CN102099330B - 供给氧化氮的前列酰胺 - Google Patents

Abstract

本发明描述前列腺素的硝基衍生物，其具有提高的药物活性和增强的耐受性。它们可用于治疗青光眼和眼高压症。

Description

供给氧化氮的前列酰胺

发明背景

本发明涉及新的前列腺素衍生物。更具体地，本发明涉及前列腺素酰胺(也称为前列酰胺(prostamides))的硝酰氧基衍生物，含有它们的药物组合物和它们作为药物用于治疗青光眼和眼高压症的用途。

青光眼是眼部疾病，其特征为由于对视神经不可逆转的损伤导致的视野的渐进性丧失，如果未经治疗，可达到全盲的程度。当眼中流体(房水)的产生和排出失衡使眼压增至不健康水平时发生青光眼。青光眼的主要病理生理学特征为升高的眼内压(IOP)。视野的丧失(原发性开角型青光眼(POAG)的一种形式)与患病眼的眼内压的持续增加有关。此外，不伴有视野丧失的高眼内压被认为是预示了该形式的POAG的早期阶段。

已知，高IOP可至少通过施用减少眼内房水的产生或增加流体排出的药物得到部分控制，所述药物为例如β-阻断剂、α-激动剂、拟胆碱药、碳酸酐酶抑制剂或前列腺素类似物。

数种副作用与常规用于治疗青光眼的药物有关。局部β-阻断剂显示严重的肺部副作用、抑郁、疲劳、意识错乱、阳痿、脱发、心力衰竭和心动过缓。局部α-激动剂具有相当高的过敏性或毒性反应发生率；局部拟胆碱药(缩瞳药)可造成视觉副作用。

用于治疗青光眼的局部前列腺素类似物(比马前列素(bimatoprost)、拉坦前列素、曲伏前列素(travoprost)和乌诺前列酮(unoprostone))可产生眼部副作用，例如虹膜色素沉着增加、眼部刺激、结膜充血、虹膜炎、葡萄膜炎和黄斑水肿(macular oedema)(Martindale，第33版，p.1445)。

美国专利No.3,922,293描述了F-型前列腺素的单羧基丙烯酸酯和它们的15β异构体(在C-9位)，以及用于制备它们的方法；美国专利No.6,417,228公开了具有功能性PGF2(受体激动剂活性的13-氮杂前列腺素和它们在治疗青光眼和眼高压症中的用途。

WO90／02553公开了前列腺素衍生物PGA、PGB、PGE和PGF(其中ω链含有环结构)用于治疗青光眼或眼高压症的用途。

WO00／51978公开了新的硝基化和／或亚硝基化前列腺素，特别是新的PGE₁衍生物，新的组合物和它们用于治疗性功能障碍的用途。

美国专利No.5,625,083公开了前列腺素的二硝酸甘油酯(dinitroglycerolester)，其可被用作血管舒张剂、抗高血压药、心血管药或支气管扩张药。

美国专利No.6,211,233公开了其中A含有前列腺素残基(特别是PGE₁)，X₁为二价连接桥(connecting bridge)的通式A-X₁-NO₂的化合物，以及它们用于治疗阳痿的用途。

发明领域

本发明的目的是提供新的前列腺素衍生物，所述衍生物不仅能消除或至少减少与这些化合物有关的副作用，而且具有提高的药理学活性。已惊人地发现，就用于眼部疾病治疗的宽范围治疗适用性和增强的活性和耐受性而言，某些前列腺素硝基衍生物与已知的前列腺素类似物相比具有改善的IOP降低功效和改善的总特性(overall profile)。尤其，已认识到，本发明的前列腺素硝基衍生物可用于治疗青光眼和眼高压症。本发明化合物显示用于降低患有开角型青光眼或患有慢性闭角型青光眼的患者的眼内压，所述患者经历周边虹膜切开术或激光虹膜成形术(iridoplasty)。

发明概述

因此，本发明的目的是式(I)化合物或其药学上可接受的盐或立体异构体：

其中符号

表示顺式或反式构型的单键或双键；R¹、R²、R³和R⁴各自独立地为H、-C(O)R⁵-ONO₂、-C(O)OR⁵-ONO₂、-C(O)R⁵R⁶-ONO₂、-[C(O)R⁵]_m-ONO₂、-C(O)R⁵-[OC(O)R⁶]_n-ONO₂、-C(O)R⁵-[(O)CR⁶]_n-ONO₂、-C(O)R⁵-[(O)R⁶]_n-ONO₂、-[C(O)R₅]_m-[C(O)OR₆]_n-ONO₂，条件是R¹、R²、R³和R⁴不能全是H；每个R⁵和R⁶可以可以相同或不同，并独立地选自C_1-9烷基、C_2-9烯基、C_2-9炔基、C_1-9烷氧基、C_2-9烷氧基烷基、C_3-10环烷基、C_3-10环烷氧基和C_4-10元杂环基；其中所述C_1-9烷基、C_2-9烯基、C_2-9炔基、C_1-9烷氧基、C_2-9烷氧基烷基、C_3-10环烷基、C_3-10环烷氧基和C_4-10元杂环部分各自任选被卤素、氰基、硝基、叠氮基、N、O、S、NO₂或ONO₂中的一个或多个取代；每个m独立地选自1至6；以及每个n独立地选自1至6。

本发明的另一个方面中，提供式(I)化合物，其中R₁、R₂、R₃和R₄中的至少两个为H，或者其中R₁和R₂都是H，或者其中R₁、R₂和R₃为H，或者其中13位上的碳原子与14位上的碳原子之间的键为双键。

本发明的另一个方面中，提供式(I)化合物，其中R₁和R₂都是H，并且13位上的碳原子与14位上的碳原子之间的键为双键，或者其中R₁、R₂和R₃为H，并且13位上的碳原子与14位上的碳原子之间的键为双键。

本发明的另一个方面中，提供式(II)化合物或其药学上可接受的盐或立体异构体：

其中：符号

表示顺式或反式构型的单键或双键；R¹、R²、R³和R⁴各自独立地为H、-C(O)R⁵-ONO₂、-C(O)OR⁵-ONO₂、-C(O)R⁵R⁶-ONO₂、-[C(O)R⁵]_m-ONO₂、-C(O)R⁵-[OC(O)R⁶]_n-ONO₂、-C(O)R⁵-[(O)CR⁶]_n-ONO₂、-C(O)R⁵-[(O)R⁶]_n-ONO₂、-[C(O)R₅]_m-[C(O)OR₆]_n-ONO₂，条件是R¹、R²、R³和R⁴不能全是H；每个R⁵和R⁶可以相同或不同，并独立地选自C_1-9烷基、C_2-9烯基、C_2-9炔基、C_1-9烷氧基、C_2-9烷氧基烷基、C_3-10环烷基、C_3-10环烷氧基和C_4-10元杂环基；其中所述C_1-9烷基、C_2-9烯基、C_2-9炔基、C_1-9烷氧基、C_2-9烷氧基烷基、C_3-10环烷基、C_3-10环烷氧基和C_4-10元杂环部分各自任选被卤素、氰基、硝基、叠氮基、N、O、S、NO₂或ONO₂中的一个或多个取代；每个m独立地选自1至6；以及每个n独立地选自1至6。

本发明另一个方面中，提供式(II)化合物，其中R¹、R²、R³和R⁴中的至少两个为H，或者其中R¹和R²都是H，或者其中R²、R³和R⁴为H。

本发明另一个方面中，提供式(II)化合物，其中13位上的碳原子与14位上的碳原子之间的键为单键或双键。

本发明另一个方面中，提供式(II)化合物，其中R¹、R³和R⁴为H，并且13位上的碳原子与14位上的碳原子之间的键为单键。

本发明的另一个方面中，提供式(II)化合物，其中R₂、R₃和R₄为H，并且13位上的碳原子与14位上的碳原子之间的键为单键。

本发明的另一个方面中，提供式(III)化合物或其药学上可接受的盐或立体异构体：

其中：R¹、R²、R³和R⁴各自独立地为H、-C(O)R⁵-ONO₂、-C(O)OR⁵-ONO₂、-C(O)R⁵R⁶-ONO₂、-[C(O)R⁵]_m-ONO₂、-C(O)R⁵-[OC(O)R⁶]_n-ONO₂、-C(O)R⁵-[(O)CR⁶]_n-ONO₂、-C(O)R⁵-[(O)R⁶]_n-ONO₂、-[C(O)R₅]_m-[C(O)OR₆]_n-ONO₂，条件是R¹、R²、R³和R⁴不能全是H；每个R⁵和R⁶可以相同或不同，并独立地选自C_1-9烷基、C_2-9烯基、C_2-9炔基、C_1-9烷氧基、C_2-9烷氧基烷基、C_3-10环烷基、C_3-10环烷氧基和C_4-10元杂环基；其中所述C_1-9烷基、C_2-9烯基、C_2-9炔基、C_1-9烷氧基、C_2-9烷氧基烷基、C_3-10环烷基、C_3-10环烷氧基和C_4-10元杂环部分各自任选被卤素、氰基、硝基、叠氮基、N、O、S、NO₂或ONO₂中的一个或多个取代；每个m独立地选自1至6；以及每个n独立地选自1至6。

本发明的另一个方面中，提供式化合物(III)，其中R¹、R²、R³和R⁴中的至少两个为H。

本发明另一个方面中，提供式(IV)化合物或其药学上可接受的盐或立体异构体：

其中：R²、R³和R⁴各自独立地为H、-C(O)R⁵-ONO₂、-C(O)OR⁵-ONO₂、-C(O)R⁵R⁶-ONO₂、-[C(O)R⁵]_m-ONO₂、-C(O)R⁵-[OC(O)R⁶]_n-ONO₂、-C(O)R⁵-[(O)CR⁶]_n-ONO₂、-C(O)R⁵-[(O)R⁶]_n-ONO₂、-[C(O)R₅]_m-[C(O)OR₆]_n-ONO₂，条件是R²、R³和R⁴不能全是H；每个R⁵和R⁶可以相同或不同，并独立地选自C_1-9烷基、C_2-9烯基、C_2-9炔基、C_1-9烷氧基、C_2-9烷氧基烷基、C_3-10环烷基、C_3-10环烷氧基和C_4-10元杂环基；其中所述C_1-9烷基、C_2-9烯基、C_2-9炔基、C_1-9烷氧基、C_2-9烷氧基烷基、C_3-10环烷基、C_3-10环烷氧基和C_4-10元杂环部分各自任选被卤素、氰基、硝基、叠氮基、N、O、S、NO₂或ONO₂中的一个或多个取代；每个m独立地选自1至6；每个n独立地选自1至6。

本发明的另一个方面中，提供式化合物(IV)，其中R2、R3和R4中的至少两个为H。

本发明的另一个方面中，提供式化合物(V)或其药学上可接受的盐或立体异构体：

其中：R¹、R³和R⁴各自独立地为H、-C(O)R⁵-ONO₂、-C(O)OR⁵-ONO₂、-C(O)R⁵R⁶-ONO₂、-[C(O)R⁵]_m-ONO₂、-C(O)R⁵-[OC(O)R⁶]_n-ONO₂、-C(O)R⁵-[(O)CR⁶]_n-ONO₂、-C(O)R⁵-[(O)R⁶]_n-ONO₂、-[C(O)R₅]_m-[C(O)OR₆]_n-ONO₂，条件是R¹、R³和R⁴不能全是H；每个R⁵和R⁶可以相同或不同，并独立地选自C_1-9烷基、C_2-9烯基、C_2-9炔基、C_1-9烷氧基、C_2-9烷氧基烷基、C_3-10环烷基、C_3-10环烷氧基和C_4-10元杂环基；其中所述C_1-9烷基、C_2-9烯基、C_2-9炔基、C_1-9烷氧基、C_2-9烷氧基烷基、C_3-10环烷基、C_3-10环烷氧基和C_4-10元杂环部分各自任选被卤素、氰基、硝基、叠氮基、N、O、S、NO₂或ONO₂中的一个或多个取代；每个m独立地选自1至6；每个n独立地选自1至6。

本发明另一个方面中，提供式(V)化合物，其中R¹、R³和R⁴中的至少两个为H，或者其中R¹为H。

本发明另一个方面中，提供式(VI)化合物或其药学上可接受的盐或立体异构体：

其中：R¹、R²和R⁴各自独立地为H、-C(O)R⁵-ONO₂、-C(O)OR⁵-ONO₂、-C(O)R⁵R⁶-ONO₂、-[C(O)R⁵]_m-ONO₂、-C(O)R⁵-[OC(O)R⁶]_n-ONO₂、-C(O)R⁵-[(O)CR⁶]_n-ONO₂、-C(O)R⁵-[(O)R6]_n-ONO₂、-[C(O)R₅]_m-[C(O)OR₆]_n-ONO₂，条件是R¹、R²和R⁴不能全是H；每个R⁵和R⁶可以相同或不同，并各自独立地选自C_1-9烷基、C_2-9烯基、C_2-9炔基、C_1-9烷氧基、C_2-9烷氧基烷基、C_3-10环烷基、C_3-10环烷氧基和C_4-10元杂环基；其中所述C_1-9烷基、C_2-9烯基、C_2-9炔基、C_1-9烷氧基、C_2-9烷氧基烷基、C_3-10环烷基、C_3-10环烷氧基和C_4-10元杂环部分各自任选被卤素、氰基、硝基、叠氮基、N、O、S、NO₂或ONO₂中的一个或多个取代；每个m独立地选自1至6；以及每个n独立地选自1至6。

本发明另一个方面中，提供式(VI)化合物，其中R¹、R²和R⁴中的至少两个为H。

本发明的另一个方面中，提供式(VII)化合物或其药学上可接受的盐或立体异构体：

其中：R³和R⁴各自独立地为H、-C(O)R⁵-ONO₂、-C(O)OR⁵-ONO₂、-C(O)R⁵R⁶-ONO₂、-[C(O)R⁵]_m-ONO₂、-C(O)R⁵-[OC(O)R⁶]_n-ONO₂、-C(O)R⁵-[(O)CR⁶]_n-ONO₂、-C(O)R⁵-[(O)R⁶]_n-ONO₂、-[C(O)R₅]_m-[C(O)OR₆]_n-ONO₂，条件是R³和R⁴不能都是H；每个R⁵和R⁶可以相同或不同，并独立地选自C_1-9烷基、C_2-9烯基、C_2-9炔基、C_1-9烷氧基、C_2-9烷氧基烷基、C_3-10环烷基、C_3-10环烷氧基和C_4-10元杂环基；其中所述C_1-9烷基、C_2-9烯基、C_2-9炔基、C_1-9烷氧基、C_2-9烷氧基烷基、C_3-10环烷基、C_3-10环烷氧基和C_4-10元杂环部分各自任选被卤素、氰基、硝基、叠氮基、N、O、S、NO₂或ONO₂中的一个或多个取代；每个m独立地选自1至6；以及每个n独立地选自1至6。

本发明的另一个方面中，提供式(VIII)化合物或其药学上可接受的盐或立体异构体

其中：R¹和R⁴各自独立地为H、-C(O)R⁵-ONO₂、-C(O)OR⁵-ONO₂、-C(O)R⁵R⁶-ONO₂、-[C(O)R⁵]_m-ONO₂、-C(O)R⁵-[OC(O)R⁶]_n-ONO₂、-C(O)R⁵-[(O)CR⁶]_n-ONO₂、-C(O)R⁵-[(O)R⁶]_n-ONO₂、-[C(O)R₅]_m-[C(O)OR₆]_n-ONO₂，条件是R¹和R⁴不能都是H；每个R⁵和R⁶可以相同或不同，并独立地选自C_1-9烷基、C_2-9烯基、C_2-9炔基、C_1-9烷氧基、C_2-9烷氧基烷基、C_3-10环烷基、C_3-10环烷氧基和C_4-10元杂环基；其中所述C_1-9烷基、C_2-9烯基、C_2-9炔基、C_1-9烷氧基、C_2-9烷氧基烷基、C_3-10环烷基、C_3-10环烷氧基和C_4-10元杂环部分各自任选被卤素、氰基、硝基、叠氮基、N、O、S、NO₂或ONO₂中的一个或多个取代；每个m独立地选自1至6；以及每个n独立地选自1至6。

本发明另一个方面中，提供式(VIII)化合物，其中R¹为H。

本发明另一个方面中，提供式(IX)化合物或其药学上可接受的盐或立体异构体

其中：R¹和R²各自独立地为H、-C(O)R⁵-ONO₂、-C(O)OR⁵-ONO₂、-C(O)R⁵R⁶-ONO₂、-[C(O)R⁵]_m-ONO₂、-C(O)R⁵-[OC(O)R⁶]_n-ONO₂、-C(O)R⁵-[(O)CR⁶]_n-ONO₂、-C(O)R⁵-[(O)R⁶]_n-ONO₂、-[C(O)R₅]_m-[C(O)OR₆]_n-ONO₂，条件是R¹和R²不能都是H；每个R⁵和R⁶可以相同或不同，并独立地选自C_1-9烷基、C_2-9烯基、C_2-9炔基、C_1-9烷氧基、C_2-9烷氧基烷基、C_3-10环烷基、C_3-10环烷氧基和C_4-10元杂环基；其中所述C_1-9烷基、C_2-9烯基、C_2-9炔基、C_1-9烷氧基、C_2-9烷氧基烷基、C_3-10环烷基、C_3-10环烷氧基和C_4-10元杂环部分各自任选被卤素、氰基、硝基、叠氮基、N、O、S、NO₂或ONO₂中的一个或多个取代；每个m独立地选自1至6；以及每个n独立地选自1至6。

本发明另一个方面中，提供式(IX)化合物，其中R¹为H。

本发明另一个方面中，提供式(X)化合物或其药学上可接受的盐或立体异构体：

其中符号

表示顺式或反式构型的单键或双键；R³和R⁴各自独立地为H、-C(O)R⁵-ONO₂、-C(O)OR⁵-ONO₂、-C(O)R⁵R⁶-ONO₂、-[C(O)R⁵]_m-ONO₂、-C(O)R⁵-[OC(O)R⁶]_n-ONO₂、-C(O)R⁵-[(O)CR⁶]_n-ONO₂、-C(O)R⁵-[(O)R⁶]_n-ONO₂、-[C(O)R₅]_m-[C(O)OR₆]_n-ONO₂，条件是R³和R⁴不能都是H；每个R⁵和R⁶可以相同或不同，并独立地选自C_1-9烷基、C_2-9烯基、C_2-9炔基、C_{1- 9}烷氧基、C_2-9烷氧基烷基、C_3-10环烷基、C_3-10环烷氧基和C_4-10元杂环基；其中所述C_1-9烷基、C_2-9烯基、C_2-9炔基、C_1-9烷氧基、C_2-9烷氧基烷基、C_3-10环烷基、C_3-10环烷氧基和C_4-10元杂环部分各自任选被卤素、氰基、硝基、叠氮基、N、O、S、NO₂或ONO₂中的一个或多个取代；每个m独立地选自1至6；以及每个n独立地选自1至6。

本发明另一个方面中，提供式(X)化合物，其中13位上的碳原子与14位上的碳原子之间的键为双键。

本发明的另一个方面中，提供化合物或其药学上可接受的盐或立体异构体，所述化合物选自：

和

本发明的另一个方面中，提供式(I)至(X)中任一个的化合物，其用作药物，或用于制备用于治疗青光眼和眼高压症的药物。

本发明另一个方面中，提供药物组合物，其包含药学上可接受的载体和药学有效量的式(I)至(X)中任一个的化合物和／或其盐或立体异构体，或者为用于局部给药的合适形式的药物组合物。

