CN102343113B - 用于组织修复的丝素蛋白管状支架的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种用于组织修复的丝素蛋白管状支架的制备方法,包括:将家蚕熟丝线编织成的管状织物装在模具上;向家蚕丝素蛋白溶液中加入亲水性胶黏剂,得到混合溶液;将所述装有管状织物的模具浸泡在所述混合溶液中,冷冻处理后取出模具,得到用于组织修复的丝素蛋白管状支架。所述管状织物在所述丝素蛋白管状支架中起支撑层的作用,能够提高丝素蛋白管状支架的生物力学性能,而丝素蛋白具有良好的生物相容性,使得所述丝素蛋白管状支架具有良好的生物相容性。因此,本发明提供的丝素蛋白管状支架具有良好的生物相容性和良好的生物力学性能,实验结果表明,本发明提供的丝素蛋白管状支架的抗拉强度≥600kPa,扯断伸长率≥20%。
Description
技术领域
本发明涉及组织修复材料技术领域,尤其涉及一种用于组织修复的丝素蛋白管状支架的制备方法。
背景技术
在再生医学和组织工程领域,多种器官、组织的损伤可应用管状支架作为修复材料,如人工神经管、人工气管、人工血管等。目前,医学上应用于人工血管的管状支架主要由聚氨酯纤维、涤纶或膨体聚四氟乙烯制成,但是,聚氨酯纤维容易形成血栓,远期通畅率较差;而涤纶和膨体聚四氟乙烯疏水性强、生物相容性差,会影响器官或组织的愈合,因此,生物相容性较好的材料作为管状支架逐渐成为研究热点。
家蚕蚕丝是家蚕合成与分泌的动物蛋白,其主要成分为丝素蛋白,约占70wt%~80wt%。丝素蛋白不仅具有独特的微纤维结构和一级结构,而且具有良好的力学性能和生物相容性,在药物释放载体、细胞外基质、生物传感器、人工韧带、人工肌腱、隐形眼镜、人工皮肤、组织修复材料等方面具有良好的应用前景。
现有技术已经公开了多种以家蚕丝素蛋白为原料制备管状组织修复支架的方法,如美国Kaplan研究组将丝素蛋白溶解后直接成型为管状,或通过静电纺成管状,或通过静电射形成管状后,将所述管状材料冷冻干燥制作小口径血管修复材料(Biomaterials,2007(28):5271-5279;Biomaterials,2008(29):4650-4657;Biomaterials,2008(29):2217-2227;Biomaterials,2009(30):3213-3223);国内也公开了通过静电纺制备丝素蛋白单层管状材料的方法(International Journal of Biological Macromolecules,2009(45):504-510),但是目前公开的丝素蛋白管状支架均由丝素蛋白单层材料构成,其生物力学性能较差,抗拉强度和扯断伸长率都较低。
发明内容
有鉴于此,本发明所要解决的技术问题在于提供一种用于组织修复的丝素蛋白管状支架的制备方法,通过本发明提供的方法得到的丝素蛋白管状支架具有良好的生物力学性能,尤其具有较高的抗拉强度和扯断伸长率。
本发明提供了一种用于组织修复的丝素蛋白管状支架的制备方法,包括:
将家蚕熟丝线编织成的管状织物装在模具上;
向家蚕丝素蛋白溶液中加入亲水性胶黏剂,得到混合溶液;
将所述装有管状织物的模具浸泡在所述混合溶液中,冷冻处理后取出模具,得到用于组织修复的丝素蛋白管状支架。
优选的,所述管状织物的内径为1mm~16mm。
