CN102349416A

CN102349416A - 一种制备金针菇液体菌种的简易方法

Info

Publication number: CN102349416A
Application number: CN 201110264922
Authority: CN
Inventors: 陈力力; 刘红; 勒磊; 陈冬纯
Original assignee: Hunan Agricultural University
Current assignee: Hunan Agricultural University
Priority date: 2011-09-08
Filing date: 2011-09-08
Publication date: 2012-02-15
Anticipated expiration: 2031-09-08
Also published as: CN102349416B

Abstract

一种制备金针菇液体菌种的简易方法，是采用无菌操作法将制备的菌丝体悬液接种至装有灭菌的液体菌种培养基的三角瓶中，然后将三角瓶放置在置于恒温培养箱中的磁力搅拌器上进行恒温培养，形成的黄色小菌球即为液体菌种。本发明利用培养微生物的常规设备进行金针菇液体菌种的制备，便于菇农进行金针菇液体菌种的批量生产；以液体菌种代替固体菌种进行金针菇子实体的栽培，可以缩短发菌时间、降低生产成本、提高生产效率，满足市场的大量需求。

Description

一种制备金针菇液体菌种的简易方法

技术领域

本发明涉及一种金针菇液体菌种的制备，特别是公开一种采用简单设备进行金针菇液体菌种快速培养的方法，适用于菇农进行金针菇液体菌种的批量生产。

背景技术

金针菇(Flammulina velutipes)不仅含有蛋白质、氨基酸、维生素、矿质元素等多种营养物质，具有营养功能，而且，富含多糖、多肽、生物碱、苷类、蒜菇素、金针菇原素、冬菇素等多种生理活性物质，具有保健、防病抗癌功能，还可促进儿童健康成长和智力发育。利用金针菇生产保健食品、功能食品已为世人瞩目。

随着国内外市场对金针菇产品需求的增长，其生产方式由传统的固体栽培、季节性生产模式，逐渐向设施化、工厂化、周年化、规模化生产发展。生产方式的变革使得采用制备的金针菇液体菌种栽培子实体成为发展趋势。但是金针菇子实体的栽培具有某种特殊性，相对于细菌、霉菌等微生物发酵产品的生产而言，发酵周期长、商品价值也不太高。如果建立工业微生物发酵生产设备来进行其液体菌种生产，技术要求高、设备利用率低、投资大，光配套的水、电、气、汽设备就需要几十万元以上的资金，从生产成本来看不合算。然而液体菌种的生产有其先进的地方，潜在着明显的优势，因此寻找投资少、适合个体菇农使用的金针菇液体菌种的简易制备方法具有现实意义，简便的液体菌种培养方法成为关注的热点。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是：针对上述现有技术的不足，提供一种制备金针菇液体菌种的简易方法，一种利用培养微生物的常规设备进行金针菇液体菌种制备的方法，可克服微生物液体深层培养设备昂贵、操作复杂的缺陷，便于菇农进行金针菇液体菌种的批量生产。

为了解决上述现有技术问题，本发明所采用的技术方案是：一种制备金针菇液体菌种的简易方法，该方法为：采用无菌操作法将制备的金针菇菌丝体悬液接种至装有灭菌的液体菌种培养基的三角瓶中，三角瓶中培养基装量为30-50％，悬液接种量为10-15％，然后将三角瓶放置在置于25-26℃恒温培养箱中的磁力搅拌器上，调节转速为180-200转/分，25-26℃恒温培养7-9天，形成的黄色小菌球(见图3)即为液体菌种。

上述金针菇菌丝体悬液的制备方法为微生物的基本操作方法，为现有技术，是将保藏的金针菇菌种用PDA固体培养基进行试管斜面培养，试管大小为180mm×18mm，25-26℃恒温培养6-7天，待形成丰满的白色菌丝，无杂菌生长后，加入无菌生理盐水，用刮铲刮下菌丝体，制成菌丝体悬液，其中，无菌生理盐水的加入量为每180mm×18mm的试管制备的斜面菌种加无菌生理盐水8-12ml；

上述金针菇液体菌种培养基的配制按常规方法配制，每升含：可溶性淀粉40g、蛋白胨5g、七水硫酸镁0.5g、磷酸二氢钾1g、葡萄糖10g、维生素B10.05mg、及维生素B20.05mg，pH值6.8。上述提及的液体菌种培养基的灭菌是指将配制的培养基采用不锈钢手提式压力灭菌锅于121℃灭菌30分钟。

采用本发明方法培养的液体菌种与常规培养的固体菌种进行栽培试验：

以棉籽壳为主要原料，按常规方法制备栽培袋，采用熟料袋栽法进行菌种栽培试验。每袋装培养料干重400g，灭菌后，分为2组，在无菌条件下，一组接种本发明方法培养的液体菌种，每袋接种量5％，另一组接种常规培养的固体菌种，每袋接种18-20g。

其栽培流程如下：拌料——装袋——消毒灭菌——接种——菌丝培养——搔菌——出菇——催菇生长——采收。

栽培过程中首先将培养温度控制在18～20℃。湿度控制在70％～80％，并定期进行通风换气。菌丝长满袋后分开培养(因各袋菌丝生长情况不一样)。长满后调节室内温度13～14℃、相对湿度85％～90％进行培养。待子实体萌发后，菌盖直径为1mm左右、柄长为3～5cm时，将栽培袋移入室温为4℃的控制室，进行遮光处理。当菌柄长12～15cm。菌盖0.5～1cm时即可采收。

