CN102293792A

CN102293792A - 一种银杏叶提取物的制备方法

Info

Publication number: CN102293792A
Application number: CN2011102477295A
Authority: CN
Inventors: 张观福
Original assignee: Guizhou Xinbang Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Guizhou Xinbang Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2011-08-26
Filing date: 2011-08-26
Publication date: 2011-12-28

Abstract

本发明是一种银杏叶提取物的制备方法，属于药品的技术领域。本发明是通过将银杏叶粗粉，采用65％乙醇回流提取，提取提取液采用用石英砂柱过滤，滤液冷却至15℃～20℃，滤液上已处理好DM-130树脂(滤液∶树脂＝1∶2-1∶3)，分别用2-3倍树脂体积10％和90-95％醇分别洗脱，收集90-95％洗脱液，减压浓缩微波干燥，即得。

Description

一种银杏叶提取物的制备方法

技术领域：

本发明涉及一种银杏叶提取物的制备方法，属于药品的技术领域。

背景技术：

银杏叶提取物是从银杏叶中提取分离出的有效成分，其功效已经被全世界的医疗组织证明和认可，目前已经被收入国家药典标准，其指标性成分为内酯不得少于24％以及黄酮不得少于6％，是各个制药企业做为各种银杏叶制剂的基础原料，近年来，天然药用植物提取物在国际市场上的销售值日渐提高，我国出口药用植物提取物银杏位列前三，国际市场需求量很大。然而，由于银杏提取物的制备工艺水平各有差异，造成其质量的参差不齐，国内种植银杏的区域广泛，采摘时间各异，其叶中的含量较低，致使同样的工艺条件得到的提取物含量偏低，不能达到国家药典标准，难以满足国内及国际的市场需求，因此，为各制药企业提供一种稳定、可靠的银杏叶提取物的制备工艺，满足市场的需求同时也能减少资源的浪费，具有广阔的市场前景。

银杏叶中含有黄酮类、萜类、酚类、生物碱类、聚异戊二烯、多糖等多种具有药理作用的活性成分。银杏提取物具有相当强烈的抗氧化作用，能消除生物体内过剩的自由基，阻止体内脂质过氧化，提高肌体免疫能力促进血液循环及脑代谢，同时还具有抗衰老、防止神经系统疾病等功能。目前工业生产银杏叶提取物的制备方法通常为用水、醇-水及丙酮-水体系进行提取，水浸提法成本低、产品安全，无环境污染，但是该法浸出率低、糖类和鞣质等水溶性杂质增加，其提取物进一步精制困难，水提法黄酮的总含量大约在10％左右，黄酮及内酯含量偏低，一般不符合要求；而丙酮-水(50％丙酮)提取法因丙酮易挥发且价格高等，普及应用受到了很大限制；因此，本发明通过对现有技术的醇水-树脂法再次进行了研究，针对目前市场上的银杏叶品种多、杂、乱的现象，导致银杏叶中本身的黄酮、内酯含量低，依据现有的制备工艺无法生产出满足要求的银杏叶提取物，导致资源的浪费，因此本发明具有深远的意义。

发明内容：

本发明的目的在于为国内各制药企业提供一种稳定、可靠的银杏叶提取物的制备工艺，解决由于现有市场中银杏叶含量普遍比较低的情况，提高银杏叶中有效成分的转移率，生产一种符合药典标准的银杏叶提取物，从而满足市场需求的同时减少资源的浪费。

本发明是通过以下技术方案实现的：

一种银杏叶提取物的制备方法，通过以下步骤来实现：

A，取银杏叶进行拣选、清洗、干燥，粉碎20-40目的粗粉，备用；

B，将上述银杏叶粗粉，加10-12倍量乙醇搅拌提取，提取2次，每次2小时，合并滤液后再次用石英砂柱过滤，滤液冷却，备用；

C，将上述经过滤冷却过后的滤液，经过大孔吸附树脂吸附后，先10-15％乙醇洗脱，再用90-95％乙醇洗脱，收集90-95％乙醇洗脱洗脱液，回收乙醇，浓缩后微波干燥，即得。

上述银杏叶提取物的制备方法，步骤B中的提取温度控制在75℃～80℃，滤液应冷却至温度为15℃～20℃；步骤C中大孔树脂柱选用DM-130，上柱的药液量/树脂量比例为1∶2-1∶3。

与现有技术相比，本发明的上述步骤中提取液不需经过浓缩、沉降和离心等复杂的工序，操作工序简单，降低了生产周期；同时也能保证其有效成分的损耗，而且药液中有效成分含量低，非常有利于大孔树脂对产品的吸附；整个工艺简单易行，成本经济、低廉，适合工业化大生产，对银杏叶选择性相对较低，生产出的产品符合规定。

1、工艺条件选择：

在树脂法工艺中，吸附树脂是关键，虽然均为非极性吸附树脂，但因药液提取工艺以及树脂本身结构和基团不同，或者药液上树脂柱方法的不同，吸附能力有所区别，在此我们收集了部分国内不同厂家、不同型号的吸附树脂进行筛选。

1、1吸附树脂的选择

分别称取等量(1000ml)预处理好的AB-8、HPD417、DM-130、ADS-17四种吸附树脂，装柱，待用；

由于银杏内酯等在水中的溶解度很小，无法进行静态吸附和吸附饱和量的测定，只考察解吸效果。

将制的提取叶粗粉，加65％乙醇搅拌提取，提取温度控制在75-80℃之间，提取2次，每次2小时，合并滤液后，再次用石英砂柱过滤，滤液冷却至15-20℃，冷却后的药液上树脂柱吸附，分别用10-15％乙醇与90-95％乙醇分别洗脱，收集90-95％乙醇洗脱液，减压浓缩，微波干燥，按中国药典2010版银杏叶提取物的标准，分别检测银杏黄酮和内醋。分离树脂筛选结果见表一。

表一银杏叶中黄酮内醋分离树脂筛选结果表

通过实验可知，AB-8、HPD417、DM-130、ADS-17树脂为大孔吸附树脂，以范德华力和氢键对有机分子进行吸附，故对银杏黄酮类和内醋类的吸附力相当，对不同乙醇浓度对内酯的解吸力相当，对黄酮解吸力不同，但聚酞胺为氢键吸附树脂，而黄酮酚经基较多，对应吸附力强，内醋酚轻基少，吸附力较弱。亦有利于对黄酮的吸附，亦有利于对内醋的解吸，故用DM-130树脂为黄酮内醋分离树脂，为进一步考察树脂的吸附性能，我们对工艺条件进行优化。

1、2洗脱剂及洗脱浓度的选择

黄酮类和内醋类化合物易溶于甲醇、乙醇、丙酮等溶剂，考虑到甲醇的毒性和丙酮的挥发性及溶解性，本实验中采用乙醇-水为洗脱溶剂，按上述实验方法，对已吸附的树脂采用洗脱剂自上而下进行洗脱，分别收集不同浓度的洗脱剂的洗脱液，真空干燥，分析其内酷和黄酮的含量。实验结果见表二。

表二乙醇洗脱浓度对黄酮内酷分离的影响表

通过实验可知，乙醇浓度在0-15％之间基本上基本上对黄酮内醋洗脱不明显，故0-15％乙醇浓度洗脱可以大大的对银杏叶提取物有效成分进行精致，考虑到0-10％乙醇浓度洗脱时需较大体积，故采用10-15％为乙醇浓度进行洗脱，黄酮解析时采用90-95％乙醇解吸较大，防止拖尾。