本发明另一个方面中，提供本文所述药物组合物，其用于治疗青光眼和眼高压症，或者其中作为眼科可接受的载体中的溶液剂、混悬剂或乳剂给予所述化合物。

本发明的另一个方面中，提供治疗青光眼或眼高压症的方法，其包括使有效降低眼内压量的本文所述药物组合物与眼接触，以降低眼压并所将述压力保持在降低的水平。

本发明的另一个方面中，提供药物组合物，其包含本文所述式(I)至(X)中任一个的化合物和／或其盐或立体异构体与以下物质的混合物：(i)β-阻断剂、或者(ii)碳酸酐酶抑制剂、或者(iii)肾上腺素能激动剂；或它们的硝酰氧基衍生物。

定义

本文使用的术语“包含”和“包括”以其开放、非限制性含义使用。

本文使用的术语“取代的”表示指定基团或部分带有一个或多个取代基。术语“未取代的”表示指定基团不带有取代基。

本文使用的术语“任选取代的”表示指定基团未经取代或者被一个或多个取代基取代。

本文使用的术语“治疗(treat)”、“治疗(treating)”或“治疗(treatment)”包括防止性(preventative)(例如预防性)治疗和减轻性治疗。

本文使用的术语″药学上可接受的″表示载体、稀释剂、赋形剂和／或盐必须与制剂的其它成分相容，并且不能对其接受者有害。

本文使用的术语“烷基”表示直链或支链饱和烃。示例性烷基包括但不限于甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、异戊基、新戊基、叔戊基、1-甲基丁基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、己基、异己基、庚基、辛基等。

本文使用的术语“烯基”表示具有至少一个双键(即C＝C)的直链或支链烃。示例性烯基包括但不限于乙烯基、丙烯基、丁烯基、戊烯基、己烯基、庚烯基、辛烯基等。

本文使用的术语“炔基”表示具有至少一个叁键(即C≡C)的直链或支链烃。示例性炔基包括但不限于乙炔基、丙炔基、丁炔基、戊炔基、己炔基、庚炔基、辛炔基等。

本文使用的术语“环烷基”表示环状饱和烃。示例性环烷基包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基等。

本文使用的术语“环烯基”表示具有至少一个双键(即C＝C)的环状烃。示例性环烯基包括但不限于环丙烯基、环丁烯基、环戊烯基、环己烯基、环庚烯基、环辛烯基等。

本文使用的术语“环炔基”表示具有至少一个叁键(即C≡C)的环状烃。示例性环炔基包括但不限于环己炔基、环庚炔基、环辛炔基等。

本文使用的术语“烷氧基”表示通过氧键合的直链或支链饱和烷基。示例性烷氧基包括但不限于甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、丁氧基、异丁氧基、叔丁氧基、戊氧基、异戊氧基、新戊氧基、叔戊氧基、己氧基、异己氧基、庚氧基、辛氧基等。

本文使用的术语“亚烷基”表示直链或支链饱和烃，其中从每个末端碳除去氢原子。示例性亚烷基包括但不限于亚甲基、亚乙基、亚丙基、亚丁基、亚戊基、亚己基、亚庚基等。

本文使用的术语“卤素(halo)”或“卤素(halogen)”表示氟、氯、溴或碘。

本文使用的术语“杂环基(heterocyclic)”和“杂环基(heterocyclyl)”表示含有一个至四个各自独立地选自O、S和N的杂原子的芳族或非芳族环状基团，其中每个基团在其环系统中具有3至10个原子。非芳族杂环基包括在其环系统中仅具有3个原子的基团，而芳族杂环基在其环系统中具有至少5个原子。杂环基包括稠合环系统，例如苯并稠合环等。示例性的3元杂环基为氮丙啶；4元杂环基为氮杂环丁基(衍生自氮杂环丁烷)；5元杂环基为噻唑基；7元环杂环基为氮杂

基；以及10元杂环基为喹啉基。

非芳族杂环基的实例包括但不限于吡咯烷基、四氢呋喃基、二氢呋喃基、四氢噻吩基、四氢吡喃基、二氢吡喃基、四氢噻喃基、哌啶子基、吗啉代、硫代吗啉代、噻噁烷基、哌嗪基、氮杂环丁基、氧杂环丁基、硫杂环丁基、高哌啶基、氧杂环庚基、硫杂环庚基、氧氮杂

基、二氮杂

基、硫氮杂

基、1,2,3,6-四氢吡啶基、2-吡咯啉基、3-吡咯啉基、二氢吲哚基、2H-吡喃基、4H-吡喃基、二噁烷基、1,3-二氧戊环基、吡唑啉基、二噻烷基、二硫戊环基、二氢吡喃基、二氢噻吩基、二氢呋喃基、吡唑烷基、咪唑啉基、咪唑烷基、3-氮杂双环[3.1.0]己基、3-氮杂双环[4.1.0]庚基、3H-吲哚基和喹嗪基。

芳族杂环基(杂芳基)的实例包括但不限于吡啶基、咪唑基、嘧啶基、吡唑基、三唑基、吡嗪基、四唑基、呋喃基、噻吩基、异噁唑基、噻唑基、噁唑基、异噻唑基、吡咯基、喹啉基、异喹啉基、吲哚基、苯并咪唑基、苯并呋喃基、噌啉基、吲唑基、中氮茚基、酞嗪基、哒嗪基、三嗪基、异吲哚基、蝶啶基、嘌呤基、噁二唑基、噻二唑基、呋咱基、苯并呋咱基、苯并噻吩基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、喹唑啉基、喹喔啉基、二氮杂萘基和呋喃并吡啶基。

可能的话，前述基团可以是C-结合的(attached)或N-结合的。例如，衍生自吡咯的基团可以是吡咯-1-基(N-结合的)或吡咯-3-基(C-结合的)。此外，衍生自咪唑的基团可以是咪唑-1-基(N-结合的)或咪唑-3-基(C-结合的)。杂环基在每个环上可任选在任何一个或多个环碳、硫或氮原子上被一个或两个氧(氧代)取代。其中两个环碳原子被氧代部分取代的杂环基的实例为1,1-一二氧代-硫代吗啉基。

具有一个或两个独立选自氧、氮和硫的杂原子的五至六元杂环芳族环的实例包括但不限于异噻唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基等。

具有1至4个独立选自氧、硫和氮的杂原子的示例性部分饱和的、完全饱和的或完全不饱和的五至八元杂环包括但不限于3H-1,2-氧硫杂环戊烷基(oxathiolyl)、1,2,3-噁二唑基、1,2,4-噁二唑基、1,2,5-噁二唑基等。其它示例性五元环为呋喃基、噻吩基、2H-吡咯基、3H-吡咯甲酰(pyrroyl)、吡咯基、2-吡咯啉基、3-吡咯啉基、吡咯烷基、1,3-二氧戊环基、噁唑基、噻唑基、噻唑基、咪唑基、2H-咪唑基、2-咪唑啉基、咪唑烷基、吡唑基、2-吡唑啉基、吡唑啉基、异噁唑基、异噻唑基、1,2-二硫杂环戊烷基(dithiolyl)、1,3-二硫杂环戊烷基、3H-1,2-氧硫杂环戊烷基、1,2,3-噁二唑基、1,2,4-噁二唑基、1,2,5-噁二唑基、1,3,4-噁二唑基、1,2,3-三唑基、1,2,4-三唑基、1,3,4-噻二唑基、1,2,3,4-噁三唑基、1,2,3,5-噁三唑基、3H-1,2,3-二噁唑基、1,2,4-二噁唑基、1,3,2-二噁唑基、1,3,4-二噁唑基、5H-1,2,5-噁噻唑基和1,3-氧硫杂环戊烷基。其它示例性六元环为2H-吡喃基、4H-吡喃基、吡啶基、哌啶基、1,2-二氧杂环己烯基、1,3-二氧杂环己烯基、1,4-二噁烷基、吗啉基、1,4-二噻烷基、硫代吗啉基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、哌嗪基、1,3,5-三嗪基、1,2,4-三嗪基、1,2,3-三嗪基、1,3,5-三噻烷基(trithianyl)、4H-1,2-噁嗪基、2H-1,3-噁嗪基、6H-1,3-噁嗪基、6H-1,2-噁嗪基、1,4-噁嗪基、2H-1,2-噁嗪基、4H-1,4-噁嗪基、1,2,5-噁噻嗪基、1,4-噁嗪基、邻-异噁嗪基、对-异噁嗪基、1,2,5-噁噻嗪基、1,2,6-噁噻嗪基、1,4,2-噁二嗪基和1,3,5,2-噁二嗪基。其它示例性七元环为氮杂卓基、氧杂

基(oxepinyl)、硫杂

基(thiepinyl)和1,2,4-二氮杂卓基。其它示例性八元环为环辛基、环辛烯基和环辛二烯基。

示例性3-10元杂环基包括但不限于氧杂环丁烷、氮杂环丁烷、四氢呋喃、吡咯烷、2,5-二氢-1H-吡咯、1,3-一氧戊环、异噁唑烷、噁唑烷、吡唑烷、咪唑烷、吡咯烷-2-酮、四氢噻吩-1,1-二氧化物、吡咯烷-2,5-二酮、四氢-2H-吡喃、哌啶、1,2,3,6-四氢吡啶、1,4-二噁烷、吗啉、哌嗪、硫代吗啉、哌啶-2-酮、哌啶-4-酮、硫代吗啉-1,1-二氧化物、1,3-噁嗪烷(oxazinan)-2-酮、吗啉-3-酮、哌嗪-2-酮、氮杂环庚烷、1,4-氧杂环庚烷、1，4-二氮杂环庚烷、氮杂环庚烷-2-酮、1,4-二氮杂环庚烷-5-酮、奎宁环、2-氮杂-双环[2.2.1]庚烷、8-氮杂-双环[3.2.1]辛烷、5-氧杂-2-氮杂-双环[2.2.1]庚烷、2-氧杂-5-氮杂-双环[2.2.1]庚烷-3-酮、2-氧杂-5-氮杂-双环[2.2.2]辛烷-3-酮、1-甲基-5,6-吡咯基-7-氧杂-双环[2.2.1]庚烷、6-氮杂-双环[3.2.1]辛烷、3,8-二氮杂-双环[3.2.1]辛烷-2-酮、2,2-二甲基-四氢-3aH-[1，3]二氧杂环戊烯并[4，5-c]吡咯、3,3-环己基吡咯烷、1,5-二氧杂(diaxo)-9-氮杂螺[5.5]十一烷、八氢-1H-异吲哚、十氢喹啉、十氢异喹啉、八氢吡咯并[1，2a]吡嗪、八氢’1H-吡啶并[1，2a]吡嗪、八氢吡咯并[3，4-c]吡啶-3-酮、十氢吡嗪并[1，2-a]氮杂卓、呋喃、1H-吡咯、异噁唑、噁唑、1H-吡唑、1H-咪唑、噻唑、1，2，4-噁二唑、1,3,4-噁二唑、4H-1,2,4-三唑、1H-四唑、吡啶、哒嗪、嘧啶、吡嗪、吡啶-2(1H)-酮、1,4,5,6-四氢环戊二烯并[c]吡唑(1,4,5,6-tetrahydrocyclopenta[c]pyrazole)、6,7-二氢-5H-吡咯并[2，1-c][1，2，4]三唑、2,3-二氢咪唑并[2，1-b]噻唑、咪唑并[2，1-b][1，3,4-c]吡啶、4,5,6,7-四氢-3H-咪唑并[4，5-c]吡啶、5,6,7,8-四氢咪唑并[1，5-a]吡嗪、4,5,6,7-四氢噻唑[5，4-c]吡啶、5,6,7,8-四氢-[1，2，4]三唑并[4，3-a]吡嗪、喹啉、异喹啉、2,3-二氢苯并呋喃、5,6,7,8-四氢喹啉、3,4-二氢-1H-异色烯、1，2，3，4-四氢异喹啉、4H-苯并[d][1，3]二噁烷、5,6,7,8-四氢吡啶并[3，4-d]嘧啶、苯并呋喃、1H-吲哚、苯并[d]噁唑、1H-苯并[d]咪唑、H-咪唑并[1，2-a]吡啶、咪唑并[1，2-a]嘧啶、5,6,7,8-四氢咪唑并[1，5-a]吡嗪-3(2H)-酮、2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂卓、2,3,4,5-四氢苯并[f][1，4]氧杂卓、5,6,7,8-四氢-4H-异噁唑并[4，3-d]氧杂卓和6,7,8,9-四氢-2H-[1，2，4]三唑并[4，3-g][1，4]二氮杂卓-3(5H)-酮。

应理解，如果碳环部分或杂环部分可通过不同环原子(不指示具体的结合点)与指定底物键合或其它形式结合，则意欲涵盖所有可能的结合点，无论是通过碳原子或者是通过例如三价氮原子。例如，术语″吡啶基″表示2-、3-或4-吡啶基，术语″噻吩基″表示2-或3-噻吩基等等。

本发明化合物的药学上可接受的盐包括所述化合物的酸加成盐或碱盐(包括二盐)。合适的酸加成盐从形成无毒盐的酸形成。实例包括乙酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐(besylate)、碳酸氢盐／碳酸盐、硫酸氢盐／硫酸盐、硼酸盐、樟脑磺酸盐、柠檬酸盐、乙二磺酸盐(edisylate)、乙磺酸盐(esylate)、甲酸盐、富马酸盐、葡庚糖酸盐(gluceptate)、葡糖酸盐、葡糖醛酸盐、六氟磷酸盐、海苯酸盐(hibenzate)、盐酸盐／氯化物、氢溴酸盐／溴化物、氢碘酸盐／碘化物、羟乙磺酸盐、乳酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、丙二酸盐、甲磺酸盐、甲基硫酸盐、萘酸盐(naphthylate)、2-萘磺酸盐、烟酸盐、硝酸盐、乳清酸盐、草酸盐、棕榈酸盐、双羟萘酸盐、磷酸盐／磷酸氢盐／磷酸二氢盐、糖二酸盐、硬脂酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、甲苯磺酸盐和三氟乙酸盐。

合适的碱盐从形成无毒盐的碱形成。实例包括铝盐、精氨酸盐、苄星(benzathine)盐、钙盐、胆碱盐、二乙胺盐、二乙醇胺盐、甘氨酸盐、赖氨酸盐、镁盐、葡甲胺盐、乙醇胺(olamine)盐、钾盐、钠盐、氨丁三醇盐和锌盐。关于合适碱的综述，参见Stahl和Wermuth的“Handbook ofPharmaceutical Salts：Properties，Selection，and Use”(Wiley-VCH，Weinheim，Germany，2002)。

适当时，可通过将本发明化合物的溶液与所需的酸或碱混合在一起来容易地制备本发明化合物的药学上可接受的盐。所述盐可从溶液中沉淀并通过过滤来收集，或者可通过蒸发溶剂来回收。盐中的离子化程度可在完全离子化至几乎非离子化范围内变化。

作为络合物(例如笼形包合物和药物-宿主包合络合物)的本发明化合物在本发明范围内。与前述溶剂合物不同，所述药物和宿主以化学计算量或非化学计算量存在。本发明还包括含有可为化学计算量或非化学计算量的两种或更多种有机和／或无机组分的络合物。所得络合物可以是离子化的、部分离子化的或非离子化的。关于此类络合物的综述，参见Haleblian的J Pharm Sci，64(8)，1269-1288(1975年8月)。

本发明化合物包括其所有多晶型物和异构体，包括如下文定义的旋光异构体、几何异构体和互变异构体以及同位素标记的化合物。

含有一个或多个不对称碳原子的本发明化合物可作为两种或更多种立体异构体存在。当化合物含有烯基或亚烯基时，则有可能为几何顺式／反式(或Z／E)异构体。当所述化合物含有例如酮基团或肟基团或芳族部分时，可出现互变立体异构现象(互变异构现象(tautomerism))。所遵循的是单一化合物可呈现超过一种类型的异构现象。

本发明化合物的所有立体异构体、几何异构体和互变异构体形式都包括在本发明范围内，包括呈现超过一种类型的异构现象的化合物和它们中的一种或多种的混合物。还包括酸加成盐或碱盐，其中抗衡离子为旋光性的(例如D-乳酸盐或L-赖氨酸)或为外消旋的(例如DL-酒石酸盐或DL-精氨酸)。

可通过本领域技术人员熟知的常规技术(例如色谱法和分级结晶)来分离顺式／反式异构体。

用于制备／分离单独对映体的常规技术包括从合适的光学纯前体进行手性合成或使用例如手性高效液相色谱法(HPLC)拆分外消旋体(或盐或衍生物的外消旋体)。

或者，外消旋体(或外消旋前体)可与合适的旋光化合物例(如醇)反应，或者在其中本发明化合物含有酸性或碱性部分的情况下与酸或碱(例如酒石酸或1-苯乙基胺)反应。所得非对映体混合物可通过色谱法和／或分级结晶分离，并且通过技术人员熟知的手段将所述非对映体中的一种或两种都转化成相应的纯对映体。

可使用色谱法(通常是HPLC)在不对称树脂上获得富含对映体形式的本发明的手性化合物(及其手性前体)，使用由含有0至50％异丙醇(通常为2至20％)和0至5％烷基胺(通常为0.1％二乙胺)的烃(通常为庚烷或己烷)组成的流动相。浓缩洗脱液得到浓缩混合物(enriched mixture)。

可通常本领域技术人员已知的常规技术分离立体异构体的混合物[参见，例如E.L.Eliel的“Stereochemistry of Organic Compounds”(Wiley，NewYork，1994)]。

本发明包括所有药学上可接受的同位素标记的本发明化合物，其中一个或多个原子被具有相同原子数但原子质量或质量数不同于通常发现于自然界的原子质量或质量数的原子替换。

适于包含在本发明化合物中的同位素的实例包括氢的同位素，例如²H和³H；碳的同位素，例如¹¹C、¹³C和¹⁴C；氯的同位素，例如³⁶Cl；氟的同位素，例如¹⁸F；碘的同位素，例如¹²³I和¹²⁵I；氮的同位素，例如¹³N和15N，氧的同位素，例如¹⁵O、¹⁷O和¹⁸O；磷的同位素，例如³²p；和硫的同位素，例如³⁵S。

某些同位素标记的本发明化合物(例如并入放射性同位素的那些化合物)有用于药物和／或底物组织分布研究中。鉴于放射性同位素氚(即³H)和碳-14(即¹⁴C)容易并入且检测方式便利，它们特别有用于该目的。

用较重的同位素例如氘(即²H)取代可得到某些由较大的代谢稳定性带来的治疗益处，例如体内半衰期增加或剂量需求减少，并因此在一些情况下是优选的。

用正电子发射同位素(positron emitting isotope)例如¹¹C、¹⁸F、¹⁵O和¹³N取代可有用于检查底物受体占据的正电子发射断层扫描(Positron EmissionTopography)(PET)研究中。

同位素标记的本发明化合物通常可通过本领域技术人员已知的常规技术制备，或通过与在随附的“实施例和制备”中描述的那些方法类似的方法，使用适当的同位素标记的试剂代替之前采用的非标记试剂来制备。

本文在命名中使用的括号内的负符号或正符号表示平面偏振光的方向被特定立体异构体旋转。

本领域普通技术人员将意识到，本发明的某些化合物可含有一个或多个可处于特定立体化学构型或几何构型的原子，产生立体异构体和构型异构体。所有此类异构体和它们的混合物包括在本发明中。本发明化合物的溶剂合物(水合物)也包括在本发明内。

通过描述本发明的说明书和权利要求书，其它特征和优点将是显而易见的。

附图说明

图1：在眼高压灵长动物中局部剂量给予实施例B-1和比马前列素，在眼高压灵长动物中对B-1(方形)和比马前列素(圆形)的IOP应答，表达为从基线的百分比变化。

图2：在正常眼压狗中局部剂量给予实施例B-1和比马前列素，在正常眼压狗中对B-1(方形)和比马前列素(圆形)的IOP应答，表达为从基线的百分比变化。

发明详述

下面提供的实施例和制备进一步阐述和举例说明了本发明化合物和制备此类化合物的方法。应理解，本发明的范围不以任意方式受以下实施例和制备的范围限制。在以下实施例中，除非另有说明，具有单一手性中心的分子作为外消旋混合物存在。除非另有说明，具有两个或更多个手性中心的那些分子作为非对映体的外消旋混合物存在。可通过本领域技术人员已知的方法获得单种对映体／非对映体。

