CN102265786A - 一种组织培养澳洲朱蕉红星的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种组织培养澳洲朱蕉红星的方法，该方法以澳洲朱蕉‘红星’小芽为原料，通过材料无菌处理、芽分化增殖、不定芽壮苗培养、植株生根培养、植株炼苗移栽5个步骤，分别通过芽诱导培养基、增殖培养基、壮苗培养基及生根培养基进行组织培养，得到澳洲朱蕉‘红星’植株。与现有技术相比，本发明可以更好地保持原有的母本性状，另外，相对于普通的扦插或嫁接，通过组培技术可以提高植株的繁殖速度和整齐度，有益效果明显。
Description
技术领域
本发明涉及一种植物的组培技术，尤其是涉及一种组织培养澳洲朱蕉‘红星’的方法。
背景技术
澳洲朱蕉‘红星’，为龙舌兰科灌木植物，地下部分具发达根茎，其主茎挺拔，茎高0.5-1米，不分枝或少分枝。叶红色轮生于茎秆上，株型很独特，原产地为我国南部热带地区，本品种为人工选育的园艺品种。多于庭园栽培或花境配置，为优秀的观叶植物。澳洲朱蕉‘红星’株形美观，色彩华丽高雅，具有较好的观赏性。朱蕉还是药用植物，其花、叶、根均可入药，我国广西民间曾用来治咯血、尿血、菌痢等症。但是，现今市场上流行的品种大多为国外引进的品种，种苗供应受限制，而且繁殖慢，从而限制了市场需求。
发明内容
本发明的目的就是为了克服上述现有技术存在的缺陷而提供一种保持原有的母本性状、繁殖率、整齐度等有益效果明显的组织培养澳洲朱蕉‘红星’的方法。
本发明的目的可以通过以下技术方案来实现：
一种组织培养澳洲朱蕉红星的方法，其特征在于，该方法通过材料无菌处理、芽分化增殖、不定芽壮苗培养、植株生根培养、植株炼苗移栽5个步骤得到澳洲朱蕉‘红星’植株，具体步骤如下：
(1)材料无菌处理
取澳洲朱蕉‘红星’植株基部的小芽用自来水冲洗2h后于超净工作台上，用75wt％的乙醇浸泡30s，1wt‰升汞浸泡15min，再用无菌水冲洗5-6次并吸干表面水分，将小芽基部切成1cm长后接种于芽诱导培养基上；
(2)芽分化增殖
接种于小芽诱导培养基上3周后，小芽的基部开始膨大并出现黄绿色突起，再过1周后可见愈伤组织，继续培养1个月，切下带芽愈伤组织放入增殖培养基中进行芽分化增殖；
(3)不定芽壮苗培养
增殖培养基诱导出的丛生芽，每丛有2-3棵不定芽植株，将其分成小丛或单芽后，放入壮苗培养基中进行不定芽壮苗培养，20天后不定芽植株可以长到2-3cm；
(4)植株生根培养
取高度为2-3cm的不定芽植株接种于生根培养基中进行诱导生根，10天后幼苗基部分化出许多白色的根原基，继续生根培养30天，根系可长至4-6cm并出现须根；
(5)植株炼苗移栽
继续生根培养20-25天，选择根系发达生长健壮的无菌苗在室内开瓶炼苗3天，然后取出后并洗净根部琼脂，继续在温室中驯化40天后移栽室外并给予肥水管理即可。
所述的芽诱导培养基的基准成分包括蔗糖30g/L、琼脂6g/L，营养成分为MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L、MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.3mg/L或MS+6-BA5.0mg/L+NAA0.5mg/L。
所述的芽诱导培养基营养成分优选MS+6-BA 5.0mg/L+NAA0.5mg/L。
所述的增殖培养基的基准成分包括蔗糖30g/L、琼脂6g/L，营养成分为MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L、MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L或MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.3mg/L。
所述的增殖培养基营养成分优选MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L。
所述的壮苗培养基的基准成分包括蔗糖30g/L、琼脂6g/L，营养成分为MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L、MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L或MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L。
