CN102178759B - 一种治疗风湿病的中药组合物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种治疗风湿病的中药组合物及其制备方法。它是由枫荷梨、柠条、淫羊藿、骨碎补、鹿衔草、宣木瓜、延胡索、徐长卿、虎杖等组成等组分构成。其制备方法包括如下步骤：按配方比例称取各原料，洗净、阴干，然后切片或破碎，并按比例1∶5浸泡在相当于含酒精度45°以上的白酒中，泡制周期为15～30天，到期后取出，加白糖适量，过滤，装瓶制成酒剂。本发明制成的复方制剂采用口服剂型，使用方便，口感好，患者易接受；在临床使用中既能治标又能治本，且疗效好、周期短、价格低、无严格适应症和毒副作用；治疗费用低，较常规治疗可节省费用60％以上。

Description

一种治疗风湿病的中药组合物及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种中药制剂即治疗风湿病的中药组合物及其制备方法

背景技术

风湿和类风湿性疾病是一种常见病、慢性病，其中以骨关节炎和类风湿性关节炎为主要形式。风湿病还是一种临床多发的、治疗期较长的顽固性疾病。目前，我国风湿性关节炎、类风湿性关节炎病人逐年增多，由其类风湿性关节炎(RA)是一种以慢性多关节炎症为主要表现的全身性自身免疫性疾病，病变主要侵犯关节滑膜，其次为浆膜、心、肺、动脉、神经、眼等结缔组织；除关节炎外，还可引起心包炎、心肌炎、胸膜炎、间质性肺炎、肾淀粉样变、眼部疾患(如巩膜炎、虹膜炎)，并发血管炎以及周围神经损害等等，是一种广泛的结缔组织病，因此又称之为类风湿病。类风湿性关节炎常侵犯多个关节，从手、足、腕等小关节起病，呈对称性，具有慢性、反复发作、致残率高的特点，给患者及社会家庭带来沉重负担。广大患者需要行之有效、价格低、服药易坚持的药物。

据报道，骨关节炎的全球发病率为10％～12％，类风湿性关节炎为1％。按世界人口66亿计，骨关节炎患病人数约有6.6～7.92亿，类风湿性关节炎约为6600多万。我国有18％的人患有某种形式的关节炎，按13亿人口计算，发病人数为2.34亿，类风湿性关节炎和骨关节炎均严重威胁着人类的健康，50％的类风湿性关节炎病人自确诊后10年内将不得不停止工作，患骨关节炎病人活动受到很大限制，关节肿胀、僵硬和疼痛，严重者关节永久变形，是老年人致残的首要原因，因此需要及时治疗。风湿病是风湿性疾病的简称，泛指影响骨、关节、肌肉及其周围软组织，如滑囊、肌腱、筋膜、血管、神经等一大组疾病。风湿性疾病包含弥漫性结缔组织病(如类风湿关节炎系统性红斑狼疮、干燥综合症、炎性肌病、硬皮病、混合性结缔组织病、白塞病等)、系统性血管炎、脊柱关节病(如强直性脊柱炎、反心性关节炎、瑞特综合症等)、骨关节炎、骨质疏松症等上百种以上的以累及骨、关节等结缔组织为主的疾病总称。

西医认为风湿、类风湿性及其它各种风湿性疾病都是自身免疫性风湿病，往往有全身多系统和多器官损害，具有繁复的症状，常因复杂多变的临床表现成为疑难杂症。风湿病的病程有些慢性、迁延不愈，有些爆发起病，其诊断和治疗相当烦琐和复杂。如果风湿性疾病得不到正确合理的治疗，关节，肌肉，骨骼等病变会导致功能障碍和畸形，留下终身残疾，甚至危及生命，后果极具严重。

目前，治疗这风湿性疾病的药物概括起来有三类：(1)非甾体类抗炎药(NSAIDs)。这类药物具有抗炎、解热、镇痛等作用，能迅速缓解炎症引起的症状，但不能改变风湿病的病程发展，停药不久即出现症状再现。同时，该类药物对消化系统、神经系统、造血系统以及肝肾有很大的毒副作用。(2)甾体类抗炎药(SAIDs)。这类药物为肾上腺皮质激素，具有抗炎、免疫作用，能迅速消除或缓解症状，但不持久，停药易复发。长期使用将导致肾皮质功能亢进或医源性肾上腺皮质功能不全，并诱发或加重感染，因此该类药物只适用于对危重病人的抢救。(3)疾病缓解药(DMDs)。这类药物中有很多的品种本身并无抗炎作用，与一般抗炎药物相比，更多地是影响疾病的基本过程。这类药物的特点是起效慢、疗程长、停药数月才出现症状再现。此类药物不良反应大，目前临床已较少使用。

