CN102160615B - 以牡丹提取物作为基料的保健食品组份及其应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种保健品，尤其是涉及一种以牡丹提取物作为基料的保健食品组份及其应用，所述牡丹提取物为牡丹汁、牡丹酚或牡丹油；配料分为三种分别为牡丹汁、胶原蛋白肽、天然果汁、Vc、异麦芽糖醇、蛋白糖和纯净水制成的口服液；以牡丹酚为基料制成口服液；以牡丹油为基料制成的软胶囊；本发明使得牡丹基料的有益成分应用得到了实现，有效地克服了牡丹根、茎或花浪费；本发明采用口服液或胶囊形式，有效地解决了牡丹生产中原料季节性强、集中供应、不能储存、不能常年供应的技术难题；实现了牡丹的资源化利用和保健功能的进一步拓展。

Description

以牡丹提取物作为基料的保健食品组份及其应用

【技术领域】

本发明涉及一种保健品，尤其是涉及一种以牡丹酚或牡丹根、皮、叶、枝和可食用牡丹花制成牡丹汁、牡丹籽油作为基料的靓肌抗衰老保健食品组份及其应用。

【背景技术】

根据本草纲目以及古方记载，牡丹具有一定的药效，牡丹根皮味辛、寒、无毒；对于疝气、妇女恶血、伤损瘀血、刀伤后内出血以及下部生疮具有一定疗效；并且牡丹的根、皮、花、叶、枝以及提取的牡丹酚是很好的保健食品，目前在国内、国际市场都很畅销。

其中以牡丹汁为例：牡丹汁因是牡丹根皮和可食牡丹花萃取而得，而且牡丹花、根、皮入药，《神农本草经》将牡丹列为“中品”，“除症结瘀血，安五脏。”其美容养生在明代《养生八笺》、清代《群芳谱》、《养颜录》、《华佗神医秘方》记载关于牡丹方剂的达几十种之多。牡丹花有活血、调经之功效，为妇科之良药，治瘟毒、风噤疮毒。牡丹根皮清热凉血、活血化瘀，用于湿毒发斑、吐血钮血、夜热早凉、无汗骨蒸、经闭痛经、痛肿病毒、跌打伤痛、惊痛邪气、安五脏、悦色、排脓、续筋骨、活血、生血和凉血等功效。据其他药典记载和经中国科学院和国家农业部茶叶质量监督检测中心检测。牡丹花含总黄酮1.2～1.7％氨基酸7.8％活性多糖27.8％维生素0.47％，儿茶素0.04％。牡丹花瓣和牡丹花粉富含多种维生素、酶、糖类和黄铜及人体所需的8种氨基酸、7中常量元素和8中微量元素，牡丹花甙、紫云英甙、蹄纹天竺甙、松油醇、牡丹黄酮醇、异黄酮醇、香叶醇、活性多糖等40余种活性成分。胡萝卜素、玉米黄素、β-萃澄茄油烯、罗勒烯醇、丁子香醇、环氧芳梓醇、β-香茅醇，苯乙醇。

牡丹根皮，自古入药，疗效甚好，而采用现代工艺萃取其有效成份牡丹酚，牡丹酚经现代医学证明，具有镇静、催眠、抗菌、抗炎、抗氧化、降血压、能够抑细胞内氧自由基的产生(O2·)能使皮肤增白，并将皮肤中沉积的色素，还原退色，清淤化斑、清肿止痛、抗过敏、抗病毒，对色斑、肌肉痛、皮肤瘙痒、牛皮癣、带状疱疹；妇女痛经、闭经具有较好的治疗和保健作用，促进面部肌肤血液循环、活化衰老表皮细胞，消除皱纹、去斑、润肤、美容也有较好的功效。牡丹酚及多酚类物质有一定量的R·OH基，能够形成有抗氧化作用的氧自由基(H·)以消除超氧阴离子(O2∧·)和羟自由基(OH·)等自由基的活性。从而保护组织免受氧化作用的损伤，以提高其免疫功能、抗癌、抗衰老，因此已被称作“第七大营养素”。因氧损伤导致许多慢性疾病，如：心血管病症、衰老的主要原因，多酚的抗氧化功能可以对这些慢性疾病起到预防的作用，对能产生过氧化作用而导致结构和功能损伤的超氧化阴离子和羟自由基有明显的消除作用。作为一种很强的抗氧化剂可以抑制DL胆固醇氧化。DL胆固醇即坏胆固醇，是血液中的“杂质”可以引起冠心病和心肌梗塞死等。其物理性可用紫外分光光度计测定，在274nm波长E(1％cm)为862紫外光区有强烈吸收，因此又有防晒的功效。

