CN102020545B - Ptp1b抑制剂及其合成与应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种PTP1B抑制剂的化学全合成方法以及在治疗2型糖尿病药物中的应用，所述PTP1B抑制剂的化学结构式如下：

Description

PTP1B抑制剂及其合成与应用

技术领域

本发明涉及生物医药，具体地说是一种溴代化合物“(2′，3′-二溴-4′，5′-二羟基-苯基)-(2，3，6-三溴-4，5-二羟基-苯基)-甲酮”及其化学全合成方法、药理活性及药学用途。该化合物及其衍生物作为胰岛素增敏剂，可用于治疗胰岛素抵抗类2型糖尿病。 

背景技术

糖尿病(Diabetes Mellitus，DM)是一种慢性内分泌代谢疾病，目前用于治疗2型糖尿病(Type 2Diabetes Mellitus，T2DM的药物主要有双胍类、磺脲类、α-糖苷酶抑制剂和噻唑烷二酮类等，由于它们多是针对病症而不是针对病因分子靶点药物的设计，因而存在各种弊端。因此，市场急需安全有效、价格合理且能长期安全服用的降糖药物。 

胰岛素抵抗是T2DM发病的关键因素，有证据证实抑制蛋白酪氨酸磷酯酶1B(Protein tyrosine phosphatase 1B，PTP1B)成为胰岛素抵抗2型糖尿病治疗的新方法。PTP1B在胰岛素信号转导通路中起着重要的负调控作用。研究证实，在胰岛素敏感细胞中应用PTP1B抑制剂可使胰岛素受体及其底物磷酸化水平升高，促进葡萄糖转运子易位及增加葡萄糖的摄取等，PTP1B抑制剂起到了胰岛素类似物和胰岛素增敏剂的作用。敲除PTP1B基因或用反义核苷酸(ASO)抑制体内PTP1B蛋白及mRNA的表达，不仅可以显著提高受试小鼠对胰岛素的敏感性，而且能够明显降低肥胖症的患者几率。Gold-stein研究表明，胰岛素抵抗患者的胰岛素靶组织中PTP1B和LARPTP表达增加，这两种PTP的表达增加能阻断胰岛素受体酪氨酸的激活和胰岛素的信号转导。P387L是PTP1B的一种错义突变，Echwald等证实2型糖尿病患者中，该基因突变频率为1.4％，而正常对照组仅为0.5％，故认为这一变异与2型糖尿病有关。采用PTP1B反义寡核苷酸处理糖尿病型小鼠(ob/ob小鼠)，抑制其PTP1B表达，发现在肝、脂肪和骨骼肌肉内PTP1B的表达下调时，ob/ob小鼠血糖恢复正常，与糖代谢有关的各项指标都趋于正常，胰岛素钳夹实验表明，糖尿病模型小鼠的肝和外周组织对胰岛素敏感性增强。这些结果证实PTP1B在胰岛素信号转导中的负调控作用，它的活性增高，可能是发生胰岛素抵抗和胰岛素受体信号受损的一个致病因素。因此，寻找小分子PTP1B抑制剂已成为治疗T2DM的新靶点。 

国际上对PTP1B抑制剂的研究不多，主要有以下几类：(1)、肽类：含磷酸化酪氨酸残基(pTyr)的肽类底物与PTP1B有较高的亲和性，但其化学和生物稳定性差；(2)、萘醌类Naphthnoquinone：通过修饰PTPase的活性位点来抑制酶的活性；(3)、噻唑烷二酮类Azolidinediones：通过增加靶器官的胰岛素敏感性来改善血糖的控制，主要包括ciglitazone、troglitazone和rosiglitazone，但由于严重的肝脏毒性，ciglitazone已从市场撤出；(4)、Benzo[b]naphthol[2，3-d]furans和thiophenes类：以benzbromarone(PTP1B抑制剂，IC₅₀＝26μM)为先导化合物进行设计合成的系列Benzo[b]naphthol[2，3-d]furans和thiophenes类化合物，在小鼠体内表现出良好的降血糖活性，但要最终成为治疗糖尿病药物还需要克服很多障碍，如电负性高、细胞膜通透性差以及选择专一性差等，以上因素都使这些抑制剂的成药性降低。我们从海藻中发现了一系列具有PTP1B抑制活性的溴代海洋天然产物，并据此设计合成了具有PTP1B抑制活性的新化合物-(2′，3′-二溴-4′，5′-二羟基-苯基)-(2，3，6-三溴-4，5-二羟基-苯基)-甲酮。