通常，可通过化学领域已知的方法制备本发明化合物，特别是按照本文所含的描述进行制备。将用于制备本发明化合物的某些方法作为本发明的进一步特征进行提供，并且在下面提供的反应方案中和在实验部分中阐述所述方法。这些反应中使用的各种保护基也是众所周知的，并在T.W.Greene和P.G.M.Wuts，Protective Groups In Organic Synthesis，第二版，John Wileyand Sons，Inc.1991，第227-229页中举例说明，为了所有目的，通过引用将该文献整体并入本文。

通过本发明化合物在常规分析(包括体内分析和受体结合分析)中的活性证明所述化合物作为药剂降低眼内压并因此治疗青光眼的效用。此类分析还提供了一种手段，通过该手段可将所述化合物的活性相互比较，以及与其它已知化合物的活性进行比较。这些比较的结果有用于确定在哺乳动物(包括人)中的剂量水平，用于治疗此类疾病。

意欲用于药物用途的本发明化合物可作为结晶产物或无定形产物进行给药。例如，它们可通过诸如沉淀、结晶、冷冻干燥、喷雾干燥或蒸发干燥等方法作为固体塞(solid plug)、粉末或薄膜获得。微波干燥或射频干燥可用于该目的。

意欲用于药物用途的本发明化合物可单独给药或与一种或多种本发明其它化合物联合给药，或与一种或多种其它药物(或为其任意组合)联合给药。通常，将它们作为与一种或多种与药学上可接受的赋形剂相结合的制剂进行给药。术语“赋形剂”在本文中用于描述不同于本发明化合物的任意成分。赋形剂的选择在很大程度上依赖于诸如特定的给药模式、赋形剂对溶解性和稳定性的影响、以及剂型的性质等因素。

适于递送本发明化合物的药物组合物和它们的制备方法对本领域技术人员来说是非常明显的。此类组合物和它们的制备方法可在例如‘Remington'sPharmaceutical Sciences'，第19版(Mack Publishing Company，1995)中找到。

可直接给药对眼施用本发明化合物(通常为于等渗、pH-调节的、无菌盐水中的微粒(micronised)悬浮液或溶液滴剂(drop)的形式)。适用于眼部施用的其它制剂包括软膏剂、可生物降解(例如可吸收凝胶海绵、胶原)和不可生物降解(例如硅酮)的植入物、糯米纸囊剂(wafer)、lenses和颗粒体系或囊泡体系，例如非离子表面活性剂囊泡(niosomes)或脂质体。可将聚合物与防腐剂(例如苯扎氯铵)掺混在一起，所述聚合物为例如交联聚丙烯酸、聚乙烯醇、透明质酸；纤维质聚合物例如羟丙基甲基纤维素、羟乙基纤维素或甲基纤维素；或杂多糖聚合物例如结冷胶(gelan gum)。

可将本发明化合物并入各种类型的眼科制剂中用于递送至眼。可将这些化合物与眼科可接受的防腐剂、表面活性剂、粘度增强剂、渗透增强剂、缓冲剂、氯化钠和水组合以形成含水的无菌眼用悬浮液或溶液。为了制备无菌眼用软膏制剂，将活性成分与防腐剂在适当的载体(例如矿物油、液体羊毛脂或白凡士林)中组合。可通过将活性成分悬浮在亲水基质中来制备无菌眼用凝胶制剂，按照出版的用于类似眼用制剂的配方，从例如卡波普-940等等的组合来制备所述亲水基质；可并入防腐剂和张力剂(tonicity agents)。可通过将活性成分溶解在生理学上可接受的等渗含水缓冲液中来制备眼用溶液制剂。此外，所述眼用溶液可包括眼科可接受的表面活性剂以帮助溶解活性成分。此外，眼用溶液可含有诸如羟甲基纤维素、羟乙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、甲基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮等增稠剂来改善药物在结膜囊中的停留。

优选将本发明化合物配制为pH为约4.5至7.8的局部眼用悬浮液或溶液。所述化合物通常含在这些制剂中，其量为0.1％至10wt％，但其量优选为0.25％至5.0wt％。因此，对于局部处方(topical presentation)，按照熟练临床医师的常规判断，将1至3滴这些制剂递送至眼睛表面，每天1至4次。

可将本发明化合物与可溶大分子实体(例如环糊精及其合适的衍生物或含聚乙二醇的聚合物)组合，以便改善它们用于任意前述给药模式中的溶解度、溶出率、味道掩蔽性(taste-masking)、生物利用度和／或稳定性。

例如，发现药物-环糊精络合物通常有用于大多数剂型和给药途径。既可使用包合络合物，又可使用非包合络合物(non-inclusion complexes)。作为与药物直接络合的替代方式(alternative)，可将环糊精用作辅助添加剂，即，作为载体、稀释剂或增溶剂。用于这些目的最常使用的是α-／β-和γ-环糊精，其实例可在国际专利申请WO91／11172、WO94／02518和WO98／55148中找到。

根据疾病和患者的状况，本文使用的术语“治疗”可包括治愈性治疗、姑息性治疗和预防性治疗中的一种或多种。

如上所述，本发明的目的还在于药物组合物，其含有至少一种式(I)的本发明化合物连同在药物领域通常使用的无毒助剂和/或载体。

优选的给药途径为局部给药。可作为在眼科可接受的载体中的溶液、悬浮液或乳液(分散体)给予本发明化合物。本文使用的术语“眼科可接受的载体”指任意物质或物质的组合，所述物质不与所述化合物反应并适合给予患者。

优选适合局部施用至患者眼部的含水载体。

希望用于本发明眼用组合物中的其它成分可包括抗微生物剂、防腐剂、助溶剂、表面活性剂和增粘剂(viscosity building agents)。

本发明还涉及治疗青光眼或眼高压症的方法，其包括使有效降低眼内压量的组合物与眼接触，以便降低眼压并将所述压力保持在降低的水平。

前列腺素硝基衍生物的剂量可通过标准临床技术来确定，并且与如在以下文献中所报道的对于相应未衍生的商购前列腺素化合物所描述的那些剂量处于相同范围或比之更小：Physician's Desk Reference，Medical EconomicsCompany，Inc.，Oradell，N.J.，第58版，2004；The pharmacological basis ofthera_peutics，Goodman and Gilman，J.G.Hardman，L. e.Limbird,第10版。

对于每次应用，所述组合物含有0.1-0.30μg，尤其1-10μg活性化合物。

可如下所述有利地进行治疗：将一滴组合物(对应于约30μl)给予患者眼睛，每天约1至2次。

进一步考虑到，本发明化合物可与已知有用于治疗青光眼或眼高压症的其它药物一起使用(分开使用或联合使用)。例如本发明化合物可与以下药物联合：(i)β-阻断剂，例如噻吗洛尔(timolol)、倍他洛尔(betaxolol)、左布诺洛尔(levobunolol)等(参见美国专利No.4,952,581)；(ii)碳酸酐酶抑制剂，例如布林唑胺(brinzolamide)；(iii)肾上腺素能激动剂，包括可乐定衍生物(clonidine derivative)，例如阿可乐定(apraclonidine)或溴莫尼定(brimonidine)(参见美国专利No.5,811,443)。还考虑与以上报道的硝酰氧基衍生物(例如β-阻断剂的硝酰氧基衍生物，例如在美国专利No.6,242,432中描述的那些化合物)的组合。

以下非限制性制备和实施例说明了本发明化合物的制备。

实施例

在下述实施例中，除非另有说明，所有的温度以摄氏度给出，并且所有的份数和百分比以重量计。试剂可从商业供应商(例如Sigma-AldrichChemical Company、Acros Organics或Lancaster Synthesis Ltd)处购买，并且除非另有说明，可未经进一步纯化而使用。四氢呋喃(THF)、二氯甲烷(CH₂Cl₂或DCM)、N,N-二甲基乙酰胺(DMA)、乙腈(MeCN或ACN)和N,N-二甲基甲酰胺(DMF)可从Aldrich购买(置于Sure-Seal瓶中)并且原样使用。除非另有说明，所有的溶剂可使用本领域技术人员已知的标准方法进行纯化。乙醚缩写为Et₂O。乙酸乙酯缩写为EtOAc或EA。三氟乙酸缩写为TFA。乙酸缩写为HOAc或AcOH。三氟甲磺酸酯(或triflate)缩写为“OTf”。叔丁氧羰基缩写为BOC。4-(N，N-二甲基氨基)吡啶缩写为DMAP。N-甲基-吗啉缩写为NMM。乙酸酐缩写为Ac₂O。N-(3-二甲基氨基丙基)-N'-乙基碳二亚胺盐酸盐缩写为EDAC或EDC。

以下阐述的反应通常在氩气或氮气正压条件下或在带有干燥管的条件下，于环境温度(除非另有说明)在无水溶剂中进行，并且反应烧瓶配备有橡胶隔片用于经由注射器引入底物和试剂。烘箱干燥和／或热干燥玻璃器皿。使用EmrysTM Optimizer EXP(来自Personal Chemistry，Inc(现在为Biotage))进行微波化学(反应)。使用玻璃支撑的硅胶60F254预涂覆的板(MerckArt5719)进行分析性薄层色谱(TLC)并用适当的溶剂比率(v／v)洗脱。通过TLC或LCMS分析反应并通过判断原料的消耗来终止反应。TLC板的显色(Visualization)用UV光进行(254nm波长)或用适当的TLC显色溶剂进行并用加热活化。用Waters或Agilent设备实施分析HPLC。使用硅胶60(Merck Art9385)或各种MPLC系统(例如Biotage或ISCO纯化系统(即，Biotage SP4型))实施快速柱色谱(Still等，J.Org.Chem.，1978，43，2923)。用以下数种方法进行制备HPLC：来自Water的制备LC4000系统，使用来自Peeke Scientific的ULtra12010mm C8柱；具有AgilentA2Prep系统的质量指导的制备HPLC(Mass-directed prep HPLC)，使用计算机控制的两个流动相梯度(含有0.1％甲酸的100％水，和含有0.1％甲酸的100％乙腈)，通过XBridge C18柱(250mm x30mm，5μm粒度)，通过UV二极管阵列和(ESI)质谱仪的检测器串联引导级分收集。纯化在来自Berger Instruments的MμLtigram II SFC上实施超临界流体色谱(SFC)，使用ProNTo软件平台。通常使用Chiralpak AS-H21.2x250mm5u柱，并在140巴下，用含20％MeOH的CO₂进行洗脱。流速为60mL／min。用260nm处的UV检测来收集峰。

通过一种或多种以下方法来确认以下实施例中的化合物结构：质子核磁共振谱、质谱和元素微量分析。使用在300、400或700兆赫(MHz)场强度下操作的Bruker波谱仪来测定质子核磁共振(¹H NMR)谱。从内标四甲基硅烷向低磁场，以百万分率(ppm，δ)记录化学位移。或者，参照相对于如下的来自氘代溶剂中残留质子的信号提及¹H NMR谱：CDCl₃＝7.25ppm；DMSO-d₆＝2.49ppm；CD₃CN＝1.94ppm，CD₃OD或甲醇-d₄＝3.30ppm；C₆D₆＝7.16ppm。峰的多重性如下指定：s，单峰；d，二重峰；dd，双二重峰；t，三重峰；dt，双三重峰；q，四重峰；br，宽峰；m，多重峰。以赫兹(Hz)给出偶合常数。对于所选实施例的详细结构说明-使用以下仪器获得质子、gCOSY、gHSQC和gHMBC NMR谱：配备有冷冻探针的Bruker Avance700MHzNMR波谱仪，其中分别将质子线圈和碳线圈调至700.13MHz和176.07MHz。使用溶解于0.75mL二甲基亚砜(d-6；99.8％D)中的约10mg样品的溶液来获得所述波谱，其参照溶剂信号(对于质子为2.50ppm，对于碳为39.51ppm)。

使用具有APCI或(ESI)电离的Agilent LC质谱仪获得质谱(MS)数据。在Agilent G3250AA LCMSD／TOF质谱仪上实施高分辨MS(HRMS)。元素微量分析由Atlantic Microlab Inc.实施，并给出关于元素的结果，在理论值的±0.4％内陈述。

可用与以下具体描述的那些方式类似的方式制备本发明的优选化合物。

以下提供的实施例和制备进一步阐述并举例说明了本发明化合物和制备此类化合物的方法。应理解，本发明的范围不以任何方式受到以下实施例和制备的范围限制。本领域技术人员将意识到，在以下描述中，不同的酸、胺、烷基卤、芳基卤、偶合试剂和杂环可被取代，以适应所需的实施方案的制备的要求。可将以下方法的规模扩大或缩小以适应所需物质的量的要求。

方案A

实施例A-1(NCX469)

(1S,2E)-3-{(1R,2R,3S,5R)-2-[(2Z)-7-(乙基氨基)-7-氧代庚-2-烯-1-基]-3，5-二羟基环戊基}-1-(2-苯基乙基)丙-2-烯-1-基4-(硝酰氧基)丁酸酯(A-1)

按照类似于来自Bundy，G.L.；Peterson，D.C.；Cornette，J.C.；Miller，W.L.；Spilman，C.H.；Wilks，J.W.J.Med.Chem.1983，26，1089-1099的程序，向比马前列素(bimataprost)(Cayman Chemicals；200mg，0.481mmol)的二氯甲烷(4.8mL)溶液中加入丁基硼酸(55.0mg，0.541mmol)。在42℃下1小时后，蒸发一些二氯甲烷并加入新鲜的二氯甲烷。将该蒸发-加入新鲜溶剂的(操作)顺序重复三次。加入分子筛，将混合物在42℃下搅拌18小时。加入4-溴丁酰氯(0.061mL，0.53mL)，允许在环境温度下搅拌48小时。减压除去溶剂，将残余物溶解在乙腈(2.4mL)中。加入硝酸银(163mg，0.962mmol)，允许在环境温度下搅拌18小时。加入另外100mg硝酸银并在40℃下搅拌2小时。使所得混合物过滤通过硅藻土，用乙腈将其洗涤。将滤液浓缩并溶解在乙酸乙酯(10mL)和盐水(2.5mL)中。分离有机层，用盐水(2×2.5mL)洗涤并减压浓缩。残余物通过制备反相HPLC纯化(水：乙腈65→25％，含有0.1％乙酸)，减压浓缩纯级分，得到A-1(57mg，22％)，为黄色油状物。使用COSY和HMBC NMR证实了在C-15处的醇的酰化区域选择性(regiochemistry)。观察到H₁₅和C₁₃、C₁₄、C₁₆、C₁₇、C₂₄、H₁₄和H₁₆之间的相关性，如以下结构中所描述：

具体地，在这些多重NMR分析后，将次甲基质子指定为C15，δ5.20(q，J＝6.47Hz，1H)，其进而在HMBC中显示了除与C13、14、16和17相关外，还与在δ171处的酯羰基相关。

¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ1.00(t，J＝7.16Hz，3H)，1.27-1.58(m，4H)，1.83-2.04(m，9H)，2.07-2.30(m，3H)，2.45(t，J＝7.25Hz，2H)，2.62(t，J＝7.72Hz，2H)，2.97-3.12(m，2H)，3.63-3.77(m，1H)，3.88-3.97(m，1H)，4.41(s，1H)，4.51-4.63(m，3H)，5.20(q，J＝6.47Hz，1H)，5.25-5.34(m，1H)，5.38-5.57(m，3H)，7.14-7.22(m，3H)，7.25-7.34(m，2H)，7.70(s，1H)。

¹³C NMR(176MHz，DMSO-d₆)δ14.81，21.76，24.81，25.32，26.29，29.92，30.89，33.21，34.92，35.69，40.01，44.01，48.75，54.24，69.49，72.89，73.80，75.47，125.86，128.22，128.35，128.99，129.31，135.81，141.22，171.36，171.57。

LCMS(ESI)：m／z585.0[MK]⁺。

HRMS(TOF)：C₂₉H₄₂N₂O₈Na的计算值[MNa]⁺：569.28334。实测值：569.28202。

C₂₉H₄₂N₂O₈-0.8H₂O的分析计算值：C，62.08；H，7.83；N，4.99。实测值：C，61.87；H，7.82；N，4.95。

方案B

实施例B-1(NCx470)

(1S，2E)-3-{(1R，2R，3S，5R)-2-[(2Z)-7-(乙基氨基)-7-氧代庚-2-烯-1-基]-3，5-二羟基环戊基}-1-(2-苯基乙基)丙-2-烯-1-基6-(硝酰氧基)己酸酯(B-1)

步骤1：(5Z)-7-{(6R，7R)-3-丁基-7-[(1E，3S)-3-羟基-5-苯基戊-1-烯-1-基]-2，4-二氧杂-3-硼杂双环[3.2.1]辛-6-基}-N-乙基庚-5-烯酰胺(b-1)

按照类似于来自Bundy，G.L.；Peterson，D.C.；Cornette，J.C.；Miller，W.L.；Spilman，C.H.；Wilks，J.W.J.Med.Chem.1983，26，1089-1099的程序，向比马前列素(Cayman Chemicals16820，Lot188757；679mg，1.63mm0l)的DCM(10.9mL)溶液中加入丁基硼酸(187mg，1.84mmol)。在42℃下1小时后，减压除去溶剂并在高真空泵条件下干燥2小时。加入新鲜DCM并在42℃下搅拌另外1小时。除去溶剂并在高真空泵条件下干燥1.5小时。再次加入新鲜DCM并在42℃下搅拌16小时。蒸发溶剂并在真空烘箱中在45℃下干燥3小时，得到904mg(100％)硼酸酯b-1，为油状物，其未经进一步纯化而直接用于下一步骤。

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δ0.50-0.66(m，2H)，0.76-0.91(m，3H)，0.98(t，J＝7.20Hz，3H)，1.16-1.35(m，4H)，1.52(quin，J＝7.39Hz，2H)，1.57-1.71(m，2H)，1.74(br.s.，1H)，1.78-2.09(m，6H)，2.08-2.23(m，2H)，2.23-2.32(m，1H)，2.52-2.65(m，2H)，2.95-3.12(m，2H)，3.79-3.93(m，1H)，4.02(s，1H)，4.25(br.s.，1H)，4.75(d，J＝4.55Hz，1H)，5.26-5.54(m，4H)，7.09-7.22(m，3H)，7.26(t，J＝7.45Hz，2H)，7.62-7.82(m，1H)。

步骤2：(1S，2E)-3-{(6R，7R)-3-丁基-7-[(2Z)-7-(乙基氨基)-7-氧代庚-2-烯-1-基]-2，4-二氧杂-3制杂双环[3.2.1]辛-6-基}-1-(2-苯基乙基)丙-2-烯-1-基6-溴己酸酯(b-2)

在0℃下，向(5Z)-7-{(6R，7R)-3-丁基-7-[(1E，3S)-3-羟基-5-苯基戊-1-烯-1-基]-2，4-二氧杂-3-硼杂双环[3.2.1]辛-6-基}-N-乙基庚-5-烯酰胺(b-1；1.63mmol)的DCM(12mL)溶液中缓慢引入DMAP(226mg，1.79mmol)和6-溴己酰氯(282μL，1.88mmol)。在环境温度下3天后，加入另外0.25当量DMAP(57mg)和0.25当量6-溴己酰氯(71μL)，允许在环境温度下搅拌一天。加入另外0.25当量6-溴己酰氯(71μL)并在环境温度下搅拌16小时。混合物用DCM稀释并用水(1x)和盐水(1x)洗涤。DCM层经无水硫酸钠干燥并浓缩，得到1330mg粗制酯b-2，为浅黄色油状物，其未经进一步纯化而使用。

