CN102083845A - 环丙基聚合酶抑制剂 - Google Patents

环丙基聚合酶抑制剂 Download PDF

Info

Publication number
CN102083845A
CN102083845A CN2009801255791A CN200980125579A CN102083845A CN 102083845 A CN102083845 A CN 102083845A CN 2009801255791 A CN2009801255791 A CN 2009801255791A CN 200980125579 A CN200980125579 A CN 200980125579A CN 102083845 A CN102083845 A CN 102083845A
Authority
CN
China
Prior art keywords
compound
hydrogen
formula
group
alkyl
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN2009801255791A
Other languages
English (en)
Other versions
CN102083845B (zh
Inventor
T.H.M.乔克斯
P.J-M.B.拉博伊森
K.范德克
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Medivir AB
Janssen Products LP
Original Assignee
Medivir AB
Centocor Ortho Biotech Products LP
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=41095413&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=CN102083845(A) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Medivir AB, Centocor Ortho Biotech Products LP filed Critical Medivir AB
Priority to CN201610033092.2A priority Critical patent/CN105693794A/zh
Publication of CN102083845A publication Critical patent/CN102083845A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN102083845B publication Critical patent/CN102083845B/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
    • C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
    • C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
    • C07H19/06—Pyrimidine radicals
    • C07H19/073—Pyrimidine radicals with 2-deoxyribosyl as the saccharide radical
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/513—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim having oxo groups directly attached to the heterocyclic ring, e.g. cytosine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H1/00—Processes for the preparation of sugar derivatives

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)

Abstract

Figure 200980125579.1_AB_0
一种式I化合物：其中：R2为氢或C1-C4烷基；R3和R4为独立地选自氢、-C(=O)R5和-C(=O)CHR6-NH2组成的群；或R3为氢和R4为单磷酸酯、二磷酸酯或三磷酸酯；或R3为氢、-C(=O)CHR5或-C(=O)CHR6-NH2和R4为（式2），各R5独立地选自氢、C1-C6烷基和C3-C7环烷基的群；R6为氢或C1-C6烷基；R7为任选经取代的苯基、萘基、或吲哚基；R8和R8’为氢、C1-C6烷基、苄基；或R8和R8’合并形成C3-C7环烷基；R9为C1-C6烷基、苄基或任意经取代的苯基；条件是R2、R3和R4不均为氢；或其药学上可接受的盐类或溶剂合物；具化合物I的药物配制剂；化合物I作为HCV抑制剂的用途，包括其中R2、R3和R4均为氢的式I化合物。

