CN102127091A - 含有杂环的希夫碱化合物 - Google Patents

Abstract

本发明属于抗肿瘤作用药物技术领域，提供具有式I结构的一类含有杂环的希夫碱化合物及其药学上可接受的盐，其中R¹，R²，R³定义见说明书所述。本发明还涉及上述化合物的制备方法，并同时公开了以该化合物或其药学上可接受的盐作为活性有效成分的药物组合物，以及它们在作为抗肿瘤药物方面的应用。

Description

含有杂环的希夫碱化合物

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体而言，本发明涉及一类具有抗肿瘤活性的希夫碱(schiff)类化合物、制备方法、组合物及其用途。

背景技术

肿瘤是严重威胁人类生命的常见病和多发病之一，病死率居第二位。全球癌症病人肿瘤的治疗在很大程度上依赖于抗肿瘤药物的开发。

近年来，分子肿瘤学、分子药理学的发展使肿瘤本质正在逐步阐明；大规模快速筛选、组合化学、基因工程等先进技术的发明和应用加速了药物开发进程；抗肿瘤药物的研究开发已进入一个崭新的时代。当今抗肿瘤的药物发展战略有以下几点：(1)以占恶性肿瘤90％以上的实体瘤为主攻对象；(2)从天然产物中寻找活性成分；(3)针对肿瘤发生发展的机制，寻找新的分子作用(酶、受体、基因)靶点；(4)大规模快速筛选；(5)新技术的导入和应用：组合化学、结构生物学、计算机辅助设计、基因工程、DNA芯片、药物基因组学等。

抗肿瘤药物正从传统的细胞毒性药物，向针对机制的多环节作用的新型抗肿瘤药物发展，目前国外关注的抗肿瘤作用的新靶点和相应的新型抗肿瘤或手段有：(1)以细胞信号转导分子为靶点；包括蛋白酪氨酸激酶抑制剂、法尼基转移酶抑制剂、MAPK信号转导通路抑制剂、细胞周期调控剂；(2)以新生血管为靶点：新生血管生成抑制剂；(3)减少癌细胞脱落、粘附和基底膜降解：抗转移药；(4)以端粒酶为靶点：端粒酶抑制剂；(5)针对肿瘤细胞耐药性：耐药逆转剂；(6)促进恶性细胞向成熟分化：分化诱导剂；(7)特异性杀伤癌细胞：(抗体和毒素)导向治疗；(8)增强放疗和化疗的疗效：肿瘤治疗增敏剂；(9)提高和调节机体免疫功能：生物反应调节剂；(10)针对癌基因和抑癌基因：基因治疗——导入野生型抑癌基因、自杀基因、抗耐药基因及反义寡核苷酸、肿瘤基因工程瘤菌。

尽管肿瘤的化学治疗已取得重大进展，新的抗肿瘤药物不断出现，但肿瘤的化学治疗仍然存在着许多问题：(1)实体瘤占恶性肿瘤的90％，但多数实体瘤如肺癌、肝癌、结肠癌及胰腺癌等还缺乏有效的药物；(2)现有的抗肿瘤药物毒副反应太大，缺乏选择性；(3)肿瘤易对抗肿瘤药物产生抗药性。因此，新型抗肿瘤药物的研究势在必行。

发明内容

针对上述技术问题，本发明的一个目的在于，提供一种新型含有杂环的希夫碱化合物及其药用盐，以解决现有抗肿瘤药物的不足。

本发明的另一个目的在于，提供所述含有杂环的希夫碱化合物及其药用盐的制备方法。

本发明的再一个目的在于提供以所述含有杂环的希夫碱化合物及其药用盐为主要活性成分的药物组合物。

本发明还有一个目的在于提供所述含有杂环的希夫碱化合物及其药用盐在作为抗肿瘤药物方面的用途。

为了实现上述目的，本发明采取的技术方案如下：

一方面，本发明提供一种式I所示的化合物或其药学上可接受的盐：

其中：

R¹，R²独立地为

1)氢、C₁-C₆直链或支链烷基、C₃-C₆环烷基，该烷基或环烷基被下列一个或多个基团取代：卤素、羟基、羧基、氨基、酰胺基、氰基、硝基、C₁-C₄烷氧基；

2)卤素、羟基、羧基、氨基、酰胺基、氰基、硝基、苯基、C₁-C₄烷氧基、苯氧基、甲硫基；

3)五元六元杂环基；

R³为取代的亚胺基，其取代基为

1)氢、C₁-C₆直链或支链烷基；

2)含0、N、S的五元或六元环杂环基，该杂环基被下列一个或多个基团取代：C₁-C₆直链或支链烷基、C₃-C₆环烷基、卤素、羟基、羧基、氨基、酰胺基、氰基、硝基、苯基、C₁-C₄烷氧基。

其中，优选地，R¹，R²独立地为氢、甲基、乙基、丙基、环己基、氯甲基、三氟甲基、溴乙基、氯丙基、氟、氯、溴、二甲氨基、苯氧基、硝基、腈基、羧基、咪唑基、呋喃基、噻吩基、吡啶基、甲硫基；R³的取代基团为：氢、甲基、乙基、取代吡啶基、取代噻吩基、取代四氢吡喃基、取代四氢呋喃基、取代吡咯基、取代哌啶基、取代吡喃基、取代四氢噻吩基。

