现为体温升高、寒战、心跳加快、呼吸急促等症状，严重可导致休克；此外，还会刺激发炎，反复刺激可使炎症部位形成肉芽肿。

有的产品为了保证三七总皂苷冻干粉的溶解效果，以含有一定比例乙醇的灭菌注射用水溶液为专用溶剂。

上述专用溶剂的使用虽然在一定程度上保证了三七总皂苷冻干粉的溶解效果，但是，由于该专用溶剂中含有一定量的乙醇，导致其无法用于对乙醇过敏的患者。另外，专用溶剂的使用也给医护人员增加了工作负担，例如，在使用该专用溶剂之前，通常需要确定患者是否对乙醇过敏。

因此，有必要开发出一种新的三七总皂苷冻干粉针剂，该冻干粉针剂在以注射用水、氯化钠注射液和葡萄糖注射液作为溶剂时，均具有理想的溶解效果。

值得注意的是，在实际使用的过程中，三七总皂苷冻干粉的溶解效果除了和冻干粉的溶解性以及所用的溶剂有关之外，还和冻干粉在容器中的性状和分布有关。理想的情况下，三七总皂苷冻干粉针剂中的冻干粉应当是一个基本完整的块状物，并具有一定的强度，在正常的运输条件下，不会粉碎成细粉。反之，如果三七总皂苷冻干粉在加入溶剂进行溶解之前有大量的细粉存在，则这些细粉会在整个容器中随机分布，并有可能粘连在容器的橡胶塞上。这种情况会给溶解工作带来一定的困难。

另外，在制备三七总皂苷冻干粉时，还应当尽量防止冻干粉和容器壁之间发生粘连。粘连情况的发生会给药品的外观带来不良影响。

发明内容

因此，本发明一个目的在于提供一种性能更加优良的三七总皂苷冻干粉。无论使用注射用水、氯化钠注射液还是葡萄糖注射液，都可以快速溶解本发明的三七总皂苷冻干粉，且溶解速度快、不溶性微粒少。另外，使用本发明优选的技术方案所制备三七总皂苷冻干粉，在正常的运输和储存过程中，不会产生大量的细粉，而且不会和容器壁之间发生粘连。

本发明另一个目的在于提供一种制备上述三七总皂苷冻干粉的方法。

本发明的组合物配方为：三七总皂苷及辅料甘露醇和氯化钠，以重量百分比计(如无特殊说明，本发明的所有百分数均以重量计)，其中甘露醇和氯化钠的含量均为三七总皂苷重量的2％～20％，优选2％～10％，再优选2％～4％，最佳配比是甘露醇的含量为三七总皂苷重量的2％，氯化钠的含量为三七总皂苷重量的4％。

上述组合物的制备方法为：称取处方量的三七总皂苷，溶于总配液量70％的75℃注射用水中，搅拌使其溶解，再加入氯化钠，溶解后加入甘露醇，搅拌至完全溶解，加入药用炭煮沸15分钟，过滤，滤液加注射用水至按三七总皂苷计0.05～0.40g/ml，调节pH值至6.5～7.0。取样检测合格后，精滤，用0.22μm滤器循环过滤，检测合格后，灌装，半压塞，送入冷冻真空干燥机，先快速冷至-37～-39℃，保温0.5～2小时，然后逐步升温，升华干燥，至成品温度达到22～28℃，压塞，取出制品，扎盖，包装，检验合格得成品。

具体实施方式

下面结合具体实施方式对本发明进行进一步的详细描述。本领域的技术人员应当明白，以下实施例仅是用于解释而不是限定本发明，根据本发明权利要求中限定的实质和范围所作的等同变化，仍属于本发明所涵盖的范围。

实施例1：三七总皂苷的提取

将三七粉碎成粗粉，分别用2、1.5、1.5倍量乙醇回流提取3次，每次0.5～5h，优选1.5h，合并滤液，回收乙醇，加水稀释，放置12小时，过滤，通过大孔吸附树脂柱(树脂用量为药材的0.25～6倍，优选2倍)，先用水洗2个保留体积，然后用50％～95％乙醇溶液(V/V，下同)，优选70％乙醇溶液，洗脱4个保留体积，收集乙醇洗脱液，脱色，回收乙醇、浓缩、减压干燥、粉碎，即得三七总皂苷提取物。