Description

环丙基聚合酶抑制剂
技术领域
本发明涉及作为丙型肝炎病毒(HCV)抑制剂的核苷衍生物，以及其于HCV的治疗或预防的用途。
背景技术
HCV为单链的正义RNA病毒，属于黄病毒科（Flaviviridae family）的肝炎病毒属（hepacivirus genus）。在初期急性感染后，大多数感染个体发展成慢性肝炎，因为HCV优先在肝细胞中复制，但不是直接细胞病变的。特别地，缺乏强健的T淋巴细胞应答和病毒突变的高倾向看起来促进了高比率的慢性感染。慢性肝炎可进展成肝纤维化，导致肝硬化、晚期肝脏疾病及HCC(肝细胞癌)，使其成为肝脏移植的首要原因。
有六种主要的HCV基因型和超过50种亚型，其在地理上分布不同。在欧洲和美国，HCV基因型1为主要的基因型。HCV的广泛基因异质性具有重要的诊断和临床含意，可能解释了疫苗开发的困难和目前疗法的有限功效。
HCV的传染可通过与污染的血液或血液制品接触而发生，例如在输血或静脉内药物使用后。引进血液筛选所使用的诊断试验已导致输液后HCV发生的下降趋势。然而，在缓慢进展至晚期肝病的情况下，现存感染将极长时间持续，从而造成严重的医疗和经济负担。
目前抗HCV的护理标准基于聚乙二醇化(pegylated)干扰素-α(IFN-α)与利巴韦林（ribavirin）的组合。此组合疗法在约50%受HCV基因型1感染的患者和约80%受基因型2和3感染的患者中产生持续的病毒学响应。除了对HCV基因型1的有限功效，此组合疗法还具有显著的副作用且在许多患者中耐受性较差。主要的副作用包括类流感症状、血液异常和神经精神病症状。因此，对于更有效、方便和更好耐受性的治疗存在需求。
对于HIV药物，尤其HIV蛋白酶抑制剂，的经验已教导次优（sub-optimal）药物动力学和复合的投药方案快速地造成非故意的遵从医嘱性失败。这意味着在HIV方案中，各个药物的24小时药谷浓度（trough concentration）(最小血浆浓度)在一天中大部分时间经常下降到低于IC90或ED90阈値。认为至少IC50的24小时药谷水平，和更实在地IC90或ED90的24小时药谷水平，对于减缓药物逃逸变异的发展是必要的。达到必要的药物动力学和药物代谢以实现如此的药谷水平提供了对于药物设计的急迫挑战。
RNA多基因的NS5B区域编码RNA依赖性RNA聚合酶(RdRp)，其对于病毒复制为必要的。因此，该酶已经引起医药化学家的显著关注。NS5B的核苷和非核苷抑制剂都是已知的。核苷抑制剂可作为链终止剂或竞争性抑制剂，其干扰核苷酸结合至聚合酶。为了起到链终止剂的功用，核苷类似物必须被细胞摄入，并在体内转化成三磷酸酯。向三磷酸酯的该转化通常经细胞激酶介导，其对潜在的核苷聚合酶抑制剂提供另外的结构需求。此外，这限制了作为HCV复制抑制剂的核苷对于能够原位磷酸化的基于细胞的检验的直接评估。
对于开发核苷作为HCV RdRp的抑制剂已进行了若干尝试，但当少数化合物进入临床开发时，都没有逐步进行到注册阶段。迄今为止，HCV靶向的核苷所遭遇的问题为毒性、突变性、缺乏选择性、不良的效力、不良的生物可利用率、次优化剂量方案和随之高量药丸负担、以及商品成本。
若干专利和专利申请案以及科学出版物公开了具有HCV抑制活性的核苷类似物。WO 2004/002999公开了用于治疗黄病毒感染的经修饰的2’和3’-核苷前药。WO 2008/043704公开了4-氨基-1-((2R,3S,4S,5R)-5-叠氮基-4-羟基-5-羟基甲基-3-甲基-四氢呋喃-2-基)-1H-嘧啶-2-酮和酯衍生物，作为HCV聚合酶抑制剂。Murakami Eisuke等人在Antimicrobial Agents and Chemotherapy, American Society for Microbiology, Vol. 51, no.2, 503-509页(2007)中公开了β-D-2’-脱氧-2’-氟-2’C-甲基胞苷和一些类似物的HCV NS5B聚合酶的磷酸化和抑制。这些化合物中无一具有2'-螺环丙基取代基。
对于可克服目前HCV疗法的一种或多种缺点的HCV抑制剂存在需求，所述缺点例如为副作用、有限的功效、耐药性的出现、和遵从医嘱性失败，以及改善持续的病毒响应。
发明内容
本发明涉及HCV抑制性的4-氨基-1-(7-羟基-6-羟基甲基-5-氧杂-螺[2.4]庚-4-基)-1H-嘧啶-2-酮类，具有关于一个或多个下列参数的有用性质：抗病毒效力、抗药性发展的有利分布、有利的病毒学分布、有利的毒物学和基因毒物学分布、和有利的药物动力学和药效学，并易于调配和给药。一种此类化合物，即4-氨基-1-((4R,6R,7S)-7-羟基-6-羟基甲基-5-氧杂-螺[2.4]庚-4-基)-1H-嘧啶-2-酮，也称为2’-脱氧-2’-螺环丙基胞苷已被描述于Can. J. Chem., vol. 71, 413-416页中，但并未作为HCV抑制剂。
本发明的化合物还可引人注目的是它们缺乏抗其它病毒的活性的事实，尤其是抗HIV。感染HIV的患者通常罹患诸如HCV之类的共同感染。用还抑制HIV的HCV抑制剂治疗此类患者可能导致HIV抗性株的出现。
具体实施方式
在一个方面中，本发明提供由式I表示的化合物：
Figure 445690DEST_PATH_IMAGE001
包括其任何可能的立体异构体，其中：
R2为氢或C1-C4烷基；
R3和R4为独立地选自氢、-C(=O)R5和-C(=O)CHR6-NH2；或
R3为氢且R4为单磷酸酯、二磷酸酯或三磷酸酯；或R3为氢、-C(=O)CHR5或-C(=O)CHR6-NH2且R4为下式基团：
Figure 549781DEST_PATH_IMAGE002
，
各R5独立地选自氢、C1-C6烷基和C3-C7环烷基；
R6为氢或C1-C6烷基；
R7为苯基，任选由1、2或3个取代基取代，所述取代基各自独立地选自卤素、C1-C6烷基、C3-C6烯基、C1-C6烷氧基、羟基和氨基，或R7为萘基；或R7为吲哚基；
R8为氢、C1-C6烷基、苄基； 
R8’为氢、C1-C6烷基、苄基；或
R8和R8’与和它们连接的碳原子一起形成C3-C7环烷基； 
R9为C1-C6烷基、苄基或苯基，其中所述苯基可任选由1、2或3个取代基取代，所述取代基各自独立选自羟基、C1-C6烷氧基、氨基、单-和二C1-C6烷基氨基；
条件是R2、R3和R4不全为氢；
或其药学上可接受的盐或溶剂合物。
在另一方面，本发明涉及式I化合物的用途，如本文所具体指出，包括其中R2、R3和R4均为氢的式I化合物，用于抑制和治疗HCV感染。或者，提供式I化合物用于药物制造的用途，如本文所具体指出，包括其中R2、R3和R4不均为氢的化合物，用于抑制和治疗HCV感染。
基团-NH-C(R8)(R8’)-C(=O)-形成氨基酸残基，其包括天然和非天然的氨基酸残基。受关注的是其中R8’为氢的那些氨基酸残基。在后述R8不为氢的情况中，在不对称碳原子处带有R8的构形可为L-氨基酸的构形。该构形也可被指定为S-构形。实例为丙氨酸(Ala)，即在R8’为氢且R8为甲基的情况中；或缬氨酸(Val)，即在R8’为氢且R8为异丙基的情况中；亮氨酸(Leu)，即在R8’为氢且R8为-CH2CH(CH3)2的情况中；异亮氨酸(Ile)，即在R8’为氢且R8为-CH(CH3)CH2CH3的情况中；和苯丙氨酸(Phe)，即在R8’为氢且R8为苄基的情况中；尤其为L-Ala、L-Val、L-Ile和L-Phe。其中R8和R8’与和它们连接的碳原子一起形成C3-C7环烷基的氨基酸残基的实例为1,1-环丙基氨基酸。在R8和R8’两者均为氢时，基团-NH-C(R8)(R8’)-C(=O)-形成甘氨酸(Gly)。
基团-C(=O)CHR6-NH2与不具有侧链(R6为氢)或C1-C6烷基侧链的氨基酸形成氨基酸酯。此类氨基酸包含甘氨酸(R6为氢)、缬氨酸(R6为异丙基)、亮氨酸(R6为-CH2CH(CH3)2、或异亮氨酸(R6为-CH(CH3)CH2CH3)，尤其为L-立体异构形式H-L-Val-、H-L-Leu-或H-L-Ile-。
式I化合物的子组为式I的那些化合物、或如此处定义式I化合物的子组，其中R2为氢。
式I化合物的子组为式I的那些化合物、或如此处定义式I化合物的子组，其中R3为氢。
式I化合物的子组为式I的那些化合物、或如此处定义式I化合物的子组，其中R4为氢。
式I化合物的子组为式I的那些化合物、或如此处定义式I化合物的子组，其中R3和R4之一为氢，且R3和R4的另一个选自乙酰基、新戊酰基，优选为异丁酰基；或R3和R4之一为氢，且R3和R4的另一个选自亮氨酰基、异亮氨酰基、和优选地缬氨酰基；或R3和R4两者均选自乙酰基、新戊酰基、和优选地异丁酰基；或R3和R4两者均选自亮氨酰基、异亮氨酰基、和优选地缬氨酰基。在一个实施方案中，R3为氢且R4如上述定义。在另一实施方案中，R4为氢且R3如上述定义。尤其是，式I化合物的子组为式I的那些化合物、或如此处定义式I化合物中R3和R4两者均为异丁酰基(-C(=O)-CH(CH3)2)的子组。
式I化合物的子组为式I的那些化合物、或如此处定义式I化合物的子组，其中R3为氢或-C(=O)R5，且R4为下式基团：
Figure 329519DEST_PATH_IMAGE003
。
式I化合物的子组为式I的那些化合物、或式I化合物的子组，如此处定义的，其中各R5为C1-C6烷基，尤其为甲基、异丙基(1-甲基乙基)、异丁基(2-甲基丙基)、仲丁基(1-甲基丙基)。
式I化合物的子组为式I的那些化合物、或如此处定义式I化合物的子组，其中R6为氢或C1-C4烷基，尤其为氢、甲基或异丁基。
式I化合物的子组为式I的那些化合物、或如此处定义式I化合物的子组，其中：
(a) R7为苯基，任选由1或2个取代基取代，所述取代基各自独立地选自卤素、C1-C6烷基、C3-C6烯基、Cl-C6烷氧基、羟基和氨基，或R7为萘基；或R7为吲哚基；
(b) R7为苯基，任选由卤素、C1-C6烷基、C3-C6烯基或C1-C6烷氧基取代，或R7为萘基；
(c) R7为苯基，任选由卤素或C1-C6烷基取代，或R7为萘基；
(d) R7为苯基，任选由卤素取代。
在一实施方案中，在式I化合物或其任何子组中的吲哚基为5-吲哚基。
式I化合物的子组为式I的那些化合物、或如此处定义式I化合物的子组，其中R8为氢，且R8’为甲基或C1-C6烷基，诸如异丙基或异丁基。式I化合物的子组为式I的那些化合物、或如此处定义式I化合物的子组，其中
Figure 662411DEST_PATH_IMAGE004
部分为甘氨酰基、丙氨酰基、或缬氨酰基(Gly、Ala或Val；尤其为Gly、L-Ala或L-Val)。
式I化合物的子组为式I的那些化合物、或如此处定义式I化合物的子组，其中
(a)R9为C1-C6烷基或苄基；
(b)R9为C1-C6烷基；
(c)R9为C1-C4烷基；或
(d)R9为甲基、乙基、或叔丁基。
式I化合物具有数个手性中心，尤其是在1’、3’、和4’碳原子处。尽管在这些碳原子处的立体化学是固定的，但是该化合物在各手中心处可显现至少75%，优选至少90%，例如超过95%的对映异构体纯度。手性也可存在于取代基中，例如在R3和/或R4为-C(=O)CHR6-NH2，其中R6不是氢的情况中；或例如在基团
Figure 476783DEST_PATH_IMAGE005
中，其在带碳原子的R8(当R8和R8’不同时)和在磷原子处可具有手性。磷中心可呈现为Rp或Sp，或此类立体异构体的混合物，包括外消旋物。也可存在由手性磷中心和手性碳原子所产生的非对映异构体。
本发明的实施方案涉及2’-脱氧-2’-螺环丙基胞苷(式I化合物，其中R2、R3和R4均为氢)所示化合物作为HCV抑制剂的用途；或双3’,5’-异丁酰基-2’-脱氧-2’-螺环丙基胞苷(式I化合物，其中R2为氢且R3和R4两者为-C(=O)R5，其中R5为异丙基)所示化合物作为HCV抑制剂的用途；两者为游离形式或其药学上可接受的酸加成盐或溶剂合物的形式；作为HCV的抑制剂或HCV感染的治疗或预防。
一个实施方案涉及如下文实施例部分所述，指定为化合物1、2a、2b、2c、2d、3、4、5、6和7的游离形式的化合物。另一实施方案涉及这些化合物以及其药学上可接受的盐和溶剂合物。一个特定实施方案涉及游离形式的化合物双3’,5’-异丁酰基-2’-脱氧-2’-螺环丙基胞苷。另一特定实施方案涉及双3’,5’-异丁酰基-2’-脱氧-2’-螺环丙基胞苷，其药学上可接受的酸加成盐和溶剂合物。