所述的壮苗培养基营养成分优选MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L。
所述的生根培养基的基准成分包括蔗糖30g/L、琼脂6g/L，营养成分为MS+NAA0.05mg/L、MS+NAA0.1mg/L或MS+NAA0.2mg/L。
所述的生根培养基营养成分优选MS+NAA0.1mg/L。
所述的培养基的pH值为5.8，使用培养基培养时温度控制为24-26℃，光照条件控制为70-90μmol/ms。
与现有技术相比，本发明可以更好地保持原有的母本性状，另外，相对于普通的扦插或嫁接，通过本发明的组培技术可以提高植株的繁殖速度和整齐度，有益效果明显。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明进行详细说明。
实施例1
一种组织培养澳洲朱蕉‘红星’的方法，该方法通过材料无菌处理、芽分化增殖、不定芽壮苗培养、植株生根培养、植株炼苗移栽5个步骤得到澳洲朱蕉‘红星’植株，具体步骤如下：
(1)材料无菌处理
取澳洲朱蕉‘红星’植株基部的小芽用自来水冲洗2h后于超净工作台上，用75wt％的乙醇浸泡30s，1wt‰升汞浸泡15min，再用无菌水冲洗5次并吸干表面水分，将小芽基部切成1cm长后接种于芽诱导培养基上，芽诱导培养基的pH值为5.8，使用培养基培养时温度控制为24℃，光照条件控制为70μmol/ms，该芽诱导培养基的基准成分包括蔗糖30g/L、琼脂6g/L，营养成分为MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L；
(2)芽分化增殖
接种于小芽诱导培养基上3周后，小芽的基部开始膨大并出现黄绿色突起，再过1周后可见愈伤组织，基部愈伤组织比较多，但不影响不定芽的增殖，不定芽生长迅速并无玻璃化等不良现象，继续培养1个月，切下带芽愈伤组织放入增殖培养基中进行芽分化增殖，增殖培养基的pH值为5.8，使用培养基培养时温度控制为24℃，光照条件控制为70μmol/ms，增殖培养基的基准成分包括蔗糖30g/L、琼脂6g/L，营养成分为MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L；
(3)不定芽壮苗培养
增殖培养基诱导出的丛生芽，每丛有2棵不定芽植株，将其分成小丛或单芽后，放入壮苗培养基中进行不定芽壮苗培养，壮苗培养基的pH值为5.8，使用培养基培养时温度控制为24℃，光照条件控制为70μmol/ms，壮苗培养基的基准成分包括蔗糖30g/L、琼脂6g/L，营养成分为MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L，不定芽迅速伸长，20天后不定芽植株可以长到2cm；
(4)植株生根培养
取高度为2cm的不定芽植株接种于生根培养基中进行诱导生根，生根培养基的pH值为5.8，使用培养基培养时温度控制为24℃，光照条件控制为70μmol/ms，生根培养基的基准成分包括蔗糖30g/L、琼脂6g/L，营养成分为MS+NAA0.05mg/L，10天后幼苗基部分化出许多白色的根原基，继续生根培养30天，根系可长至4cm并出现须根；
(5)植株炼苗移栽
继续生根培养25天，选择根系发达生长健壮的无菌苗在室内开瓶炼苗3天，然后取出后并洗净根部琼脂，继续在温室中驯化40天后移栽室外并给予肥水管理即完成对澳洲朱蕉‘红星’植株的组织培养。
实施例2
一种组织培养澳洲朱蕉红星的方法，该方法通过材料无菌处理、芽分化增殖、不定芽壮苗培养、植株生根培养、植株炼苗移栽5个步骤得到澳洲朱蕉‘红星’植株，具体步骤如下：
(1)材料无菌处理
取澳洲朱蕉‘红星’植株基部的小芽用自来水冲洗2h后于超净工作台上，用75wt％的乙醇浸泡30s，1wt‰升汞浸泡15min，再用无菌水冲洗6次并吸干表面水分，将小芽基部切成1cm长后接种于芽诱导培养基上，芽诱导培养基的pH值为5.8，使用培养基培养时温度控制为25℃，光照条件控制为80μmol/ms，该芽诱导培养基的基准成分包括蔗糖30g/L、琼脂6g/L，营养成分为MS+6-BA5.0mg/L+NAA0.5mg/L；