发明内容

本发明目的在于提供一种新型PTP1B抑制剂-“(2′，3′-二溴-4′，5′-二羟基-苯基)-(2，3，6-三溴-4，5-二羟基-苯基)-甲酮”，该化合物及其衍生物通过抑制蛋白酪氨酸磷脂酶1B的活性，增强胰岛素受体敏感性，可用于治疗胰岛素抵抗类2型糖尿病。 

为实现上述目的，本发明采用的技术方案如下： 

1、“(2′，3′-二溴-4′，5′-二羟基-苯基)-(2，3，6-三溴-4，5-二羟基-苯基)-甲酮”的化学全合成与结构鉴定 

(1)(2′，3′-dibromo-4′，5′-dihydroxy-phenyl)-(2，3，6-tribromo-4，5-dihydroxy-phenyl)-methanone 7的化学全合成反应过程 

Scheme 1(a)多聚磷酸，70～90℃，60～120min；(b)溴素(溴素∶化合物3摩尔比＝2∶1)，乙酸，室温；(c)溴素(溴素∶化合物4摩尔比＝4∶1)，三氯化铝，乙酸，70～90℃；(d)NBS(NBS∶化合物5摩尔比＝1∶1)，浓硫酸-乙酸(体积比＝1∶1)，-10～10℃；(e)三溴化硼，二氯甲烷，室温。 

(2)Bis-(3，4-dimethoxy-phenyl)-methanone 3的化学合成与结构鉴定 

按照摩尔比1∶1比例将藜芦酸(化合物1)、藜芦醚(化合物2)与多聚磷酸加入到三口反应瓶中，藜芦酸与多聚磷酸的质量比为1∶4～1∶5，70～90 ℃搅拌反应60～120min；冷却至60℃并在30min内向反应物中滴加反应体系5倍体积量的冰水混合物，此时反应物中析出大量不溶于水的粉红色固体；过滤除水后，将得到的固体溶于二氯甲烷中，固体与二氯甲烷的质量/体积为1∶5～1∶10，依次用等体积的质量浓度3％氢氧化钠溶液和蒸馏水分别洗涤3～5次；无水硫酸钠干燥二氯甲烷相后，减压浓缩得粉色固体；石油醚洗涤固体物三次后减压蒸干得淡黄色固体，经过波谱分析，确证化合物为bis-(3，4-dimethoxy-phenyl)-methanone； 

该化合物理化性质如下：白色粉末，熔点145.3-146.1℃，核磁共振氢谱：¹H NMR(500MHz，CDCl₃)：δ3.92(s，6H)，3.94(s，6H)，6.88(d，J＝8.4Hz，2H)，7.36(dd，J＝8.4，1.8Hz，2H)，7.41(d，J＝1.8Hz，2H)；核磁共振碳谱：¹³C NMR(125MHz，CDCl₃)：δ56.03(q)，109.79(d)，112.39(d)，124.69(d)，130.82(s)，148.9(s)，152.61(s)，194.35(s)。 

