CN102149392B

CN102149392B - 温和无刺激无醇的皮肤消毒剂

Info

Publication number: CN102149392B
Application number: CN200880131186.7A
Authority: CN
Inventors: K·S·克里维
Original assignee: XTTRIUM LAB Inc
Current assignee: XTTRIUM LAB Inc
Priority date: 2008-08-15
Filing date: 2008-08-15
Publication date: 2016-06-01
Anticipated expiration: 2028-08-15
Also published as: JP2012500195A; WO2010019155A1; CA2733780C; PL2320915T3; AU2008360632B2; EP2320915A4; MX2011001693A; EP2320915A1; ES2465476T3; EP2320915B1; JP5542817B2; CA2733780A1; AU2008360632A1; CN102149392A; HK1158926A1

Abstract

本发明涉及免洗抗菌组合物，其在不使用醇作为载体或辅助活性成分的情况下，提供了革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌的充分减少。

Description

温和无刺激无醇的皮肤消毒剂

发明领域

本发明涉及抗菌和杀菌组合物。

发明背景

近年来，抗生素抗性微生物的流行率急剧增加。在医学界对于青霉素抗性肺炎球菌、万古霉素抗性肠球菌和甲氧苯青霉素和喹诺酮抗性的铜绿假单胞菌(Pseudomonasaeruginosa)有着极大的关注。在美国和欧洲，自从上世纪八十年代早期开始，甲氧苯青霉素抗性金黄色葡萄球菌(MRSA)和万古霉素抗性肠球菌(VRE)感染的发生率就显著增加。在全国上下的内科重症监护病房内，万古霉素抗性肠球菌定植(colonization)的增加最近已经达到了流行病的比例。这些微生物通过在天然环境和新病人之间交叉感染而定植，从而能够存活。腹泻和大便失禁进一步增加了VRE皮肤定植的危险，这显示皮肤定植与导管相关脓毒症、交叉感染和血液培养物污染有关。

这些发现提示，为了将VRE皮肤污染减至最低，必须减少医护工作者手部的细菌污染，从而截断病人之间的传播。

金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)是医院感染的主要原因，包括：血流感染，手术部位感染和肺炎。疾病控制中心(CDC)获得的总体数据表明，从1990年1月至1999年5月，金黄色葡萄球菌感染具有如下比例：12.6％从重症监护室(ICU)获得的血流感染，18.1％从ICU获得的肺炎病例，和16％从ICU获得的尿道感染。调查报告显示，金黄色葡萄球菌抗性的进一步发展在近年来迅速加快，甲氧苯青霉素抗性的金黄色葡萄球菌分离物的总体比例在参与调查的医院中从1975年的2.4％增加到了1991年到29％。

甲氧苯青霉素抗性金黄色葡萄球菌(MRSA)感染已经与透析治疗，抗生素前期使用，烧伤病房或重症监护病房的住院治疗，长期住院，先前的住院，和先前的侵袭过程联系起来。MRSA的受众与其它抗性葡萄球菌菌株的受众相似。MRSA病人房间的环境表面，以及病人护理设备都经常被污染。然而，还没有很好地研究从这样的污染源传播MRSA的作用。

肠球菌是另一种被鉴定为医院感染来源的问题生物。和金黄色葡萄球菌一样，肠球菌分离物抗性的发生率也有显著增加。根据CDC，在参与医院ICU万古霉素抗性的肠球菌分离物总比例与1994-1998年间抗性的平均速率相比，在1999年增加了40％。

感染后分离的病原体主要随着手术过程的类型而改变。在清洁手术过程中，其中胃肠道、妇科腔道和呼吸道没有被侵入时，来自外部环境或病人的皮肤菌群的金黄色葡萄球菌是通常的感染来源。根据国家医院感染调查系统的数据，在过去十年内，感染后分离的病原体的发生和分布几乎没有改变。然而，越来越多的这些病原体显示抗菌药抗性，尤其是甲氧苯青霉素抗性的金黄色葡萄球菌。

伤口部位的感染是手术后疾病的主要来源，引起许多医院感染。这些感染约为每年500,000例，在估计的2700万例手术中，感染导致住院时间延长和更高的费用。平均手术部位感染(SSI)延长住院时间7.3天。这些感染构成了医院感染引起的42％的额外费用。在1992年，估计额外支出对于每例SSI感染为几千美元。

平均来说，患手术部位感染的病人比没有获得这样的感染的病人需要4.6％的额外非卧床护理就诊。在这些医院中，0.62％-1.9％的患有手术部位感染的病人死亡。这些数据显示了手术部位感染对医疗系统造成的巨大人力和经济浪费，因此控制它们具有极大的重要性。

长期以来，联双胍(bisbiguanide)的杀菌作用就是广为人知的。氯己定是这类化合物最著名的成员，以水溶液或者醇溶液的形式使用。另外，氯已定已经以各种配方销售多年，例如作为用于消毒双手和皮肤，消毒手术部位，消毒医疗器械，消毒伤口，消毒手术室，病房等的抗菌洗手液和术前洗消组合物。然而，这些配方通常会包含额外的成分，例如刺激物，醇等。

Taylor等2000年8月22日授权的美国专利号6,107,261，及其在2001年3月20日获得的后续美国专利号6,204,230，以及Taylor等2000年10月24日授权的美国专利号6,136,771公开了抗菌组合物，其含有至少50％饱和百分数的抗菌剂。该组合物还包含作为溶解促进剂的表面活性剂和可能是醇的水性溶剂。

Osborne等1998年7月7日授权的美国专利号5,776,430公开了一种外用抗菌清洁剂，其含有约0.65-0.85％氯己定和约50-60％变性醇，用其擦洗皮肤然后用水冲洗。

