CN102260249B - (-)多沙唑嗪甲磺酸盐ⅱ型结晶、其制备方法及用途 - Google Patents

Abstract

本发明提供了(-)多沙唑嗪甲磺酸盐及其多晶型化合物、含有该(-)多沙唑嗪甲磺酸盐的制剂，及其在制备特异性治疗良性前列腺增生药物中的用途。

Description

(-)多沙唑嗪甲磺酸盐Ⅱ型结晶、其制备方法及用途

本申请是申请号为CN 200610147193.9，申请日为2006年11月10日，发明名称为“(-)多沙唑嗪甲磺酸盐、其制备方法及用途”的分案申请。 

技术领域

本发明涉及具有光学活性的(-)多沙唑嗪甲磺酸盐和含有该盐的制剂，其可以具有特异性地作用于前列腺内的α₁受体，同时可以减少多沙唑嗪的全身性反应。更具体的，本发明涉及光学活性的(-)(左旋)多沙唑嗪甲磺酸盐及其I型、II型、III型、IV型、V型或VI型结晶以及使用该光学活性的(-)多沙唑嗪甲磺酸盐的I型、II型、III型、IV型、V型或VI型结晶制剂和它们在制备特异性治疗良性前列腺增生的药物中的用途。 

背景技术

良性前列腺增生症(benign prostatic hyperplasia，BPH)是常见的、多发的男性老年病之一。BPH目前多采用手术治疗，虽然效果较好，但是仍有20％手术患者的症状不能得到根本缓解；因此人们力求寻找药物和损伤性小的非手术方法替代外科治疗。 

BPH患者出现的尿路梗阻表现，一方面源于增大前列腺所致的机械性梗阻，另一个更主要的原因是前列腺和膀胱颈部平滑肌收缩导致的动力性梗阻。研究发现，交感神经系统对前列腺平滑肌功能的调节发挥着重要作用；如脊髓麻醉阻滞全部神经时，可导致尿道闭合压下降47％，阻断α受体能产生相似的降压作用。这些动力学变化说明，药物阻滞支配前列腺运动的交感肾上腺素能神经，具有重要的临床意义，这构成了α受体阻滞剂治疗BPH的基础。 

α受体在体内广泛分布，在泌尿生殖系统中分布在前列腺内、包膜、尿道、膀胱颈，尤其是前列腺基质内最多。α受体又可分为α₁和α₂受体。研究发现，分布在前列腺平滑肌上的主要是α₁受体。因此，对α₁/α₂受体有高度选 择性的拮抗剂，可以有效地改善尿路梗阻症状(Eri LM，Tveter KJ，α-Blockade in the treatment of symptomatic benign prostatic hyperplasia，J Urol.，1995，154：923～934.)。 

(±)多沙唑嗪(Doxazosin)最早公开于US4,188,390中，该药物由Pfizer公司开发，并于1988年上市，是长效选择性α₁受体阻断剂，目前市售的多沙唑嗪制剂为甲磺酸盐，是含有左旋和右旋多沙唑嗪的外消旋体混合物。 

尽管(±)多沙唑嗪作为选择性α₁受体阻断剂，可以缓解BPH尿路梗阻的症状，但是发现其具有非常明显的心血管方面的副作用，例如低血压、眩晕、头痛、口干、不安、紧张、出汗、心动过速和皮肤潮红等(Lepor H，Knapp-Maloney G，Sunshine H.A dose titration study evaluating terazosin，a selective，once-a-day α₁-blocker for the treatment of symptomatic benign prostatic hyperplasia，J Urol.，1990a，144(6)：1393～7.)。 

Hatano等通过放配基和离体实验研究了(±)多沙唑嗪及其对映体(+)多沙唑嗪和(-)多沙唑嗪在人前列腺组织的药理学特性(Hatano A，Tang R，Walden PD，et al.The α-adrenoceptor antagonist properties of the enantiomers of doxazosin in the human prostate，Eur J Pharmacology，1996，313(1-2)：135～143.)。研究结果表明，(±)多沙唑嗪及其对映体对α₁受体有高选择性和高亲和力。离体实验证明，(±)多沙唑嗪及其对映体竞争性拮抗苯肾上腺素引起人离体前列腺平滑肌收缩反应，三者的拮抗参数即pA₂值相同(Yamada S，Suzuki M，Tanaka C，et al.Comparative study on α₁-adrenoceptor antagonist binding in human prostate and aorta，Clin.Exp.Pharmacol Physiol.，1994，21(5)：405～11)。因此，(±)多沙唑嗪、(+)多沙唑嗪和(-)多沙唑嗪对心血管系统的立体选择性成为人们十分关心的重要问题。如果两个对映体中的某一个药物对心血管系统的作用弱于另一个对映体同时也弱于(±)多沙唑嗪，则该药物可能成为心血管系统副作用小且治疗BPH效果更为专一的单一对映体药物。 

发明名称为“治疗良性前列腺增生和动脉粥样硬化的方法和(+)多沙 唑嗪的组合物”(Methods and Compositions of(+)Doxazosin for the Treatment of Benign Prostatic Hyperplasia and Atherosclerosis)的WO94/09785号公报中公开了(+)多沙唑嗪的选择性治疗良性前列腺增生症的效果，其中描述到：“(-)多沙唑嗪诱发低血压反应，而(+)多沙唑嗪不具有低血压反应；因此(+)多沙唑嗪优于(±)多沙唑嗪，更适合于治疗良性前列腺增生症。临床人用剂量为每日0.5～10mg，单次或分次服用；最适剂量每日0.5～5mg，单次或分次服用”。但是在同一申请人提交的发明名称为“治疗良性前列腺增生和动脉粥样硬化的方法和(-)多沙唑嗪的组合物”(Methods andCompositions of(-)Doxazosin for the Treatment of Benign Prostatic Hyperplasia and Atherosclerosis)WO94/09783号公报中也公开了(-)多沙唑嗪的选择性治疗良性前列腺增生症的效果，其中描述到：“(+)多沙唑嗪诱发低血压反应，而(-)多沙唑嗪不具有低血压反应；因此(-)多沙唑嗪优于(±)多沙唑嗪，更适合于治疗良性前列腺增生症。临床人用剂量为每日0.5～10mg，单次或分次服用；最适剂量每日0.5～5mg，单次或分次服用”。 

因此，可以认为，关于(-)或(+)多沙唑嗪的选择性治疗BPH的效果，仍然是不清楚的。此外，关于(-)或(+)多沙唑嗪治疗BPH的特异性，现有技术文件也不清楚甚至自相矛盾。因此，对于研制治疗BPH的新药造成混乱。 

同时，上述文献中也没有公开关于光学活性多沙唑嗪的盐的内容，因此对于光学活性多沙唑嗪的盐，目前也知之甚少。 

本发明的发明人等通过长期深入研究，发现了(-)多沙唑嗪的盐酸盐及其多晶型物-I型、II型和III型结晶。另外，本发明人等还发现通过采用(-)多沙唑嗪盐酸盐，可以获得良好的治疗BPH的效果，同时可以降低用药量，而且减少心血管方面副反应的发生。(-)多沙唑嗪盐酸盐，及其多晶型物-I型、II型和III型结晶已经在2004年9月8日申请了发明名称为光学活性的多沙唑嗪盐的发明专利，申请号：200410076821.X。 