在另一方面，本发明提供式I化合物或其药学上可接受的盐、水合物或溶剂合物，用于治疗或预防(或治疗或预防用药物的制造)HCV感染的用途。在依据本发明治疗或预防的场合中，代表性HCV基因型包括基因型lb(流行于欧洲)或la(流行于北美)。本发明也提供治疗或预防HCV感染的方法，尤其是基因型1a或1b。
式I化合物被描述为限定的立体异构体。此类化合物的绝对构形可使用本领域已知的方法测定，例如X-射线衍射或NMR和/或由已知立体化学的起始材料推论。依据本发明的药物组合物优选地基本上包含所指立体异构体的立体异构性纯的制剂。
如本文所述，化合物和中间体的纯的立体异构形式被定义为基本上不含与所示化合物或中间体相同基础分子结构的其它对映异构或非对映异构形式的异构体。尤其是，术语“立体异构性纯”表示化合物或中间体具有至少80%的立体异构性过量(即，最少90%的一种异构体和最多10%的其它可能的异构体)，至多100%的立体异构体性过量(即，100%的一种异构体且无其它异构体)，更特别地，化合物或中间体具有90%直至100%的立体异构体性过量，再更特别为具有94%直至100%的立体异构体性过量，且最特别为具有97%直至100%的立体异构体性过量。术语“对映异构性纯”和“非对映异构性纯”应以相似的方式理解，但另一方面指所涉及混合物中分别具有对映异构体性过量和非对映异构体性过量。
本发明化合物和中间体的纯的立体异构形式可应用本领域已知的程序获得。例如，对映异构体可以从旋光活性酸类或碱类，通过它们非对映异构性盐类的选择性结晶而彼此分离。其实例为酒石酸、二苯甲酰-酒石酸、二甲苯甲酰基酒石酸和樟脑磺酸。或者，对映异构体可使用手性固定相经色谱技术分离。所述纯的立体化学异构体形式也可衍生自对应的适当起始材料的纯的立体化学异构体形式，条件是立体特异性地发生反应。优选，如果需要特定的立体异构体，则所述化合物通过立体特异性的制备方法合成。这些方法将有利地运用对映异构体性纯的起始材料。
式I化合物的非对映异构性外消旋物能够通过常规方法单独地获得。可有利地运用适当的物理分离方法，例如选择性结晶化和色谱，例如柱色谱。
本发明也意图包括在本化合物上所出现原子的所有同位素。同位素包括具有相同原子序号但不同质量数的那些原子。作为一般实例且并非限制，氢的同位素包括氚和氘。碳的同位素包括C-13和C-14。
药学上可接受的加成盐类包括式I化合物的治疗上活性的非毒性的酸和碱加成盐形式。受关注的为式I化合物或本文所指出的式I化合物的子组的游离(即，非盐)形式。如本文所使用的，术语“游离形式”是指不为盐形式或溶剂合物的式I化合物。
药学上可接受的酸加成盐类能够通过以适当酸处理游离形式而方便地获得。适当酸类包含，例如，无机酸类例如氢卤酸类，例如盐酸或氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等酸类；或有机酸类，例如乙酸、丙酸、羟基乙酸、乳酸、丙酮酸、草酸(即，乙二酸)、丙二酸、琥珀酸(即，丁二酸)、马来酸、富马酸、苹果酸(即，羟基丁二酸)、酒石酸、柠檬酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、环己氨磺酸、水杨酸、对氨基水杨酸、双羟萘酸等酸类。相反地，能够通过以适当碱处理将所述酸加成盐形式转化成为游离形式。
含酸性质子的式I化合物也可以通过以适当有机和无机碱处理而被转化成它们的药学上可接受的金属或胺加成盐形式。适当的碱盐形式包含，例如，铵盐类、碱金属和碱土金属盐类，例如，锂、钠、钾、镁、钙盐类等，与有机碱的盐类，例如苄星青霉素、N-甲基-D-葡萄糖胺、哈胺（hydrabamine）盐类，和与氨基酸例如，精氨酸、赖氨酸等的盐类。相反地，所述金属或胺加成盐形式能够通过以适当酸处理而被转化成游离形式。
术语“溶剂合物”覆盖式I化合物及其盐类能够形成的任何药学上可接受的溶剂合物。此类溶剂合物例如为水合物、醇合物，例如乙醇合物、丙醇合物等。
一些式I化合物也可以它们的互变异构体形式存在。例如，酰胺(-C(=O)-NH-)基团的互变异构体形式为亚氨基醇类(-C(OH)=N-)，其在具有芳香性质的环中能够变得稳定。此类形式，尽管在本文所示结构式中并未清楚指出，但意图包含于本发明的范围中。
如本文所使用的“C1-C4烷基”作为基团或基团的一部分，定义了具有1至4个碳原子的饱和直链或支链烃基，例如，甲基、乙基、1-丙基、2-丙基、1-丁基、2-丁基、2-甲基-1-丙基、2-甲基-2-丙基。“C1-C6烷基”涵盖C1-C4烷基及其具有5或6个碳原子的较高级同系物，例如，1-戊基、2-戊基、3-戊基、1-己基、2-己基、2-甲基-1-丁基、2-甲基-1-戊基、2-乙基-1-丁基、3-甲基-2-戊基等。C1-C6烷基中受关注的为C1-C4烷基。
“C1-C6烷氧基”意指-O-C1-C6烷基，其中C1-C6烷基如上列定义。C1-C6烷氧基的例为甲氧基、乙氧基、正丙氧基、和异丙氧基。
“C3-C7环烷基”包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基和环庚基。这些的子组为C3-C6环烷基。受关注的为环丙基。
术语“C3-C6烯基”作为基团或基团的一部分，定义了具有饱和碳-碳键和至少一个双键的直链或支链烃基，且具有3至6个碳原子，例如1-丙烯基、2-丙烯基(或烯丙基)、1-丁烯基、2-丁烯基、3-丁烯基、2-甲基-2-丙烯基、2-戊烯基、3-戊烯基、2-己烯基、3-己烯基、4-己烯基、2-甲基-2-丁烯基、2-甲基-2-戊烯基等。C3-C6烯基中受关注的为C3-C4烯基。C3-C6烯基或C3-C4烯基中受关注的为具有一个双键的那些基团。
术语“卤素”为氟基、氯基、溴基和碘基的统称。
如本文使用的，术语“(=O)”或“氧代”当连接于碳原子时形成羰基基团。应注意原子在其允许的价态时能够仅以氧代基取代。
术语“单磷酸酯、二磷酸酯或三磷酸酯”是指下列基团：
。
如本文使用的，用于定义中的任何分子部分上的基团位置可以是此部分上的任何位置，只要其为化学稳定的。当在任何所给部分中的任何变量出现超过一次时，此变量的各定义为独立的。
只要在本文中使用时，“式I化合物”或“本发明化合物”或相似术语，其意指包括式I化合物，包括可能的立体化学上的异构体形式，及其药学上可接受的盐类和溶剂合物。
制备方法
其中R3和R4两者均为氢的式I化合物在本文中以式I-a表示，能够由尿嘧啶至胞嘧啶转化反应而制备，其由2’-脱氧-2’-螺环丙基尿苷1f至对应的2’-脱氧-2’-螺环丙基胞苷1g，随后移除保护基PG，获得所需终产物I-a。该尿嘧啶转化至胞嘧啶能够通过将尿嘧啶衍生物与POCl3或二氯磷酸酯（phosphorodichloridate）反应而实施，所述二氯磷酸酯例如为苯基或经取代的苯基二氯磷酸酯，例如，4-氯苯基二氯磷酸酯、和三唑或四唑。此反应可于反应惰性溶剂中在碱存在下进行，例如，卤化烃例如二氯甲烷，在叔胺存在下，例如三乙胺。或者，也可使用碱性溶剂例如吡啶。如果需要，生成的下式三唑或四唑衍生物能够被分离和纯化：
Figure 300700DEST_PATH_IMAGE007
后者以氨或R2-NH2的处理获得对应的胞嘧啶衍生物1g。移除PG基团最后导致所需终产物I。如本文使用的，PG代表羟基保护基，尤其是下文所述基团之一。
上述所需转化中使用的中间体1f通过在中间体1d中的外双键处的环丙烷环形成反应，且随后移除中间体1e中的氮保护基而获得。该环丙烷环形成涉及重氮甲烷对外双键的加成，随后利用环丙烷基团的形成和氮的排除而光化学重排，优选在光敏化剂例如二苯甲酮存在下。这些反应优选在反应惰性溶剂中进行，例如，重氮甲烷反应可在醚中进行，例如二乙醚，并在芳香族烃中光化学重排，例如苯或甲苯，或偶极非质子溶剂例如乙腈、或其混合物。
中间体1d通过中间体1c经Wittig反应而获得。在此反应中，后者与甲基三苯基
Figure 499600DEST_PATH_IMAGE008
卤化物，优选为氯化物或溴化物，于反应惰性溶剂例如醚(例如二乙醚或四氢呋喃)中反应。中间体1c进而得自在于吡啶中的乙酸酐存在下，通过中间体1b中的2’-羟基与例如三氧化铬的氧化反应。1a中4’和5’-羟基的选择性保护产生中间体lb。
为了避免副反应，4’和5’-羟基优选以羟基保护基PG保护，且尿嘧啶基团中的氨基(NH)官能团用氨基保护基PG1保护。羟基保护基PG能够不同或相同，或结合形成环状保护基。PG例如为三烷基甲硅烷基，例如三甲基甲硅烷基(TMS)、叔丁基二甲基甲硅烷基(TBDMS)、或三异丙基甲硅烷基(TIPS)。或两个PG基团结合形成聚烷基化二硅氧烷-1,3-二基，例如四异丙基二硅氧烷-1,3-二基(TIPDS)。这些基团能够通过酸或氟离子(例如NaF或四正丁基氟化铵-TBAF)移除。另一羟基保护基也可为氨基保护基，其为三苯甲基或经取代的三苯甲基，例如4-甲氧基-三苯甲基((4-甲氧基苯基)(联苯基)甲基)，其于酸性条件下被移除，例如通过用乙醇/HCl，或用乙酸处理。
选择氨基保护基PG1，使其可相对于PG基团选择性裂解。可使用的氨基保护基为苯甲酰基。其它此类基团为二甲基氨基亚甲基，其可使用二甲基甲酰胺二甲基乙缩醛导入。在酸性条件下，二甲基氨基亚甲基被移除，例如通过用乙醇/HCl处理。
上述反应说明于下列反应图示
Figure 168479DEST_PATH_IMAGE009
图示1：2’-脱氧-2’-螺环丙基胞苷的一般合成。
如下列反应图示所描绘，式I-a化合物进而能够被转化成氨基磷酸酯类（phosphoramidates）。在碱存在下将化合物I-a与氯磷酸酯（phosphorochloridate）2a反应，获得氨基磷酸酯I-b。此反应中可使用的溶剂包含醚类，例如二乙醚或THF，或吡啶，或其混合物。可添加碱例如N-甲基咪唑，以捕获在反应期间所形成的酸
Figure 50591DEST_PATH_IMAGE010
图示2：合成氨基磷酸酯的一般方法。
I-a的单-或二-酯的合成描述于下列图示3中。在该图示中，R3a和R4a独立地为-C(=O)R5或-C(=O)CHR6-NH2，或特别地，R3a和R4a独立地为-C(=O)R5。在R3a和R4a独立地为-C(=O)CHR6-NH2时，后者基团的氨基优选经氨基保护基保护，例如上述的任何氨基保护基PG1，且该基团可以-C(=O)CHR6-NH-PG1表示。使用用于移除氨基保护基的适当反应条件，能够移除此类基团。例如，PG1可为BOC基团，且可于酸性条件下移除。当游离氨基不再能够干扰随后反应步骤时，可以在任何阶段移除所述氨基保护基，但通常在最后步骤中移除。
中间体3a中的更具反应性的5’-羟基可被选择性保护，如同在中间体3b中，其进而被酯化成3c，随后尿嘧啶至胞嘧啶转化成3d。后者被脱保护，产生3’-单酯I-c。I-c中5’-羟基的酯化产生终产物I-d。更具反应性的5’-羟基也能够被选择性地酯化，导入基团R4，以产生3e，且所产生的5’-酯中间体可随后以不同的酸酯化，因而导入基团R3a，其如上述定义。这些酯化反应产生二酯中间体3f，其被提交到尿嘧啶至胞嘧啶转化，产生终产物I-d。尿嘧啶至胞嘧啶转化使用上述对于制备中间体1g的程序进行
Figure 804920DEST_PATH_IMAGE011
图示3：单-和二-酯类的合成。
如上列所指明，R3a为氢且R4a为酯的式I化合物（所述化合物以I-e表示）能够如下制备：通过以羟基保护基保护中间体3b中的游离羟基，该羟基保护基可相对于其它羟基保护基选择性裂解，生成中间体4a。然后下一步骤涉及5’-羟基保护基的移除，产生中间体4b，随后酯化反应成中间体4c。随后尿嘧啶至胞嘧啶转化，产生对应的4’-羟基保护的胞苷衍生物4d，其经脱保护而产生5’-取代的、4’-未取代的衍生物I-e。这些反应呈现于图示4中，其中基团PGa具有与PG相同的意义，但被选择以使PG可相对于基团PGa选择性裂解。例如，PG可为三苯甲基或4-甲氧基三苯甲基，而PGa为三烷基甲硅烷基例如三甲基甲硅烷基或叔丁基二甲基甲硅烷基
Figure 276353DEST_PATH_IMAGE012
图示4：单酯类的合成。
 
