CN102240341B - 一种平喘滴丸的制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种平喘组合物及其制备方法和应用。本发明所述平喘滴丸由麻黄、X、洋金花和助剂组成，其中X为小叶榕和/或甘草，助剂为聚乙二醇6000或4000。本发明所述平喘组合物具有平喘、松弛气管平滑肌、镇咳的作用，可用于制备治疗哮喘咳嗽类疾病的药物，具有推广应用价值。

Description

一种平喘滴丸的制备方法

技术领域

    本发明涉及中药组合物领域，具体涉及一种平喘组合物及其制备方法和应用。 

背景技术

哮喘是临床最常见的疾病之一，不论在过去还是现在，中医或西医都认为是比较难治的病症之一，目前尚缺乏较理想的中西药物。 

世界第一个哮喘日（98.12.11）统计全球有1.5亿，中国有2500万人患哮喘。据报道，目前世界哮喘发病率为1～3%，多数国家的发病率和病死率还在逐年上升，我国哮喘病人中每年约100万人死亡，500～1000万人伤残，哮喘病易发且根治难已成为社会关注的问题。西医应用激素、抗胆碱药，难以达到标本兼治。中医治喘积累了不少良方。国内治疗哮喘的中成药品种少，主要有止喘灵口服液、止喘灵注射液，喘可治注射液等，其中止喘灵注射液市场份额大。由于中成药成分复杂，溶液制剂常存在稳定性差、携带不方便等问题。 

平喘滴丸由麻黄、X、洋金花和助剂组成，其中X为小叶榕、甘草，助剂为聚乙二醇6000或4000。麻黄辛、温，发汗解表，宣肺平喘；洋金花辛、温，解痉止痛，止咳平喘。现代化学和药理学研究表明：麻黄主要成分麻黄碱能缓解支气管平滑肌挛急而止咳平喘；洋金花中莨菪类生物碱既可缓解气道平滑肌痉挛，又可改善微循环，降低血浆血栓素，佐以小叶榕抗炎镇咳，甘草清热解毒，祛痰止咳，既具有中医的平喘、止咳、化痰之功，又有现代医学的松弛、扩张支气管作用，治喘治根，成为治喘良药。 

发明内容

    本发明的目的在于平喘药方的基础上，提供一种止喘组合物，该组合物制备的平喘滴丸具有平喘、松弛气管平滑肌、镇咳的作用。 

    本发明另一目的在于提供上述平喘组合物的制备方法。 

    本发明还有一个目的在于提供上述平喘组合物的应用。 

    本发明上述目的通过以下技术予以实现： 

一种平喘组合物，由麻黄、X、洋金花和助剂组成，各组分的重量份配比为麻黄300~600、X 100~400、洋金花100~300和助剂300~700，其中X为小叶榕和/或甘草，助剂为聚乙二醇6000或4000。

以下为本发明选取药物的药效介绍： 

麻黄

【性味与归经】 辛、微苦，温。归肺、膀胱经。

【功效】 发汗散寒，宣肺平喘，利水消肿。 

生品发汗解表和利水消肿力强，多用于风寒表实证，胸闷喘咳，风水浮肿，风湿痹痛，阴疽，痰核。蜜麻黄性温偏润，辛散发汗作用缓和，增强了润肺止咳之功，以宣肺平喘止咳力胜。多用于表症已解，气喘咳嗽。 