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δ0.57(s，2H)，0.77-0.92(m，3H)，0.98(t，J＝7.20Hz，3H)，1.18-1.32(m，4H)，1.39(d，J＝6.57Hz，3H)，1.46-1.64(m，4H)，1.81(dt，J＝13.89，6.95Hz，6H)，1.95-2.08(m，3H)，2.08-2.24(m，2H)，2.29(t，J＝7.20Hz，3H)，2.51-2.62(m，3H)，3.03(dd，J＝7.33，5.56Hz，2H)，3.62(d，J＝6.57Hz，2H)，4.01(s，1H)，4.19-4.33(m，1H)，5.03-5.18(m，1H)，5.36(d，J＝6.32Hz，2H)，5.47-5.57(m，2H)，7.16(d，J＝7.58Hz，3H)，7.26(d，J＝7.07Hz，2H)，7.61-7.81(m，1H)。

步骤3：(1S，2E)-3-{(1R，2R，3S，5R)-2-[(2Z)-7-(乙基氨基)-7-氧代庚-2-烯-1-基]-3，5-二羟基环戊基}-1-(2-苯基乙基)丙-2-烯-1-基6-(硝酰氧基)己酸酯(B-1)

向(1S，2E)-3-{(6R，7R)-3-丁基-7-[(2Z)-7-(乙基氨基)-7-氧代庚-2-烯-1-基]-2，4-二氧杂-3-硼杂双环[3.2.1]辛-6-基}-1-(2-苯基乙基)丙-2-烯-1-基6-溴己酸酯(b-2；1.63mmol)的MeCN(10.1mL)溶液中加入硝酸银(1030mg，6.06mmol)。在环境温度下搅拌两天后，加入另外0.5当量硝酸银(217mg)并在环境温度下搅拌三天。使混合物过滤通过硅藻土垫。固体用EtOAc洗涤。浓缩滤液，并将残余物溶解在EtOAc中。溶液用水(1x)和盐水(1x)洗涤，经无水硫酸钠干燥并浓缩，得到粗产物，然后通过制备反相HPLC纯化所述粗产物(水：乙腈，含有0.1％乙酸)，得到372mg(39.7％)硝酸酯B-1，为浅黄褐色油状物(yellow-brownish oil)。

¹H NMR(700MHz，DMSO-d₆)δ0.97(t，J＝7.08Hz，3H)，1.28-1.37(m，3H)，1.42(ddd，J＝14.04，5.64，2.43Hz，1H)，1.47(qd，J＝7.45，7.30Hz，2H)，1.52-1.58(m，J＝7.63，7.63，7.52，7.30Hz，2H)，1.62-1.68(m，J＝7.35，7.35，7.19，6.86Hz，2H)，1.81-1.90(m，2H)，1.93(q，J＝7.08Hz，3H)，1.97(t，J＝7.52Hz，2H)，2.08(dd，J＝13.49，5.97Hz，1H)，2.13-2.21(m，2H)，2.29(t，J＝7.30Hz，2H)，2.58(t，J＝7.96Hz，2H)，2.99-3.05(m，2H)，3.66(t，J＝7.96Hz，1H)，3.89(d，J＝3.54Hz，1H)，4.40(d，J＝4.87Hz，1H)，4.49(t，J＝6.63Hz，1H)，4.56(d，J＝5.75Hz，1H)，5.15(q，J＝6.63Hz，1H)，5.26(t，J＝7.08Hz，1H)，5.38-5.45(m，1H)，5.45-5.52(m，1H)，7.16(d，J＝7.96Hz，2H)，7.26(t，J＝7.52Hz，1H)，7.63-7.73(m，1H)。

¹³C NMR(101MHz，DMSO-d₆)δ14.79，24.02，24.57，24.78，25.31，25.71，26.28，30.89，33.19，33.48，34.91，35.74，44.01，48.75，54.18，69.47，73.3，73.65，75.48，125.83128.20，128.32，128.95，129.09，129.29，135.61，141.21，171.53，171.97。

基于对质子化学位移、积分、偶合，以及在2D谱中观察到的关键的同-和杂-核相关的详细检查，发现质子、gCOSY、gHSQC和gHMBC NMR谱与描述的结构一致。HSQC谱中不存在碳相关，这允许鉴定羟基质子。在COSY谱中观察到来自羟基质子与相邻的次甲基和亚甲基质子的相关性，这使得能确定环戊基环的取代。在HMBC谱中观察到来自羟基和次甲基信号与明显的碳共振的关键相关，这允许进一步证实结构。

对于实施例B-1观察到的关键COSY相关：

COSY和HSQC帮助将羟基质子指定(assigned)为在δ4.56(d，J＝5.75Hz，1H)和4.40(d，J＝4.87Hz，1H)处的共振，以及将次甲基质子如下指定：C-9的次甲基质子指定为δ3.89(d，J＝3.54Hz，1H)，C-11的次甲基质子指定为δ3.66(t，J＝7.96Hz，1H)，以及C15的次甲基质子指定为δ5.15(q，J＝6.63Hz，1H)。

对于实施例B-1观察到的关键HMBC相关性：

在HMBC谱中，发现C-15处的质子(指定为在δ5.15(q，J＝6.63Hz，1H)处的共振)与在δ171.97处的酯的羰基存在针对结合位点的关键相关。

LCMS(ES-API)：m／z597.2(M+Na)⁺。

元素分析：C₃₁H₄₆N₂O₈的计算值：C，64.79；H，8.07；N，4.87。实测值：C，64.71；H，8.08；N，4.90。

方案C

实施例C-1(NCX471)

(1S,2E)-3-{(1R,2R,3S,5R)-2-[(2Z)-7-(乙基氨基)-7-氧代庚-2-烯-1-基]-3,5-二羟基环戊基}-1-(2-苯基乙基)丙-2-烯-1-基3-(2-{2-[2-(硝酰氧基)乙氧基]乙氧基}乙氧基)丙酸酯(C-1)

步骤1：3-(2-{2-[2-(硝酰氧基)乙氧基]乙氧基}乙氧基)丙酸叔丁酯(c-1)

在-50℃下，向12-羟基-4,7，10-三氧杂癸酸(trioxRdodecanoate)叔丁酯(Fluka；2.50g，8.98mmol)的二氯甲烷(45mL)溶液中加入四乙基硝酸铵(3.45g，18.0mmol)，然后加入2，6-二-叔丁基吡啶(2.98mL，13.50mmol)。缓慢加入在二氯甲烷(0.5mL)中的三氟甲磺酸酐(1.66mL，9.88mmol)，在-50℃下搅拌1小时，然后使其经18小时温热至室温。加入二氯甲烷(45mL)和1N HCl水溶液(45mL)。分离有机层，用盐水(45mL)洗涤，干燥(MgSO₄)并减压浓缩。残余物通过柱色谱纯化(乙酸乙酯-己烷10-100％)，得到c-1(2.68g，92％)，为无色油状物。

¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ1.41(s，9H)，2.43(t，J＝6.2Hz，2H)，3.48-3.56(m，8H)，3.60(t，J＝6.2Hz，2H)，3.68-3.77(m，2H)，4.60-4.73(m，2H)。

HRMS(TOF)：C₁₃H₂₆NO₈[MH]⁺的计算值：324.16529。实测值：324.16601。

C₁₃H₂₅NO₈的分析计算值：C，48.29；H，7.79；N，4.33。实测值：C，48.21；H，7.96；N，4.39。

步骤2：3-(2-{2-[2-(硝酰氧基)乙氧基]乙氧基}乙氧基)丙酸(c-2)

在0℃下，向c-1(1.0g，3.1mmol)的二氯甲烷(7.5mL)溶液中加入三氟乙酸(7.5mL)，使其经3小时温热至环境温度。加入甲苯(2mL)，然后减压浓缩混合物，得到酸c-2(0.87g，100％)，为无色油状物，其未经进一步纯化而使用。

¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ2.46(t，J＝6.3Hz，2H)，3.49-3.58(m，8H)，3.62(t，J＝6.4Hz，2H)，3.70-3.76(m，2H)，4.59-4.73(m，2H)。

LCMS(ESI)：m／z268.1[MH]⁺。

HRMS(TOF)：C₉H₁₈NO₈[MH]⁺的计算值：268.10269。实测值：268.10435。

步骤3：(1S，2E)-3-{(1R，2R，3S，5R)-2-[(2Z)-7-(乙基氨基)-7-氧代庚-2-烯-1-基]-3,5-二羟基环戊基}-1-(2-苯基乙基)丙-2-烯-1-基3-(2-{2-[2-(硝酰氧基)乙氧基]乙氧基}乙氧基)丙酸酯(C-1)

向酸c-2(204mg，0.764mmol)的二氯甲烷(2.5mL)0℃溶液中加入草酰氯(0.065mL，0.764mmol)，使其温热至环境温度，保持18小时。加入在二氯甲烷(1mL)中的粗制醇b-1(727mg，1.44mmol)，然后加入NMM(0.113mL，1.02mmol)和DMAP(6.2mg，0.051mmol)，允许在环境温度下搅拌18小时。将混合物冷却至0℃，加入另外的草酰氯(0.035mL)，并使其经18小时温热至环境温度。用水(0.5mL)猝灭混合物并真空浓缩。残余物通过制备反相HPLC纯化(水：乙腈60→25％，含有0.1％乙酸)，减压浓缩纯级分，得到C-1(38mg，11％)，为无色油状物。

¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ0.98(t，J＝7.16Hz，3H)，1.22-1.36(m，1H)，1.40-1.56(m，3H)，1.79-2.03(m，7H)，2.06-2.29(m，3H)，2.53-2.65(m，4H)，2.94-3.11(m，2H)，3.44-3.53(m，8H)，3.60-3.71(m，5H)，3.85-3.94(m，1H)，4.37-4.41(m，1H)，4.54-4.59(m，1H)，4.61-4.65(m，2H)，5.13-5.22(m，1H)，5.23-5.30(m，1H)，5.38-5.43(m，1H)，5.46-5.51(m，2H)，7.14-7.20(m，3H)，7.23-7.31(m，2H)，7.63-7.73(m，1H)。

LCMS(ESI)：m／z687.2[MNa]⁺。

HRMS(TOF)：C₃₄H₅₂N₂O₁₁Na[MNa]⁺的计算值：687.34633。实测值：687.35495。

方案D

实施例D-1

(1R)-3-{(1R,2R,3S,5R)-2-[(2Z)-7-(乙基氨基)-7-氧代庚-2-烯-1-基]-3,5-二羟基环戊基}-1-(2-苯基乙基)丙基4-(硝酰氧基)丁酸酯(D-1)

对于第一步骤，以类似于实施例A-1的顺序：按照来自Bundy，G.L.；Peterson，D.C.；Cornette，J.C.；Miller，W.L.；Spilman，C.H.；Wilks，J.W.J.Med.Chem.1983，26，1089-1099的程序，向拉坦前列素乙酰胺(CaymanChemicals Lot181408；730mg，1.75mmol)的二氯甲烷(17.5mL)溶液中加入丁基硼酸(200mg，1.97mmol)。在42℃下1小时后，减压除去溶剂，在高真空泵下干燥2小时。加入新鲜DCM并在42℃下搅拌另外一小时。除去溶剂并在高真空泵下干燥1.5小时。再次加入新鲜DCM并在42℃下搅拌16小时。蒸发溶剂并在高真空泵下干燥3.5小时，得到767mg(71.0％)硼酸酯d-1，为无色油状物，其未经进一步纯化而直接在下一步骤中使用。

对于第二步骤，以类似于实施例A-1的顺序：在0℃下，向粗制(5Z)-7-{(6R,7R)-3-丁基-7-[(3R)-3-羟基-5-苯基戊基]-2，4-二氧杂-3-硼杂双环[3.2.1]辛-6-基}-N-乙基庚-5-烯酰胺(d-1；308mg，0.637mmol)的DCM(6.4mL)溶液中加入N-甲基吗啉(69mg，0.669mmol)和4-溴丁酰氯(148mg，0.796mmol)。允许温热混合物并在环境温度下搅拌22小时。加入DCM(20mL)和水(5mL)。分离有机层，用盐水(5mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，减压浓缩，得到340mg(46％)溴代酯d-2，为黄色油状物，其未经进一步纯化而使用。

对于第三步骤，以类似于实施例A-1的顺序：将粗制(1S，2E)-3-{(6R，7R)-3-丁基-7-[7-(乙基氨基)-7-氧代庚基]-2，4-二氧杂-3-硼杂双环-[3.2.1]辛-6-基}-1-(2-苯基乙基)丙-2-烯-1-基4-溴丁酸酯(d-2；340mg，通过HPLC纯化为46％纯，理论上为0.247mmol)溶解在乙腈(5.4mL)中。加入硝酸银(160mg，0.942mmol)并在环境温度下搅拌三天。加入另外91mg硝酸银并在60℃下搅拌4小时。使所得混合物过滤通过硅藻土垫，将其用EtOAc洗涤。浓缩滤液并溶解在乙酸乙酯(10mL)中，用水(1x)和盐水(1x)洗涤，减压浓缩。残余物通过制备反相HPLC纯化(水：乙腈65→25％，含有0.1％乙酸)，减压浓缩纯级分，得到13mg(9.6％)硝酸酯D-1，为黄色油状物。

¹H NMR(400MHz，氯仿-d)δ1.06-1.17(m，3H)，1.29-1.48(m，2H)，1.61-1.79(m，6H)，1.81-1.94(m，4H)，2.04(qd，J＝6.74，6.57Hz，4H)，2.08-2.26(m，4H)，2.31-2.48(m，3H)，2.63(dt，J＝9.16，6.54Hz，2H)，2.76-3.02(m，1H)，3.20-3.36(m，2H)，3.90(br.s.，1H)，4.15(br.s.，1H)，4.51(t，J＝6.32Hz，2H)，4.86-5.08(m，1H)，5.31-5.66(m，3H)，7.12-7.23(m，3H)，7.25-7.36(m，2H)。

LCMS(ES-API)：m／z549.2(M+H)⁺。

HRMS(TOF)：C₂₉H₄₃N₂0₈[MH]⁺的计算值：549.31704。实测值：549.31945。

方案E

实施例E-16-{[(5Z)-7-{(1R,2R,3R,5S)-3,5-二羟基-2-[(1E,3S)-3-羟基-5-苯基戊-1-烯-1-基]环戊基}庚-5-烯酰基](乙基)氨基}-6-氧代己基硝酸酯和实施例E-2(1S，2E)-3-{(1R,2R,3S，5R)-2-[(2Z)-7-{乙基[6-(硝酰氧基)己酰基]氨基}-7-氧代庚-2-烯-1-基]-3,5-二羟基环戊基}-1-(2-苯基乙基)丙-2-烯-1-基6-(硝酰氧基)己酸酯

步骤2：(5Z)-N-(6-溴己酰基)-74(6R,7R)-3-丁基-7-[(1E,3S)-3-羟基-5-苯基戊-1-烯-1-基]-2，4-二氧杂-3-硼杂双环[3.2.1]辛-6-基}-N-乙基庚-5-烯酰胺(e-1)和(1S，2E)-3-[(6R,7R)-74(2Z)-7-[(6-溴己酰基)(乙基)氨基]-7-氧代庚-2-烯-1-基}-3-丁基-2,4-二氧杂-3-硼杂双环[3.2.1]辛-6-基]-1-(2-苯基乙基)丙-2-烯-1-基6-溴己酸酯(e-2)

在0℃下，向(5Z)-7-{(6R,7R)-3-丁基-7-[(1E,3S)-3-羟基-5-苯基戊-1-烯-1-基]-2,4-二氧杂-3-硼杂双环[3.2.1]辛-6-基}-N-乙基庚-5-烯酰胺(b-1；708mg，1.47mmol)的DCM(9.8mL)溶液中缓慢引入NMM(190mg，1.84mmol)和6-溴己酰氯(274μL，1.84mmol)。然后将其在环境温度下搅拌3天。混合物用DCM稀释并用水(1x)和盐水(1x)洗涤。DCM层净无水硫酸钠干燥并浓缩，得到819mg粗产物。粗产物通过制备HPLC进一步纯化(水：乙腈65→25％，含有0.1％乙酸)，减压浓缩纯级分，分别得到e-1(291mg；30.1％)和e-2(90mg；7.3％)。两种中间体e-1和e-2各自未经进一步表征而分别使用。

步骤3：6-{[(5Z)-7-{(1R,2R,3R,5S)-3,5-二.羟基-2-[(1E,3S)-3-羟基-5-苯基戊-1-烯-1-基]环戊基}庚-5-烯酰基](乙基)氨基}-6-氧代己基硝酸酯(E-1)

向(5Z)-N-(6-溴己酰基)-7-{(6R,7R)-3-丁基-7-[(1E,3S)-3-羟基-5-苯基戊-1-烯-1-基]-2，4-二氧杂-3-硼杂双环[3.2.1]辛-6-基}-N-乙基庚-5-烯酰胺(e-1；240mg，0.364mmol)的MeCN(3.6mL)溶液中加入硝酸银(186mg，1.09mmol)。在环境温度下搅拌1天后，加入另外2当量硝酸银(124mg)并在环境温度下搅拌另外一天。使混合物过滤通过硅藻土垫。固体用EtOAc洗涤。浓缩滤液并将残余物溶解在EtOAc中。溶液用水(1x)和盐水(1x)洗涤，经无水硫酸钠干燥并浓缩，得到粗产物，然后通过制备反相HPLC纯化所述粗产物(水：乙腈，含有0.1％乙酸)，得到160mg(76.5％)酰亚胺E-1，为无色油状物。

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δ1.00-1.10(m，3H)，1.25-1.41(m，4H)，1.48-1.60(m，5H)，1.61-1.77(m，5H)，1.89-2.06(m，5H)，2.09-2.26(m，4H)，3.55-3.73(m，4H)，3.83-3.97(m，2H)，4.36(d，J＝4.80Hz，1H)，4.44-4.54(m，3H)，4.66(d，J＝4.55Hz，1H)，5.21-5.32(m，1H)，5.35-5.52(m，3H)，7.11-7.20(m，3H)，7.25(t，J＝7.45Hz，2H)。

LCMS(ES-API)：m／z597.2(M+Na⁺)。

¹³C NMR(176MHz，DMSO-d₆)δ14.14，23.97，24.39，24.59，24.77，25.89，26.04，31.35，36.48，36.74，38.45，40.01，43.96，48.86，54.26，69.46，70.59，73.71，75.73，125.54，128.18，128.21，128.73，129.65，132.13，135.18，142.25，175.33，175.40。

步骤4：(1S，2E)-3-{(1R，2R，3S，5R)-2-[(2Z)-7-{乙基[6-(硝酰氧基)己酰基]氨基}-7-氧代庚-2-烯-1-基]-3，5-二羟基环戊基}-1-(2-苯基乙基)丙-2-烯-1-基6-(硝酰氧基)己酸酯(E-2)

向(1S，2E)-3-[(6R，7R)-7-{(2Z)-7-[(6-溴己酰基)(乙基)氨基]-7-氧代庚-2-烯-1-基}-3-丁基-2，4-二氧杂-3-硼杂双环[3.2.1]辛-6-基]-1-(2-苯基乙基)丙-2-烯-1-基6-溴-己酸酯(e-2；700mg，0.838mmol)的MeCN(0.91mL)溶液中加入硝酸银(93mg，0.546mmol)。在环境温度下搅拌1天后，加入另外4当量硝酸银(64mg)并在环境温度下搅拌另外一天。使混合物过滤通过硅藻土垫。固体用EtOAc洗涤。浓缩滤液并将残余物溶解在EtOAc中。溶液用水(1x)和盐水(1x)洗涤，经无水硫酸钠干燥并浓缩，得到粗产物，然后通过制备反相HPLC纯化所述粗产物(水：乙腈，含有0.1％乙酸)，得到50mg(8.1％)酰亚胺-酯E-2，