发明内容

本发明的发明人等在(-)多沙唑嗪盐酸盐进一步研究的基础上，完成了本发明。 

本发明公开了： 

1.(-)多沙唑嗪甲磺酸盐。 

2.如1所述的(-)多沙唑嗪的甲磺酸盐，为在2θ角为11.01°、25.9°和26.6°左右处具有衍射峰的I型结晶。 

3.如2所述的(-)多沙唑嗪的甲磺酸盐，为具有图2所示的X-射线衍射模式的结晶。 

4.如2所述的(-)多沙唑嗪的甲磺酸盐，其DSC峰值为251.95℃，起始点235.66℃，热焓值/J·g^-1 170.21。 

5.如2所述的(-)多沙唑嗪的甲磺酸盐，其DSC图谱如图13所示。 

6.如1所述的(-)多沙唑嗪的甲磺酸盐，为在2θ角为15.20°、15.82°、22.10°和22.79°左右具有衍射峰的II型结晶。 

7.如6所述的(-)多沙唑嗪的甲磺酸盐，其衍射峰相对强度最大的峰位于2θ角15.82°左右。 

8.如6所述的(-)多沙唑嗪的甲磺酸盐，为具有图4所示的X-射线衍射模式的结晶。 

9.如6所述的(-)多沙唑嗪的甲磺酸盐，其DSC峰值为255.62℃，起始点254.03℃，热焓值/J·g^-1 106.60。 

10.如6所述的(-)多沙唑嗪的甲磺酸盐，其DSC图谱如图14所示。 

11.如1所述的(-)多沙唑嗪的甲磺酸盐，为在2θ角为10.35°、20.45°和22.68°左右处具有衍射峰的III型结晶。 

12.如11所述的(-)多沙唑嗪的甲磺酸盐，衍射峰相对强度最大的峰位于2θ角22.68度左右。 

13.如11所述的(-)多沙唑嗪的甲磺酸盐，为具有图6所示的X-射 线衍射模式的结晶。 

14.如11所述的(-)多沙唑嗪的甲磺酸盐，其DSC峰值为283.30℃，276.74，热焓值/J·g^-1 143.54。 

15.如11所述的(-)多沙唑嗪的甲磺酸盐，其DSC图谱如图15所示。 

16.如1所述的(-)多沙唑嗪的甲磺酸盐，为在2θ角为15.2°、22.67°和24.75°左右处具有衍射峰的IV型结晶。 

17.如16所述的(-)多沙唑嗪的甲磺酸盐，衍射峰相对强度最大的峰位于2θ角24.75度左右。 

18.如16所述的(-)多沙唑嗪的甲磺酸盐，为具有图8所示的X-射线衍射模式的结晶。 

19.如16所述的(-)多沙唑嗪的甲磺酸盐，DSC数据为峰值138.90℃，起始点124.37℃，热焓值/J·g^-1 34.07；峰值177.10，起始点167.44℃，热焓值/J·g^-1 12.30；峰值243.80，起始点231.75℃，热焓值/J·g^-1 44.06；峰值269.30，起始点263.45，热焓值/J·g^-1 28.94之一。 

20.如16所述的(-)多沙唑嗪的甲磺酸盐，其DSC图谱如图16所示。 

21.如1所述的(-)多沙唑嗪的甲磺酸盐，为在2θ角为15.83°、20.58°和22.8°左右处具有衍射峰的V型结晶。 

22.如21所述的(-)多沙唑嗪的甲磺酸盐，衍射峰相对强度最大的峰位于2θ角22.8度左右。 

23.如21所述的(-)多沙唑嗪的甲磺酸盐，为具有图10所示的X-射线衍射模式的结晶。 

24.如21所述的(-)多沙唑嗪的甲磺酸盐，其DSC峰值为247.91℃，240.66，热焓值/J·g^-1131.74。 

25.如21所述的(-)多沙唑嗪的甲磺酸盐，其DSC图谱如图17。 

26.如权利要求1所述的(-)多沙唑嗪的甲磺酸盐，为在2θ角为15.89°、20.63°和22.85°左右处具有衍射峰的VI型结晶。 

27.如26所述的(-)多沙唑嗪的甲磺酸盐，衍射峰相对强度最大的峰 位于2θ角22.85度左右。 

28.如26所述的(-)多沙唑嗪的甲磺酸盐，为具有图12所示的X-射线衍射模式的结晶。 

29.如26所述的(-)多沙唑嗪的甲磺酸盐，其DSC峰值为247.55℃，240.82，热焓值/J·g^-1 66.45。 

30.如26所述的(-)多沙唑嗪的甲磺酸盐，其DSC图谱如图18所示。 

31.一种多沙唑嗪制剂，含有1-29任一所述的(-)多沙唑嗪甲磺酸盐和药用载体，且实质上不含(+)多沙唑嗪。 

32.上述1-29所述的(-)多沙唑嗪甲磺酸盐和上述30的制剂在制备特异性治疗良性前列腺增生的药物中的用途。 

附图说明

图1是制备例3所得(-)多沙唑嗪甲磺酸盐I型结晶的红外吸收光谱。 

图2是制备例3所得(-)多沙唑嗪甲磺酸盐I型结晶的X射线衍射光谱。 

图3是制备例2所得(-)多沙唑嗪甲磺酸盐II型结晶的红外吸收光谱。 

图4是制备例2所得(-)多沙唑嗪甲磺酸盐II型结晶的X射线衍射光谱。 

图5是制备例4所得(-)多沙唑嗪甲磺酸盐III型结晶的红外吸收光谱。 

图6是制备例4所得(-)多沙唑嗪甲磺酸盐III型结晶的X射线衍射光谱。 

图7是制备例7所得的(-)多沙唑嗪甲磺酸盐IV型结晶的红外吸收光谱。 

图8是制备例7所得的(-)多沙唑嗪甲磺酸盐IV型结晶的X射线衍射光谱。 

图9是制备例5所得的(-)多沙唑嗪甲磺酸盐V型结晶的红外吸收光谱。 

图10是制备例5所得的(-)多沙唑嗪甲磺酸盐V型结晶的X射线衍射光谱。 

图11是制备例6所得的(-)多沙唑嗪甲磺酸盐VI型结晶的红外吸收光谱。 

图12是制备例6所得的(-)多沙唑嗪甲磺酸盐VI型结晶的X射线衍射光谱。 

图13是制备例3所得的(-)多沙唑嗪甲磺酸盐I型结晶的DSC分析图谱。 

图14是制备例2所得的(-)多沙唑嗪甲磺酸盐II型结晶的DSC分析图谱。 

图15是制备例4所得的(-)多沙唑嗪甲磺酸盐III型结晶的DSC分析图谱。 

图16是制备例7所得的(-)多沙唑嗪甲磺酸盐IV型结晶的DSC分析图谱。 

图17是制备例5所得的(-)多沙唑嗪甲磺酸盐V型结晶的DSC分析图谱。 

图18是制备例6所得的(-)多沙唑嗪甲磺酸盐VI型结晶的DSC分析图谱。 

具体实施方式

以下具体介绍本发明，本发明说指本发明的(-)多沙唑嗪甲磺酸盐是指系统命名为(-)4-氨基-2-[4-(1，4-苯并二氧戊环-2-羰基)哌嗪-1-基]-6，7-二甲氧基喹唑啉的化合物的单甲磺酸盐，具有如下式(II)所示的结构： 

本发明的(-)多沙唑嗪甲磺酸盐应当为基本上光学纯的物质，所谓光学纯是指(-)多沙唑嗪甲磺酸盐中，根据制备工艺，实际上不含或者含有含量不影响(-)多沙唑嗪的药理活性的(+)多沙唑嗪的(-)多沙唑嗪和(+)多沙唑嗪的混合物。所谓含量不影响(-)多沙唑嗪的药理活性的混合物，ee值应当在80％以上，优选90％以上，更优选95％以上，再优选98％以上，最优选99％以上或100％。 