欧洲专利申请0604-848公开了一种凝胶，其含有占醇重量40-90％的抗菌剂，和聚合物以及增稠剂。

Lee于1990年9月11日授权的美国专利号4,956,170涉及一种高醇含量的抗菌凝胶组合物，其含有各种软化剂和保湿剂，以保护皮肤抵抗醇的干燥作用。在醇制剂中，需要高水平的醇来提供对敏感和抗性菌株的立即杀伤作用。

Gorman等的美国专利号4,420,484公开了一种碱性氨基或铵抗菌剂(尤其是联双胍、季铵盐和联吡啶)-聚乙二醇酯表面活性剂甜菜碱(betaine)和/或氧化胺表面活性剂抗菌皮肤清洁组合物，其用水、醇和各种其它成分配制。

Cardelli等的美国专利号4,374,126教导了一种醇组合物和形成薄膜的方法，其中该组合物包含醇溶性羧基化聚丙烯酸酯，其包含一种抗菌剂、粘合促进剂和双功能酰胺，其用于在醇溶剂蒸发时交联聚合物。如此形成的薄膜对体液具有抗性，能够在皮肤表面留长达两天，以提供最初和持续的抗菌活性。

美国专利号3,855,140和3,960,745公开了异丙醇的使用，而美国专利号4,919,837公开了使用低级烷醇，例如乙醇或正丙醇。众所周知醇会使皮肤脱脂，并可能导致皮肤刺激。

环戊硅氧烷(Velvesil^TM)是一种硅聚合物，其能用于各种化妆品应用中，包括止汗剂、乳液、防晒剂、唇膏、洗发液、指甲涂层组合物、护发素，例如2002年9月3日授权的美国专利号6,444,745；2003年3月11日授权的美国专利号6,531,540；2003年3月25日授权的6,538,061；2004年7月6日授权的6,759,479，这些专利都被转让给通用电器公司(匹茨菲尔德，马萨诸塞州)。然而，这些专利都没有公开用环戊硅氧烷作为无醇水性皮肤消毒剂的成分，用于术前洗消液，术前准备，个人护理洗手液等。

Dyna-Hex4是一种由Xttrium实验室制造和出售的市售抗菌清洁组合物，其由4％氯己定葡糖酸盐(chlorhexidinegluconate)，椰油基二乙醇酰胺(cocamideDEA)，香料POFL147，葡萄糖酸-δ-内酯，羟乙基纤维素，异丙醇，氧化月桂胺，PEG-75羊毛脂，纯净水，和十三醇。异丙醇作为其它组分的辅助(secondary)载体。

与醇基和/或含醇消毒剂有关的有两大问题。首先，醇的有效浓度(通常认为是大于约60重量％的乙醇或其等效量)对于皮肤是有刺激性的，导致干燥和随后的剥落和开裂。由于皲裂皮肤更容易受到微生物污染，重复使用醇消毒剂可能使得要解决的问题反而恶化。第二，虽然醇能够作为有效消毒剂，一旦蒸发，其杀菌活性就丧失。因此，它没有剩余抗菌效力。

因此，迫切需要一种无醇抗菌清洁组合物，它能显示极为有利的抗革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌以及其它微生物效力。

近年来，对于有效抗菌产品的需求日益增加。抗菌抗性的发生率已提高到了剧烈水平。但同时，对于无刺激且能够迅速施加而无需冲洗的产品(即免洗产品)的需求也在日益增加。

发明内容

本发明涉及抗菌组合物，其能够充分减少革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌，而不使用醇作为载体或辅助活性组分。

发明详述

本发明针对一种抗菌清洁组合物，其可以作为免冲洗产品而不是冲洗产品施用。该产品能有效杀死细菌和其它微生物，而对于皮肤温和，不会导致皮肤刺激或干燥。发现本发明的抗菌清洁组合物能显著减少细菌(例如金黄色葡萄球菌等)的集落形成单位(CFU)数量，而无需使用醇作为辅助抗菌剂，或者作为主要抗菌剂的载体。

无醇水性皮肤消毒组合物的主要成分是由水基基质中的氯己定葡糖酸盐，硅聚合物，环戊硅氧烷-C_30-45烷基鲸蜡硬脂基二甲基硅油交联聚合物(Velvesil^TM)，以及甘油组成的。

本发明不含醇，因此减少了其可能的刺激性，并且含有独特的硅聚合物环戊硅氧烷-C_30-45烷基鲸蜡硬脂基二甲基硅油交联聚合物以进一步保护皮肤不受刺激。除了无醇和无刺激性，本发明还用作免洗产品，而不是冲洗产品。大部分基于氯己定葡糖酸盐的抗菌剂是冲洗产品。本发明可以用作免冲洗产品。

本发明的组合物对于个人护理、消毒剂、术前洗消液、卫生护理洗手产品，术前准备产品，伤口护理剂等特别有用。另外，本发明对皮肤无害，无醇，无刺激，具有抗菌作用。

氯己定葡糖酸盐：

英国ICI实验室于1950年合成了氯己定葡糖酸盐(1，1’-六亚甲基二[5-(对氯苯基二胍]二-D-葡糖酸盐)。迄今，氯己定被认为是“黄金标准”抗菌剂，用于针对各种革兰氏阳性和革兰氏阴性的细菌、真菌、酵母和有选择的病毒的抗菌剂和消毒剂。氯己定葡糖酸盐也被叫做氯己定二葡糖酸盐，是一种由氯己定和葡萄糖酸形成的盐。化学上，氯己定是一种强碱，其盐形式最稳定。

氯己定盐能轻易吸附在微生物的细胞壁上，导致细胞壁完整性破坏，胞内物质渗漏。氯己定在低浓度下是一种抑菌剂，在高浓度下则具有杀菌性。氯己定的主要益处是能够通过接触杀死细菌，而对哺乳动物细胞无毒性。

氯己定葡糖酸盐的结构式如下：

氯己定葡糖酸盐被认为在目前可得的抗菌剂中是最持久的。氯己定葡糖酸盐的一个重要贡献是其对皮肤的强亲和性。大部分施加到皮肤表面的氯己定葡糖酸盐能够结合和保留，从而使其能在干燥后仍然保持活性。