牡丹根皮含有牡丹酚、芍药甙、没食子酸、挥发油0.15～0.4％植物淄醇、牡丹酚甙、没食子酸葡萄糖、牡丹酚原甙、氧化芍药甙等，因此牡丹不仅具有很高的观赏艺术价值，且有很好的养生、美容、药用价值。黄酮类物质是当代国际科技和医学界公认的十分有利于人体健康的物质，具有较强的活血一通经、降血压、防止血栓形成、降低血管脆性、改善血液循环、防治心脑血管疾病、美容护肝等作用，是一种很强的抗氧化剂，可以清楚体内自由基。抗氧化作用是Ve的十倍以上，这种抗氧化作用可以阻止细胞的退化衰老。也可阻止癌症的发生。据医学临床研究证明，活性多糖具有较好的抗肿瘤作用，能抑制多种肿瘤的生长，能较好的提高免疫机能，特别是活性多糖中的茶多糖，具有显著的降血糖、降低胆固醇及调节甘油三脂水平的作用，其降白血糖的机能与促进外周组织对葡萄糖的作用，提高机体对胰岛素的敏感性有关，被誉为“天然胰岛素”，而牡丹花中所含的丰富的氨基酸、多种维生素及黄酮醇，经科学家研究发现具有净化血液、减少自由基，预防过氧化脂质形成，清除体内毒素，维持体内酸碱平衡，促进新陈代谢，抗敏养颜、美白等作用。

牡丹自古以来皆用其根皮入药，名曰“丹皮”，牡丹药用价值很高。《神农本草经》将其列为中品。李时珍撰《本草纲目》曰：牡丹性微寒，味苦辛，无毒。入心、肝、肾经。具有清血，活血散瘀的功能。主治斑疹吐血，血滞经闭，经前发势，痈肿疮毒，损伤瘀血，阴虚发势，无汗骨蒸。临床上主要用于清肝火和凉血散瘀(消炎、降压)，如因肝郁火而致的发热、盗汗、自汗、头痛目涩、月经不调，常配栀子、柴胡等，方如“丹栀逍遥散”。取其热散瘀作用，治疗急性阑尾炎常配大黄、金银花等，方如“大黄牡丹汤”加减。因高血压和动脉硬化而瘘有肝郁积热症者，可配野菊花、石决明等降压。如阴虚发热，可配“青蒿鳖甲煎汤”。热症出血，可助犀角、生地凉血止血；因甩胸腥部挫伤后有瘀血作痛者，方剂中加丹皮、赤艾以凉血去瘀。因此，丹皮是治疗血中伏火，除烦热，祛血瘀或瘕积聚的常用药物。

由于目前的办公人员或长期接触辐射源的人员经常会出现注意力不集中、视力下降、骨质疏松等疾病；一方面是由于工作时间长缺乏锻炼造成的，另一方面是工作环境和精神压力造成的；但是牡丹中的成分对于上述问题均具有一定的功效。在洛阳乃至全国的牡丹根、茎、叶利用率很低，大多以牡丹花作为茶饮，使得没有利用价值或品相不好的牡丹花以及根、茎、叶白白的浪费了，所以申请人研发了牡丹综合利用的技术。

参考文献：

1、《本草纲目》；

2、明代的《养生八笺》；

3、清代《群芳谱》；

4、《养颜录》；

5、《中西医结合杂志》(1985、4、24、5)《辽宁医学杂志》(1960、7、4)；

6、《湖南医学杂志》(1983、4、24)《中医杂志》(1983、10、19)；

7、《药性论》；

8、《民间常用草药汇编》；

9、《中药抗衰有效成分药理与应用》黑龙江科学技术出版社。

【发明内容】

本发明技术方案提供了一种以牡丹提取物作为基料的保健食品组份及其应用，本发明通过将牡丹基料与具有保健功效的食用辅料进行合理的配伍食用，使得牡丹基料的有益成分应用得到了实现，有效地克服了牡丹根、茎、叶或花浪费；本发明采用口服液或胶囊形式，有效地解决了牡丹生产中原料季节性强、集中供应、不能储存、不能常年供应的技术难题；实现了牡丹的资源化利用和保健功能的进一步拓展。

