CN102116772A - 二氢查尔酮化合物的筛选方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种二氢查尔酮化合物的筛选方法。该方法首先将n种苯甲醛类化合物B系列化合物合并为一混合物，依次与酮醛缩合反应物苯乙酮类化合物A系列m种反应，生成相应的m组二氢查尔酮混合物；将该m种A系列化合物合并为一混合物，依次与B系列各单一化合物反应，生成n组二氢查尔酮混合物。选出A、B系列混合物各自最强的混合物，确定最强的A系列的苯乙酮类化合物与B系列苯甲醛类化合物，将最强的A系列苯乙酮类化合物依次与B系列n种化合物反应，再将最强的B系列苯甲醛类化合物依次与A系列m种苯乙酮化合物反应，共生成m+n-1种二氢查尔酮，筛选出最强的促胰岛素分泌作用的二氢查尔酮化合物，即为本方法筛选的目标化合物。

Description

二氢查尔酮化合物的筛选方法

技术领域

本发明涉及一种二氢查尔酮化合物的筛选方法。

技术背景

天然资源作为发现新药的来源之一，在药物发展史上起了重要的作用。天然产物来源的活性化合物是起治疗作用的物质基础，提取天然来源的先导化合物，进行合成、结构改造与优化，是创新药物研究与开发的关键。

糖尿病是由于体内胰岛素缺乏或拮抗胰岛素的激素增加，或胰岛素在靶细胞内不能发挥正常生理作用而引起的葡萄糖、蛋白质及脂质代谢紊乱的一种综合病症。传统的口服降糖药疗效有限，新的天然来源的糖尿病药物的基础研究已是迫不及待的紧急任务。随着对糖尿病基础理论的深入研究，多种作用机制的抗糖尿病药物已用于临床评价与治疗，其中胰岛素促泌剂引起了广泛的关注。

血竭(Dragon’s Blood)是一种天然产物，也是传统的中药品种之一，有棕榈科麒麟血竭和百合科龙血树属[Dracaena cochinchinensis(Lour.)S.C.Chen]龙血竭。

通过药学实验证明龙血竭具有显著的降血糖作用，对龙血竭及其提取物(Extraction of Dragon’s Blood，EDB)进行了有关降血糖功能试验，试验表明，EDB有显著的胰岛素促泌作用。以中药血清化学理论为指导，运用液相色谱质谱联用技术，对龙血竭进行了动物血清药化学及药代动力学的基础研究，从小鼠灌服EDB后的血浆样品中分析并分离鉴定出龙血竭中4个原型成分皆为二氢查耳酮，具有显著的胰岛素促泌作用，与前期龙血竭有效提取物(EDB)有良好的胰岛素促泌降血糖作用相印证。多方面证明了这4个二氢查耳酮是龙血竭起降血糖作用的主要物质基础。根据实验数据，发现4个化合物功能活性顺序与OCH₃位置的改变与活性的增强有着密切的关系。与现有的胰岛素促泌药物结构相比，二氢查尔酮衍生物作为胰岛素促泌降血糖药物，经检索未见报道。

二氢查尔酮的结构如图所示，已有的研究从一个侧面反映活性高低与R2-R6，R2’-R6’位的OCH₃的个数和位置有关，有必要在保持二氢查尔酮骨架完整的基础上系统研究OCH₃和OH在不同个数和不同位点的活性状况。

以天然产物中有生物活性的化合物母体骨架为先导化合物的基本结构，寻找活性更强的相关衍生物，是一个挑战。传统的经典合成方法，是通过一步步反应，在每一步反应后，进行纯化及结构鉴定，然后通过活性测定，再设计下一个合成的同系物目标。按传统的方法，若将m个含不同衍生基团的反应物A(A1，A2......Am)与n个不同衍生基团的反应物B(B1，B2......Bn)分别合成，化学合成需进行m×n次反应、纯化、活性试验、鉴定等繁琐过程。为了选择高活性化合物重复以上步骤，耗时耗成本耗精力。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术中存在的缺陷，提供一种二氢查尔酮化合物的筛选方法。

