CN102229856A

CN102229856A - 一种猕猴桃籽油及其制备方法

Info

Publication number: CN102229856A
Application number: CN2011101550819A
Authority: CN
Inventors: 熊铁一; 孟爱国; 罗禹; 李策宏; 王玉; 杨楠
Original assignee: SICHUAN PROVINCE NATURAL RESOURCES SCIENCE ACADEMY
Current assignee: SICHUAN PROVINCE NATURAL RESOURCES SCIENCE ACADEMY
Priority date: 2011-06-10
Filing date: 2011-06-10
Publication date: 2011-11-02
Anticipated expiration: 2031-06-10
Also published as: CN102229856B

Abstract

本发明属于保健食品领域，涉及植物猕猴桃籽油及其制备方法。本发明要解决的技术问题之一是使猕猴桃籽油的营养成分更为均衡。解决该技术问题的方案是提供了一种营养成分更为均衡猕猴桃籽油，该猕猴桃籽油的α-亚麻酸含量为45wt％～59wt％，亚油酸含量为10wt％～20wt％。本发明猕猴桃籽油亚油酸的活性成分含量更高，具有显著的增强免疫功能。在体液免疫试验测试方面优于现有的市售产品，具有很好的应用前景。

Description

一种猕猴桃籽油及其制备方法

技术领域

本发明属于保健食品领域，涉及植物猕猴桃籽油及其制备方法。

背景技术

中国是猕猴桃的原产地，种植面积居世界第一。猕猴桃除鲜食外，大部分用于猕猴桃浓缩汁、猕猴桃果酒、猕猴桃罐头及猕猴饮料的加工，产生大量果渣废料。从果渣中分离出猕猴桃籽，再经超临界CO₂萃取技术提取出的猕猴桃籽油，是一种具有生物活性成分的高级保健品原料。

经研究测定，猕猴桃籽中油脂含量高达20％以上，猕猴桃籽油主要含棕榈酸、硬脂酸、油酸、亚油酸、α-亚麻酸等。不饱和脂肪酸含量接近90％，其中以α-亚麻酸和亚油酸为主。

亚油酸和亚麻酸是两种种对人体健康特别重要的必需脂肪酸，只能从外界摄取而不能在体内自行合成。药理实验证明，亚麻酸及其代谢物EPA、DHA具有调节血脂，降低血压，增强自身免疫，延缓衰老，预防糖尿病，预防癌症，抑制癌症的转移，减肥，防脑中风和心肌梗塞，清除血中有害物质和防治心脏病，缓减更年期综合症，强神健脑，增强注意力和记忆力，调节情绪，辅助治疗多发性硬化症，辅助治疗类风湿性关节炎，抑制过敏性反应和抗炎，预防与治疗便秘、腹泻和胃肠综合症等功效。亚油酸在人体内可被转化成γ-亚麻酸，DH-γ-亚麻酸和花生四烯酸，也可作为能量使用或贮存。亚油酸的主要生理功能是：作为某些生理调节物质(如前列腺素)的前体物质；亚油酸可使胆固醇脂化，从而降低血清和肝脏中的胆固醇水平，对糖尿病也有预防作用；亚油酸能抑制动脉血栓的形成，因而可预防心肌梗塞的发生；亚油酸对维持机体细胞膜功能和调节免疫功能也起着重要作用。

中国专利授权公告号CN 101584366A公开的一种富含α-亚麻酸的猕猴桃籽油的制备方法，借由超临界二氧化碳萃取工艺以及两阶段降压分离技术浓缩猕猴桃籽油，并获得比原料含量更高的α-亚麻酸油品，α-亚麻酸含量在60wt％以上，但是其亚油酸含量很低。

中国专利授权公告号CN 1483795公开的一种猕猴桃果仁油及其提取方法，采用超临界CO₂萃取技术，获得的产品含亚油酸50.27mg/g，亚麻酸600.10mg/g，维生素E 838.20mg/kg，及微量硒，铁，锌。其亚油酸含量很低。