为实现上述发明目的，本发明采用如下技术方案：

所述以牡丹提取物作为基料的保健食品组份，所述牡丹提取物为牡丹汁、牡丹酚或牡丹油，其中以牡丹汁作为基料，按重量百分比：

牡丹汁        10～20％

胶原蛋白肽    5～30％

天然果汁      20～60％

Vc            0.001～0.0035％

异麦芽糖醇0.5～5％

蛋白糖2～8％

余量为纯净水

将所有成分经过混合均匀灌装、灭菌，即制成口服液。

所述以牡丹提取物作为基料的保健食品组份，所述牡丹提取物为牡丹汁、牡丹酚或牡丹油，其中以牡丹酚作为基料，按重量百分比：

牡丹酚        0.3～2％

胶原蛋白肽    5～30％

天然果汁      20～60％

Vc            0.001～0.0035％

异麦芽糖醇0.5～5％

蛋白糖2～8％

余量为纯净水

将所有成分经过混合均匀灌装、灭菌，即制成口服液。

所述以牡丹提取物作为基料的保健食品组份，所述牡丹提取物为牡丹汁、牡丹酚或牡丹油，其中以牡丹油作为基料，不包含表皮胶囊成分，胶囊内组份按重量百分比：

牡丹油      10～25％

葡萄籽油    38～80％

鳕鱼肝油    10～30％

Ve          1～6％；

其中胶囊表皮成分按重量百分比：

明胶35～45％

甘油15～25％

水35～44.3％

防腐剂0.2～0.5％

将牡丹油、葡萄籽油、鳕鱼肝油、Ve按照成分含量混合均匀装入胶囊表皮制成软胶囊。

所述以牡丹提取物作为基料的保健食品的应用：

所述以牡丹提取物作为基料的保健食品的应用包含口服液和软胶囊。

所述以牡丹提取物作为基料的保健食品的应用中口服液成年人每日10～50ml，

所述以牡丹提取物作为基料的保健食品的应用中软胶囊制成规格500mg/粒。

所述以牡丹提取物作为基料的保健食品的应用中软胶囊成年人每日1～6粒。

由于采用了上述技术方案，本发明具有如下有益效果：

本发明所述的以牡丹提取物作为基料的保健食品组份及其应用，本发明采用口服液或软胶囊并且利用不同的剂型克服了因加工工艺不同对其天然活性成分的破坏，避免了油剂，水剂不相溶问题的发生，更好的保存了牡丹天然活性成分和功效；

1)、本发明配方中有效成分含量和配比，符合中国营养学学会标准，按人体所需精确到配比。

2)、提取工艺较为成熟，也就是常规的无菌提取，保证了产品的质量，品质上乘，纯天然萃取，无污染和人体吸收率高。

3)、首次将牡丹籽、油；葡萄籽油和鳕鱼肝油中的天然动物性和植物性不包含脂肪酸成分，按照人体所需精确到配比，符合中国营养学学会标准，配料较为合理。

4)、首次将牡丹纯天然萃取植物性功效成份和深海鱼动物性功效成份，以不同的剂型结合在一起，避免了单一植物活性功效成分或单一动物功效活性成分的缺失和不足，强化了动植物活性功效成分的互补性和协同效应。

5)、本发明中主要功效成分，全部纯天然萃取，无添加，无着色，口感清纯，风味独特，保存了天然活性成分，以利于人体吸收。

6)、首次将本发明配方中的功效成分，按理化性质不同分别制成口服液和胶囊制剂，服用、保存、携带方便。

根据以上分析，本发明具有了强效，抗衰老，增强免疫力，怡悦心神，调节人体功能和免疫系统，加速新陈代谢、健脑益智、驻颜美容、滋肝补肾、仰制脂肪合成的养生、保健、防病治病、美容，易人体吸收等多功效于一体的比较理想的保健产品。