【应用】 

1. 用于外感风寒，恶寒发热，头、身疼痛，鼻塞，无汗，脉浮紧等表实证。

2. 用于风寒外束，肺气壅遏所致的喘咳证。能开宣肺气，散风寒而平喘。 

3. 用于水肿而兼表证，为宣肺利尿之要药，本品发汗利水，有助于消散水肿，常与生姜、白术等同用，如越婢加术汤。 

【用量用法】 2—9g。宜后下。解表生用，平喘炙用。 

药理研究： 

　　发汗： 

　　① 有效成分 挥发油、麻黄碱。 

　　② 条件　温服、温热条件。 

　　③ 作用机理：·阻碍汗腺导管对钠离子的重吸收→汗腺分泌↑；·兴奋中枢，外周α受体。 

　　平喘： 

　　① 有效成分 麻黄碱、伪麻黄碱、挥发油、此外，2,3,5,6-四甲基吡嗪 L-α-萜品烯醇。 

　　② 机理 

　　促进NA和Adr的释放。 

　　本身激动β-R→激活Ac→促进cAMP产生。 

　　阻止过敏介质的释放。 

　　促进PGE的释放。 

　　直接兴奋α-肾上腺素受体→血管收缩→粘膜肿胀减轻。 

　　抑制抗体产生。 

　　③ 作用特点 缓慢、温和、持久，可以口服。 

　　利尿： 

　　① 有效成分 d-伪麻黄碱。 

　　② 作用 尿量增加。 

　　③ 机理 

　　扩张肾血管→增加肾血流量。 

　　阻碍肾小管对钠离子的重吸收。 

　　抗炎、抗过敏： 

　　① 有效成分 伪麻黄碱、甲基麻黄碱、麻黄碱。 

　　② 作用机理 

　　抑制过敏递质释放； 

　　溶血素减少，呈抗补体作用。 

　　镇咳、祛痰： 

　　① 作用强度 为可待因的1/20。 

　　② 有效成分 萜品烯醇，麻黄挥发油。 

　　解热、抗菌、抗病毒： 

　　① 有效成分 挥发油。 

　　② 抗菌　金黄色葡萄球菌，甲、乙型溶血链球菌、流感嗜血杆菌、肺炎双球菌、炭疽杆菌、白喉杆菌、大肠杆菌、奈瑟双球菌。 

③ 抗病毒 流感病毒。 

中医经验： 

　　麻黄的主要功用有四： 

　　1. 发汗散寒； 

　　2. 宣肺平喘； 

　　3. 行水消肿； 

　　4. 散阴疽，消症结。由于临床上最常用为辛温发汗药， 所以一般都归在发散风寒药中。 

麻黄除了辛温发汗、解表散寒以外，并有明显的宣肺平喘作用。凡是风寒外侵、毛窍束闭而致肺气不得宣通的外感喘咳，都可用麻黄治疗。即使是表证已解，但仍喘咳的，还可以继续用麻黄治疗，这时可改用炙麻黄。生麻黄发汗解表的效力大，炙麻黄发汗力小而平喘止咳的效果较好。 

小叶榕： 

入药主用其叶Folium Fici Microcarpae，研究表明小叶榕叶主含黄酮、三萜类、齐墩果酸、脂肪族化合物和甾体化合物等，对治疗心血管疾病、抗炎、抑菌等方面都有显著的效果，用其浸膏作为哮喘和慢性支气管炎治疗药。

甘草： 

【性味与归经】甘草性平，味甘，归十二经。

【功能主治】补脾益气，清热解毒，祛痰止咳，缓急止痛，调和诸药。在中医上，甘草补脾益气，滋咳润肺，缓急解毒，调和百药。 

【用法用量】内服：煎汤，3～9g(大剂量30～60g）。 

药理研究： 

（1）调节机体免疫功能： 

　　甘草具有增强和抑制机体免疫功能的不同成份。甘草葡聚糖能增强机体免疫功能，对小鼠脾脏淋巴细胞有激活增殖作用，表现出致分裂原特性，与ConA合用有协同作用。 

　　甘草酸类主要表现为增强巨噬细胞吞噬功能和增强细胞免疫功能的作用，但对体液免疫功能有抑制作用。20例高血脂症病人应用甘草甜素后，血浆免疫球蛋白IgGIgA及补体C3含量均显著降低。甘草酸单铵和LX也有免疫抑制作用。甘草酸单铵对3H-TdR掺入大鼠淋巴细胞DNA有抑制作用。LX腹腔注射能明显抑制免疫小鼠IgG的生成。 