为达到上述目的，本发明采用如下技术步骤：

一种二氢查尔酮化合物的筛选方法，其特征在于该方法的具体步骤为：

a.准备反应物苯乙酮类化合物A₁至A_m共m种；准备反应物苯甲醛类化合物B₁至B_n共n种；m、n为整数；

b.将B₁至B_n共n种苯甲醛类化合物等摩尔混合为混合物B_混，将该混合物B_混分别与A₁至A_m共m种苯乙酮类化合物进行等摩尔酮醛缩合反应，合成A_1查混至A_m查混的共m组查尔酮混合物，然后将该m种查尔酮混合物脱保护苄基并作催化加氢反应，生成相应的m组二氢查尔酮混合物A_1混至A_m混；

c.将A₁至A_m共m种苯乙酮类化合物等摩尔混合成混合物A_混，再将该混合物A_混分别与B₁至B_n共n种苯甲醛类化合物进行等摩尔酮醛缩合反应，合成B_1查混至B_n查混的共n组查尔酮混合物，然后将该查尔酮混合物脱保护苄基并作催化加氢反应，生成相应的n组二氢查尔酮混合物B_1混至B_n混；

d.按大鼠胰岛细胞胰岛素分泌放射免疫测试方法，检测步骤b所得的A_1混至A_m混的m组二氢查尔酮混合物的大鼠胰岛细胞胰岛素分泌量的强度，选出最强的一组混合物为A_i混；同样，检测步骤c所得的B_1混至B_n混的n组二氢查尔酮混合物的大鼠胰岛细胞胰岛素分泌量的强度，选出最强的一组混合物为B_j混；

e.将A_i分别与B₁至B_n进行等摩尔酮醛缩合反应，得到n个查尔酮化合物A_iB_1查至A_iB_n查，然后脱保护苄基并作加氢反应，生成相应的n个二氢查尔酮化合物A_iB₁至A_iB_n；

f.将B_j分别与A₁至A_m进行等摩尔酮醛缩合反应，得到m个查尔酮化合物A₁B_j查至A_mB_j查，然后脱保护苄基并作加氢反应，生成m个相应的二氢查尔酮化合物A₁B_j至A_mB_j；

g.按大鼠胰岛细胞胰岛素分泌放射免疫测试方法，检测步骤e中所得的n个A_iB₁至A_iB_n和步骤f中的m个A₁B_j至A_mB_j二氢查尔酮化合物的大鼠胰岛细胞胰岛素分泌量的强度，

筛选出强度最强的二氢查尔酮化合物即为本方法的目标化合物。

本发明的方法无需分离纯化，只需2(m+n)-1次合成，便可直接进行生物活性筛选，快速，经济，可用于数量巨大、反应条件一致、步骤有限的合成反应，尤其在一定母核结构的基础上获得系列化合物或同系物。本发明促胰岛素分泌作用的二氢查尔酮化合物的筛选方法尚未见报道。

本发明的方法可用于对已知先导物进行结构优化，能在发现新的有效的药物的同时，减少时间和成本。

本发明的方法是一种建立在高效、平行合成基础上的快速大量合成化合物的新方法，它与生物活性物质高通量筛选相结合，极大的推动了先导化合物的结构优化以及构效关系研究。本方法是在同一步反应过程中，加入各种不同的能够参与反应的化合物基团，使各种不同的基本结构的基团以组合的方式参与反应，经过一定的反应步骤，获得多种结构不同的化合物。由于本发明的方法可以同时在相同的条件下获得大量的结构类似的化合物，这一特点在进行化合物结构的改造优化和筛选中具有强大的优势。