实施例2：三七总皂苷冻干粉的制备

按以下配方制备三七总皂苷冻干粉：

配方1：三七总皂苷200g，甘露醇4g，氯化钠8g，加入注射用水后的总体积为2000ml，分装成1000支。每支含三七总皂苷0.2g。

配方2：三七总皂苷400g，甘露醇16g，氯化钠8g，加入注射用水后的总体积为2000ml，分装成1000支。每支含三七总皂苷0.4g。

配方3：三七总皂苷200g，甘露醇4g，氯化钠4g，加入注射用水后的总体积为2000ml，分装成1000支。每支含三七总皂苷0.2g。

配方4：三七总皂苷100g，甘露醇4g，氯化钠4g，加入注射用水后的总体积为2000ml，分装成1000支。每支含三七总皂苷0.1g。

配方5：三七总皂苷400g，甘露醇20g，氯化钠20g，加入注射用水后的总体积为2000ml，分装成1000支。每支含三七总皂苷0.4g。

配方6：三七总皂苷100g，甘露醇7g，氯化钠7g，加入注射用水后的总体积为2000ml，分装成1000支。每支含三七总皂苷0.1g。

配方7：三七总皂苷200g，甘露醇20g，氯化钠20g，加入注射用水后的总体积为2000ml，分装成1000支。每支含三七总皂苷0.2g。

配方8：三七总皂苷400g，甘露醇60g，氯化钠60g，加入注射用水后的总体积为2000ml，分装成1000支。每支含三七总皂苷0.4g。

配方9：三七总皂苷200g，甘露醇40g，氯化钠40g，加入注射用水后的总体积为2000ml，分装成1000支。每支含三七总皂苷0.2g。

对照样品：三七总皂苷200g，加入注射用水后的总体积为2000ml，分装成1000支。每支含三七总皂苷0.2g。

根据上述配方，先称取处方量的三七总皂苷，溶于总配液量70％的75℃注射用水中，搅拌使溶解，再加入氯化钠，溶解后加入甘露醇，搅拌至完全溶解，加入药用炭煮沸15分钟，过滤，滤液加注射用水至全量(总配液量)，调节pH值至6.5～7.0。取样检测合格后，精滤，用0.22μm滤器循环过滤，检测合格后，灌装，半压塞，送入冷冻真空干燥机，先快速冷至-37～-39℃，保温0.5～2小时，然后逐步升温，升华干燥，至成品温度达到22～28℃，压塞，取出制品，扎盖，包装，检验合格得成品。

实施例3：溶解速度试验

取实施例2中制备出的三七总皂苷冻干粉，每一种配方的冻干粉分别用注射用水、氯化钠注射液或葡萄糖注射液溶解，其中每支冻干粉所用的溶剂体积为8ml。加入溶剂后立即盖上瓶塞，轻轻振摇，然后静置观察冻干粉的溶解情况。其中溶解时间从加入溶剂时开始计算，至溶液呈均一的澄明状态时止。并以10支冻干粉作为一组，计算溶解时间的平均值。各种配方制备的冻干粉及对照样品的溶解速度如表1所示：

表1：三七总皂苷冻干粉配方1-9及对照样品的溶解速度

	注射用水	氯化钠注射液	葡萄糖注射液
				配方1	11秒	9秒	9秒
配方2	16秒	15秒	14秒
				配方3	17秒	12秒	13秒
配方4	13秒	10秒	11秒
				配方5	23秒	20秒	22秒
配方6	25秒	23秒	23秒
				配方7	22秒	19秒	20秒
配方8	34秒	30秒	32秒
				配方9	37秒	33秒	35秒
对照样品	62秒	58秒	57秒

从上表可以看出，根据配方1-9制备的三七总皂苷冻干粉，其溶解速度明显优于对照样品。且在配方1-9中，配方1-4促进溶解的效果明显优于其他配方。

实施例4：不溶性微粒试验

试验方法：

取供试品，用水将容器外壁洗净，小心开启瓶盖，精密加入适量微粒检查用水。根据药品的实际使用情况，本实施例选取的微粒检查用水的体积为8ml和250ml。其中8ml是在冻干粉容器(西林瓶)中溶解药粉的最大适宜容积，250ml是实际临床应用的常用配液体积。然后小心盖上瓶盖，缓缓振摇使内容物溶解，超声处理(80～120W)30秒脱气或静置适当时间脱气，小心开启容器，直接将供试品容器置于取样器上，不加搅拌，由微粒检测仪直接抽取适量溶液(以不吸入气泡为限)，测定并记录数据；另取至少2个供试品，同法测定。第一个供试品的数据不计，取后续测定结果的平均值计算。

结果判定：

每个供试品容器中含粒径大于10μm的不溶性微粒不得过6000粒，含粒径大于25μm的微粒不得过600粒。例如，当供试品用8ml微粒检查用水溶解时，应当计算8ml溶液中含有的微粒总量。而当供试品用250ml微粒检查用水溶解时，则应当计算250ml溶液中含有的微粒总量。

表2：三七总皂苷冻干粉配方1-9与对照样品溶液中微粒的数目(单位：粒)

从上表可以看出，根据配方1-9制备的三七总皂苷冻干粉，其微粒的含量均符合要求。而对照样品在用250ml微粒检查用水溶解时，其微粒含量明显不符合要求。

本领域的技术人员应当明白，上述对不溶性微粒数量的要求仅是一种基本要求。理想的情况下，不溶性微粒的数量越低，用药就越安全。由于很多患者通常需要长期大量地使用三七总皂苷冻干粉，因此不溶性微粒的数量显然越低越好。