R3a和R4a为相同酯基的式I化合物在下文以I-f表示，其能够通过以相同羧酸酯化两羟基，从而自化合物3a制备
Figure 799738DEST_PATH_IMAGE013
图示5：二酯类的合成。
起始材料3a能够通过移除中间体1f中的羟基保护基PG而制备，其可如上列图示1的说明的制备。
术语“氨基保护基”或“N-保护基”包括酰基，例如甲酰基、乙酰基、丙酰基、新戊酰基、叔丁基乙酰基、2-氯乙酰基、2-溴乙酰基、三氟乙酰基、三氯乙酰基、邻苯二甲酰基、邻硝基苯氧基乙酰基、α-氯丁酰基、苯甲酰基、4-氯苯甲酰基、4-溴-苯甲酰基、4-硝基苯甲酰基等；磺酰基，例如苯磺酰基、对甲苯磺酰基等；形成氨基甲酸酯的基团，例如苄基氧基羰基、对氯-苄基氧基羰基、对甲氧基苄基氧基羰基、对硝基苄基氧基羰基、2-硝基苄基氧基羰基、对溴苄基氧基羰基、3,4-二甲氧基苄基氧基-羰基、4-甲氧基苄基氧基羰基、2-硝基-4,5-二甲氧基苄基氧基羰基、3,4,5-三甲氧基苄基氧基羰基、1-(对联苯基)-1-甲基乙氧基羰基、α,α-二甲基-3,5-二甲氧基苄基-氧基羰基、二苯甲基氧基羰基、叔丁氧基-羰基、二异丙基甲氧基羰基、异丙基氧基羰基、乙氧基羰基、甲氧基羰基、烯丙基氧基羰基、2,2,2-三氯乙氧基羰基、苯氧基羰基、4-硝基苯氧基羰基、芴基-9-甲氧基羰基、环戊基氧基羰基、金刚烷基氧基羰基、环己基氧基羰基、苯基硫羰基等；烷基，例如苄基、三苯基甲基、苄基氧基甲基等；和甲硅烷基，例如三甲基甲硅烷基等。
羟基-保护基包括醚类，例如甲基、经取代的甲基醚类，例如甲氧基甲基、甲硫基甲基、苄基氧基甲基、叔丁氧基甲基、2-甲氧基乙氧基甲基等；甲硅烷基醚类，例如三甲基甲硅烷基(TMS)、叔丁基二甲基甲硅烷基(TBDMS)三苄基甲硅烷基、三苯基甲硅烷基、叔丁基二苯基甲硅烷基、三异丙基甲硅烷基等；经取代的乙醚类，例如1-乙氧基甲基、1-甲基-1-甲氧基乙基；叔丁基、烯丙基、苄基、对甲氧基苄基、二苯基甲基、三苯甲基等。酯羟基保护基包括酯类，例如甲酸酯、苄基甲酸酯、氯乙酸酯、甲氧基乙酸酯、苯氧基乙酸酯、新戊酸酯、金刚酸酯(adamantoate)、
Figure 229582DEST_PATH_IMAGE014
酸酯(mesitoate)、苯甲酸酯等。
在另一方面，本发明涉及药物组合物，其包含治疗上有效量的式I化合物(如本文所具体指出的)，和药学上可接受的载体。在本文中，治疗上有效量是在受感染的患者或有感染风险的患者中，足以以预防方式对抗、或稳定化、或减轻病毒感染的量，尤其是对HCV病毒感染。在再一方面中，本发明涉及制备药物组合物(如本文所具体指出的)的方法，其包括使药学上可接受的载体与治疗上有效量的式I化合物(如本文所具体指出的)密切混合。
本发明的化合物或其任何子组可依给药目的而被配制成各种药物形式。作为适当的组合物，可被提及的所有组合物通常被运用于全身性给药药物。为了制备本发明的药物组合物，将有效量的特定化合物（任选为加成盐形式或金属复合物）作为活性成分与药学上可接受的载体以密切混合物的形式合并，根据所需给药制剂的形式，所述载体可采取广泛多样化形式。这些药物组合物合意地为单一剂型，其特别适用于口服给药、直肠给药、皮下给药、或肠胃外注射。例如，在口服剂型组合物的制备中，可运用任何通常的医药介质，例如在口服液体制剂，例如悬浮液、糖浆剂、酏剂、乳状液和溶液的情形中，所述介质例如为水、二醇类、油类、醇类等；或在粉末剂、丸剂、胶囊和片剂的情形中，为固体载体，例如淀粉、糖类、高岭土、润滑剂、粘结剂、崩解剂等。因其易于给药，片剂和胶囊代表最有利的口服单位剂型，在此情形中显然采用固体医药载体。对于肠胃外组合物，载体通常包含无菌水，至少为大部分，但是可包括其它成分，例如为了帮助溶解。例如，可制备可注射溶液，其中载体包括盐水溶液、葡萄糖溶液或盐水与葡萄糖溶液的混合物。也可制备可注射悬浮液，在该情形中可应用适当液体载体、悬浮剂等。还包括的是固体形式制剂，其在欲使用前短暂时间被转化成液体形式制剂。在适合经皮给药的组合物中，所述载体任选包括穿透增强剂和/或适当的润湿剂，任选与小量比例的任何天然的适当添加剂合并，该添加剂对皮肤不会引致显著的毒性效果。本发明的化合物也可由口吸入或吹入给药，以溶液、悬浮液或干粉末的形式，使用任何本领域已知的递送系统。
配制易于给药且剂量均一的单位剂型的前述药物组合物是特别有利的。如本文使用的单位剂型是指适合作为单一剂量的物理上离散的单位，各单位含有预定量的经计算以产生所需治疗效果的活性成分，并与所需医药载体联合。此类单位剂型的实例为片剂(包括刻痕片剂（scored tablet）或包衣片剂)、胶囊、丸剂、栓剂、粉末包、糯米纸囊剂（wafers）、可注射溶液或悬浮液等，及其分离的成批品。 
式I化合物显示出抗HCV的活性，且可用于治疗和预防HCV感染或与HCV有关的疾病。后者包括进行性肝纤维化、炎症和坏死导致肝硬化、晚期肝病、和HCC。此外，本发明的化合物可对于HCV突变株具有活性。此外，本发明的化合物可显示出有利的药物动力学分布，且在生物可利用率项目上可具有引人注目的性质，包括可接受的半衰期、AUC(曲线下面积)和峰值、和缺乏不利的现象，如不足的快速起效和组织停滞。
本发明化合物也引人注目的是它们的低毒性和有利的选择性指数可被证实，例如在细胞毒性试验中证实。此外，本发明的化合物缺乏抗其它病毒的活性，尤其抗HIV。在共同感染的患者中，使用具双重或多重抗病毒效果的药物可能导致抗其它病毒的次最优化投药，结果可导致抗病毒株的出现。
式I化合物的抗HCV的体外抗病毒活性可在细胞HCV复制子系统中试验，基于Lohmann等人(1999) Science 285：110-113，由Krieger等人(2001) Journal of Virology 75：4614-4624(通过引用并入本文)所述进一步修改，其进一步示例于实施例部分中。此模型尽管并非HCV完全感染模型，但被广泛接受作为目前可取得的自发HCV RNA复制的最健全和有效的模型。应了解，在HCV复制子模型中，区分特异性干扰HCV功能的化合物与发挥细胞毒性或细胞静止效果的那些化合物是重要的，并且结果造成HCV RNA或连接报道子酶浓度的降低。在领域中已知用于评估细胞毒性的检验，例如基于线粒体酶活性，使用荧光氧化还原染料例如刃天青。此外，细胞计数筛选用于连接的报道子基因活性的非选择性抑制的评估，例如萤火虫荧光素酶。通过利用荧光酶报道子基因（其表达取决于构成的活性基因启动子）的稳定转染，可准备适当的细胞类型，且此类细胞可用作计数筛选，以排除非选择性抑制剂。
由于其抗病毒性质，尤其是抗HCV性质，式I化合物，包括任何可能的立体异构体、其药学上可接受的加成盐类或溶剂合物，可用于治疗感染HCV的温血动物，尤其是人类，且用于温血动物尤其是人类中HCV感染的预防。本发明进一步更涉及治疗感染HCV的温血动物尤其是人类，或有感染HCV风险的温血动物的方法，所述方法包括给药抗HCV有效量的式I化合物，如本文所具体指出的。
因此，本发明的化合物可用作药物，尤其作为抗HCV药物或作为HCV-抑制性药物。本发明也涉及所述化合物在治疗或预防HCV感染的药物制造中的用途。所述作为药物的用途或治疗方法包括对HCV感染的患者，或对易受HCV感染的患者，全身性给药一定量如本文所具体指出的式I化合物，该量有效防止与HCV感染有关的症状。
一般而言，预期每日抗病毒有效量为约0.01至约700毫克/千克，或约0.5至约400毫克/千克，或约1至约250毫克/千克，或约2至约200毫克/千克，或约10至约150毫克/千克体重。应理解，能够在全天以适当间隔给药所需剂量，如二、三、四或更多个的次剂量。所述次剂量可被配制为单位剂型，例如每单位剂型中含约1至约5000毫克，或约50至约3000毫克，或约100至约1000毫克，或约200至约600毫克，或约100至约400毫克的活性成分。 
本发明也涉及式I化合物、其药学上可接受的盐或溶剂合物、和其它抗病毒化合物（尤其是其它抗HCV化合物）的组合。术语“组合”可关于含(a)如上列具体指明的式I化合物，和(b)任选其它抗HCV化合物的产品，作为用于同时、分开或相继使用于HCV感染治疗中的组合制剂。
可用于此类组合中的抗HCV化合物包括HCV聚合酶抑制剂、HCV蛋白酶抑制剂、在HCV生活史中其它靶的抑制剂、和免疫调节剂，及其组合。HCV聚合酶抑制剂包括NM283(valopicitabine)、R803、JTK-109、JTK-003、HCV-371、HCV-086、HCV-796 and R-1479、R-7128、MK-0608、VCH-759、PF-868554、GS9190、XTL-2125、NM-107、GSK625433、R-1626、BILB-1941、ANA-598、IDX-184、IDX-375、MK-3281、MK-1220、ABT-333、PSI-7851、PSI-6130、VCH-916。HCV蛋白酶的抑制剂(NS2-NS3抑制剂和NS3-NS4A抑制剂)包括BILN-2061、VX-950 (telaprevir)、GS-9132 (ACH-806)、SCH-503034 (boceprevir)、TMC435350 (也称作TMC435)、TMC493706、ITMN-191、MK-7009、BI-12202、BILN-2065、BI-201335、BMS-605339、R-7227、VX-500、BMS650032、VBY-376、VX-813、SCH-6、PHX-1766、ACH-1625、IDX-136、IDX-316。HCV NS5A抑制剂的实例为BMS790052，A-831、A-689、NIM-811和DEBIO-025为NS5B亲环素抑制剂的例。
在HCV生活史中的其它靶的抑制剂包括NS3螺旋酶；金属蛋白酶抑制剂；反义寡核苷酸抑制剂，例如ISIS-14803和AVI-4065；siRNA’s，例如SIRPLEX-140-N；载体-编码的短发夹状RNA(shRNA)；DNA核酶；HCV特异性核糖核酸酶，例如heptazyme，RPI.13919；进入抑制剂，例如HepeX-C、HuMax-HepC；α-葡糖苷酶抑制剂，例如celgosivir、UT-231B等；KPE-02003002；和BIVN 401。
免疫调节剂包括天然和重组干扰素同工型化合物，包括α-干扰素、β-干扰素、γ-干扰素、和ω-干扰素，例如Intron A?、Roferon-A?、Canferon-A300?、Advaferon?、Infergen?、Humoferon?、Sumiferon MP?、Alfaferone?、IFN-beta?、和Feron?；聚乙二醇衍生的(聚乙二醇化)干扰素化合物，例如PEG干扰素-α-2a(Pegasys?)、PEG干扰素-α-2b(PEG-Intron?)、和聚乙二醇化IFN-α-con 1；干扰素化合物的长作用配制剂和衍生作用，该化合物例如白蛋白稠合的干扰素albuferon α；在细胞中刺激干扰素合成的化合物，例如雷西莫特(resiquimod)；白介素；增进1型辅助T细胞响应发展的化合物，例如SCV-07；类TOLL受体激动剂例如CpG-10101(actilon)、和艾沙托立宾(isatoribine)；胸腺素α-1；ANA-245；ANA-246；组胺二盐酸盐；丙帕锗(propagermanium)；十氧化四氯(tetrachlorodecaoxide)；ampligen；IMP-321；KRN-7000；抗体，例如civacir和XTL-6865；以及预防和治疗性疫苗，例如InnoVac C和HCV E1E2/MF59。
其它抗病毒剂包括利巴韦林、金刚烷胺(amantadine)、viramidine、硝唑尼特(nitazoxanide)；替比夫定(telbivudine)；NOV-205；taribavirin；内核糖体进入的抑制剂；广谱病毒抑制剂，例如IMPDH抑制剂，和霉酚酸及其衍生物，并且包括但不限于VX-497(merimepodib)、VX-148、和/或VX-944)；或上述任何的组合。
在所述组合物中使用的特定药剂包括干扰素-α(IFN-α)、聚乙二醇化干扰素-α或利巴韦林，以及基于抗体靶向的抗HCV表位、小干扰RNA(Si RNA)、核糖核酸酶、DNA核酶、反义RNA、例如NS3蛋白酶的小分子拮抗剂、NS3螺旋酶和NS5B聚合酶的治疗法。
在另一方面，提供如本文所具体指出的式I化合物和抗HIV化合物的组合。后者优选为对于改进生物可利用率的药物代谢和/或药物动力学具有正面效果的那些HIV抑制剂。此类HIV抑制剂的实例为利托那韦(ritonavir)。如此，本发明进一步提供组合，其包含(a)式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物；和(b)利托那韦或其药学上可接受的盐。化合物利托那韦、其药学上可接受的盐类、及其制备的方法述于WO 94/14436。US 6,037,157及其中引述的参考文献：US 5,484,801、US 08/402,690、WO 95/07696、和WO 95/09614，公开了利托那韦的优选剂型。 
本发明还涉及制备本文所述组合的方法，包括合并如前文所述的式I化合物和其它药剂，例如抗病毒剂，包括抗HCV或抗HIV剂，尤其是前文所述的那些。
所述组合可发现用于制造在受HCV感染的哺乳类动物中治疗HCV感染的药物，所述组合尤其包含如前文所述的式I化合物和干扰素-α(IFN-α)、聚乙二醇化干扰素-α、或利巴韦林。或者本发明提供治疗感染HCV的哺乳类动物（尤其是人类）的方法，包括向所述哺乳类动物给药有效量的如本文所具体指出的组合。特别地，所述治疗包括全身性给药所述组合，且有效量为有效于治疗与HCV感染有关的临床症状的量。
在一实施方案中，上述组合被配制为药物组合物的形式，其包括上述活性成分和如上所述的载体。每一种活性成分可被分开配制，且配制剂可共同给药，或者可以提供包含二者以及视需要的其它活性成分的一种配制剂。在前者的情形中，所述组合也可被配制为合并的制剂，以同时、分开或相继用于HCV治疗。所述组合可采取上述任何形式。在一实施方案中，两成分被配制在一个剂型例如固定剂量的组合中。在一特定实施方案中，本发明提供药物组合物，其包括(a)治疗上有效量的式I化合物，包括其可能的立体异构体形式，或其药学上可接受的盐、或其药学上可接受的溶剂合物，和(b)治疗上有效量的利托那韦或其药学上可接受的盐，和(c)载体。
本发明组合物的个体成分能够在治疗期间可于不同时间被分开给药，或以分开或单一组合形式同时给药。本发明意欲涵盖所有此类同时或交替治疗的方案，且术语“给药”被相应地解释。在一优选实施方案中，分开剂型被同时给药。
在一实施方案中，本发明的组合含有一定量的利托那韦，或其药学上可接受的盐，相对于在所述式I化合物单独被给药时的生物可利用率，其足以临床上改善式I化合物的生物可利用率。或者，本发明的组合含有一定量的利托那韦，或其药学上可接受的盐，相对于当所述式I化合物单独被给药时的至少一种药物动力变量，其足以增加式I化合物的所述至少一种药物动力变量，该变量选自t1/2、Cmin、Cmax、Css、12小时的AUC，或24小时的AUC。