当今，西医治疗风湿病主要应用非甾抗炎药、免疫抑制剂及激素等药物，虽然能够暂时止痛，缓解症状，起到一定的治疗作用，然而却不能从根本上治疗风湿性疾病，而且长期用药还可能破坏人体免疫系统，最终出现不可逆转的胃、肝、肾等内脏器官严重损伤，其产生的副作用绝对小容忽视。如布洛芬、抗风湿灵、可的松、雷公藤等，可是这类药物普遍存在有毒副作用较大的问题。以雷公藤和“蚂蚁制剂”为例：雷公藤类也属一种中药制剂，并且具有肯定的抗炎、镇痛、免疫抑制作用，是近年来研制的一种抗风湿药物。该药物对多种变态反应性疾病，特别是自身免疫性疾病如类风湿性关节炎及强直性脊柱炎等疗效显著，是目前公认的抗炎免疫药。但近年来的临床研究表明，服用雷公藤制剂会引起严重的肠胃道反应、诱发皮肤粘膜疾病、引起白细胞减少、粒细胞缺乏、血小板减少、头晕、乏力、嗜睡、心悸、胸闷、心率不齐等症状。长期服用雷公藤制剂还将导致月经不调、停经、精子减少、死精或无精、睾丸缩小等症状。但它对患者的胃肠道、皮肤粘膜、心肝、肾及生殖系统都有明显的损害作用；而通常风湿或类风湿病人的病程都较长，需要长期服用药物，显然这类药物的毒副作用较大，在长期服用这类药物时，无疑又会对病人造成新的伤害。中国专利第93110592.1号中记述了“蚂蚁类风湿灵”中药制剂，它是以蚂蚁为“君”药，并配以其它的昆虫、爬虫等入药，主要治疗类风湿关节炎，这一制剂由于采用的中药原料都比较贵，使得该药价格较高。而且该药为散剂，口服时散失量大，且不方便，而且这种药在使用中要求服用剂量较大、服用周期也很长，因此一般的患者较难以承受。就该类药物的中药原料加工而言，现有技术中，对于人药用的蚂蚁、蛇类均采用高温烘干法进行干燥处理，而这种方法却使得蚂蚁、蛇类的其中有效成份(蛋白、蚁酸)被大量破坏，最终导致只有些药物还含有较多的激素成份，如果长期使用，极易发生霉菌、病毒、结核等感染，给病人带来新的痛苦。

祖国医学长期以来对“风湿病”的治疗有丰富的经验，积累了许多行之有效的验方，相较西医而言，祖国医学疗效确切、使用方便、不良反应小等优势明显，因此更适宜在临床的推广应用。祖国医学统称为“痹病”。中医认为，痹证是由于风、寒、湿、热等外邪侵袭人体，闭阻经络，气血运行不畅导致肌肉、筋骨，关节的麻木，重着，和屈伸不利，关节肿大灼热等主要临床表现的病症，因此，中医痹证的范围比较广泛，除风湿性和类风湿性关节炎外，现代医学的关节痛，强直性脊柱炎，痛风性关节炎，骨关节炎、坐骨神经痛等疾病都属于痹证范畴。由此可见中医的痹症与现代西医的风湿疾病，无论是在概念上，还是在所包含的病种上，都是基本相同。痹证、痹病、风湿病是中医的病名，中医有5000年的历史，早在2500年前《黄帝内经》中就有“风、寒、湿三气杂至合而为痹”的记载。清朝的林佩琴在《类证治裁痹证》一书中最早提出痹证的病名：宋朝的窦材在《扁鹊全书.痹病》一书中最早提出痹症的病名；汉代的张仲景《金匮要略方论.痉温病脉证》一书中最早提出风湿为病两字，总观其各自的论述，都很相似于现代医学风湿或类风湿等疾病。近代中医专家，学者按历史的沿革把中医的病名确定为风湿病。中医认为风湿病的原因和发病过程的道理大体有四种：1、外感六淫之邪，2、营气卫血失调；3、脏腑阴阳内伤；4、痰浊瘀血内生。

现代研究认为抗炎与调节免疫是治疗风湿性疾病的两个重要方面。而中药尤其是植物药成分复杂，含有多种次生活性物质，具有明显的特色和优势。据祖国医学记载，植物药治疗风湿病的历史悠久，源远流长，经过长期的临床实践积累了丰富的经验。近年来应用现代科学方法，验证了许多经典中药处方，发现了多种对风湿病有明显疗效的植物药，然而，这些中成药中，绝大多数足以止痛、活血化淤为其主要功效，对风湿病起着缓解病情的作用，尚难以达到改变病程的目的，并且有一定的毒副作用。本发明的目的之一是利用改变药剂配方，从而提供一种无霉、无副作用、用药经济、治疗效果更好的治疗风湿病的中药制剂，并使该制剂具有增强患者免疫功能之效果。目的之二是提供一种可保证药物有效成份，从而确保治疗效果的该制剂的制备方法。