优选的,所述管状织物的厚度为0.3mm~1.0mm。
优选的,所述管状织物由纬编方式编织得到。
优选的,所述家蚕丝素蛋白溶液的质量浓度为1.0%~15%。
优选的,所述亲水性胶黏剂与所述家蚕丝素蛋白的质量比为0.2~3。
优选的,所述亲水性胶黏剂为聚乙二醇缩水甘油醚。
优选的,所述冷冻处理的温度为-80℃~-4℃。
优选的,所述冷冻处理的时间为0.5h~48h。
优选的,所述家蚕丝素蛋白溶解液按照以下步骤制备:
将家蚕生丝置于碳酸钠水溶液中煮沸脱胶,得到家蚕丝素蛋白;
将所述家蚕丝素蛋白溶解于溶剂中,得到家蚕丝素蛋白溶解液,所述溶剂为氯化钙、乙醇和水的混合溶液。
与现有技术相比,本发明将家蚕丝素蛋白溶液与亲水性胶黏剂混合,得到混合溶液;然后将家蚕熟丝线编织成的管状织物装在模具上并浸泡在混合溶液中,冷冻处理后取出模具,即可得到丝素蛋白管状支架。在本发明提供的方法中,家蚕熟丝线织成的管状织物装在模具上并浸泡在混合溶液中进行冷冻处理时,家蚕丝素蛋白在亲水性胶黏剂的作用下附着于管状织物中并在管状织物的内外表面凝固形成膜,得到具有三层结构的丝素蛋白管状支架。所述管状织物在所述丝素蛋白管状支架中起支撑层的作用,能够提高丝素蛋白管状支架的生物力学性能,而丝素蛋白具有良好的生物相容性,使得所述丝素蛋白管状支架具有良好的生物相容性。实验结果表明,本发明提供的丝素蛋白管状支架的抗拉强度≥600kPa,扯断伸长率≥20%。同时,本发明提供的丝素蛋白管状支架中,家蚕熟丝线织成的管状织物具有弹性,能够起到类似于天然血管中平滑肌的作用,最大程度上模拟天然血管发挥作用。
附图说明
图1为本发明实施例提供的用于组织修复的丝素蛋白管状支架内表面放大100倍的扫描电镜照片。
具体实施方式
本发明提供了一种用于组织修复的丝素蛋白管状支架的制备方法,包括:
将家蚕熟丝线编织成的管状织物装在模具上;
向家蚕丝素蛋白溶液中加入亲水性胶黏剂,得到混合溶液;
将所述装有管状织物的模具浸泡在所述混合溶液中,冷冻处理后取出模具,得到用于组织修复的丝素蛋白管状支架。
本发明以家蚕丝素蛋白和家蚕熟丝线为原料制备丝素蛋白管状支架,所述丝素蛋白管状支架具有良好的生物相容性和生物力学性能。
本发明以家蚕熟丝线为原料,将其编织成管状织物。为了使得到的丝素蛋白管状支架更适于用作人工血管,所述管状织物的内径优选为1mm~16mm,更优选为1mm~10mm;所述管状织物的厚度优选为0.3mm~1.0mm,更优选为0.3mm~0.8mm。为了使得到的丝素蛋白管状支架具有良好的弹性,所述管状织物优选为采用纬编方式编织得到。本发明对所述家蚕熟丝线的规格没有特殊限制,当所述家蚕熟丝线的直径较小时,优选对所述家蚕熟丝线进行纺织工业中常用的并捻处理,使编织成的管状织物的直径和厚度符合使用要求。
得到管状织物后,将其装在模具上。本发明中的模具可以为圆柱形模具,也可以为具有双层结构的圆筒形模具,还可以为管状模具。所述模具的尺寸应与所述管状织物的尺寸相匹配,具体而言,所述模具的内径应与所述管状织物的内径相当或略小。
家蚕丝素蛋白是本发明需要的另一种原料,本发明直接以家蚕丝素蛋白溶液为原料,所述家蚕丝素蛋白溶液优选按照以下步骤制备:
将家蚕生丝置于碳酸钠水溶液中煮沸脱胶,得到家蚕丝素蛋白;
将所述家蚕丝素蛋白溶解于溶剂中,得到第一溶液,所述溶剂为氯化钙、乙醇和水的混合溶液;
将所述第一溶液进行透析,得到家蚕丝素蛋白溶液。