观测记录栽培袋内菌丝生长及出菇情况，并统计头潮菇产量、总产量、出菇时间、记录菌柄菌盖直径及测定生物学效率。(生物学效率＝子实体鲜重/培养料干重×100％)。结果见下表1：

表1本发明方法培养的液体菌种与常规培养的固体菌种的栽培数据对照表

由上表并结合图4可知，栽培试验时，虽然采用本发明方法培养的液体菌种与常规培养的固体菌种栽培得到的金针菇的外形没有明显的区别，但采用本发明方法培养的液体菌种比常规培养的固体菌种的头潮菇现蕾时间和金针菇子实体长满时间要短得多，其袋产量和生物学效率也比固体菌种要高，而本发明方法培养液体菌种的设备极其简单，仅需用到恒温培养箱、磁力搅拌器、及三角瓶(见图1及图2)，说明采用培养微生物的常规设备培养出的液体菌种进行栽培，不仅能得到常规固种栽培的金针菇子实体，而且产量也要相对高得多。

因此，利用培养微生物的常规设备进行金针菇液体菌种制备的方法，克服了微生物液体深层培养设备昂贵、操作复杂的缺陷，便于菇农进行金针菇液体菌种的批量生产；以液体菌种代替固体菌种进行金针菇子实体的栽培，可以缩短发菌时间、降低生产成本、提高生产效率，可满足市场的大量需求。

附图说明：

图1是本发明培养方法采用的培养箱示意图。

图2是本发明培养方法所采用的设备(培养箱+搅拌器+三角瓶)示意图。

图3是本发明方法培养的液体菌种示意图。

图4是栽培试验中出菇阶段显示的液体菌种与固种菌种的栽培袋示意图，

其中：A表示固体菌种；B表示液体菌种。

具体实施方式：

制备金针菇菌丝体悬液：将保藏的金针菇菌种用180mm×18mm的PDA固体培养基进行试管斜面培养，25℃培养7天形成丰满的白色菌丝后加入10ml无菌生理盐水，用刮铲刮下菌丝体，制成菌丝体悬液；

制备金针菇液体菌种培养基：每升培养基中含可溶性淀粉40g、蛋白胨5g、七水硫酸镁0.5g、磷酸二氢钾1g、葡萄糖10g、维生素B10.05mg、及维生素B20.05mg，pH值6.8。并采用不锈钢手提式压力灭菌锅于121℃灭菌30分钟。

实施例1

采用无菌操作法将制备的菌丝体悬液接种至装有已灭菌的液体菌种培养基的三角瓶中，三角瓶中培养基装量为30％，悬液接种量为10％，然后将三角瓶放置在置于25℃恒温培养箱中的磁力搅拌器上，调节转速为180转/分，25℃恒温培养9天，形成的黄色小菌球即为液体菌种。

实施例2

采用无菌操作法将制备的菌丝体悬液接种至装有已灭菌的液体菌种培养基的三角瓶中，三角瓶中培养基装量为40％，悬液接种量为12％，然后将三角瓶放置在置于25℃恒温培养箱中的磁力搅拌器上，调节转速为190转/分，25℃恒温培养8天，形成的黄色小菌球即为液体菌种。

实施例3

采用无菌操作法将制备的菌丝体悬液接种至装有已灭菌的液体菌种培养基的三角瓶中，三角瓶中培养基装量为50％，悬液接种量为15％，然后将三角瓶放置在置于26℃恒温培养箱中的磁力搅拌器上，调节转速为200转/分，26℃恒温培养7天，形成的黄色小菌球即为液体菌种。

Claims

1.一种制备金针菇液体菌种的简易方法，其特征在于：该方法为：采用无菌操作法将制备的金针菇菌丝体悬液接种至装有灭菌的液体菌种培养基的三角瓶中，三角瓶中培养基体积装量为30-50％，悬液接种量为10-15％，然后将三角瓶放置在置于25-26℃恒温培养箱中的磁力搅拌器上，调节转速为180-200转/分，25-26℃恒温培养7-9天，形成的黄色小菌球即为液体菌种。

2.如权利要求1所述的一种制备金针菇液体菌种的简易方法，其特征在于：所述金针菇菌丝体悬液的制备方法是将保藏的金针菇菌种用PDA固体培养基进行试管斜面培养，25-26℃恒温培养6-7天，待形成丰满的白色菌丝，无杂菌生长后，加入无菌生理盐水，用刮铲刮下菌丝体，制成菌丝体悬液，其中，无菌生理盐水的加入量为每180mm×18mm的试管制备的斜面菌种加无菌生理盐水8-12ml。

3.如权利要求1所述的一种制备金针菇液体菌种的简易方法，其特征在于：所述液体菌种培养基每升含：可溶性淀粉40g、蛋白胨5g、七水硫酸镁0.5g、磷酸二氢钾1g、葡萄糖10g、维生素B10.05mg、及维生素B20.05mg，pH值6.8。