为无色油状物。

¹H NMR(700MHz，DMSO-d₆)δ1.04(t，J＝7.08Hz，3H)，1.26-1.38(m，5H)，1.42(dt，J＝14.15，2.87Hz，1H)，1.48-1.59(m，6H)，1.61-1.70(m，4H)，1.79-1.92(m，2H)，1.93-2.02(m，3H)，2.03-2.10(m，1H)，2.12-2.23(m，2H)，2.24-2.33(m，2H)，2.58(t，J＝7.30Hz，4H)，2.65(t，J＝7.30Hz，2H)，3.61(q，J＝7.08Hz，2H)，3.64-3.69(m，1H)，3.90(d，J＝3.54Hz，1H)，4.40(d，J＝4.87Hz，1H)，4.50(q，J＝6.49Hz，4H)，4.57(d，J＝5.75Hz，1H)，5.16(q，J＝6.19Hz，1H)，5.23-5.30(m，1H)，5.40-5.53(m，3H)，7.16(d，J＝7.96Hz，3H)，7.26(t，J＝7.74Hz，2H)。

¹³C NMR(176MHz，DMSO-d₆)δ14.61，24.44，24.50，24.86，25.07，25.20，26.19，26.37，26.47，31.39，33.97，36.25，37.00，37.18，38.93，40.48，44.51，49.29，54.69，69.90，73.83，74.13，74.19，75.97，126.31，128.65，128.79，129.28，129.61，129.98，136.12，141.67，172.43，175.82，175.89。

LCMS(ES-API)：m／z756.2(M+Na)⁺。

方案F

步骤1：6-(硝酰氧基)己酸

与US2006／189603A1中所述类似，将硝酸银加入到6-溴己酸(4.88_g，25mmol)的乙腈(25mL)溶液中。在环境温度下12小时后，过滤并蒸发后将残余物进行硅胶色谱纯化(使用Biotage，用EtOAc-CH₂Cl₂25-50％洗脱)，得到产物(4.0g，90％)，为无色油状物。

¹H NMR(400MHz，氯仿-d₆)δ1.40-1.60(m，2H)，1.62-1.86(m，3H)，.2.03(s，1H)，2.41(t，J＝7.33Hz，2H)，4.48(t，J＝6.57Hz，2H)，10.20(bs，1H)。

LCMS(ESI)：m／z200.20(M+Na)⁺。

HRMS.C₆H₁₁NO₅Na[M+Na]⁺的计算值：200.0529。实测值：200.0531。

步骤2：(1R，2R，3R，4S)-3-[(2Z)-7-(乙基氨基)-7-氧代庚-2-烯-1-基]-4-羟基-2-[(1E，3S)-3-羟基-5-苯基戊-1-烯-1-基]环戊基6-(硝酰氧基)己酸酯(F-1)

(1S，2R，3R，4R)-2-[(2Z)-7-(乙基氨基)-7-氧代庚-2-烯-1-基]-4-羟基-3-[(1E，3S)-3-羟基-5-苯基戊-1-烯-1-基]环戊基6-(硝酰氧基)己酸酯(F-2)

(1R，3S，4R，5R)-4-[(2Z)-7-(乙基氨基)-7-氧代庚-2-烯-1-基]-5-[(1E，3S)-3-羟基-5-苯基戊-1-烯-1-基]环戊烷-1，3-二基)二[6-(硝酰氧基)己酸]酯(F-3)

(1S，2E)-3-[(1R，2R，3S，5R)-2-[(2Z)-7-(乙基氨基)-7-氧代庚-2-烯-1-基]-3-羟基-5-{[6-(硝酰-氧基)己酰基]氧基}环戊基]-1-(2-苯基乙基)丙-2-烯-1-基6-(硝酰氧基)己酸酯(F-4)

在氮气下，于环境温度，将6-(硝酰氧基)己酸(1.77g，10.0mmol)溶解在无水二氯甲烷(80mL)中。将溶液冷却至0℃，依次加入4滴无水DMF和草酰氯(870μL，10mmol)，允许温热至环境温度。12小时后，使混合物过滤通过二氧化硅塞，用无水二氯甲烷(50mL)将其洗涤。蒸发溶剂得到1.71g(88％)粗制的推测酰氯(6-硝酰氧基-己酰氯)，为黄色油状物，其未经进一步纯化而立即使用。

在氮气下，于0℃向比马前列素(Cayman Chemicals；831mg，2.00mmol)的二氯甲烷(10mL)悬浮液中加入DMAP树脂(Argonaut(Biotage“PS-DMAP”)；2.75g1.60mmol／g，4.20mmol)和上述粗制6-硝酰氧基-己酰氯(822mg，2.1mmol)。在0℃下20分钟后，除去冷却浴并在环境温度下搅拌18小时。过滤出树脂，浓缩滤液，然后通过制备反相HPLC分离粗制混合物，分别得到无色油状的15-酯F-1(142mg，12.4％)、白色固体状的9-酯F-2(20mg，1.7％)、无色油状的9,11-二酰基硝酸酯F-3和无色油状的11.15-二酰基酯F-4。

实施例F-1

(1R,2R,3R,4S)-3-[(2Z)-7-(乙基氨基)-7-氧代庚-2-烯-1-基]-4-羟基-2-[(1E,3S)-3-羟基-5-苯基戊-1-烯-1-基]环戊基6-(硝酰氧基)己酸酯

¹H NMR(700MHz，DMSO-d₆)δ0.98(t，J＝7.30Hz，3H)，1.31(dq，J＝7.74，7.59Hz，2H)，1.42(dd，J＝15.48，3.98Hz，1H)，1.45-1.50(m，2H)，1.50-1.54(m，2H)，1.57-1.63(m，J＝7.35，7.35，7.19，6.86Hz，2H)，1.63-1.70(m，2H)，1.95(d，J＝7.08Hz，2H)，1.98(t，J＝7.52Hz，3H)，2.11(t，J＝15.70Hz，1H)，2.25(t，J＝7.30Hz，2H)，2.33(ddd，J＝14.82，9.29，5.53Hz，1H)，2.45(t，J＝8.18Hz，1H)，2.55-2.64(m，2H)，2.98-3.06(m，2H)，3.91(qd，J＝5.68，5.53Hz，1H)，3.95(d，J＝3.98Hz，1H)，4.46(t，J＝6.63Hz，2H)，4.61(d，J＝3.98Hz，1H)，4.75(d，J＝4.87Hz，1H)，4.77(dd，J＝7.74，4.64Hz，1H)，5.24-5.32(m，1H)，5.38-5.49(m，3H)，7.16(d，J＝7.52Hz，3H)，7.25(t，J＝7.74Hz，2H)，7.70(t，J＝4.64Hz，1H)。

¹³C NMR(176MHz，DMSO-d₆)：δ14.78，24.04，24.34，24.49，25.29，25.67，26.31，31.14，33.20，33.40，34.90，40.00，41.30，48.67，50.77，69.27，69.92，73.88，78.27，125.54，128.17，128.22，128.94，129.24，129.84，136.07，142.23，171.57，172.62。

基于对质子化学位移、积分、偶合，以及在2D谱中观察到的关键的同-和杂-核相关的详细检查，证实所描述的结构。HSQC谱中不存在碳相关性，这允许鉴定羟基质子。在COSY谱中观察到来自羟基质子与相邻的次甲基和亚甲基质子的相关性，这使得能确定环戊基环的取代。

观察到的关键COSY相关：

观察到的关键HMBC相关：

在HMBC谱中，发现C-11(以上编号1)处的质子(指定为在δ4.77(dd，J＝7.74，4.64Hz，1H)处共振)与在δ172.62处的酯的羰基(以上编号7)存在针对结合位点的关键相关。

LCMS ESI：m／z597.2(M+Na⁺).

HRMS C₂₉H₄₂BrNO₅Na[M+Na]⁺的计算值：597.3146。实测值：597.3134。

实施例F-2

(1S，2R，3R，4R)-2-[(2Z)-7-(乙基氨基)-7-氧代庚-2-烯-1-基]-4-羟基-3-[(1E，3S)-3-羟基-5-苯基戊-1-烯-1-基]环戊基6-(硝酰氧基)己酸酯

¹H NMR(700MHz，DMSO-d₆)δ0.98(t，J＝7.30Hz，3H)，1.17-1.30(m，2H)，1.33-1.41(m，4H)，1.47(dt，J＝15.48，7.74Hz，2H)，1.56(qd，J＝7.67，7.52Hz，2H)，1.59-1.74(m，5H)，1.86(dd，J＝13.71，7.96Hz，1H)，1.90-1.96(m，1H)，1.98(t，J＝7.52Hz，2H)，2.02(t，J＝5.09Hz，2H)，2.17(dt，J＝11.94，7.96Hz，1H)，2.29(q，J＝7.08Hz，2H)，2.36(ddd，J＝14.82，8.62，6.19Hz，1H)，2.56-2.66(m，2H)，3.03(dd，J＝7.30，5.53Hz，2H)，3.76(dd，J＝13.71，2.65Hz，1H)，3.88-3.95(m，1H)，4.50(t，J＝6.63Hz，2H)，4.73(d，J＝4.42Hz，1H)，4.75(d，J＝5.75Hz，1H)，4.91(t，J＝4.64Hz，1H)，5.29(d，J＝4.42Hz，1H)，5.36-5.44(m，1H)，5.46-5.53(m，1H)，7.10-7.20(m，3H)，7.26(t，J＝7.52Hz，2H)，7.70(qd，J＝5.68，5.53Hz，1H)。

¹³C NMR(176MHz，DMSO-d₆)δ14.78，24.00，24.58，24.64，25.23，25.73，26.33，31.32，33.19，33.57，34.85，40.01，41.45，46.55，54.70，70.30，73.67，73.76，75.04，125.57，128.05，128.23，128.26，129.73，130.77，136.00，142.27，171.43，172.27。

基于对质子化学位移、积分、偶合，以及在2D谱中观察到的关键的同-和杂-核相关的详细检查，证实所描述的结构。HSQC谱中不存在碳相关，这允许鉴定羟基质子。在COSY谱中观察到来自羟基质子与相邻的次甲基和亚甲基质子的相关性，这使得能确定环戊基环的取代。

观察到的关键COSY相关：

COSY和HSQC帮助将羟基质子指定为在δ4.73(d，J＝4.42Hz，1H)，4.75(d，J＝5.75Hz，1H)处共振，以及如下指定次甲基质子：将C-9(以上编号4)处的次甲基质子指定为δ4.91(t，J＝4.64Hz，1H)、将C-11(以上编号1)处的次甲基质子指定为δ3.88-3.95(m，1H)，以及将C15(以上编号9)处的次甲基质子指定为δ3.76(dd，J＝13.71，2.65Hz，1H)。

观察到的关键HMBC相关：

在HMBC谱中，发现C-9(以上编号4)处的质子(指定为在δ4.91(t，J＝4.64Hz，1H)处共振)与在δ172.27处的酯的羰基(以上编号20)存在针对结合位点的关键相关性。

LCMS(ESI)：m／z597.2(M+Na⁺)

HRMS C₂₉H₄₂BrNO₅Na[M+Na]⁺的计算值：597.3146。实测值：597.3123.

实施例F-3

(1R,3S，4R,5R)-4-[(2z)-7-(乙基氨基)-7-氧代庚-2-烯-1-基]-5-[(1E,3S)-3-羟基-5-苯基戊-1-烯-1-基]环戊烷-1,3-二基双[6-(硝酰氧基)己酸]酯(F-3)

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δ7.71(br.s.，1H)，7.23-7.32(m，2H)，7.17(d，J＝7.33Hz，3H)，5.44-5.61(m，2H)，5.25-5.38(m，2H)，4.95-5.22(m，1H)，4.84-4.90(m，1H)，4.76-4.83(m，1H)，4.43-4.55(m，5H)，3.86-4.03(m，1H)，2.97-3.10(m，2H)，2.57-2.64(m，2H)，2.54-2.57(m，1H)，2.41-2.48(m，1H)，2.21-2.36(m，5H)，1.84-2.10(m，6H)，1.43-1.72(m，12H)，1.25-1.41(m，4H)，0.99(t，J＝7.33Hz，3H)

HRMS C₃₇H₅₅N₃O₁₂Na[M+Na]⁺的计算值：756.3679。实测值：756.3646。

C₃₇H₅₅N₃O₁₂·0.28H₂O的分析计算值：C，60.04；H，7.59；N，5.68。实测值：C，60.03；H，7.53；N，5.67。

实施例F-4

(1S，2E)-3-[(1R，2R，3S，5R)-2-[(2Z)-7-(乙基氨基)-7-氧代庚-2-烯-1-基]-3-羟基-5-{[6-(硝酰-氧基)己酰基]氧基}环戊基]-1-(2-苯基乙基)丙-2-烯-1-基6-(硝酰氧基)己酸酯(F-4)

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δ7.70(br.s.，1H)，7.27(t，J＝7.45Hz，2H)，7.11-7.22(m，3H)，5.35-5.46(m，1H)，5.48-5.57(m，2H)，5.21-5.34(m，1H)，5.09-5.18(m，1H)，4.74-4.85(m，1H)，4.66(d，J＝4.04Hz，1H)，4.48(dt，J＝12.95，6.54Hz，5H)，3.89-4.02(m，1H)，2.97-3.09(m，2H)，2.63-2.74(m，1H)，2.55-2.70(m，2H)，2.19-2.37(m，6H)，1.82-2.03(m，6H)，1.57-1.71(m，4H)，1.41-1.57(m，8H)，1.25-1.41(m，4H)，0.98(t，J＝7.20Hz，3H)。

HRMS C₃₇H₅₅N₃O₁₂Na[M+Na]⁺的计算值：756.3678。实测值：756.3641。

C₃₇H₅₅N₃O₁₂-0.08H₂O的分析计算值：C，60.44；H，7.56；N，5.71。实测值：C，60.45；H，7.55；N，5.67。

方案G

实施例G-1

(2R,3R)-3-[(2Z)-7-(乙基氨基)-7-氧代庚-2-烯-1-基]-4-羟基-2-[(1E,3S)-3-羟基._-5-苯基戊-1-烯-1-基]环戊基4-(硝酰氧基)丁基碳酸酯(G-1)

步骤1：4-氯丁基(2R,3R)-3-[(2Z)-7-(乙基氨基)-7-氧代庚-2-烯-1-基]-4-羟基-2-[(1E,3S)-3-羟基-5-苯基戊-1-烯-1-基]环戊基碳酸酯(g-1)

在0℃下，向比马前列素(Cayman Chemicals16820，Lot188757；123mg，0.30mmol)的DCM(3mL)溶液中加入DMAP(39mg，0.31mmol)，然后缓慢加入氯甲酸4-氯丁基酯(43μL，0.31mmol)。在环境温度下3天后，混合物用DCM稀释并用水(1x)和盐水(1x)洗涤。DCM层经无水硫酸钠干燥并减压浓缩。对区域异构体和二酰化产物的粗制混合物进行柱色谱(乙酸乙酯-己烷25-100％，然后甲醇-二氯甲烷(5-15％))，得到作为主要分离组分的11-酰化氯化物g-1(25mg，15％)，为无色油状物。

LCMS(ES-API)：m／z572.2(M+Na)⁺。

步骤2：(2R,3R)-3-[(2Z)-7-(乙基氨基)-7-氧代庚-2-烯-1-基]-4-羟基-2-[(1E,3S)-3-羟基-5-苯基戊-1-烯-1-基]环戊基4-碘丁基碳酸酯(g-2)

将4-氯丁基(2R,3R)-3-[(2Z)-7-(乙基氨基)-7-氧代庚-2-烯-1-基]-4-羟基-2-[(1E,3S)-3-羟基-5-苯基戊-1-烯-1-基]环戊基碳酸酯(g-1；25mg，0.045mmol)溶解在丙酮(0.9mL)中。向溶液中加入碘化钠(68mg，0.45mmol)。将混合物在135℃下微波处理35分钟，然后减压浓缩。将残余物溶解在EA+水中。分离EA相，用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥并浓缩，得到23mg(80％)粗制碘化物g-2，其未经进一步纯化而立即使用。

LCMS(ES-API)：m／z664.2(M+Na)⁺。

步骤3：(2R,3R)-3-[(2Z)-7-(乙基氨基)-7-氧代庚-2-烯-1-基]-4-羟基-2-[(1E,3S)-3-羟基-5-苯基戊-1-烯-1-基]环戊基4-(硝酰氧基)丁基碳酸酯(G-1)

向(2R,3R)-3-[(2Z)-7-(乙基氨基)-7-氧代庚-2-烯-1-基]-4-羟基-2-[(1E,3S)-3-羟基-5-苯基戊-1-烯-1-基]环戊基4-碘丁基碳酸酯(g-2；23mg，0.036mmol)的MeCN(0.72mL)溶液中加入硝酸银(18mg，0.108mmol)。在环境温度下搅拌过夜后，使混合物过滤通过硅藻土垫。固体用ACN洗涤。浓缩滤液，将残余物溶解在EtOAc+水中。EtOAc相用盐水(1x)洗涤，经无水硫酸钠干燥并浓缩，得到粗制混合物，然后通过制备HPLC纯化所述粗制混合物(水：乙腈，含有0.1％乙酸)，得到8.0mg所需产物(42％)。

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δ0.98(t，J＝7.33Hz，3H)，1.35-1.57(m，4H)，1.58-1.74(m，6H)，1.90-2.03(m，5H)，2.03-2.17(m，1H)，2.34(ddd，J＝14.65，9.09，5.31Hz，1H)，2.42-2.49(m，1H)，2.52-2.63(m，2H)，2.96-3.09(m，2H)，3.85-3.98(m，2H)，3.99-4.14(m，2H)，4.44-4.57(m，2H)，4.62-4.74(m，2H)，4.78(d，J＝4.55Hz，1H)，5.29(dt，J＝10.67，7.17Hz，1H)，5.37-5.55(m，3H)，7.10-7.20(m，3H)，7.21-7.32(m，2H)，7.70(t，J＝5.05Hz，1H)。

LCMS(ES-API)：m／z599.2(M+Na)⁺。

HRMS(TOF)：C₃₀H₄₄N₂O₉Na[MNa]⁺的计算值：599.29390。实测值：599.29203。

实施例G-2(1S，2E)-3-{(1R，2R，3S，5R)-2-[(2Z)-7-(乙基氨基)-7-氧代庚-2-烯-1-基]-3，5-二羟基环戊基}-1-(2-苯基乙基)丙-2-烯-1-基4-(硝酰氧基)丁基碳酸酯(G-2)

沿着与实施例G-1类似的路线制备，除了使用硼酸酯b-1，用氯甲酸3-氯丙基酯酰化(100％粗品产率)，用于丙酮中的NaI交换(22％)，用硝酸银硝化，以及制备HPLC，得到55mg(49％)碳酸酯G-2，为无色油状物。

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δ0.98(t，J＝7.33Hz，3H)，1.27-1.39(m，1H)，1.39-1.55(m，3H)，1.60-1.83(m，4H)，1.80-2.03(m，7H)，2.04-2.26(m，3H)，2.60(t，J＝7.83Hz，2H)，2.97-3.10(m，2H)，3.60-3.74(m，2H)，3.91(br.s.，1H)，4.02-4.16(m，2H)，4.35-4.48(m，1H)，4.54(t，J＝6.19Hz，1H)，4.57-4.69(m，1H)，4.97(q，J＝6.74Hz，1H)，5.20-5.33(m，1H)，5.37-5.63(m，3H)，7.12-7.22(m，3H)，7.23-7.35(m，2H)，7.63-7.77(m，1H)。

LCMS(E SI)：m／z599.2(M+Na)⁺。

C₃₀H₄₄N₂O₉0.4C₆H₁₀的分析计算值：C，63.84；H，7.94；N，4.38。实测值：C，63.66；H，8.13；N，4.38。

方案H

实施例H-1

(1R,2R,3R，4S)-3-[(2Z)-7-(乙基氨基)-7-氧代庚-2-烯-1-基]-4-羟基-2-[(1E，3S)-3-羟基-5-苯基戊-1-烯-1-基]环戊基4-(硝酰氧基)丁酸酯

步骤1：(1R,2R,3R，4S)-3-[(2Z)-7-(乙基氨基)-7-氧代庚-2-烯-1-基]-4-羟基_-2-[(1E，3S)-3-羟基-5-苯基戊-1-烯-1-基]环戊基4-溴丁酸酯(h-1)

在0℃下，向比马前列素(Cayman Chemicals；540mg，1.30mmol)的无水二氯甲烷(5.2mL)悬浮液中加入DMAP(850mg，1.33mmol)和4-溴丁酰氯(0.154mL，.32mmol)，允许搅拌72小时。过滤所得混合物，通过氮气流除去溶剂。将残余物重新溶解在二氯甲烷中，用饱和NaHCO₃和盐水洗涤，经M_gSO₄干燥，得到粗制混合物，对所述混合物进行制备反相HPLC处理，得到主要的可分离纯组分11-溴代酯h-1，为无色油状物，42mg(6％)。

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δ7.70(bs.，1H)，7.22-7.32(m，2H)，7.10-7.21(m，3H)，5.37-5.54(m，3H)，5.20-5.35(m，1H)，4.72-4.86(m，2H)，4.57-4.66(m，1H)，3.84-4.01(m，2H)，3.51(t，J＝6.57Hz，2H)，2.96-3.10(m，2H)，2.54-2.66(m，2H)，2.21-2.45(m，4H)，2.05-2.21(m，1H)，1.89-2.04(m，7H)，1.57-1.73(m，2H)，1.30-1.54(m，4H)，0.98(t，J＝7.33Hz，3H)。

LCMS(E SI)：m／z588.2(M+Na)⁺.