所述透析具体包括以下步骤:
将第一溶液灌注于透析袋内,所述透析袋的截留分子量为3kDa~20kDa;
将灌注了家蚕丝素蛋白溶解液的透析袋置于去离子水中,每隔2h更换去离子水,持续透析4天,得到家蚕丝素蛋白溶液。
按照本发明,得到家蚕丝素蛋白溶液后,优选将其质量浓度调整为1.0%~15%,更优选为1.0%~10%,最优选为1.0%~6%,所述调整方法可以为用去离子水将家蚕丝素蛋白溶液稀释或用本领域技术人员熟知的方法将家蚕丝素蛋白溶液浓缩。然后向其中加入亲水性胶黏剂,按照本领域技术人员熟知的方法混合均匀后得到混合溶液。
所述亲水性胶黏剂的作用是将家蚕丝素蛋白与所述管状织物粘结起来。按照本发明,所述亲水性胶黏剂优选为聚乙二醇缩水甘油醚。所述亲水性胶黏剂与所述家蚕丝素蛋白的质量比优选为0.1~5,更优选为0.2~3,最优选为0.5~2.5。
按照本发明,加入亲水性胶黏剂之前,优选按照本领域技术人员熟知的方法将所述家蚕丝素蛋白溶液进行脱泡处理。
得到混合溶液后,将所述装有管状织物的模具浸泡在所述混合溶液中,进行冷冻处理,然后取出模具,得到丝素蛋白管状支架。装有管状织物的模具浸泡在混合溶液中时,混合溶液中的家蚕丝素蛋白能够随着溶剂渗透进入管状织物内部并填充于模具与管状织物之间,即该管状织物完全浸润于含有家蚕丝素蛋白的混合溶液中。进行冷冻处理时,家蚕丝素蛋白凝固,并在亲水性胶黏剂的作用下附着于管状织物的内外表面形成膜,最终形成具有外膜、管状织物和内膜三层结构的丝素蛋白管状支架,同时,家蚕丝素蛋白也存在于管状织物内部。在该丝素蛋白管状支架中,家蚕丝素蛋白形成的内外两层膜使得丝素蛋白管状支架具有良好的生物相容性;而管状织物使丝素蛋白管状支架具有良好的生物力学性能,尤其具有良好的弹性。按照本发明,所述冷冻处理的温度优选为-80℃~-4℃,更优选为-80℃~-10℃,最优选为-80℃~-20℃;所述冷冻处理的时间优选为0.5h~48h,更优选为1h~40h,最优抗为2h~24h。
冷冻处理完成后,取出模具,优选将得到的管状样品置于去离子水或纯水中,每隔3h~4h更换去离子水或纯水,持续4天后,将管状样品干燥,得到丝素蛋白管状支架。
所述丝素蛋白管状支架可以用作人工血管、人工支气管或人工神经管等组织修复材料,更适合用作人工血管。当所述丝素蛋白管状支架用于不同口径血管时,可以调整其内径和厚度以满足不同血管的需要。
该丝素蛋白管状支架以家蚕熟丝线编织成的管状织物为支撑结构,管状织物的内外表面均具有家蚕丝素蛋白形成的膜,同时,家蚕丝素蛋白也存在于管状织物内部,使所述丝素蛋白管状支架具有良好的生物相容性和良好的生物力学性能。此外,家蚕熟丝线编织成的管状织物具有良好的弹性,能够起到类似于天然血管中平滑肌的作用,从而最大程度上模拟天然血管发挥作用。
所述丝素蛋白管状支架的内径和厚度与管状织物的内径和厚度以及模具的内径均有关,其内径优选为0.8mm~15mm,更优选为1.5mm~10mm,其厚度优选≤1mm。
得到丝素蛋白管状支架后,对其进行动物实验和细胞毒性实验,结果表明,所述丝素蛋白管状支架无致敏性,其细胞毒性均在1级以下。
对所述丝素蛋白管状支架进行生物力学性能测试,结果表明,其具有较高的强度和伸长率:抗拉强度≥600kPa,扯断伸长率≥20%。
为了进一步说明本发明,下面结合实施例对本发明提供的用于组织修复的丝素蛋白管状支架的制备方法进行详细描述。