具体实施方式

现将本发明的具体实施例叙述于后。

实施例1：

a.准备苯乙酮类化合物A系列10种，苯甲醛类化合物B系列10种，化合物名称及对应序号分别见表1。

表1A、B系列化合物名称及对应序号

在进行羟醛缩合之前，需将A₁至A₇、B₁至B₅苯环上的活泼酚羟基进行苄基保护，步骤如下：在250mL三口瓶中加入0.05mol含羟基的苯乙酮类化合物或苯甲醛类化合物，用50mL无水乙醇溶解后，加入0.035mol K₂CO₃，机械搅拌下，缓慢滴加0.06mol苄氯，含羟基的苯乙酮类化合物或苯甲醛类化合物与苄氯的摩尔比为1∶1.2，滴加完成后，加热回流反应，TLC跟踪反应至原料点消失。旋转蒸发回收乙醇，加水，乙酸乙酯萃取。萃取液用5％的NaOH洗二次，再用水洗至中性，无水MgSO₄干燥，旋转蒸发蒸去溶剂和过量的苄氯，用乙酸乙酯重结晶，得苄基苯乙酮类化合物或苄基苯甲醛类化合物。

b.在N2流保护的三口瓶中，各加入1mmol B₆至B₁₀以及经苄基保护的B₁至B₅的苯甲醛类化合物，再加入10mmol经苄基保护的A₁，在搅拌状态下加入由90mL乙醇和10g KOH配成的溶液，加热回流反应，TLC跟踪反应，原料点完全消失后结束反应，滤出反应过程中析出的黄色固体物质A_1查混；取1/3重量的A_1查混，置于另一带汞封的三口瓶中，用200mL乙醇溶解，加入20mL 1mol/LNaOH溶液，0.8g 10％Pd/C催化剂。密闭体系后，通入氢气使汞柱保持10mmHg。室温下搅拌反应，TLC检测反应终点。1小时后，原料点消失，停止反应。过滤除去Pd/C催化剂，旋转蒸去乙醇，用盐酸调pH至中性。乙酸乙酯萃取，萃取液浓缩后重结晶，得到浅黄色固体为A_1混。以此类推生成相应的二氢查尔酮混合物A_1混至A_10混等10组二氢查尔酮混合物。

c.在N₂流保护的三口瓶中，各加入1mmolA8至A10以及经苄基保护的A₁至A₇苯乙酮类化合物，再加入10mmol经苄基保护的B₁，在搅拌状态下加入由90mL乙醇和10g KOH配成的溶液，加热回流反应，TLC跟踪反应，原料点完全消失后结束反应，滤出反应过程中析出的黄色固体物质B_1查混；取1/3重量的B_1查混，置于另一带汞封的三口瓶中，用200mL乙醇溶解，加入20mL 1mol/L NaOH溶液，0.8g 10％Pd/C催化剂。密闭体系后，通入氢气使汞柱保持10mmHg。室温下搅拌反应，TLC检测反应终点。1小时后，原料点消失，停止反应。过滤除去Pd/C催化剂，旋转蒸去乙醇，用盐酸调pH至中性。乙酸乙酯萃取，萃取液浓缩后重结晶，得到浅黄色固体为B_1混。以此类推，生成相应的二氢查尔酮混合物B_1混至B_10混等10组二氢查尔酮混合物。

d.将A_1混至A_10混等10组及B_1混至B_10混等10组二氢查尔酮混合物列为目标物，通过大鼠胰岛细胞胰岛素分泌放射免疫测试方法，检测胰岛素分泌量的强度，见表2，分别选出A系列与B系列最强的混合物，具体方法如下：将胰岛分为正常对照组、高糖组、格列齐特阳性对照组和20组目标物组，每组先加入1ml无糖Krebs-Ringer液(简称K液)于37℃，5％CO₂培养箱中孵育30分钟，取出离心1000rpm，1分钟，弃上清，然后在各组中分别加入1ml的无糖K液，孵育4小时。取上清，用大鼠胰岛素放射免疫分析试剂盒测胰岛素含量，见表2。

表2A、B系列混合物促原代胰岛细胞胰岛素分泌结果(n＝6)