本领域目前需要开发一种能使猕猴桃籽油的营养成分更为均衡的技术。

发明内容

本发明要解决的技术问题之一是使猕猴桃籽油的营养成分更为均衡。

解决该技术问题的方案是提供了一种营养成分更为均衡猕猴桃籽油，其α-亚麻酸含量为45wt％～59wt％，亚油酸含量为10wt％～20wt％。该猕猴桃籽油是从猕猴桃籽中经超临界二氧化碳萃取提取出。

本发明也提供了上述猕猴桃籽油的制备方法。该方法包括以下步骤：

a、将干燥猕猴桃籽粉碎至20～50目；

b、取粉碎后的猕猴桃籽进行超临界二氧化碳萃取，萃取工艺参数为：

萃取温度35～50℃；萃取压力30～40MPa；萃取时间180～280min；

分离釜压力8～15MPa、温度22～30℃；

c、将萃取所得植物油静置18～36h，减压抽滤。

其中，上述方法步骤a中所述猕猴桃籽粉碎目数为40目。

其中，上述方法步骤b中所述超临界二氧化碳萃取的萃取温度为45℃。

其中，上述方法步骤b中所述超临界二氧化碳萃取的萃取压力为35MPa。

其中，上述方法步骤b中所述超临界二氧化碳萃取的萃取时间为240min。

其中，上述方法步骤b中所述超临界二氧化碳萃取的分离釜压力为12MPa。

其中，上述方法步骤b中所述超临界二氧化碳萃取的分离釜温度为25℃。

其中，上述方法步骤c中所述静置时间为24h。

具体而言，本发明猕猴桃籽油是采用以下方法制备的：

(1)将干燥猕猴桃籽粉碎至20～50目；粉碎优选为40目。

(2)取粉碎后的猕猴桃籽进行超临界二氧化碳萃取，萃取工艺参数为萃取温度35～50℃、萃取压力30～40MPa、萃取时间180～280min，分离釜压力8～15MPa、温度22～30℃。

(3)将萃取所得植物油静置18～36h，减压抽滤。

其中，上述方法步骤a中所述猕猴桃籽粉碎目数优选为40目。步骤b中所述超临界二氧化碳萃取的萃取温度优选为45℃。步骤b中所述超临界二氧化碳萃取的萃取压力优选为35MPa。所述超临界二氧化碳萃取的萃取压力优选为35MPa。上述方法步骤b中所述超临界二氧化碳萃取的萃取时间为240min。步骤b中所述超临界二氧化碳萃取的分离釜压力优选为12MPa。步骤b中所述超临界二氧化碳萃取的分离釜温度优选为25℃。步骤c中所述静置时间优选为24h。优选的，上述的猕猴桃籽为红心猕猴桃籽；上述的红心猕猴桃籽油是由红心猕猴桃籽制备得到的。

本发明的有益效果在：于本发明的猕猴桃籽油含有活性成分α-亚麻酸和亚油酸等，其亚油酸的活性成分含量更高，具有显著的增强免疫功能。在体液免疫试验测试方面优于现有的市售产品。本发明的制备方法与现有技术相比，该方法工艺先进，大生产实用性强，成本相对较低。环境污染小。所得提取物杂质少，有效成分含量高，具有很好的应用前景。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明做进一步的说明。