发明内容

本发明的目的旨在提供一种既能够对风湿性关节炎起到很好治疗或缓解症状作用，具有疗效好、周期短、价格低、无毒副作用等优点，又能使患者乐于接受的一种中药组合物。它既可以作为药物，按照规定剂量服用，又可以当作含饮料随意酌之。这也是造福人类的一件大好事。

本发明人通过多年的临床实践认为，风湿病的基本病机为肝肾亏虚，气血不足，气血凝滞、阻塞不通。因此治疗风湿病必须温补肾阳、消肿止痛、蠲痹通络。正气已弱，首重扶正：瘀血为病的，必须注意活血行气化瘀。人体正气较强时，也可以祛邪为主。因时而异，但扶正是根本，是关键。扶正关键在补肝肾，肝主疏泄，藏血，开窍于目，其华在爪；肾为先天之本，主骨生髓；肝血充足可转为肾精，肾精满盈也能化为肝血，所以可通过补肝肾达到滋阴补阳，治疗风湿病的目的。肾精足则骨骼得养，肾阳不虚，滋养筋骨，病邪才不能深伏，感邪后才易祛除。因此以补正为本，祛邪为要，活血化瘀为辅，则痹症自治。

本发明中药组合物主要由枫荷梨、柠条、淫羊藿、骨碎补、鹿衔草、宣木瓜、延胡索、徐长卿、虎杖等组成。方中，枫荷梨性温，味甘，能祛风利湿，调经活；柠条性温，味甘，能滋阴补血，活血；淫羊藿性温，味辛、甘，能补肾阳，强筋骨，祛风湿。以上三药能养血补肾，搜风通络，发挥温补肾阳，蠲痹通络的功效，在方中作为君药。骨碎补能补肾强骨，活血续伤，主治肾虚腰痛，风湿痹痛，跌打损伤，筋骨挫伤等；鹿衔草补虚益肾，祛风除湿，活血通络；宣木瓜药性温味酸，能平肝舒筋，和胃化湿，主治湿痹拘挛，腰膝关节酸重疼痛，吐泻转筋，脚气水肿。三药能加强补肾、搜风通络作用，在方中作为臣药。延胡索性辛、苦、温、归心、肝、脾经，具有活血、行气、止痛之功；徐长卿祛风化湿，消肿止痛；二药能行气活血，祛瘀止痛。虎杖性苦、平，能祛风利湿，破瘀通络，主治风湿筋骨疼痛，跌打损伤；三药在配方中作为佐使药，引上列诸药入于经髓骨骼。综上所述，全方紧扣风湿病的病因病机，科学合理配伍，标本兼治，共收温补肾阳、消肿止痛、蠲痹通络之功。

本发明是根据中医对风湿性关节炎(痹症)的认识及辨证施治原则，按照中医组方和制备原则对中药组合物精心研制，通过以下的技术方案实现的：

本发明药物组分的用量是经过发明人进行大量摸索总结得出的，各组分用量在下述范围都有较好的疗效，本发明的药物含有

枫荷梨331～999份    柠条331～999份      淫羊藿331～999份

骨碎补166～498份    鹿衔草166～498份    宣木瓜166～498份

延胡索166～498份    徐长卿166～498份    虎杖110～330份

优选范围为：

枫荷梨498～998份    柠条498～999份淫    羊藿498～999份

骨碎补248～496份    鹿衔草248～496份    宣木瓜248～496份

延胡索248～480份    徐长卿266～480份    虎杖210～300份

最佳重量份为：

枫荷梨688份    柠条688份      淫羊藿688份

骨碎补468份    鹿衔草368份    宣木瓜368份

延胡索328份    徐长卿328份    虎杖268份

本发明所要解决的技术问题是通过以下的技术方案来实现的。其特点是以枫荷梨、柠条、淫羊藿、骨碎补、鹿衔草、宣木瓜、延胡索、徐长卿、虎杖等为原料制成的药物。这种治疗风湿病的中物组合物，其特征是它由下列主要原料为组分组成、或者是由下列主要原料的水提取物作为活性成分和药学上可接受的附加剂组成、或者是由下列主要原料的醇提取物作为活性成分和药学上可接受的附加剂组成。本发明通过科学组合、精心研制，具有补肝肾、强腰膝、祛风湿、舒筋血之功，还兼有扶正祛邪之效，对各种风湿病及疼痛效果尤为显著。

