CN102329821A - 一种芽孢杆菌哈工大威海菌株的培养基及发酵方法 - Google Patents
一种芽孢杆菌哈工大威海菌株的培养基及发酵方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN102329821A CN102329821A CN201110288650A CN201110288650A CN102329821A CN 102329821 A CN102329821 A CN 102329821A CN 201110288650 A CN201110288650 A CN 201110288650A CN 201110288650 A CN201110288650 A CN 201110288650A CN 102329821 A CN102329821 A CN 102329821A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- weihai
- technology
- bacterial strain
- harbin institute
- grams per
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明涉及微生物培养基和发酵工程技术领域,利用Plackett-Burman(PB)设计法和响应面优化法,提供了一种适合芽孢杆菌哈工大威海菌株的培养基及发酵方法,该方法就可显著提高抑制黄曲霉毒素产生的细菌生物活性物质的产量。该培养基配方(克/升)为:葡萄糖20-50,牛肉膏5-15,酵母粉3-12,大豆蛋白胨4-15,硫酸镁1-5,磷酸氢二钾1-5,硫酸锰0.01-0.1,高温灭菌后,以1-10%量接种,在25-35℃摇床或发酵罐中以100-200转/分钟连续培养3-6d,即可获得含有抑制黄曲霉毒素的芽孢杆菌哈工大威海菌株生物活性物质的高产发酵液,与对照相比,该发酵液对寄生曲霉真菌菌丝体生长的抑制率提高3.5-5.4倍,对黄曲霉毒素的抑制率提高2-3倍。
Description
技术领域:
本发明涉及微生物培养基和发酵工程技术领域,具体的说是一种芽孢杆菌哈工大威海菌株的培养基及发酵方法。
背景技术:
黄曲霉毒素(aflatoxin,AFT)是20世纪60年代初发现的一种真菌有毒代谢产物,具有强致癌性。在我国,黄曲霉毒素污染食品情况十分严重,尤其是花生和玉米极易被污染。如何有效地防止黄曲霉毒素污染是一个亟待解决的重大课题,对保障农产品的国际竞争能力,保证国际贸易的正常进行等方面,都有十分重要的理论和现实意义。
芽孢杆菌(Bacillus spp.)能分泌多种抗生素等生物活性物质,利用其抑制黄曲霉生长或毒素产生,国内外已经有过报道,但未见用于防治黄曲霉毒素的芽孢杆菌生物活性物质的高产发酵培养基和发酵方法的报道。对生产抑制黄曲霉毒素的芽孢杆菌生物活性物质的高产发酵培养基和发酵条件进行优化,可为今后应用芽孢杆菌制剂防治黄曲霉毒素打下一个坚实的基础。
发明内容:
本发明所要解决的技术问题是克服上述现有技术的不足,提供一种适合高产发酵生产抑制黄曲霉毒素的细菌活性物质的培养基和发酵方法。
本发明解决上述技术问题采用的技术方案是:
一种芽孢杆菌哈工大威海菌株的培养基,其特征在于:其组成配方为:葡萄糖20-50克/升,牛肉膏5-15克/升,酵母粉3-12克/升,大豆蛋白胨4-15克/升,硫酸镁1-5克/升,磷酸氢二钾1-5克/升,硫酸锰0.01-0.1克/升。
一种芽孢杆菌哈工大威海菌株的发酵方法,其特征在于包括如下步骤:
(1)配制芽孢杆菌哈工大威海菌株的培养基,培养基配方(克/升)为:葡萄糖20-50,牛肉膏5-15,酵母粉3-12,大豆蛋白胨4-15,硫酸镁1-5,磷酸氢二钾1-5,硫酸锰0.01-0.1。
(2)从保藏的芽孢杆菌哈工大威海菌株中,无菌操作接种到装有30ml培养基的100ml三角瓶中,在35℃摇床中以150转/分钟恒温连续培养12h,获得液体种子;按照1-10%接种量将液体种子转接于所述培养基中,在25-35℃摇床或发酵罐中以100-200转/分钟连续培养3-6d,即可获得含有抑制黄曲霉毒素的芽孢杆菌哈工大威海菌株生物活性物质的高产发酵液。
本发明所用培养基配方与其他细菌培养中的配方显著不同在于第一是在单因素实验研究的基础上,进一步利用Plackett-Burman(PB)设计法和响应面优化设计法对培养基进行优化获得的配方,更合理科学;第二配方中的营养物质成分丰富,搭配合理,为芽孢杆菌哈工大威海菌株的生长提供了充足的营养和适宜的生长环境;第三可使抑制黄曲霉毒素的芽孢杆菌生物活性物质的产量大幅度提高。
本发明获得的芽孢杆菌哈工大威海菌株的发酵上清液稀释5倍后与对照培养基培养获得的发酵上清液稀释相同倍数相比,对寄生曲霉真菌菌丝体生长的抑制率提高3.5-5.4倍,对黄曲霉毒素的抑制率提高2-3倍。
本发明所用培养基配方不仅适用于实验室摇瓶培养,也可放大于自动发酵罐培养。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明做进一步说明。
实施例1
菌种:芽孢杆菌哈工大威海菌株由哈尔滨工业大学(威海)海洋学院从山东省土壤中分离的一株具有强抑制黄曲霉毒素的芽孢杆菌新菌株(Bacillus sp.)。