(-)多沙唑嗪甲磺酸盐具有多种晶型，现已发现了以下(-)多沙唑嗪甲磺酸盐的I型、II型、III型、IV型、V型或VI型结晶。 

六种结晶的理化性质如下： 

1.晶型I(无定型)： 

溶解度：溶解于水、甲醇、乙醇、二甲基亚砜等极性溶剂；不溶于丙酮、 

        氯仿、二氯甲烷等弱极性溶剂和石油醚、苯等非极性溶剂。 

熔点：没有固定的熔点 

红外光谱：见图1 

X-射线粉末衍射：见图2 

DSC分析图谱：见图13 

2.晶型II： 

溶解度：溶解于水、甲醇、乙醇、二甲基亚砜等极性溶剂；不溶于丙酮、 

        氯仿、二氯甲烷等弱极性溶剂和石油醚、苯等非极性溶剂。 

熔点：250.4～268.9 

红外光谱：见图3 

X-射线粉末衍射：见图4 

DSC分析图谱：见图14 

3.晶型III： 

溶解度：溶解于水、甲醇、乙醇、二甲基亚砜等极性溶剂；不溶于丙酮、 

        氯仿、二氯甲烷等弱极性溶剂和石油醚、苯等非极性溶剂。 

熔点：268.2～270.3 

红外光谱：见图5 

X-射线粉末衍射：见图6 

DSC分析图谱：见图15 

4.晶型IV： 

溶解度：溶解于水、甲醇、乙醇、二甲基亚砜等极性溶剂；不溶于丙酮、 

        氯仿、二氯甲烷等弱极性溶剂和石油醚、苯等非极性溶剂。 

熔点：238.4～249.6 

红外光谱：见图7 

X-射线粉末衍射：见图8 

DSC分析图谱：见图16 

5.晶型V： 

溶解度：溶解于水、甲醇、乙醇、二甲基亚砜等极性溶剂；不溶于丙酮、 

        氯仿、二氯甲烷等弱极性溶剂和石油醚、苯等非极性溶剂。 

熔点：246.8～248.2 

红外光谱：见图9 

X-射线粉末衍射：见图10 

DSC分析图谱：见图17 

6.晶型VI： 

溶解度：溶解于水、甲醇、乙醇、二甲基亚砜等极性溶剂；不溶于丙酮、 

        氯仿、二氯甲烷等弱极性溶剂和石油醚、苯等非极性溶剂。 

熔点：268.4～269.2 

红外光谱：见图11 

X-射线粉末衍射：见图12 

DSC分析图谱：见图18 

具体来说，I型结晶，其在2θ角11.0°、25.9°和26.6°等处有衍射峰，衍射峰基峰位于25.9°左右。该I型结晶的(-)多沙唑嗪甲磺酸盐的红外最大吸收位于波数1600cm^-1左右处，另外在1500cm^-1左右和1650cm^-1左右的吸收峰也较强。 

具体的，图2中I型结晶的衍射图谱总结如下： 

图13中I型结晶的DSC图谱总结如下： 

晶型	峰值(peak)/℃	起始点(onset)/℃	热焓值/J·g-1
				I	251.95	235.66	170.21

[0117] 从上述图谱观察，(-)多沙唑嗪甲磺酸盐的I型结晶实际上属于无定形物。 

(-)多沙唑嗪的甲磺酸盐II型结晶，其在2θ角15.2°、15.82°和22.7°左右处有衍射峰，其衍射峰基峰位于15.82°左右。该II型结晶的(-)多沙唑嗪甲磺酸盐的红外最大吸收也是位于波数1600cm^-1左右，同时在波数1100～1200cm^-1、1200～1300cm^-1和1400～1500cm^-1间均具有极强的吸收。 

具体的，图4中II型结晶的衍射图谱概括如下： 

图14中II型结晶的DSC图谱总结如下： 

晶型	峰值(peak)/℃	起始点(onset)/℃	热焓值/J·g-1
				II	255.62	254.03	106.60

(-)多沙唑嗪的甲磺酸盐的III型结晶，其在2θ角10.35°、20.45°和22.68°左右处有衍射峰，其衍射峰基峰位于22.68°左右。该II型结晶的(-)多沙唑嗪甲磺酸盐的红外最大吸收也是位于波数1600cm^-1左右，同时在波数1200-1300cm^-1左右和1400-1500cm^-1左右也具有较强的吸收。 

具体的，图6中III型结晶的衍射图谱概括如下： 

图15中III型结晶的DSC图谱总结如下： 

晶型	峰值(peak)/℃	起始点(onset)/℃	热焓值/J·g-1
				III	283.30	276.74	143.54

(-)多沙唑嗪的甲磺酸盐IV型结晶，其在2θ角15.2°、22.67°和24.75°左右处有衍射峰，其衍射峰基峰位于24.75°左右。该IV型结晶的(-)多沙唑嗪甲磺酸盐的红外最大吸收也是位于波数1600cm^-1左右，同时在波数1400～1500cm^-1和1600～1700cm^-1间均具有极强的吸收。 

具体的，图8中IV型结晶的衍射图谱概括如下： 

图16中IV型结晶的DSC图谱总结如下： 

(-)多沙唑嗪的甲磺酸盐V型结晶，其在2θ角15.83°、20.58°和22.8°左右处有衍射峰，其衍射峰基峰位于22.8°左右。该V型结晶的(-)多沙唑嗪甲磺酸盐的红外最大吸收也是位于波数1600cm^-1左右，同时在波数1200～1300cm^-1和1400～1500cm^-1间均具有极强的吸收。 

具体的，图10中V型结晶的衍射图谱概括如下： 

图17中V型结晶的DSC图谱总结如下： 

晶型	峰值(peak)/℃	起始点(onset)/℃	热焓值/J·g-1
				V	247.91	240.66	131.74

(-)多沙唑嗪的甲磺酸盐VI型结晶，其在2θ角15.89°、20.63°和22.85°左右处有衍射峰，其衍射峰基峰位于22.85°左右。该VI型结晶的(-)多沙唑嗪甲磺酸盐的红外最大吸收也是位于波数1600cm^-1左右，同时在波数1200～1300cm^-1、1400～1500cm^-1和1600～1700cm^-1间均具有极强的吸收。 

具体的，图12中VI型结晶的衍射图谱概括如下： 

图18中VI型结晶的DSC图谱总结如下： 

晶型	峰值(peak)/℃	起始点(onset)/℃	热焓值/J·g-1
				VI	247.55	240.82	66.45

以下对本发明的(-)多沙唑嗪甲磺酸盐的制备方法进行介绍。 

本发明的(-)多沙唑嗪甲磺酸盐可以采用常规的光学拆分方法进行。 例如，可以通过拆分市售的外消旋多沙唑嗪(以下记作(±)多沙唑嗪)进行，首先将市售的(±)多沙唑嗪盐碱化，然后通过色谱法或者结晶法进行拆分得到(-)多沙唑嗪游离碱，之后用甲磺酸酸化即得。 

例如，可以使用普通制备量色谱柱，采用常规方法按照普通的分离方法进行拆分，例如在流动相中加入手性添加剂，通过手性添加剂与所要分离的外消旋多沙唑嗪的相互作用，使得(-)多沙唑嗪和(+)多沙唑嗪具有不同的保留时间，从而实现分离。之后，去除手性添加剂，用甲磺酸(或者甲磺酸的有机溶剂溶液等)酸化，即可获得本发明的(-)多沙唑嗪甲磺酸盐。 

或者，也可以采用具有手性填料的手性分离柱，按照常规方法进行色谱分离。 

另外，不通过对(±)多沙唑嗪进行拆分，而是通过对手性中间体进行拆分，之后进行合成，也可以直接获得光学活性的左旋多沙唑嗪或者多沙唑嗪甲磺酸盐，即(-)多沙唑嗪或者(-)多沙唑嗪甲磺酸盐。 

例如，可以首先将式(III)的外消旋苯并二氧六环基羰基哌嗪(以下简称侧链碱I)拆分， 

得到式(IV)所示的左旋苯并二氧六环基羰基哌嗪(以下简称(-)侧链碱I)， 

然后与式(V)所示的二甲氧基喹唑啉(其中X表示离去基团如卤素(氯、 溴、碘等)、低级烷氧基或者低级烷硫基等)缩合， 

得到式(VI)所示的(-)多沙唑嗪游离碱或者盐， 

将式(VI)的游离碱用例如甲磺酸-甲醇或者甲磺酸-乙醇等溶液酸化，即可获得式(II)所示的本发明的(-)多沙唑嗪甲磺酸盐。 

在拆分侧链碱I的时候，可以采用常规拆分方法，如采用与光学活性酸反应生成非对映异构体盐，根据生成的盐的溶解度差异，实现消旋侧链碱I的拆分。作为所采用的光学活性的酸，例如有D-酒石酸、D-二乙酰酒石酸、D-二苯甲酰酒石酸、D-樟脑磺酸、L-谷氨酸等。从原料的易得、价格等方面考虑，优选D-酒石酸。 