本发明组合可以在所述组合中每一所含成分的特定剂量范围给药至人类，例如，如上具体指明的式I化合物，和利托那韦或其药学上可接受的盐，可具有范围为0.02至5.0克/日的剂量水平。式I化合物对利托那韦的重量比可为约30:1至约1:15，或约15:1至约1:10，或约15:1至约1:1，或约10:1至约1:1，或约8:1至约1:1，或约5:1至约1:1，或约3:1至约1:1，或约2:1至1:1的范围。每日可共同给药式I化合物和利托那韦一次或二次，优选为口服，其中每剂式I化合物的量如上所述；且每剂利托那韦的量为1至约2500毫克，或约50至约1500毫克，或约100至约800毫克，或约100至约400毫克，或40至约100毫克的利托那韦。
本文所引述的所有参考文献通过引用并入本文。
实施例
下列实施例中，化合物名称由Chemdraw UltraTM软件，Cambridgesoft，第9.0.7版产生。 
实施例1：4-氨基-1-(7-羟基-6-羟基甲基-5-氧杂-螺[2.4]庚-4-基)-1H-嘧啶-2-酮(1)
Figure 861421DEST_PATH_IMAGE015
Figure 136544DEST_PATH_IMAGE016
步骤1：1-((6aR,8R,9R,9aS)-9-羟基-2,2,4,4-四异丙基-6a,8,9,9a-四氢-6H-呋喃并[3,2-f][1,3,5,2,4]trioxadisilocin-8-基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(I-1) 
将含D-尿苷(20克)和1,3-二氯-1,1,3,3-四异丙基二硅氧烷(1.018当量)在吡啶(300毫升)中的混合物于室温搅拌64小时。在真空(30℃)中移除吡啶。将残余物再次溶解于100毫升CH2Cl2，以水(3×75毫升)洗涤，以无水MgSO4干燥并过滤。将滤液蒸发至干燥并就此用于后续反应。LC-MS：Rt：3.16分钟，m/z：487(M+H)+。
步骤2：1-((6aR,8R,9aR)-2,2,4,4-四异丙基-9-氧代四氢-6H-呋喃并[3,2-f][1,3,5,2,4]trioxadisilocin-8-基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(I-2)
将中间体I-1(19.93克)溶解于200毫升CH2Cl2，加入吡啶(1当量)和乙酸酐(2.91当量)，随后加入CrO3(2.75当量)。于室温搅拌混合物，30分钟后观察到温和的回流。搅拌90分钟后，LC-MS表明形成反应产物I-2(50%)和留下起始材料I-1(50%)。另搅拌2小时生成55%的产物I-2和残留45%的I-1。另添加10毫升吡啶、5毫升乙酸酐和5克CrO3，并于室温搅拌该混合物过夜。LC-MS表明少有进展。将暗棕色溶液倾注至1300毫升乙酸乙酯中，并将残余物通过硅藻土(dicalite)垫过滤。沉淀物以另外的乙酸乙酯洗涤。蒸发合并的滤液至干燥。使用CH2Cl2到CH2Cl2/乙酸乙酯1:1，以柱色谱纯化中间体I-2。薄层色谱(TLC)表明两个点。因此使用庚烷到庚烷/丙酮7：3，将中间体I-2以柱色谱再次纯化。收集含产物的级分，并蒸发生成8.5克的白色固体(I-2)。LC-MS：Rt：3.31分钟，m/z：485(M+H)+。备注：也观察到酮的水合物：LC-MS：Rt：3.20分钟，m/z：503 (M+H)+。
步骤3：1-((6aR,8R,9aS)-2,2,4,4-四异丙基-9-亚甲基四氢-6H-呋喃并[3,2-f][1,3,5,2,4]trioxadisilocin-8-基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(I-3) 
将NaH(0.897克)悬浮于15毫升无水二甲基亚砜(DMSO)中，并于氩气下加热至65℃ 1.5小时。在搅拌下加入溴化甲基三苯基
Figure 468431DEST_PATH_IMAGE008
(12.84克)，随后加入30毫升无水DMSO和15毫升无水四氢呋喃(THF)。于室温搅拌混合物1.5小时。形成黄色/橙色混合物。然后经由注射器逐滴加入溶解于20毫升无水THF中的中间体I-2(6.97克)，全部于室温搅拌1.5小时，然后于50℃搅拌1小时。然后冷却混合物至室温。通过硅藻土塞滤除沉淀物，浓缩滤液(以移除THF)，并将残余物在CHC13和水(各300毫升)之间分配。分离有机层，水层以CHC13反萃取。合并的层通过硅藻土塞过滤并浓缩。使用CH2C12至7：3的CH2C12/乙酸乙酯作为洗脱液，将产物经柱色谱纯化。蒸发生成2.97克呈白色固体的中间体I-3。LC-MS：Rt：3.56分钟，m/z：483(M+H)+。
步骤4：3-苯甲酰基-1-((6aR,8R,9aS)-2,2,4,4-四异丙基-9-亚甲基四氢-6H-呋喃并[3,2-f][1,3,5,2,4]trioxadisilocin-8-基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(I-4)
以20毫升无水吡啶蒸发中间体I-3(2.4克)2次。然后将其再次溶解于30毫升无水吡啶中。添加二异丙基乙基胺(3当量)，随后添加苯甲酰氯(1.5当量)。混合物于室温搅拌2小时。在低于30℃真空中蒸发吡啶，并加入150毫升CH2C12。所产生的混合物以50毫升饱和NaHCO3洗涤2次。有机层于MgSO4上干燥，过滤并蒸发，残余物于真空中干燥64小时。使用CH2Cl2至8：2的CH2Cl2/乙酸乙酯作为洗脱液，将中间体I-4经柱色谱纯化。蒸发后，获得2.89克呈白色泡沫的I-4。LC-MS：Rt：3.79分钟，m/z：587(M+H)+。
步骤5：3-苯甲酰基-1-((3’R,6aR,8R,9aS)-2,2,4,4-四异丙基-4’,5’,6,6a,8,9a-六氢螺[呋喃并[3,2-f][1,3,5,2,4]trioxadisilocine-9,3’-吡唑]-8-基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮及其差向异构体（epimer）3-苯甲酰基-1-((3’S,6aR,8R,9aS)-2,2,4,4-四异丙基-4’,5,6,6a,8,9a-六氢螺[呋喃并[3,2-f][1,3,5,2,4]trioxadisilocine-9,3’-吡唑]-8-基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(I-5)
从N-甲基-N-亚硝基-对甲苯磺酰胺(DIAZALD)(4.862克)，以及在二乙醚和2-(2-乙氧基乙氧基)乙醇中的KOH(2.9克)产生重氮甲烷，将其溶解于I-4(1.072克)的二乙醚(20毫升)搅拌溶液中，其于冰水浴中冷却。当蒸馏完全时，于室温搅拌黄色溶液直到TLC或LC-MS显示反应完全。将混合物蒸发至干燥，生成1.149克白色泡沫。LC-MS表明差向异构体(I-5)的3：1混合物，其被就此使用于后续反应。LC-MS：Rt：3.67&3.68分钟，m/z：629(M+H)+。
步骤6：3-苯甲酰基-1-((6a’R,8’R,9a’S)-2’,2’,4’,4’-四异丙基六氢螺[环丙烷-1,9’-呋喃并[3,2-f][1,3,5,2,4]trioxadisilocine]-8’-基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(I-6)
在氩气下，于室温搅拌中间体I-5(250毫克)和溶解于5毫升1：1的无水苯/CH3CN中的二苯甲酮(1当量)的混合物。该混合物以150瓦卤素灯照射直到LC-MS显示起始材料的完全转化。蒸发混合物至干燥，并使用CH2Cl2作为洗脱液通过柱色谱纯化中间体I-6。在纯级分蒸发后，获得呈清澈油状物的I-6(150毫克)。LC-MS：Rt：3.91分钟，m/z：601(M+H)+。
步骤7：1-((6a’R,8’R,9a’S)-2’,2’,4’,4’-四异丙基六氢螺[环丙烷-1,9’-呋喃并[3,2-f][1,3,5,2,4]trioxadisilocine]-8’-基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(I-7)
将中间体I-6(150毫克)溶解于3毫升CH2C12，并加入10毫升NH3/甲醇。搅拌混合物1小时，蒸发至干燥，使用CH2C12至9：1的CH2C12/乙酸乙酯作为洗脱液，经柱色谱纯化。蒸发后，获得无色油状物，其在以二乙醚研制和蒸发后，生成87毫克呈白色泡沫的中间体I-7。LC-MS：Rt：3.66分钟，m/z：497(M+H)+。
步骤8：4-氨基-I-((6a’R,8’R,9a’S)-2’,2’,4’,4’-四异丙基六氢螺[环丙烷-1,9’-呋喃并[3,2-f][1,3,5,2,4]trioxadisilocine]-8’-基)嘧啶-2(1H)-酮(I-8)
将I-7(1.0克)溶液溶解于20毫升无水吡啶中，并将此溶液于冰浴中冷却。逐滴添加4-氯苯基二氯磷酸酯(1.5当量)，并冷搅拌此溶液5分钟。然后，逐滴添加四唑(3当量，CH3CN中的0.45 M溶液)。移除冰浴，进行反应直到LC-MS显示无进一步发展。另添加1当量的4-氯苯基二氯磷酸酯，并于室温搅拌混合物另外3小时。LC-MS表明无起始材料留下。将混合物蒸发至干燥(<40℃)，并将残余物置入CH2C12(75毫升)，以饱和NaHCO3洗涤2次。以Na2SO4干燥有机相，过滤并蒸发。将先前反应的残余物溶解于在二
Figure 803597DEST_PATH_IMAGE017
烷(0.5M)中的25毫升NH3溶液中。以规则间隔添加在二
Figure 532519DEST_PATH_IMAGE017
烷中的另外的NH3直到以LC-MS判断为反应完全。当完成时，将混合物蒸发至干燥。使用CH2Cl2至9：1的CH2C12/甲醇作为洗脱液，将中间体I-8经柱色谱纯化。蒸发后，获得呈黄色至橙色粘稠固体的I-8(840毫克)。LC-MS：Rt：3.42分钟，m/z：496(M+H)+。
步骤9：   4-氨基-1-(7-羟基-6-羟基甲基-5-氧杂-螺[2.4]庚-4-基)-1H-嘧啶-2-酮(I)
将中间体I-8(840毫克)溶解于25毫升THF中。加入氟化四正丁基铵(TBAF；2当量)。于室温搅拌混合物1小时，然后于真空中蒸发。使用9：1的CHC13/甲醇至3：1的CHCl3/甲醇作为洗脱液，将化合物经柱色谱纯化2次。蒸发含产物的级分后，获得呈白色固体的化合物1(300毫克)。LC-MS：Rt：1.25分钟，m/z：254(M+H)+。1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ ppm 0.31 - 0.59 (m, 3 H), 0.93 - 1.02 (m, 1 H), 3.51 - 3.65 (m, 1 H), 3.71 (d, J=4.89 Hz, 2 H), 3.97 (t, J=5.87 Hz, 1 H), 4.98 (t, J=4.99 Hz, 1 H), 5.12 (d, J=5.87 Hz, 1 H), 5.72 (d, J=7.43 Hz, 1 H), 6.01 (s, 1 H), 7.13 (br. s., 2 H), 7.77 (d, J=7.24 Hz, 1 H)。
实施例2： (2S)-2-((((4R,6R,7S)-4-(4-氨基-2-氧代嘧啶-1(2H)-基)-7-羟基-5-氧杂螺[2.4]庚烷-6-基)甲氧基)((苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸苄基酯
Figure 345754DEST_PATH_IMAGE018
将化合物1(100毫克)与(2S)-2-(氯(苯氧基)磷酰基氨基)丙酸苄基酯(279毫克，2.0当量)一起溶解于无水THF/吡啶中。将混合物冷却至-78℃。添加N-甲基咪唑(NMI)(259毫克，8当量)，并于-78℃搅拌该混合物15分钟，然后于RT搅拌过夜。蒸发所产生的混合物至干燥。添加10毫升CH2C12并以10毫升0.5N HCl洗涤残余物。分离有机层并以10毫升水洗涤，以Na2SO4干燥，过滤并蒸发。使用CH2Cl2至CH2C12/MeOH 9-1作为洗脱液，将化合物通过硅胶色谱纯化(在此洗脱液中Rf=0.2)。获得黄色固体，对其使用EtOAc至EtOAc/MeOH 8-2作为洗脱液以柱色谱再次纯化。蒸发并于真空干燥过夜后，获得80毫克(33.4%)的2a(非对映异构体的混合物)。LC-MS：Rt：3.37分钟，m/z：569(M-H)-。1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ ppm 0.31 - 0.41 (m, 1 H), 0.43 - 0.58 (m, 2 H), 0.95 - 1.06 (m, 1 H), 1.20 - 1.31 (m, 3 H), 3.82 - 4.01 (m, 3 H), 4.09 - 4.23 (m, 1 H), 4.23 - 4.36 (m, 1 H), 4.98 - 5.15 (m, 2 H), 5.29 - 5.39 (m, 1 H), 5.70 (d, J=7.43 Hz, 1 H), 6.07 (s, 1 H), 6.13 (dd, J=12.81, 10.47 Hz, 1 H), 7.08 - 7.25 (m, 6 H), 7.29 - 7.39 (m, 6 H), 7.54 (d, 1 H)。
以相似方式制备下列化合物：
(2S)-2-((((4R,6R,7S)-4-(4-氨基-2-氧代嘧啶-1(2H)-基)-7-羟基-5-氧杂螺[2.4]庚烷-6-基)甲氧基)(4-氯苯氧基)磷酰基氨基)丙酸苄基酯(2b)
Figure 843731DEST_PATH_IMAGE019
LC-MS：Rt：3.65分钟，m/z：603(M-H)-。1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ ppm 0.30 - 0.43 (m, 1 H), 0.44 - 0.60 (m, 2 H), 0.95 - 1.06 (m, 1 H), 1.20 - 1.31 (m, 3 H), 3.84 - 4.01 (m, 3 H), 4.09 - 4.23 (m, 1 H), 5.04 - 5.14 (m, 2 H), 5.29 - 5.39 (m, 1 H), 5.71 (d, J=7.63 Hz, 1 H), 6.07 (s, 1 H), 6.12 - 6.27 (m, 1 H), 7.08 - 7.26 (m, 5 H), 7.27 - 7.43 (m, 7 H), 7.55 (d, J=7.24 Hz, 1 H)。
 