根据试验结果，A系列中A_5混胰岛素促泌效果最强，B系列中B_6混胰岛素促泌效果最强。

e.在N₂流保护的三口瓶中，加入经苄基保护的10mmol A₅与10mmol B₁，在搅拌状态下加入由90mL乙醇和10g KOH配成的溶液，加热回流反应，TLC跟踪反应，原料点完全消失后结束反应，滤出反应过程中析出的黄色固体物质A₅B_1查；取1/3重量的A₅B_1查，置于另一带汞封的三口瓶中，用200mL乙醇溶解，加入20mL1mol/LNaOH溶液，0.8g 10％Pd/C催化剂。密闭体系后，通入氢气使汞柱保持10mmHg。室温下搅拌反应，TLC检测反应终点。1小时后，原料点消失，停止反应。过滤除去Pd/C催化剂，旋转蒸去乙醇，用盐酸调pH至中性。乙酸乙酯萃取，萃取液浓缩后重结晶，得到浅黄色结晶为二氢查尔酮A₅B₁。以此类推，生成相应的A₅B₁至A₅B₁₀等10个二氢查尔酮化合物。

f.在N₂流保护的三口瓶中，加入经苄基保护的10mmol B₆与10mmolA₁，在搅拌状态下加入由90mL乙醇和10g KOH配成的溶液，加热回流反应，TLC跟踪反应，原料点完全消失后结束反应，滤出反应过程中析出的黄色固体物质A₁B_6查；取1/3重量的A₁B_6查，置于另一带汞封的三口瓶中，用200mL乙醇溶解，加入20mL1mol/LNaOH溶液，0.8g 10％Pd/C催化剂。密闭体系后，通入氢气使汞柱保持10mmHg。室温下搅拌反应，TLC检测反应终点。1小时后，原料点消失，停止反应。过滤除去Pd/C催化剂，旋转蒸去乙醇，用盐酸调pH至中性。乙酸乙酯萃取，萃取液浓缩后重结晶，得到浅黄色结晶为A₁B₇。以此类推，生成相应的A₁B₆至A₁₀B₆等10个二氢查尔酮化合物。

g.将A₅B₁至A₅B₁₀和A₁B₆至A₁₀B₆等20个二氢查尔酮化合物列为目标物，通过对大鼠离体原代胰岛细胞促胰岛素分泌试验，检测胰岛素分泌量的强度，见表3，选出最强的化合物，具体方法如下：将胰岛分为正常对照组、高糖组、格列齐特阳性对照组和20组目标物组，每组先加入1ml无糖Krebs-Ringer液(简称K液)于37℃，5％CO₂培养箱中孵育30分钟，取出离心1000rpm，1分钟，弃上清，然后在各组中分别加入1ml的无糖K液，孵育4小时。取上清，用大鼠胰岛素放射免疫分析试剂盒测胰岛素含量。

表3A、B系列化合物促原代胰岛细胞胰岛素分泌结果(n＝6)

根据试验结果，胰岛素促泌效果最强是A₅B₉。

实施例2：

a.准备苯乙酮类化合物A系列7种，苯甲醛类化合物B系列12种，化合物名称及对应序号分别见表4。

表4A、B系列化合物名称及对应序号

在进行羟醛缩合之前，需将A₆和B₁₁苯环上的活泼酚羟基进行苄基保护，步骤如下：在250mL三口瓶中加入0.05molA₆或B₁₁，用50mL无水乙醇溶解后，加入0.035mol K₂CO₃，机械搅拌下，缓慢滴加0.06mol苄氯，含羟基的A₆或B₁₁与苄氯的摩尔比为1∶1.2，滴加完成后，加热回流反应，TLC跟踪反应至原料点消失。旋转蒸发回收乙醇，加水，乙酸乙酯萃取。萃取液用5％的NaOH洗二次，再用水洗至中性，无水MgSO₄干燥，旋转蒸发蒸去溶剂和过量的苄氯，用乙酸乙酯重结晶，得苄基苯乙酮或苄基苯甲醛。