(3)Bis-(2-bromo-4，5-dimethoxy-phenyl)-methanone 4的化学合成与结构鉴定 

将反应(2)中制备的化合物3bis-(3，4-dimethoxy-phenyl)-methanone和乙酸(质量比例为1∶10～1∶15)加入三口反应瓶中，室温下快速搅拌使固体溶解；将溴素加至乙酸(体积比1∶2)中稀释，化合物bis-(3，4-dimethoxy-phenyl)-methanone∶溴素摩尔比＝1∶2，室温下快速滴加至反应瓶中，20min内滴加完毕；溴素滴加完毕后，室温下搅拌继续反应1h后有浅黄色沉淀析出，TLC检测反应终点，原料点消失后停止反应；反应液倒入盛有饱和食盐水的分液漏斗，加入二氯甲烷萃取3～5次，合并有机相；无水硫酸钠干燥，减压浓缩后得褐色固体；丙酮反复洗涤固体，减压蒸干得微黄色粉末，经过波谱分析，确证化合物为bis-(2-bromo-4，5-dimethoxy-phenyl)-methanone； 

该化合物理化性质如下：淡黄色粉末，熔点172.5-173.2℃，核磁共振氢谱：¹H NMR(500MHz，CDCl₃)：δ3.87(s，6H)，3.94(s，6H)，7.05(s，4H)；核磁共振碳谱：¹³C NMR(125MHz，CDCl₃)：δ56.26(q)，56.33(q)，113.22(s)，114.0(d)，116.36(d)，131.76(s)，148.40(s)，152.01(s)，194.26(s)。 

(4)Bis-(2，3-dibromo-4，5-dimethoxy-phenyl)-methanone 5的化学合成与结构鉴定 

将反应(3)中制备的化合物4bis-(2-bromo-4，5-dimethoxy-phenyl)-methanone和乙酸(质量比例为1∶15～1∶20)加入三口反应瓶中，升温至40～50℃加入适量三氯化铝(三氯化铝∶bis-(2-bromo-4，5-dimethoxy-phenyl)-methanone摩尔比为2∶1～1∶1)；搅拌反应30min后冷却至室温；将溴素加至乙酸(体积比1∶5)中稀释，化合物bis-(2-bromo-4，5-dimethoxy-phenyl)-methanone∶溴素摩尔比＝1∶4，室温下滴加至三口反应瓶中，1h内滴加完毕，然后缓慢升温至70～90℃回流，TLC检测反应终点，原料点消失后停止反应；反应液倒入盛有体积比浓度3％ 盐酸溶液的分液漏斗，加入二氯甲烷萃取3～5次，合并有机相，减压蒸干后得褐色固体；采用硅胶柱色谱(石油醚∶乙酸乙酯体积比＝8∶1为洗脱剂)纯化，得淡黄色粉末，经过波谱分析，确证化合物为bis-(2，3-dibromo-4，5-dimethoxy-phenyl)-methanone。 

该化合物理化性质如下：淡黄色粉末，熔点120.7～121.4℃，核磁共振氢谱：¹H NMR(500MHz，CDCl₃)：δ3.87(s，6H)，3.91(s，6H)，7.03(s，2H)；核磁共振碳谱：¹³C NMR(125MHz，CDCl₃)：δ56.55(q)，60.81(q)，114.01(d)，115.24(s)，123.56(s)，136.34(s)，150.33(s)，152.48(s)，193.55(s)。(5)(2′，3′-dibromo-4′，5′-dimethoxy-phenyl)-(2，3，6-tribromo-4，5-dimethoxy-phenyl)-methanone 6的化学合成与结构鉴定 

