CN102051392A

CN102051392A - 氯化血红素及其制备方法和补血药物组合物

Info

Publication number: CN102051392A
Application number: CN2009101978966A
Authority: CN
Inventors: 于茂泉; 官代学; 罗建华; 陈建; 吴海峰
Original assignee: Shanghai Hongru Sci & Tech Development Co Ltd
Current assignee: Shanghai Hongru Sci & Tech Development Co Ltd
Priority date: 2009-10-29
Filing date: 2009-10-29
Publication date: 2011-05-11

Abstract

本发明公开了一种氯化血红素及其制备方法和补血药物组合物。该氯化血红素的制备方法包括以下步骤：(1)将抗凝新鲜猪血和含0.5～2％(wt)NaCl的冰醋酸混合，在100～130℃消化1～8小时；(2)将步骤(1)消化后所得流体物和醋酸溶液混合均匀，调节pH值至3.5～4.5，加入蛋白酶进行酶解；(3)将步骤(2)酶解后的反应液过滤，分离出固体即得氯化血红素。本发明采用生物提取技术制备氯化血红素，该生物提取技术可大规模、无污染的得到高纯度的氯化血红素。氯化血红素是治疗铁缺乏症和缺铁性贫血最有效的原料。将为新一代高效补血产品的开发带进一个高安全、高吸收的“高纯度生物铁时代”新的时代。

Description

氯化血红素及其制备方法和补血药物组合物

技术领域

本发明属于生化提取技术领域，特别涉及一种氯化血红素及其制备方法和补血药物组合物。

背景技术

铁缺乏症和缺铁性贫血是最常见的营养素缺乏症，至今仍是世界各国普遍而重要的健康问题，尤其是发展中国家，其高危人群为妇女、婴幼儿和儿童；目前，全世界约11.2亿人患缺铁性贫血，有21.5亿人铁缺乏。

复旦大学各附属医院统计的上海市铁缺乏和缺铁性贫血状况如下：

	缺铁性贫血	铁缺乏
			育龄妇女	11.39％	43.32％
妊娠三个月以上妇女	19.28％	66.27％
			10岁～17岁青少年	9.84％	13.17％
6个月～2岁婴幼儿	33.8％～45.7％	75％～82.5％

以往改善缺铁性贫血所用的补血产品都是补充离子铁，包括无机铁如硫酸亚铁和有机铁如乳酸亚铁等。铁在胃肠道以亚铁离子形式被吸收，然而离子铁吸收差，并且在体内易被氧化而产生大量自由基，伤害机体组织器官，有一定的毒副作用。

发明内容

因此，本发明要解决的技术问题就是针对现有的补血产品都是补充离子铁，存在离子铁吸收差，有毒副作用的缺陷，提供一种新的补血产品，其吸收率高，不引起蓄积中毒，安全性好。

本发明人首先采用生物和酶工程方法，选择最佳浓度、配方比例及消化时间，从动物新鲜的血红细胞中提取氯化血红素(Hemin)。然后将其作为(主要)功效成分制成补血的药物制剂。通过反复试验表明，该药物制剂可达到更为经济合理的生产目标，工艺稳定性也高。

本发明解决上述技术问题所采用的技术方案是：一种氯化血红素的制备方法，包括以下步骤：

(1)将抗凝新鲜猪血和含0.5～2％(wt)NaCl的冰醋酸混合，在100～130℃消化1～8小时；

(2)将步骤(1)消化后所得流体物和醋酸溶液混合均匀，调节pH值至3.5～4.5，加入蛋白酶进行酶解；

(3)将步骤(2)酶解后的反应液过滤，分离出固体即得氯化血红素。

本发明步骤(1)中，所述的含0.5～2％(wt)NaCl的冰醋酸较佳的是含1％(wt)NaCl的冰醋酸。所述的抗凝新鲜猪血是指新鲜猪血经抗凝处理所得的产品，一般按现有技术往新鲜猪血加入抗凝剂即可。抗凝新鲜猪血和含0.1～5％(wt)NaCl的冰醋酸的体积比是1∶3～1∶7，较佳的是1∶5。消化条件较佳的是115℃，4小时。

步骤(2)中，消化后所得流体物和醋酸溶液的体积比是1∶4～1∶8，较佳的是1∶6。醋酸溶液的浓度是10～30(wt)％。所述的蛋白酶可以是常规的蛋白质水解酶，较佳的是537蛋白酶。537蛋白酶是市售商品，有较强的水解能力，能将大分子的蛋白质水解成氨基酸等产物。酶解条件采用各蛋白酶的最佳反应条件。较佳的，蛋白酶的添加量是占反应溶液的0.1～1(wt)％，较佳的是0.5(wt)％，酶解50～70℃，36～72小时，较佳的60℃，48小时。酶解较佳的在搅拌状态下进行，较佳的转速60转/分。