另外，除了拆分侧链碱I以外，也可以首先拆分式(VII)表示的外消旋酸(以下简称侧链酸II)或其反应性衍生物(如酰卤化物、酸酐、酯等)， 

得到式(VIII)表示的(-)侧链酸II或转变为其反应性衍生物(如酰卤化物、酯等)， 

然后与另外制备的式(IX)表示的中间体III反应， 

得到式(VI)所示的(-)多沙唑嗪游离碱或者盐， 

将式(VI)的游离碱用例如甲磺酸-甲醇或者甲磺酸-乙醇等溶液酸化，即可获得式(II)所示的本发明的(-)多沙唑嗪甲磺酸盐。 

上述侧链酸II的反应性衍生物，例如侧链酸与其它酸形成的复合酸酐如低级烷酸酐、碳酸单酯酐等，与N-琥珀酰亚胺、邻苯二甲酰亚胺等成的酯、酰氯、酰溴等酰卤化物。 

侧链酸II的拆分方法，可以采用常规方法，例如与光学活性的碱反应，形成非对映异构体盐，根据生成的盐的溶解度差异，实现消旋侧链酸II的拆分。作为可采用的光学活性的碱，例如常用的光学活性生物碱如番木鳖碱、马钱子碱、喹宁、奎尼丁、咖啡碱、麻黄碱、D或L-α-苯乙胺、D或L-苯基异丙胺等。 

在本申请人申请的申请号为：200410076821.X的发明的实验例中，得到了在α₁受体的特异性阻断剂(±)多沙唑嗪甲磺酸盐、(+)多沙唑嗪盐酸盐和(-)多沙唑嗪盐酸盐中，多沙唑嗪甲磺酸盐对映体对心血管系统α₁受体的阻断作用具有立体选择性，其中(-)多沙唑嗪盐酸盐的作用最弱。也就是说，(-)多沙唑嗪盐酸盐的降压作用(包括收缩压和舒张压)显著低于(±)多沙唑嗪甲磺酸盐与(+)多沙唑嗪盐酸盐。另一方面，从(+)多沙唑嗪盐酸盐、(-)多沙唑嗪盐酸盐和(±)多沙唑嗪甲磺酸盐降低膀胱排尿压的活性来看，三者的最大降压幅度分别为6.80±3.21、7.64±3.14和7.52±2.86mmH₂O(均值±标准差)，三者的最大抑制效应无明显差异(P＞0.05)。此外，(+)多沙唑嗪盐酸盐、(±)多沙唑嗪甲磺酸盐和(-)多沙唑嗪盐酸盐对膀胱基础内压值无明显影响(P＞0.05)，多沙唑嗪对映体对正常麻醉大鼠膀胱排尿反射的作用不具有立体选择性。所以，在目的为特异性地治疗治疗良性前列腺增生的时候，优选使用(-)多沙唑嗪盐酸盐的结论。 

而本发明通过进一步的动物实验，对(-)多沙唑嗪盐酸盐与(-)多沙唑嗪甲磺酸盐的生物利用度进行了研究，得到了(-)多沙唑嗪甲磺酸盐的生物利用度优于(-)多沙唑嗪盐酸盐的结论。 

另外，本发明还涉及特异性治疗良性前列腺增生的多沙唑嗪甲磺酸盐制剂，其中含有(-)多沙唑嗪甲磺酸盐，且实质上不含(+)多沙唑嗪。 

本发明的特异性治疗良性前列腺增生的多沙唑嗪制剂中所含有(-)多沙唑嗪甲磺酸盐如前所定义，其中的实质上不含(+)多沙唑嗪与前面的叙述也相同。 

在用于特异性治疗良性前列腺增生的时候，本发明的(-)多沙唑嗪甲磺酸盐的用法、用量等与疾病的症状、患者的年龄、种族等有关。 

对于给药方式来说，可以采用口服或非经肠道给药方式，优选采用口服制剂。当然，也可以采用贴剂、栓剂以及各种DDS(药物释放系统)给药制剂，以提高药物的释放均匀性，实现缓释或者减少首过效应等。 

对于口服制剂来说，可以采用片剂、胶囊剂、糖锭剂、颗粒剂、混悬剂或者乳剂等剂型。 

上述药物制剂应当含有各种制剂所必需的药用辅料，采用常规方法或者与具体剂型相应的制备方法加以制备。因为各种药物辅料和制剂方法属于本领域的常识，本发明中不拟对此做出限定。 

例如，对于制备片剂或者胶囊剂来说，其制备工艺包括将本发明的(-)多沙唑嗪甲磺酸盐与赋形剂相混合，制成软材，造粒，然后装胶囊或者与润滑剂等混合打片得到相应的胶囊或者片剂。另外，根据情况，也可以将(-)多沙唑嗪甲磺酸盐与赋形剂的混合物不经造粒直接压片。 

在此，赋形剂包括各种常规的片剂或者胶囊剂中所用的成分，填充剂、崩解剂、粘合剂等。 

在此，填充剂如淀粉、乳糖、微晶纤维素、糊精、甘露醇、氧化镁、硫酸钙等常用填充剂。崩解剂如羧甲基纤维素(及其盐如钠盐)、交联羧甲基纤维素(及其盐如钠盐)、交联聚维酮、羧甲基淀粉钠、低取代羟丙基纤维素等常用崩解剂。粘合剂如聚维酮(PVP)、羟丙基甲基纤维素(HPMC)、淀粉浆等常用粘合剂。润滑剂如硬脂酸镁、硬脂酸钙等。 

另外，也可以根据具体情况，使用可以赋予片剂或者胶囊剂特定释放特性的辅料。

由于本发明的制剂中(-)多沙唑嗪甲磺酸盐的用量较小，因此，为了保证药物的均匀度等，在与赋形剂混合制软材之前，也可以预先将(-)多沙唑嗪甲磺酸盐用制造片剂或者胶囊的赋形剂或者其他药用辅料稀释，制成倍散后使用。 

以下举出制备例、实验例和实施例对本发明进行进一步说明，但并非对本发明构成任何限制。 

本发明中除非特别说明，所有的百分比均为重量百分比 

制备例1(-)多沙唑嗪碱的制备 

(1)消旋N-(1，4-苯并二氧六环-2-羰基)哌嗪的制备 

14.22g(50mmol)N-(1，4-苯并二氧六环-2-羰基)哌嗪盐酸盐，4g(100mmol)NaOH溶于40ml水中，用40ml二氯甲烷萃取3次，蒸干后得8.84g固体混旋侧链碱I。摩尔收率71％。 

(2)消旋N-(1，4-苯并二氧六环-2-羰基)哌嗪的拆分 

12.4g(50mmol)消旋侧链碱I(N-(1，4-苯并二氧六环-2-羰基)哌嗪)溶于80ml甲醇中，加入到溶有7.5g D-酒石酸的30ml水溶液中，室温下加入少量晶种搅拌结晶24hr，过滤得约4.52g(-)侧链碱的酒石酸盐。[α]＝-24～-27°(c＝1，H₂O)，摩尔收率46％。 

(3)(-)侧链碱I(N-(1，4-苯并二氧六环-2-羰基)哌嗪))的纯化： 

4.0g(-)-侧链碱的酒石酸盐，加入16ml 95％乙醇4ml水重结晶，得到产品3.2g[α]＝-30.5(c＝1，H₂O)。 

二次纯化同上。[α]＝-32.0(c＝1，H₂O) 