(2S)-2-((((4R,6R,7S)-4-(4-氨基-2-氧代嘧啶-1(2H)-基)-7-羟基-5-氧杂螺[2.4]庚烷-6-基)甲氧基)(苯氧基)磷酰基氨基)-3-苯基丙酸乙基酯(2c)
Figure 5591DEST_PATH_IMAGE020
LC-MS：Rt：1.84分钟，m/z：585(M+H)+ 。
 
(2S)-2-((((4R,6R,7S)-4-(4-氨基-2-氧代嘧啶-1(2H)-基)-7-羟基-5-氧杂螺[2.4]庚烷-6-基)甲氧基)(苯氧基)磷酰基氨基)丙酸甲基酯(2d) 
Figure 956230DEST_PATH_IMAGE021
LC-MS：Rt：1.25分钟，m/z：495(M+H)+。
 
实施例3：异丁酸(4R,6R,7S)-4-(4-氨基-2-氧代嘧啶-1(2H)-基)-6-(异丁酰基-氧基甲基)-5-氧杂螺[2.4]庚烷-7-基酯(3) 
Figure 838735DEST_PATH_IMAGE022
将中间体I-7(11.00克，22.14毫摩尔)溶解于THF(280毫升)中，并加入TBAF(59.8毫升，59.8毫摩尔)。于室温搅拌混合物1小时。加入吡啶、甲醇和水的混合物(80毫升，3：1：1)，随后将强酸阳离子交换剂，Dowex 50 Wx4(128克)，加至吡啶、甲醇和水的混合物(320毫升，3：1：1)中。搅拌反应混合物45分钟并过滤。Dowex残余物以吡啶、甲醇和水的混合物(320毫升，3：1：1)洗涤2次，并于减压下浓缩合并的滤液。以乙酸乙酯中的0至10%甲醇的梯度洗脱，将混合物以硅胶色谱纯化，生成呈白色泡沫的中间体I-9(5.597克，84%)。LC-MS，Rt：2.05分钟，m/z = 253(M-H)-。
将中间体I-9(5.16克，20.30毫摩尔)溶解于无水吡啶(100毫升)中，此溶液以冷水外部冷却。添加异丁酸酐(16.85毫升，101毫摩尔)，并使反应于室温进行过夜。此反应再次以冷水外部冷却，通过添加甲醇以猝灭过量异丁酸酐。于室温搅拌20分钟并蒸发挥发物后，添加乙酸乙酯并以饱和NaHCO3水溶液洗涤(2x)混合物。有机相以MgSO4干燥并于真空中浓缩，获得呈白色固体的I-10(7.68克，96%)。LC-MS：Rt：2.26分钟，m/z = 393(M-H)-。
将POCl3(4.72毫升，50.6毫摩尔)添加至I-10(7.68克，19.47毫摩尔)、1H-1,2,4-三唑(15.20克，220毫摩尔)和三乙胺(30.7毫升，220毫摩尔)在无水CH2C12(50毫升)中的经冷却的混合物中。于室温搅拌混合物2.5小时。通过添加冷水以猝灭过量POCl3，并分离有机层，于真空中浓缩。使用洗脱梯度CH2C12/乙酸乙酯90：10至85：15，将混合物经硅胶色谱纯化，生成中间体I-11(7.5克，86%)。LC-MS：Rt：2.38分钟，m/z = 446(M+H)+。
将中间体I-11(7.49克，16.81毫摩尔)溶解于THF(200毫升)中，并以浓NH4OH水溶液(15毫升)处理。3.5小时后，于减压下移除挥发物。以CH2C12中的0至5%甲醇梯度洗脱，将混合物经硅胶色谱纯化。将产物溶解于乙酸乙酯中，并以水(2x)和盐水(2x)洗涤混合物。以MgSO4干燥有机相，过滤后，于真空中浓缩，生成呈白色泡沫的化合物3(5.597克，84%)LC-MS：Rt：1.95分钟，m/z = 394(M+H)+。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ ppm 0.36 - 0.46 (m, 1 H) 0.64 - 0.75 (m, 1 H) 0.77 - 0.92 (m, 2 H) 1.06 - 1.15 (m, 12 H) 2.53 - 2.66 (m, 2 H) 4.18 - 4.36 (m, 3 H) 4.98-5.02 (m, 1 H) 5.77 (d, J=7.4 Hz, 1 H) 6.25 (s, 1 H) 7.25 (br. s., 1 H) 7.29 (br. s., 1 H) 7.55 (d, J=7.4 Hz, 1 H)。
实施例4：异丙酸((4R,6R,7S)-4-(4-氨基-2-氧代嘧啶-1(2H)-基)-7-羟基-5-氧杂螺[2.4]庚烷-6-基)甲基酯(4)
Figure 925640DEST_PATH_IMAGE023
Figure 868188DEST_PATH_IMAGE024
于冰水浴中冷却中间体I-9(350毫克，1.377毫摩尔)的无水吡啶(15毫升)溶液，并添加(氯(4-甲氧基苯基)亚甲基)二苯(900毫克，2.91毫摩尔)。将反应混合物置于融化的冰水浴中，然后于室温搅拌过夜。添加过量甲醇，30分钟后，将反应混合物浓缩，干燥并就此用于后续反应。LC-MS：Rt：2.48分钟，m/z = 525(M-H)-。
向上述残余物的无水DMF(15毫升)溶液中，添加叔丁基氯二甲基硅烷(TBDMSC1；311毫克，2.065毫摩尔)和咪唑(169毫克，2.478毫摩尔)。于室温搅拌反应混合物过夜。在次日添加总计6当量的TBDMSC1和咪唑，并继续搅拌再次过夜。混合物以甲醇猝灭，并部份移除挥发物，以乙酸乙酯稀释，混合物以水(2x)和盐水洗涤。有机相以MgSO4干燥，过滤后，于真空中浓缩。以CH2C12至19：1的CH2C12/甲醇洗脱梯度，将混合物经硅胶色谱纯化，生成中间体I-13，其就此用于后续反应。LC-MS：Rt：3.70分钟，m/z = 639(M-H)-。
将中间体I-13溶解于80%乙酸水溶液(10毫升)中，并于室温搅拌混合物。8小时后，蒸发挥发物，以CH2C12至4 %甲醇/CH2Cl2的洗脱梯度，将混合物经硅胶色谱纯化。蒸发溶剂生成中间体I-14(318毫克，73%)。LC-MS：Rt：2.46分钟，m/z = 367(M-H)-。
将中间体I-14(318毫克，0.863毫摩尔)溶解于无水吡啶(8毫升)中，此溶液以冷水外部冷却。经由注射器加入异丁酸酐(430微升，2.59毫摩尔)。于室温搅拌反应混合物过夜。添加甲醇以猝灭过量的异丁酸酐，然后移除挥发物。添加乙酸乙酯，溶液以饱和NaHCO3洗涤，以MgSO4干燥，过滤后于真空中浓缩，生成中间体I-15(307毫克，81%)。LC-MS：Rt：3.0分钟，m/z = 437(M-H)-。
将中间体I-15(307毫克，0.700毫摩尔)、1H-1,2,4-三唑(546毫克，7.91毫摩尔)和三乙胺(1.1毫升，7.91毫摩尔)溶解于无水CH2Cl2(7毫升)中，并于0℃冷却。添加POCl3(0.170毫升，1.820毫摩尔)，同时将反应温度维持在低于25℃。过夜搅拌该混合物。添加3.0当量的1H-1,2,4-三唑和三乙胺以及CH2Cl2(5毫升)，并于室温搅拌混合物另外3小时。小心添加冷水以猝灭过量POCl3。分离下层的有机层并通过于真空中蒸发而浓缩。以CH2C12至4%甲醇/CH2C12梯度洗脱，将混合物经硅胶色谱纯化，生成中间体I-16(200毫克，58%)。LC-MS：Rt：3.09分钟，m/z = 490(M+H)+。
将中间体I-16(200毫克，0.408毫摩尔)溶解于THF(5毫升)中，并以浓NH4OH水溶液(0.5毫升)处理。7小时后，移除挥发物，并于减压下浓缩混合物。以CH2C12至5%甲醇/CH2Cl2梯度洗脱，将混合物经硅胶色谱纯化。蒸发溶剂后，获得中间体I-17(179毫克，100%)。LC-MS：Rt：2.74分钟，m/z = 438(M+H)+。
向中间体I-17(179毫克，0.409毫摩尔)和乙酸(147毫克，2.454毫摩尔)的THF(10毫升)溶液中，添加TBAF(1227微升，1.227毫摩尔，在THF中1M)。于室温搅拌混合物。继续搅拌2小时，然后移除溶剂。以甲醇/CH2Cl2 4%至8%梯度洗脱，将混合物经硅胶色谱纯化。将产物(100毫克)与处于THF(10毫升)中的CaCO3(60毫克)和Dowex 50 Wx4(200毫克)混合，并于室温搅拌2小时。过滤混合物，蒸发挥发物后，经硅胶色谱再次纯化(梯度洗脱：氯仿中的0至15%甲醇)，生成呈白色固体的化合物4(59毫克，44%)。LC-MS：Rt：1.08分钟，m/z = 324(M+H)+。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ ppm 0.36 - 0.45 (m, 1 H) 0.46 - 0.57 (m, 2 H) 0.96 - 1.05 (m, 1 H) 1.10 (d (app.)), J=6.5 Hz, 6 H) 2.58 (h(app.)), J=6.5 Hz, 1 H) 3.86 - 3.91 (m, 1 H) 3.97-4.01 (m, 1 H) 4.21 (dd, J=12.0, 5.9 Hz, 1 H) 4.33 (dd, J=12.0, 2.3 Hz, 1 H) 5.34 (d, J=5.7 Hz, 1 H) 5.74 (d, J=7.4 Hz, 1 H), 6.01 (s, 1 H) 7.06 - 7.28 (m, 2 H) 7.57 (d, J=7.4 Hz, 1 H)。
 