【具体实施方式】

通过下面的实施例可以更详细的解释本发明，本发明并不局限于下面的实施例，公开本发明的目的旨在保护本发明范围内的一切变化和改进；

所述牡丹提取物包括牡丹汁、牡丹酚和牡丹油：

所述以牡丹提取物作为基料的保健食品组份，按重量百分比：

牡丹汁        10～20％

胶原蛋白肽    5～30％

天然果汁      20～60％

Vc            0.001～0.0035％

异麦芽糖醇0.5～5％

蛋白糖2～8％

余量为纯净水

将所有成分经过混合均匀灌装、灭菌，即制成口服液。

所述以牡丹提取物作为基料的保健食品组份，按重量百分比：

牡丹酚        0.3～2％

胶原蛋白肽    5～30％

天然果汁      20～60％

Vc            0.001～0.0035％

异麦芽糖醇0.5～5％

蛋白糖2～8％

余量为纯净水

将所有成分经过混合均匀灌装、灭菌，即制成口服液。

所述以牡丹提取物作为基料的保健食品组份，所述牡丹汁选用可食用的牡丹采用压榨法，将牡丹根皮或牡丹花和叶经清洗，分拣、压榨、过滤、混合、灭菌制成牡丹汁或用超临界CO2萃取取得，制成牡丹汁。

所述以牡丹提取物作为基料的保健食品组份，所述胶原蛋白肽为分步定向酶解天然深海鱼皮胶原蛋白制取的活性肽，纯度≥99％(高纯度、干重计)≤400道尔顿，超微分子。

所述以牡丹提取物作为基料的保健食品组份，所述天然果汁为纯苹果汁或纯红枣汁或纯桃汁或蓝莓汁。

所述以牡丹提取物作为基料的保健食品组份，所述Vc为养生堂生物(上海)国际有限公司市售；所述异麦芽糖醇为上海蓝安食品责任有限公司或上海德津实业有限公司市售；所述蛋白糖为深圳市三六五创辉香精香料有限公司市售。

所述以牡丹提取物作为基料的保健食品组份，不包含表皮胶囊成分按重量百分比：

牡丹油      10～25％

葡萄籽油    38～80％

鳕鱼肝油    10～30％

Ve          1～6％；

其中胶囊表皮成分按重量百分比：

明胶35～45％

甘油15～25％

水35～44.3％

防腐剂0.2～0.5％

将牡丹油、葡萄籽油、鳕鱼肝油、Ve按照成分含量混合均匀装入胶囊表皮制成软胶囊。

所述以牡丹提取物作为基料的保健食品的应用：

所述以牡丹提取物作为基料的保健食品的应用包含口服液和软胶囊。

所述以牡丹提取物作为基料的保健食品的应用中口服液成年人每日10～50ml，

所述以牡丹提取物作为基料的保健食品的应用中软胶囊制成规格500mg/粒。

所述以牡丹提取物作为基料的保健食品的应用中软胶囊成年人每日1～6粒。

本发明辅料中所述的鳕鱼肝油：鳕鱼是生活在0℃～16℃的深海冷水鱼类，不杂食、无污染，是目前最好的天然鱼肝油，品质安全可靠。富含天然维生素A、维生素D和大脑营养素DHA、ω-3多不饱和脂肪酸及免疫因子“AKGS”含量符合世界卫生组织安全标准，品质安全可靠，纯天然、口感清纯、长期服用不会过量。特别是富含的DHA成分是其它肝油中没有的，是公认的益智与促进大脑发育的营养素，是视网膜的主要组成部分，对防止视力下降、视力和大脑疲痨、骨质疏松、急性支气管炎、过敏性鼻炎有一定的作用，而“DHA”被世界公认为“脑黄金”。

本发明辅料中所述的Va的功效：1、提高视力，防止夜盲。2、促进骨骼和皮肤粘膜的生长，使皮肤湿润细嫩。3、促进头发正常生长，牙齿坚固。4、促进儿童青少年长高，抗病力增强，减少儿童青少年传染病的发生。5、对抗环境污染能力，增加鼻喉肺气管表层正常运作。

本发明辅料中所述的Vc作用功效：1、生成胶原蛋白，抗衰老、美化皮肤，增加皮肤弹性，促进微血管健康，预防色斑，阻断黑色素形成。2、预防关节炎，帮助铁的吸收，防止坏血病，增加免疫力。3、预防心血管疾病，强化维生素E的效果。