氯己定葡糖酸盐在本发明组合物中的浓度为在水基基质中，约1-10％重量/重量比，优选2-6％重量/重量比，最优选4％重量/重量比。

可使用氯己定碱，但是能溶于制剂的氯己定盐是优选的。优选的盐是盐酸盐、醋酸盐，最优选的是葡糖酸盐，因其高水溶性和易吸收性。

硅聚合物：

用于无醇皮肤消毒组合物的本发明的硅聚合物包括一种或多种以下物质：聚二甲基硅氧烷聚合物(道康宁(DowCorning)225硅液)，聚二甲基硅氧烷中的聚二甲基硅氧烷醇(道康宁1403硅液)，环甲基硅酮和聚二甲基硅氧烷共聚物(copolyl，道康宁3225C硅液)，硅氧烷二醇(BASF1066DCG多醇)，和最优选的环戊硅氧烷-C_30-45烷基鲸蜡硬脂基(cetearyl)二甲基硅油交联聚合物(Velvesil^TM)，如(I)中所示。

环戊硅氧烷-C_30-45烷基鲸蜡硬脂基二甲基硅油交联聚合物是通过在掺入各种烷基硅氧烷的有机硅基质中建立由烷基和聚醚链组成的共聚物网络而产生的。本文所用的“环戊硅氧烷”指掺入I式所示的环戊硅氧烷-C_30-45烷基鲸蜡硬脂基二甲基硅油交联聚合物的基质。

环戊硅氧烷容易加工，与有机材料高度相容，而且提供了乳化益处。含有环戊硅氧烷的制剂可以从低粘度可喷洒的乳液，到高度结构化的无水凝胶。环戊硅氧烷可用于各式各样的个人护理产品，包括皮肤乳液和霜，防晒产品，着色化妆品，浴液，洗面产品，护发素和造型剂。另外，环戊硅氧烷易于与其它成分混合。

本发明的硅聚合物——环戊硅氧烷的使用浓度可以是组合物的约5％重量/重量比，优选小于0.1％重量/重量比，和最优选在水基介质中0.01％重量/重量比。

甘油：

甘油是已知的湿润剂，其由于对角质层外层中水的状态的影响而对皮肤调理具有有益效果。该调理可能是由于甘油与角质层中的脂蛋白相互作用，改变了脂蛋白的水结合和/或亲水性质。由于该现象，当甘油与皮肤相互作用时，水分会倾向增加，形成储器，其中水溶性活性成分(例如氯己定葡糖酸盐)可以溶解并保留，不被洗去。另外，当活性成分本身溶于甘油时，可进一步增加增强效应。

除了是一种已知的湿润剂，甘油还可用作锚定剂(anchoringagent)。本发明的锚定剂选自下组：甘油、丙二醇、甘油醛、二羟丙酮、1，3-丁二醇、2，3-丁二醇、赤藓醇、赤藓糖、赤藓酮糖、核糖、山梨醇、甘露醇和肌醇。最优选的，所选的锚定剂是甘油。

本文所称的锚定剂是一种吸湿剂，它能够穿透和维持在皮肤外层中(换言之，是一种实体化剂(substantiveagent))，活性成分可分配入其中并由于锚定剂而保留，不被洗去。锚定剂提供活性成分(例如抗菌剂)的缓释。

本发明甘油的浓度可以是在水基基质中小于1％重量/重量比，最优选为0.25％重量/重量比。

锚定剂可以与其它试剂混合。许多具有锚定和实体化性能的聚合物材料都可以任选地与上述锚定剂(例如甘油)混合，以提供改进的保持和缓释可溶性活性成分的性能。

这些试剂的例子包括：十八碳烯-1/马来酐共聚物，有机氟化改性硅树脂，聚乙烯吡咯烷酮，苯乙烯和丁二烯的氢化共聚物，成膜共聚物，二十碳烯和乙烯吡咯烷酮的共聚物，十六碳烷和乙烯吡咯烷酮的共聚物，纤维素醚，2-羟乙基甲基丙烯酸均聚物，小麦蛋白水解物的可可二甲基(cocodimethyl)铵盐，瓜尔胶羟丙基三甲基氯化铵，羟丙基纤维素，月桂基二甲基铵羟丙基水解胶原，月桂基二甲基铵羟丙基水解小麦蛋白，聚季铵盐-24和透明质酸，可溶性网硬蛋白和可溶性小麦蛋白，硬脂酰二甲基铵羟丙基水解胶原，丙烯酸/丙烯酸酯共聚物，苯氧基聚二甲基硅氧烷，聚二甲基硅氧烷共聚醇(copolyol)磷酸盐，聚癸烯/聚丁烯共聚物，聚甲基丙烯酰氨基丙基三甲基氯化铵，聚甲基烷基硅氧烷等。

其它成分：

“水基基质”意味着使用纯净水，USP，作为提供安全无毒和无刺激性载体的水相稀释剂。所用的纯净水，USP，补充组合物重量/重量百分数至100％。

如需要，本发明的组合物可包含香料，用于提供宜人香味。香料可选自但不限于：露得清(Neutrogena)香精，水果，木材，香料，和花卉。

另外，本发明的组合物可包含染料，提供特征性颜色。仅作为例子，染料可以选自但不限于：FD&C蓝色1号，红色2号，红色3号，红色40号，红色102号，D&C黄色10号，FD&C绿色3号，和焦油色素(tarcolors)。