值得注意的是，根据配方1-4制备的三七总皂苷冻干粉，其微粒的含量明显低于由配方5-9制备的三七总皂苷冻干粉。其中配方4和配方5相比，虽然甘露醇和氯化钠的用量非常接近，但是微粒的含量却相差1倍左右，且配方4的外观明显优于配方5的外观。这种情况有些出乎研究人员的预料。当然，在所有的配方中，无论从微粒数量还是外观看，配方1的效果都是最好的。

实施例5：安全性试验

选取配方1进行以下各项安全性试验

1)急性毒性试验

参照《中药药理研究方法学》急性毒性试验进行，采用常规预试，测出产品腹腔和尾静脉注射的最大致死量和最小致死量，取130只小鼠随机分为13组，每组10只，雌雄各半，给小鼠尾静脉和腹腔注射不同剂量的产品溶液，观察小鼠的中毒症状，采用孙氏综合法计算LD50值。结果发现，在给药后不同时间内，小鼠出现自由活动减少，濒死时呼吸频率增快、张口呼吸、鼻翼扇动等中毒症状。腹腔注射的LD50为743.53mg/kg；尾静脉注射的LD50为461.21mg/kg。

2)过敏试验

用氯化钠注射液将产品稀释为每1ml中含三七总皂苷20mg的溶液，给豚鼠腹腔注射。每次0.5ml/只，隔日一次，共三次。给药后第14天及第21天分别静脉注射该溶液1.0ml/只，结果均未见豚鼠有过敏反应。给予5％新鲜蛋清的豚鼠在给予蛋清后的第14天及第21天，在分别静脉注射蛋清后均出现过敏反应，且皆于15min内死亡。这些结果表明，本产品的过敏反应检查符合规定。

3)溶血与凝聚试验

参照《中国药典》2005年版一部附录XVIII相关内容进行试验，结果表明，本产品在3小时内对家兔红细胞无溶血作用和红细胞凝集反应。

4)血管刺激试验

参照《中药新药研究的技术要求》相关内容进行试验，采用同体左右耳对照，取3只家兔，左耳由耳缘静脉注射本产品5.0ml(25mg)/只，右耳给予等容量的氯化钠注射液，每日一次，连续三日。结果表明，家兔耳缘静脉给药部位肉眼观察无明显变化，病理切片显微镜检显示，距注射部位1cm处血管内皮连续、完整，未见增生、肿胀，血管周围组织未见炎性细胞浸润及坏死现象，而且管腔内无血栓形成。这些结果表明，本产品无血管刺激反应。

5)异常毒性试验

参照《中国药典》2005年版一部附录XVIII相关内容进行试验，小鼠尾静脉注射本产品溶液0.5ml(2.5mg)/只，结果表明，5只小鼠均未发生死亡及其他异常表现。

6)降压物质检查

参照《中国药典》2005年版一部附录XVIII相关内容进行试验，用氯化钠注射液将本产品稀释成每1ml中含三七总皂苷20mg的溶液，剂量按猫体重每1kg静脉注射1ml，结果表明，本产品的降压物质检查符合规定。

上述试验结果表明，本产品的应用安全符合规定。

对本产品进行6个月的加速试验，将产品在温度40℃±2℃，相对湿度75％±5％条件下存放6个月，结果表明，各项检测指标均未见显著变化，均符合规定。这说明本产品的稳定性符合要求。

Claims (3)

1.一种三七总皂苷冻干粉，由三七总皂苷、甘露醇和氯化钠组成，以重量百分比计，其中甘露醇和氯化钠的含量均为三七总皂苷重量的2%～4%；其由以下方法制备的：先称取处方量的三七总皂苷，溶于总配液量70%的75℃注射用水中，搅拌使其溶解，再加入氯化钠，溶解后加入甘露醇，搅拌至完全溶解，加入药用炭煮沸15分钟，过滤，滤液加注射用水至全量，调节pH值至6.5～7.0，再用0.22μm滤器循环过滤，然后灌装，半压塞，送入冷冻真空干燥机，先快速冷至-37～-39℃，保温0.5～2小时，然后逐步升温，升华干燥，至成品温度达到22～28℃时，压塞。

2.根据权利要求1所述的三七总皂苷冻干粉，以重量百分比计，其中甘露醇的含量为三七总皂苷重量的2%，氯化钠的含量为三七总皂苷重量的4%。

3.根据权利要求1或2所述的三七总皂苷冻干粉，其是由以下方法制备的：先称取处方量的三七总皂苷，溶于总配液量70%的75℃注射用水中，搅拌使其溶解，再加入氯化钠，溶解后加入甘露醇，搅拌至完全溶解，加入药用炭煮沸15分钟，过滤，滤液加注射用水至全量，调节pH值至6.5～7.0，再用0.22μm滤器循环过滤，然后灌装，半压塞，送入冷冻真空干燥机，先快速冷至-37～-39℃，保温0.5～2小时，然后逐步升温，升华干燥，至成品温度达到22～28℃时，压塞。