CN102335185A - 淫羊藿苷在制备防治支气管哮喘药物中的用途 - Google Patents

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董竞成
徐长青
吴金峰
刘宝君
曹玉雪
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本发明属生物医学领域，涉及中药有效成分淫羊藿苷的新的药用用途，具体涉及淫羊藿苷在制备防治支气管哮喘药物中的用途。试验结果证实，淫羊藿苷具有改善哮喘大鼠肺组织炎症的作用；具有抑制哮喘大鼠血清中炎症细胞因子的作用；具有抑制哮喘大鼠肺泡灌洗液中炎症细胞因子的作用；能够调节哮喘大鼠肺组织Th1/Th2相关细胞因子表达失衡；能够调节哮喘大鼠肺组织中Th1/Th2相关转录因子(T-bet/GATA-3)表达失衡。本发明的中药有效成分淫羊藿苷可作为活性成分，与药物学上可接受的载体制备防治支气管哮喘的药物组合物。

Description

淫羊藿苷在制备防治支气管哮喘药物中的用途
技术领域
本发明属生物医学领域，涉及中药有效成分淫羊藿苷的新的药用用途，具体涉及淫羊藿苷在制备防治支气管哮喘药物中的用途。
背景技术
支气管哮喘属慢性气道炎症性疾病。据报道，其发病率和死亡率呈逐年上升趋势，严重威胁人们的身心健康。有关支气管哮喘病理研究显示，多种炎症细胞、细胞因子及炎症介质，构成了复杂的炎症网络，参与了哮喘的发生发展。既往的研究表明，中药材淫羊藿的水煎剂对哮喘显示了一定的干预作用，但预防和治疗作用尚未显现。
淫羊藿苷是淫羊藿的主要效应单体，淫羊藿苷(icariin，ICA，C33H40O15)是小檗科(Berberidaceae)淫羊藿属Epimedium植物淫羊藿茎叶中提取的总黄酮的主要有效成分。现代药理研究证实：淫羊藿苷能提高机体免疫功能、调节骨代谢、抗衰老、抗肿瘤等功效，能显著抑制ConA诱导的正常小鼠体外T淋巴细胞早期活化和增殖，并呈剂量依赖性。至今为止，国内外尚未见有淫羊藿苷应用于防治哮喘的相关研究报道。
所述淫羊藿苷其分子结构：
Figure BSA00000207457300021
发明内容
本发明的目的是提供中药有效成分淫羊藿苷的新用途。尤其涉及中药淫羊藿的有效单体淫羊藿苷在制备防治支气管哮喘药物中的应用
本发明所述淫羊藿苷，其具有下述式(I)的分子结构：
Figure BSA00000207457300022
本发明结合以往相关研究基础，采用哮喘反复发作模型，进行淫羊藿苷干预治疗试验：
采用HE染色观察淫羊藿苷对OVA诱导的大鼠肺组织炎症浸润的干预作用及病理学评分的影响；采用酶联免疫吸附测定法检测血清中IL-4和IFN-γ的含量；取各组大鼠肺泡灌洗液，采用酶联免疫吸附测定法检测肺泡灌洗液中IL-4和IFN-γ的含量；观察淫羊藿苷对大鼠哮喘模型肺组织T-bet和GATA-3蛋白表达的干预作用。试验结果证实，(1)淫羊藿苷具有改善哮喘大鼠肺组织炎症的作用；(2)淫羊藿苷具有抑制哮喘大鼠血清中炎症细胞因子的作用；(3)淫羊藿苷具有抑制哮喘大鼠肺泡灌洗液中炎症细胞因子的作用。(4)淫羊藿苷能够调节哮喘大鼠肺组织Th1/Th2相关细胞因子表达失衡；(5)淫羊藿苷能够调节哮喘大鼠肺组织中Th1/Th2相关转录因子(T-bet/GATA-3)表达失衡。
本发明的中药有效成分淫羊藿苷能进一步制备防治支气管哮喘的药物。
本发明的中药有效成分淫羊藿苷能作为活性成分，与药物学上可接受的载体制备防治支气管哮喘的药物组合物；作为活性成分的淫羊藿苷防治哮喘的机理与能从基因和蛋白水平调节T细胞亚群紊乱有关，进一步实现防治哮喘。
附图说明
图1，各组大鼠肺组织HE染色及淫羊藿苷干预后的变化情况。
图2，各组大鼠肺组织炎症病理学评分及淫羊藿苷干预后的变化情况。
图3，各组大鼠肺组织中IL-4表达及淫羊藿苷的干预作用。
图4，各组大鼠肺组织中IFN-γ表达及淫羊藿苷的干预作用。
图5，各组大鼠肺组织T-bet和GATA-3蛋白检测及淫羊藿苷的干预作用。
