CN102146348A - 一株产高丝氨酸内酯的乙酸钙不动杆菌及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明从高等植物植株上分离得到的乙酸钙不动杆菌A.calcoaceticus WA465，可以产高丝氨酸内酯，利用群体密度调控的机理防治植物病害，提供一种全新的生防剂，增加了微生物农药的剂型。该菌株附生于高等植物植株，因而施用过程中可以根好的在植物表面定殖，表现出良好的稳定性和防治效果的延续性，在植物病害防治上具有很好的应用前景。
Description
技术领域：
本发明涉及生物技术领域，具体涉及高等植物叶际产高丝氨酸内酯的乙酸钙不动杆菌及其在生物防治领域中的应用。
背景技术：
在现代农业生产中大量施用化学农药等手段防止植物病害的做法，已经造成严重的环境污染，以及随之产生的生态风险足以引起人们的关注。食品蔬菜的高农药残留严重影响到人的健康，另外大量残余农药的面源污染造成严重的链式反应，带来的生态环境污染是不可低估的。对有害生物进行可持续控制和无公害治理已日益受到人们的关注，并成为一个活跃的研究领域，为发展可持续农业奠定基础。
抗病害的转基因植物的改造在一定程度上减少了对化学农药的依赖，减少了化学农药的环境污染。尽管有些转基因作物已经进入大田试验并逐步进入大规模商业化，但多数国家和政府还是持较为谨慎的态度。在我国尽管批准了个别的转基因作物的种植，但转基因作物的生态风险，如：基因的横向转移、生物多样性的变化、转基因作物的蔓延等一些问题，值得引起人们足够的重视。
微生物农药是另一种控制植物等病害的有效方式之一，由于微生物农药具有一定的环境效益和社会效益，各国政府持积极的支持态度，我国在控制植物病害的微生物资源开发、做生物农药种类、生产技术和规模，特别是推广应用方面已跻身世界先进水平。然而在微生物农药的剂型和质量上，我们同国外相比尚有一定的差距，特别是在新型生物防治产品研制领域几乎是空白。
发明内容：
本发明的目的是提供新型的植物病害防治方法，以及相关的微生物资源，本发明的另一目的是公开该微生物资源的应用。
本发明所述的乙酸钙不动杆菌(Acinetobacter calcoaceticus)，该菌分离来自于烟草植物叶片，系烟草叶际微生物。细菌菌落呈圆形，浅黄色，不透明，表面光滑。该菌经16S rDNA基因序列同源性分析鉴定为变形杆菌门γ变形杆菌纲不动杆菌属(Acinetobacter calcoaceticus)，命名为A.calcoaceticus WA465。该菌的最适生长温度在25～30℃，最适生长pH 6～8，生长过程中无需额外添加生长因子等。该菌可以产中长链的高丝氨酸内酯，对于依赖群体密度感应信号分子高丝氨酸内酯调控的植物病害微生物，具有干扰其毒力因子分泌和控制病害微生物的功能。
本发明从高等植物植株上分离得到的乙酸钙不动杆菌A.calcoaceticus WA465，可以产高丝氨酸内酯，利用群体密度调控的机理防治植物病害，提供一种全新的生防剂，增加了微生物农药的剂型。该菌株附生于高等植物植株，因而施用过程中可以很好的在植物表面定殖，表现出良好的稳定性和防治效果的延续性。
具体实施方式：
以下将将结合具体实施例对本发明作进步的说明，目的在于帮助读者更好的理解本发明的精神实质，但不作为对本发明实施范围的限定。
实施例1本发明所述的乙酸钙不动杆菌A.calcoaceticus WA465的分离：
称取20g烟草叶片到100ml的生理盐水中，超声波振荡清洗5miin，150r/min振荡20min，取菌液0.1ml涂布含有新鲜烟草抽提物的LB固体培养基(T-LB)，25℃避光倒置培养2～3天。对菌落进行多次划线纯化，并记录菌落形态等参数。
T-LB培养基(1000ml)：蛋白胨100g，酵母浸粉50g，氯化钠50g，新鲜烟草叶片无菌研磨后叶汁无菌过滤10ml。
实施例2本发明所述的乙酸钙不动杆菌A.calcoaceticus WA465在实验室条件下对烟草野火病害的防治：
将平板上乙酸钙不动杆菌A.calcoaceticus WA465的单菌落接种至LB液体培养基中，30℃，200r/min过夜培养，菌体浓度可达109个/ml。制备成菌悬液喷洒在烟草叶片上，自然晾干1h。按照常规植物病原菌接种方法，接种不同浓度的丁香假单胞菌(Pseudomonas syringae pv.tabaci)，每个处理3个重复，接种后间隔1天记录发病情况。实验结果表明，接种丁香假单胞菌3天后，103个/ml浓度的接种剂量已经导致对照组烟草产生病变，当接种剂量为105个/ml浓度时已经引起对照组烟草产生强烈的病变。而对于喷洒了生防菌乙酸钙不动杆菌A.calcoaceticus WA465的实验组烟草，当丁香假单胞菌的接种量在107个/ml浓度时烟草表现出微弱的病变。实验结果表明，生防菌乙酸钙不动杆菌A.calcoaceticus WA465对丁香假单菌的防治效果明显。
Claims (3)
1.一株产高丝氨酸内酯的乙酸钙不动杆菌A.calcoaceticus WA465，其特征在于，所述菌株系叶际微生物。
2.根据权利要求1所述的菌株，其特征在于产高丝氨酸内酯。
3.根据权利要求1所述的菌株在植物病害防治方面的应用。
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2010
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