CN102014887A - 抗叶酸药在癌症治疗中的联合应用 - Google Patents
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Abstract
在治疗某些癌症中有用的组合物和方法。该方法包括向接受抗叶酸抗癌药的患者施用甲氧胺,所述甲氧胺以足以增强或增加抗叶酸抗癌药效果的量施用。本申请的一部分是基于这样的认识作出的,即某些靶向DNA中脱碱基损伤或AP位点的分子改善、增加或增强了某些抗癌药的化学治疗效力。
Description
相关申请
本申请要求Theuer等人于2006年12月29日提交的标题为“抗代谢药在癌症治疗中的联合应用”的美国临时专利申请系列第60/877,836号,Theuer等人于2007年1月3日提交的标题为“抗代谢药在癌症治疗中的联合应用”的美国临时专利申请系列第60/883,266号,和Theuer等人于2007年1月8日提交的标题为“抗代谢药在癌症治疗中的联合应用”的美国临时专利申请系列第60/883,959号的优先权,在法律容许的最大范围内,上述内容全部通过引用引入本文,包括任何附图。
发明的领域
本发明一般涉及具有包括用于研究、诊断和治疗在内的各种功用的化合物。更特别地,本文描述和提供了包含甲氧胺和抗代谢抗癌药的组合物,和通过施用这些组合物治疗某些癌症的方法。
背景技术
癌症是世界性的难题。因此,对寻找治疗癌症的新组合物和方法有着极大的兴趣。癌症治疗有三种普遍的分类:化学治疗、放射治疗和手术。治疗时常联合在一起,因为与利用单一疗法的治疗策略相比,联合治疗往往增加了根除癌症的机率。通常,手术切除大肿瘤块之后,接着进行化学治疗和/或放射治疗。
化学治疗药物可以以多种方式起作用。例如,化疗药物可以通过干扰细胞周期进程或引起DNA链断裂而起作用。如果癌细胞不能克服由治疗化合物引起的细胞周期阻断或者细胞损伤,那么癌细胞通常将通过细胞凋亡机制而死亡。无论进行或者不进行手术或放射治疗,使用单一化学治疗药物治疗癌症都存在一些缺点。通常,癌细胞对化学治疗药物产生耐药性。这些耐药性致使需要更高的药物剂量和/或致使癌症重新扩散。化学治疗药物对患者可能有毒。因此,存在患者可以接受的可实施的上限量。然而,如果可以开发另一种药物来抑制导致耐药性的途径,那么,癌细胞对化学治疗药物的作用可变得敏感。
用于克服癌症化学治疗耐药性的药物的设计应当达到下述目标:1)找到联合,这种联合可以逆转耐药性,而不仅仅只是改善化学治疗药物对肿瘤的活性,和2)找到不会增加第一种化学治疗药物的毒性作用的另一种药物。在这些条件下,需要将已知具有抗癌性质的药物与其他可能具有抗癌性质的药物、或者可能以其他方式增加第一种药物效力的药物一起进行大量的实验性测验。不幸地,多种抗癌药物联合的这些方法迄今被证明非常不成功。
因此,缺乏能够逆转癌症治疗化疗耐药性的疗法。
发明概述
本文描述和请求保护的发明有多种特性和实施方式,包括但不限于在本发明概述中列举或描述或提及的那些。本文描述和请求保护的发明不限于本发明概述中证明的特性或实施方式或者受这些特性或实施方式的限制,本发明概述仅用于举例说明的目的而并非限制。
从整个申请和权利要求来看,本文描述和请求保护的发明的这些和其他方面及实施方式将是明显的,它们都应当被看作是该书面说明书的一部分。
本文公开了用于治疗某些癌症的组合物和方法。本申请的一部分是基于迄今为止未知的认识作出的,即某些靶向DNA脱碱基损伤或AP(无嘌呤/无嘧啶)位点的分子改善、增加或增强了抗代谢抗癌药的效能。在其他实施方式中,碱基切除途径的抑制剂如甲氧胺与抗代谢抗癌药联合使用。抗代谢抗癌药是与正常生化反应所需物质(代谢产物)结构相似,然而其结构的不同又足以干扰正常细胞功能,包括细胞分裂的化学治疗药物。抗叶酸剂是优选的一类抗代谢药物。抗叶酸抗癌药是与叶酸结构相似的化学治疗药物,然而其结构的不同又足以阻断叶酸活性和中断细胞复制必需的叶酸-依赖性机制。