(4)(-)侧链碱I(N-(1，4-苯并二氧六环-2-羰基)哌嗪))的制备： 

5g经二次纯化的(-)侧链碱的酒石酸盐，加入30ml水，NaOH 0.6g，溶解后，用30mlX3二氯甲烷萃取，干燥，蒸干后得1.0g固体(-)侧链碱纯度约为96％。 

(5)(-)多沙唑嗪的制备： 

30ml正丁醇中1.27克2-氯-4-氨基-6，7，-二甲氧基喹唑啉，1.4克(-)侧链碱I，加热回流4小时，冷却后过滤，然后用乙酸乙酯洗涤。50℃真空干燥。得2.5克产品。((-)多沙唑嗪盐酸盐晶型III) 

(6)(-)多沙唑嗪碱的制备： 

12.4克(-)多沙唑嗪盐酸盐，加入到35ml DMF，18毫升水中，在15-35℃条件下，加入溶有3.6克K₂CO₃10克水溶液，得澄清溶液.然后加入150毫升水 稀释.析出固体，过滤得(-)多沙唑嗪碱。 

制备例2II型(-)多沙唑嗪甲磺酸盐的合成： 

上述合成(-)多沙唑嗪碱，加入到50毫升25℃甲醇中加入2.5克甲磺酸，溶解后在室温搅拌5小时后过滤，50℃真空干燥得产品12.6克，其晶性为II型。 

制备例3I型(-)多沙唑嗪甲磺酸盐的制备 

0.2克晶性为II型(-)多沙唑嗪甲磺酸盐加入5ml水中，加热回流溶解后，迅速冷却结晶。过滤后50℃真空干燥。得0.12克I型(-)多沙唑嗪甲磺酸盐。 

制备例4III型(-)多沙唑嗪甲磺酸盐的制备 

7.0克晶性为I型(-)多沙唑嗪甲磺酸盐加入28ml甲醇中，加热回流溶解后，加热回流3小时结晶。过滤后50℃真空干燥。得0.9克III型(-)多沙唑嗪甲磺酸盐。 

制备例5V型(-)多沙唑嗪甲磺酸盐的制备 

7.0克晶性为I型(-)多沙唑嗪甲磺酸盐加入28ml甲醇中，加热回流溶解后，迅速冷却至室温结晶10小时。过滤后50℃真空干燥。得2.35克V型(-)多沙唑嗪甲磺酸盐。 

制备例6VI(-)多沙唑嗪甲磺酸盐的制备 

4.0克晶性为I型(-)多沙唑嗪甲磺酸盐加入20ml95％乙醇中，加热回流溶解后，迅速冷却至室温结晶10小时。过滤后50℃真空干燥。得1.74克VI型(-)多沙唑嗪甲磺酸盐。同样用0.2克I型(-)多沙唑嗪甲磺酸盐加入10ml氯仿中，加热回流溶解后，过滤不溶部分，迅速冷却至室温结晶10小时。过滤后50℃真空干燥也可得到VI型(-)多沙唑嗪甲磺酸盐。 

制备例7IV(-)多沙唑嗪甲磺酸盐的制 

(-)多沙唑嗪碱6.2克，加入到25毫升甲醇中加入2.5克甲磺酸，加热到55℃保温30分钟.慢慢冷却至室温，5小时后过滤，50℃真空干燥得产品4.6克，其晶性为IV型。 

所得化合物分别进行X射线粉末衍射、熔点、红外光谱的测定。 

X射线粉末衍射：德国Bruker D8ADVANCE型粉末X射线衍射仪，CuKα₁辐射，石墨单色器，40KV，120mA，2θ扫描范围5-60°，扫描速度2.4°/分，步长0.02°； 

熔点仪：瑞士BUCHI公司，B-540型熔点仪。 

红外测定仪器：Nicolet Magna-IR 550型KBr片 

差示扫描量热法 

仪器：Perkin-Elmer DSC7型 

实验条件：平衡温度：30℃，升温速度：10℃/min，温度范围：30-280℃ 

实验例1多沙唑嗪及其对映体对兔血管α₁受体的拮抗特性 

本实验例通过兔离体胸主动脉、颈总动脉等模型，研究了α₁受体拮抗剂(±)多沙唑嗪甲磺酸盐及其对映体(盐酸盐)对心血管α₁受体的拮抗作用及其在血管上的药理学特性。 

实验方法 

新西兰种白兔，雄性，体重2.5～3.5Kg，由河北医科大学实验动物中心提供。 

(±)多沙唑嗪甲磺酸盐，市售品；(+)多沙唑嗪盐酸盐和(-)多沙唑嗪盐酸盐按照制备例1(5)方法制得；盐酸地昔帕明、盐酸普萘洛尔、醋酸去氧皮质酮、哌唑嗪盐酸盐和重酒石酸去甲肾上腺素(NA)购自Sigma公司。除醋酸去氧皮质酮溶于1，2-丙二醇外，其他试药溶解于双重蒸馏水中。 

由兔耳静脉注射戊巴比妥钠浅麻醉后，放血处死动物。立即取出胸主动脉、颈总动脉、耳动脉、肠系膜动脉和肺动脉，剥离脂肪和其他结缔组织。 为了避免血管内皮松弛对实验结果的影响，以表面粗糙的聚乙烯插管(外径略小于血管内径)小心摩擦血管内腔去除内皮。动脉环标本(长度为4mm)管腔中平行穿入两个钨丝环，一环固定于10ml浴槽下方的固定支撑点上，另一个钨丝环连接于浴槽上方的张力传感器，传感器连接于四道生理记录仪(ERT-884型，河南开封友林电子有限公司)。 

于胸主动脉、颈总动脉、耳动脉、肠系膜动脉和肺动脉标本分别施以4.0g、3.0g、2.0g、1.5g和2.5g的前负荷，并使标本在营养液中平衡1.5h。营养液成分(mmol·L^-1)为：NaCl 133，KCl 4.7，NaH₂PO₄ 1.35，NaHCO₃ 16.3，MgSO₄ 0.61，glucose 7.8 and CaCl₂ 2.52，pH 7.2。营养液保温37℃±0.5，持续通含95％O₂+5％CO₂混合气。实验开始前加入去甲肾上腺素(NA)预收缩血管，待张力稳定后，加入乙酰胆碱(Ach)1mol·L^-1以检查内皮功能的有无，该浓度的Ach不产生任何舒张反应作为完全去除内皮的指标。 

在浴槽溶液中，加入盐酸地昔帕明(10^-7mol·L^-1)、醋酸去氧皮质酮(5×10^-6mol·L^-1)和盐酸普萘洛尔(10^-6mol·L^-1)，分别阻断NA的再摄取以及β受体。每个标本作6次NA累积量效曲线，弃去第1、2次的实验结果，并在进行第4、5、6次实验前30分钟，将三个不同浓度(0.03，0.1和0.3mol·L^-1)的(±)多沙唑嗪甲磺酸盐、(+)多沙唑嗪盐酸盐、(-)多沙唑嗪盐酸盐分别加入浴槽溶液。每个标本只给一种拮抗剂。使用PHARM/PCS程序(第四版)中的Schild Plot计算pA₂值。(样本数见各表) 

1.(±)多沙唑嗪甲磺酸盐、(+)多沙唑嗪盐酸盐、(-)多沙唑嗪盐酸盐对去甲肾上腺素(NA)诱发兔胸主动脉收缩的影响 

在给予各种多沙唑嗪之前，各组胸主动脉NA量效曲线的E_max和EC₅₀值无明显差异(P＞0.05)。各组分别给予(±)多沙唑嗪甲磺酸盐、(+)多沙唑嗪盐酸盐、(-)多沙唑嗪盐酸盐0.03、0.1、0.3mol·L^-1后，随着拮抗剂浓度增加，NA量效曲线平行右移，但E_max不变(P＞0.05)。(±)多沙唑嗪甲磺酸盐、(+)多沙唑嗪盐酸盐、(-)多沙唑嗪盐酸盐的Schild plot的斜率等于1(P＞0.05)，表明三种拮抗剂抑制NA收缩反应的作用方式为 竞争性拮抗。(+)多沙唑嗪的pA₂值明显大于(±)多沙唑嗪的pA₂值，而(-)多沙唑嗪的pA₂值明显小于(±)多沙唑嗪的pA₂值，结果见表1。 