实施例1本发明猕猴桃籽油的制备：

(1)干燥猕猴桃籽(红心猕猴桃，又叫红阳猕猴桃，由四川自然资源研究院提供，下同)10Kg粉碎至20目；

(2)超临界二氧化碳萃取，萃取工艺参数为萃取温度35℃、萃取压力30MPa、萃取时间180min，分离釜压力8MPa、温度30℃；

(3)萃取所得植物油静置18h，减压抽滤，得成品油2.7Kg(批号110101)。

实施例2本发明猕猴桃籽油的制备：

(1)干燥猕猴桃籽10Kg粉碎至50目；

(2)超临界二氧化碳萃取，萃取工艺参数为萃取温度50℃、萃取压力40MPa、萃取时间360min，分离釜压力15MPa、温度22℃；

(3)萃取所得植物油静置38h，减压抽滤，得成品油3.3Kg(批号110102)。

实施例3本发明猕猴桃籽油的制备：

(1)干燥猕猴桃籽10Kg粉碎至40目；

(2)超临界二氧化碳萃取，萃取工艺参数为萃取温度45℃、萃取压力35MPa、萃取时间240min，分离釜压力12MPa、温度25℃；

(3)萃取所得植物油静置24h，减压抽滤，得成品油3.4Kg(批号110103)。

实施例4猕猴桃籽油中α-亚麻酸和亚油酸的含量测定

方法为气相色谱法，具体可参照《保健食品检验与评价技术规范》。

(1)标准储备液称0.0250g的α-亚麻酸甲酯及0.0250mg的亚油酸甲酯标准品，分别用正己烷溶解，并定容于25mL容量瓶中，混均，浓度分别为1.0mg/mL。

(2)标准使用液分别取α-亚麻酸甲酯及亚油酸甲酯标准储备液各5.0mL置于10mL的容量瓶中，混匀，α-亚麻酸甲酯和亚油酸甲酯的含量为0.5mg/mL。

(3)仪器与设备GC-2010气相色谱仪(岛津)；氢火焰离子化检测器(FID)；HGA-2LB空气发生器；KCH-500II型氢气发生器

(4)分析步骤

皂化

称取0.100g猕猴桃籽油和磁力搅拌子一并放入50mL磨口烧瓶中，加入4mL0.5mol/L氢氧化钾甲醇溶液，上部连接回流冷凝管，并固定于磁力搅拌器上，由冷凝管上口向溶液中导入氮气；使反应瓶中始终充满氮气。开启磁力搅拌器，并加热使反应液保持65±5℃，搅拌回流约15min。

甲脂化

从冷凝管上部加入4mL三氟化硼甲醇溶液，搅拌(65±5℃)，回流约2min，冷至室温，从冷凝管上部加入5mL正己烷继续搅拌5min，移去冷凝管，加入5mL饱和氯化钠水溶液，摇动数分钟，转移至25mL分液漏斗中分离水与有机相，再加3mL正己烷洗水相，分离，弃水相，合并有机相并定容至10mL(浓度低时吹氮浓缩至1.0mL)。供测定用。

(5)气相色谱条件

色谱柱：安捷伦DB-FFAP(30m，0.32mm，0.25μm)。

柱箱温度：220℃。

进样口温度：250℃。

检测器温度：260℃。

氮气：50mL/min，30∶1分流；氢气：45mL/min；空气：500mL/min。

(6)定性分析

在上述仪器条件下，分析取标准使用液和试样测定液1.0μL，注入气相色谱仪，以保留时间来确定α--亚麻酸甲酯和亚油酸甲酯。

(7)定量分析

试样中α-亚麻酸甲酯和亚油酸甲酯色谱峰面积或峰高与标准的比较定量。

(8)分析结果

试样中α-亚麻酸甲酯和亚油酸甲酯测定结果计算，换算后得不同工艺三次提取所得猕

猴桃籽油中α-亚麻酸和亚油酸含量如表1：

表1α-亚麻酸和亚油酸含量测定结果

批号	α-亚麻酸含量	亚油酸含量
			110101	46.5％	17.7％
110102	55.2％	18.6％
			110103	58.2％	13.4％
市售猕猴桃籽油产品	65.2％	7.8％

本发明的猕猴桃籽油含有活性成分α-亚麻酸和亚油酸等，具有多种保健和药物用途，各有效成分含量及比例与现有提取油有所不同。且本发明的制备方法与现有技术相比，该方法工艺先进，大生产实用性强，成本相对较低。环境污染小。所得提取物杂质少，有效成分含量高。

实施例5猕猴桃籽油体液免疫试验

将本发明所述猕猴桃籽油与市售产品进行了体液免疫试验，以测试其在增强免疫方面的作用。

实验设5个组，即4个实验组和1个阴性对照组，每组10只清洁级昆明种小鼠。采用灌胃法，每天以给小鼠灌胃不同剂量的受试物(批号110103)和市售的猕猴桃籽油，阴性对照组给予等量蒸馏水。每天1次，连续30天后进行各项免疫指标的测定。