这些抗叶酸抗癌药包括:培美曲塞、卡培他滨、依达曲沙、氨甲喋呤、洛美曲索、诺拉曲塞、ralitrexed、PT523和三甲曲沙。任何抗叶酸抗癌药与BER(碱基切除修复)抑制剂的联合使用都是预期的。一方面,该方法包括提供i)被诊断患有癌症的患者,ii)包含抗叶酸抗癌药的第一制剂和iii)包含甲氧胺的第二制剂;向所述患者施用所述第一制剂;和向所述患者施用所述第二制剂,其中甲氧胺以足够增强或增加抗叶酸抗癌药效果的量施用。第二制剂可口服施用。另一方面,该方法包括:提供i)被诊断患有癌症的患者,其中所述癌症至少部分对培美曲塞单独治疗耐药,ii)包含培美曲塞的第一制剂;和iii)包含甲氧胺的第二制剂;向所述患者施用第一制剂;和向所述患者施用所述第二制剂,其中甲氧胺以足够增强所述培美曲塞活性和克服所述耐药性的量施用。在这些方法中,甲氧胺和抗叶酸抗癌药可作为一种制剂施用。而且,甲氧胺和抗叶酸抗癌药可以任何的顺序连续施用。而且,甲氧胺可口服给药,抗叶酸抗癌药可口服或静脉给药。而且,所述甲氧胺的量可以是足够使癌细胞敏感而不引起正常细胞发生不适当的致敏作用的量。而且,施用甲氧胺和抗叶酸抗癌药可获得协同作用。而且,抗叶酸抗癌药可口服或静脉施用,且所述甲氧胺可以足够增强所述抗叶酸抗癌药活性的量每天不超过两次地口服施用。而且,可选择患有对单独用抗叶酸抗癌药治疗至少部分耐药的癌症的患者,且其中包含甲氧胺的所述第二制剂以有效增强所述抗叶酸抗癌药活性并克服所述耐药性的量施用。而且,所述甲氧胺与所述抗叶酸抗癌药的比例可以是1∶5至1∶500,更优选1∶15至1∶40,甚至更加优选约1∶20至约1∶30。 而且,所述癌症可选自:癌(carcinomas)、黑素瘤、肉瘤、淋巴瘤、白血病、星形细胞瘤、神经胶质瘤、恶性黑色素瘤、慢性淋巴细胞性白血病、肺癌、结肠直肠癌、卵巢癌、胰腺癌、肾癌、子宫内膜癌、胃癌、肝癌、头颈部癌和乳腺癌。在优选的实施方式中,抗叶酸抗癌药是培美曲塞。
在另一实施方式中,公开了一种改良的方法,在包括向患者施用抗叶酸抗癌药的治疗被诊断患有癌症的患者的癌症的方法中,改良之处包括向所述患者以足够增强所述抗叶酸抗癌药毒性的量施用甲氧胺。还公开了抗癌制剂,该制剂包含含培美曲塞的剂型和含协同量甲氧胺的剂型,和根据已公开的治疗方法使用该制剂的方法。在另一实施方式中,公开了甲氧胺的改良用途,用于抗叶酸抗癌药治疗患者的癌症的用途,改良之处包括以足够在所述患者中增强所述抗叶酸抗癌药毒性的量使用甲氧胺。
一方面,本发明是基于先前未知的认识作出的,即靶向AP位点的某些分子如甲氧胺口服是完全生物可利用的,并且当每天口服给药一次或两次时就能维持最低有效浓度。抗癌药通常以静脉推注(intravenous bolus)施用,因为它们很少在胃肠道良好地吸收。静脉给药有许多缺点。首先,化疗药静脉注射需要在诊所或医院进行。第二,静脉治疗通常以推注给药,这导致非常大但又短暂的药物接触。一些抗癌药在持续接触后最有效,这可通过重复口服剂量获得。对那些抑制化疗药物耐药机制的药物来说特别正确的是,所需的有益效果需要耐药途径的延长的抑制。延长药物接触可通过连续静脉给药获得。然而,以连续输注方式施用抗癌药需要复杂的药物输注装置和静脉导管插入术。口服给药避免了连续静脉输注的要求,是患者优选的给药途径。然而,对于我们的认识来说,如本申请提供的能够逆转化疗药物耐药性和具有近乎完全口服生物利用度的BER抑制剂迄今为止还未开发出来。
培美曲塞是多靶向抗叶酸剂,其起作用的方式在机理上不同于5-FU和其他早期的抗代谢药。培美曲塞的独特之处在于,其是通过叶酰多聚谷氨酸合成酶(FPGS)在细胞内代谢为更高多聚谷氨酸形式的吡咯并嘧啶抗叶酸剂类似物。五谷氨酸形式是细胞内主要的种类,培美曲塞多聚谷氨酸的效能是母体单谷氨酸化合物效能的约60倍;培美曲塞多聚谷氨酸也显示出延长的细胞保留能力。因此,静脉推注给药后培美曲塞的药理作用能持续许多天。