本发明组合物的pH可以是5-7。如需要，pH可以通过加入合适的酸化剂或者碱化剂，例如6N盐酸或者50％氢氧化钠来调节。

用途：

本文中发现氯己定葡糖酸盐4％重量/重量比能有效在与皮肤表面接触后立即减少人类皮肤上的细菌，并且持续最长达6小时，而且随后也依然有残留。另外，已显示皮肤菌群的减少能够减少某些类型的医院感染的风险。水性氯己定葡糖酸盐制剂在本领域已显示对于下列指标性生物是有效的：大肠杆菌(Escherichiacoli)，表皮葡萄球菌(Staphylococcusepidermidis)，屎肠球菌(Enterococcusfaecium)，粪肠球菌(Enterococcusfaecalis)，铜绿假单胞菌(Pseudomonasaeuruginosa)，粘质沙雷氏菌(Serratiamarcescens)，白色念珠菌(Candidaalbicans)，艰难念珠菌(Candidadifficile)。

另外，本发明2-4％重量/重量比的氯己定葡糖酸盐产品可用于，但不限于下列目的：注射前、手术前准备，导管前准备，导管插入，中央静脉导管，经外周插管的中央静脉插管，中线，透析，移植/瘘管，动脉和股线，swangantz导管(漂浮导管)，伤口维护，胸管，缝合后的手术部位清洁，小手术过程，正骨针放置，维护等。

本发明组合物能够通过在施用后数(＞5)小时内维持皮肤上集落形成单位/cm²至少3.0log₁₀的减少，在使用1分钟内就可实现最高达2.0log₁₀的减少。为了实现该结果，本发明的组合物可以施用一次或者在数日内施用数次。

缩写和定义：

“无醇的”在本文中指组合物含有少于约10％重量的醇。在本发明的一些具体实施方式中，无醇也可以指组合物含有少于约5％、约2％、或约1％体积的醇。优选的，无醇是指组合物含有少于约0.5％体积的醇。最优选的，无醇意味着组合物不含醇。

“抗菌剂”和“消毒剂”在本文中指抑制生物生长，或对其杀伤的试剂，这些生物包括细菌，原生动物，病毒，蛋白酶传染性因子，酵母，真菌，或其它感染性因子，并且这些试剂在与上述试剂混合时具有提高的实体化性能，这意味着它能够透过皮肤，即使在冲洗后仍然提供长效抗菌活性。

“医护工作者”在本文中指大夫、护士、护工、麻醉师、急救人员、术前助手、术后助手等。

“无刺激性”意指符合以下特征，即接受本发明的病人不会产生红斑或更加令人痛苦的皮肤刺激形式。

“免冲洗”在本文中意指一种施加到皮肤上，留置干燥而无需水洗的产品。

实施例

实施例1.本发明的优选组合物

实施例2.术前皮肤制剂的测试

在手术或其它侵入过程前，病人的皮肤必须用外用抗菌产品(术前皮肤制剂)处理，以通过减少皮肤上微生物的数量避免医院感染。有几种可以评估抗生性皮肤组合物效力的方法。例如，TentativeFinalMonograph(TFM)forHealth-CareAntisepticDrugProducts(“健康护理抑菌药物产品的临时最终决议”(59卷116号，1994年6月17日)描述了评估此类产品的体内过程，以及预期的性能标准。当测试新产品时，在该研究中必须包括一种已确定的皮肤制剂作为阳性对照。

评估了4％无醇氯己定葡糖酸盐(CHG)组合物的单独测试样品作为病人术前皮肤制剂的抗菌效力。该评估是基于食品和药物监察局颁布的药物评估和研究中所详细说明的方法进行的。募集了至少6个人，单侧施加该产品，以确保测试产品如下表在所述的位置得到评估。

测试样品	腹股沟上评估的数量
		4％无醇氯己定葡糖酸盐组合物	6

在各个腹股沟位置评估了4％无醇氯己定葡糖酸盐(CHG)的即时抗菌效力，在施加完后30秒，10分钟±30秒和6小时±30分钟采样。所有产品的施用都是通过随机定位进行的。

A)中和：

该评估的目的是为了测定当施加到测试个体的腹股沟上时，采样液完全中和4％无醇氯己定葡糖酸盐(CHG)组合物清洁剂中所含的活性成分，而不对标示生物产生毒性的能力。中和研究中所使用的测试微生物是表皮葡萄球菌ATCC12228，一种常见的皮肤细菌。

B)方法：

测试前期：

在第一次基线采样前至少两周的时间被称作“测试前”期。在这段时间内，受试者被指示仅使用调查者提供的用于个人卫生的个人卫生产品(肥皂、沐浴液、除臭剂等)，并被告知防止与溶剂、酸和碱进行皮肤接触。受试者被禁止使用紫外线美黑灯，和用化学处理的浴池和/或热浴盆进行泡浴。另外，受试者在采样前四十八小时内不能泡澡或淋浴。他们可以使用海绵擦拭，但是不能碰受试区域。

受试者在用4％无醇氯己定葡糖酸盐(CHG)组合物处理前5天内不得剃除解剖位置上的体毛。该方案能够使得皮肤上的正常微生物菌群稳定。

基线周：

测试前期后的一周构成基线周。受试者在采样后48小时内不得淋浴。所有受试者在用4％无醇氯己定葡糖酸盐(CHG)组合物处理前至少72小时采样，以筛选基线。

收集了来自两个腹股沟对侧位置的样品。根据基于对侧腹股沟位置的准确筛选基线，受试者够资格继续研究。筛选计数的接受条件是在腹股沟区域对侧位置有至少1.0x10⁵个集落形成单位/cm²。在处理日处理前，从每个测试区域使用筛选基线用的相同标准收集第二和最终基线样品。

如果处理后计数数据是从不能在第二基线采样时显示足够的细菌水平(在腹股沟区域对侧位置上1.0x10⁵集落形成单位/cm²)从而实现在腹股沟区域位置上3.0log₁₀的减少的数据的任何区域得来的，那么它们必须从数据分析中被排除。