本发明药物可以采用中药制剂常规方法制备成任何可药用的常规制剂。例如可将这些原料药碾成粉末后，混合均匀制成散剂冲服；也可以将这些药物一起水煎，然后浓缩水煎液，制成口服液；但是为了使该药物各原料药更好的发挥药效，优选对原料药枫荷梨、柠条、延胡索、骨碎补、宣木瓜、鹿衔草进行特殊蒸馏提取，但这不能限制本发明的保护范围。

所述的药学上能接受的附加剂是下列的一种或一种以上：如甘油、明胶、聚乙二醇、丙二醇、糊精、乙醇、干淀粉、柠檬酸、碳酸氢钠、尼泊金乙酯、酒石酸、卵磷脂、十二烷基硫酸钠等。

其剂型是任何一种药剂学上所说的剂型，如糖浆剂、颗粒剂、胶囊、片剂等；所述的胶囊为普通的胶囊、泡腾胶囊或其它各种适宜的胶囊；所述的片剂为普通的片剂、泡腾片、分散片或其它各种适宜的片剂。用适宜的包衣材料包衣或不进行包衣。

为了更好地说明本发明药物安全有效稳定，本发明人将药效实验和临床作用结果分析如下：

2、本发明胶囊的药效学实验

2.1本发明药物对大鼠佐性关节炎的影响

2.1.1取SD大鼠60只，体重200±20g，随机分为6组，大鼠于乙醚麻醉下，以Freund’s完全佐剂0.05毫升于右后足垫内，第8日开始给药治疗，一日3次，连续给药15天，停药后观察3天，观察不同时间的肿胀值，结果见表1

表1本发明药物对大鼠佐性关节炎的影响

注：：*与模型对照组和对照药物组相比P＜0.05

2.1.2结果：本发明药物(低、中、高剂量组)与与模型对照组和对照药物组相比有显著差异(P＜0.05，本发明药物组合物(低、中、高剂量组)对对大鼠佐性关节炎的影响明显高于模型对照组和对照药物组(表1)。

2.2本发明药物对大鼠足肿胀的抑制作用

2.2.1实验方法及动物分组雌性SD大鼠50只，随机分为5组，大鼠足部以角叉菜胶致炎；本发明药物低(0.3g/kg)、中(0.6g/kg)、高剂量(1.2g/kg)组，以醋酸可的松作对照(1.4/kg)，生理盐水对照组(同容量生理盐水)。灌胃给药，连续给药7天，每天一次。

表2本发明药物组合物对大鼠足肿胀的抑制作用

注：**与模型对照组和对照药物组相比P＜0.01

2.2.2结果：结果表明本发明药物高剂量对大鼠足肿胀有明显抑制作用，中、低剂量组虽有减轻大鼠足肿胀的趋势，但差异无显著性(表2)。

2.3本发明药物对细胞免疫调节作用及迟发性超敏反应(DTH)的影响

2.3.1取小鼠130只(20±2g，雄雌兼用)，随机分为13组，自由取食、饮水。取6组，每天给药80mg·kg^-1，3天后以50％DNCB致敏，形成免疫增强模型。另取6组50％DNCB致敏后立即每天给药250mg·kg^-1，形成免疫低下模型。另设1组空白对照组(仅以DNCB致敏)。本发明药物按表1所示的剂量对免疫增强组和免疫低下组中的5个组连续给药12天。对照组给等体积的生理氯化钠溶液。第13天，每只小鼠以2.5％的DNCB攻击右耳，2小时后，称重，脱颈椎处死，以直径8mm米打孔器打孔，取左右耳片。另取脾脏、胸腺于分析天平称重，计算左右耳片差值、脾脏系数和胸腺系数。

2.3.2结果：结果表明，免疫增强组中，本发明药物提取物合剂在3.25～50mg/kg/d范围内能下调小鼠左右耳片差值、脾脏指数及胸腺指数，其下调的程度随本发明药物合剂剂量的加大而增加，其中25mg/kg/d的剂量下调作用最为显著。免疫低下组中，12.5～50mg/kg/d的本发明药物合剂能显著地上调小鼠左右耳片差值及胸腺指数。其上调作用在3.125～25mg/kg/d内呈剂量依赖性的量效关系。本发明药物合剂对免疫低下组小鼠的脾脏指数没有显著的影响，但随剂量增加而呈上升的趋势。