具体实施方式
实施例1
(1)实验动物及分组：采用健康清洁级雄性SD大鼠，体重350±10g，购自四川比尔实验动物公司。动物饲养于复旦大学实验动物中心，饲养条件：清洁级，光照时间固定，水、食物自由摄取。动物分为6组，包括空白对照组、模型组、淫羊藿苷(低、中、高剂量)干预组。低剂量为5mg/kg，中剂量为10mg/kg，高剂量为20mg/kg。给药方式为腹腔注射，每日一次，共28天。
(2)主要试剂及仪器：卵蛋白(上海丽珠东风生物技术有限公司)；氢氧化铝凝胶(Sigma.Co.)；戊巴比妥钠(上海化学试剂公司，进口分装)；IL-4、13试剂盒(Biosource进口分装)；皮质酮试剂盒(R&D公司)；ACTH放免试剂盒(第二军医大学神经生物学研究所)；SN-695B型智能放免γ测量仪(上海原子核研究所朗日环仪器一厂)；DL-8R冷冻离心机(上海离心机械研究所)；FeroTec Gradien PCR基因扩增仪(杭州大和热磁电子有限公司)；DYY-8型稳压稳流电泳仪(上海琪特分析仪器有限公司)；H6-1微型电泳槽(上海精益有机玻璃制品仪器厂)；倒置显微镜(Leica德国莱卡)；YS9801型医用超声雾化器(上海亿圣科技有限公司)；Rotor-Gene3000RealtimePCR仪(Corbett Research)；引物设计软件(Primer Premier 5.0)；动物诱喘装置：不完全封闭有机玻璃箱，28×15×13cm3，箱体一端为通气孔，另一端连接超声雾化器。
(3)制备哮喘模型
第一天给与含卵蛋白100mg加氢氧化铝凝胶混合液1ml，第15天时，以5％的卵蛋白生理盐水溶液5L/min雾化吸入20分钟诱发哮喘发作，每天1次，连续28天，对照组以生理盐水代替OVA。
(4)检测指标及结果
淫羊藿苷对哮喘模型大鼠肺组织病理学和炎症分级评分的影响(如图1、图2所示)；
2)采用酶联免疫吸附测定法检测血清中IL-4和IFN-γ的含量(如表1所示)；
表1.各组大鼠血清IL-4和IFN-γ表达及淫羊藿苷干预后的变化情况(X±S)
Figure BSA00000207457300051
P＜0.05vs模型组
3)淫羊藿苷对哮喘模型大鼠肺泡灌洗液中IL-4和IFN-γ表达的影响(如表2，图3、图4所示)；
表2.各组大鼠肺泡灌洗液中IL-4和IFN-γ表达及淫羊藿苷干预后的变化情况(X±S)
Figure BSA00000207457300062
*P＜0.05vs模型组
4)观察淫羊藿苷对大鼠哮喘模型肺组织T-bet和GATA-3蛋白表达的干预作用(如图5所示)。
结果显示，本发明所述的淫羊藿苷具有改善哮喘大鼠肺组织炎症的作用；具有抑制哮喘大鼠血清中炎症细胞因子的作用；具有抑制哮喘大鼠肺泡灌洗液中炎症细胞因子的作用；能够调节哮喘大鼠肺组织Th1/Th2相关细胞因子表达失衡；能够调节哮喘大鼠肺组织中Th1/Th2相关转录因子(T-bet/GATA-3)表达失衡。
所述的淫羊藿苷能制备防治支气管哮喘的药物。

Claims (7)

1.式(I)结构的淫羊藿苷在制备防治支气管哮喘药物中的用途，
2.按权利要求1所述的用途，其特征在于所述的淫羊藿苷改善肺组织炎症。
3.按权利要求1所述的用途，其特征在于所述的淫羊藿苷抑制血清中炎症细胞因子。
4.按权利要求1所述的用途，其特征在于所述的淫羊藿苷抑制肺泡灌洗液中炎症细胞因子。
5.按权利要求1所述的用途，其特征在于所述的淫羊藿苷调节肺组织Th1/Th2相关细胞因子表达失衡。
6.按权利要求1所述的用途，其特征在于所述的淫羊藿苷调节肺组织中Th1/Th2相关转录因子T-bet/GATA-3表达失衡。
7.一种防治支气管哮喘的药物组合物，其特征在于：包括作为活性成分的淫羊藿苷，以及药物学上可接受的载体。
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PB01 Publication
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