(2)芽分化增殖
接种于小芽诱导培养基上3周后，小芽的基部开始膨大并出现黄绿色突起，再过1周后可见愈伤组织，基部愈伤组织比较多，但不影响不定芽的增殖，不定芽生长迅速并无玻璃化等不良现象，继续培养1个月，切下带芽愈伤组织放入增殖培养基中进行芽分化增殖，增殖培养基的pH值为5.8，使用培养基培养时温度控制为25℃，光照条件控制为80μmol/ms，增殖培养基的基准成分包括蔗糖30g/L、琼脂6g/L，营养成分为MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L；
(3)不定芽壮苗培养
增殖培养基诱导出的丛生芽，每丛有3棵不定芽植株，将其分成小丛或单芽后，放入壮苗培养基中进行不定芽壮苗培养，壮苗培养基的pH值为5.8，使用培养基培养时温度控制为25℃，光照条件控制为80μmol/ms，壮苗培养基的基准成分包括蔗糖30g/L、琼脂6g/L，营养成分为MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L，不定芽迅速伸长，20天后不定芽植株可以长到3cm；
(4)植株生根培养
取高度为3cm的不定芽植株接种于生根培养基中进行诱导生根，生根培养基的pH值为5.8，使用培养基培养时温度控制为25℃，光照条件控制为80μmol/ms，生根培养基的基准成分包括蔗糖30g/L、琼脂6g/L，营养成分为MS+NAA0.1mg/L，10天后幼苗基部分化出许多白色的根原基，继续生根培养30天，根系可长至4cm并出现须根；
(5)植株炼苗移栽
继续生根培养20天，选择根系发达生长健壮的无菌苗在室内开瓶炼苗3天，然后取出后并洗净根部琼脂，继续在温室中驯化40天后移栽室外并给予肥水管理即完成对澳洲朱蕉‘红星’植株的组织培养。
实施例3
一种组织培养澳洲朱蕉红星的方法，该方法通过材料无菌处理、芽分化增殖、不定芽壮苗培养、植株生根培养、植株炼苗移栽5个步骤得到澳洲朱蕉‘红星’植株，具体步骤如下：
(1)材料无菌处理
取澳洲朱蕉‘红星’植株基部的小芽用自来水冲洗2h后于超净工作台上，用75wt％的乙醇浸泡30s，1wt‰升汞浸泡15min，再用无菌水冲洗6次并吸干表面水分，将小芽基部切成1cm长后接种于芽诱导培养基上，芽诱导培养基的pH值为5.8，使用培养基培养时温度控制为26℃，光照条件控制为90μmol/ms，该芽诱导培养基的基准成分包括蔗糖30g/L、琼脂6g/L，营养成分为MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.3mg/L；
(2)芽分化增殖
接种于小芽诱导培养基上3周后，小芽的基部开始膨大并出现黄绿色突起，再过1周后可见愈伤组织，基部愈伤组织比较多，但不影响不定芽的增殖，不定芽生长迅速并无玻璃化等不良现象，继续培养1个月，切下带芽愈伤组织放入增殖培养基中进行芽分化增殖，增殖培养基的pH值为5.8，使用培养基培养时温度控制为26℃，光照条件控制为90μmol/ms，增殖培养基的基准成分包括蔗糖30g/L、琼脂6g/L，营养成分为MS+6-BA 3.0mg/L+NAA0.3mg/L；
(3)不定芽壮苗培养
增殖培养基诱导出的丛生芽，每丛有3棵不定芽植株，将其分成小丛或单芽后，放入壮苗培养基中进行不定芽壮苗培养，壮苗培养基的pH值为5.8，使用培养基培养时温度控制为26℃，光照条件控制为90μmol/ms，壮苗培养基的基准成分包括蔗糖30g/L、琼脂6g/L，营养成分为MS+6-BA 2.0mg/L+NAA0.2mg/L，不定芽迅速伸长，20天后不定芽植株可以长到3cm；
(4)植株生根培养
取高度为3cm的不定芽植株接种于生根培养基中进行诱导生根，生根培养基的pH值为5.8，使用培养基培养时温度控制为26℃，光照条件控制为90μmol/ms，生根培养基的基准成分包括蔗糖30g/L、琼脂6g/L，营养成分为MS+NAA0.2mg/L，10天后幼苗基部分化出许多白色的根原基，继续生根培养30天，根系可长至4cm并出现须根；
(5)植株炼苗移栽
继续生根培养20天，选择根系发达生长健壮的无菌苗在室内开瓶炼苗3天，然后取出后并洗净根部琼脂，继续在温室中驯化40天后移栽室外并给予肥水管理即完成对澳洲朱蕉‘红星’植株的组织培养。
Claims (10)