1、抗体生成细胞检测(Jerne改良玻片法)。

取羊血，生理盐水洗涤3次，每只鼠经腹腔注射2％(v/v，用生理盐水配制)压积SRBC0.2mL。将SRBC免疫4天后的小鼠处死，取脾，制成细胞悬液，200目筛网过滤，洗涤、离心2次。将琼脂糖加热溶解后，与等量双倍Hank′s液混合，分装小试管，每管0.5mL，再向管内加10％(v/v，用SA液配制)压积SRBC50μl、脾细胞悬液20μl，迅速混匀后，倾倒于已刷琼脂糖薄层的玻片上，待琼脂凝固后，将玻片水平扣放在片架上，放入二氧化碳培养箱中温育1.5小时，然后用SA缓冲液稀释的补体(1∶10)加入到玻片架凹槽内，继续温育1.5小时后，计数溶血空斑数。

2、血清溶血素测定(半数溶血值HC₅₀的测定)。

取羊血，生理盐水洗涤3次，每只鼠经腹腔注射2％(v/v，用生理盐水配制)压积SRBC0.2mL进行免疫。5天后，摘除眼球取血于离心管内，放置约1小时，将凝固血与管壁剥离，使血清充分析出，2000rpm离心10分钟，收集血清。用SA缓冲液将血清稀释为400倍，取1mL置试管内，依次加入10％(v/v，用SA缓冲液配制)压积SRBC0.5mL，补体1mL(用SA缓冲液按1∶10稀释)。另设不加血清的对照管(以SA缓冲液代替)。置37℃恒温水浴中保温30分钟后，冰浴终止反应。2000rpm离心10分钟，取上清1mL，加都氏试剂3mL。同时取10％(v/v，用SA缓冲液配制)的压积SRBC0.25mL，加都氏试剂至4mL于另一试管中，充分混匀，放置10分钟后，于540nm处以对照作空白，分别测定各管光密度值。溶血素的量以半数溶血值(HC₅₀)表示，按下式计算：

样品HC₅₀＝样品光密度值/SRBC半数溶血时的光密度值×稀释倍数。

表2体液免疫试验结果

与对照组比较，^*P＜0.05，^**P＜0.01

由试验结果(表2)可以看出，本发明所述猕猴桃籽油具有显著的增强免疫功能。与市售产品相比，低剂量组的试验结果接近中剂量的市售产品，因而在体液免疫试验测试方面优于市售产品。

Claims

1.猕猴桃籽油，其特征在于：其α-亚麻酸含量为45wt％～59wt％，亚油酸含量为10wt％～20wt％。

2.制备权利要求1所述的猕猴桃籽油的方法，其特征在于：包括以下步骤：

a、猕猴桃籽干燥粉碎至20～50目；

b、超临界二氧化碳萃取：

萃取温度35～50℃；萃取压力为30～40Mpa；萃取时间为180～280min；

分离釜压力为8～15Mpa；分离温度为22～30℃；

c、萃取所得植物油静置，静置时间为18～36h，再减压抽滤得猕猴桃籽油。

3.如权利要求2所述的方法，其特征在于：所述步骤a中，干燥猕猴桃籽粉碎至40目。

4.如权利要求2所述的方法，其特征在于：步骤b中所述超临界二氧化碳萃取的萃取温度为45℃。

5.如权利要求2所述的方法，其特征在于：步骤b中所述超临界二氧化碳萃取的萃取压力为35MPa。

6.如权利要求2所述的方法，其特征在于：步骤b中所述超临界二氧化碳萃取的萃取时间为240min。

7.如权利要求2所述的方法，其特征在于：步骤b所述中超临界二氧化碳萃取的分离釜压力为12MPa。

8.如权利要求2所述的方法，其特征在于：步骤b中所述超临界二氧化碳萃取的分离温度为25℃。

9.如权利要求2所述的方法，其特征在于：步骤c中所述静置时间为24h。