HRMS：C₂₉H₄₂BrNO₅Na[M+Na]⁺的计算值：586.2138。实测值：586.2132。

步骤2：(1R，2R，3R，4S)-3-[(2Z)-7-(乙基氨基)-7-氧代庚-2-烯-1-基]-4-羟基-2-[(1E，3S)-3-羟基-5-苯基戊-1-烯-1-基]环戊基4-(硝酰氧基)丁酸酯

向(1R，2R，3R，4S)-3-[(2Z)-7-(乙基氨基)-7-氧代庚-2-烯-1-基]-4-羟基-2-[(1E，3S)-3-羟基-5-苯基戊-1-烯-1-基]环戊基4-溴丁酸酯(h-1；40mg，0.071mmol)的乙腈(0.3mL)溶液中加入硝酸银(36mg，0.213mmol)。在环境温度下18小时后，使混合物过滤通过硅藻土，用乙腈(10mL)将其洗涤。浓缩滤液，溶解在乙酸乙酯(15mL)中，用盐水(2×3mL)洗涤。浓缩物通过制备反相HPLC纯化，得到19mg(49％)硝酸酯H-1，为无色油状物。

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δ7.71(bs.，1H)，7.26(t，J＝7.45Hz，2H)，7.10-7.19(m，3H)，5.37-5.51(m，3H)，5.21-5.35(m，1H)，4.70-4.83(m，2H)，4.63(d，J＝4.04Hz，1H)，4.51(t，J＝6.57Hz，2H)，3.86-3.99(m，2H)，2.96-3.10(m，2H)，2.53-2.64(m，3H)，2.26-2.41(m，3H)，2.052.17(m，1H)，1.81-2.05(m，7H)，1.59-1.74(m，2H)，1.34-1.54(m，4H)，0.98(t，J＝7.20Hz，3H)。

LCMS(E SI)：m／z569.2(M+Na⁺)。

HRMS：C₂₉H₄₂N₂O₈Na[M+Na]⁺的计算值：569.2833。实测值：569.2822。

方案J

实施例J-1

(1R,2R,3R,4S)-3-[(2Z)-7-(乙基氨基)-7-氧代庚-2-烯-1-基]-4-羟基-2-[(1E,3S)-3-羟基-5-苯基戊-1-烯-1-基]环戊基4-(硝酰氧基)丁基丁二酸酯

步骤1：4-[4-(硝酰氧基)丁氧基]-4-氧代丁酸(j-2)

向含有三乙胺(0.79mL，5.6mmol)的粗制硝酸4-羟基丁酯(j-1；0.889g，3.78mmol；专利申请US2006／189603A1)在t-BuOH(19mL)中的溶液中加入琥珀酸酐(0.790g，7.90mmol)，允许在环境温度下搅拌12小时。加入2.5％H₃PO₄水溶液。用二氯甲烷(3x50mL)萃取后，合并的有机层经MgSO₄干燥，过滤并减压除去溶剂。残余物用使用硅胶的Biotage纯化(用5％-20％EtOAc／CH₂Cl₂的梯度洗脱)，得到琥珀酸酯j-2，为无色油状物(820mg，92％)，其未经进一步纯化而使用。

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δ12.23(s，1H)，4.49-4.58(m，2H)，4.00-4.08(m，2H)，2.43-2.49(m，4H)，1.59-1.77(m，4H)

步骤2：(1R,2R,3R,4S)-3-[(2Z)-7-(乙基氨基)-7-氧代庚-2-烯-1-基]-4-羟基_-2-[(1E,3S)-3-羟基-5-苯基戊-1-烯-1-基]环戊基4-(硝酰氧基)丁基丁二酸酯(J-1)

在氮气下，于室温，将粗制4-[4-(硝酰氧基)丁氧基]-4-氧代丁酸(30mg，0.13mmol)溶解在无水二氯甲烷(1.28mL)中。将溶液冷却至0℃，并依次加入无水DMF(0.25mL)和草酰氯(10μL，0.128mmol)。在环境温度下搅拌12小时后，使混合物过滤通过二氧化硅塞，用无水二氯甲烷(5mL)将其洗涤。除去溶剂，得到32mg(100％)推测的酰氯(4-氯-4-氧代丁酸4-(硝酰氧基)丁酯)，为无色油状物，其未经进一步表征或纯化而立即使用。

在0℃下，向比马前列素(Cayman Chemicals；25mg，0.024mmol)的二氯甲烷悬浮液中加入DMAP树脂(Argonaut(Biotage“PS-DMAP”)；30mg1.6mmol／g，0.024mmol)和以上粗制4-氯-4-氧代丁酸4-(硝酰氧基)丁酯。在0℃下20分钟后，除去冷却浴并允许在环境温度下搅拌72小时。过滤出树脂，浓缩滤液，得到粗制混合物，为油状物，使用Biotage设备通过快速色谱将其纯化(用梯度为含有25-100％CH₂Cl₂的EtOAc洗脱)，得到19mg(30％)J-1，为无色油状物。

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δ7.70(s，1H)，7.26(t，J＝7.45Hz，2H)，7.17(d，J＝7.83Hz，3H)，5.76(s，2H)，5.36-5.52(m，3H)，5.31(s，1H)，4.75(d，J＝4.80Hz，2H)，4.62(d，J＝4.04Hz，1H)，4.48-4.58(m，4H)，3.93(d，J＝18.44Hz，2H)，2.96-3.09(m，2H)，2.63-2.71(m，1H)，2.56(d，J＝1.77Hz，3H)，2.22-2.36(m，2H)，1.96(s，2H)，1.56-1.80(m，10H)，1.34-1.53(m，4H)，0.98(t，J＝7.20Hz，3H)。

LCMS(ESI)：m／z655.2(M+Na)⁺。

HRMS：C₃₃H₄₈N₂O₁₀Na[M+Na]⁺的计算值：655.3201。实测值：655.3180。

实施例J-2

(1R，2E)-3-{(1R，2R，3S，5R)-2-[(2Z)-7-(乙基氨基)-7-氧代庚-2-烯-1-基]-3，5-二羟基环戊基}-1-(2-苯基乙基)丙-2-烯-1-基)4-(硝酰氧基)丁基丁二酸酯

以与实施例J-1类似的方式，使酸j-2与受保护的比马前列素硼酸酯b-1偶合，并使用Biotage通过色谱纯化得到133mg(18.1％)15-酯硝酸酯J-2，为无色油状物。

¹H NMR(700MHz，DMSO-d6)δ0.98(t，J＝7.30Hz，3H)，1.21-1.32(m，2H)，1.42(dd，J＝15.48，3.98Hz，2H)，1.44-1.55(m，4H)，1.56-1.70(m，J＝7.35，7.35，7.19，6.86Hz，4H)，1.85-2.05(m，5H)，2.052.17(m，1H)，2.25(t，J＝7.30Hz，2H)，2.33(ddd，J＝14.82，9.29，5.53Hz，1H)，2.46(ddd，J＝11.83，8.07，7.96Hz，1H)，2.54-2.65(m，2H)，2.95-3.08(m，2H)，3.84-4.00(m，2H)，4.46(t，J＝6.63Hz，2H)，4.61(d，J＝3.98Hz，1H)，4.77(ddd，J＝12.27，4.53，4.42Hz，2H)，5.21-5.35(m，1H)，5.36-5.55(m，3H)，7.16(d，J＝7.52Hz，3H)，7.25(t，J＝7.74Hz，2H)，7.70(t，J＝4.64Hz，1H)。

HRMS C₃₁H₄₆N₂O₈Na[M+Na]⁺的计算值：597.3146。实测值：597.3133。

C₃₁H₄₆N₂O₈·0.33H₂O的分析计算值：C，64.12；H，8.10；N，4.82。实测值：C，64.11；H，8.07；N，4.80。

方案M

实施例M-1：(1S，2E)-3-{(1R，2R，3S，5R)-2-[(2Z)-7-(乙基氨基)-7-氧代庚-2-烯-1-基]-3，5-二羟基环戊基}-1-(2-苯基乙基)丙-2-烯-1-基(5S)-5-(硝酰氧基)己酸酯

步骤1：(R)-5-硝酰氧基己酸叔丁酯(m-2)

在0℃下，向HNO₃(8.40mL，188mmol)的乙酸酐(20mL)溶液中缓慢加入(R)-5-羟基己酸叔丁酯(m.1；Pamies，O.；Backvall，J.E.J.Org.Chem.2002，67，1261-1265；5.84g，31mmol)的CH₂Cl₂(20mL)溶液。将混合物在0℃下搅拌15分钟，然后倒入冰冻的10％NaOH水溶液。分离有机层，然后用H₂O、NaHCO₃和盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥并浓缩。然后通过快速色谱纯化粗制残余物(用0／100至20／80乙酸乙酯／己烷的梯度洗脱)，得到所需叔丁酯m-2，其未经进一步纯化而使用。

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)：δ5.09(m，1H)；2.25(m，2H)；1.69(m，4H)；1.45(s，9H)；1.38(d，3H，J＝6.2Hz)

步骤2：(R)-5-硝酰氧基己酸(m-3)

在0℃下，向粗制(R)-5-硝酰氧基己酸叔丁酯(31mmol)的CH₂Cl₂(50mL)中溶液中加入BF₃·Et₂O(5.1mL，40mmol)。1小时后，然后用盐水洗涤混合物，经Na₂SO₄干燥，减少溶剂体积。所得溶液未经进一步纯化而用于随后步骤中。

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)：δ5.11(m，1H)；2.43(m，2H)；1.75(m，4H)；1.39(d，3H，J＝6.2Hz)

步骤3：(R)-5-硝酰氧基己酸4-硝基苯酯(m-4)

将(R)-5-硝酰氧基己酸(1.50g，8.57mmol)、4-硝基苯酚(1.20g，8.57mmol)、N-(3-二甲基氨基丙基)-N’-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDAC；2.00g，10.3mmol)和DMAP(催化量)在CH₂Cl₂(20mL)中的溶液在环境温度下搅拌3天，减压除去溶剂，得到粗产物，然后将其通过快速色谱纯化(用0／100至20／80乙酸乙酯／己烷的梯度洗脱)，得到苯基酯m-4(780mg，31％)，其未经进一步纯化而使用。

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)：δ8.25(d，2H)；7.27(d，2H)；5.12(m，1H)；2.67(m，2H)；1.83(m，4H)；1.40(d，3H，J6.2Hz)

步骤4：(1S,2E)-3-{(1R,2R,3S,5R)-2-[(2Z)-7-(乙基氨基)-7-氧代庚-2-烯-1-基]-3,5-二羟基环戊基}-1-(2-苯基乙基)丙-2-烯-1-基(5S)-5-(硝酰氧基)己酸酯

将(5Z)-7-{(6R,7R)-3-丁基-7-[(1E,3S)-3-羟基-5-苯基戊-1-烯-1-基]-2，4-二氧杂-3硼杂双环[3.2.1]辛-6-基}-N-乙基庚-5-烯酰胺(380mg，0.79mmol)、(R)-5-硝酰氧基己酸4-硝基苯酯(780mg，2.61mmol)和DMAP(320mg，2.61mmol)在CH₂Cl₂(20mL)中的溶液在环境温度下搅拌1天。减压除去溶剂得到油状物，然后将所述油状物溶解在MeOH中，并在环境温度下搅拌过夜。减压除去溶剂，得到浅黄色油状物，然后先后通过快速色谱(用20／80至70／30丙酮／己烷梯度洗脱)和制备反相HPLC(乙酸铵10mM：乙腈)纯化所述油状物，得到所需产物(310mg，69％)。

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)：δ7.68(1H，t)；7.25(2H，m)；7.17(3H，m)；5.48(3H，m)；5.35-5.05(3H，m)；4.57(1H，d)；4.39(1H，d)；3.90(1H，m)；3.67(1H，m)；3.03(2H，m)；2.59(2H，t)；2.33(2H，t)；2.15(4H，m)；1.96(7H；m)；1.70-1.40(7H，m)；1.30(3H，d)；1.00(3H，t)。

方案K

实施例K-1

(1S,2E)-3-{(1R,2R,3S,5R)-2-[(2E)-7-(乙基氨基)-7-氧代庚-2-烯-1-基]-3，5-二羟基环戊基}-1-(2-苯基乙基)丙-2-烯-1-基4-(硝酰氧基)丁基碳酸酯

从早先尝试最优化预期顺式-碳酸酯实施例G-2中分离作为明显的副产物。

步骤1：4-氯丁基(1S,2E)-3-{(1R,2R,3S,5R)-2-[(2Z)-7-(乙基氨基)-7-氧代庚-2-烯-1-基]-3,5-.二羟基环戊基}-1-(2-苯基乙基)丙-2-烯-1-基碳酸酯(k-1)

向比马前列素硼酸酯b-1(529mg，1.10mmol)的THF溶液中加入DMAP(6.9mg，0.055mmol)。将溶液冷却至0℃并依次缓慢加入吡啶(0.22mL，2.75mmol)和氯甲酸4-氯丁酯(0.375mL，2.75mmol)。允许在环境温度下搅拌2天。加入更多的吡啶(89μL，1.11mmol)和氯甲酸4-氯丁酯(150μL，1.10mmol)并搅拌另外24小时。减压浓缩所得混合物，用乙酸乙酯和水分配残余物。有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩，得到808mg(134％)粗制油状物，其未经进一步纯化而使用。

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ0.62-0.71(m，1H)，0.88(t，J＝7.1Hz，2H)，1.11(t，J＝7.2Hz，2H)，1.22-1.38(m，3H)，1.57(s，2H)，1.64-1.77(m，2H)，1.77-1.92(m，4H)，1.86(dq，J＝10.5，10.3Hz，2H)，1.96(q，J＝3.2Hz，1H)，2.01-2.15(m，3H)，2.17-2.34(m，1H)，2.64(t，J＝7.1Hz)，3.26(dd，J＝7.2，5.7Hz，1H)，3.53-3.62(m，1H)，3.58(t，J＝6.1Hz，3H)，4.17(dt，J＝7.8，6.1Hz，2H)，5.34-5.59(m，3H)，7.11-7.22(m，2H)，7.27-7.34(m，1H)。

LCMS(ESI)(M+Na⁺)：573.2。

步骤2：实施例K-1(1S，2E)-3-{(1R，2R，3S，5R)-2-[(2E)-7-(乙基氨基)-7-氧代庚-2-烯-1-基]-3，5-二羟基环戊基}-1-(2-苯基乙基)丙-2-烯-1-基4-(硝酰氧基)丁基碳酸酯

将氯碳酸酯k-1(686mg，1.25mmol)和硝酸银(636mg，3.74mmol)在乙腈(12.5mL)中的混合物在82℃下搅拌过夜。加入更多的硝酸银(318mg，1.87mmol)，在82℃下进行另外5小时，然后允许在环境温度下搅拌4天。将所得混合物过滤通过硅藻土，用二氯甲烷冲洗所述硅藻土。减压蒸发滤液，将残余物溶解在二氯甲烷中，用水和盐水洗涤。真空浓缩萃取物，得到611m_g黄色-棕色油状物，用制备SFC将其纯化，得到55mg(7.6％)预期的浅黄色油状的顺式G-2和182mg(25.3％)浅黄色油状的反式-K-1。

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δ0.97(t，J＝7.20Hz，3H)，1.27-1.56(m，4H)，1.59-1.80(m，4H)，1.80-2.04(m，7H)，2.04-2.28(m，3H)，2.60(t，J＝7.83Hz，2H)，2.96-3.09(m，2H)，3.66(t，J＝6.32Hz，2H)，3.92(br.s.，1H)，4.09(t，J＝5.81Hz，2H)，4.38(br.s.，1H)，4.54(t，J＝6.06Hz，1H)，4.60(br.s.，1H)，4.96(q，J＝6.65Hz，1H)，5.26-5.38(m，1H)，5.39-5.59(m，3H)，7.12-7.23(m，3H)，7.23-7.33(m，2H)，7.70(br.s.，1H)。

HRMS.C₃₀H₄₄N₂O₉Na(M+Na)的计算值：599.2945；实测值：599.2911。

实施例M-2

(1S，2E)-(3-{(1R，2R，3S，5R)-2-[(2Z)-7-(乙基氨基)-7-氧代庚-2-烯-1-基]-3，5-二羟基环戊基}-1-(2-苯基乙基)丙-2-烯-1-基(5S)-5-(硝酰氧基)己酸酯

按照方案M中对于实施例M-1所示的相似路线进行制备，不同的是从(S)-5-羟基己酸叔丁酯(Pamies，O.；Backvall，J.E.J.Org.Chem.2002，67，1261-1265)开始。

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)：δ7.68(1H，t)；7.25(2H，m)；7.17(3H，m)；5.48(3H，m)；5.35-5.05(3H，m)；4.57(1H，d)；4.39(1H，d)；3.90(1H，m)；3.67(1H，m)；3.03(2H，m)；2.59(2H，t)；2.33(2H，t)；2.15(4H，m)；1.96(7H；m)；1.70-1.40(7H，m)；1.30(3H，d)；1.00(3H，t)。

方案N

实施例N-1

(1S，2E)-3-{(1R，2R，3S，5R)-2-[(2Z)-7-(乙基氨基)-7-氧代庚-2-烯-1-基]-3，5-二羟基环戊基}-1-(2-苯基乙基)丙-2-烯-1-基反式-2-[(硝酰氧基)甲基]环丙烷羧酸酯

步骤1：反式-2-羟基甲基-1-环丙烷羧酸乙酯(n-2)