将反应(4)中制备的化合物5bis-(2，3-dibromo-4，5-dimethoxy-phenyl)-methanone和乙酸(质量比例为1∶5～1∶10)加入反应瓶中，冰浴中快速搅拌下加入浓硫酸(浓硫酸与乙酸的体积比例为2∶1～4∶1)；搅拌20min后加入NBS(bis-(2，3-dibromo-4，5-dimethoxy-phenyl)-methanone∶NBS摩尔比＝1∶1～1∶2)；冰浴条件下搅拌反应；TLC检测反应终点，原料点消失后将反应液倾入冰水中终止反应；反应液用二氯甲烷萃取3～5次，合并有机相，无水硫酸钠干燥，减压蒸干得褐色固体；用硅胶柱色谱纯化，石油醚∶乙酸乙酯体积比＝50∶1为洗脱剂，得白色粉末，经波谱分析，确证化合物为(2′，3′-dibromo-4′，5′-dimethoxy-phenyl)-(2，3，6-tribromo-4，5-dimethoxy-phenyl)-methanone。 

该化合物理化性质如下：白色粉末，熔点113.3-114.7℃，核磁共振氢谱：¹H NMR(500MHz，CDCl₃)：δ3.84(s，-OCH₃)，3.90(s，-OCH₃)，3.92(s，-OCH₃)，3.94(s，-OCH₃)，7.36(s，1H)；核磁共振碳谱：¹³C NMR(125MHz，CDCl₃)：δ56.48(q)，60.77(q)，61.11(q)，61.16(q)，115.32(d)，115.82(d)，117.51(s)，117.63(d)，122.27(s)，124.79(s)，132.22(s)，139.09(s)，151.75(s)，152.11(s)，152.92(s)，190.17(s)。 

(6)(2′，3′-dibromo-4′，5′-dihydroxy-phenyl)-(2，3，6-tribromo-4，5-dihydroxy-phenyl)-methanone 7的化学合成与结构鉴定 

将反应(5)中制备的化合物6(2′，3′-dibromo-4′，5′-dimethoxy-phenyl)-(2，3，6-tribromo-4，5-dimethoxy-phenyl)-methanone和二氯甲烷(质量/体积1∶25～1∶30)加入反应瓶中，冰浴下缓慢滴加1M的三溴化硼溶液((2′，3′-dibromo-4′，5′-dimethoxy-phenyl)-(2，3，6-tribromo-4，5-dimethoxy-phenyl)-methanone与三溴化硼摩尔比为1∶8～1∶10)，1h内滴加完毕；撤去冰浴 后室温下搅拌反应，TLC检测反应终点，原料点消失后，反应液倾入到盛有冰水混合物的烧杯中终止反应；混合液用乙酸乙酯萃取两次，合并有机相，无水硫酸钠干燥，减压蒸干得褐色固体；采用氯仿∶甲醇＝15∶1做洗脱剂，硅胶柱色谱精制得黄色粉末，经过波谱分析，确证化合物为7(2′，3′-dibromo-4′，5′-dihydroxy-phenyl)-(2，3，6-tribromo-4，5-dihydroxy-phenyl)-methanone。 

该化合物理化性质如下：白色粉末，熔点118-120℃，核磁共振氢谱：1H NMR(500MHz，CDCl₃)：δ7.05(s，1H)；核磁共振碳谱：¹³C NMR δ108.41(s)，111.60(d)，114.44(s)，115.57(s)，117.34(s)，118.92(s)，126.85(s)，134.13(s)，144.44(s)，144.77(s)，146.62(s)，149.70(s)，190.20(s)。 

2、蛋白酪氨酸磷脂酶1B抑制活性测定 

采用分子生物学方法，构建基因重组的hGST-PTP1B-BL21 E.Coli人类PTP1B工程菌，以GST亲和层析柱纯化hGST-PTP1B蛋白质，利用含有磷酸的多肽para-Nitrophenyl Phosphate(pNPP)被PTP1B酶解掉一个磷酸后的产物pNP在波长405nm处有吸收峰的原理，以PTP1B作用后生成pNP的量表示PTP1B酶活性变化以及化合物对酶活性的抑制情况，计算化合物PTP1B酶活力抑制率。 