2.(±)多沙唑嗪甲磺酸盐、(+)多沙唑嗪盐酸盐、(-)多沙唑嗪盐酸盐对去甲肾上腺素(NA)诱发兔颈总动脉收缩的影响 

在给予各种多沙唑嗪之前，各组胸主动脉NA量效曲线的E_max和EC₅₀值无明显差异(P＞0.05)。分别给予三个不同浓度(0.03、0.1、0.3μmol·L^-1)的(±)多沙唑嗪甲磺酸盐、(+)多沙唑嗪盐酸盐、(-)多沙唑嗪盐酸盐后，随着拮抗剂浓度增加，NA量效曲线均呈现平行右移，E_max值不变(P＞0.05)。((±)多沙唑嗪甲磺酸盐、(+)多沙唑嗪盐酸盐、(-)多沙唑嗪盐酸盐的Schild plot斜率等于1(P＞0.05)，表明三种拮抗剂抑制NA收缩反应的作用方式为竞争性拮抗。(+)多沙唑嗪的pA₂明显大于(±)多沙唑嗪，而(-)多沙唑嗪的pA₂值明显小于(±)多沙唑嗪，结果见表1。 

表1  多沙唑嗪及其对映体对兔离体胸主动脉和颈动脉的pA₂值 

均值±标准差，^cP＜0.01与(±)多沙唑嗪比较。 

3.(+)多沙唑嗪盐酸盐、(-)多沙唑嗪盐酸盐对去甲肾上腺素(NA)诱发兔耳动脉收缩反应的影响 

给予哌唑嗪(Pra)盐酸盐1、10、100nM后，随着阻断剂浓度增加，NA量效曲线右移，Schild plot分析结果表明，Pra的作用为非竞争性拮抗(斜率小于1)。给予(+)多沙唑嗪盐酸盐0.03、0.1、0.3μM后，随着阻断剂浓度 增加，NA量效曲线平行右移，E_max值不变，(+)多沙唑嗪盐酸盐的Schild plot的斜率等于1(P＞0.05)。给予(-)多沙唑嗪盐酸盐0.03、0.1、0.3μM后，随着阻断剂浓度增加，NA量效曲线平行右移，E_max值不变，(-)多沙唑嗪盐酸盐的Schild plot的斜率等于1(P＞0.05)。此外，(-)多沙唑嗪盐酸盐的pA₂值明显小于(+)多沙唑嗪盐酸盐的pA₂值，结果见表2。 

表2  多沙唑嗪对映体对兔离体耳动脉的pA₂值 

均值±标准差，^**P＜0.01与(+)多沙唑嗪比较，^▲▲P＜0.01与1比较。 

4.(+)多沙唑嗪盐酸盐、(-)多沙唑嗪盐酸盐对去甲肾上腺素(NA)诱发兔肠系膜动脉收缩反应的影响 

给予Pra 1、10、100nM后，随着阻断剂浓度增加，NA量效曲线平行右移，E_max值不变(P＞0.05)，Pra的Schild plot的斜率等于1。给予(+)多沙唑嗪盐酸盐0.03、0.1、0.3μM后，随着阻断剂浓度增加，NA量效曲线平行右移，E_max值不变，(+)多沙唑嗪盐酸盐的Schild plot的斜率等于1。给予(-)多沙唑嗪盐酸盐0.03、0.1、0.3μM后，随着阻断剂浓度增加，NA量效曲线平行右移，E_max值不变，(-)多沙唑嗪盐酸盐的Schild plot的斜率等于1。此外，(-)多沙唑嗪盐酸盐的pA₂值明显小于(+)多沙唑嗪盐酸盐的pA₂值，结果见表3。 

表3  多沙唑嗪对映体对兔离体肠系膜动脉的pA₂值 

均值±标准差，^**P＜0.01与(+)多沙唑嗪比较。 

5.(+)多沙唑嗪盐酸盐、(-)多沙唑嗪盐酸盐对去甲肾上腺素(NA)诱发兔肺动脉收缩反应的影响 

给予Pra 1、10、100nM后，随着阻断剂浓度增加，NA量效曲线右移，Schild plot分析结果表明，Pra的作用属非竞争性拮抗(斜率小于1)。给予(+)多沙唑嗪盐酸盐0.03、0.1、0.3μM后，随着阻断剂浓度增加，NA量效曲线平行右移，E_max值不变，(+)多沙唑嗪盐酸盐的Schild plot的斜率等于1。给予(-)多沙唑嗪盐酸盐0.03、0.1、0.3μM后，随着阻断剂浓度增加，NA量效曲线平行右移，E_max值不变，(-)多沙唑嗪盐酸盐的Schild plot的斜率等于1。此外，(-)多沙唑嗪盐酸盐的pA₂值明显小于(+)多沙唑嗪盐酸盐的pA₂值，结果见表4。 

表4  多沙唑嗪对映体对兔离体肺动脉的pA₂值 

均值±标准差，^**P＜0.01与(+)多沙唑嗪比较，^▲▲P＜0.01与1比较。 

从上述表1～4所示结果可见，在兔离体胸主动脉、颈总动脉兔耳动脉、肠系膜动脉和肺动脉，多沙唑嗪及其对映体三种阻断剂拮抗NA诱发收缩反应的pA₂值不同，(-)多沙唑嗪盐酸盐的pA₂值明显低于其消旋体及(+)多沙唑嗪盐酸盐的pA₂值。因此，各对映体对兔动脉血管平滑肌α₁受体的阻断作用具有立体选择性，其中(-)多沙唑嗪盐酸盐的作用最弱。 

实验例2多沙唑嗪及其对映体对麻醉大鼠血压及心室内压的影响 

实验方法 

雄性Wistar大鼠，体重250～300g，由河北医科大学实验动物中心提供。 

试剂同实验例1。 

颈总动脉血压的测定：雄性Wistar大鼠，用25％乌拉坦(2g/kg，其中1g/kg皮下注射，1g/kg腹腔注射)麻醉，仰卧固定，颈前正中做纵行皮肤切口，行气管插管以保持呼吸道通畅，用镊子分离筋膜、肌间隙，游离出 左侧颈总动脉后，细线结扎远心端，动脉夹固定近心端。用眼科剪刀在动脉壁上作一小切口，将充有肝素(25kU/L)生理盐水的硬质聚乙烯导管(内径1mm)插入动脉，细丝线结扎固定，管的另一侧经三通、压力换能器与八道生理记录仪相连，用于测定颈总动脉血压。将心电电极与一钢针用胶布缠绕固定，钢针刺入大鼠四肢皮下，引导心电，用于测定心率。5号半输液针头通过胶管与另一个三通相连，其中充有已排空气泡的生理盐水。左后肢骨静脉处做纵行皮肤切口，暴露股静脉，将5号半输液针头刺入股静脉，胶布固定，以备静脉给药用。 

左心室内压的测定：雄性Wistar大鼠，用25％乌拉坦(2g/kg，其中1g/kg皮下注射，1g/kg腹腔注射)麻醉，仰卧固定，颈前正中纵行切口，气管插管，分离右侧颈总动脉后结扎其远心端。把聚乙烯导管(内径1mm)用肝素(25kU/L)生理盐水充满后经三通与压力换能器和八道生理记录仪相连。动脉夹夹住颈总动脉近心端，用眼科剪刀在动脉壁上作一小切口，将液体石蜡润滑外壁的上述聚乙烯导管，并用细线结扎在颈总动脉上，既使切口处不漏血，又让导管自由推进。之后打开动脉夹，从显示器上可看到动脉血压波形，待动脉血压稳定后，将颈总动脉内的聚乙烯导管顺着主动脉(在主动脉瓣开放时)插入左心室；导管进入左心室的瞬间血压突然下降，脉压差明显加大；固定聚乙烯导管，待稳定后，测定左心室内压。心电电极与钢针相连，把钢针刺入大鼠四肢表皮下，引导心电，用于测定心率。5号半输液针头通过胶管与另一个三通相连，其中充有已排空气泡的生理盐水。左后肢骨静脉处做纵行皮肤切口，暴露股静脉，将5号半输液针头刺入股静脉，胶布固定，备静脉给药用。 