如Kajiwara，T.；Nakatomi，T.；Sasaki，Y.；Hatanaka，A..Agric.Biol.Chem.1980，44，2099-2104中所述，在冰浴中冷却的容器中，向反式-2-甲酰基-1-环丙烷羧酸乙酯(n-1；Aldrich；335g，2.36mol)的乙醇(2L)溶液中分批加入硼氢化钠(44.6g，1.18mol)。在环境温度下搅拌2小时后，小心滴加水(1L)。将所得溶液浓缩以除去乙醇，用乙酸乙酯(2×1L)萃取。有机层经MgSO₄干燥，过滤并蒸发，得到313g(92％)无色液体状的醇n-2，其NMR与报道的NMR(Ando，W.；Imai，I.；Migita，T.J.Org.Chem.1972，37，3596-3600)相符，并且未经进一步纯化而使用。

步骤2：反式-2-羟基甲基-1-环丙烷羧酸(n-3)

向反式-2-羟基甲基-1-环丙烷羧酸乙酯(n-2；313g，2.17mol)的乙醇(1L)溶液中缓慢加入氢氧化钠(130g，3.26mol)的水(1.3L)溶液。将所得溶液在环境温度下搅拌48小时。减压除去乙醇，然后用2M HCl水溶液使pH达到约2，用乙酸乙酯(4L)萃取。有机萃取物用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并减压蒸发，得到144g(约57％)白色固体状的酸n-3，其未经进一步纯化而使用，其NMR与报道的NMR(手性异构体的NMR；参见补充材料Wellendorph，P.；Hog，S.；Greenwood，J.R.；de Lichtenberg，A.；Nielsen，B.；Frolund，B.；Brehm，L.；Clausen，R.P.；Brauner-Osborne，H.JPharmacol Exp Ther2005，315，346-351)相符。

步骤3：反式-2-溴甲基-1-环丙烷羧酸(n-4)

与D′Yakonov，I.A.；Guseva，O.V.Sbornik Statei Obshchei Khim.，Akad.Nauk S.S.S.R.1953，1，425-33；Chem.Abstr.；1955；882中所报道的相似，向机械搅拌的反式-2-羟基甲基-1-环丙烷羧酸(n-3；144g，1.24mol)的CH₂Cl₂(1L)溶液中滴加PBr₃(111g，0.413mol)。在环境温度下14、时后，减压除去CH₂Cl₂，得到油状物，将其在冰浴中冷却。滴加水。混合物用乙酸乙酯(3×1L)萃取。将有机萃取物汇集，经MgSO4干燥，过滤并减压蒸发，得到油状物，通过硅胶柱色谱将其纯化(用EtOAc：己烷；1∶10洗脱)，得到136g(60％)溴化物n-4，为白色晶体，其未经进一步纯化而使用。

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：δ1.03(m，1H)，1.48(m，1H)，1.63(m，1H)，1.99(m，1H)，3.37(m，2H)，12.05(s，1H)。

ESI MS：m／z178.66；176.69。

C₅H₇O₂Br的分析计算值：C，33.55；H，3.94。实测值：C，34.09；H，3.83

步骤4：反式-2-硝酰氧基甲基-1-环丙烷羧酸(n-5)

将硝酸银加入到反式-2-(溴甲基)环丙烷羧酸(n-4；4.48g，25mmol)的乙腈(25mL)溶液中。混合物立即变为白色，然后成为浅绿色悬浮液。在环境温度下72小时后，使所得混合物过滤通过硅藻土，用乙腈将其洗涤。浓缩滤液，然后用EtOAc(3x200mL)萃取。合并的有机萃取物用水和盐水洗涤，经MgSO₄干燥，过滤，浓缩并真空干燥，得到3.765g(93％)硝酸酯n-5，为白色固体，其未经进一步纯化而使用。

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δ12.36(s，1H)，4.53(dd，J＝11.24，6.95Hz，1H)，4.38(dd，J＝11.24，7.96Hz，1H)，1.51-1.75(m，2H)，0.93-1.15(m，2H).

C₃₇H₅₅N₃O₁₂·0.06EtOAc的分析计算值：C，37.82；H，4.53；N，8.42。实测值：C，37.87；H，4.49；N，8.44。

步骤5：反式-2-(氯羰基)环丙基]甲基硝酸酯(n-6)

在氮气下，将反式-2-[(硝酰氧基)甲基]环丙烷羧酸(n-5；967mg，6.00mmol)溶解在无水CH₂Cl₂(60mL)中，然后冷却至0℃。依次加入无水DMF(44mg，0.6mmol)和草酰氯(523μL，6.0mmol)。允许温热至环境温度。12小时后，冷却至0℃，再次依次加入无水DMF(44mg，0.60mmol)和草酰氯(261μL，3.00mmol)。4小时后，通过¹³CNMR检查，证实了含有少量羧酸(δ173)的酰氯(δ171)。过滤通过二氧化硅塞。真空浓缩滤液，得到900mg(80％)反式-2-(氯羰基)环丙基]甲基硝酸酯(n-6)，其为油状物，其未经进一步纯化而使用。

1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ4.47-4.67(m，1H)，4.26-4.47(m，1H)，1.52-1.75(m，2H)，0.88-1.13(m，2H)。

步骤6：实施例N-1(1S，2E)-3-{(1R，2R，3S，5R)-2-[(2Z)-7-(乙基氨基)-7-氧代庚-2-烯-1-基]-3，5-二羟基环戊基}-1-(2-苯基乙基)丙-2-烯-1-基反式-2-[(硝酰氧基)甲基]环丙烷羧酸酯

在0℃下，向比马前列素硼酸酯b-1(560mg，1.16mmol)的DCM(6.86mL)溶液中加入DMAP树脂(Biotage“PS-DMAP”；1.125g，1.6mmol/g，1.80mmol)和粗制酰氯n-6(312mg，1.74mmol)。在0℃下20分钟后，除去冷却浴，使混合物在环境温度下搅拌12小时。将所得混合物冷却至0℃，加入另外的酰氯n-6(214mg，1.2mmol)和DMAP树脂(0.772g，1.6mmol／g，1.236mmol，1.03eq)。20分钟后，使其温热并在环境温度下搅拌12小时。过滤出树脂，用水(0.5mL)猝灭并减压除去溶剂。用CH₂Cl₂(50mL)和水(10mL)将残余物分配。用CH₂Cl₂(2×50mL)萃取。合并的有机层经MgSO₄干燥，过滤并真空浓缩，得到油状物，用硅胶纯化所述油状物(Biota_ge；25S柱)(用连续梯度25％-100％EtOAc-己烷、100％EtOAc和5％MeOH-CH₂Cl₂洗脱)。得到级分404mg(60％){(1R，2R，3S，5R)-2-[(2Z)-7-(乙基氨基)-7-氧代庚-2-烯-1-基]-3，5-二羟基环戊基}-1-(2-苯基乙基)丙-2-烯-1-基反式-2-[(硝酰氧基)甲基]环丙烷羧酸酯(N-1)，为无色油状物，通过手性SFC-HPLC分析，其为非对映体的1：1混合物。

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δ7.70(br.s.，1H)，7.27(t，J＝7.45Hz，2H)，7.13-7.22(m，3H)，5.37-5.52(m，3H)，5.21-5.34(m，1H)，5.14(d，J＝5.81Hz，1H)，4.47-4.58(m，2H)，4.31-4.45(m，2H)，3.85-3.95(m，1H)，3.63-3.74(m，1H)，2.96-3.09(m，2H)，2.53-2.64(m，2H)，2.04-2.24(m，3H)，1.80-1.97(m，6H)，1.56-1.72(m，3H)，1.38-1.53(m，3H)，1.24-1.37(m，1H)，1.04-1.14(m，2H)，0.92-1.02(m，3H)。

LCMS ESI(M+Na)⁺：581.2。

HRMS C₃₀H₄₂N₂O₈m／z[M+Na]⁺的计算值：581.2833。实测值：581.2828。

C₃₀H₄₂N₂O₈·0.13H₂O的分析计算值：C，64.23；H，7.59；N，4.99。实测值：C，64.23；H，7.57；N，4.97。

实施例O-1：(1S,2E)-3-{(1R,2R,3S,5R)-2-[(2Z)-7-(乙基氨基)-7-氧代庚-2-烯-1-基]-3,5-二羟基环戊基}-1-(2-苯基乙基)丙-2-烯-1-基5-(硝酰氧基)戊酸酯

在氮气下，将5-(硝酰氧基)戊酸(489mg，3.00mmol；美国专利2006／189603)溶解在无水DCM(30mL)中，冷却至0℃，并依次加入无水DMF(1滴)和草酰氯(262μL，3.00mmol)。允许在环境温度下搅拌12小时。¹³CNMR显示含有少量羧酸(约δ173ppm)的酰氯(δ171ppm)。蒸发并真空干燥，得到450mg(80％)硝酸5-氯-5-氧代戊酯，为浅黄色油状物，其未经进一步纯化而使用。

在0℃下，向比马前列素硼酸酯b-1(560mg，1.16mmol)的DCM(2mL)溶液中依次加入DMAP树脂(1.087g，1.6mmol／g；1.74mmol；Biotage“PS-DMAP”)和粗制硝酸5-氯-5-氧代戊酯(305mg，1.69mmol)。在0℃下20分钟后，除去冷却浴，并允许在环境温度下搅拌，24小时后冷却至0℃，加入更多的硝酸5-氯-5-氧代戊酯(125mg，0.70mmol，0.60eq)和DMAP树脂(0.453g，1.6mmol／1g，0.725mmol，0.625eq)。使其温热并在环境温度下搅拌24小时，然后冷却至0℃，加入另外的粗制硝酸5-氯-5-氧代戊酯(209mg，1.16mmol)和DMAP树脂(0.743g，1.6mmol／1g，1.19mmol，1.03eq)。使其温热并在环境温度下搅拌72小时。过滤出树脂，用水(0.5mL)猝灭并减压除去溶剂，得到残余物，用CH₂Cl₂(50mL)和水(10mL)将所述残余物分配，用CH₂Cl₂(2×50mL)萃取。合并的有机层经MgSO₄干燥，真空蒸发得到油状物，将所述油状物通过质量指导的(mass-directed)制备-HPLC纯化，得到233mg(49.5％)(1S,2E)-3-{(1R,2R,3S,5R)-2-[(2Z)-7-(乙基氨基)-7-氧代庚-2-烯-1-基]-3,5-二羟基环戊基}-1-(2-苯基乙基)丙-2-烯-1-基5-(硝酰氧基)戊酸酯(O-1)，为无色油状物。

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δ7.68(t，J＝5.05Hz，1H)，7.22-7.32(m，2H)，7.12-7.21(m，3H)，5.35-5.55(m，3H)，5.11-5.31(m，2H)，4.47-4.61(m，3H)，4.40(d，J＝4.80Hz，1H)，3.85-3.95(m，1H)，3.62-3.76(m，1H)，2.95-3.11(m，2H)，2.53-2.63(m，2H)，2.35(t，J＝7.20Hz，2H)，2.03-2.27(m，3H)，1.81-2.01(m，7H)，1.55-1.72(m，4H)，1.38-1.52(m，3H)，1.26-1.35(m，1H)，0.97(t，J＝7.20Hz，3H)。

LCMS ESI(M+Na)⁺：584.2

MA：C₃₀H₄₄N₂O₈Na[M+Na]⁺的计算值：m／z583.2989。实测值：583.2993。

C₃₀H₄₄N₂O₈-0.32H₂O.0.06CH₂Cl₂的分析计算值：C，63.10；H，7.88；N，5.02。实测值：C，63.17；H，7.89；N，4.90。

方案P

步骤1.4-(硝酰氧基)丁基4-硝基苯基碳酸酯(p-1)

将粗制硝酸4-羟基-丁酯(j-1；1580mg，11.7mmol；专利申请US2006／189603A1)溶解在ACN和THF(1：3，112mL)中，用氯碳酸对硝基苯酯(4.71g，23.4mmol)处理。缓慢加入吡啶(2.84mL，35.1mmol)，混合物变为温热，因此在加入过程中用冰浴冷却。使混合物在环境温度下搅拌过夜。过滤所得悬浮液。固体用ACN和THF洗涤。减压浓缩滤液。将残余物溶解在EA中，用水和盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到1.49g粗制固体，所述固体对正相色谱呈弱的有机可溶性。通过制备HPLC纯化得到1.45_g(41％)无色固体，其未经进一步纯化而使用。

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ1.91(dt，J＝6.06，3.03Hz，4H)，4.23-4.45(m，2H)，4.47-4.68(m，2H)，7.32-7.48(m，2H)，8.16-8.50(m，2H)。

步骤2.用碳酸4-(硝酰氧基)丁酯(4-硝基苯基)酯将比马前列素酰化

(1R,3S,4R,5R)-4-[(2Z)-7-(乙基氨基)-7-氧代庚-2-烯-1-基]-5-[(1E,3S)-3-({[4-(硝酰氧基)丁氧基]羰基}氧基)-5-苯基戊-1-烯-1-基]环戊烷-1,3-二基二[4-(硝酰氧基)丁基])二碳酸酯(P-1)

(1S,2E)-3-[(1R,2R,3S,5R)-2-[(2Z)-7-(乙基氨基)-7-氧代庚-2-烯-1-基]-3-羟基-5-({[4-(硝酰氧基)丁氧基]羰基}氧基)环戊基]-1-(2-苯基乙基)丙-2-烯-1-基4-(硝酰氧基)丁基碳酸酯(P-2)(1R,3S,4R,5R)-4-[(2Z)-7-(乙基氨基)-7-氧代庚-2-烯-1-基]-5-[(1E,3S)-3-羟基-5-苯基戊-1-烯-1-基]环戊烷-1,3-二基二[4-(硝酰氧基)丁基]二碳酸酯(P-3)

将比马前列素(1.00g，2.41mmol)溶解在DCM(24.1mL)中，用4-(硝酰氧基)丁基4-硝基苯基碳酸酯(p-1；1.45g，4.82mmol)和DMAP(607mg，4.82mmol)处理，允许在环境温度下搅拌60小时。所得混合物用DCM稀释，用水和盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩得到粗制混合物，通过连续色谱循环纯化所述混合物(MPLC(10-100％EA／己烷，然后5-15％甲醇／DCM)，接着制备HPLC)得到以下数种纯化合物：

11-碳酸酯G-1：210mg(15％)，浅黄色油状物。

15碳酸酯G-2：30mg(2％)，浅黄色油状物。

三硝酸酯P-1：124mg(5％)，浅黄色油状物。

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δ0.98(t，J＝7.20Hz，3H)，1.41-1.55(m，2H)，1.59-1.78(m，13H)，1.80-2.15(m，9H)，2.43-2.50(m，1H)，2.54-2.65(m，3H)，2.96-3.10(m，2H)，3.99-4.18(m，6H)，4.33-4.33(m，0H)，4.45-4.62(m，6H)，4.81(ddd，J＝8.91，7.26，3.79Hz，1H)，4.87(t，J＝4.67Hz，1H)，4.93-5.04(m，1H)，5.25-5.41(m，2H)，5.59-5.72(m，2H)，7.13-7.23(m，3H)，7.23-7.34(m，2H)，7.69(t’J＝5.18Hz，1H)。

C₄₀H₅₈N₄O₁₉·0.25H₂O的分析计算值：C，62.00；H，7.72；N，4.82。实测值C，62.06；H，7.76；N，4.90。

11，15-二硝酸酯P-2：320mg(18％)，浅黄色油状物。

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ0.97(t，J＝7.20Hz，3H)，1.38-1.58(m，4H)，1.58-1.77(m，8H)，1.79-2.03(m，7H)，2.05-2.17(m，1H)，2.34(ddd，J＝14.78，9.09，5.43Hz，1H)，2.44-2.48(m，1H)，2.52-2.63(m，2H)，2.96-3.07(m，2H)，3.95(d，J＝4.04Hz，1H)，3.98-4.15(m，4H)，4.51(ddd，J＝12.88，6.32，6.06Hz，4H)，4.64-4.76(m，2H)，4.96(q，J＝6.48Hz，1H)，5.28(dt，J＝10.93，7.17Hz，1H)，5.34-5.46(m，1H)，5.48-5.69(m，2H)，7.11-7.21(m，3H)，7.22-7.32(m，2H)，7.69(t，J＝5.31Hz，1H)。

LCMS(M+Na⁺)：m／z760.2。

证实该结构的关键方面为通过1D质子、2D HAQC、COAY和HMBC谱检查将次甲基信号(H-8、H-9、H-11、H-12、H-15-参见以下的非常规编号和结构)和羟基信号进行指定。通过检查HAQC谱、在质子谱中寻找信号、以及HAQC中不存在交叉峰来鉴定C-9处的羟基。通过检查COAY谱，相对于次甲基H-8和亚甲基H-5定位羟基。在COAY谱中还观察到清楚和明显的H-15与H-10a的偶合，以及H-12与H-9a的偶合。HMBC谱允许相对于明显的羰基C-7和C-13a，将次甲基质子H-9和H-15进行指定，如下图所示。

对于P-2的NMR相关

9，11-二硝酸酯P-3：78mg(4％)，浅黄色油状物。

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ0.97(t，J＝7.20Hz，3H)，1.41-1.51(m，2H)，1.58-1.76(m，11H)，1.76-2.12(m，7H)，2.38-2.48(m，1H)，2.52-2.65(m，3H)，2.96-3.08(m，2H)，3.88-3.98(m，1H)，4.00-4.15(m，4H)，4.52(dt，J＝17.62，6.09Hz，4H)，4.73-4.83(m，2H)，4.86(t，J＝4.93Hz，1H)，5.25-5.39(m，2H)，5.43-5.63(m，2H)，7.10-7.20(m，3H)，7.21-7.30(m，2H)，7.69(s，1H)。

LCMS(M+Na⁺)：m／z760.2。

通过NMR证实该结构的重要方面是通过1D质子、2D HAQC、COAY和HMBC谱检查将次甲基(H-8、H-9、H-11、H-12、H-15-参见以下的非常规编号和结构)信号和羟基信号进行指定。通过检查HAQC谱、在质子谱中寻找信号、以及HAQC中不存在交叉峰来鉴定C-15处的羟基。通过检查COAY谱相对于次甲基H-14和H-16定位该羟基，所述COAY谱显示清楚和明显的H-15与H-14的偶合。COAY谱也表明H-8相对于H-9和H-12的位置。HMBC谱允许相对于明显的羰基C-7和C-22将次甲基质子H-9和H-11进行指定。HMBC相关也表明羟基质子H-12a相对于C-14的位置。

对于P-3的NMR相关

方案Q

实施例Q-1

(1S,2E)-3-{(1R,2R,3S,5R)-2-[(2Z)-7-(乙基氨基)-7-氧代庚-2-烯-1-基]-3，5-二羟基环戊基}-1-(2-苯基乙基)丙-2-烯-1-基(5R)-5,6-二(硝酰氧基)己酸酯

步骤1：己-5-烯酸叔丁酯(q-2)

在-10℃下，向5-己烯酸q-1(6.00g，52.6mmol)、叔丁醇(72.2mL，735.84mmol)和DMAP(1.28g，10.51mmol)在DCM(150mL)中的搅拌溶液中加入DCC(16.26g，78.84mmol)。在室温下搅拌过夜后，过滤出固体。减压蒸发滤液得到粗制油状物，通过色谱(Biotage；65i)纯化所述粗制油状物。用EtOAc／己烷从5／95至10／90的梯度洗脱，得到4.16g(46.53％)叔丁酯q-2，其显示了与文献(Johnson，P.Y.；Berchtold，G.A.J.Org.Chem.1970，35，584-592)相符的¹H NMR谱，并未经纯化而使用。

步骤2：(5R)-5，6-二羟基己酸叔丁酯(q-3)