本发明具有如下优点： 

所述目标化合物是具有显著PTP1B酶抑制活性的全新结构化合物，是胰岛素抵抗类2型糖尿病的治疗新药；本发明对其进行了化学全合成，选择便宜易得的起始原料，降低反应成本，实现了目标化合物高收率、低成本的合成，且工艺操作简单，具有良好的产业化生产前景。 

具体实施方式

实施例1“(2′，3′-二溴-4′，5′-二羟基-苯基)-(2，3，6-三溴-4，5-二羟基-苯基)-甲酮”的化学全合成与结构鉴定 

(1)Bis-(3，4-dimethoxy-phenyl)-methanone 3的化学合成与结构鉴定 

按照摩尔比1∶1比例将22.08g(120mmol)藜芦酸(化合物1)、16.92g(120mmol)藜芦醚(化合物2)与100g多聚磷酸加入到250ml三口反应瓶中，80℃搅拌反应1h；冷却至60℃并在30min内向反应物中滴加250ml冰水，此时反应物中析出大量不溶于水的粉红色固体；过滤除水后，将得到的固体溶于100ml二氯甲烷中，依次用等体积的3％氢氧化钠溶液和蒸馏水洗涤三次；无水硫酸钠干燥二氯甲烷相后，减压浓缩得粉色固体；石油醚洗涤固体物三次后减压蒸干得淡黄色固体3(30.68g，产率85％)，经过波谱分析，确证化合物为bis-(3，4-dimethoxy-phenyl)-methanone。 

(2)Bis-(2-bromo-4，5-dimethoxy-phenyl)-methanone 4的化学合成与结构鉴定 

将反应(1)中制备的化合物3(15.1g，50mmol)和120ml乙酸加入250ml 三口反应瓶中，室温下快速搅拌使固体溶解；将5.3ml溴素加至10ml乙酸中稀释，室温下快速滴加至三口反应瓶中，20min内滴加完毕；溴素滴加完毕后，室温下搅拌继续反应1h后有浅黄色沉淀析出，TLC检测反应终点，原料点消失后停止反应。反应液倒入盛有120ml饱和食盐水的分液漏斗，加入二氯甲烷(每次100ml)萃取三次，合并有机相；无水硫酸钠干燥，减压浓缩后得褐色固体；丙酮洗涤固体4至6次，减压蒸干得微黄色粉末4(18.87g，产率82％)，经过波谱分析，确证化合物为bis-(2-bromo-4，5-dimethoxy-phenyl)-methanone。 

(3)Bis-(2，3-dibromo-4，5-dimethoxy-phenyl)-methanone 5的化学合成与结构鉴定 

将反应(2)中制备的化合物4(9.2g，20mmol)和200ml乙酸加入500ml三口反应瓶中，升温至45℃加入2.0g三氯化铝；搅拌反应30min后冷却至室温；将4.0ml溴素加至20ml乙酸中稀释，室温下滴加至三口反应瓶中，1h内滴加完毕，然后缓慢升温至80℃回流，TLC检测反应终点，原料点消失后停止反应。反应液倒入盛有400ml体积比浓度为3％盐酸溶液的分液漏斗，加入二氯甲烷(每次200ml)萃取三次，合并有机相，减压蒸干后得褐色固体；采用硅胶柱色谱(石油醚∶乙酸乙酯体积比＝8∶1为洗脱剂)纯化，得白色粉末5(6.34g，产率为51％)，经过波谱分析，确证化合物为bis-(2，3-dibromo-4，5-dimethoxy-phenyl)-methanone。 

(4)(2′，3′-dibromo-4′，5′-dimethoxy-phenyl)-(2，3，6-tribromo-4，5-dimethoxy-phenyl)-methanone 6的化学合成与结构鉴定 