1.一种组织培养澳洲朱蕉红星的方法，其特征在于，该方法通过材料无菌处理、芽分化增殖、不定芽壮苗培养、植株生根培养、植株炼苗移栽5个步骤得到澳洲朱蕉‘红星’植株，具体步骤如下：
(1)材料无菌处理
取澳洲朱蕉‘红星’植株基部的小芽，用自来水冲洗2h后于超净工作台上，用75wt％的乙醇浸泡30s，1wt‰升汞浸泡15min，再用无菌水冲洗5-6次并吸干表面水分，将小芽基部切成1cm长后接种于芽诱导培养基上；
(2)芽分化增殖
接种于小芽诱导培养基上3周后，小芽的基部开始膨大并出现黄绿色突起，再过1周后可见愈伤组织，继续培养1个月，切下带芽愈伤组织放入增殖培养基中进行芽分化增殖；
(3)不定芽壮苗培养
增殖培养基诱导出的丛生芽，每丛有2-3棵不定芽植株，将其分成小丛或单芽后，放入壮苗培养基中进行不定芽壮苗培养，20天后不定芽植株可以长到2-3cm；
(4)植株生根培养
取高度为2-3cm的不定芽植株接种于生根培养基中进行诱导生根，10天后幼苗基部分化出许多白色的根原基，继续生根培养30天，根系可长至4-6cm并出现须根；
(5)植株炼苗移栽
继续生根培养20-25天，选择根系发达生长健壮的无菌苗在室内开瓶炼苗3天，然后取出后并洗净根部琼脂，继续在温室中驯化40天后移栽室外并给予肥水管理即可。
2.根据权利要求1所述的一种组织培养澳洲朱蕉红星的方法，其特征在于，所述的芽诱导培养基的基准成分包括蔗糖30g/L、琼脂6g/L，营养成分为MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L、MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.3mg/L或MS+6-BA5.0mg/L+NAA0.5mg/L。
3.根据权利要求2所述的一种组织培养澳洲朱蕉红星的方法，其特征在于，所述的芽诱导培养基营养成分优选MS+6-BA 5.0mg/L+NAA0.5mg/L。
4.根据权利要求1所述的一种组织培养澳洲朱蕉红星的方法，其特征在于，所述的增殖培养基的基准成分包括蔗糖30g/L、琼脂6g/L，营养成分为MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L、MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L或MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.3mg/L。
5.根据权利要求4所述的一种组织培养澳洲朱蕉红星的方法，其特征在于，所述的增殖培养基营养成分优选MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L。
6.根据权利要求1所述的一种组织培养澳洲朱蕉红星的方法，其特征在于，所述的壮苗培养基的基准成分包括蔗糖30g/L、琼脂6g/L，营养成分为MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L、MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L或MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L。
7.根据权利要求6所述的一种组织培养澳洲朱蕉红星的方法，其特征在于，所述的壮苗培养基营养成分优选MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L。
8.根据权利要求1所述的一种组织培养澳洲朱蕉红星的方法，其特征在于，所述的生根培养基的基准成分包括蔗糖30g/L、琼脂6g/L，营养成分为MS+NAA0.05mg/L、MS+NAA0.1mg/L或MS+NAA0.2mg/L。
9.根据权利要求8所述的一种组织培养澳洲朱蕉红星的方法，其特征在于，所述的生根培养基营养成分优选MS+NAA0.1mg/L。
10.根据权利要求1所述的一种组织培养澳洲朱蕉红星的方法，其特征在于，所述的培养基的pH值为5.8，使用培养基培养时温度控制为24-26℃，光照条件控制为70-90μmol/ms。
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