培美曲塞抑制胸核苷酸合成酶(TS)、二氢叶酸还原酶(DHFR)和甘氨酰胺核糖核苷酸转甲酰酶(GARFT)、所有参与胸苷和嘌呤核苷酸从头生物合成的叶酸-依赖性酶。相反,5-FU和其他早期的抗代谢药主要仅抑制TS。虽然培美曲塞引起细胞死亡的准确机制仍不清楚,但是其不仅仅包含TS抑制。因此,在异质非选择性人结肠癌细胞系组(cell line panel)中,对5FU敏感性最好的预测者是TS活性,包括FPGS活性和TS酶动力学在内的多种敏感性决定因素对培美曲塞非常重要(van Triest B,Pinedo HM,van Hensbergen Y.Thymidylatesynthase level as the main predictor parameter for sensitivity to 5-FU,butnot for Folate-based Thymidylate Synthase Inhibitors,in 13 NonselectedColon Cancer Cell Lines.Clin.Cancer.Res.1999;5:643-54)。进一步的研究确认,胃肠细胞系对培美曲塞的敏感性不能通过TS的表达来预测(Kim JH,Lee KW,Jung Y等人,Cytotoxic effects of pemetrexed ingastric cancer cells.Cancer Sci.2005;96:365-71)。
通过与5-FU对比进行体外多个癌细胞系活性研究,可以清楚培美曲塞独特的药理学活性。在一系列的13组结肠癌细胞系中,例如,培美曲塞的效能是5-FU效能的18至627倍(van Triest等人,1999)。该独特的药理学和培美曲塞被认为具有多种还未完全被认识的作用机制的事实使得要弄清楚当与其它特别的抗癌药联合用于治疗特定的癌症时其具有多大效力是困难的。
本发明的一个方面是发现了甲氧胺和抗叶酸化合物联合给药在治疗癌症中的意外改进的效果。因此,本文描述的一个实施方式涉及方法,包括提供i)被诊断患有癌症的患者,ii)包含抗叶酸抗癌药的第一制剂和iii)包含甲氧胺的第二制剂;向患者施用第一制剂;和向所述患者施用第二制剂,其中甲氧胺以足够增强或增加抗叶酸抗癌药效果(即增强活性)的量施用。可使用任何抗叶酸抗癌药,条件是在某些实施方式方法中5-FU被特别地排除。在典型的实施方式中,抗癌药可以选自:培美曲塞、依达曲沙、氨甲喋呤、洛美曲索、诺拉曲塞、ralitrexed、PT523、三甲曲沙、氨喋呤、5,10-二去氮杂四氢叶酸(DDATHF)、吡曲克辛、雷替曲塞、GW1843[(S)-2-[5-[(1,2-二氢-3-甲基-1-氧苯并[f]喹唑啉-9-基)甲基]氨基-1-氧-2-异吲哚基(isoindolynl)]-戊二酸],它们的药用盐和任意的组合。在更典型的实施方式中,抗癌药可以选自:培美曲塞、依达曲沙、氨甲喋呤、洛美曲索、诺拉曲塞、ralitrexed、PT523、三甲曲沙、氨喋呤,它们的药用盐和任意的组合。在最典型的实施方式中,抗癌药可以是培美曲塞和其药学可接受的盐。例如,培美曲塞可以是二钠盐。在示例性实施方式中,培美曲塞可以是二钠盐七水合物。
在典型的非限制性实施方式中,抗叶酸抗癌药是培美曲塞。甲氧胺和抗叶酸抗癌药可连续给药(以任何顺序)或者作为一种制剂一起给药。例如,培美曲塞可以200至1,000mg/m2体表面积每天的量,或者以500至600mg/m2体表面积每天的量静脉给药。在另一实施方式中,甲氧胺与抗叶酸抗癌药的比例可以是1∶5至1∶500。