步骤(3)中，分离出固体按常规进行烘干，一般是颗粒物。烘干的条件同常规，较佳的是于121℃烘烤2小时以上，即可得恒重的产品，即得氯化血红素。

因此，本发明还提供上述方法制备的氯化血红素。该氯化血红素与人体血红蛋白(Hb)中的血红素同源。纯度可高达90％以上，可以大大增强血红素的功效性和利用率。

本发明还提供一种补血药物组合物，包括活性成分和载体，其中，所述的活性成分至少包括如上所述的氯化血红素。当然也可以还包括其他的补血活性成分。所述的氯化血红素的用量是贫血的治疗或预防使用量。所述的载体是常规的药学上使用的载体，如填充剂、稀释剂、润滑剂、矫味剂等。

较佳的所述的补血药物组合物是片剂，其包括以下质量百分比的各组分：3～8％氯化血红素，2～5％葡萄糖酸锌，2～5％维生素C，30～70％乳糖，0.5～3.8％微晶纤维素，20～50％蔗糖，0.1～1％硬脂酸镁和0.1～0.5％包衣粉。

较佳的，所述的补血药物组合物的组成如下：4.5％氯化血红素，3.75％葡萄糖酸锌，3.75％维生素C，50％乳糖，2％微晶纤维素，35.3％蔗糖，0.5％硬脂酸镁和0.2％包衣粉，百分比是质量百分比。

本发明所用的原料或试剂除特别说明之外，均市售可得。

相比于现有技术，本发明的有益效果如下：本发明采用生物提取技术制备氯化血红素，该生物提取技术可大规模、无污染的得到高纯度的氯化血红素。氯化血红素是治疗铁缺乏症和缺铁性贫血最有效的原料。将为新一代高效补血产品的开发带进一个高安全、高吸收的“高纯度生物铁时代”新的时代。

附图说明

以下结合附图说明本发明的特征和有益效果。

图1是工艺流程图。

具体实施方式

下面用实施例来进一步说明本发明，但本发明并不受其限制。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，或按照制造厂商所建议的条件。本发明中所述的百分比若无特别说明，是指质量百分比。

实施例1 氯化血红素的制备

1.消化：将抗凝新鲜猪血与含1(wt)％NaCl的冰醋酸按体积比1∶5混合于反应釜中，115℃消化4小时。

2.酶解：将消化后所得流体物及20(wt)％醋酸溶液按体积比1∶6投入反应釜中，开启搅拌，转速要求60转/分，搅拌30min后，将反应液pH值调节至3.5。再按0.5(wt)％比例加入537蛋白酶(购自江门市亚东生物化工有限公司)(相当于500IU/ml反应液)，在60℃下搅拌48小时。然后出料。

3.过滤、分离：将酶解后的反应液先用压滤机过滤，然后用分离机进行分离，转速要求7600转/分。分离后取固体颗粒物。

4.干燥：将固体颗粒物于121℃烘烤2小时以上至恒重，即得氯化血红素。氯化血红素纯度是92％。

实施例2 氯化血红素的制备

1.消化：将抗凝新鲜猪血与含0.5(wt)％NaCl的冰醋酸按体积比1∶7混合于反应釜中，100℃消化8小时。

2.酶解：将消化后所得流体物及30(wt)％醋酸溶液按体积比1∶8投入反应釜中，开启搅拌，转速要求60转/分，搅拌30min后，将反应液pH值调节至4.5。再按0.1(wt)％比例加入537蛋白酶，在50℃下搅拌72小时。然后出料。

4.干燥：将固体颗粒物于121℃烘烤2小时以上至恒重，即得氯化血红素。氯化血红素纯度是94％。

实施例3 氯化血红素的制备

1.消化：将抗凝新鲜猪血与含2(wt)％NaCl的冰醋酸按体积比1∶3混合于反应釜中，130℃消化1小时。

2.酶解：将消化后所得流体物及10(wt)％醋酸溶液按体积比1∶4投入反应釜中，开启搅拌，转速要求60转/分，搅拌30min后，将反应液pH值调节至4.0。再按1(wt)％比例加入537蛋白酶，在70℃下搅拌36小时。然后出料。