实施例1
将规格为16×20/22的家蚕熟丝线通过纬编的方法织成内径为2mm、厚度为0.6mm的管状织物;
将0.2kg家蚕生丝依次在10L质量浓度为0.25%的碳酸钠自来水溶液中煮沸30min、10L质量浓度为0.25%的碳酸钠自来水溶液中煮沸30min和10L质量浓度为0.25%的碳酸钠去离子水溶液中煮沸45min;将得到的蚕丝清洗、拉松,于60℃烘箱内干燥后,得到家蚕丝素蛋白;
将10g家蚕丝素蛋白溶解于100mL摩尔比为1∶2的氯化钙和乙醇的水溶液中,70℃搅拌溶解2h后得到第一溶液;
将所述第一溶液灌注于透析袋内后浸泡于去离子水中,每隔2h更换去离子水,持续透析4天,得到家蚕丝素蛋白溶液,将所述家蚕丝素蛋白溶液的质量浓度调整为1.5%后脱泡,然后向其中加入聚乙二醇缩水甘油醚,搅拌均匀,得到混合溶液,所述聚乙二醇缩水甘油醚与所述家蚕丝素蛋白的质量比为1.5∶1;
将所述管状织物装在直径为1.8mm的圆柱形模具上,将所述圆柱形模具浸泡于所述混合溶液中,并于-80℃冷冻48h,取出模具后,得到管状样品;
将所述管状样品置于去离子水中,每隔3h更换去离子水,浸泡4天,风干后得到丝素蛋白管状支架。
所述丝素蛋白管状支架的内径为1.95mm、厚度为0.70mm。
对所述丝素蛋白管状支架植入动物体内进行动物实验,受试动物均未出现明显的过敏、炎症等症状,说明所述丝素蛋白管状支架无致敏性。
按照GB/T 16886.5-2003提供的体外细胞毒性试验中的浸提液实验方法对所述丝素蛋白管状支架进行细胞毒性实验,实验结果表明,所述丝素蛋白管状支架的细胞毒性为1级以下。
对所述丝素蛋白管状支架进行生物力学性能测试,其抗拉强度为620kPa,扯断伸长率为22%。
实施例2
将规格为12×20/22的家蚕熟丝线通过纬编的方法织成内径为3mm、厚度为0.5mm的管状织物;
将0.2kg家蚕生丝依次在10L质量浓度为0.25%的碳酸钠自来水溶液中煮沸30min、10L质量浓度为0.25%的碳酸钠自来水溶液中煮沸30min和10L质量浓度为0.25%的碳酸钠去离子水溶液中煮沸45min;将得到的蚕丝清洗、拉松,于60℃烘箱内干燥后,得到家蚕丝素蛋白;
将10g家蚕丝素蛋白溶解于100mL摩尔比为1∶2的氯化钙和乙醇的水溶液中,70℃搅拌溶解2h后得到第一溶液;
将所述第一溶液灌注于透析袋内后浸泡于去离子水中,每隔2h更换去离子水,持续透析4天,得到家蚕丝素蛋白溶液,将所述家蚕丝素蛋白溶液的质量浓度调整为2.5%后脱泡,然后向其中加入聚乙二醇缩水甘油醚,搅拌均匀,得到混合溶液,所述聚乙二醇缩水甘油醚与所述家蚕丝素蛋白的质量比为1.5∶1;
将所述管状织物装在直径为2.8mm的圆柱形模具上,将所述圆柱形模具浸泡于所述混合溶液中,并于-40℃冷冻10h,取出模具后,得到管状样品;
将所述管状样品置于去离子水中,每隔3h更换去离子水,浸泡4天,风干后得到丝素蛋白管状支架。
所述丝素蛋白管状支架的内径为2.9mm、厚度为0.70mm。对所述丝素蛋白管状支架的内表面进行电镜扫描,参见图1,图1为本发明实施例提供的丝素蛋白管状支架内表面放大100倍的扫描电镜照片,由图1可知,其内表面具有孔结构。
对所述丝素蛋白管状支架植入动物体内进行动物实验,受试动物均未出现明显的过敏、炎症等症状,说明所述丝素蛋白管状支架无致敏性。