具体而言，式I所示的化合物可以为：

在上述的化合物或其药学上可接受的盐中，所述药学上可接受的盐优选为式I所示的化合物与无机酸和/或有机酸所成的盐；

进一步优选地，所述盐为盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐、磷酸盐、磷酸氢盐、乙酸盐、丙酸盐、丁酸盐、乳酸盐、甲磺酸盐、对甲苯磺酸盐、马来酸盐、苯甲酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、柠檬酸盐、富马酸盐、牛磺酸盐、葡萄糖酸盐等药学上可接受的盐。

可选地，所述药学上可接受的盐为式I所示的化合物与碱金属、碱土金属的氧化物和/或氢氧化物所成的盐；

所述盐优选为钠盐、钾盐、钙盐、镁盐。

另一方面，本发明提供上述化合物或其药学上可接受的盐的制备方法，所述方法包括以下步骤：

1.以苯甲醛类化合物(1)为起始原料，在相转移催化剂如氯化苄基三乙胺、四丁基溴化铵、三辛基甲基氯化铵、季铵碱等存在下，溶于三氯甲烷或三溴甲烷中，于KOH等碱性环境下，-20～120℃反应制得α-羟基苯乙酸类化合物(2)，并进一步酯化得(3)；

2.单取代或多取代的五元或六元杂环的醛或酮与水合肼在无水甲醇、无水乙醇、二氯甲烷、甲苯、DMF、四氢呋喃等溶剂中，在冰乙酸、三乙胺、氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸氢钠、碳酸钠等催化下回流反应制得schiff碱类化合物(4)；

3.(3)和(4)在甲醇、乙醇、甲苯、DMF、DMSO等溶剂中，在催化剂如醋酸锌、醋酸铵、甲醇钠、氧化 铅等存在下，-5～200℃反应制得(5)，(5)与磺酰氯在二氯甲烷、三氯甲烷、甲苯、乙醇、乙腈等溶剂中，-10～120℃下反应制得(6)；

4.(6)和(7)在吡啶、N，N-二异丙基乙胺、三乙胺、碳酸钾、碳酸钠、氢氧化钾、氢氧化钠、碳酸氢钠等缚酸剂存在下，在甲醇、乙醇、二氯甲烷、三氯甲烷、乙腈、DMF、DMSO等溶剂中，0～120℃反应制得目标化合物I。

其中各取代基如上述所定义。

将反应制得各种中间体或所得产物溶于乙醚、DMF、丙酮、甲醇、乙醇、乙酸乙酯或DMSO中的一种，滴加无机酸或有机酸的溶液，制成药学上可接受的盐。

具体是将各种化合物溶于乙醚、DMF、丙酮、甲醇、乙醇、乙酸乙酯或DMSO中的一种，于冰水浴下滴加盐酸乙醚溶液至pH＝2，制成盐酸盐；或将各种化合物溶于乙醚、DMF、丙酮、甲醇、乙醇、乙酸乙酯或DMSO中的一种，加入等摩尔牛磺酸，加热搅拌得其牛磺酸盐；抑或将各种化合物溶于乙醚、DMF、丙酮、甲醇、乙醇、乙酸乙酯或DMSO中的一种，于冰水浴下滴加浓氢氧化钾水溶液至pH＝9，制成钾盐，等等。

再一方面，本发明还提供一种药物组合物，其包含治疗有效量的上述化合物或其药学上可接受的盐。

优选地，所述药物组合物还包含一种或多种药学上可接受的辅料；并且所述药物组合物可以为片剂、分散片、肠溶片、咀嚼片、口崩片、胶囊、糖衣剂、颗粒剂、干粉剂、口服溶液剂、注射用小针、注射用冻干粉针或大输液。

本发明化合物的药物组合物制备方法如下：使用标准和常规的技术，使本发明化合物与制剂学上可接受的固体或液体载体结合，以及使之任意地与制剂学上可接受的辅助剂和赋形剂结合制备成微粒或微球。固体剂型包括片剂、分散颗粒、胶囊、缓释片、缓释微丸等等。固体载体可以是至少一种物质，其可以充当稀释剂、香味剂、增溶剂、润滑剂、悬浮剂、粘合剂、崩解剂以及包裹剂。惰性固体载体包括磷酸镁、硬脂酸镁、滑粉糖、乳糖、果胶、丙二醇、聚山梨酯80、糊精、淀粉、明胶、纤维素类物质例如甲基纤维素、微晶纤维素、低熔点石蜡、聚乙二醇、甘露醇、可可脂等。液体剂型包括溶剂、悬浮液例如注射剂、粉剂等等。

此类化合物对于治疗人类因肿瘤引起的疾病是有效的。尽管本发明的化合物可以不经任何配制直接给药，但所述的各种化合物优选以药物制剂的形式使用，给药途径可以是非肠道途径(如静脉、肌肉给药)及 口服给药。

药物组合物以及单元剂型中含有的活性成份(本发明化合物)的量可以根据患者的病情、医生诊断的情况特定地加以应用，所用的化合物的量或浓度在一个较宽的范围内调节。通常，活性化合物的量范围为组合物的0.5％～90％(重量)，另一优选的范围为0.5％～70％。