所用培养基配方(克/升)为:葡萄糖30,牛肉膏5,酵母粉10,大豆蛋白胨10,硫酸镁4,磷酸氢二钾5,硫酸锰0.04。首先从保藏的芽孢杆菌哈工大威海菌株液体菌种中,无菌操作接种到装有30ml培养基的100ml三角瓶中,在35℃摇床中以150转/分钟恒温连续培养12h,获得芽孢杆菌哈工大威海菌株液体种子;按照1%接种量将液体种子转接于所述液体培养基中,在25℃摇床中以200转/分钟恒温连续培养6d,即可获得芽孢杆菌哈工大威海菌株生物活性物质的高产发酵液,与对照相比,对寄生曲霉真菌菌丝体生长的抑制率提高3.8倍,对黄曲霉毒素的抑制率提高2.5倍。
实施例2
菌种:芽孢杆菌哈工大威海菌株由哈尔滨工业大学(威海)海洋学院从山东省土壤中分离的一株具有强抑制黄曲霉毒素的芽孢杆菌新菌株(Bacillus sp.)。
所用培养基配方(克/升)为:葡萄糖25,牛肉膏10,酵母粉4,大豆蛋白胨10,硫酸镁2,磷酸氢二钾4,硫酸锰0.01。首先从保藏的芽孢杆菌哈工大威海菌株的液体菌种中,无菌操作接种到装有30ml培养基的100ml三角瓶中,在35℃摇床中以150转/分钟恒温连续培养12h,获得芽孢杆菌哈工大威海菌株的液体种子;按照5%接种量将液体种子转接于所述液体培养基中,在30℃摇床中以150转/分钟连续培养6d,即可获得芽孢杆菌哈工大威海菌株生物活性物质的高产发酵液,与对照相比,对寄生曲霉真菌菌丝体生长的抑制率提高5.01倍,对黄曲霉毒素的抑制率提高2.04倍。
实施例3
菌种:芽孢杆菌哈工大威海菌株由哈尔滨工业大学(威海)海洋学院从山东省土壤中分离的一株具有强抑制黄曲霉毒素的芽孢杆菌新菌株(Bacillussp.)。
所用培养基配方(克/升)为:葡萄糖50,牛肉膏14,酵母粉10,大豆蛋白胨15,硫酸镁3,磷酸氢二钾4,硫酸锰0.1。首先从保藏的芽孢杆菌哈工大威海菌株的液体菌种中,无菌操作接种到装有70ml培养基的250ml三角瓶中,在35℃摇床中以150转/分钟恒温连续培养12h,获得芽孢杆菌哈工大威海菌株的液体种子;按照10%接种量将液体种子转接于所述液体培养基中,在10L自动发酵罐中以100转/分钟连续培养4d,即可获得芽孢杆菌哈工大威海菌株生物活性物质的高产发酵液,与对照相比,对寄生曲霉真菌菌丝体生长的抑制率提高4.2倍,对黄曲霉毒素的抑制率提高3.0倍。
Claims (2)
1.一种芽孢杆菌哈工大威海菌株的培养基,其特征在于:其组成配方为:葡萄糖20-50克/升,牛肉膏5-15克/升,酵母粉3-12克/升,大豆蛋白胨4-15克/升,硫酸镁1-5克/升,磷酸氢二钾1-5克/升,硫酸锰0.01-0.1克/升。
2.一种芽孢杆菌哈工大威海菌株的发酵方法,其特征在于包括如下步骤:
(1)配制芽孢杆菌哈工大威海菌株的培养基,培养基配方(克/升)为:葡萄糖20-50,牛肉膏5-15,酵母粉3-12,大豆蛋白胨4-15,硫酸镁1-5,磷酸氢二钾1-5,硫酸锰0.01-0.1。
(2)从保藏的芽孢杆菌哈工大威海菌株中,无菌操作接种到装有30ml培养基的100ml三角瓶中,在35℃摇床中以150转/分钟恒温连续培养12h,获得液体种子;按照1-10%接种量将液体种子转接于所述培养基中,在25-35℃摇床或发酵罐中以100-200转/分钟连续培养3-6d,即可获得含有抑制黄曲霉毒素的芽孢杆菌哈工大威海菌株生物活性物质的高产发酵液。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201110288650A CN102329821A (zh) | 2011-09-22 | 2011-09-22 | 一种芽孢杆菌哈工大威海菌株的培养基及发酵方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201110288650A CN102329821A (zh) | 2011-09-22 | 2011-09-22 | 一种芽孢杆菌哈工大威海菌株的培养基及发酵方法 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN102329821A true CN102329821A (zh) | 2012-01-25 |
Family
ID=45481783
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201110288650A Pending CN102329821A (zh) | 2011-09-22 | 2011-09-22 | 一种芽孢杆菌哈工大威海菌株的培养基及发酵方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN102329821A (zh) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN107557402A (zh) * | 2014-12-04 | 2018-01-09 | 武汉轻工大学 | 一种寄生曲霉的afg2产毒发酵方法 |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101914478A (zh) * | 2010-08-06 | 2010-12-15 | 新发药业有限公司 | 一种枯草芽孢杆菌及其应用 |
CN101948783A (zh) * | 2010-08-31 | 2011-01-19 | 广州广牧丰生物技术有限公司 | 一种能提高乳酸芽孢杆菌活菌数的培养基 |