表3对迟发性超敏反应的影响(n＝10，

注：①与免疫增强组的CY对照比较*P＜005，**P＜0.01；

②与免疫低下组的CY对照比较**P＜0.01，***P＜0.005，*P＜0.05。

2.4本发明药物对腹腔巨噬细胞生成IL-1的影响

2.4.1取小鼠6只(20土2g，雄雌各半)，于实验的前3天给0.6％巯基乙醇酸钠2ml/只。实验时脱颈椎处死，给8ml Hank’s液，在24孔板中无菌制备和培养单层巨噬细胞。本发明药物合剂以无血清的RPMI-1640液配制成15.5、31.3、62.5、125、250g/ml，分别加入单层巨噬细胞1ml/孔。阳性对照为2.0g/mlLPS的无血清RPMI-1640液，空白对照为无血清RPMI-1640液。制备巨噬细胞培养上清，储存于-20℃备用。另取小鼠6只(20±2S，雄雌各半)，脱颈椎处死后，无菌制备小鼠胸腺细胞并加入96孔板中，0.1ml/孔，含胸腺细胞1X10⁶个。将含有IL-1的不同浓度药物作用的培养上清液，用培养液作1∶20、1∶40、1∶80三个梯度稀释，分别加入上述培养孔中，每孔50μl，然后每孔加入ConA使其终浓度g/ml，另设Con A对照孔，测定IL-1的活性。

2.4.2结果：结果表明，不同浓度的本发明药物合剂对小鼠巨噬细胞生成IL-1有不同的影响。浓度在62.5μg·m1^-1以下时对小鼠巨噬细胞生成IL-1没有促进作用；浓度在125～500μg·ml^-1时本发明药物合剂对小鼠巨噬细胞生成IL-1有促进作用。不同稀释比的小鼠巨噬细胞上清液中IL-1的活性不同。稀释比为1∶40的巨噬细胞上清液对小鼠脾淋巴细胞增殖有明显的促进作用，其中经125～500μg·ml^-1的本发明药物合剂作用后的巨噬细胞上清稀释液，对小鼠脾淋巴细胞增殖的促进作用显著。稀释比为1∶20的巨噬细胞上清液对小鼠脾淋巴细胞增殖没有显著的促进作用。稀释比为1∶80的巨噬细胞上清液中IL-1的活性有很大的降低，但与相应的空白对照相比仍然有统计学意义(见表4)。

表4对小鼠腹腔巨噬细胞生成IL-1的影响

注：①与1∶40稀释度的空白对照比较，**P＜0.01，*P＜0.05；②与1∶80稀释度的空白对照比较，**P＜0.01，*P＜0.05

2.5本发明药物对T淋巴细胞增殖反应的影响

2.5.1取6～8周龄健康小鼠72只，分为6组(每组12只，雄雌各半，自由取食、饮水)，1～5组分别给50、25、12.5、6.25、3.125mg/kg/d剂量的本发明药物合剂，另设空白对照组，每天给等体积的生理氯化钠溶液。给药后的第5、10、15天分别取上述6组中的4只小鼠摘眼球放血，脱颈椎处死，无菌取脾，培养、收集脾淋巴细胞，在液体闪烁计数仪中测定每个孔的放射量(cpm)。

2.5.2结果：结果表明，不同剂量的本发明药物合剂对小鼠脾淋巴细胞增殖反应都有显著的增强作用，但起效的时间不同。给3.125～6.25mg/kg/d，给药10d观察到对小鼠脾淋巴细胞增殖反应有显著促进作用，给药15d，其促进作用达极显著水平(P＜0.01)；给12.5～25mg/kg/d，给药5d观察到对小鼠脾淋巴细胞增殖反应有显著促进作用，给药10、15d其促进作用达极显著水平(P＜0.01)；但给50mg/kg/d的本发明药物合剂，给药的第5d没有观察到对小鼠脾淋巴细胞体内增殖有显著促进作用，且第10、15d所检测到的促进作用相对于给25mg/kg/d的本发明药物合剂有显著的下降。在设定的5个剂量中，本发明药物合剂的给药剂量与小鼠淋巴细胞增殖的促进作用呈钟罩型的量效关系，在3.125-25mg/kg/d的范围内随着剂量增加，这种促进作用呈上升趋势，当本发明药物剂的剂量增至50mg/kg/d时，这种促进作用开始下降(见表5)。

表5本发明药物对小鼠T淋巴细胞增殖反应的影响-

注：与空白对照组比较，*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001

2.6本发明药物对脾淋巴细胞产生IL-2的影响

2.6.1取6～8周龄健康小鼠72只，分为6组(每组12只，雄雌各半，自由取食，饮水)，1～5组分别给50、25、12.5、6.25、3.125mg·kg^-1·d^-1的本发明药物合剂，另设空白对照组，每天给等体积的生理氯化钠溶液。给药后的第5、10、15天分别取上述6组中的4只小鼠摘眼球放血，脱颈椎处死。无菌制备、培养脾细胞，收集上清、离心、除菌后，分别作1∶1、1∶2、1∶4稀释，测定稀释液的IL-2活性，以促进小鼠胸腺细胞增殖反应表示。

2.6.2结果：结果表明，不同剂量的本发明药物合剂对小鼠脾淋巴细胞IL-2的生成有不同的影响。低剂量的本发明药物合剂(3.125～12.5mg·kg^-1·d^-1)在给药的前5天内，没有观察到对小鼠脾淋巴细胞生成IL-2的促进作用。而较高剂量的本发明药物合剂(25～50mg/kg/d)在给药的第5天对小鼠脾淋巴细胞生成IL-2表现出显著的促进作用。本发明药物合剂对小鼠脾淋巴细胞生成IL-2的促进作用随给药时间的增加而加强。给药的第5天，5个剂量的本发明药物合剂仅有25、50mg/kg/d两个剂量表现出促进作用。给药的第10天，5个剂量的本发明药物合剂对小鼠脾淋巴细胞生成IL-2都表现出显著的促进作用，而在给药的第15天，这种促进作用进一步加强。不同稀释比的小鼠脾淋巴细胞培养上清液中IL-2的活性有一定的差异。稀释比为1∶2时，不同给药时间和剂量的小鼠脾淋巴细胞培养上清液中的IL-2活性最高(见表6)。

表6对小鼠脾淋巴细胞生成IL-2的影响

注：与空白对照组比较，*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001

2.7本发明药物对Ts细胞亚群的影响

2.7.1取小鼠28只，分为7组(每组4只，雄雌各半)，作为供体鼠。其中1组为适量免疫组(OI)，即以50μl的1％DNCB丙酮∶麻油液(1∶1，V∶V)对小鼠腹部致敏。另6组为超适量免疫组(SOI)，即用1％DNCB 300μl涂于腹部致敏。适量组与超适量组致敏均在第2天强化。超适量免疫组中的3组每天给药100mg/kg，以消除超适量DNCB免疫造成的Ts细胞抑制。本发明药物合剂按表7所示的剂量和分组方案对供体鼠连续给至第5天。另取小鼠70只，分为7组，每组10只(雄雌各半)，作为受体鼠。供体鼠末次给药2小时后，取脾制成脾细胞悬液，给同系受体鼠尾静脉注射1X10⁸个脾细胞，同时用1％DNCB丙酮-麻油液致敏两次。受体鼠致敏的剂量为：适量组9ul，超适量组50ul。末次强化后的第4天，于每鼠右耳涂以1％DNCB攻击(适量组4ul，超适量组20ul)，24小时后脱颈椎处死，无菌取脾，培养、收集脾淋巴细胞，用液闪仪测放射性强度。

2.7.2结果：结果表明，超适量免疫(SOI)小鼠T淋巴细胞的应答水平显著地低于适量免疫(OI)小鼠(p＜0.01)，说明小鼠的免疫耐受造模成功(见表7)。单独使用25、50mg/kg/d两个剂量的本发明药物合剂和100mg/kg的CY均能显著上调超适量的DNCB所诱导的小鼠T，细胞亚群亢进而引起的免疫耐受，其中25mg/·kg/d剂量的本发明药物合剂可使小鼠的T淋巴细胞的免疫功能接近正常应答水平。本发明药物合剂与环磷酰胺合用可使小鼠T淋巴细胞的应答水平下降。25、50mg/kg/d两个剂量的本发明药物合剂能显著下调由100mg/kg的CY提升的小鼠T淋巴细胞的应答水平(见表7)。

表7本发明药物对小鼠T细胞亚群的影响

注：①与OI对照比较，***P＜0.001；②与SOI对照比较，**P＜0.01，***P＜0.001；

③与SOI+CY对照比较，*P＜0.05，**P＜0.01

2.8急毒性实验

2.8.1芫花根对小鼠的半数致死量为腹腔注射：269.4mg/kg，灌胃：521.4mg/kg；以2.1得到的本发明药物合剂对昆明小鼠的半数致死量为腹腔注405mg/kg，灌胃：895.1mg/kg。结果表明本发明药物合剂添加甘草乙醇后，毒性大大下降。