（2）抗菌、抗病毒、抗炎、抗变态反应 

　　甘草黄酮类化合物对金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、酵母菌、真菌、链球菌等有抑制作用。甘草甜素对人体免疫性缺陷病毒（艾滋病病毒，HIV）、肝炎病毒、水疱性口腔病毒、腺病毒Ⅲ型、单纯疱疹病毒Ⅰ型、牛痘病毒等均有明显的抑制作用。甘草具有皮质激素样抗炎作用，对小鼠化学性耳廓肿胀、腹腔毛细血管通透性增高、大鼠棉球肉芽肿、甲醛性大鼠足肿胀、角叉菜胶性大鼠关节炎等都有抑制作用。 

　　抗炎有效成份是甘草酸单铵盐、甘草次酸和 100与芍药苷合并应用对大鼠足肿胀有协同抑制作用。甘草酸单铵盐对豚鼠腹腔注射给药，可明显抑制豚鼠支气管哮喘的发生，表现为引喘时间明显延长。甘草甜素能显著抑制鸡蛋清引起的豚鼠皮肤反应，并减轻过敏性休克症状。甘草水煎液能抑制大鼠被动皮肤过敏反应，降低小鼠血清IgE抗体水平。异甘草素等成份能抑制透明质酸酶的活性，并对由免疫刺激所诱导的肥大细胞组胺释放有抑制作用。 

（3）镇咳、祛痰 

　　甘草浸膏片口内含化后能覆盖在发炎的咽部黏膜上，缓和炎症对它的刺激，达到镇咳作用。甘草还能通过促进咽喉和支气管黏膜的分泌，使痰易于咳出，呈现祛痰镇咳作用。甘草次酸、甘草黄酮、甘草流浸膏灌胃给药，对氨水和二氧化硫引起的小鼠咳嗽均有镇咳作用，并均有祛痰作用。甘草次酸胆碱盐皮下注射，对豚鼠吸入氨水和电刺激猫喉上神经引起的咳嗽，均有明显的镇咳作用。 

（4）解毒 

　　甘草对误食毒物（毒蕈），药物中毒（敌敌畏、喜树碱、顺铂、咖啡因、巴比妥）均有一定的解毒作用，能缓解中毒症状，降低中毒动物的死亡率。甘草解毒作用的有效成份主要为甘草甜素。 

　　甘草解毒作用的机制为： 

　　①吸附毒物，甘草甜素水解后释放出的葡萄糖醛酸可与含羧基、羟基的毒物结合，减少毒物的吸收； 

　　②通过物理、化学沉淀毒物以减少吸收，如甘草可沉淀生物碱； 

　　③肾上腺皮质激素样作用，并改善垂体-肾上腺系统的调节作用，提高机体对毒物的耐受能力； 

　　④提高小鼠肝细胞色素P-450的含量，增强肝脏的解毒功能。 

　综上所述，与甘草补脾益气功效相关的药理作用为肾上腺皮质激素样作用和调节机体免疫功能；与其清热解毒功效相关的药理作用为抗菌、抗病毒、抗炎、抗变态反应等作用；与其缓急止痛功效相关的作用为抗溃疡、解痉和保肝作用；而祛痰止咳、调和诸药的功效与其镇咳、祛痰、解毒作用有关。甘草还具有抗心律失常、降血脂、抗动脉粥样硬化、抑制血小板聚集、抗肿瘤等作用。甘草的主要有效成份是甘草甜素、甘草素及异黄酮类等。 

　　我国现存的古代第一部中药学专著《神农本草经》把甘草列为“上品”。公元五世纪的名医陶弘景所辑的《名医别录》，称她为美草、蜜草，还有“国老”样的尊称。陶弘景说：“国老即帝师之称，虽非君而为君所宗，是以能安和草石，而解诸毒也”。又说:甘草“最为众药之主，经方少有不用者”。七世纪甄权也说它“调和众药有功，故有国老之号”。在中医界有“十方九草”、“无草不成方”之说。 