1.(+)多沙唑嗪盐酸盐、(-)多沙唑嗪盐酸盐和(±)多沙唑嗪甲磺酸盐对麻醉大鼠颈总动脉压的影响 

(+)多沙唑嗪盐酸盐、(-)多沙唑嗪盐酸盐剂量依赖性地降低颈总动脉收缩压，(+)多沙唑嗪盐酸盐的最大降压幅度明显大于(-)多沙唑嗪盐酸盐。(+)多沙唑嗪盐酸盐对颈总动脉舒张压的降低作用显著强于对收 缩压的作用，而(-)多沙唑嗪盐酸盐无此现象。(+)多沙唑嗪盐酸盐对舒张压的最大降压幅度明显大于(-)多沙唑嗪盐酸盐。降压的强度按从低到高的顺序排列依次是(-)多沙唑嗪盐酸盐、(±)多沙唑嗪甲磺酸盐和(+)多沙唑嗪盐酸盐。以平均动脉压的下降百分比计算ED₃₀值，(+)多沙唑嗪盐酸盐、(±)多沙唑嗪甲磺酸盐和(-)多沙唑嗪盐酸盐的ED₃₀值依次为15.64±9.40nmol/kg(均值±标准差)、45.93±20.61nmol/kg和128.81±35.70nmol/kg，三种药物ED₃₀的比值为1∶2.94∶8.24，提示(-)多沙唑嗪盐酸盐的降压效果显著低于(±)多沙唑嗪甲磺酸盐与(+)多沙唑嗪盐酸盐。结果见表5和表6。 

表5  多沙唑嗪及其对映体对麻醉大鼠颈动脉收缩压的影响 

^*P＜0.05，^**P＜0.01与对照组比较；^△P＜0.05，^△△P＜0.01与(+)多沙唑嗪比较；n＝8。 

表6  多沙唑嗪及其对映体对麻醉大鼠颈动脉舒张压的影响 

^*P＜0.05，^**P＜0.01与对照组比较；^△△P＜0.01与(+)多沙唑嗪比较；n＝8。 

2.(+)多沙唑嗪盐酸盐、(-)多沙唑嗪盐酸盐和(±)多沙唑嗪甲磺酸盐对麻醉大鼠左心室内压的影响 

(+)多沙唑嗪盐酸盐、(-)多沙唑嗪盐酸盐和(±)多沙唑嗪甲磺酸盐均剂量依赖性地降低左心室收缩压，250nmol/kg时的作用最强(表7)。同剂量的三种药物，其左心室收缩压的抑制强度从强到弱依次是(+)多沙唑嗪盐酸盐、(±)多沙唑嗪甲磺酸盐和(-)多沙唑嗪盐酸盐。大鼠左心室瞬时压力(±dp/dt)随着药物剂量的增加，±dp/dt的绝对值逐渐减少，250nmol/kg时的作用最强。三种药物抑制±dp/dt的强度是(+)多沙唑嗪盐酸盐＞(±)多沙唑嗪甲磺酸盐＞(-)多沙唑嗪盐酸盐。(+)多沙唑嗪盐酸盐、(±)多沙唑嗪甲磺酸盐和(-)多沙唑嗪盐酸盐股静脉给药后，除了(+)多沙唑嗪盐酸盐250nmol/kg显著降低心率(P＜0.01)之外，其他剂量和其他两个药物对大鼠心率的作用无统计学意义(P＞0.05)。 

表7  多沙唑嗪及其对映体对麻醉大鼠左心室压的影响 

^*P＜0.05，^**P＜0.01与对照组比较；^△P＜0.05，^△△P＜0.01与(+)多沙唑嗪比较；n＝8。 

结论：(+)多沙唑嗪盐酸盐、(-)多沙唑嗪盐酸盐和(±)多沙唑嗪甲磺酸盐对麻醉大鼠心血管系统的作用存在明显差异。三种药物对大鼠的降压作用和心脏抑制作用的强度，从低到高依次是(-)多沙唑嗪盐酸盐＜(±)多沙唑嗪甲磺酸盐＜(+)多沙唑嗪盐酸盐。因此，多沙唑嗪对映体对麻醉大鼠心血管系统α₁受体的阻断作用具有立体选择性，其中(-)多沙唑嗪盐酸盐的作用最弱。 

实验例3多沙唑嗪及其对映体对麻醉大鼠膀胱内压的影响 

实验方法 

雄性Wistar大鼠，体重250～300g，由河北医科大学实验动物中心提供。 

试剂同实验例1。 

膀胱灌流液的配制  选用无糖台氏液，其成分为(g/L)：NaCl 8.0，KCl 0.2，CaCl₂ 0.2，MgCl₂ 0.1，NaH₂PO₄ 0.05，NaHCO₃ 1.0。灌流液用双蒸水配制，其多数电解质成分首先配制成浓度较高的母液，临用前将各母液按所需量混合，再稀释定容；CaCl₂和NaHCO₃则在定容前最后加入。 

膀胱内压的测定  雄性Wistar大鼠，25％乌拉坦(1.2g/kg)皮下麻醉， 仰卧固定，沿下腹正中线切开皮肤和肌肉，暴露膀胱，用湿润棉花稍加固定，用尖端套了硅胶管的镊子轻提膀胱，在膀胱顶部行造孔术。将一自制双腔聚乙烯插管插入膀胱内，用细线结扎固定，但不结扎输尿管。该双腔聚乙烯插管的外层管通过三通和压力换能器与八道生理记录仪相连，用于记录膀胱内压；内层管与恒速泵相连，膀胱灌流液的灌注速度为10ml/h。为了减小内层管的灌注压力对膀胱内压的影响，内层管比外层管长2mm。室内恒温恒定30℃。5号半输液针头通过胶管与另一个三通相连，其中充有已排空气泡的生理盐水。左后肢骨静脉处做纵行皮肤切口，暴露股静脉，将5号半输液针头刺入股静脉，胶布固定，备静脉给药用。 

膀胱内压稳定20分钟后，用注射器(1ml)将多沙唑嗪对映体从股静脉插管处注入大鼠体内，记录给药后膀胱内压各参数：排尿压、基础压、排尿间隔和排尿容量的变化情况。以每个剂量的药前值作为对照值。实验随机分为三组：(1)(+)多沙唑嗪盐酸盐组，(+)多沙唑嗪盐酸盐分为三种浓度，从低到高依次为5×10^-6、5×10^-5和5×10^-4mol/L，均按0.05ml/100g体重给药。每只大鼠给予一种浓度的药物，每个剂量组8只大鼠。(2)(-)多沙唑嗪盐酸盐组，(-)多沙唑嗪盐酸盐分为三种浓度，从低到高依次为5×10^-6、5×10^-5和5×10^-4mol/L，均按0.05ml/100g体重给药。每只大鼠给予一种浓度的药物，每个剂量组8只大鼠。(3)(±)多沙唑嗪甲磺酸盐组：(±)多沙唑嗪甲磺酸盐分为三种浓度，从低到高依次为5×10^-6、5×10^-5和5×10^-4mol/L，均按0.05ml/100g体重给药。每只大鼠给予一种浓度的药物，每个剂量组8只大鼠。按以上给药方案，三种浓度从低到高分别对应于药物在大鼠体内的剂量为：2.5、25和250nmol/kg。 