-
2011
- 2011-09-22 CN CN201110288650A patent/CN102329821A/zh active Pending
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101914478A (zh) * | 2010-08-06 | 2010-12-15 | 新发药业有限公司 | 一种枯草芽孢杆菌及其应用 |
CN101948783A (zh) * | 2010-08-31 | 2011-01-19 | 广州广牧丰生物技术有限公司 | 一种能提高乳酸芽孢杆菌活菌数的培养基 |
Non-Patent Citations (4)
Title |
---|
孔青等: "1株海洋芽孢杆菌抑制黄曲霉生长和毒素合成的研究", 《浙江大学学报》, vol. 36, no. 4, 31 December 2010 (2010-12-31), pages 387 - 392 * |
张琇: "海洋芽孢杆菌S-12-86溶菌酶的发酵、纯化与生物活性的研究", 《中国博士学位论文全文数据库》, 31 December 2008 (2008-12-31) * |
苏芳等: "戊糖乳杆菌WH12-2-1产细菌素条件的优化", 《中国乳品工业》, vol. 38, no. 3, 31 December 2010 (2010-12-31), pages 12 - 13 * |
谢英等: "植物乳杆菌LB-B1产细菌素发酵条件的优化", 《中国酿造》, 31 December 2010 (2010-12-31), pages 22 - 25 * |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN107557402A (zh) * | 2014-12-04 | 2018-01-09 | 武汉轻工大学 | 一种寄生曲霉的afg2产毒发酵方法 |
CN107557402B (zh) * | 2014-12-04 | 2019-04-26 | 武汉轻工大学 | 一种寄生曲霉的afg2产毒发酵方法 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN102174419B (zh) | 一株米根霉菌株及其诱变筛选方法和发酵生产富马酸的方法 | |
CN102172174B (zh) | 一种基于无性孢子的樟芝快速液态发酵工艺 | |
CN104560827B (zh) | 一种防治烟草青枯病的生防放线菌菌株及其应用 | |
CN102911878A (zh) | 一株棘孢木霉菌株及其应用 | |
CN103484421B (zh) | 一种液体发酵中试生产粉红粘帚霉厚垣孢子的方法 | |
CN106754524A (zh) | 副干酪乳杆菌n1115培养基及其应用 | |
CN104996166A (zh) | 一种液体菌种的培养方法 | |
CN104403953A (zh) | 一种饲料用酿酒酵母菌高密度发酵培养基配方及其应用 | |
CN102634460B (zh) | 米根霉rh1-5及其分离培养方法 | |
CN102174426A (zh) | 一种纤维堆囊菌高密度发酵与埃博霉素产物分离偶联的生产工艺 | |
CN108823110B (zh) | 一株产灰黄霉素的菌株及其应用 | |
CN108841889B (zh) | 利用微生物发酵生产松刚霉素主份——灰黄霉素的方法 | |
CN104630167A (zh) | 海洋微生物发酵生产低温葡萄糖氧化酶的方法 | |
CN102485879A (zh) | 一种用于生产wf11899a的发酵培养基 | |
CN104419657A (zh) | 高生长及产酸速率的d-乳酸生产菌及应用 | |
CN105602917A (zh) | 一种橙皮苷酶的生产方法及应用 | |
CN102719363A (zh) | 加拿大一枝黄花内生真菌的抗菌发酵液的制备方法 | |
CN102634473B (zh) | 一种沙雷氏菌合成培养基及其发酵液的制备方法 | |
CN102329821A (zh) | 一种芽孢杆菌哈工大威海菌株的培养基及发酵方法 | |
CN102796680A (zh) | 一种玫瑰孢链霉菌及其利用组合前体生产达托霉素的方法 | |
CN101861796B (zh) | 一种利用有色稻米发酵废糟培养豹斑毒鹅膏的方法 | |
CN102199552B (zh) | 罗伦隐球酵母专用培养基及其用途 | |
CN111548967B (zh) | 一株恶臭假单胞菌x14及其应用方法 | |
CN105018410A (zh) | 一种诱导三孢布拉氏霉老化菌株快速大量产孢的方法 | |
CN103589646B (zh) | 一种木霉菌株及其用途和厚垣孢子及其制备方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C02 | Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001) | ||
WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Application publication date: 20120125 |