下表总结了测试位置的最小基线标准，以及FDA规定的最小有效log₁₀减少标准。

解剖位置	最小基线	最小log₁₀下降
			腹股沟	1.0x 10⁵CFU/cm²	10分钟时3.0log₁₀

在测试日前至少48小时对于所有需要剃毛(clipping)的测试位置进行剃毛。

所有采样用柱状体采样(cylindersampling)技术进行。

测试期：

在采样前，受试者被询问有关他们是否遵循实验方案限制。肉眼再次检查受试者(由技术人员)的解剖采样位置，以确保不存在任何损伤或皮肤病。

随机化：根据计算机产生的随机化方案，在每个受试者腹股沟区域的测试区域划线，以在一侧接受4％无醇氯己定葡糖酸盐(CHG)组合物。在左侧和右侧之间平衡随机化。处理日基线和准备后采样位点在各测试区域内随机化。

盲化：由于产品中显著的不同，4％无醇氯己定葡糖酸盐(CHG)组合物不能使得调查者盲化。处理受试者的调查者不参与细菌计数和清点特定个体的培养皿。

每个处理区域的大小为2”x5”，位于腹股沟韧带下方的大腿上/内侧。在各处理区域中划分4个取样位置。基于先前的设计，对腹股沟区进行最终基线(第二基线)采样。用4％无醇氯己定葡糖酸盐(CHG)组合物对合适的区域进行准备。然后在30秒，10分钟±30秒，和6小时±30分钟对这些位置进行采样。

对于6小时±30分钟的位置，将无菌纱布垫覆盖在准备好的区域上，以协助防止微生物污染。纱布垫是用闭合无菌敷料固定在原位的。用柱状体采样技术从位置上采集所有样品。

微生物学方法：

样品采集：

用Williamson和Kligman(J.Invest.Dermatol.45：498-503，1965)柱状体采样技术的改良方法获得定量培养物。将无菌洗擦杯(scrubbingcup)(3.8cm²，内部面积，高约2.54cm)牢固地置于皮肤上，覆盖要采样的区域。将3ml含有中和剂的洗擦溶液置于杯中，用无菌橡胶“警察(policeman)”温和压迫洗擦一分钟该区域。吸出洗擦溶液，用3.0ml新鲜溶液替换，重新洗擦。合并两个等份。这些过程用于所有的基线样品和处理样品。合并的洗擦溶液的等份用含有中和剂的布特菲尔德氏(Butterfield’s)磷酸盐缓冲稀释水作为稀释剂，以10倍稀释步骤(10-foldsteps)进行。

微生物计数：

在采样后30分钟内，将1ml等份的合适稀释液一式两份置于15-20ml大豆-酪蛋白消化琼脂倾注平皿中，该平皿含有合适的中和剂。30±2℃好氧培养72±4小时后，对集落进行计数，并且基于CountingColoniesonPlatesandReportingResults，StandardMethodsForEvaluationofDairyProducts(“平皿集落计数和报道结果，评估乳制品的标准方法”，第14版，美国公众健康协会，华盛顿特区)的方法计算原始样品中的活细胞。在计数前冷藏保存平皿最长达48小时。测定和报道每平方厘米上回收的微生物的平均数量。

为了将收集到的样品体积转换成集落形成单位/cm²皮肤，使用下列公式：

R = \log_{10} [\frac{F (\frac{{Σc}_{1}}{n}) 10^{- D}}{A}]

其中

R＝平均集落形成单位，以每平方厘米皮肤上的log₁₀对数计

F＝加到采样柱状体上的剥离液总毫升数；F＝6.0ml

c/n＝收集的每个样品所用的两份集落计数的平均数

D＝计数的平皿的稀释系数

A＝采样柱状体的内面积(3.8cm²)

生长促进对照：

对于每批铺板的培养基，使用含0.5％聚山梨酸酯80和0.07％卵磷脂的大豆-酪蛋白消化琼脂(或等价物)，在每个倾注平皿中接种小于100个集落形成单位的表皮葡萄球菌ATCC12228。用稀释液系列稀释陈化20-26小时的表皮葡萄球菌培养物。加入的集落形成单位通过一式两份的涂布平板验证。平皿在30±2℃培养72±4小时。

不良事件：

记录所有不良事件，无论其严重程度或者因/果关系。效果的严重程度被记录为“轻度”，意味着注意到迹象或者症状，但是容易忍受；“中度”意味着达到一定程度的不适，导致影响日常活动和/或需要药物治疗；和“重度”，意味着不能工作或进行日常活动，需要医护/干涉。

不良事件/体验的原因关系：

当确定与4％无醇氯己定葡糖酸盐(CHG)组合物的因果关系时，将关系描述成“无”，“可能”，“很可能”或“绝对”。使用了下列定义：

严重不良事件/体验：

严重不良事件/体验是在任何剂量下发生的任何不良体验，其导致以下任意结果：死亡；危及生命的不良药物体验；住院病人住院或者延长住院时间；持续或严重的劳动能力丧失/无行为能力；和先天畸形/先天缺损。

未预期的不良事件/体验：

未预期的不良事件/体验是任何没有在上面描述过的不良药物事件/体验。

随访：

如果发生不良事件/体验，受试者将被送到最近的紧急医护设施进行治疗。严重或未预期的药物事件/体验将随后得到解决。在不良事件报告上记录任何不良事件。

预期的反应：

与该测试有关的危险主要是与使用4％无醇氯己定葡糖酸盐(CHG)组合物有关。也可能是胶带反应。可能会发生轻度到重度红斑，肿胀，瘙痒，皲裂，脱屑，或在少见的情况下发生发疱或过敏反应。任何这些事件的发生都被认为是“不良事件”，并记录在研究报告中。

数据分析：

下面描述的分析是在产生的数据的基础上进行的。原始数据(集落形成单位/ml)被转换成log₁₀集落形成单位/cm²。将小于1集落形成单位/cm²的计数处理成1集落形成单位/cm²，从而使得log转化为0。通过从获得的处理日基线计数中扣除处理后的log计数计算出log减少数量级。只有在研究的处理日当天细菌水平符合最小纳入标准的受试者才被包括在分析中，除了以下：实验室事故导致污染样品。如果在一些但不是全部时间点缺少数据，将可获得的时间点的数据纳入分析。任何有缺少数据的受试者不被包括在数据分析中。缺少数据的受试者被新的受试者取代。