又一方面，本发明还提供上述化合物及其药学上可接受的盐在制备抗肿瘤药物中的用途。

与现有技术相比，本发明提供了一类具有式I结构的新型含有杂环的希夫碱化合物或其药学上可接受的盐，这类化合物及其盐对肿瘤具有明显的抑制作用，可用作抗肿瘤药物中的活性成分。

具体实施方式

下面结合具体的实施例进一步详细描述本发明。应理解，这些实施例只是为了举例说明本发明，而非以任何方式限制发明的范围。

在以下的实施例中，未详细描述的各种过程和方法是本领域中公知的常规方法。所用试剂未标明来源、规格的均为市售分析纯或化学纯。

所述的化合物经高效液相色谱(HPLC)，薄层色谱(TLC)进行检测。随后采用诸如红外光谱(IR)，核磁共振谱(¹H NMR，¹³C NMR)，质谱(MS)等更进一步确证其结构。

实施例1：中间体(2a)的制备

向三口烧瓶中加入0.025mol对氟苯甲醛，30mL三溴甲烷，适量氯化苄基三乙铵，搅拌均匀，升温至50℃搅拌15min，滴加含0.028mol氢氧化钾的水溶液，滴毕，继续反应8h，硅胶板控制反应进程。反应完全后用1mol/L稀盐酸调pH约为3，用乙酸乙酯萃取(30mL×3)，取乙酸乙酯层无水硫酸钠干燥，过滤蒸干。残余物用硅胶柱层析分离得到(2a)，白色粉末(HPLC：98.3％)，收率53.1％。Rf＝0.36[单点，展开剂：v(三氯甲烷)∶v(甲醇)＝3∶1]。m.p.128.6～129.3℃，EI-MS m/z(％)：170.0(M⁺)。

实施例2：中间体(2b)的制备

向三口烧瓶中加入0.025mol 4二甲氨基苯甲醛，30mL三氯甲烷，适量四丁基溴化铵，搅拌均匀，升温至50℃搅拌15min，滴加含0.03mol碳酸钾的水溶液，滴毕，继续反应8h，硅胶板控制反应进程。反应完全后用1mol/L稀盐酸调pH约为3，用乙酸乙酯萃取(30mL×3)，取乙酸乙酯层用无水硫酸钠干燥，过滤蒸干。残余物用硅胶柱层析分离得到(2b)，白色粉末(HPLC：99.0％)，收率67.2％。Rf＝0.38[单点，展开剂：v(三氯甲烷)∶v(甲醇)＝3∶1]。m.p.157.0～158.2℃，EI-MS m/z(％)：195.1(M⁺)。

实施例3：中间体(2c)的制备

向三口烧瓶中加入0.025mol 3-苯氧基苯甲醛，30mL三氯甲烷，适量三辛基甲基氯化铵，搅拌均匀，升温至70℃搅拌10min，滴加含0.028mol碳酸氢钠的水溶液，滴毕，继续反应5h，硅胶板控制反应进程。反应完全后用1mol/L稀盐酸调pH约为3，用乙酸乙酯萃取(30mL×3)，取乙酸乙酯层用无水硫酸钠干燥，过滤蒸干。残余物用硅胶柱层析分离得到(2c)，白色粉末(HPLC：97.8％)，收率56.8％。Rf＝0.41[单点，展开剂：v(三氯甲烷)∶v(甲醇)＝3∶1]。m.p.183.4～184.3℃，EI-MS m/z(％)：244.1(M⁺)。

用类似的方法制备2-羟基对硝基苯基乙酸(2d)，黄色粉末(HPLC：99.5％)，收率66.1％。Rf＝0.33[单点，展开剂：v(三氯甲烷)∶v(甲醇)＝3∶1]。m.p.194.2～195.5℃，EI-MS m/z(％)：197.0(M⁺)。

2-羟基间氰基苯基乙酸(2e)，白色粉末(HPLC：99.1％)，收率57.8％。Rf＝0.34[单点，展开剂：v(三氯甲烷)∶v(甲醇)＝3∶1]。m.p.167.2～170.0℃，EI-MS m/z(％)：177.1(M⁺)。

2-羟基对羧基苯基乙酸(2f)，白色粉末(HPLC：98.4％)，收率60.5％。Rf＝0.21[单点，展开剂：v(三氯甲烷)∶v(甲醇)＝3∶1]。m.p.98.6～99.8℃，EI-MS m/z(％)：196.1(M⁺)。

2-羟基-(2，4，6-三甲基苯基)乙酸(2g)，白色粉末(HPLC：99.3％)，收率54.9％。Rf＝0.37[单点，展开剂：v(三氯甲烷)∶v(甲醇)＝3∶1]。m.p.113.4～114.9℃，EI-MS m/z(％)：194.1(M⁺)。

2-羟基对三氟甲基苯基乙酸(2h)，浅黄色粉末(HPLC：97.5％)，收率48.9％。Rf＝0.40[单点，展开剂：v(三氯甲烷)∶v(甲醇)＝3∶1]。m.p.146.7～148.0℃，EI-MS m/z(％)：220.0(M⁺)。