本发明辅料中所述的VD作用功效：1、延缓衰老、清除自由基，净化血液，保护血管，减少低密度脂肪蛋白，防止动脉硬化，促进性激素分泌，提高生殖能力。2、美化、滋润皮肤，清除色斑，老人斑，提高免疫力，增强肝的排毒功能，保护肝脏，增强抗癌能力。

本发明辅料中所述的Vd作用功能：帮助钙和维生素的吸收，强化骨骼、牙齿，防止佝偻病。

文献资料：《中国维生素白皮书》杜冠平、李学军编著，中国医药学会会长吴均田审校；胶原蛋白之父布兰特博士断言：“皮肤衰老的过程就是胶原蛋白的流失过程”。胶原蛋白肽，是胶原蛋白经胶原蛋白酶降解处理后制成有两个及两个以上氨基酸组成，人体吸收是以多肽的方式进行，具有较高的消化吸收性，分子量大约400道尔顿，可以被人身无障碍的吸收，无需消化，供身体组织充分利用。日本研究发现深海鱼皮的胶原蛋白与人体的胶原蛋白最为相似，具有下功效1.独特/HL因子，防止胶原流失，抑制黑色素，美白肌肤。2.修复真皮层延缓衰老，改善微循环，祛斑去皱。3.收缩毛孔，补水保湿，紧致皮肤，修复表皮。4.改善肤色，祛除黑眼圈，消除眼袋。

A、胶原蛋白占人体蛋白质总量的三分之一，胶原蛋白作用是将人体的几个细胞黏合起来形成组织(皮肤、血管壁、软骨等)，使人体组织富有弹性，同时对被胶原蛋白包围的细胞形成保护，避免细菌入侵。

B、文献《查维生素矿物质白皮书》杜冠平、李学军等编。中国药理医学会理事长张均田审校。百张出版社。

本发明辅料中所述的葡萄籽油：富含亚油酸75％、Ve36.12mg/kg、VD 7.95、Va8.56OPC(花青素)30mg/kg.从其有效成分的含量可以看出，其中维生素E、A、D，以在前的分析中论述，即富含的OPC(原花青素)是目前自然界中发现的清除自由基和抗氧化能力最强的物质之一，其抗氧化活性是Ve的五十倍，Vc的二十倍，发挥深层的清除自由基作用，抵抗自由基对人体细胞、器管的损害，帮助吸收Ve和Vc，强化循环系统的弹性，降低紫外线的伤害，保护肌肤中的胶原蛋白，改善静脉肿胀及水肿，预防黑色素沉淀，保护肌肤免受紫外线荼毒，预防胶原纤维和弹性的破坏，保护肌肤应有的弹性和张力，而OPC的抗辐射的超强抗氧化功能，还表现在能仰制自由基引发的脂质过氧化，减少电脑、手机、电视和X光射线、V射线等辐射。对人体内脏器管造成的伤害，减轻紫外线辐射对皮肤的损伤，保护眼睛免受辐射损伤，防治红血丝，增强视力，减少视网膜病，阻止自由基对晶状体蛋白的氧化。预防白内障、视网膜、抗过敏，保护消化系统，增强肌肤的抵抗力和免疫力，防止皮肤过敏及各类皮肤病，增强皮肤抗辐射能力，阻断紫外线伤害，因此有“皮肤维他命”和“皮肤化妆品”的美誉。避免皮肤皱纹产生和下垂，并且有超强的延缓衰老的增强免疫的作用，其亚油酸含量是目前发现的最高植物之一。其营养价值和医疗作用均得到国内外医学界和营养学家的充分肯定。主要功效表现在，是前列腺素合成的原料，软化心脑血管，促进血液循环，降脂、降压、促进新陈代谢，调节内分泌，减缓衰老，更有“血管清道夫”的美誉

本发明辅料中所述的牡丹油包含牡丹根、花、茎油和牡丹籽油：牡丹油中富含人体必需的多不饱和脂肪酸，不饱和脂肪酸是人体生命活动不可少，但身体自身不能合成，必需由食物供给的多不饱和脂肪酸。【文献《功能食品研究与应用》吴谋成编著，化学工业出版社】牡丹籽油具农部产品质量检测中心检测，亚油酸含量29％，亚麻酸含量在40％以上，而亚油酸的功能在葡萄籽油中已有论述。现代医学生命科学家和美国食品药品管理委员会(FDA)对亚麻酸的功能确认：1.预防心脑血管疾病2.降低血脂3.降低临界性高血压4.抑制癌症的发生和轻缓5.抑制过敏反应，抗炎作用6.抑制衰老7.增强智力8.保护视力。