实施例3.4％无醇氯己定葡糖酸盐组合物的准备技术

用4％无醇氯己定葡糖酸盐(CHG)组合物根据下列步骤准备腹股沟区域：a)将5毫升4％无醇氯己定葡糖酸盐(CHG)组合物涂到无菌纱布垫上；b)将4％无醇氯己定葡糖酸盐(CHG)组合物施用到处理区域2分钟，用无菌毛巾或消毒纱布干燥该区域；和c)重复步骤a-b。接触时间从该区域第二次干燥后开始计算。

实施例4.中和剂验证程序

该评估的目的是为了确定当被加到受试者腹部时，样品溶液完全中和4％无醇氯己定葡糖酸盐(CHG)组合物清洁剂中的活性成分，而不显示对标示生物毒性的能力。

一个受试者参与了该研究。该受试者符合要进行中和验证的方案的纳入和排除标准。中和受试者不需要最低细菌计数，他/她被告知在处理日前14日内避免外用或全身性使用抗菌剂。对于该受试者，在腹部两侧涂上4％无醇氯己定葡糖酸盐组合物。

测试生物是表皮葡萄球菌ATCC12228。该培养物是从30±2℃在合适的培养基中生长的过夜(24±2小时)肉汤培养物中制备的，其含有约10⁸-10⁹个集落形成单位/ml。

过夜悬液用布特菲尔德氏磷酸缓冲水(PBW)系列稀释，实现了测试样品接种的合适浓度。

中和效力对照：a)用含有中和剂的洗擦液从腹部收集样品。记录受试者编号，进行准备的部位，在准备区域内采样的位置，和样品收集的时间；b)用无菌的2”x5”模板标记腹部测试区域；c)在标记测试区域后，用3个70％异丙醇的拭子准备各部位总共1分钟，等待该部位干燥；d)用4％无醇氯己定葡糖酸盐组合物准备该部位；e)使用刮片刮擦(tilescrub)技术，在准备后30秒，用含有中和剂的洗擦溶液收集样品；f)将每个合并的样品(约6ml)在涡旋式混合机上混合，然后将5ml转移到干净试管中。试管立刻以100-500集落形成单位/ml接种；g)接种后，将1ml等份的接种样品立即(＜1分钟)，和于30分钟(±2分钟)时使用含有中和剂的胰蛋白酶解酪蛋白大豆琼脂进行平板涂布(每块平板0.1ml等份，1ml涂布10个平皿，一式两份)。平板在30±2℃下培养48±2小时。

数量对照：将稀释的接种物加到含有5.0ml采样液(不含中和剂)的试管中，使最终接种物浓度达到约100-500集落形成单位/ml。将一式两份的1.0ml等份在接种后立即(＜1分钟)和30分钟(±2分钟)时以如上c)所述的相同方式铺板，除了使用不含中和剂的胰蛋白酶解酪蛋白大豆琼脂。

毒性对照：a)将稀释的接种物加到含有5.0ml采样液和中和剂的试管中，使最终接种物浓度达到约100-500集落形成单位/ml。将一式两份的1.0ml等份在接种后立即(＜1分钟)和30分钟(±2分钟)时以如上c)所述的相同方式铺板，除了使用含中和剂的胰蛋白酶解酪蛋白大豆琼脂；b)计数平板，计算各样品的集落形成单位/ml；c)将数据转换成对集落形成单位/ml的log₁₀；d)各样品的数据评估和回收表达成log₁₀集落形成单位/ml。

中和剂效力：如果抑菌样品的log₁₀集落形成单位/ml比起数量对照低不超过0.3log，中和剂被认为是有效的。

中和剂毒性：如果毒性对照(TC)比起数量对照样品低不超过0.3log，采样溶液被认为是无毒性的。

中和效力对照、数量对照和毒性对照确保采样溶液或程序对受试生物没有不良影响。

总结和结论

FDA的TentativeFinalMonographforHealth-CareAntisepticDrugProducts；ProposedRule(“健康护理抑菌药物产品的临时最终决议”于1994年6月17日公开在FederalRegister(联邦文件档))要求在药物施用后10分钟内集落形成单位/cm²有3.0log₁₀的减少。计数必须在6小时后不超过测试日的基线。4％无醇氯己定葡糖酸盐(CHG)组合物实现了腹股沟部位上皮肤的集落形成单位/cm²的log₁₀减少，并且在10分钟采样间隔内在腹股沟部位上超过了FDA提出的3.0log₁₀的减少的标准。采样间隔6小时时获得的集落形成单位/cm²不超过测试日的基线。

实施例5.平均Log的Log₁₀减少

实施例6.对象配置

总参与人数	10名
		通过筛选基线的总人数(在腹股沟上)	8名
未通过筛选基线的总人数(在腹股沟上)	2名
		处理总人数	8名
通过处理基线总人数(在腹股沟上)	6名
		未通过处理基线总人数(在腹股沟上)	2名

实施例7.在24小时接触的过程中，用于测定一种测试产品的刺激性的评估

该评估的目的是为了确定24小时贴片接触受试人皮肤后，4％无醇氯己定葡糖酸盐(CHG)组合物的潜在刺激/低变应原性。用21名志愿的受试人在24小时攻击期内测定4％无醇氯己定葡糖酸盐(CHG)组合物的潜在刺激性。直接将4％无醇氯己定葡糖酸盐(CHG)组合物涂在上臂内侧表面。在涂用产品之前和涂用4％无醇氯己定葡糖酸盐(CHG)组合物24小时后肉眼观察测试部位。

纳入标准：

接受至少18岁的足够数量的明显健康的受试者参与研究，以确保21名受试者完成该研究。在可能的范围内，选择的受试者组是混合性别，年龄和种族的。受试者上臂内侧的皮肤没有临床上明显的皮肤病、损伤、开放性创伤、纹身和/或其它可能影响受试者和研究的异常。

排除标准：

受试者在24小时测试期内不准使用美黑床，或浸泡在游泳池或澡盆中，淋浴，或者洗涤测试部位。使用外用药或者已知对墨水、乳胶、常用化妆品、异丙醇、或氯己定葡糖酸盐过敏或敏感的受试者被排除。如果任何受试者具有生理病况，例如正患有或最近患过严重疾病、哮喘、糖尿病、肝炎、癌症，或任何免疫受损病况，例如AIDS(或HIV阳性)的，他们也被排除。任何妊娠、活跃皮疹、皮炎、使用药物传递贴片、任何医学状况，在调查者看来应当被排除不参与的，还有任何的违背意愿的情形，都是排除的基础。

测试期：

所有肉眼评估都是由受过训练的评估人进行的。肉眼评估受试者的测试部位作为基线。将约25μl4％无醇氯己定葡糖酸盐(CHG)组合物直接涂到0.25平方英寸的部位上(一边为0.5英寸)，随机分布在上臂内侧皮肤上。让4％无醇氯己定葡糖酸盐(CHG)组合物在皮肤上至少干燥15分钟，然后如需要用纸巾拍干。用无菌皮肤标记笔标记部位，如果部位不明显的话。

让受试者离开实验室。在离开实验室之前，指示受试者在24小时测试期内不要进行日光浴，使用美黑床，泡在游泳池或浴缸中，淋浴，或洗涤测试部位。施用产品后24小时±1小时，受试者回到实验室，对测试部位进行刺激迹象的评分。

在产品施用和施用产品24小时后进行肉眼评估，测试部位根据实施例8提供的描述进行分级。任何接触的部位评分为6或7的都被认为是不良事件。

实施例8.皮肤状况目测评估的分级标准

级别	描述
		0	无刺激证据
1	微小的红斑，几乎不可辨
		2	清晰红斑，轻易可辨；轻微肿胀或轻微的丘疹反应
3	红斑和丘疹
		4	清晰的浮肿
5	红斑，浮肿和丘疹
		6^*	血管破裂
7^*	扩散到测试部位以外的强烈反应

*被认为是不良事件

在最终肉眼评估后，用肥皂和水和/或70％异丙醇洗涤测试部位。

总结和结论

该研究的初步结果表明，4％无醇氯己定葡糖酸盐(CHG)组合物在单个24小时贴片接触皮肤期间，不导致刺激或引起低变应原反应。全部21个病人的级别为0，表示没有刺激证据。

所有在本申请中提到的专利、专利申请和出版物以当专利、专利申请和出版物被单独提到时相同的程度，为了所有的目的在此完整引入以供参考。

虽然在上面已经详细描述了一些实施方式和实施例，本领域一般技术人员能够清楚地明白，在实施方式和实施例中可以有许多改动，而不违背其教导。所有这些改动都包含在本发明的权利要求范围内。

Claims

1.一种无醇水性皮肤消毒组合物，其特征在于，在水基基质中含有氯己定葡糖酸盐、环戊硅氧烷-C_30-45烷基鲸蜡硬脂基二甲基硅油交联聚合物和甘油，所述氯己定葡糖酸盐以水基基质中2-6％的重量/重量比存在，所述环戊硅氧烷-C_30-45烷基鲸蜡硬脂基二甲基硅油交联聚合物在水基介质中以小于0.1％重量/重量比存在，和所述甘油以水基基质中少于1％的重量/重量比存在。

2.如权利要求1所述的组合物，其特征在于，氯己定葡糖酸盐以水基基质中4％的重量/重量比存在。

3.如权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述组合物还包含选自：聚二甲基硅氧烷聚合物，聚二甲基硅氧烷中的聚二甲基硅氧烷醇液，环甲基硅酮和聚二甲基硅氧烷共聚物，和硅氧烷二醇的硅聚合物。

4.如权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述环戊硅氧烷-C_30-45烷基鲸蜡硬脂基二甲基硅油交联聚合物以水基基质中0.01％的重量/重量比存在。

5.如权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述组合物还包含选自：丙二醇、甘油醛、二羟丙酮、1，3-丁二醇、2，3-丁二醇、赤藓醇、赤藓糖、赤藓酮糖、核糖、山梨醇、甘露醇和肌醇的锚定剂。

6.如权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述甘油以水基基质中0.25％的重量/重量比存在。

7.如权利要求1-6任一所述的组合物，其特征在于，其还含有着色添加剂或香料添加剂。

8.如权利要求1-6任一所述的组合物，其特征在于，其是免洗产品。

9.一种非治疗性消毒皮肤的方法，其特征在于，所述方法包括：对病人皮肤施涂权利要求1所述的皮肤消毒组合物，其中所述组合物在水基基质中含有氯己定葡糖酸盐、环戊硅氧烷-C_30-45烷基鲸蜡硬脂基二甲基硅油交联聚合物和甘油。

10.如权利要求9所述的方法，其特征在于，所述组合物用作免洗产品。

11.如权利要求9所述的方法，其特征在于，所述组合物可任选的冲洗掉。

12.一种术前无醇水性皮肤消毒组合物，其特征在于，在水基基质中含有氯己定葡糖酸盐、环戊硅氧烷-C_30-45烷基鲸蜡硬脂基二甲基硅油交联聚合物和甘油，所述氯己定葡糖酸盐以水基基质中2-6％的重量/重量比存在，所述环戊硅氧烷-C_30-45烷基鲸蜡硬脂基二甲基硅油交联聚合物以在水基介质中小于0.1％重量/重量比存在，和所述甘油以水基基质中少于1％的重量/重量比存在，其中所述组合物在与皮肤接触4分钟后导致细菌减少至少3个log级别。

13.一种无醇水性洗手消毒组合物，其特征在于，在水基基质中含有氯己定葡糖酸盐、环戊硅氧烷-C_30-45烷基鲸蜡硬脂基二甲基硅油交联聚合物和甘油，所述氯己定葡糖酸盐以水基基质中2-6％的重量/重量比存在，所述环戊硅氧烷-C_30-45烷基鲸蜡硬脂基二甲基硅油交联聚合物以在水基介质中小于0.1％重量/重量比存在，和所述甘油以水基基质中少于1％的重量/重量比存在，其中所述组合物在第一次洗涤后5分钟内导致指标性生物减少至少2个log级别。

14.如权利要求13所述的组合物，其特征在于，所述指标性生物选自：大肠杆菌(Escherichiacoli)、表皮葡萄球菌(Staphylococcusepidermidis)、屎肠球菌(Enterococcusfaecium)、粪肠球菌(Enterococcusfaecalis)、铜绿假单胞菌(Pseudomonasaeuruginosa)、粘质沙雷氏菌(Serratiamarcescens)、白色念珠菌(Candidaalbicans)、艰难念珠菌(Candidadifficile)。

15.如权利要求13所述的组合物，其特征在于，所述组合物在第10次洗涤后5分钟内导致一种指标性生物减少至少3个log级别。

16.如权利要求15所述的组合物，其特征在于，所述指标性生物选自：大肠杆菌、表皮葡萄球菌、屎肠球菌、粪肠球菌、铜绿假单胞菌、粘质沙雷氏菌、白色念珠菌、艰难念珠菌。

17.一种无醇水性手术手部洗擦消毒组合物，其特征在于，在水基基质中含有氯己定葡糖酸盐、环戊硅氧烷-C_30-45烷基鲸蜡硬脂基二甲基硅油交联聚合物和甘油，所述氯己定葡糖酸盐以水基基质中2-6％的重量/重量比存在，所述环戊硅氧烷-C_30-45烷基鲸蜡硬脂基二甲基硅油交联聚合物以在水基介质中小于0.1％重量/重量比存在，和所述甘油以水基基质中少于1％的重量/重量比存在，其中所述组合物在第一日1分钟内导致手部微生物菌群减少至少1个log级别。

18.如权利要求17所述的组合物，其特征在于，所述组合物在第二日1分钟内导致手部微生物菌群减少至少2个log级别。

19.如权利要求17所述的组合物，其特征在于，所述组合物在第五日终时，1分钟内导致手部微生物菌群减少至少3个log级别。

20.如权利要求17所述的组合物，其特征在于，所述组合物在第一日至少6小时内导致手部细菌生长抑制。

21.一种在手术前非治疗性消毒皮肤的方法，其特征在于，所述方法包括：在皮肤上施用无醇水性消毒组合物，其中所述组合物在水基基质中含有氯己定葡糖酸盐、环戊硅氧烷-C_30-45烷基鲸蜡硬脂基二甲基硅油交联聚合物和甘油，所述氯己定葡糖酸盐以水基基质中2-6％的重量/重量比存在，所述环戊硅氧烷-C_30-45烷基鲸蜡硬脂基二甲基硅油交联聚合物以在水基介质中小于0.1％重量/重量比存在，和所述甘油以水基基质中少于1％的重量/重量比存在。

22.一种通过施用无醇水性消毒组合物非治疗性消毒双手的方法，其特征在于，所述组合物在水基基质中含有氯己定葡糖酸盐、环戊硅氧烷-C_30-45烷基鲸蜡硬脂基二甲基硅油交联聚合物和甘油，所述氯己定葡糖酸盐以水基基质中2-6％的重量/重量比存在，所述环戊硅氧烷-C_30-45烷基鲸蜡硬脂基二甲基硅油交联聚合物以在水基介质中小于0.1％重量/重量比存在，和所述甘油以水基基质中少于1％的重量/重量比存在，其中所述组合物在第一次洗涤后5分钟内导致指标性生物减少至少2个log级别。

23.如权利要求22所述的方法，其特征在于，所述指标性生物选自：大肠杆菌、表皮葡萄球菌、屎肠球菌、粪肠球菌、铜绿假单胞菌、粘质沙雷氏菌、白色念珠菌、艰难念珠菌。

24.如权利要求22所述的方法，其特征在于，所述组合物在第10次洗涤后5分钟内导致指标性生物减少至少3个log级别。

25.如权利要求23所述的方法，其特征在于，所述指标性生物选自：大肠杆菌、表皮葡萄球菌、屎肠球菌、粪肠球菌、铜绿假单胞菌、粘质沙雷氏菌、白色念珠菌、艰难念珠菌。

26.一种在医护人员参与手术过程前非治疗性消毒医护人员双手的方法，其特征在于，所述方法包括施用无醇水性消毒组合物，所述组合物在水基基质中含有氯己定葡糖酸盐、环戊硅氧烷-C_30-45烷基鲸蜡硬脂基二甲基硅油交联聚合物和甘油，所述氯己定葡糖酸盐以水基基质中2-6％的重量/重量比存在，所述环戊硅氧烷-C_30-45烷基鲸蜡硬脂基二甲基硅油交联聚合物以在水基介质中小于0.1％重量/重量比存在，和所述甘油以水基基质中少于1％的重量/重量比存在，其中所述组合物在第一日1分钟内导致手部微生物菌群减少至少1个log级别。

27.如权利要求26所述的方法，所述组合物在第二日1分钟内导致手部微生物菌群减少至少2个log级别。

28.如权利要求26所述的方法，其特征在于，所述组合物在第五日终时，1分钟内导致手部微生物菌群减少至少3个log级别。

29.如权利要求26所述的方法，其特征在于，所述组合物在第一日至少6小时内导致手部细菌生长抑制。