将反应(3)中制备的化合物5(6.2g，10mmol)和50ml乙酸加入500ml三口反应瓶中，冰浴、快速搅拌下加入150ml浓硫酸；搅拌20min后加入NBS(1.8g，10mmol)；冰浴下搅拌反应，TLC检测反应终点，原料点消失后停止反应。反应液倒入盛有200ml冰水混合物的烧杯中，静止1h后，用二氯甲烷(每次300ml)萃取三次，合并有机相，减压蒸干后得褐色固体；采用硅胶柱色谱(石油醚∶乙酸乙酯体积比＝50∶1为洗脱剂)纯化，得白色粉末6(3.01g，产率为43％)，经波谱分析，确证化合物为(2′，3′-dibromo-4′，5′-dimethoxy-phenyl)-(2，3，6-tribromo-4，5-dimethoxy-phenyl)-methanone。(5)(2′，3′-dibromo-4′，5′-dihydroxy-phenyl)-(2，3，6-tribromo-4，5-dihydroxy-phenyl)-methanone 7的化学合成与结构鉴定 

将反应(4)中制备的化合物6(6.9g，10.0mmol)和150ml二氯甲烷加入500ml三口反应瓶中，冰浴下缓慢滴加1M的三溴化硼溶液100ml(100mmol)，1h内滴加完毕；撤去冰浴后室温下搅拌反应，TLC检测反应终点，原料点消失后，反应液倾入到盛有300ml冰水混合物的烧杯中终止 反应。混合液用乙酸乙酯萃取两次，每次用乙酸乙酯200ml，合并有机相，无水硫酸钠干燥，减压蒸干得褐色固体；采用石油醚∶乙酸乙酯＝3∶2做洗脱剂，硅胶柱色谱精制得黄色粉末8(5.89g，92％)，经过波谱分析，确证化合物为7(2′，3′-dibromo-4′，5′-dihydroxy-phenyl)-(2，3，6-tribromo-4，5-dihydroxy-phenyl)-methane。 

反应总产率＝85％×82％×51％×43％×92％＝13.4％ 

实施例2 蛋白酪氨酸磷脂酶1B抑制活性测定 

将待测化合物2、3、4、5、6和化合物7分别用DMSO配制成不同浓度的供试品溶液，取2μL供试品溶液分别加入到标准的测活体系(50mMTris-HCl，PH 6.5，2mM pNPP，2％DMSO，30nM hGST-PTP1B)，阴性对照：DMSO，阳性对照：正钒酸钠，反应温度为30℃，动态测定波长为405nm处的光吸收，时间3min，按如下公式计算化合物PTP1B酶活力抑制率。抑制率＝(实验组A值-阴性对照组A值)/(对照组A值-阴性对照组A)×100％，结果见表1。 

        表1 蛋白质酪氨酸磷脂酶1B抑制率(％) 

      Table 1 Inhibitory Ratio(％) of PTP1B 

化合物浓度为20μg/mL时，如果抑制率大于50％，则继续进行5μg/mL浓度水平测试。 

试验结果表明：化合物7对蛋白质酪氨酸磷酸酯酶1B表现出显著的抑制作用，具有良好的抗2型糖尿病临床应用前景。 

实施例3 化合物7体内降血糖活性测试 

1、动物分组及处理 

采用高脂饮食STZ-DM模型(链脲佐菌素诱导的2型糖尿病大鼠模型)对化合物进行了体内降血糖活性试验，测试血糖生理指标，评价化合物的体内降糖活性。 

2型糖尿病模型制备 

Wistar大白鼠70只，环境适应性饲养3d后，随机抽取10只(雌雄各半)作为正常对照组，其余大鼠禁食24h后，按照30mg/kg一次性腹腔注射链脲佐菌素(溶解于0.1mol/L枸橼酸钠溶液，pH＝4.5)，诱导糖尿病模型。3d后禁食12h，尾静脉采血，测定空腹血糖，以血糖大于16.7mmol/L 确定为糖尿病模型造模成功。 