实施例5：异丁酸(4R,6R,7S)-4-(4-氨基-2-氧代嘧啶-1(2H)-基)-6-(羟基甲基)-5-氧杂螺[2.4]庚烷-7-基酯(5)
Figure 243806DEST_PATH_IMAGE025
将中间体I-12(250毫克，0.475毫摩尔)溶解于无水吡啶(10毫升)中，并以冷水外部冷却此溶液。经注射器将异丁酸酐(236微升，1.424毫摩尔)加入至该溶液，并于室温搅拌此反应2小时。加入更多异丁酸酐(236微升，1.424毫摩尔)，进一步搅拌该混合物2小时。加入更多异丁酸酐(236微升，1.424毫摩尔)，并搅拌混合物过夜。随后，通过添加甲醇以猝灭过量异丁酸酐。于室温搅拌此溶液20分钟，然后浓缩至干燥。将残余物置入乙酸乙酯(30毫升)中，以饱和NaHCO3水溶液(2x20毫升)洗涤该溶液。有机相于Na2SO4上干燥，滤除固体，溶剂经蒸发移除。生成呈无色油状物的I-18，就此用于后续反应。LC-MS：Rt：3.07分钟。
将POCl3(102微升，1.089毫摩尔)加至中间体I-18(250毫克，0.419毫摩尔)、1H-1,2,4-三唑(327毫克，4.73毫摩尔)、三乙胺(661微升，4.73毫摩尔)和CH2C12(6.0毫升)的经冷却的混合物中，同时将反应温度维持在低于25℃(生成白色沉淀)。于室温搅拌反应混合物4小时。当反应完成时，经由小心添加冷H2O以猝灭过量POCl3。分离有机层，于真空中蒸发而浓缩。以90：10至85：15的CH2Cl2/乙酸乙酯梯度洗脱，将混合物经硅胶色谱纯化，生成呈油状中间体I-19(200毫克，74 %)：Rt：3.15分钟。 
将中间体I-19(200毫克，0.309毫摩尔)溶解于THF(5毫升)中，并以浓NH4OH水溶液(0.6毫升)处理。4小时后，添加更多浓NH4OH水溶液(0.3毫升)，搅拌混合物过夜。真空中移除溶剂，将油状物溶解于乙酸乙酯中，以水和盐水洗涤。以Na2SO4干燥，过滤并蒸发挥发物后，残余物(I-20)就此用于后续反应。LC-MS：Rt：2.86分钟，m/z = 594(M-H)-。
将中间体I-20(180毫克，0.302毫摩尔)溶解于80%乙酸水溶液(5毫升)中，于室温搅拌反应混合物。9小时后，移除挥发物，以CH2C12中的5%至15%甲醇洗脱梯度，将混合物经硅胶色谱纯化。获得的残余物以iPr2O研制，并于真空中干燥。生成化合物5(60.8毫克，62%)。LC-MS：Rt：1.25分钟，m/z = 324(M+H)+。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ ppm 0.33 - 0.41 (m, 1 H) 0.62 - 0.71 (m, 1 H) 0.74 – 0.82 (m, 2 H) 1.08-1.14 (m, 6 H) 2.55-2.64 (1H, m) 3.62-3.68 (m, 2H) 3.99 – 4.04  (m, 1 H) 4.98-5.03 (m, 1 H) 5.12 (t, J=5.2 Hz, 1 H) 5.76 (d, J=7.4 Hz, 1 H) 6.27 (s, 1 H) 7.14 - 7.33 (m, 2 H) 7.80 (d, J=7.4 Hz, 1 H)。
 
实施例6：(2S)-2-((((4R,6R,7S)-4-(4-氨基-2-氧代-嘧啶-1(2H)-基)-7-羟基-5-氧杂螺[2.4]庚烷-6-基)甲氧基)(苯氧基)磷酰基-氨基)丙酸苄基酯的异丁酸酯(6) 
Figure 664423DEST_PATH_IMAGE026
将化合物5与(2S)-2-(氯-苯氧基)磷酰基氨基)丙酸苄基酯(2.0当量)一起溶解于无水THF/吡啶中。冷却该混合物至-78℃。添加N-甲基咪唑(NMI)(8当量)，并于-78℃搅拌该混合物15分钟，然后于RT搅拌过夜。将混合物蒸发至干燥。添加10毫升CH2C12，残余物以10毫升0.5N HCl洗涤。分离有机层并以10毫升水洗涤，于Na2SO4上干燥，过滤并蒸发。使用CH2C12/MeOH的梯度作为洗脱液，将化合物经硅胶色谱纯化。
依照相同程序，但由(2S)-2-(氯-(苯氧基)磷酰基氨基)丙酸乙基酯起始，还制备(2S)-2-((((4R,6R,7S)-4-(4-氨基-2-氧代-嘧啶-1(2H)-基)-7-羟基-5-氧杂螺[2.4]庚烷-6-基)甲氧基)(苯氧基)磷酰基-氨基)丙酸乙基酯的异丁酰基酯(7)：
。
生物学实施例
复制子检验
在细胞检验中检查式I化合物对于HCV RNA复制的抑制活性，目的在于鉴定抑制HCV功能性细胞复制细胞系的化合物，也已知为HCV复制子。该细胞检验基于双顺反子表达构筑体（bicistronic expression construct），如Lohmann等人(1999), Science vol. 285 110-113页所述，经Krieger等人(2001), Journal of Virology 75：4614-4624所述修改，以多重目标筛选策略。
该检验利用稳定转染的细胞系Huh-7 luc/neo(下文称为Huh-Luc)。此细胞系带有编码双顺反子表达构筑体的RNA，包括1b型HCV的野生型NS3-NS5B区域，转译自内核糖体进入位(IRES)，来自脑心肌炎病毒 (encephalomyocarditis virus，EMCV)，跟着报道子部分(FfL-荧光酶)，和可选择的标记部分(neoR，新霉素磷酸转移酶)。此构筑体邻接来自1b型HCV的5’和3’ NTR(非转译区域)。在G418(neoR)存在下，此复制子细胞的连续培养依赖于HCV RNA的复制。表达HCV RNA的稳定转染的复制子细胞，其自动复制且达到高水平，编码尤其是荧光酶，用于筛选抗病毒化合物。
将复制子细胞置于在以各种浓度添加的试验和对照化合物存在下的384孔板中。在培育3日后，通过检验荧光酶活性来测量HCV复制(使用标准荧光酶检验底物和试剂和Perkin Elmer ViewLuxTM ultraHTS微板成像器)。在没有任何抑制剂的情况下，对照培养物中的复制子细胞具有高荧光酶表达。化合物对于荧光酶活性的抑制活性在Huh-Luc细胞上监测，能够对每一试验化合物作剂量-响应曲线。然后计算EC50值，其值代表降低检测的荧光酶活性50%所需化合物的量，或更具体地，检测基因上连接的HCV复制子RNA复制的能力。
细胞毒性
在Huh7-CMV-Luc复制子检验中测定细胞毒性。将复制子细胞(2500个细胞/孔)（在巨细胞病毒(CMV)构成的启动子控制下，用荧光酶报道子基因稳定转化）在试验化合物各浓度存在或不存在下培育。在湿润的5% CO2气氛中于37℃培育3日后，经由测量Luc活性而定量细胞增殖，并表示为CC50值(细胞毒性，细胞生长的50%抑制浓度)。试验于384孔板中进行。
检验
对本发明的化合物试验其抗野生型人类免疫缺陷病毒(HIV)的效力。使用细胞检验评估抗病毒活性，依据下列程序进行。将人类T细胞系MT4以绿色荧光蛋白(Green Fluorescent Protein，GFP)和HIV-特异性启动子、HIV-1长端重复(LTR)进行基因工程处理。该细胞系指明为MT4 LTR-EGFP，可用于所研究化合物的体外抗-HIV活性的评估。在HIV-1感染的细胞中，产生Tat蛋白质，其上调LTR启动子，最后导致GFP报道子产生的刺激，能够以荧光计量测量进行的HIV-感染。能够测定有效浓度值例如50%有效浓度(EC50)，且通常以μM表示。EC50值被定义为使 HIV感染的荧光细胞降低50%的试验化合物的浓度。HIV-1感染的监测使用扫描显微镜进行。影像分析能够非常敏感的检测病毒感染。在细胞坏死前进行测量，其通常于感染约5日后发生，尤其于感染3日后进行测量。表中IIIB栏列出抗野生型株IIIB的EC50值。
下表中的结果说明本发明的化合化显示出抗HCV活性，而缺少抗HIV活性。它们就毒性而言显示出有利的结果，且具有可接受的选择性指数(EC50和CC50之间的比率)。
表：试验结果
 

Claims (17)

1.式I化合物，
Figure 222775DEST_PATH_IMAGE001
包括其任何可能的立体异构体，其中：
R2为氢或C1-C4烷基；
R3和R4独立地选自氢、-C(=O)R5和-C(=O)CHR6-NH2；或
R3为氢和R4为单磷酸酯、二磷酸酯或三磷酸酯；或R3为氢、-C(=O)CHR5或-C(=O)CHR6-NH2和R4为下式基团：
，
各R5独立地选自氢、C1-C6烷基和C3-C7环烷基；
R6为氢或C1-C6烷基；
R7为苯基，任选由1、2或3个取代基取代，所述取代基各自独立地选自卤素、C1-C6烷基、C3-C6烯基、C1-C6烷氧基、羟基和氨基，或R7为萘基；或R7为吲哚基；
R8为氢、C1-C6烷基、苄基；
R8’为氢、C1-C6烷基、苄基；或
R8和R8’与和它们连接的碳原子一起形成C3-C7环烷基；
R9为C1-C6烷基、苄基或苯基，其中所述苯基可任选由1、2或3个取代基取代，所述取代基各自独立地选自羟基、C1-C6烷氧基、氨基、单-和二C1-C6烷基氨基；
条件是R2、R3和R4不均为氢；
或其药学上可接受的盐或溶剂合物。
2.根据权利要求1所述的化合物，其中R2为氢。
3.根据权利要求1所述的化合物，其中R3和R4为氢。
4.根据权利要求1-2中任一项所述的化合物，其中R3为氢，且R4为下式基团:
Figure 919652DEST_PATH_IMAGE003
。
5.根据权利要求1-2或权利要求4中任一项所述的化合物，其中R7为苯基，任选由卤素、或C1-C6烷基取代，或R7为萘基。
6.根据权利要求1-2或者权利要求4或5中任一项所述的化合物，其中R8为氢，且R8’为氢或C1-C6烷基。
7.根据权利要求1-2或者权利要求4或5中任一项所述的化合物，其中R3和R4之一为-C(=O)R5，且R3和R4中的另一个为氢；或其中R3和R4两者均为-C(=O)R5；且其中R5为C1-C6烷基。
8.根据权利要求7所述的化合物，其中R5为异丙基。
9.根据权利要求1-2、或权利要求4-8中任一项所述的化合物，其中R9为C1-C6烷基或苄基。
10.根据权利要求1所述的化合物，其中所述化合物具有下式：
Figure 878643DEST_PATH_IMAGE004
。
11.根据权利要求10所述的化合物，其中所述化合物为游离形式。
12.药物组合物，其包含抗病毒有效量的如权利要求1-11中任一项所定义的式I化合物和药学上可接受的载体。
13.如权利要求1-11中任一项所定义的式I化合物以及其中R2、R3和R4均为氢的式I化合物，用作HCV抑制剂。
14.根据权利要求13所述的用作HCV抑制剂的式I化合物，其中式I化合物的R2、R3和R4均为氢。
15.根据权利要求14所述的用作HCV抑制剂的式I化合物，其中所述化合物为游离形式。
16.包括式I化合物以及其中R2、R3和R4均为氢的式I化合物与另外的HCV抑制剂的组合。
17.制备如权利要求1-11中任一项所定义的式I化合物的方法，其中
(a)如下制备其中R3和R4两者均为氢的式I化合物，其以式I-a表示：通过从2’-脱氧-2’-螺环丙基尿苷1f至对应的2’-脱氧-2’-螺环丙基胞苷1g的尿嘧啶至胞嘧啶的转化反应，随后移除保护基PG而获得化合物I-a：
Figure 693016DEST_PATH_IMAGE006
(b)通过将化合物I-a与氯磷酸酯2a在碱存在下反应获得氨基磷酸酯I-b：
Figure 577795DEST_PATH_IMAGE007
，
从而制备式I化合物，其中R3为氢且R4为
Figure 844828DEST_PATH_IMAGE008
(c) 如下制备式I化合物，其中R3为氢且R4为-C(=O)R5或-C(=O)CHR6-NH2，其以R4a表示，且所述化合物以式I-c表示；或R3和R4彼此独立地为-C(=O)R5或-C(=O)CHR6-NH2，以下分别以R3a、R4a表示，且所述化合物以式I-d表示；且其中-C(=O)CHR6-NH2中的的氨基可用能够在后移除的氨基保护基保护：
通过选择性保护中间体3a中的5’-羟基，获得中间体3b，其进而被酯化成中间体3c，随后经尿嘧啶至胞嘧啶转化成中间体3d；将后者脱保护成3’-单酯I-c；或通过将I-c中的5’-羟基酯化成化合物I-d；或
通过选择性酯化中间体3a中的5’-羟基，由此导入基团R4a而生成中间体3e，并且中间体3e随后用不同酸酯化，因而导入基团R3a，产生二酯中间体3f，使其经历尿嘧啶至胞嘧啶转化，从而产生化合物I-d：
Figure 43728DEST_PATH_IMAGE010
(d)如下制备式I化合物，其中R3为氢且R4为如上述指定的R4a，所述化合物以式I-e表示：通过用羟基保护基保护中间体3b中的游离羟基，该羟基保护基可相对于其它羟基保护基选择性裂解，生成中间体4a；移除5’-羟基保护基，产生中间体4b；将后者酯化成为中间体4c；使后者经历尿嘧啶至胞嘧啶转化，因此获得4’-羟基保护的胞苷衍生物4d，将其脱保护，产生化合物I-e；如下列图示中所表示，其中基团PGa具有与PG相同的含义，但被选择以使其可相对于基团PG选择性裂解： 
Figure 774924DEST_PATH_IMAGE012
图示4：单酯类的合成
(e)通过酯化中间体3a中的两个羟基，制备式I化合物，其中R3a和R4a相同且如上述所指定，所述化合物以式I-f表示：
Figure 768288DEST_PATH_IMAGE014
。
CN200980125579.1A 2008-07-01 2009-07-01 环丙基聚合酶抑制剂 Expired - Fee Related CN102083845B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201610033092.2A CN105693794A (zh) 2008-07-01 2009-07-01 环丙基聚合酶抑制剂