在0℃下，向AD-mix-β(Aigma-Aldrich，40g，1.4g／mol)在H₂O／叔丁醇1：1(300mL)中的搅拌悬浮液中加入烯烃q-2(4.95g，28mmol)。将混合物在4℃下搅拌过夜，然后加入EtOAc(160mL)，使用冰浴将温度保持在0℃，加入Na₂A₂O₅(11.8g)。30分钟后，除去冰浴，使温度升至23℃。水相用EtOAc(3x200mL)萃取。有机相用盐水洗涤，经Na₂AO₄干燥，经硅胶过滤，减压蒸发溶剂，得到5.43g(95％)手性二醇q-3，其未经进一步纯化而使用。

步骤3：(5R)-5，6-二(硝酰氧基)己酸叔丁酯(q-4)

向0℃下冷却的HNO₃(5.8mL，140mmol)的Ac₂O(20mL)溶液中加入二醇q-3(5.72g，28mmol)的DCM(20mL)溶液。将混合物冷却至0℃。30分钟后加入NaOH，达到pH7，混合物用DCM(3x50mL)萃取。有机相经硫酸钠干燥，化合物通过色谱纯化(Biotage；100SNAP)(用EtOAc-己烷5／95至20／80的梯度洗脱)，得到5g(61％)手性二硝酸酯q-4，其未经进一步纯化而使用。

步骤4：(5R)-5，6-二(硝酰氧基)己酸(q-5)

向在0℃下冷却的叔丁酯q-4(5g，17mmol)的DCM(20mL)溶液中加入BF₃·Et₂O(2.4mL，18.7mmol)，将混合物在0℃下搅拌3小时，并在室温搅拌过夜。加入饱和NaHCO₃水溶液和NaOH(颗粒)直到pH10，混合物用DCM(3x150mL)萃取。有机相用3M HCl缓慢酸化，用DCM萃取，用盐水洗涤并用Na₂AO₄干燥。在环境温度下将溶剂部分地减压除去至约20mL，将酸q-5的DCM溶液用于随后的反应中(4.05_g理论最终量)。¹H NMR与Lazzarato，L.等，J.Med.Chem.2005，48，1322-1329中对于外消旋体报道的¹H NMR相符。

步骤5：(5R)-5,6-二(硝酰氧基)己酸4-硝基苯酯(q-6)

向酸q-5(1.33g，5.6mmol)的DCM(20mL)溶液中加入EDAC(1.3g，6.7mmol)、DMAP(催化量)和对硝基苯酚(780mg，5.6mmol)。使混合物搅拌过夜，然后加入饱和NaHCO₃溶液。减压蒸发溶剂，通过色谱纯化粗产物(Biotage；100ANAP)(用DCM／己烷80／20的混合物洗脱)，得到1.25g(63％)对硝基苯酯q-6，其未经进一步纯化而使用。

步骤6：(1A，2E)-3-{(1R，2R，3A，5R)-2-[(2Z)-7-(乙基氨基)-7-氧代庚-2-烯-1-基]-3，5-二羟基环戊基}-1-(2-苯基乙基)丙-2-烯-1-基(5R)-5，6-二(硝酰氧基)己酸酯

用DCM(20mL)中的粗制对硝基苯酯q-6(1.25g，3.48mmol)和DMAP(430mg，3.48mmol)酰化比马前列素硼酸酯b-1。将混合物搅拌8小时，减压蒸发DCM。将残余物溶解在MeOH(20mL)中并搅拌过夜以使所述化合物脱保护。蒸发溶剂，通过制备HPLC得到纯的340mg(55％)15-酰基二硝酸酯Q-1。

¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)：δ0.97(t，3H)，1.35(m，1H)，1.40-1.65(m，3H)，1.60-1.80(m，4H)，1.80-2.00(m，7H)，2.05-2.25(3H)，2.34-2.38(m，2H)，2.57-2.62(m，2H)，3.01-3.05(m，2H)，3.60-3.71(m，1H)，3.91(m，1H)，4.40(d，1OH)，4.57(d，1OH)，4.67-4.96(m，2H)，5.17(m，1H)，5.28(m，1H)，5.41-5.50(m，4H)，7.16-7.19(m，3H)，7.25-7.30(m，2H)，7.69(s，1H)。

MS(M+1)：636.2

实施例Q-2：(1A，2E)-3-{(1R，2R，3A，5R)-2-[(2Z)-7-(乙基氨基)-7-氧代庚-2-烯-1-基]-3，5-二羟基环戊基}-1-(2-苯基乙基)丙-2-烯-1-基(5A)-5，6-二(硝酰氧基)己酸酯

以与对于对映体Q-1相似的方式，在方案Q中使用AD-mix-α，以生成硝基苯酯q-6的对映体。由此制备Q-2，并通过制备HPLC纯化。如所预期的，NMR谱与Q-1的NMR谱相同。

方案R

实施例R-1

(1S,2E)-3-{(1R,2R,3S,5R)-2-[(2Z)-7-(乙基氨基)-7-氧代庚-2-烯-1-基]-3，5-二羟基环戊基}-1-(2-苯基乙基)丙-2-烯-1-基(5S)-5-(硝酰氧基)己基碳酸酯

步骤1：(5A)-己烷-1,5-二醇(r-2)

在0℃下，向(5A)-5-羟基己酸叔丁酯(r-1；Pámies，O.；

J.-E.J.Org.Chem.2002，67，1261-1265；3.00g，15.9mmol)的THF(35mL)搅拌溶液中加入LiAlH₄(31.88mL的1M THF溶液，31.88mmol)。将混合物搅拌4小时，冷却至0℃并用1N NaOH处理直到停止泡腾。加入Et₂O(600mL)，将混合物保持在强力搅拌下。溶液经Na₂SO₄干燥，过滤并减压蒸发溶剂，得到1.9g手性二醇r-2，其具有与报道的NMR(Davies，A.G.；Smyth，G.D.Tetrahedron：Asymmetry1996，7，1001-1004)相同的NMR，其未经进一步纯化而使用。

步骤2：(5A)-5-羟基己基4-硝基苯基碳酸酯(r-3)

向二醇r-2(1.75g，14.81mmoi)的DCM(36mL)溶液中加入吡啶(1.31mL，16.3mmol)，将混合物在0℃下冷却。滴加氯甲酸对硝基苯酯(2.98g，14.81mmol)的DCM(8mL)溶液，3小时后，混合物用5％H₃PO₄水溶液(100mL)洗涤。干燥溶剂并减压蒸发溶剂，得到粗制化合物(5g)，用硅胶将其纯化(Biotage；40+M)(用20％-50％EtOAc-己烷和50％EtOAc的连续梯度洗脱)，得到2.44g(58％)混合碳酸酯r-3，其未经进一步纯化而使用。

步骤3：(5S)-5-硝酰氧基己基4-硝基苯基碳酸酯(r-4)

向0℃下冷却的HNO₃(2.02mL，48.73mmol)的Ac₂O(13mL)溶液中加入溶解在DCM(2mL)中的r-3(2.3g，8.12mmol)，将混合物在0℃下冷却。30分钟后，加入NaOH，以达到pH7，混合物用DCM(3x150m)萃取。干燥有机相，化合物用硅胶纯化(Biotage；40+M)(用5％-20％EtOAc-己烷和20％EtOAc的连续梯度洗脱)，得到1.97g(74％)硝酸酯r-4，其未经进一步纯化而使用。

步骤4：(1A，2E)-3-{(1R,2R,3A，5R)-2-[(2Z)-7-(乙基氨基)-7-氧代庚-2-烯-1-基]-3，5-二羟基环戊基}-1-(2-苯基乙基)丙-2-烯-1-基(5A)-5-(硝酰氧基)己基碳酸酯(R-1)

用DCM(25mL)中的粗制对硝基苯酯r-4(1.18g，3.61mmol)和DMAP(441mg，3.61mmol)酰化比马前列素硼酸酯b-1(580mg，1.2mmol)。将混合物搅拌8小、时，减压蒸发溶剂。将残余物溶解在MeOH(20mL)中并搅拌过夜，以使化合物脱保护。蒸发溶剂并通过制备HPLC得到380mg(52％)纯的R-1。

¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)：δ0.97(t，3H)，1.30(d，3H)，1.30-1.70(m，10H)，1.80-2.00(m，7H)，2.05-2.25(3H)，2.60(m，2H)，3.02(m，2H)，3.68(m，1H)，3.90(m，1H)，4.05(m，2H)，4.40(d，1OH)，4.60(d，1OH)，4.96(m，1H)，5.12(m，1H)，5.28(m，1H)，5.37-5.62(m，3H)，7.16-7.19(m，3H)，7.25-7.30(m，2H)，7.69(s，1H)。

MS(M+1)：605。

实施例R-2

(1A，2E)-3-{(1R，2R，3A，5R)-2-[(2Z)-7-(乙基氨基)-7-氧代庚-2-烯-1-基]-3，5-二羟基环戊基}-1-(2-苯基乙基)丙-2-烯-1-基(5R)-5-(硝酰氧基)己基碳酸酯

与实施例R-1类似，除了用对映体(5R)-5-(乙酰氧基)己酸叔丁酯(Pámies，O.；

J.-E.J.Org.Chem.2002，67，1261-1265)开始方案R，并最终制备粗制碳酸对硝基苯酯r-4的对映体，将其类似地用于酰化比马前列素硼酸酯(580mg，1.2mmol)，在进行制备HPLC纯化后得到420mg(57％)15-酰基硝酸酯R-2。

¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)：δ0.97(t，3H)，1.30(d，3H)，1.30-1.70(m，10H)，1.80-2.00(m，7H)，2.05-2.25(3H)，2.60(m，2H)，3.02(m，2H)，3.68(m，1H)，3.90(m，1H)，4.05(m，2H)，4.40(d，1OH)，4.60(d，1OH)，4.96(m，1H)，5.12(m，1H)，5.28(m，1H)，5.37-5.62(m，3H)，7.16-7.19(m，3H)，7.25-7.30(m，2H)，7.69(s，1H)。

MS(M+1)：605。

方案S

实施例S-1

(1R,2E)-3-{(1R,2R,3S,5R)-2-[(2Z)-7-(乙基氨基)-7-氧代庚-2-烯-1-基]-3，5-二羟基环戊基}-1-(2-苯基乙基)丙-2-烯-1-基6-(硝酰氧基)己酸酯

步骤1.(5Z)-7-{(1R,2R,3R,5S)-3,5-二羟基-2-[(1E)-3-氧代-5-苯基戊-1-烯-1-基]环戊基}-N-乙基庚-5-烯酰胺(15-酮基-比马前列素；s-1)

使用来自Taber，D.F.；Kanai，K.Tetrahedron1998，54，11767-11782的方法，向比马前列素(100mg，0.240mmol)的1,4-二噁烷(20mL)搅拌溶液中分批加入DDQ(224mg，0.96mmol)。将所得混合物在环境温度下搅拌过夜，然后用水(2x20mL)和盐水(2x20mL)洗涤。有机层用Na₂SO₄干燥，过滤并真空浓缩，得到15-酮基-比马前列素s-1(54mg，0.13mmol)，产率为50％，其为略带红色的固体，其未经进一步纯化而用于下一步骤。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ1.14(t，J＝7.3Hz，3H)，1.35(d，J＝10.5Hz，1H)，2.80-2.98(m，4H)，3.20-3.35(m，2H)，4.05(bm，1H)，4.10(m，1H)，5.36-5.42(m，2H)，6.16(d，J＝15.7Hz，1H)，6.68(dd，J＝8.8，15.7Hz，1H)。

LCMS ESI(M+Na⁺)：m／z437.20。

步骤2.(5Z)-7-{(1R，2R,3R,5S)-3,5-二羟基-2-[(1E,3R)-3-羟基-5-苯基戊-1-烯-1-基]环戊基}-N-乙基庚-5-烯酰胺(15-表-比马前列素；s-2)

在氮气氛下，将15-酮s-1(530mg，最大1.28mmol)和CeCl₃.7H₂O(143.3mg，0.38mmol，0.3当量)在MeOH／DCM(2：1，48mL)中的溶液在-78℃下搅拌30分钟。一批加入NaBH₄(28.75mg，0.77mmol，1.6当量)。在-78℃下1小时后，用1N HCl水溶液将混合物酸化至_pH3并用EtOAc(100mL)稀释。加入盐水(50mL)，分离有机层并用盐水洗涤(2x50mL)，真空浓缩，得到420mg黄色油状物，通过具有ISCO装置的MPLC进行最初纯化(硅胶80g，DCM／IPA，梯度直至30％)，首先洗脱95mg(18％)15-表-比马前列素s-2，通过手性分析性HPLC(Chiralcel OD-H，使用庚烷／EtOH／Et2NH85／15／0.2)(发现)其具有91％非对映体过量。其次洗脱的再生比马前列素(280m_g(53％)，含有92％非对映体过量)重新用于如上所述另一个循环中，与其它批次合并，并纯化得到97％非对映体过量，然后用于下面(步骤)。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ1.08(t，J＝6.8Hz，3H)，3.18-3.29(m，2H)，3.93(bm，1H)，4.09(m，1H)，4.15(m，1H)，5.28-5.63(m，4H)。

步骤3(5Z)-7-{(6R，7R)-3-丁基-7-[(1E，3R)-3-羟基-5-苯基戊-1-烯-1-基]-2，4-二氧杂-3-硼杂双环[3.2.1]辛-6-基}-N-乙基庚-5-烯酰胺(s-3)

按照对于硼酸酯b-1给出的程序来制备：从15-表-比马前列素s-2(165m_g，0.400mmol)得到油状物，其未经进一步纯化而使用。

¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)：δ.0.82(t，J＝7.3Hz，3H)，0.98(t，J＝7.3Hz，3H)，3.03(ddd，J＝7.2，7.3，12.9Hz，2H)，3.88(m，1H)，4.03(s，1H)，4.78(d，J＝4.7Hz，1H)，5.27-5.58(m，4H)，7.18-7.37(m，5H)，7.73(bs，1H)。

步骤4(1R，2E)-3-{(6R，7R)-3-丁基-7-[(2Z)-7-(乙基氨基)-7-氧代庚-2-烯-1-基]-2，4-二氧杂-3-硼杂双环[3.2.1]辛-6-基}-1-(2-苯基乙基)丙-2-烯-1-基6-溴己酸酯(s-4)

按照对于酯b-2所描述的程序进行制备：粗制醇s-3(理论上为0.400mmol)得到粗制卤代-酯s-4，为浅黄色油状物，其未经进一步纯化而用于下一步骤。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ0.88(t，J＝6.9Hz，3H)，1.15(t，J＝7.2Hz，3H)，2.51(t，J＝7.3Hz，1H)，2.62(t，J＝7.2Hz，2H)，4.10(s，1H)，4.18(s，1H)，5.20(q，J＝6.4Hz，1H)，5.33-5.58(m，4H)。

LCESIMS(M+Na)：615.10；616.10。

步骤5.(1R，2E)-3-{(1R，2R，3S，5R)-2-[(2Z)-7-(乙基氨基)-7-氧代庚-2-烯-1-基]-3，5-二羟基环戊基}-1-(2-苯基乙基)丙-2-烯-1-基6-(硝酰氧基)己酸酯S-1)

按照对于实施例B-1提供的程序进行制备：粗制卤代-酯s-4(理论上为0.400mmol)得到350mg黄色油状物，通过具有ISCO装置的MPLC(硅胶，DCM／IPA，0-30％梯度)和制备HPLC(水：乙腈：HCOOH)纯化所述油状物，得到80mg(三步骤的产率为35％)目标硝酸酯B-1，通过HPLC-MS(分析)其纯度为100％。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ1.15(t，J＝7.3Hz，3H)，2.66(t，J＝7.5Hz，1H)，3.30(ddd，J＝1.0，7.3，13.0Hz，2H)，3.97(bs，1H)，4.20(bs，1H)，4.46(t，J＝6.6Hz，2H)，5.28(dd，J＝6.6，13.2Hz，1H)，5.39(m，1H)。

LC ESI MS(M+Na⁺)：m／z597.30。

表1具体实施例

所选实施例的功效通过呼吸气量测定法(pneumatonometry)测量眼内压

在眼压正常的狗(Beagle)和高眼压的非人灵长动物中通过呼吸气量测定法测量眼内压(例如尽管在本文中剂量不同，参见由Toris，C.B.；Zhan，G.-L.；Feilmeier，M.R.；Camras，C.B.；McLaughlin，M.A.J.OcμLar Pharm.Ther.2006，22，86-92描述的高(眼)压灵长动物)。如所描述的，在该灵长动物模型中，仅一只眼睛为高(眼)压。经训练接受呼吸气量测定法的清醒动物(n＝8／研究)中进行研究。将试验化合物和对照品配制在含有0.5％吐温80和0.02％苯扎氯铵的10mM柠檬酸缓冲载体(pH5.5)中，并在晚上给药。以与0.03％比马前列素等摩尔浓度的剂量配制所有试验化合物。在治疗后-12小时(基线)、12小时和18小时测量眼内压。当测量眼内压时，用盐酸丁卡因(0.5％)麻醉角膜。

在灵长动物模型中，高压眼接受2x25μl体积滴量的试验化合物。一周冲洗期后，然后向眼高压症眼施用比马前列素(2x25μl体积滴量)作为对照。在本研究中，对侧的正常(眼)压的眼未经处理。在正常(眼)压的狗模型中，以50μl体积滴量对一只眼局部施用试验化合物。对侧眼接受50μl体积滴量的空白载体或比马前列素(仅在头-对-头研究的情况下)用作对照。使用学生配对t检验来对试验化合物处理与载体或比马前列素对照处理进行显著差异性比较。

表2和3描述了在眼高压症非人灵长动物和眼压正常的狗中局部施用新的NO-比马前列素之后所见到的眼内压(IOP)的变化。ΔEmax表示与基线(BL)值相比的最大功效。ΔΔEmax反映了化合物处理的眼与对于载体处理的眼在其中观察到化合物的最大IOP降低的时间点所见到的IOP的差异。来自载体对照的百分比变化为由化合物实现的超过载体的IOP降低(设定在100％)的IOP降低的百分比变化。Tmax表示观察到化合物的最大IOP降低的时间点。

表2：灵长动物IOP总结-实施例B-1和比马前列素

*相对于基线p＜0.05，**相对于基线比较p＜0.01

表3：狗IOP总结-NO-前列酰胺试验化合物和比马前列素

**相对于载体对照p＜0.01

Claims (5)

1.式(IX)化合物或其药学上可接受的盐

其中:

R¹和R²各自独立地为H、-C(O)R⁵-ONO₂、-C(O)OR⁵-ONO₂、-C(O)R⁵R⁶-ONO₂、-[C(O)R⁵]_m-ONO₂、-C(O)R⁵-[OC(O)R⁶]_n-ONO₂、-C(O)R⁵-[(O)CR⁶]_n-ONO₂、-C(O)R⁵-[(O)R⁶]_n-ONO₂、-[C(O)R₅]_m-[C(O)OR₆]_n-ONO₂，条件是R¹和R²不能都是H；

每个R⁵和R⁶可以相同或不同，并独立地选自C_1-9烷基和C_1-9烷氧基,

其中所述C_1-9烷基和C_1-9烷氧基部分各自任选被卤素、氰基、硝基、叠氮基、N、O、S、NO₂或ONO₂中的一个或多个取代；

每个m独立地选自1至6；以及

每个n独立地选自1至6。

2.根据权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐，所述化合物选自:

3.权利要求1或2所述化合物在制备用于治疗青光眼和眼高压症的药物中的用途。

4.药物组合物，其包含药学上可接受的载体和药物有效量的权利要求1和2中任一项所定义的式(IX)的化合物和/或其盐。

5.权利要求4所述药物组合物在制备治疗青光眼或眼高压症的药物中的用途。

Images