2、治疗 

采用随机分组法，将成模大鼠依次分为模型组、治疗组、阳性对照组，每组10只(雌雄各半)。正常组和模型组灌服0.5％CMC-Na溶液，其余各组按照20mg/kg每日灌服相应化合物的CMC-Na混悬液，阳性对照组ig阳性药物文迪雅(有效成分罗格列酮)；各组均采用高脂饮食，自由饮水。 

3、指标检测 

每7d将小鼠禁食12h后，称体重，尾静脉采血测定血糖。 

              表2 化合物7对大鼠血糖的影响 

       Fig 2 Hypoglycemic Effect of Compound 7 

[实验结论]：采用STZ-DM模型对化合物体内降血糖活性进行研究，发现化合物7在大鼠体内具有显著的降血糖效果。 

Claims (4)

1.一种PTP1B抑制剂，其特征在于：为(2′，3′-二溴-4′，5′-二羟基-苯基)-(2，3，6-三溴-4，5-二羟基-苯基)-甲酮，结构式如下：

其中苯环的2，2′，3，3′和6位碳所连接的基团为溴原子；4，4′和5，5′位碳与羟基相接；化学名称中文为：(2′，3′-二溴-4′，5′-二羟基-苯基)-(2，3，6-三溴-4，5-二羟基-苯基)-甲酮；英文为：(2′，3′-dibromo-4′，5′-dihydroxy-phenyl)-(2，3，6-tribromo-4，5-dihydroxy-phenyl)-methanone。

2.一种权利要求1所述抑制剂合成方法，其特征在于：所述的化合物合成路线为：

Scheme 1(a)多聚磷酸，70～90℃，60～120min；(b)溴素，溴素∶化合物3摩尔比＝2∶1，乙酸，室温；(c)溴素，溴素∶化合物4摩尔比＝4∶1，三氯化铝，乙酸，70～90℃；(d)NBS，NBS∶化合物5摩尔比＝1∶1；浓硫酸-乙酸 体积比＝1∶1，-10～10℃；(e)三溴化硼，二氯甲烷，室温。

3.按照权利要求2所述合成方法，其特征在于：所述抑制剂具体制备过程如下，

(1)按照摩尔比1∶1比例将藜芦酸、藜芦醚与多聚磷酸加入到容器瓶中，藜芦酸与多聚磷酸的质量比为1∶4～1∶5，70～90℃搅拌反应60～120min；冷却至60℃并在25～35min内向反应物中滴加反应体系4～6倍体积量的冰水混合物，此时反应物中析出大量不溶于水的粉红色固体；过滤除水后，将得到的固体溶于二氯甲烷中，固体与二氯甲烷的质量/体积为1∶5～1∶10，依次用等体积的质量浓度3％氢氧化钠溶液和蒸馏水分别洗涤3～5次；无水硫酸钠干燥二氯甲烷相后，减压浓缩得粉色固体；石油醚洗涤固体物三次 后减压蒸干得淡黄色固体，经过波谱分析，确证化合物为bis-(3，4-dimethoxy-phenyl)-methanone；

(2)将反应(1)中制备的化合物bis-(3，4-dimethoxyphenyl)-methanone和乙酸按质量比例为1∶10～1∶1加入反应瓶中，室温下快速搅拌使固体溶解；将溴素加至乙酸中稀释，溴素与乙酸体积比1∶2，化合物bis-(3，4-dimethoxy-phenyl)-methanone∶溴素摩尔比＝1∶2，室温下将溴素的乙酸液快速滴加至反应瓶中，20min内滴加完毕；溴素滴加完毕后，室温下搅拌继续反应1h后有浅黄色沉淀析出，TLC检测反应终点，原料点消失后停止反应；反应液倒入盛有饱和食盐水的分液漏斗，加入二氯甲烷萃取3～5次，合并有机相；无水硫酸钠干燥，减压浓缩后得褐色固体；丙酮反复洗涤固体，减压蒸干得微黄色粉末，经过波谱分析，确证化合物为bis-(2-bromo-4，5-dimethoxy-phenyl)-methanone；