4.干燥：将固体颗粒物于121℃烘烤2小时以上至恒重，即得氯化血红素。氯化血红素纯度是90％。

实施例4 氯化血红素药物制剂的制备

原料配方：

原料名称	质量百分比
		氯化血红素	4.5％
葡萄糖酸锌	3.75％

维生素C	3.75％
		乳糖	50％
微晶纤维素	2％
		蔗糖	35.3％
硬脂酸镁	0.5％
		包衣粉	0.2％

生产工艺：

1.粉碎过筛：按配方，将包含实施例1所得的氯化血红素等颗粒晶体形原料粉碎，并过100目筛。

2.制粒：将上述所有原料进行混匀后，加7％的纯化水，制软材，用高效湿发制粒机制粒成20目颗粒；湿粒制成后，放入干燥箱，干燥温度60-70℃，二小时后即得干颗粒；然后用20目筛对干颗粒整粒。

3.压片：往上述干颗粒中加入硬脂酸镁，充分搅匀，用旋转式压片机压片。

4.包衣：将压制好的素片用高效薄膜包衣机包衣，包衣过程应控制片床温度为55±5℃，雾化压力为3.5～4.5kgf/cm²，转速为5～6转/分钟，喷液量为150～200g/min。

5.内包装：将片子通过片剂包装机装入塑料瓶内，或通过铝塑包装机包装。

6.外包装：按包装规格要求进行盒装，最后出成品。

上述工艺流程图见图1。

实施例5 氯化血红素药物制剂的制备

原料配方：

原料名称	质量百分比
		氯化血红素	6.00％
葡萄糖酸锌	5.00％
		维生素C	2.00％
乳糖	45.00％
		微晶纤维素	0.50％
蔗糖	40.00％
		硬脂酸镁	1.00％

包衣粉

0.50％

生产工艺同实施例1。

实施例6 氯化血红素药物制剂的制备

原料配方：

原料名称	质量百分比
		氯化血红素	8.00％

葡萄糖酸锌	3.00％
		维生素C	5.00％
乳糖	30.00％
		微晶纤维素	3.80％
蔗糖	50.00％
		硬脂酸镁	0.10％
包衣粉	0.10％

生产工艺同实施例1。

实施例7 氯化血红素药物制剂的制备

原料配方：

原料名称	质量百分比
		氯化血红素	3.00％
葡萄糖酸锌	2.00％
		维生素C	3.00％
乳糖	70.00％
		微晶纤维素	1.00％
蔗糖	20.00％
		硬脂酸镁	0.70％

包衣粉

0.30％

生产工艺同实施例1。

下面通过试验例来进一步说明本发明的有益效果。

试验例1

1.产品功效

经上海医科大学食品毒理与保健食品功能检测中心检测，结果认为实施例4所制片剂具有改善营养性贫血的作用。

2.产品安全性

经上海市预防医学研究院按GB15193有关规定对实施例4所制片剂进行安全毒理学评价试验，结果认为实施例所制属无毒级物质。

3.吸收率试验

按照中国药典有关铁吸收率的试验标准，将实施例4～7制备的氯化血红素片剂和市场上常规的一、二代补血产品进行比较，测定吸收率及对胃肠道的刺激反应。结果见表1所示。

表1.三代补血成分升级表

Claims

1.一种氯化血红素的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述的含0.5～2％(wt)NaCl的冰醋酸是含1％(wt)NaCl的冰醋酸；抗凝新鲜猪血和含0.5～2％(wt)NaCl的冰醋酸的体积比是1∶5；消化条件是115℃，4小时。

3.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中所述的蛋白酶是537蛋白酶。

4.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中所述的消化后所得流体物和醋酸溶液的体积比是1∶6；醋酸溶液的浓度是10～30(wt)％；蛋白酶的添加量是占反应溶液的0.5(wt)％，酶解60℃，48小时；酶解在搅拌状态下进行，转速60转/分。

5.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)中分离出固体进行烘干。

6.一种如权利要求1～5任一项所述的制备方法制备而得的氯化血红素。

7.一种补血药物组合物，包括活性成分和载体，其特征在于，所述的活性成分至少包括如上所述的氯化血红素。

8.如权利要求7所述的补血药物组合物，其特征在于，所述的载体是药学上可用的填充剂、稀释剂、润滑剂和/或矫味剂。

9.如权利要求7所述的补血药物组合物，其特征在于，所述的补血药物组合物是片剂，其包括以下质量百分比的各组分：3～8％氯化血红素，2～5％葡萄糖酸锌，2～5％维生素C，30～70％乳糖，0.5～3.8％微晶纤维素，20～50％蔗糖，0.1～1％硬脂酸镁和0.1～0.5％包衣粉。

10.如权利要求7所述的补血药物组合物，其特征在于，所述的补血药物组合物的组成如下：4.5％氯化血红素，3.75％葡萄糖酸锌，3.75％维生素C，50％乳糖，2％微晶纤维素，35.3％蔗糖，0.5％硬脂酸镁和0.2％包衣粉，百分比是质量百分比。