2.9长期毒性实验

2.9.1将本发明药物合剂配制成50mg/ml溶液，将实验大鼠分为三组：即高剂量组(MTD：1g/kg)、中剂量组(1/3MTD：333.3mg/kg和低剂量组(1/10MTD：100mg/kg)，分别对各组SD大鼠(270±14g)实行灌胃给药。每个剂量组40只，雌雄各半。连续给药90天，统计死亡数、平均中毒个数、体重以及血清主要生化指标的变化。并观察90天给药结束后配对生育能力的影响。给药结束后，三个剂量组大鼠的体重明显地增加。在高剂量组，中毒症状出现在给药后的78天，40只大鼠中有14只鼻孔出血，腹泻，一只死亡；中剂量组的中毒症状出现在给药后的86天，7只表现为轻微的腹泻；低剂量组没有出现中毒症状，结果见表8。

表8中毒死亡数及体重变化

给药结束后，三个剂量组大鼠的血清中AST、ALT、LDH、BUN指标比正常大鼠稍低，但没有显著差异，结果见表9。

表9、血清主要理化指标变化情况(雌雄平均数)

给药结束后的第一天，三个剂量组的大鼠即开始交配，在配对后的第24-30天开始产仔。由此可以看出，本发明药物合剂对大鼠的肝肾、生殖系统没有表现出显著的影响，结果见表10。

表10、连续给药90天后对大鼠生殖能力的影响

3、疗效实验：为了证明上述优点，本发明药物组合物进行了以下临床治疗，有关临床治疗情况如下：

(1)病人概况(选择病史、病情、年龄、性别等)

(2)病人来源：综合医院门诊患者

(3)入组标准：性别、年龄不限，病程大于半年

(4)用药方法：贴敷本发明的药物组合物，直接贴敷于思处，每次贴敷的时间为6天，贴敷3次为1个疗程，1个疗程为18天。

(5)疗效评定

痊愈：疼痛、肿胀、僵直和屈伸不利等风湿症状完全消失，社会功能完全恢复；主要参考指标(血沉，抗链0、类风湿因子)正常。

显效：疼痛、肿胀、僵直和屈伸不利等风湿症状明显减轻，基本不影响社会功能；主要参考指标(血沉，抗链0、类风湿因子)基本正常。

有效：显效：疼痛、肿胀、僵直和屈伸不利等风湿症状减轻，基本不影响社会功能；但主要参考指标(血沉，抗链0、类风湿因子)中个别不正常。

无效：疼痛、肿胀、僵直和屈伸不利等风湿症状改善不明显，影响社会功能。主要参考指标(血沉，抗链0、类风湿因子)不正常。

(6)疗效分析

性别：按入组标准，共治疗风湿病500例，其中男性175例，占35％；女性325例，占65％。本发明药物高剂量和中剂量组各占200例，对照药物组(骨刺片)100例。

病程：1年之内30例，1年～5年150例，5年～10年180例，10～20年90例，20年以上50例。

年龄组：30岁以下40例，31～40岁90例，41～50岁155例，50～60岁130例，61～70岁45例，71岁以上40例。

结果：总疗效统计和分析结果见表11，疗程与疗效比较结果见表12，主症指标与疗效比较结果见表13。疾病类型与疗效见其结果表14。

表11总疗效统计和分析表

注：本发明组与对照组比较p＜0.05。

表11结果表明本发明药物中剂量和高剂量组治疗结果显著，有效率分别为93％、94.5％。

表12疗程与疗效比较表

注：本发明组与对照组比较p＜0.05。

本12结果表明本发明药物中剂量和高剂量组与对照药物组比较对本病治疗不论病程长短，疗效均有效提高。

表13主症指标与疗效比较表

注：本发明组与对照组比较p＜0.05。

从表13治疗前后症状对比分析，可见本发明药物中剂量和高剂量组与对照药物组比较对消除关节疼痛，减轻红肿热，恢复运动机能等方面均有显著疗效，可使抗0和血沉下降或恢复正常，部分类风湿因子试验转阴，对有环形红斑或硬结者，有消除作用。

疾病类型与疗效如下

表14疾病类型与疗效结果表

以上药效和临床实验证明，本发明的药物组合物治疗风湿性疾病，具有显著的疗效，且对患者无任何毒副作用，且疗效显著，其治愈率达00％以上。使用1个疗程内，疼痛、肿胀症状逐步减轻，进而消除僵直、屈伸不利等风湿症状。这为本发明药物的安全有效稳定和临床应用提供了强有力的依据。

具体实施方式

下面结合实施例详细描述本发明的实现方案。

实施例1：

本发明酒剂的制备方法：

将枫荷梨450克、柠条450克、淫羊藿450克、骨碎补400克、鹿衔草400克、宣木瓜250克、延胡索250克、徐长卿250克、虎杖250克等药物洗净、阴干，然后切片或破碎，并按比例1∶5浸泡在相当于含酒精度45°以上的白酒中，其泡制周期为15～30天，到期后取出，加白糖适量，过滤装瓶即可。