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP08159396 2008-07-01
EP08159396.4 2008-07-01
EP08171005.5 2008-12-08
EP08171005 2008-12-08
PCT/EP2009/004748 WO2010000459A1 (en) 2008-07-01 2009-07-01 Cyclopropyl polymerase inhibitors

Related Child Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201610033092.2A Division CN105693794A (zh) 2008-07-01 2009-07-01 环丙基聚合酶抑制剂

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN102083845A true CN102083845A (zh) 2011-06-01
CN102083845B CN102083845B (zh) 2016-09-14

Family

ID=41095413

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN200980125579.1A Expired - Fee Related CN102083845B (zh) 2008-07-01 2009-07-01 环丙基聚合酶抑制剂
CN201610033092.2A Pending CN105693794A (zh) 2008-07-01 2009-07-01 环丙基聚合酶抑制剂

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201610033092.2A Pending CN105693794A (zh) 2008-07-01 2009-07-01 环丙基聚合酶抑制剂

Country Status (29)

Country Link
US (1) US8431588B2 (zh)
EP (1) EP2141172B1 (zh)
JP (1) JP5624029B2 (zh)
KR (1) KR20110038683A (zh)
CN (2) CN102083845B (zh)
AP (1) AP2010005505A0 (zh)
AR (1) AR072428A1 (zh)
AU (1) AU2009266004B2 (zh)
BR (1) BRPI0913643A2 (zh)
CA (1) CA2729316A1 (zh)
CL (1) CL2010001634A1 (zh)
CO (1) CO6321255A2 (zh)
DK (1) DK2141172T3 (zh)
EA (1) EA022754B1 (zh)
EC (1) ECSP10010725A (zh)
ES (1) ES2396803T3 (zh)
HK (1) HK1226080A1 (zh)
HR (1) HRP20121068T1 (zh)
IL (1) IL209932A (zh)
MX (1) MX2010014493A (zh)
NI (1) NI201000231A (zh)
PL (1) PL2141172T3 (zh)
PT (1) PT2141172E (zh)
SI (1) SI2141172T1 (zh)
SV (1) SV2010003779A (zh)
TW (1) TW201012814A (zh)
UY (1) UY31950A (zh)
WO (1) WO2010000459A1 (zh)
ZA (1) ZA201009294B (zh)

Families Citing this family (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111848940B (zh) * 2008-09-08 2024-09-06 沙特阿美技术公司 聚碳酸酯多元醇组合物和方法
UY32099A (es) 2008-09-11 2010-04-30 Enanta Pharm Inc Inhibidores macrocíclicos de serina proteasas de hepatitis c
TW201201815A (en) * 2010-05-28 2012-01-16 Gilead Sciences Inc 1'-substituted-carba-nucleoside prodrugs for antiviral treatment
CA2822556A1 (en) 2010-12-30 2012-07-05 Enanta Pharmaceuticals, Inc Macrocyclic hepatitis c serine protease inhibitors
CN103380132B (zh) 2010-12-30 2016-08-31 益安药业 菲啶大环丙型肝炎丝氨酸蛋白酶抑制剂
US10201584B1 (en) 2011-05-17 2019-02-12 Abbvie Inc. Compositions and methods for treating HCV
JP5845841B2 (ja) 2011-11-18 2016-01-20 東芝ライテック株式会社 照明制御装置
WO2013123138A2 (en) 2012-02-14 2013-08-22 University Of Georgia Research Foundation, Inc. Spiro [2.4]heptanes for treatment of flaviviridae infections
WO2015103490A1 (en) 2014-01-03 2015-07-09 Abbvie, Inc. Solid antiviral dosage forms
GEP20247600B (en) 2015-03-06 2024-02-26 Atea Pharmaceuticals Inc B-D-2'-DEOXY-2'a-FLUORO-2'-B-C-SUBSTITUTED-2-MODIFIED-N6-SUBSTITUTED PURINE NUCLEOTIDES FOR HCV TREATMENT
RU2590952C1 (ru) * 2015-05-26 2016-07-10 Вячеслав Энгельсович Семёнов Средство гепатопротекторного действия
US10711029B2 (en) 2016-07-14 2020-07-14 Atea Pharmaceuticals, Inc. Beta-d-2′-deoxy-2′-alpha-fluoro-2′-beta-c-substituted-4′fluoro-n6-substituted-6-amino-2-substituted purine nucleotides for the treatment of hepatitis c virus infection
EP3512863B1 (en) 2016-09-07 2021-12-08 ATEA Pharmaceuticals, Inc. 2'-substituted-n6-substituted purine nucleotides for rna virus treatment
SG11201906163TA (en) 2017-02-01 2019-08-27 Atea Pharmaceuticals Inc Nucleotide hemi-sulfate salt for the treatment of hepatitis c virus
EP3773753A4 (en) 2018-04-10 2021-12-22 ATEA Pharmaceuticals, Inc. TREATMENT OF PATIENTS INFECTED WITH THE HEPATITIS C VIRUS WITH CIRRHOSIS
US10874687B1 (en) 2020-02-27 2020-12-29 Atea Pharmaceuticals, Inc. Highly active compounds against COVID-19

Family Cites Families (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DK0727419T3 (da) 1992-12-29 2002-06-10 Abbott Lab Mellemprodukter til fremstilling af forbindelser, som inhiberer retroviral protease
IL110752A (en) 1993-09-13 2000-07-26 Abbott Lab Liquid semi-solid or solid pharmaceutical composition for an HIV protease inhibitor
US5559158A (en) 1993-10-01 1996-09-24 Abbott Laboratories Pharmaceutical composition
IL111991A (en) 1994-01-28 2000-07-26 Abbott Lab Liquid pharmaceutical composition of HIV protease inhibitors in organic solvent
US6037157A (en) 1995-06-29 2000-03-14 Abbott Laboratories Method for improving pharmacokinetics
GB0114286D0 (en) 2001-06-12 2001-08-01 Hoffmann La Roche Nucleoside Derivatives
TW200500374A (en) * 2002-06-28 2005-01-01 Idenlx Cayman Ltd 2' and 3' -nucleoside produrgs for treating flavivridae infections
EA014685B1 (ru) * 2003-04-25 2010-12-30 Джилид Сайэнс, Инк. Фосфонатсодержащие антивирусные соединения (варианты) и фармацевтическая композиция на их основе
DE602005015466D1 (de) * 2004-08-23 2009-08-27 Hoffmann La Roche Antivirale 4'-azidonucleoside
ES2392948T3 (es) * 2006-10-10 2012-12-17 Janssen Products, L.P. Intermedio para inhibidores nucleosídicos de VHC

Also Published As

Publication number Publication date
CN105693794A (zh) 2016-06-22
EP2141172A1 (en) 2010-01-06
JP2011526270A (ja) 2011-10-06
PT2141172E (pt) 2013-01-14
SI2141172T1 (sl) 2013-02-28
SV2010003779A (es) 2011-02-08
CN102083845B (zh) 2016-09-14
DK2141172T3 (da) 2013-01-21
BRPI0913643A2 (pt) 2015-11-24
MX2010014493A (es) 2011-05-19
TW201012814A (en) 2010-04-01
CA2729316A1 (en) 2010-01-07
AU2009266004B2 (en) 2014-01-30
PL2141172T3 (pl) 2013-03-29
AU2009266004A1 (en) 2010-01-07
IL209932A0 (en) 2011-02-28
JP5624029B2 (ja) 2014-11-12
CO6321255A2 (es) 2011-09-20
HK1226080A1 (zh) 2017-09-22
EP2141172B1 (en) 2012-10-24
ZA201009294B (en) 2012-06-27
CL2010001634A1 (es) 2011-08-05
AP2010005505A0 (en) 2010-12-31
AR072428A1 (es) 2010-08-25
HRP20121068T1 (hr) 2013-01-31
KR20110038683A (ko) 2011-04-14
ES2396803T3 (es) 2013-02-27
WO2010000459A1 (en) 2010-01-07
IL209932A (en) 2013-12-31
UY31950A (es) 2010-01-29
ECSP10010725A (es) 2011-04-29
US20110092460A1 (en) 2011-04-21
EA022754B1 (ru) 2016-02-29
US8431588B2 (en) 2013-04-30
EA201170118A1 (ru) 2011-06-30
NI201000231A (es) 2011-09-03

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN102083845B (zh) 环丙基聚合酶抑制剂
AU2011282241B2 (en) Methods for the preparation of diasteromerically pure phosphoramidate prodrugs
CN102256991B (zh) 尿嘧啶基环丙基核苷酸
CN105705510B (zh) Hcv聚合酶抑制剂
US20100297079A1 (en) Compounds, compositions and methods for treating viral infection
EA027929B1 (ru) Нуклеозиды на основе урацила и спирооксетана
TWI675664B (zh) Hcv聚合酶抑制劑

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20160914

Termination date: 20190701

CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee