CN102293124A - 一种白色毛木耳变异菌株的菌种分离培养及鉴定方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种白色毛木耳变异菌株的菌种分离培养及鉴定方法,它包括菌种分离培养和菌种鉴定两个步骤,其中,菌种分离培养包括以下步骤:(1)配制加富PDA培养基;(2)白色耳片获取;(3)分离培养,所述的菌种鉴定包括拮抗鉴定和出耳鉴定两种方法。本发明能够快速、准确地对白色毛木耳变异菌株的菌种进行分离培养及鉴定,具有简便、实用等优点。
Description
技术领域
本发明涉及食用菌领域,特别是一种白色毛木耳变异菌株的菌种分离培养及鉴定方法。
背景技术
木耳是一种味道鲜美,营养丰富,可素可荤的食用菌,不仅能为中国菜肴大添风采,而且能养血驻颜,令人肌肤红润,容光焕发,可防治缺铁性贫血,还具有其他药用功效。毛木耳生长过程中会出现一种白色变异菌种,而现有技术不能很好地鉴定此菌种且不能使此菌种稳定遗传下去。
发明内容
本发明的目的即在于克服现有技术的不足,提供一种简便、快速、准确地对白色毛木耳变异菌株的菌种进行分离培养及鉴定的方法。
本发明的目的是通过以下技术方案来实现:一种白色毛木耳变异菌株的菌种分离培养及鉴定方法,它包括菌种分离培养和菌种鉴定两个步骤,其中,所述的菌种分离培养包括以下步骤:
(1)配制加富PDA培养基:培养基按以下组分及重量比配制:马铃薯15~25,麦麸5~7,葡萄糖1~3,琼脂1~3,水90~110;
(2)白色耳片获取:从栽培的毛木耳“琥珀木耳”品种中挑选白色耳片;
(3)分离培养:将挑选出的白色耳片去除表皮,并切取耳片内部组织块放在加富PDA培养基上培养,培养温度为22~28℃,菌丝体生长长度达到2~3cm时,选择无杂菌感染的菌种进行扩大培养,取前端菌丝体进行培养,菌丝生长满培养基后即为菌种,编号为APW2010,并将其放入冷藏装置内4~6℃下保藏;
所述的菌种鉴定包括以下拮抗鉴定步骤:
拮抗鉴定:将APW2010与“琥珀木耳”菌种同时接种在PDA平板培养基上,相距2~3cm,在25~28℃条件下培养8~10天,再在光照强度300~500Lx环境下培养5~7天,与“琥珀木耳”菌种接触部位出现隆起拮抗线的菌种即可判为白色变异菌种。
所述的菌种鉴定还包括以下出耳鉴定步骤:
(1)培养基配制与菌种培养:培养基按以下组分及重量比配制:棉籽壳28~35,麸皮2~5,水60~70,菌种培养方法是:将装有上述培养基的培养器经高压灭菌或者常压灭菌后,接种培养,在22~25℃下培养,菌丝生长满培养基后,进行出耳鉴定;
(2)出耳鉴定:将菌种瓶或者菌种袋的口上覆盖物去除,温度20~25℃,空气相对湿度为90~95%,光照强度100~300Lx,耳片仍为白色的菌种即可判为白色变异菌种。
所述的冷藏装置包括冰箱;所述的培养器为750mL的玻璃瓶或折径为17cm、长度为33cm的塑料袋。
本发明的有益效果是:能够快速、准确地对白色毛木耳变异菌株的菌种进行分离培养及鉴定,具有简便、实用等特点。
本发明生物材料样品保藏单位名称为:中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏单位地址为:北京市朝阳区北辰西路1号院3号,保藏日期为:2011年04月08日,保藏编号为:CGMCCNo.4715,分类命名为:毛木耳 Auricularia Polytricha。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明做进一步的描述:
实施例1:
一种白色毛木耳变异菌株的菌种分离培养与鉴定方法,它包括菌种分离培养和菌种鉴定两个步骤,其中,所述的菌种分离培养包括以下步骤:
(1)配制加富PDA培养基:培养基按以下组分及重量比配制:马铃薯15,麦麸5,葡萄糖1,琼脂1,水110;
(2)白色耳片获取:从栽培的毛木耳“琥珀木耳”品种中挑选白色耳片;
(3)分离培养:将挑选出的白色耳片去除表皮,并切取耳片内部组织块放在加富PDA培养基上培养,培养温度为22℃,菌丝体生长长度达到2cm时,选择无杂菌感染的菌种进行扩大培养,取前端菌丝体进行培养,菌丝生长满培养基后即为菌种,编号为APW2010,并将其放入冰箱内4℃下保藏;
所述的菌种鉴定包括一个拮抗鉴定步骤:
拮抗鉴定:将APW2010与“琥珀木耳”菌种同时接种在PDA平板培养基上,相距2cm,在25℃条件下培养8天,再在光照强度300Lx环境下培养5天,与“琥珀木耳”菌种接触部位出现隆起拮抗线的菌种即可判为白色变异菌种。
所述的菌种鉴定还包括以下出耳鉴定步骤:
(1)培养基配制与菌种培养:培养基按以下组分及重量比配制:棉籽壳28,麸皮2,水70,菌种培养方法是:用750mL玻璃瓶或者折径为17cm、长度为33cm的塑料袋作为培养器装培养基,经高压灭菌或者常压灭菌后,接种培养,在22℃下培养,菌丝生长满培养基后,进行出耳鉴定;
(2)出耳鉴定:将菌种瓶或者菌种袋的口上覆盖物去除,温度20℃,空气相对湿度为90%,光照强度100Lx,耳片仍为白色的菌种即可判为白色变异菌种。
实施例2:
一种白色毛木耳变异菌株的菌种分离培养与鉴定方法,它包括菌种分离培养和菌种鉴定两个步骤,其中,所述的菌种分离培养包括以下步骤:
(1)配制加富PDA培养基:培养基按以下组分及重量比配制:马铃薯20,麦麸6,葡萄糖2,琼脂2,水100;
(2)白色耳片获取:从栽培的毛木耳“琥珀木耳”品种中挑选白色耳片;
(3)分离培养:将挑选出的白色耳片去除表皮,并切取耳片内部组织块放在加富PDA培养基上培养,培养温度为28℃,菌丝体生长长度达到3cm时,选择无杂菌感染的菌种进行扩大培养,取前端菌丝体进行培养,菌丝生长满培养基后即为菌种,编号为APW2010,并将其放入冰箱内6℃下保藏;
所述的菌种鉴定包括一个拮抗鉴定步骤:
拮抗鉴定:将APW2010与“琥珀木耳”菌种同时接种在PDA平板培养基上,相距3cm,在28℃条件下培养10天,再在光照强度500Lx环境下培养7天,与“琥珀木耳”菌种接触部位出现隆起拮抗线的菌种即可判为白色变异菌种。
所述的菌种鉴定还包括以下出耳鉴定步骤:
(1)培养基配制与菌种培养:培养基按以下组分及重量比配制:棉籽壳35,麸皮5,水60,菌种培养方法是:用750mL玻璃瓶或者折径为17cm、长度为33cm的塑料袋作为培养器装培养基,经高压灭菌或者常压灭菌后,接种培养,在25℃下培养,菌丝生长满培养基后,进行出耳鉴定;
(2)出耳鉴定:将菌种瓶或者菌种袋的口上覆盖物去除,温度25℃,空气相对湿度为95%,光照强度300Lx,耳片仍为白色的菌种即可判为白色变异菌种。
实施例3:
一种白色毛木耳变异菌株的菌种分离培养与鉴定方法,它包括菌种分离培养和菌种鉴定两个步骤,其中,所述的菌种分离培养包括以下步骤:
(1)配制加富PDA培养基:培养基按以下组分及重量比配制:马铃薯25,麦麸7,葡萄糖3,琼脂3,水90;
(2)白色耳片获取:从栽培的毛木耳“琥珀木耳”品种中挑选白色耳片;
(3)分离培养:将挑选出的白色耳片去除表皮,并切取耳片内部组织块放在加富PDA培养基上培养,培养温度为25℃,菌丝体生长长度达到2.5cm时,选择无杂菌感染的菌种进行扩大培养,取前端菌丝体进行培养,菌丝生长满培养基后即为菌种,编号为APW2010,并将其放入冰箱内5℃下保藏;
所述的菌种鉴定包括一个拮抗鉴定步骤:
拮抗鉴定:将APW2010与“琥珀木耳”菌种同时接种在PDA平板培养基上,相距2.5cm,在27℃条件下培养9天,再在光照强度400Lx环境下培养6天,与“琥珀木耳”菌种接触部位出现隆起拮抗线的菌种即可判为白色变异菌种。
所述的菌种鉴定还包括以下出耳鉴定步骤:
(1)培养基配制与菌种培养:培养基按以下组分及重量比配制:棉籽壳31.5,麸皮3.5,水65,菌种培养方法是:用750mL玻璃瓶或者折径为17cm、长度为33cm的塑料袋作为培养器装培养基,经高压灭菌或者常压灭菌后,接种培养,在24℃下培养,菌丝生长满培养基后,进行出耳鉴定;
(2)出耳鉴定:将菌种瓶或者菌种袋的口上覆盖物去除,温度23℃,空气相对湿度为93%,光照强度200Lx,耳片仍为白色的菌种即可判为白色变异菌种。
Claims (5)
1.一种白色毛木耳变异菌株的菌种分离培养与鉴定方法,其特征在于:它包括菌种分离培养和菌种鉴定两个步骤,其中,所述的菌种分离培养包括以下步骤:
(1)配制加富PDA培养基:培养基按以下组分及重量比配制:马铃薯15~25,麦麸5~7,葡萄糖1~3,琼脂1~3,水90~110;
(2)白色耳片获取:从栽培的毛木耳“琥珀木耳”品种中挑选白色耳片;
(3)分离培养:将挑选出的白色耳片去除表皮,并切取耳片内部组织块放在加富PDA培养基上培养,培养温度为22~28℃,菌丝体生长长度达到2~3cm时,选择无杂菌感染的菌种进行扩大培养,取前端菌丝体进行培养,菌丝生长满培养基后即为菌种,编号为APW2010,并将其放入冷藏装置内4~6℃下保藏;
所述的菌种鉴定包括以下拮抗鉴定步骤:
拮抗鉴定:将APW2010与“琥珀木耳”菌种同时接种在PDA平板培养基上,相距2~3cm,在25~28℃条件下培养8~10天,再在光照强度300~500Lx环境下培养5~7天,与“琥珀木耳”菌种接触部位出现隆起拮抗线的菌种即可判为白色变异菌种。
2.根据权利要求1所述的一种白色毛木耳变异菌株的菌种分离培养与鉴定方法,其特征在于:所述的菌种鉴定还包括以下出耳鉴定步骤:
(1)培养基配制与菌种培养:培养基按以下组分及重量比配制:棉籽壳28~35,麸皮2~5,水60~70,菌种培养方法是:将装有上述培养基的培养器经高压灭菌或者常压灭菌后,接种培养,在22~25℃下培养,菌丝生长满培养基后,进行出耳鉴定;
(2)出耳鉴定:将菌种瓶或者菌种袋的口上覆盖物去除,温度20~25℃,空气相对湿度为90~95%,光照强度100~300Lx,耳片仍为白色的菌种即可判为白色变异菌种。
3.根据权利要求1所述的一种白色毛木耳变异菌株的菌种分离培养与鉴定方法,其特征在于:所述的冷藏装置包括冰箱。
4.根据权利要求2所述的一种白色毛木耳变异菌株的菌种分离培养与鉴定方法,其特征在于:所述的培养器为750mL的玻璃瓶。
5.根据权利要求2所述的一种白色毛木耳变异菌株的菌种分离培养与鉴定方法,其特征在于:所述的培养器为折径为17cm、长度为33cm的塑料袋。
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