甘草浸膏口服后能覆盖发炎的咽部粘膜，缓和炎症对它的刺激，起到镇咳作用。 甘草的解毒功能， 

甘草醇提取物及甘草次酸在体外对金葡菌、结核杆菌、大肠杆菌、阿米巴原虫及滴虫均有抑制作用。

洋金花： 

功效分类：平喘药；祛风药。

性味归经：味辛；性温；有毒。归肺；肝经。 

功效主治：平喘止咳；麻醉止痛；解痉止搐。用于哮喘咳嗽；脘腹冷痛；风湿痹痛；癫痫；惊风；外科麻醉。 

药理作用： 

1.对中枢神经系统的作用： 

1.1对行为的影响： 兔侧脑室注射东莨菪碱6mg/kg，可出现闭眼、侧卧、翻正反射消失，约经40分钟恢复，但活动仍较少。东莨菪碱与冬眠合剂合用于人、猴、犬均可产生全身麻醉。东莨菪碱与戊巴比妥或眠尔通合用也可使小鼠活动明显减少，表现出与中枢抑制药的协同作用。小剂量东莨菪碱（0.1-0.2mg/kg）使小鼠自主活动增加。小鼠腹腔注射东莨菪碱4mg/kg，能增强中枢兴奋药（苯丙胺、去氧麻黄碱、咖啡因等）所引起的活动增加，并能对抗利血平及氯丙嗪引起的活动减少，表现中枢兴奋作用。因此认为，东莨菪碱对中枢神经系统的作用是双向性的。 　　 

1.2对脑电的影响： 给埋藏电极的清醒猫腹腔注射氢溴酸东莨菪碱0.05-0.1mg/kg，5分钟后，脑电图由低幅快波转变为不规则的高幅慢波。但此时惊醒反应仍存在，动物表现安静。若剂量增至0.25-0.50mg/kg时，脑电活动出现高度同步化和不规则高幅慢波，而且脑电惊醒反应亦消失；动物表现兴奋狂躁。对猴、犬、兔和大鼠等动物，东莨菪碱所引起的脑电反应非常近似，并能阻断多种生理刺激所引起的惊醒反应。 

1.3对条件反射的影响： 大鼠皮下注射东莨菪碱0.05-100mg/kg，能不同程度地阻断回避性条件反射和二级条件反射，阻断率与剂量呈平行关系。在抑制大鼠回避性条件反射时，东莨菪碱影响二级条件反射及条件反射最强，阿托品则较弱。 

1.4对痛觉的影响： 兔钾离子透入法和小鼠热板法证明东莨菪碱有一定的镇痛作用，并能加强杜冷丁的镇痛作用，对抗去甲肾上腺素侧脑室注射引起的痛阈降低和杜冷丁镇痛作用的减弱。小鼠腹腔注射洋金花总碱每只0.2mg，15分钟后，对辐射热的痛阈可提高54.7%。亦有报道，东莨菪碱能对抗震颤素的中枢镇痛作用，且较阿托品为强。 

1.5与神经递质的相互影响： 用1/10万的东莨菪碱作猫侧脑室灌流，能增加乙相胆碱的释放量，灌流期间合并静脉注射东莨菪碱1mg/kg，并不能使乙酰胆碱释放量进一步增加但大鼠腹腔注射 东莨菪碱0.63mg/kg，脑中乙酰胆碱含量可减少31%，作用在给药后60分钟，为最强，于120分钟时恢复正常，说明非侧脑室给药仍能促进脑内乙酰胆碱的释放。而使脑组织中乙酰胆碱含量下降。兔静脉注射利血平0.5-1.0mg/kg或脑室注射对氯苯丙氨酸（PCPA）每只5.0mg，均能延长侧脑室注射东莨菪碱2-3mg/kg引起的麻醉，但脑室注射5-HT每只250mg，静脉注射优降宁50mg/kg均显著缩短其麻醉时间；而脑室内注射去甲肾上腺素每只 20Oμg，对东莨菪碱的麻醉时间无明显影响。 