b.在N₂流保护的三口瓶中，各加入1mmol B₁至B₁₂，再加入10mmolA₁，在搅拌状态下加入由90mL乙醇和10g KOH配成的溶液，加热回流反应，TLC跟踪反应，原料点完全消失后结束反应，滤出反应过程中析出的黄色固体物质A_1查混；取1/3重量的A_1查混，置于另一带汞封的三口瓶中，用200mL乙醇溶解，加入20mL 1mol/L NaOH溶液，0.8g 10％Pd/C催化剂。密闭体系后，通入氢气使汞柱保持10mmHg。室温下搅拌反应，TLC检测反应终点。1小时后，原料点消失，停止反应。过滤除去Pd/C催化剂，旋转蒸去乙醇，用盐酸调pH至中性。乙酸乙酯萃取，萃取液浓缩后重结晶，得到浅黄色固体为A_1混。以此类推，生成相应的二氢查尔酮混合物A_1混至A_7混等7组二氢查尔酮混合物。

c.在N₂流保护的三口瓶中，各加入1mmol A₁₁至A₅和A₇以及经苄基保护的A₆苯乙酮类化合物，再加入10mmol B₁，在搅拌状态下加入由90mL乙醇和10g KOH配成的溶液，加热回流反应，TLC跟踪反应，原料点完全消失后结束反应，滤出反应过程中析出的黄色固体物质B_1查混；取1/3重量的B_1查混，置于另一带汞封的三口瓶中，用200mL乙醇溶解，加入20mL 1mol/L NaOH溶液，0.8g 10％Pd/C催化剂。密闭体系后，通入氢气使汞柱保持10mmHg。室温下搅拌反应，TLC检测反应终点。1小时后，原料点消失，停止反应。过滤除去Pd/C催化剂，旋转蒸去乙醇，用盐酸调pH至中性。乙酸乙酯萃取，萃取液浓缩后重结晶，得到浅黄色固体为B_1混。以此类推，生成相应的二氢查尔酮混合物B_1混至B_12混等12组二氢查尔酮混合物。

d.将A_1混至A_7混等7组及B_1混至B_12混等12组二氢查尔酮混合物列为目标物，通过对大鼠离体原代胰岛细胞促胰岛素分泌试验，检测胰岛素分泌量的强度，见表5，分别选出A系列与B系列最强的混合物，具体方法如下：将胰岛分为正常对照组、高糖组、格列齐特阳性对照组和20组目标物组，每组先加入1ml无糖Krebs-Ringer液(简称K液)于37℃，5％CO₂培养箱中孵育30分钟，取出离心1000rpm，1分钟，弃上清，然后在各组中分别加入1ml的无糖K液，孵育4小时。取上清，用大鼠胰岛素放射免疫分析试剂盒测胰岛素含量，见表5。

表5A、B系列混合物促原代胰岛细胞胰岛素分泌结果(n＝6)

根据试验结果，A系列中A_4混胰岛素促泌效果最强，B系列中B_9混胰岛素促泌效果最强。

e.在N₂流保护的三口瓶中，加入经苄基保护的10mmolA₄与10mmol B₁，在搅拌状态下加入由90mL乙醇和10g KOH配成的溶液，加热回流反应，TLC跟踪反应，原料点完全消失后结束反应，滤出反应过程中析出的黄色固体物质A₄B_1查；取1/3重量的A₄B_1查，置于另一带汞封的三口瓶中，用200mL乙醇溶解，加入20mL 1mol/LNaOH溶液，0.8g 10％Pd/C催化剂。密闭体系后，通入氢气使汞柱保持10mmHg。室温下搅拌反应，TLC检测反应终点。1小时后，原料点消失，停止反应。过滤除去Pd/C催化剂，旋转蒸去乙醇，用盐酸调pH至中性。乙酸乙酯萃取，萃取液浓缩后重结晶，得到浅黄色结晶为二氢查尔酮A₄B₁。以此类推，生成相应的A₄B₁至A₄B₁₂等12个二氢查尔酮化合物。