(3)将反应(2)中制备的化合物bis-(2-bromo-4，5-dimethoxy-phenyl)-methanone和乙酸按质量比例为1∶15～1∶20加入反应瓶中，升温至40～50℃加入三氯化铝，三氯化铝∶bis-(2-bromo-4，5-dimethoxy-phenyl)-methanone摩尔比为2∶1～1∶1；搅拌反应30min后冷却至室温；将溴素加至乙酸中稀释，溴素与乙酸体积比1∶5，化合物bis-(2-bromo-4，5-dimethoxy-phenyl)-methanone∶溴素摩尔比＝1∶4，室温下将溴素的乙酸液滴加至反应瓶中，1h内滴加完毕，然后缓慢升温至70～90℃回流，TLC检测反应终点，原料点消失后停止反应；反应液倒入盛有体积比浓度3％盐酸溶液的分液漏斗，加入二氯甲烷萃取3～5次，合并有机相，减压蒸干后得褐色固体；采用硅胶柱色谱纯化，石油醚∶乙酸乙酯体积比＝8∶1为洗脱剂，得淡黄色粉末，经过波谱分析，确证化合物为bis-(2，3-dibromo-4，5-dimethoxy-phenyl)-methanone；

(4)将反应(3)中制备的化合物bis-(2，3-dibromo-4，5-dimethoxy-phenyl)-methanone和乙酸按质量比例为1∶5～1∶10加入反应瓶中，冰浴中快速搅拌下加入浓硫酸，浓硫酸与乙酸的体积比例为2∶1～4∶1；搅拌20min后加入NBS，bis-(2，3-dibromo-4，5-dimethoxy-phenyl)-methanone∶NBS摩尔比＝1∶1～1∶2；冰浴条件下搅拌反应；TLC检测反应终点，原料点消失后将反应液倾入冰水中终止反应；反应液用二氯甲烷萃取3～5次，合并有机相，无水硫酸钠干燥，减压蒸干后得褐色固体；采用硅胶柱色谱纯化，石油醚∶乙酸乙酯体积比＝50∶1为洗脱剂，得白色粉末，经波谱分析确证化合物为(2′，3′-dibromo-4′，5′-dimethoxy-phenyl)-(2，3，6-tribromo-4，5-dimethoxy-phenyl)-methanone；

(5)将反应(4)中制备的化合物(2′，3′-dibromo-4′，5′-dimethoxy-phenyl)-(2，3，6-tribromo-4，5-dimethoxy-phenyl)-methanone和二氯甲烷按质量g/体积ml 1∶25～1∶30加入反应瓶中，冰浴下缓慢滴加1M的三溴化硼溶液，(2′，3′-dibromo-4′，5′-dimethoxy-phenyl)-(2，3，6-tribromo-4，5-dimethoxy-phenyl)- methanone与三溴化硼摩尔比为1∶8～1∶10，1h内滴加完毕；撤去冰浴后室温下搅拌反应，TLC检测反应终点，原料点消失后，反应液倾入到盛有冰水混合物的烧杯中终止反应；混合液用乙酸乙酯萃取两次，合并有机相，无水硫酸钠干燥，减压蒸干得褐色固体；采用氯仿∶甲醇＝15∶1做洗脱剂，硅胶柱色谱精制得黄色粉末，经过波谱分析， 确证化合物为(2′，3′-dibromo-4′，5′-dihydroxy-phenyl)-(2，3，6-tribromo-4，5-dihydroxy-phenyl)-methanone。

4.一种权利要求1所述抑制剂在制备治疗2型糖尿病药物中的应用，权利要求1所述化合物是具有PTP1B酶抑制活性的化合物，能够通过负调控胰岛素信号转导通路，增强胰岛素受体敏感性，使胰岛素生理功能正常发挥，进而调控血糖，达到对胰岛素抵抗类2型糖尿病的治疗功效。