　　因此，东莨菪碱对大脑皮层和皮层下某些部位主要是抑制作用，如使意识消失，产生麻醉等，认为这与其阻滞大脑皮层和脑干网质结构M-胆碱受体有关，也可能与它在中枢神经系统对抗去甲肾上腺素作用有关。但对延髓和脊髓则有不同程度的兴奋作用，特别对延髓的呼吸中枢，兴奋作用较明显。为此，东莨菪碱可提高清醒犬的呼吸频率，从而抵消冬眠药物（杜冷丁和氯丙嗪）减慢呼吸的作用。 

2.对循环系统的作用： 

2.1对心血管的作用：东莨菪碱能解除迷走神经对心脏的抑制，使交感神经作用占优势，故心率加快。阿托品有类似作用，且更强。正常兔和麻醉犬静脉注射阿托品2-4mg/kg或东莨菪碱4mg/kg后，可拮抗肾上腺素或去甲肾上腺素50μg/kg所诱发的心律紊乱（房性或室性期前收缩，室性心动过速等）、但不能拮抗引起的心率加快。离体兔耳血管灌流表明，20mg 的东莨菪碱可以拮抗去甲肾上腺素20μg/0.1mg引起的血管收缩作用，但此作用比阿托品弱得多。 

2.2对血流动力学的影响： 出血性休克犬静脉注射洋金花总碱，心排血量未见增高，但输血以补充血容量后，洋金花总碱能使心排血量增加。说明洋金花对心排血量的影响与血容量有关。麻醉兔静脉注射东莨菪碱10-20mg/kg，能拮抗静脉注射5μg/kg肾上腺素或去甲肾上腺素的升压作用。实验还表明，东莨菪碱能改善失血性犬的微循环。 

3.对呼吸系统和平滑肌器官的作用： 

小剂量洋金花注射液可完全拮抗乙酰胆碱引起离体豚鼠气管平滑肌的收缩作用。洋金花对实验性气管炎大鼠的气管粘液腺有抑制作用，杯状细胞显著减少，此作用与切断单侧迷走神经的作用相似。东莨菪碱能降低胃肠道的蠕动及张力，能阻断胆碱能神经的功能，使膀胱逼尿肌松弛，尿道括约肌收缩，引起尿潴留。 

4.其它作用： 

洋金花总碱或东莨菪碱用作与麻醉剂时，可使病人周围血管扩张，体表温度升高，而体温下降。但术后2-6小时体温出现回升。对精神病患者应用洋金花麻醉后，静脉注射给药可见血胆碱酯酶活力的平均值有显著提高，而肌肉注射则不明显。

【药理作用】 

　　为M-胆碱受体阻断剂, 药理作用广泛。

1. 对中枢神经系统有抑制作用, 人肌注或静脉滴注洋金花总生物碱后会出现头昏、眼重、肌体无力、嗜睡等现象, 继而兴奋, 然后进入麻醉状态．东莨菪碱对人、猴、犬均可致全身麻醉现象, 对兔及小鼠尚有一定的镇痛作用。 

2. 休克作用:东莨菪碱对正常兔及麻醉犬具拮抗肾上腺素或去甲肾上腺素引起的心律紊乱．用于人麻醉时可使心率加快．东莨菪碱能改善失血性犬的微循环, 临床观察也证实此作用。 