2-羟基-(4-(1H-咪唑-1-基)苯基)乙酸(2i)，浅黄色粉末(HPLC：99.0％)，收率59.6％。Rf＝0.39[单点，展开剂：v(三氯甲烷)∶v(甲醇)＝3∶1]。m.p.121.9～123.4℃，EI-MS m/z(％)：218.1(M⁺)。

2-羟基对甲硫基苯基乙酸(2j)，浅黄色粉末(HPLC：99.1％)，收率53.5％。Rf＝0.41[单点，展开剂：v(三氯甲烷)∶v(甲醇)＝3∶1]。m.p.184.2～185.9℃，EI-MS m/z(％)：198.0(M⁺)。

实施例4：中间体(3a)的制备

向反应瓶中加入0.1mol α-羟基对氟苯乙酸、20mL甲醇和3mL浓硫酸，加热回流2h。停止反应，蒸干过量的甲醇，向油状剩余物中加入100mL二氯甲烷和50mL 10％碳酸钾水溶液，取二氯甲烷层用150mL水洗涤3次，分液，无水硫酸钠干燥，减压蒸干得无色油状液体(3a)，HPLC：96.4％，收率97.0％。Rf＝0.52[单 点，展开剂：v(石油醚)∶v(乙酸乙酯)＝4∶1]。

用类似的方法制备2-羟基-(4-二甲氨基苯基)乙酸甲酯(3b)，HPLC：95.4％，收率93.5％。Rf＝0.50[单点，展开剂：v(石油醚)∶v(乙酸乙酯)＝4∶1]。

2-羟基间苯氧基苯基乙酸甲酯(3c)，HPLC：97.1％，收率90.2％。Rf＝0.49[单点，展开剂：v(石油醚)∶v(乙酸乙酯)＝4∶1]。

2-羟基对硝基苯基乙酸甲酯(3d)，HPLC：98.0％，收率93.1％。Rf＝0.56[单点，展开剂：v(石油醚)∶v(乙酸乙酯)＝4∶1]。

2-羟基间氰基苯基乙酸甲酯(3e)，HPLC：95.8％，收率96.4％。Rf＝0.55[单点，展开剂：v(石油醚)∶v(乙酸乙酯)＝4∶1]。

2-羟基对羧基苯基乙酸甲酯(3f)，HPLC：90.6％，收率91.3％。Rf＝0.21[单点，展开剂：v(石油醚)∶v(乙酸乙酯)＝4∶1]。

2-羟基-(2，4，6-三甲基苯基)乙酸甲酯(3g)，HPLC：97.9％，收率98.3％。Rf＝0.59[单点，展开剂：v(石油醚)∶v(乙酸乙酯)＝4∶1]。

2-羟基对三氟甲基苯基乙酸甲酯(3h)，HPLC：92.4％，收率93.9％。Rf＝0.53[单点，展开剂：v(石油醚)∶v(乙酸乙酯)＝4∶1]。

2-羟基-(4-(1H-咪唑-1-基)苯基)乙酸甲酯(3i)，HPLC：89.6％，收率90.7％。Rf＝0.48[单点，展开剂：v(石油醚)∶v(乙酸乙酯)＝4∶1]。

2-羟基对甲硫基苯基乙酸甲酯(3j)，HPLC：93.0％，收率97.1％。Rf＝0.51[单点，展开剂：v(石油醚)∶v(乙酸乙酯)＝4∶1]。

实施例5：中间体(4a)的制备

取0.02mol的水合肼溶于30moL无水乙醇中，在不断搅拌下滴加3滴乙酸，于60℃下加入含0.02mol4乙酰基吡啶的乙醇溶液，回流反应4h。冷却，抽滤，滤饼先用无水乙醇洗涤，真空干燥得黄色固体(4a)，HPLC：98.3％，收率65.8％。Rf＝0.47[单点，展开剂：v(石油醚)∶v(乙酸乙酯)＝2∶1]。

实施例6：中间体(4b)的制备

取0.02mol的水合肼溶于30mL无水甲醇中，在不断搅拌下滴加10％氢氧化钠溶液至pH约为9～10，升温回流缓慢加入含0.05mol 3-溴-4-醛基噻吩的甲醇溶液，继续反应5h。冷却，加入适量水析出固体， 过滤，无水乙醇重结晶得亮黄色晶体(4b)，HPLC：99.2％，收率67.4％。Rf＝0.45[单点，展开剂：v(石油醚)∶v(乙酸乙酯)＝2∶1]。

实施例7：中间体(4c)的制备

取0.02mol的水合肼溶于30mL无水甲醇中，在不断搅拌下滴加几滴三乙胺至pH约为7～8，60℃下缓慢加入含0.04mol 2，6-二甲基四氢-4H-吡喃-4-酮的甲醇溶液，加热回流反应10h。冷却，蒸干溶剂，无水乙醇重结晶得黄色晶体(4c)，HPLC：92.8％，收率69.4％。Rf＝0.48[单点，展开剂：v(石油醚)∶v(乙酸乙酯)＝2∶1]。