按照GB/T 16886.5-2003提供的体外细胞毒性试验中的浸提液实验方法对所述丝素蛋白管状支架进行细胞毒性实验,实验结果表明,所述丝素蛋白管状支架的细胞毒性为1级以下。
对所述丝素蛋白管状支架进行生物力学性能测试,其抗拉强度为650kPa,扯断伸长率为25%。
实施例3
将规格为12×20/22的家蚕熟丝线通过纬编的方法织成内径为5mm、厚度为0.5mm的管状织物;
将0.2kg家蚕生丝依次在10L质量浓度为0.25%的碳酸钠自来水溶液中煮沸30min、10L质量浓度为0.25%的碳酸钠自来水溶液中煮沸30min和10L质量浓度为0.25%的碳酸钠去离子水溶液中煮沸45min;将得到的蚕丝清洗、拉松,于60℃烘箱内干燥后,得到家蚕丝素蛋白;
将10g家蚕丝素蛋白溶解于100mL摩尔比为1∶2的氯化钙和乙醇的水溶液中,70℃搅拌溶解2h后得到第一溶液;
将所述第一溶液灌注于透析袋内后置于去离子水中,每隔2h更换去离子水,持续透析4天,得到家蚕丝素蛋白溶液,将所述家蚕丝素蛋白溶液的质量浓度调整为4%后脱泡,然后向其中加入聚乙二醇缩水甘油醚,搅拌均匀,得到混合溶液,所述聚乙二醇缩水甘油醚与所述家蚕丝素蛋白的质量比为1∶1;
将所述管状织物装在直径为4.8mm的圆柱形模具上,将所述圆柱形模具浸泡于所述混合溶液中,并于-40℃冷冻5h,取出模具后,得到管状样品;
将所述管状样品置于去离子水中,每隔3h更换去离子水,浸泡4天,风干后得到丝素蛋白管状支架。
所述丝素蛋白管状支架的内径为4.85mm、厚度为0.8mm。
对所述丝素蛋白管状支架植入动物体内进行动物实验,受试动物均未出现明显的过敏、炎症等症状,说明所述丝素蛋白管状支架无致敏性。
按照GB/T 16886.5-2003提供的体外细胞毒性试验中的浸提液实验方法对所述丝素蛋白管状支架进行细胞毒性实验,实验结果表明,所述丝素蛋白管状支架的细胞毒性为1级以下。
对所述丝素蛋白管状支架进行生物力学性能测试,其抗拉强度为850kPa,扯断伸长率为30%。
实施例4
将规格为12×20/22的家蚕熟丝线通过纬编的方法织成内径为5mm、厚度为0.5mm的管状织物;
将0.2kg家蚕生丝依次在10L质量浓度为0.25%的碳酸钠自来水溶液中煮沸30min、10L质量浓度为0.25%的碳酸钠自来水溶液中煮沸30min和10L质量浓度为0.25%的碳酸钠去离子水溶液中煮沸45min;将得到的蚕丝清洗、拉松,于60℃烘箱内干燥后,得到家蚕丝素蛋白;
将10g家蚕丝素蛋白溶解于100mL摩尔比为1∶2的氯化钙和乙醇的水溶液中,70℃搅拌溶解2h后得到第一溶液;
将所述第一溶液灌注于透析袋内后置于去离子水中,每隔2h更换去离子水,持续透析4天,得到家蚕丝素蛋白溶液,将所述家蚕丝素蛋白溶液的质量浓度调整为4%后脱泡,然后向其中加入聚乙二醇缩水甘油醚,搅拌均匀,得到混合溶液,所述聚乙二醇缩水甘油醚与所述家蚕丝素蛋白的质量比为1∶1;
将所述管状织物装在直径为4.8mm的圆柱形模具上,将所述圆柱形模具浸泡于所述混合溶液中,并于-20℃冷冻10h,取出模具后,得到管状样品;
将所述管状样品置于去离子水中,每隔3h更换去离子水,浸泡4天,风干后得到丝素蛋白管状支架。
所述丝素蛋白管状支架的内径为4.9mm、厚度为0.7mm。