f.在N₂流保护的三口瓶中，加入10mmol B₉与10mmolA₁，在搅拌状态下加入由90mL乙醇和10g KOH配成的溶液，加热回流反应，TLC跟踪反应，原料点完全消失后结束反应，滤出反应过程中析出的黄色固体物质A₁B_9查；取1/3重量的A₁B_9查，置于另一带汞封的三口瓶中，用200mL乙醇溶解，加入20mL 1mol/L NaOH溶液，0.8g 10％Pd/C催化剂。密闭体系后，通入氢气使汞柱保持10mmHg。室温下搅拌反应，TLC检测反应终点。1小时后，原料点消失，停止反应。过滤除去Pd/C催化剂，旋转蒸去乙醇，用盐酸调pH至中性。乙酸乙酯萃取，萃取液浓缩后重结晶，得到浅黄色结晶为A₁B₉。以此类推，生成相应的A₁B₉至A₇B₉等7个二氢查尔酮化合物。

g.将A₄B₁至A₄B₁₂和A₁B₉至A₇B₉等19个二氢查尔酮化合物列为目标物，通过对大鼠离体原代胰岛细胞促胰岛素分泌试验，检测胰岛素分泌量的强度，见表6，选出最强的化合物，具体方法如下：将胰岛分为正常对照组、高糖组、格列齐特阳性对照组和20组目标物组，每组先加入1ml无糖Krebs-Ringer液(简称K液)于37℃，5％CO₂培养箱中孵育30分钟，取出离心1000rpm，1分钟，弃上清，然后在各组中分别加入1ml的无糖K液，孵育4小时。取上清，用大鼠胰岛素放射免疫分析试剂盒测胰岛素含量。

表6A、B系列化合物促原代胰岛细胞胰岛素分泌结果(n＝6)

根据试验结果，胰岛素促泌效果最强是A₂B₉。

实施例3

取正常昆明种小鼠，雌雄各半，禁食不禁水14h后，腹腔注射2％四氧嘧啶(200mg/kg)生理盐水溶液，注射后恢复正常饮食。72小时后测定禁食不禁水8小时的小鼠血糖，血糖值大于11.1mmol/L者为实验性合格糖尿病动物模型。

血糖测定采用葡萄糖氧化酶法，即4-AA-酚显色法。葡萄糖氧化酶是一种需氧脱氢酶，能催化葡萄糖生成葡萄糖酸的过氧化氢，后者在过氧化物酶作用下放出氧，是4-氨基安替比林(4-AA)与酚氧化缩合，生成红色醌亚胺染料，可在波长505nm比色测定。

结果计算，血糖含量

二氢查耳酮对四氧嘧啶糖尿病模型小鼠的药效试验步骤如下：取合格的四氧嘧啶糖尿病模型小鼠，雌雄各半，共分十组，即模型

对照组、阳性格列齐特对照组、龙血素B(4’-羟基-2，4，6-三甲氧基查耳酮)高与低剂量组、龙血素A(4’-羟基-2，4-二甲氧基查耳酮)高与低剂量组、剑叶龙血素A(4’-羟基-2，6-三甲氧基查耳酮)高与低剂量组、龙血素G(4’-羟基-4，6’-二甲氧基-查耳酮)高与低剂量组。实验时，模型

对照组灌胃生理盐水，格列齐特剂量为90mg/kg，其他药物高剂量为30mg/kg，低剂量为20mg/kg。连续给药7d，末次给药后禁食不禁水8h，眼眶静脉窦取血，于4000rpm/min离心，离心5min后取血清，按葡萄糖氧化酶法测定血糖水平，所得数据进行组间t检验。

试验结果表明：与模型对照组及对照药格列齐特组比较，4种合成的二氢查耳酮均具有良好的降血糖作用，见表7。同时，实验中可以观察到，他们都可以改善糖尿病小鼠多饮、多尿等状况。

表7四种二氢查耳酮对Alloxan诱导的糖尿病小鼠血糖值的影响

^＊p＜0.05，^＊＊p＜0.01v.s.模型对照组

实验中采用四氧嘧啶选择性的破坏胰岛β细胞，造成小鼠血糖升高，从而导致糖尿病，这表明二氢查耳酮具有减弱四氧嘧啶对胰岛β细胞的损伤或改善受损伤细胞的功能，从而缓解糖尿病小鼠的症状。