本发明口服液的实验动物：

昆明二级雄性小鼠，体重16±2g。将小鼠随机分为：常规喂养组和口服液对照组，每组10只。

饲料配制及喂养管理：

基础饲料：由第四军医大学动物中心购买，适合小鼠的正常生长。

常规喂养组饲喂基础饲料，口服液对照组喂养连续口服液和基础饲料。同时喂养30d。两组小鼠均自由饮食与饮水，饲养环境温度为20-28℃，湿度为60％-70％。

受试物剂量；

口服液对照组小鼠灌胃给予受试物(本发明的口服液一或二)，灌胃量为0.2mL/只·次，另一常规喂养组给予等剂量的蒸馏水，每天1次，连续30d。

动物实验操作要点：

A、小鼠的抓取：

先用右手抓住鼠尾提起，放在实验台上，在其向前爬行时，用左手的拇指和食指抓住小白鼠的头颈部皮肤，然后鼠体置于左手心中，把后肢拉直，用左手无名指及小指按住尾巴和后肢，前肢用中指固定，即可作注射或其它实验操作。如需要较长时间操作时，可将鼠装入玻璃、木或竹制小白鼠盒内或固定在小白鼠固定板上。

B、小鼠的编号：

采用0.5％品红溶液涂擦被毛作为标记。

C、小鼠的处死：

脊椎脱臼法：右手抓住鼠尾用力向后拉，同时左手拇指与食指用力向下按住鼠头。将脊髓与脑髓拉断，鼠便立即死亡。

D、胃内注入(灌胃)：

左手拇指和食指抓住鼠两耳和头部皮肤，其他3指抓住背部皮肤，将鼠抓持在手掌内。特制灌胃针头可用一般7.5～8号注射针头改制，去掉针头并挫平，在其外面焊接一个光滑的球状金属圈套。灌胃时，针头沿着鼠右侧嘴角通过食管进入胃内，然后将受试物灌入胃内。此法的要点在于，动物要固定好，头部和颈部保持很平，进针方法正确，决不可进针不顺就硬往里插，否则会注入肺内，造成死亡。

E、采血：

采用从眼睛采血的方法。先用左手抓取固定小鼠，然后用剪刀将小鼠的胡须剪去，用镊子将小鼠突出的眼球拔除，直接将血液滴入离心管中。

测定指标：

1)、体重，DNA中T细胞系数：两组小鼠每隔6d称一次体重，喂养至第30d时，处死，分别称重、记录：

2)、生化指标：喂养至第30d，眼睛采血分离血清；血液静置30min，3000r/min离心15min，取上清液。采血前禁食16h。

其中常规喂养组和口服液对照组喂养过程中无不良反应和死亡现象。

3)、测定DNA中T细胞受体重排切除环的数量：喂食本发明的口服液一或二后与常规喂养组相比，本发明的口服液一或二口服液对照组白鼠经过测试诱导了CD4^+及CD8^+T细胞亚群的下调及IFN-γ的表达减少，而IL-4的分泌呈增高趋势；所以本发明可诱导Ag85A特异性抗体的分泌，产生了明显的体液应答。

本发明软胶囊的实验动物：

昆明二级雄性小鼠，体重16±2g。将小鼠随机分为：常规喂养组和软胶囊对照组，每组10只。

饲料配制及喂养管理：

基础饲料：由第四军医大学动物中心购买，适合小鼠的正常生长。

常规喂养组饲喂基础饲料，软胶囊对照组喂养连续软胶囊和基础饲料。同时喂养30d。两组小鼠均自由饮食与饮水，饲养环境温度为20-28℃，湿度为60％-70％。

受试物剂量；

口服液对照组小鼠灌胃给予受试物(本发明的软胶囊退去囊体)，灌胃量为0.2mL/只·次，另一常规喂养组给予等剂量的蒸馏水，每天1次，连续30d。

动物实验操作要点：

(1)小鼠的抓取：

先用右手抓住鼠尾提起，放在实验台上，在其向前爬行时，用左手的拇指和食指抓住小白鼠的头颈部皮肤，然后鼠体置于左手心中，把后肢拉直，用左手无名指及小指按住尾巴和后肢，前肢用中指固定，即可作注射或其它实验操作。如需要较长时间操作时，可将鼠装入玻璃、木或竹制小白鼠盒内或固定在小白鼠固定板上。