对所述丝素蛋白管状支架植入动物体内进行动物实验,受试动物均未出现明显的过敏、炎症等症状,说明所述丝素蛋白管状支架无致敏性。
按照GB/T 16886.5-2003提供的体外细胞毒性试验中的浸提液实验方法对所述丝素蛋白管状支架进行细胞毒性实验,实验结果表明,所述丝素蛋白管状支架的细胞毒性为1级以下。
对所述丝素蛋白管状支架进行生物力学性能测试,其抗拉强度为750kPa,扯断伸长率为29%。
实施例5
将规格为12×20/22的家蚕熟丝线通过纬编的方法织成内径为7mm、厚度为0.5mm的管状织物;
将0.2kg家蚕生丝依次在10L质量浓度为0.25%的碳酸钠自来水溶液中煮沸30min、10L质量浓度为0.25%的碳酸钠自来水溶液中煮沸30min和10L质量浓度为0.25%的碳酸钠去离子水溶液中煮沸45min;将得到的蚕丝清洗、拉松,于60℃烘箱内干燥后,得到家蚕丝素蛋白;
将10g家蚕丝素蛋白溶解于100mL摩尔比为1∶2的氯化钙和乙醇的水溶液中,70℃搅拌溶解2h后得到第一溶液;
将所述第一溶液灌注于透析袋内后置于去离子水中,每隔2h更换去离子水,持续透析4天,得到家蚕丝素蛋白溶液,将所述家蚕丝素蛋白溶液的质量浓度调整为6%后脱泡,然后向其中加入聚乙二醇缩水甘油醚,搅拌均匀,得到混合溶液,所述聚乙二醇缩水甘油醚与所述家蚕丝素蛋白的质量比为1∶1;
将所述管状织物装在直径为6.8mm的圆柱形模具上,将所述圆柱形模具浸泡于所述混合溶液中,并于-20℃冷冻12h,取出模具后,得到管状样品;
将所述管状样品置于去离子水中,每隔3h更换去离子水,浸泡4天,风干后得到丝素蛋白管状支架。
所述丝素蛋白管状支架的内径为6.9mm、厚度为0.7mm。
对所述丝素蛋白管状支架植入动物体内进行动物实验,受试动物均未出现明显的过敏、炎症等症状,说明所述丝素蛋白管状支架无致敏性。
按照GB/T 16886.5-2003提供的体外细胞毒性试验中的浸提液实验方法对所述丝素蛋白管状支架进行细胞毒性实验,实验结果表明,所述丝素蛋白管状支架的细胞毒性为1级以下。
对所述丝素蛋白管状支架进行生物力学性能测试,其抗拉强度为860kPa,扯断伸长率为30%。
实施例6
将规格为16×20/22的家蚕熟丝线通过纬编的方法织成内径为10mm、厚度为0.6mm的管状织物;
将0.2kg家蚕生丝依次在10L质量浓度为0.25%的碳酸钠自来水溶液中煮沸30min、10L质量浓度为0.25%的碳酸钠自来水溶液中煮沸30min和10L质量浓度为0.25%的碳酸钠去离子水溶液中煮沸45min;将得到的蚕丝清洗、拉松,于60℃烘箱内干燥后,得到家蚕丝素蛋白;
将10g家蚕丝素蛋白溶解于100mL摩尔比为1∶2的氯化钙和乙醇的水溶液中,70℃搅拌溶解2h后得到第一溶液;
将所述第一溶液灌注于透析袋内后置于去离子水中,每隔2h更换去离子水,持续透析4天,得到家蚕丝素蛋白溶液,将所述家蚕丝素蛋白溶液的质量浓度调整为6%后脱泡,然后向其中加入聚乙二醇缩水甘油醚,搅拌均匀,得到混合溶液,所述聚乙二醇缩水甘油醚与所述家蚕丝素蛋白的质量比为1∶1;
将所述管状织物装在直径为9.8mm的圆柱形模具上,将所述圆柱形模具浸泡于所述混合溶液中,并于-20℃冷冻3~12h,取出模具后,得到管状样品;
将所述管状样品置于去离子水中,每隔3h更换去离子水,浸泡4天,风干后得到丝素蛋白管状支架。