用类似的方法制备3-吡咯基乙酮腙(4d)，HPLC：94.2％，收率63.7％。Rf＝0.43[单点，展开剂：v(石油醚)∶v(乙酸乙酯)＝2∶1]。

2-硝基-4-噻吩乙酮腙(4e)，HPLC：92.8％，收率69.1％。Rf＝0.49[单点，展开剂：v(石油醚)∶v(乙酸乙酯)＝2∶1]。

1，3-二甲基哌啶-4-酮腙(4f)，HPLC：96.7％，收率59.4％。Rf＝0.50[单点，展开剂：v(石油醚)∶v(乙酸乙酯)＝2∶1]。

4-吡啶甲醛腙(4g)，HPLC：93.1％，收率64.4％。Rf＝0.41[单点，展开剂：v(石油醚)∶v(乙酸乙酯)＝2∶1]。

2，6-二甲基-4-吡喃酮腙(4h)，HPLC：87.6％，收率66.0％。Rf＝0.43[单点，展开剂：v(石油醚)∶v(乙酸乙酯)＝2∶1]。

2-甲基四氢噻吩-3-酮腙(4i)，HPLC：92.3％，收率70.5％。Rf＝0.49[单点，展开剂：v(石油醚)∶v(乙酸乙酯)＝2∶1]。

2-腈基-4-四氢呋喃乙酮腙(4j)，HPLC：94.1％，收率67.4％。Rf＝0.53[单点，展开剂：v(石油醚)∶v(乙酸乙酯)＝2∶1]。

实施例8：中间体(5a)的制备

将含0.02mol(4a)的乙醇溶液加到250mL反应瓶中，在恒定温度下滴加含0.02mol(3a)的乙醇溶液，并加入30％的甲醇钠催化反应，滴加完毕后改成蒸馏装置，蒸除反应生成的甲醇，提高反应温度，TLC检测至反应完全。降至室温，加浓硫酸中和甲醇钠，蒸除溶剂，过硅胶柱分离的白色粉末(5a)，HPLC：99.4％， 收率67.3％。Rf＝0.58[单点，展开剂：v(石油醚)∶v(乙酸乙酯)＝3∶1]。

实施例9：中间体(5b)的制备

将0.02mol(4b)的甲苯溶液加到250ml的反应瓶中，在恒定温度下滴加中间体(3b)，在微波中火600w条件下反应30min，硅胶柱分离得黄色粉末(5b)，HPLC：99.0％，收率85.4％。Rf＝0.55[单点，展开剂：v(石油醚)∶v(乙酸乙酯)＝3∶1]。

实施例10：中间体(5c)的制备

将含0.02mol(4c)的DMF溶液加到250ml的反应瓶中，加入适量PbO，在恒定温度下滴加中间体(3c)，滴加完毕后改成蒸馏装置，将反应生成的甲醇蒸出，提高反应温度回流，TLC检测至反应完全。冷至室温抽滤，蒸除溶剂，硅胶柱分离得白色粉末(5c)，HPLC：99.2％，收率71.6％。Rf＝0.50[单点，展开剂：v(石油醚)∶v(乙酸乙酯)＝3∶1]。

类似的方法制备α-羟基对硝基苯乙酰基-3-吡咯基乙酮腙(5d)，HPLC：99.8％，收率78.5％。Rf＝0.57[单点，展开剂：v(石油醚)∶v(乙酸乙酯)＝3∶1]。

α-羟基间氰基苯乙酰基-2-硝基-4-噻吩乙酮腙(5e)，HPLC：98.8％，收率74.0％。Rf＝0.53[单点，展开剂：v(石油醚)∶v(乙酸乙酯)＝3∶1]。

α-羟基对羧基苯乙酰基-1，3-二甲基哌啶-4-酮腙(5f)，HPLC：99.8％，收率71.3％。Rf＝0.31[单点，展开剂：v(石油醚)∶v(乙酸乙酯)＝3∶1]。

α-羟基-2，4，6-三甲基苯乙酰基-4-吡啶甲醛腙(5g)，HPLC：99.6％，收率75.8％。Rf＝0.60[单点，展开剂：v(石油醚)∶v(乙酸乙酯)＝3∶1]。

α-羟基对三氟甲基苯乙酰基-2，6-二甲基-4-吡喃酮腙(5h)，HPLC：99.1％，收率68.4％。Rf＝0.59[单点，展开剂：v(石油醚)∶v(乙酸乙酯)＝3∶1]。

α-羟基-4-(1H-咪唑-1-基)苯乙酰基-2-甲基四氢噻吩-3-酮腙(5i)，HPLC：99.7％，收率75.7％。Rf＝0.57[单点，展开剂：v(石油醚)∶v(乙酸乙酯)＝3∶1]。

α-羟基对甲硫基苯乙酰基-2-腈基-4-四氢呋喃乙酮腙(5j)，HPLC：99.2％，收率70.7％。Rf＝0.59[单点，展开剂：v(石油醚)∶v(乙酸乙酯)＝3∶1]。

实施例11：中间体(6a)的制备：

向三口瓶中依次加入(5a)0.1mol、二氯甲烷40mL、三乙胺0.2mol，然后加入盐酸三甲胺0.08mol，在氮气保护下降温至0℃，搅拌下滴加苯磺酰氯0.03mol，4h后，去掉氮气保护，加浓盐酸调pH约为7，倒入100mL水中，充分搅拌后，用100mL二氯甲烷分3次萃取，取有机层蒸干得浅黄色油状液体(6a)，收率81.3％。