糖耐量试验步骤如下：取60只合格的四氧嘧啶糖尿病模型小鼠，雌雄各半，共分6组，模型对照组、阳性格列齐特对照组、龙血素B、龙血素A、剑叶龙血素A和龙血素G，各组相应给药剂量与药效试验相同。均按0.2ml/kg体积灌胃给药，每日一次，连续7d，末次给药前禁食8h，给药2h后眼眶静脉窦采血，灌胃给蔗糖(2.5g/kg)，测定给蔗糖后0.5、1、2h的血糖值。灌胃给药，每日一次，连续7d，末次给药前禁食8h，给药1h后眼眶静脉窦采血，灌胃给蔗糖(2.5g/kg)，测定给蔗糖后0.5、1、2h的血糖值。血糖测定方法同上，所得数据进行组间t检验。

糖耐量试验结果显示，与模型对照组及对照药格列齐特组比较，4种合成的二氢查耳酮均具有良好的糖耐量作用，见表8。

表8四种二氢查耳酮糖耐量试验

^*P＜0.05，^**P＜0.01vs模型对照组

糖耐量实验结果表明，正常小鼠葡萄糖耐量在1h达高峰，2h后开始有所下降；4组给药组小鼠血糖在2h时均比模型组小鼠血糖有了明显降低(P＜0.05)。其中龙血素B，龙血素A和龙血素G组在1h时有明显的降血糖作用(P＜0.01)，效果优于格列齐特对照组

剑叶龙血素A效果略差，其药效与格列齐特组类似。

Claims (1)

1.一种二氢查尔酮化合物的筛选方法，其特征在于该方法的具体步骤为：

a.准备反应物苯乙酮类化合物A₁至A_m共m种；准备反应物苯甲醛类化合物B₁至B_n共n种；m、n为整数；

b.将B₁至B_n共n种苯甲醛类化合物等摩尔混合为混合物B_混，将该混合物B_混分别与A₁至A_m共m种苯乙酮类化合物进行等摩尔酮醛缩合反应，合成A_1查混至A_m查混的共m组查尔酮混合物，然后将该m种查尔酮混合物脱保护苄基并作催化加氢反应，生成相应的m组二氢查尔酮混合物A_1混至A_m混；

c.将A₁至A_m共m种苯乙酮类化合物等摩尔混合成混合物A_混，再将该混合物A_混分别与B₁至B_n共n种苯甲醛类化合物进行等摩尔酮醛缩合反应，合成B_1查混至B_n查混的共n组查尔酮混合物，然后将该查尔酮混合物脱保护苄基并作催化加氢反应，生成相应的n组二氢查尔酮混合物B_1混至B_n混；

d.按大鼠胰岛细胞胰岛素分泌放射免疫测试方法，检测步骤b所得的A_1混至A_m混的m组二氢查尔酮混合物的大鼠胰岛细胞胰岛素分泌量的强度，选出最强的一组混合物为A_i混；同样，检测步骤c所得的B_1混至B_n混的n组二氢查尔酮混合物的大鼠胰岛细胞胰岛素分泌量的强度，选出最强的一组混合物为B_j混；

e.将A_i分别与B₁至B_n进行等摩尔酮醛缩合反应，得到n个查尔酮化合物A_iB_1查至A_iB_n查，然后脱保护苄基并作加氢反应，生成相应的n个二氢查尔酮化合物A_iB₁至A_iB_n；

f.将B_j分别与A₁至A_m进行等摩尔酮醛缩合反应，得到m个查尔酮化合物A₁B_j查至A_mB_{j 查}，然后脱保护苄基并作加氢反应，生成m个相应的二氢查尔酮化合物A₁B_j至A_mB_j；

g.按大鼠胰岛细胞胰岛素分泌放射免疫测试方法，检测步骤e中所得的n个A_iB₁至A_iB_n和步骤f中的m个A₁B_j至A_mB_j二氢查尔酮化合物的大鼠胰岛细胞胰岛素分泌量的强度，筛选出强度最强的二氢查尔酮化合物即为本方法的目标化合物。