    作为一种优选方案，上述平喘组合物中，所述助剂为聚乙二醇6000或4000。 

本发明所述平喘组合物的制备方法包括如下步骤： 

（1）将麻黄、X与洋金花一起，以8~18倍量酸水溶液提取2次，每次1~2小时，滤过，合并滤液，50~80℃减压浓缩成稠膏；快速搅拌下加入乙醇使含醇量为60~80%，静置过夜，取上清液滤过，滤液回收乙醇，减压浓缩成稠膏，或将稠膏真空干燥，粉碎成120~200目干膏细粉，备用；

（2）取聚乙二醇，加热至80~90℃，加入步骤（1）所得稠膏或干膏细粉，搅匀，85℃保温，得到平喘组合物。

    当用本发明上述平喘组合物制备滴丸剂时，步骤如下：将平喘组合物置滴丸装置中，60~85℃保温，滴入0~10℃二甲基硅油冷却剂中，取出，去除滴丸表面的硅油，40~60℃干燥，得到平喘滴丸剂。 

具体实施方式

    以下结合实施例来进一步解释本发明，但实施例并不对本发明做任何形式的限定。 

实施例1

一种口服给药的中药复方平喘滴丸，其是由麻黄、小叶榕、洋金花、聚乙二醇6000按下述重量份配比制备而成的药剂：

麻黄　         450

小叶榕         300

洋金花　       150

聚乙二醇6000　 400

以下详细说明本发明中药复方平喘滴丸的制备工艺：

（1）提取物的制备：方中三味，麻黄、小叶榕和洋金花一起，以15倍量酸水溶液（0.05％）提取2次，每次1.5小时，滤过，合并滤液，65℃减压浓缩成稠膏（药材：稠膏＝2：1）。快速搅拌下加入乙醇使含醇量为70%，静置过夜，取上清液滤过，滤液回收乙醇，减压浓缩成稠膏（固含物70%），备用。

（2）熔融：取聚乙二醇6000，加热至85℃使熔，加入提取物稠膏，搅匀，85℃保温。 

（3）滴制：将混合药液，置滴丸装置中，70℃保温，滴入4℃二甲基硅油冷却剂中，取出，去除滴丸表面的硅油，50℃干燥，即得。 

实施例2

一种口服给药的中药复方平喘滴丸，其是由麻黄、小叶榕、甘草、洋金花、聚乙二醇4000按下述重量份配比制备而成的药剂：

麻黄        　 400

小叶榕         200

甘草           50

洋金花　       100

聚乙二醇4000　 350

以下详细说明本发明中药复方平喘滴丸的制备工艺：

（1）提取物的制备：方中四味，麻黄、小叶榕，甘草和洋金花一起，以18倍量酸水溶液（0.01％）提取2次，每次1小时，滤过，合并滤液，60℃减压浓缩成稠膏（药材：稠膏＝2：1）。快速搅拌下加入乙醇使含醇量为60%，静置过夜，取上清液滤过，滤液回收乙醇，减压浓缩成稠膏（固含物75%），真空干燥，粉碎成150目细粉，备用。

（2）熔融：取聚乙二醇4000，加热至85℃使熔，加入提取物干膏细粉，搅匀，85℃保温。 

（3）滴制：将混合药液，置滴丸装置中，75℃保温，滴入5℃二甲基硅油冷却剂中，取出，去除滴丸表面的硅油，50℃干燥，即得。 

实施例3

一种口服给药的中药复方平喘滴丸，其是由麻黄、甘草、洋金花聚乙二醇6000、聚乙二醇4000按下述重量份配比制备而成的药剂：

麻黄　         500

甘草           100

洋金花         200

聚乙二醇6000　 200

聚乙二醇4000   300

以下详细说明本发明中药复方平喘滴丸的制备工艺：

（1）提取物的制备：方中三味，麻黄、甘草和洋金花一起，以16倍量酸水溶液（0.02％）提取2次，每次1.5小时，滤过，合并滤液，70℃减压浓缩成稠膏（药材：稠膏＝2：1）。快速搅拌下加入乙醇使含醇量为65%，静置过夜，取上清液滤过，滤液回收乙醇，减压浓缩成稠膏（固含物80%），真空干燥，粉碎成200目细粉，备用。

（2）熔融：取聚乙二醇6000和4000，加热至80℃使熔，加入提取物干膏细粉，搅匀，80℃保温。 

（3）滴制：将混合药液，置滴丸装置中，75℃保温，滴入3℃二甲基硅油冷却剂中，取出，去除滴丸表面的硅油，50℃干燥，即得。 

实施例4  不同平喘方的平喘及镇咳作用研究

1 材料

1.1 药物

平喘方A、B、C、F、H、I、J提取液（0.3g生药/ml），由广东药学院提供，批号：050430；止喘灵注射液由中国江苏苏中制药厂提供，批号：001122。

A：麻黄、小叶榕、洋金花； 

B：麻黄、小叶榕；

C：麻黄、小叶榕、甘草、洋金花；

F：麻黄、甘草、洋金花；

H：麻黄、甘草；

I：洋金花、小叶榕；

J：洋金花、麻黄。

试剂与仪器

氨水（AR）为长沙市试剂化工厂产品，批号为041115。氯化钠（AR）为湖南化学试剂总厂产品，批号：031124。氯化钾（AR）为湖南试剂厂产品，批号：040623。氯化钙（AR）为武汉中南化学试剂厂产品，批号：031125。磷酸氢二钾（AR）为湖南试剂厂产品，批号：050122。硫酸镁为湖南试剂厂产品，批号：041219。碳酸氢钠由上海虹光化工厂产品，批号：031021。葡萄糖为上海化学试剂分装厂，批号：021024。磷酸组织胺为上海生化所技术公司生产，批号：041025。氯化乙酰胆碱为北京东环联合化工厂产品，批号：021225。超声雾化器为江苏鱼跃医疗设备有限公司产品。

动物

豚鼠BALB/C系小白鼠，清洁级，体重18~20g，雌雄各半，购自上海西普尔—必凯实验动物有限公司，合格证号：沪动合格字153号。

试验方法

2.1 动物剂量与给药方法

灌胃给药：小鼠为0.3g /kg，豚鼠为0.15 g /kg。

平喘试验

2.2.1 对豚鼠的平喘作用（喷雾止喘法）

取健康幼年豚鼠，体重180g±20g，分别置于容积约为4L的密闭玻璃钟罩内，用超声雾化器喷入2%氯化乙酰胆碱和0.1%磷酸组织胺等容积混合液15s。观察并记录豚鼠的引喘潜伏期（即从喷雾开始到哮喘发作呼吸困难，直至抽搐跌倒的时间），如超出120s者不予选用。

挑选引喘实验合格的豚鼠54只，随机分为9组，每组6只豚鼠，然后按0.15 g /kg的体积灌胃给予待试药，空白对照组给予相同体积的蒸馏水，每天1次，连续3天，末次用药后1h，以上述方法引喘，观察并记录引喘潜伏期，超过120s不喘不跌倒者以120s计算。计算潜伏期抑制率并进行统计分析。 

引喘潜伏期抑制率=（给药后潜伏期-给药前潜伏期）/给药前潜伏期×100% 

2.2.2 对豚鼠离体完整气管平滑肌的影响（采用气管容积法）

将400 g±20g豚鼠用钝器击毙，立即剖开颈部至胸部的皮肤和肌肉，细心分离出气管，将喉下至气管分叉处的完整气管段剪下，放下Krebs-Henseleit营养液中（营养液预先用氧气饱和），剪除气管周围的结缔组织，用营养液将气管腔冲洗干净，测量其长度和直径。将气管一端固定于U型管底/端，另一端固定于有刻度的毛细吸管上。U型管接一吸有营养液的注射器，将营养液缓缓注入气管内，排除气管中空气并调节毛细管的液面至适当高度。将气管放入盛有35mlKrebs-Henseleit营养液的37℃恒温麦氏浴槽内，待气管舒缩稳定后，以稳定时的液面高度为基点进行实验。实验时，将豚鼠分为8组，每组6只。第1组为空白对照组，先向浴槽内加入0.1%组胺0.2ml，再加入蒸馏水0.4ml；第2-8组为给药组，先向浴槽内加入0.1%组胺0.2ml，再加入药液0.4ml。记录给药后3分钟毛细管内液面稳定时的高度。