用类似的方法制备α-苯磺酸酯基对二甲氨基苯乙酰基-3-溴-4-噻吩醛腙(6b)，得黄色油状液体，收率79.4％。

α-苯磺酸酯基间苯氧基苯乙酰基-2，6-二甲基四氢吡喃-4-酮腙(6c)，浅黄色油状液体，收率83.4％。

α-苯磺酸酯基对硝基苯乙酰基-3-吡咯基乙酮腙(6d)，浅黄色油状液体，收率80.9％。

α-苯磺酸酯基间氰基苯乙酰基-2-硝基-4-噻吩乙酮腙(6e)，棕黄色油状液体，收率86.0％。

α-苯磺酸酯基对羧基苯乙酰基-1，3-二甲基哌啶-4-酮腙(6f)，浅黄色油状液体，收率77.4％。

α-苯磺酸酯基-2，4，6-三甲基苯乙酰基-4-吡啶甲醛腙(6g)，黄色油状液体，收率85.3％。

α-苯磺酸酯基对三氟甲基苯乙酰基-2，6-二甲基-4-吡喃酮腙(6h)，黄色油状液体，收率83.4％。

α-苯磺酸酯基-4-(1H-咪唑-1-基)苯乙酰基-2-甲基四氢噻吩-3-酮腙(6i)，黄色油状液体，收率79.6％。

α-苯磺酸酯基对甲硫基苯乙酰基-2-腈基-4-四氢呋喃乙酮腙(6j)，浅黄色油状液体，收率81.4％。

实施例12：α-(5，6，7，7a-四氢噻吩并[3，2-c]吡啶-2(4H)-酮)-4-氟苯乙酰基-4-吡啶乙酮腙(I-1)的制备

氮气保护下，将0.1mol(7)溶于50mL乙腈中，加入19.8g(0.20mol)三乙胺，加热至40℃，滴加0.11mol(6a)，保温反应3h，板层控制反应完毕，过滤除去不溶物，蒸干得棕色油状物，异丙醇重结晶得I-1浅黄色粉末，HPLC：99.3％，收率71.4％。Rf＝0.37[单点，展开剂：v(石油醚)∶v(乙酸乙酯)＝2∶1]，EI-MS m/z(％)：424.1(M⁺)。

实施例13：α-(5，6，7，7a-四氢噻吩并[3，2-c]吡啶-2(4H)-酮)-4-二甲氨基苯乙酰基-3-溴-4-噻吩醛腙(I-2)的制备

氮气保护下，将0.1mol(7)加到250mL反应瓶中，用65mL甲苯将其分散，搅拌下冷却至10℃，加入吡啶0.3mol。将0.11mol(6b)分批加入反应体系中，加毕升温至95℃继续反应2.5h(板层显示反应完全)。用3×50mL水洗涤反应液，分取甲苯层，用无水硫酸钠充分干燥，过滤，减压蒸尽甲苯，硅胶柱分离即得黄色固体产物I-2，HPLC：99.8％，收率64.4％。Rf＝0.35[单点，展开剂：v(石油醚)∶v(乙酸乙酯)＝2∶1]，EI MS m/z(％)：518.0(M⁺)。

实施例14：α-(5，6，7，7a-四氢噻吩并[3，2-c]吡啶-2(4H)-酮)-3-苯氧基苯乙酰基-2，6-二甲基四氢吡喃-4-酮腙(I-3)的制备

在装有搅拌、冷凝器、温度计的反应瓶中加入(7)0.02mol，用80mL二氯甲烷将其分散，搅拌下冷却至0℃，加入三乙胺0.04mol。将(6c)分批加入反应体系中，加毕升温至回流继续反应5h(板层显示反应完全)。用3×80mL水洗涤反应液，分取二氯甲烷层，用无水硫酸钠充分干燥，过滤，减压蒸尽二氯甲烷，即得淡黄色固体产物(I-3)，HPLC：98.2％，收率86.9％。Rf＝0.39[单点，展开剂：v(石油醚)∶v(乙酸乙酯)＝2∶1]，EI-MS m/z(％)：505.2(M⁺)。

用类似的方法制备α-(5，6，7，7a-四氢噻吩并[3，2-c]吡啶-2(4H)-酮)-4-硝基苯乙酰基-3-吡咯基乙 酮腙(I-4)，HPLC：99.3％，收率77.0％。Rf＝0.45[单点，展开剂：v(石油醚)∶v(乙酸乙酯)＝2∶1]，EI-MSm/z(％)：439.1(M⁺)。

α-(5，6，7，7a-四氢噻吩并[3，2-c]吡啶-2(4H)-酮)-3-氰基苯乙酰基-2-硝基-4-噻吩乙酮腙(I-5)，HPLC：99.1％，收率85.9％。Rf＝0.41[单点，展开剂：v(石油醚)∶v(乙酸乙酯)＝2∶1]，EI-MS m/z(％)：481.0(M⁺)。

α-(5，6，7，7a-四氢噻吩并[3，2-c]吡啶-2(4H)-酮)-4-羧基苯乙酰基-1，3-二甲基哌啶-4-酮腙(I-6)，HPLC：98.3％，收率81.5％。Rf＝0.22[单点，展开剂：v(石油醚)∶v(乙酸乙酯)＝2∶1]，EI-MS m/z(％)：456.1(M⁺)。