实验结果 

(+)多沙唑嗪盐酸盐、(-)多沙唑嗪盐酸盐和(±)多沙唑嗪甲磺酸盐均剂量依赖性降低膀胱排尿压(表8)，三种药物的最大降压幅度分别为6.80±3.21、7.64±3.14和7.52±2.86(均值±标准差)，三者的最大抑制效应无明显差异(P＞0.05)。此外，(+)多沙唑嗪盐酸盐、(±)多沙唑嗪甲磺酸 盐和(-)多沙唑嗪盐酸盐对膀胱内压基础值无明显影响(P＞0.05)。(+)多沙唑嗪盐酸盐、(-)多沙唑嗪盐酸盐和(±)多沙唑嗪甲磺酸盐对排尿间隔和排尿量均无显著影响(P＞0.05)。 

表8  多沙唑嗪及其对映体对麻醉大鼠膀胱排尿压的影响 

^*P＜0.05，^**P＜0.01与给药前比较；n＝8。 

结论：(+)多沙唑嗪盐酸盐、(±)多沙唑嗪甲磺酸盐和(-)多沙唑嗪盐酸盐对麻醉大鼠膀胱排尿过程的作用强度相似，彼此之间没有明显的差异，因此，多沙唑嗪对映体对正常麻醉大鼠膀胱排尿反射的作用不具有立体选择性。 

实验例4(-)多沙唑嗪盐酸盐治疗良性前列腺增生最佳剂量的研究试验方法 

雄性Wistar大鼠，体重250～300g，由河北医科大学实验动物中心提供。 

试剂同实验例1。 

1.麻醉大鼠颈总动脉血压测定  同前。 

2.麻醉大鼠左心室内压测定  同前。 

3.麻醉大鼠膀胱内压测定  同前。 

4.剂量设定  (±)多沙唑嗪甲磺酸盐、(+)多沙唑嗪盐酸盐和(-)多沙唑嗪盐酸盐均采用灌胃给药。每只大鼠只给一个剂量，给药后连续观察 并记录动脉平均压、左室内压以及膀胱内压的变化，记录最大反应，并计算最大反应的百分率。实验分五个剂量组：0.05mg/kg、0.08mg/kg、0.2mg/kg、0.3mg/kg和0.4mg/kg，每个剂量组5只大鼠。按照大鼠与人的剂量进行折算(人用量mg/60kg＝大鼠剂量mg/kg÷5.4×60)，上述五个剂量的临床人用量(口服剂量)分别为：0.5mg/60kg、0.8mg/kg、2mg/60kg、3mg/kg和4mg/60kg。 

实验结果 

1.药物对醉大鼠颈总动脉血压的影响 

表9  多沙唑嗪及其对映体对麻醉大鼠颈动脉平均动脉压的影响 

^*P＜0.05，^**P＜0.01与给药前比较；^△P＜0.05，^△△P＜0.01与R(+)多沙唑嗪比较；n＝5。 

2.药物对麻醉大鼠左心室内压的影响 

表10  多沙唑嗪及其对映体对麻醉大鼠左心室内压的影响 

^*P＜0.05，^**P＜0.01与给药前比较；^△P＜0.05，^△△P＜0.01与R(+)多沙唑嗪比较；n＝5。 

3.药物对麻醉大鼠膀胱内压的影响 

表11  多沙唑嗪及其对映体对麻醉大鼠膀胱内压的影响 

^*P＜0.05，^**P＜0.01与给药前比较；n＝5。 

结论：根据上述3个实验的结果可以推知，临床成人每日口服(-)多沙唑嗪盐酸盐0.8mg、2mg、3mg或4mg时，均可降低膀胱排尿压，而且药物的效果随剂量增加而增强。但是，若用药量达到4mg/日以上(给大鼠灌胃(-)多沙唑嗪盐酸盐0.4mg/kg，相当于成人用量4mg/日)时，会显著影响血压和心脏的功能；每日口服(-)多沙唑嗪盐酸盐4mg可能使病人产生较明显的心血管系统不良反应。故成人每日口服(-)多沙唑嗪盐酸盐治疗良性前列腺增生的最佳临床剂量范围是0.8mg～3mg。 

实验例5(-)多沙唑嗪甲磺酸盐和(-)多沙唑嗪盐酸盐的生物利用度比较 

以猫为试验动物，对(-)多沙唑嗪甲磺酸盐(制备例2得到)和(-)多沙唑嗪盐酸盐(制备例1(5)得到)的生物利用度进行了研究，采用高效液相色谱法(HPLC)进行检测，色谱柱为十八烷基键合硅胶反相色谱柱(4.6mm×250mm，5μm)，流动相为甲醇-醋酸缓冲液(冰醋酸15ml和1ml三乙胺，加水至500ml)(55∶45)，流速为1ml·min^-1，荧光检测器，激发波长λ_ex 270nm，发射波长λ_em 385nm。并利用3p97程序，计算血药浓度-时间数据，比较(-)多沙唑嗪甲磺酸盐和(-)多沙唑嗪盐酸盐的生物利用度。 

1.方法学研究结果 

实验证明，空白血浆不影响(-)多沙唑嗪及内标物派唑嗪的测定。(-) 多沙唑嗪在低、中、高三个浓度的回收率分别为98.6％、99.5％、100.3％；(-)多沙唑嗪的三个不同浓度下的日内标准差RSD分别为5.4％(低浓度)、4.7％(中浓度)、2.8％(高浓度)。(-)多沙唑嗪三个不同浓度下的日间标准差RSD分别为6.3％(低浓度)、5.9％(中浓度)、3.9％(高浓度)。(-)多沙唑嗪在40～500ng·ml^-1范围内，浓度与峰面积比值呈良好的线性关系，该方法的最小检测限为10ng·ml^-1，最小定量限为40ng·ml^-1。 

2.生物利用度研究 

动物随机分二组，实验前动物禁食24小时，分别肌肉注射盐酸氯胺酮注射液(15mg·kg^-1)和腹腔注射25％乌拉坦(1.0g·kg^-1)进行麻醉。将麻醉动物仰位固定，做气管插管，保持呼吸通畅，并做十二指肠插管，以备十二指肠给药。分离右侧股静脉以备取血。按相同剂量(2.0μmol·kg^-1)分别给予(-)多沙唑嗪甲磺酸盐和(-)多沙唑嗪盐酸盐，分别于给药前及给药后10、30、60、90、120、180min经股静脉取血0.5ml，置肝素化试管，离心(5000r·min-1，20min)分离血浆，血浆置-20℃冰箱贮存，供测血药浓度使用。 

试验表明：在麻醉猫体内，(-)多沙唑嗪甲磺酸盐和(-)多沙唑嗪盐酸盐十二指肠给药后均于10分钟达高峰，其峰浓度分别为1176.19±1217.30ng/ml和773.99±715.12ng/ml。两种盐在麻醉猫体内的血药浓度经统计学处理具有显著性差异(p＝0.0004)。 

结论：(-)多沙唑嗪甲磺酸盐的血药浓度明显高于(-)多沙唑嗪盐酸盐的血药浓度。 

Claims (5)

1.(-)多沙唑嗪甲磺酸盐的II型结晶，具有图4所示的X-射线衍射模式。

2.根据权利要求1所述的(-)多沙唑嗪甲磺酸盐的II型结晶，其DSC峰值为255.62℃，起始点254.03℃，热焓值/J·g^-1106.60。

3.根据权利要求1所述的(-)多沙唑嗪甲磺酸盐的II型结晶，其DSC图谱如图14所示。

4.一种多沙唑嗪制剂，含有权利要求1-3任一项所述的(-)多沙唑嗪甲磺酸盐的II型结晶和药用载体，且实质上不含(+)多沙唑嗪。

5.权利要求1～3任一项所述的(-)多沙唑嗪甲磺酸盐的II型结晶或权利要求4所述的制剂在制备特异性治疗良性前列腺增生的药物中的用途。

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