止咳试验

2.3.1 对小鼠氨水引咳的镇咳作用(采用氨气刺激法)

取体重为19.5±0.73g小鼠，雌雄兼用，按性别体重分层，随机分成9组，分别给蒸馏水，止咳灵注射液、平喘方A液、B液、C液、F液、H液、I液、J液，灌胃给药，体积为0.3 g /kg，每天1次，给药3天。末次给药后1hr，取0.2ml浓氨水，吸入小棉球中，迅速将小棉球放置到倒置的500ml烧杯中，将小鼠置于烧杯中，观察和记录小鼠的咳嗽潜伏期和3分钟内咳嗽次数，并按公式

止咳率=用药组咳嗽潜伏期（s）/阴性对照组咳嗽潜伏期（s）×100%，计算其止咳率。

结果

3.1 平喘方平喘作用

3.1.1 平喘方对磷酸组胺喷雾所致豚鼠的平喘作用

与蒸馏水对照比较，给药前7种方平喘提取物和止喘灵注射液对组胺喷雾所致哮喘的引喘潜伏期无显著差异（P>0.05）；给药后3种方的平喘和止喘灵注射液对引喘潜伏期及抑制率有显著差异（P>0.05~0.01）。其中平喘方A液的作用最佳（表1）。

表1  平喘灵对组胺喷雾致喘的影响（X±SD，n=6）

注：与蒸馏水对照组比较，*P<0.05, **P<0.01；

3.1.2 平喘方对豚鼠离体完整气管平滑肌的影响

与蒸馏水对照比较，7种方的平喘和止喘灵注射液对组胺引起的豚鼠离体气管收缩有显著的抑制作用，可使痉挛的气管平滑肌得到明显的松弛，其中平喘方A液的作用最佳（表2）。

表2  对豚鼠离体完整气管平滑肌的影响（X±SD，n=6）

注：与蒸馏水对照组比较，*P<0.05, **P<0.01；

3.2 平喘方镇咳作用

3.2.1 平喘方对小鼠氨水引咳的镇咳作用

与蒸馏水对照比较，7种方的平喘提取物和平喘注射液均明显延长小鼠咳嗽潜伏期、减少咳嗽次数，其中平喘方C液的作用最强（表3）。

表3  平喘方对小鼠氨水引咳的镇咳作用（X±SD）

注：与蒸馏水对照组比较，*P<0.05, **P<0.01。

Claims (1)

1.一种平喘滴丸的制备方法，其特征在于：由麻黄、小叶榕、洋金花、聚乙二醇6000按下述重量份配比制备而成：

麻黄　         450

小叶榕         300

洋金花　       150

聚乙二醇6000　 400

其制备工艺具体为：

（1）提取物的制备：方中三味，麻黄、小叶榕和洋金花一起，以15倍量酸水溶液提取2次，每次1.5小时，滤过，合并滤液，65℃减压浓缩成稠膏，快速搅拌下加入乙醇使含醇量为70%，静置过夜，取上清液滤过，滤液回收乙醇，减压浓缩成稠膏，备用；

（2）熔融：取聚乙二醇6000，加热至85℃使熔，加入提取物稠膏，搅匀，85℃保温；

（3）滴制：将混合药液，置滴丸装置中，70℃保温，滴入4℃二甲基硅油冷却剂中，取出，去除滴丸表面的硅油，50℃干燥，即得。