实施例2：

本发明糖浆剂的制备方法：

将枫荷梨500克、柠条500克、淫羊藿500克、骨碎补300克、鹿衔草300克、宣木瓜300克、延胡索200克、徐长卿200克、虎杖200克水煎二次，每次1小时，滤过，合并滤液，浓缩成稠膏，加乙醇沉淀二次，使含醇量第一次达65％，第二次达80％，滤过，回收乙醇并浓缩至约700mL，趁热加蔗糖、用尼泊金乙酯醇液搅溶，再加沸水至全量，搅匀即得。

实施例3：

本发明颗粒冲剂的制备方法：

将枫荷梨500克、柠条400克、淫羊藿400克、骨碎补300克、鹿衔草300克、宣木瓜300克、延胡索250克、徐长卿250克、虎杖250克等上述药物粉碎碾成粗末，用含水的65％乙醇提取二次，第一次2小时，第二次1小时，回收乙醇，过滤，滤液浓缩成稠膏，干燥，粉碎过100目筛，混匀、湿润、软化、结成团块时取出，制成颗粒冲剂。

同理，按实施例3的方法，加入适宜的胶囊剂等。

本发明制剂为芳香酒剂，无毒，或棕褐色糖浆剂、或淡黄色颗粒剂或片剂或胶囊剂。

以上各组成中，重量是以生药计算的，在本发明中，若重量以克为单位，该

组成可制成药物制剂1000剂，所述1000剂指，制成的成品药物制剂1000剂，如制成胶囊制剂1000粒、片剂1000片、颗粒剂1000g、口服液1000安瓶、注射液1000安瓶、滴丸剂1000粒等，作为颗粒剂也可以制成大包装，如100-500袋，具体可以是100袋、150袋、200袋、250袋、500袋，每袋可作为1次服用量。本制剂重量可以增大或减小，但各组成之间的生药材重量配比比例不变。

本发明是在名老中医经验方的基础上，经过大量的制备工艺试验和临床应用所得到的纯中药制剂。本发明标本兼治，疗效显著，对各种风湿病症状的改善和促进患者身体的康复具有明显的治疗效果。

本发明的优点是与同类西药相比，其组方合理、疗效显著、无耐药和抗药性、无毒副作用，治疗周期短，且价格便宜患者易接受，服用方便、口感好、适宜长期服用等，是一种用于治疗风湿病的纯中药制剂。

本发明的特点是：

1.系全天然药物制剂，具有补肝肾、强腰膝、祛风湿、舒筋血之功，其在临床使用中疗效好、周期短、价格低、无严格适应症和毒副作用；

2.采用口服剂型，使用方便，口感好，患者易接受；

3.标本兼治，疗效显著、治疗费用低，较常规治疗可节省费用60％以上；

4.高血压、心脏病患者慎用。

Claims (7)

1.一种治疗风湿病的中药组合物，其特征是：它由下列原料的水提取物或醇提取物作为活性成分和药学上可接受的附加剂组成，各原料的重量份为：枫荷梨331～999份、柠条331～999份、淫羊藿331～999份、骨碎补166～498份、鹿衔草166～498份、宣木瓜166～498份、延胡索166～498份、徐长卿166～498份、虎杖110～330份。

2.根据权利要求1所述的一种治疗风湿病的中药组合物，其特征是：所述的各原料的重量份为：枫荷梨688份、柠条688份、淫羊藿688份、骨碎补468份、鹿衔草368份、宣木瓜368份、延胡索328份、徐长卿328份、虎杖268份。

3.根据权利要求1所述的一种治疗风湿病的中药组合物的制备方法，其特征是：按所述重量配比称取各原料，将上述药物洗净、阴干，然后切片或破碎，并按比例1∶5浸泡在相当于含酒精度45°以上的白酒中，其泡制周期为15～30天，到期后取出，加白糖适量，过滤装瓶即可。

4.根据权利要求1所述的一种治疗风湿病的中药组合物，其特征是：所述的药学上接受的附加剂是下列一种以上：甘油、明胶、聚乙二醇、丙二醇、糊精、干淀粉、对羟基苯甲酸乙酯、酒石酸、柠檬酸、碳酸氢钠、卵磷脂、十二烷基硫酸钠。

5.根据权利要求1所述的一种治疗风湿病的中药组合物，其特征是：其剂型为颗粒剂、胶囊或片剂。

6.根据权利要求5所述的一种治疗风湿病的中药组合物，其特征是：其胶囊为泡腾胶囊。

7.根据权利要求5所述的一种治疗风湿病的中药组合物，其特征是：所述的片剂为泡腾片或为分散片，用适宜的包衣材料包衣。