CN102191300A

CN102191300A - 一种茯苓多糖的提取方法

Info

Publication number: CN102191300A
Application number: CN2011100722004A
Authority: CN
Inventors: 周明扬
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 2011-03-24
Filing date: 2011-03-24
Publication date: 2011-09-21

Abstract

本发明公开了一种茯苓多糖的提取方法，包括下列步骤：将茯苓原料超细粉碎得茯苓粉；酶解提取获得滤液；滤液浓缩至比重为1.05-1.10时过滤，滤液干燥后获得茯苓多糖。本发明的茯苓多糖提取方法，工艺条件容易控制，可以提高收率达到25%，而且具有反应条件温和，反应产物无毒、无副作用等优点。

Description

一种茯苓多糖的提取方法

技术领域

本发明涉及中药材有效成分提取，具体涉及茯苓多糖的提取方法。

背景技术

茯苓，英文名：Indian Buead，Tuckahoe，拉丁名：Wolfiporia cocos(Schw.)Ryv.&Gibn，别名：茯菟、茯灵、茯蕶、伏苓、伏菟、松腴、云苓、茯兔、松薯、松木薯、松苓。隶属于非褶菌目Aphyllophorales，多孔菌科Polyporaceae，茯苓属Wolfiporia。

茯苓的干燥菌核，其主要活性成分为多聚糖类，主要为茯苓聚糖(pachyman)，含量最高可达75％，为一种具有β(1→6)吡喃葡萄糖聚糖支链的β(1→3)吡喃葡萄糖聚糖，切断支链成β(1→3)葡萄糖聚糖，称茯苓次聚糖(pachymaran)，常称为茯苓多糖(PPS)，具抗肿瘤活性、抑制肿瘤生长、抗炎、抗衰老、调节机体免疫、减轻放化疗毒副反应等多种功能。但是，茯苓中水溶性茯苓多糖，含量比较低，大多数是茯苓聚糖，普通水煮沸提取方法，提取率2％左右，提取率很低，造成药材利用率也很低。

目前，茯苓多糖的制备主要是通过发酵醇沉法[1]、稀碱浸提法[2]、水提醇沉法[3]和微波辅助提取法[4]等，先得到茯苓多糖的粗品，再通过纯化工艺得到茯苓多糖的精品。水提醇沉法耗时长，多糖提取率低；用酸碱液浸提茯苓多糖，浸提程序较繁琐，浸提反应较剧烈，极易破坏多糖的立体结构，使其生物活性受到限制。

[1]纪芳，李鹏飞，徐胜元，等.羧甲基茯苓多糖的制备及体内抗肿瘤作用的实验研究[J].中国微生态学杂志，2003，15(3)：333-334。

[2]潘琦，贾向云，罗天诰，等.茯苓皮提取茯苓多糖实验方法研究[J].云南中医学院学报，1997，20(3)。

[3]仲兆金，刘浚.衍生法分离茯苓三萜[J].中药材，2002，25(4)：247-250。

[4]聂金嫒，吴成岩，吴世容，等.微波辅助提取茯苓中茯苓多糖的研究[J].中草药，2004，35(12)。

发明内容

本发明的目的是克服现有技术中的缺陷，提供一种茯苓多糖的提取方法。本发明的提取方法相比已有的技术，可有效提高收率。

本发明采用了下列技术方案来解决上述技术问题：

一种茯苓多糖的提取方法，包括下列步骤：

1)将茯苓原料超细粉碎得茯苓粉；

将合格干燥的茯苓饮片初步粉碎后，再超细粉碎，使茯苓粉颗粒直径达到3微米以下。

2)酶解提取；

先将茯苓粉加去离子水后搅拌，采用复合酶在合适的条件下酶解获得酶解液；而后酶解液灭酶活，采用回流法提取有效成分后固液分离获得滤液。

所述复合酶含有纤维素酶、半纤维素酶、淀粉酶和木瓜蛋白酶。

进一步的，复合酶中，所述纤维素酶、半纤维素酶、淀粉酶和木瓜蛋白酶的重量比为：

4.8～5.2∶2.8～3.2∶1.8～2.2∶0.8～1.2，最优比例为5∶3∶2∶1。

较佳的，茯苓粉末与去离子水的重量比为1∶11.5～12.5。

较佳的，搅拌速度为25～35转/分钟。

较佳的，复合酶使用量为药材重量的3.8～4.2％。

较佳的，酶解时间0.9～1.1h、酶解温度55～65℃、溶媒pH值5.0～6.0。

酶解液灭酶活的方法为：将酶解液升温至沸腾灭酶活。

酶解液灭酶活后可多次提取并合并提取液，较佳为两次提取。

本发明经研究认为，茯苓多糖主要存在于茯苓细胞壁中，受细胞壁主要成分纤维素的阻碍，往往提取率较低。采用主要成分为纤维素酶、半纤维素酶、淀粉酶、木瓜蛋白酶组成的复合酶，可使细胞壁发生不同程度的软化、膨胀和崩溃，从而改变细胞壁的通透性，使茯苓多糖更容易被提取，同时采酶解法可以部分降解茯苓聚糖，使之成为水溶性茯苓多糖，增加了有效成分的提取比例。