1.3DM-130树脂用量对分离的影响

我们考察了树脂用量对分离效果的影响，结果见表三。

表三树脂用量对黄酮内酷分离的影响表

通过实验可知，当吸附剂量大时，吸附比表面积大，主要吸附在树脂柱的上部，采用醇解吸时，黄酮和内酷可以较好的分离，但吸附剂量较小时，树脂基本上已饱和，采用水洗或低浓缩醇解吸时，黄酮类化合物的迁移(解吸和被解吸是动态平衡)，造成黄酮类被低浓度醇洗脱下，分离不完全，一般控制在吸附树脂的1/2-3/5时即可，过小，造成浪费过大，影响分离，即树脂/药液在(1∶2-1∶3)之间。

1.4洗脱剂用量的选择

从理论上讲，洗脱剂用量越多越好，能将吸附物质解析下来，但过量的洗脱剂后处理带来麻烦，起不到浓缩的效果，同时过量的溶剂会给黄酮带来更大的大的迁移。

考虑到洗脱剂对分离效果的影响，我们分别对90％的乙醇浓度，以1倍量柱体积(1BV)、2BV、3BV、4BV、5BV进行研究，结果见表四。

表四洗脱剂用量的选择表

从实验可知2-3倍已能将黄酮及内醋洗脱下来。

1.5最佳工艺条件的验证

最佳工艺条件为银杏叶粗粉20-40目，采用10-12倍65％乙醇回流提取2次，每次2小时，合并提取液，用石英砂柱过滤，滤液冷却至15℃～20℃，滤液上已处理好DM-130树脂(滤液∶树脂＝1∶2-1∶3)，分别用2-3倍树脂体积10％和90-95％醇分别洗脱，收集90-95％洗脱液，减压浓缩微波干燥，检测含量，按此条件，试制三批，结果如下表五：

表五大生产试制结果

可以看出，该项技术稳定可靠，能够较经济地达到银杏黄酮昔与菇内酷的有效分离。银杏黄酮普含量能稳定可靠地达到36以上，表中提取物含量的高低与所用银杏叶原料中有效成份含量成影响不大相关。银杏内醋含量能稳定可靠地达到7％以上。有效成份收得率均在90％以上。试制试产工作达到了预期的目标。

具体实施例：

实施例1

取银杏叶进行拣选、清洗、干燥，粉碎20目的粗粉，加10倍量65％乙醇搅拌提取，提取2次，每次2小时，合并滤液后再次用石英砂柱过滤，滤液冷却至15℃，取经滤冷却过后的滤液，经过DM-130大孔吸附树脂吸附后，先15％乙醇洗脱，再用95％乙醇洗脱，收集95％乙醇洗脱洗脱液，回收乙醇，浓缩后微波干燥，即得。

实施例2

取银杏叶进行拣选、清洗、干燥，粉碎40目的粗粉，加12倍量乙醇搅拌提取，提取2次，每次2小时，合并滤液后再次用石英砂柱过滤，滤液冷却至20℃，取经滤冷却过后的滤液，经过DM-130大孔吸附树脂吸附后，先10％乙醇洗脱，再用90％乙醇洗脱，收集90％乙醇洗脱洗脱液，回收乙醇，浓缩后微波干燥，即得。

实施例3

取银杏叶进行拣选、清洗、干燥，粉碎40目的粗粉，加11倍量乙醇搅拌提取，提取2次，每次2小时，合并滤液后再次用石英砂柱过滤，滤液冷却至18℃，取经滤冷却过后的滤液，经过DM-130大孔吸附树脂吸附后，先12％乙醇洗脱，再用93％乙醇洗脱，收集93％乙醇洗脱洗脱液，回收乙醇，浓缩后微波干燥，即得。

Claims

1.一种银杏叶提取物的制备方法，其特征在于按照以下步骤：

B，将上述银杏叶粗粉，加65％乙醇10-12倍量搅拌提取，提取2次，每次2小时，合并滤液后再次用石英砂柱过滤，滤液冷却，备用；

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤B中的提取温度控制在75℃～80℃，滤液冷却后的温度为15℃～20℃。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤C中大孔树脂柱选用DM-130。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：上柱的药液量/树脂量比例为1∶2-1∶3。