α-(5，6，7，7a-四氢噻吩并[3，2-c]吡啶-2(4H)-酮)-2，4，6-三甲基苯乙酰基-4-吡啶甲醛腙(I-7)，HPLC：99.8％，收率84.3％。Rf＝0.44[单点，展开剂：v(石油醚)∶v(乙酸乙酯)＝2∶1]，EI MS m/z(％)：434.1(M⁺)。

α-(5，6，7，7a-四氢噻吩并[3，2-c]吡啶-2(4H)-酮)-4-三氟甲基苯乙酰基-2，6-二甲基-4-吡喃酮腙(I-8)，HPLC：99.2％，收率80.6％。Rf＝0.43[单点，展开剂：v(石油醚)∶v(乙酸乙酯)＝2∶1]，EI-MS m/z(％)：477.1(M⁺)。

α-(5，6，7，7a-四氢噻吩并[3，2-c]吡啶-2(4H)-酮)-4-(1H-咪唑-1-基)苯乙酰基-2-甲基四氢噻吩-3-酮腙(I-9)，HPLC：99.7％，收率81.9％。Rf＝0.49[单点，展开剂：v(石油醚)∶v(乙酸乙酯)＝2∶1]，EI-MSm/z(％)：467.1(M⁺)。

α-(5，6，7，7a-四氢噻吩并[3，2-c]吡啶-2(4H)-酮)-4-甲硫基苯乙酰基-2-腈基-4-四氢呋喃乙酮腙(I-10)，HPLC：99.2％，收率77.4％。Rf＝0.55[单点，展开剂：v(石油醚)∶v(乙酸乙酯)＝2∶1]，EI-MS m/z(％)：470.1(M⁺)。

实施例15：化合物I-4成盐酸盐

取I-4固体产物2.0g，溶于10mL无水乙醚。冰水浴冷却至0℃，滴加15％盐酸乙醚溶液至pH为2，继续于冰水浴下搅拌约1h。过滤，得黄色固体。

实施例16：化合物I-8成牛磺酸盐

取I-8固体产物2.0g，溶于15mL无水乙醇。加热至回流后加入等摩尔牛磺酸，继续于回流下搅拌反应约3h。反应完毕，于室温下静置24h。过滤，得浅黄色固体。

实施例17：化合物I-6成钾盐

取I-6固体产物1.0g，溶于40mL无水甲醇。冰水浴冷却至5℃，搅拌下滴加20％的氢氧化钾水溶液至pH为9，继续于冰水浴下搅拌约1h。于室温下静置24h。析出白色结晶，过滤，得白色固体。

实施例18：本发明的具有式I结构的化合物及其药学上可接受的盐，在抗肿瘤方面有明显的效用。现通过以下药理实验说明：

1.材料：

1.1四唑盐(MTT)：用0.01mol的磷酸盐缓冲液(PBS)溶解MTT终浓度5mg/mL，过滤除菌，分装，4℃避光保存。

1.2MTT裂解液的配制：80g的十二烷基磺酸钠(SDS，华美生物工程公司)溶解在200mL的DMF中，水浴加热助溶，加入200mL蒸馏水，用80％乙酸与1N盐酸混合调pH至4.7。

1.3细胞株选用：HT29(结肠癌)、PC3(前列腺癌)、H460M(肺癌)、MKN45(胃癌)。

2.操作步骤：

a.单细胞悬浮液接种于96孔板(用PRMI-1640基础培养基将细胞稀释至3×10⁴/mL，每孔加入200μL稀释好的细胞)，37℃，5％C0₂，饱和湿度下培养24小时；

b.去除培养基，取新配置培养基制备发明化合物(I-1、I-2、I-3、I-4、I-5、I-6、I-7、I-8、I-9、I-10)和氟尿嘧啶溶液，每孔200μL，培养48小时；

c.每孔加入2mg/mL的MTT 20μL，孵育4小时；

d.吸出孔内培养液(尽量完全)，加入DMSO液(150μL/孔)，振荡10分钟，使结晶物充分溶解；

e.酶标仪检测各孔OD值，(λ＝570nm)；

f.绘制细胞活力曲线图，求出IC₅₀值。

化合物细胞毒性试验结果IC₅₀(μg/mL)

通过体外药理实验结果可见，所有目标化合物具有较强的细胞毒性，对4种肿瘤细胞均有一定程度的 毒性，具有进一步深入研究价值。

为了更充分地说明本发明的含杂环的希夫碱类化合物的药物组合物，下面提供下列制剂实施例，所述实施例仅用于说明，而不是用于限制本发明的范围。所述制剂可以使用本发明化合物中的任何活性化合物及其盐，优选使用实施例12～17中所描述的化合物。

实施例19：胶囊剂

用下述成分制备硬明胶胶囊：

用量/囊

化合物I-1             75mg

预胶化淀粉            100mg

泊洛沙姆              4mg

羧甲基淀粉钠          10mg

硬脂酸镁              20mg

10％聚维酮乙醇溶液    适量

制备工艺：将原辅料预先干燥，过100目筛备用。按处方量将上述成分混匀，过60目筛三次，加适量10％聚维酮乙醇(95％)溶液制软材，过18目筛制粒，40℃干燥，过16目筛整粒，填充入硬明胶胶囊中。