3)滤液浓缩至比重为1.05～1.10时过滤，滤液干燥后获得茯苓多糖。

较佳的，所述滤液浓缩方法为减压浓缩。减压浓缩时，真空度优选控制在0.08～0.09MPa之间、温度65～85℃之间，

较佳的，所述干燥方法为喷雾干燥。喷雾干燥时，较佳的，进风温度控制在175±3℃，出风温度控制在70±3℃。

减压浓缩及喷雾干燥应在24小时内完成。

本发明的茯苓多糖提取方法，工艺条件容易控制，可以提高收率，达到25％，而且具有反应条件温和，反应产物无毒、无副作用等优点。

附图说明

图1：茯苓多糖生产工艺简图

具体实施方式

以下列举具体实施例以进一步阐述本发明，应理解，实例并非用于限制本发明的保护范围。

实施例1茯苓多糖的提取

工艺流程如图1所示，

提取方法：

1.将茯苓原料超细粉碎得茯苓粉：

根据批生产指令，领出所需干燥茯苓饮片原料100kg。

将合格干燥的茯苓饮片，粉碎成0.5cm左右的颗粒，在超细粉碎10分钟，使茯苓粉末细度达到3微米以下。

2.酶解提取：

复合酶：由纤维素酶、半纤维素酶、淀粉酶和木瓜蛋白酶混合而成，其比例为：5∶3∶2∶1。酶解提取：第一次加茯苓原料重量12倍量去离子水，调成提取用水pH值5.0-6.0，开动搅拌桨，搅拌速度30转/分钟，加入混合酶，使用量为茯苓粉末重量的4.0％，加热到酶解温度60℃，保持温度酶解1h后，加热使酶解液升温沸腾，灭酶回流提取1小时，离心机过滤，得滤液1；药材残渣，第二次加茯苓重量8-10倍量去离子水，回流提取1小时，离心过滤，得滤液2，合并两次水提取液。

3.滤液浓缩至比重为1.05-1.10时过滤，滤液干燥后获得茯苓多糖：

提取液浓缩：按照《外循环真空浓缩回收机使用、维护、保养规程》、《药液浓缩岗位操作规程》操作，开启真空泵及循环水冷却泵，待真空度升至0.04MPa时，向蒸发器中加入提取液至液面高度在下视镜中部，继续抽真空，待真空度至0.08MPa时，打开蒸汽开关，控制真空度在0.08-0.09MPa之间、温度65-85℃之间，保持液位在视镜范围内。

当液体浓缩至比重为1.05-1.10时(60℃)，快速滤过(孔径80目)，滤液置喷雾干燥贮罐中，以备喷雾干燥用。

喷雾干燥：按照《喷雾干燥机组使用、维护、保养规程》、《喷雾干燥岗位操作规程》操作，对上述浓缩液进行喷雾干燥。进风温度控制在175±3℃，出风温度控制在70±3℃。最终获得茯苓提取物：25.5kg，收集茯苓提取物装入PE袋中，称重，每桶不超过25kg包装。

浓缩、喷雾干燥应在24小时内完成。

4.检验：

采用中国药典2010版一部中记载的多糖检测方法检验产物中茯苓多糖的重量百分含量为70％，计算茯苓多糖的收率为25.5％。

Claims

1.一种茯苓多糖的提取方法，包括下列步骤：

1)将茯苓原料超细粉碎得茯苓粉；

2)酶解提取：先将茯苓粉加去离子水后搅拌，采用复合酶在合适的条件下酶解获得酶解液；而后酶解液灭酶活，采用回流法提取有效成分后固液分离获得滤液；

2.如权利要求1所述茯苓多糖的提取方法，其特征在于，所述步骤1)中，茯苓粉的颗粒直径为3微米以下。

3.如权利要求1所述茯苓多糖的提取方法，其特征在于，所述步骤2)中，所述复合酶含有纤维素酶、半纤维素酶、淀粉酶和木瓜蛋白酶。

4.如权利要求3所述茯苓多糖的提取方法，其特征在于，所述复合酶中，纤维素酶、半纤维素酶、淀粉酶和木瓜蛋白酶的重量比为：4.8～5.2∶2.8～3.2∶1.8～2.2∶0.8～1.2。

5.如权利要求4所述茯苓多糖的提取方法，其特征在于，所述复合酶中，纤维素酶、半纤维素酶、淀粉酶和木瓜蛋白酶的重量比为：5∶3∶2∶1。

6.如权利要求1所述茯苓多糖的提取方法，其特征在于，所述步骤2)中，复合酶使用量为药材重量的3.8～4.2％，酶解时间0.9～1.1h、酶解温度55～65℃、溶媒pH值为5.0～6.0。

7.如权利要求1所述茯苓多糖的提取方法，其特征在于，所述步骤2)中，酶解液灭酶活的方法为：将酶解液升温至沸腾灭酶活。

8.如权利要求1所述茯苓多糖的提取方法，其特征在于，所述步骤3)中，所述滤液浓缩方法为减压浓缩；所述干燥方法为喷雾干燥。

9.如权利要求8所述茯苓多糖的提取方法，其特征在于，所述减压浓缩及喷雾干燥在24小时内完成。