(2)小鼠的编号：

采用0.5％品红溶液涂擦被毛作为标记。

(3)小鼠的处死：

脊椎脱臼法：右手抓住鼠尾用力向后拉，同时左手拇指与食指用力向下按住鼠头。将脊髓与脑髓拉断，鼠便立即死亡。

(4)胃内注入(灌胃)：

左手拇指和食指抓住鼠两耳和头部皮肤，其他3指抓住背部皮肤，将鼠抓持在手掌内。特制灌胃针头可用一般7.5～8号注射针头改制，去掉针头并挫平，在其外面焊接一个光滑的球状金属圈套。灌胃时，针头沿着鼠右侧嘴角通过食管进入胃内，然后将受试物灌入胃内。此法的要点在于，动物要固定好，头部和颈部保持很平，进针方法正确，决不可进针不顺就硬往里插，否则会注入肺内，造成死亡。

(5)采血：

采用从眼睛采血的方法。先用左手抓取固定小鼠，然后用剪刀将小鼠的胡须剪去，用镊子将小鼠突出的眼球拔除，直接将血液滴入离心管中。

测定指标：

(1)、体重，DNA中T细胞系数：两组小鼠每隔6d称一次体重，喂养至第30d时，处死，分别称重、记录：

(2)、生化指标：喂养至第30d，眼睛采血分离血清；血液静置30min，3000r/min离心15min，取上清液。采血前禁食16h。

其中常规喂养组和软胶囊对照组喂养过程中无不良反应和死亡现象。

(3)、测定DNA中T细胞受体重排切除环的数量：喂食本发明的软胶囊后与常规喂养组相比，本发明的软胶囊对照组白鼠经过测试诱导了CD4^+及CD8^+T细胞亚群的下调及IFN-γ的表达减少，而IL-4的分泌呈增高趋势；所以本发明可诱导Ag85A特异性抗体的分泌，软胶囊同样产生了明显的体液应答效应。

结论：

由上述实验可以看出：本发明口服液或软胶囊无明显不良反应。

在30d小鼠喂养实验中，口服液或软胶囊的任一两组小鼠生长发育正常。在喂养小鼠的30d中，每6d称一次小鼠体重，口服液组小鼠的体重变化见下表。

口服液对小鼠体重的影响(g，n＝10，)

结合上表中两组小鼠的体重增长可以看出：口服液对照组小鼠的体重增长速度明显地大于常规喂养组，统计分析结果表明，常规喂养组小鼠与口服液对照组体重变化差异达显著水平，常规喂养组小鼠体重增长变化与口服液对照组有显著差异。这说明口服液具有增进小鼠食欲，促进小鼠健康成长的作用；口服液对照组小鼠活跃程度要高于常规喂养组，这进一步说明口服液对照组小鼠健康状况优于常规喂养组。

软胶囊对小鼠体重的影响(g，n＝10，)

结合上表中两组小鼠的体重增长可以看出：软胶囊对照组小鼠的体重增长速度大于常规喂养组，统计分析结果表明，常规喂养组小鼠与软胶囊对照组体重变化差异明显水平，常规喂养组小鼠体重增长变化与软胶囊对照组具有一定差异。这说明软胶囊具有增进小鼠食欲，促进小鼠健康成长的作用；软胶囊对照组小鼠活跃程度要高于常规喂养组，这进一步说明软胶囊对照组小鼠健康状况优于常规喂养组。

在此需要说明的是，其中未详述部分为现有技术或本领域通用技术。

为了公开本发明的目的而在本文中选用的实施例，当前认为是适宜的，但是应了解的是，本发明旨在包括一切属于本构思和本发明范围内的实施例的所有变化和改进。

Claims (1)

1.一种以牡丹提取物作为基料的保健胶囊，以牡丹油作为基料，其特征是：

胶囊内组份按重量百分比：

各组份之和为百分之百；

其中胶囊表皮成分按重量百分比：

明胶35～45％

甘油15～25％

水35～44.3％

防腐剂0.2～0.5％

将牡丹油、葡萄籽油、鳕鱼肝油、Ve按照成分含量混合均匀装入胶囊表皮制成软胶囊。