所述丝素蛋白管状支架的内径为9.85mm、厚度为0.9mm。
对所述丝素蛋白管状支架植入动物体内进行动物实验,受试动物均未出现明显的过敏、炎症等症状,说明所述丝素蛋白管状支架无致敏性。
按照GB/T 16886.5-2003提供的体外细胞毒性试验中的浸提液实验方法对所述丝素蛋白管状支架进行细胞毒性实验,实验结果表明,所述丝素蛋白管状支架的细胞毒性为1级以下。
对所述丝素蛋白管状支架进行生物力学性能测试,其抗拉强度为900kPa,扯断伸长率为35%。
由上述实施例可知,本发明提供的丝素蛋白管状支架具有良好的生物力学性能,尤其具有较高的抗拉强度和扯断伸长率。
以上实施例的说明只是用于帮助理解本发明的方法及其核心思想。应当指出,对于本技术领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明原理的前提下,还可以对本发明进行若干改进和修饰,这些改进和修饰也落入本发明权利要求的保护范围内。
Claims (10)
1.一种用于组织修复的丝素蛋白管状支架的制备方法,包括:
将家蚕熟丝线编织成的管状织物装在模具上,所述模具为圆柱形模具、管状模具或双层结构的圆筒形模具;
向家蚕丝素蛋白溶液中加入亲水性胶黏剂,得到混合溶液;
将所述装有管状织物的模具浸泡在所述混合溶液中,冷冻处理后取出模具,得到用于组织修复的丝素蛋白管状支架;
所述丝素蛋白管状支架具有外膜、管状织物和内膜三层结构,家蚕丝素蛋白也存在于管状织物内部。
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述管状织物的内径为1mm~16mm。
3.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述管状织物的厚度为0.3mm~1.0mm。
4.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述管状织物由纬编方式编织得到。
5.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述家蚕丝素蛋白溶液的质量浓度为1.0%~15%。
6.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述亲水性胶黏剂与所述家蚕丝素蛋白的质量比为0.2~3。
7.根据权利要求6所述的制备方法,所述亲水性胶黏剂为聚乙二醇缩水甘油醚。
8.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述冷冻处理的温度为-80℃~-4℃。
9.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述冷冻处理的时间为0.5h~48h。
10.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述家蚕丝素蛋白溶液按照以下步骤制备:
将家蚕生丝置于碳酸钠水溶液中煮沸脱胶,得到家蚕丝素蛋白;
将所述家蚕丝素蛋白溶解于溶剂中,得到第一溶液,所述溶剂为氯化钙、乙醇和水的混合溶液;
将所述第一溶液进行透析,得到家蚕丝素蛋白溶液。
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