实施例20：片剂

用下述成分制备片剂：

用量/片

化合物I-4的盐酸盐      75mg

淀粉                   45mg

微晶纤维素             40mg

羧甲基淀粉钠盐         4.5mg

硬脂酸镁               1mg

滑石粉                 1mg

泊洛沙姆               3mg

制备工艺：将原辅料预先干燥，过100目筛备用。先将处方量的辅料充分混匀。将原料药以递增稀释法加到辅料中，每次加时充分混匀2-3次，保证药与辅料充分混匀，过20目筛，在55℃通风烘箱中干燥2h，干颗粒过16目筛整粒，测定中间体含量，混合均匀，在压片机上压片。

实施例21：注射剂

注射液的制备：

化合物I-8的牛磺酸盐    45mg

丙二醇        100mg

聚山梨酯80    适量

蒸馏水        300mL

制备方法：取活性成分加入到已溶解聚山梨酯和丙二醇的注射用水中，加入药用碱调节pH值至4～8使其溶解。加入活性炭，搅拌吸附30min，除炭、精滤、灌封、灭菌。

实施例22：粉剂

注射用冻干粉的制备：

化合物I-6的钾盐    50mg

药用碱             0.1-7.0％

甘露醇             55-80％

制备方法：取活性成分加入注射用水，用药用碱调节pH值至4～8使其溶解。再加入甘露醇，按注射剂的要求进行高压灭菌，加入活性炭，采用微孔滤膜过滤，滤液进行分装，采用冷冻干燥法，制得疏松块状物，封口，即得。

Claims (11)

1.一种式I所示的化合物或其药学上可接受的盐：

其中：

R¹，R²独立地为

1)氢、C₁-C₆直链或支链烷基、C₃-C₆环烷基，该烷基或环烷基被下列一个或多个基团取代：卤素、羟基、羧基、氨基、酰胺基、氰基、硝基、C₁-C₄烷氧基；

2)卤素、羟基、羧基、氨基、酰胺基、氰基、硝基、苯基、C₁-C₄烷氧基、苯氧基、甲硫基；

3)五元六元杂环基；

R³为取代的亚胺基，其取代基为

1)氢、C₁-C₆直链或支链烷基；

2)含O、N、S的五元或六元环杂环基，该杂环基被下列一个或多个基团取代：C₁-C₆直链或支链烷基、C₃-C₆环烷基、卤素、羟基、羧基、氨基、酰胺基、氰基、硝基、苯基、C₁-C₄烷氧基。

2.如权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中，R¹，R²独立地为氢、甲基、乙基、丙基、环己基、氯甲基、三氟甲基、溴乙基、氯丙基、氟、氯、溴、二甲氨基、苯氧基、硝基、腈基、羧基、咪唑基、呋喃基、噻吩基、吡啶基、甲硫基；R³的取代基团为：氢、甲基、乙基、取代吡啶基、取代噻吩基、取代四氢吡喃基、取代四氢呋喃基、取代吡咯基、取代哌啶基、取代吡喃基、取代四氢噻吩基。

3.如权利要求1或2所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中，所述化合物为：

4.如权利要求1-3中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中，所述药学上可接受的盐为式I所示的化合物与无机酸和/或有机酸所成的盐；

优选地，所述盐为盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐、磷酸盐、磷酸氢盐、乙酸盐、丙酸盐、丁酸盐、乳酸盐、甲磺酸盐、对甲苯磺酸盐、马来酸盐、苯甲酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、柠檬酸盐、富马酸盐、牛磺酸盐、葡萄糖酸盐。

5.如权利要求1-3中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中，所述药学上可接受的盐为式I所示的化合物与碱金属、碱土金属的氧化物和/或氢氧化物所成的盐；

优选地，所述盐为钠盐、钾盐、钙盐、镁盐。

6.如权利要求1-5中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐的制备方法，其中，所述方法包括以下步骤：

a.(5)与磺酰氯在二氯甲烷、三氯甲烷、甲苯、乙醇或乙腈中，-10～120℃下反应制得(6)；

b.(6)和(7)在吡啶、N，N-二异丙基乙胺、三乙胺、碳酸钾、碳酸钠、氢氧化钾、氢氧化钠或碳酸氢钠缚酸剂存在下，以甲醇、乙醇、二氯甲烷、三氯甲烷、乙腈、DMF或DMSO为溶剂，0～120℃反应制得目标化合物I。

其中各取代基如权利要求1或2定义。

7.如权利要求6所述的制备方法，其中，所述方法还包括各种中间体或所得产物与无机酸和/或有机酸，碱金属、碱土金属的氧化物和/或氢氧化物成盐的步骤。

8.一种药物组合物，其包含治疗有效量的权利要求1-5中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐。 

9.如权利要求8所述的药物组合物，其中，所述药物组合物还包含一种或多种药学上可接受的辅料；优选地，所述药物组合物为片剂、分散片、肠溶片、咀嚼片、口崩片、胶囊、糖衣剂、颗粒剂、干粉剂、口服溶液剂、注射用小针、注射用冻干粉针或大输液。

10.如权利要求1-5中任一项的化合物及其药学上可接受的盐在制备抗肿瘤药物方面的应用。

11.如权利要求10所述的应用，在用于制备治疗结肠癌、前列腺癌、肺癌、胃癌药物方面的用途。