另一方面,甲氧胺可以以足以使癌症敏感而不引起正常组织不适当的致敏作用的量口服给药。在非限制性优选实施方式中,甲氧胺经口给药以使其相对于其他口服给药的抗癌药具有大大增强的生物利用度。在其他非限制性优选实施方式中,甲氧胺口服给药使得当每天一次或两次给药时其能够维持最低有效浓度。测量口服生物利用度的一种方法是将获得的水平与甲氧胺静脉给药所获得的水平相比较。因此,在本发明的另一方面,甲氧胺口服给药以获得相对于静脉给药至少50%,相对于静脉给药至少60%,相对于静脉给药至少70%,相对于静脉给药至少75%,相对于静脉给药至少80%,相对于静脉给药至少85%,相对于静脉给药至少90%,相对于静脉给药至少95%,或者与静脉给药大致相当的生物利用度。重要的是认识到了,除了与静脉施用甲氧胺相比口服给药获得的意外高的生物利用度之外,还获得了与静脉给予甲氧胺相比更加令人期望的pK曲线。在本发明的另一方面,由于血浆中的半衰期>4小时,因此每天一次或两次给药后经口服给药的甲氧胺维持了最低有效浓度。这个优点容许令人期望的甲氧胺口服给药方案,包括每天一次或两次给药。尽管培美曲塞静脉给药联合甲氧胺口服给药是优选的非限制性实施方式,但每种抗癌药的其他给药途径也是预期的。
在本发明的另一方面,提供了对抗癌药的治疗耐药的某些癌症的治疗方法。相应地,也提供了方法,包括:
提供i)被诊断患有癌症的患者,其中所述癌症对单一培美曲塞治疗耐药,ii)包含抗叶酸抗癌药的第一制剂;和iii)包含甲氧胺的第二制剂;
向患者施用第一制剂;和
向患者施用第二制剂,其中甲氧胺可以以足以增强或增加抗叶酸抗癌药效果(即增强毒性)的量施用。在一个实施方式中,抗叶酸抗癌药可以是培美曲塞。甲氧胺和抗叶酸抗癌药可连续给药(以任何顺序)或者作为一种制剂一起给药。培美曲塞可以200至1,000mg/m2体表面积每天的量,或者以500至600mg/m2体表面积每天的量静脉给药。培美曲塞与甲氧胺的比例可以是1∶5至1∶500。在另一实施方式中,甲氧胺的量可以以足以使癌症敏感而不引起正常组织不适当的致敏作用的量口服给药。在另一实施方式中,甲氧胺的量可以以足以使癌症敏感而不引起正常组织不适当的致敏作用的量每天一次或每天两次口服给药。尽管甲氧胺口服给药是意想不到的优选的给药途径,但是其他类型的给药也是可能的。
另一种实施方式涉及通过提供第一和第二制剂来治疗癌症的方法,其中所述的第一制剂包含抗叶酸剂,第二制剂包含口服施用的甲氧胺。包含抗叶酸剂的第一制剂可通过常规给药途径施用,包括静脉给药。非限制性优选的抗叶酸剂是培美曲塞。相应地,在一个实施方式中,抗叶酸剂是培美曲塞,且包含甲氧胺的第二制剂以与培美曲塞单独治疗相比具有协同效果的量口服给药。
另一方面,该方法可用于治疗对单独的培美曲塞耐药的癌症。根据这些实施方式,培美曲塞以逆转对单独使用抗叶酸剂耐药(并因此协同)的量施用。因此在一个实施方式中,甲氧胺以增强或增加培美曲塞毒性和克服癌症对培美曲塞治疗耐药的有效量口服给药。例如,治疗周期内由于耐药性增强,培美曲塞治疗癌症的效果可能降低。甲氧胺的施用可以防止耐药性增强,提供比单独用甲氧胺或培美曲塞治疗癌症累加作用更强的效果。
还提供了方法,包括∶
提供i)被诊断患有癌症的患者,其中癌症可以选自:癌、黑素瘤、肉瘤、淋巴瘤、白血病、星形细胞瘤、神经胶质瘤、恶性黑色素瘤、慢性淋巴细胞性白血病、肺癌、结肠直肠癌、卵巢癌、胰腺癌、肾癌、子宫内膜癌、胃癌、肝癌、头颈部癌和乳腺癌,其中的癌症可以对单独培美曲塞治疗耐药,ii)包含抗叶酸抗癌药的第一制剂和iii)包含甲氧胺的第二制剂;
向所述患者施用第一制剂;和
向所述患者施用第二制剂,其中甲氧胺可以以足以增强或增加抗叶酸抗癌药效果的量施用。甲氧胺和抗叶酸抗癌药可连续给药,或者作为一种制剂一起给药。例如,可以首先施用甲氧胺,最后施用抗叶酸抗癌药,或者首先施用抗叶酸抗癌药,最后施用甲氧胺。
在典型的实施方式中,抗叶酸抗癌药可以是培美曲塞。培美曲塞可以200至1,000mg/m2体表面积每天的量,或以500至600mg/m2体表面积每天的量静脉给药。培美曲塞与甲氧胺的比例可是1∶5至1∶500。在另一实施方式中,甲氧胺的量可以以足以引起癌细胞对抗癌药治疗易感(即敏感)而不引起正常细胞不适当的损伤的量口服施用。在另一实施方式中,甲氧胺的量可以以足以使癌症敏感而不引起正常组织不适当的致敏作用的量每天一次或两次口服施用。
另一实施方式可以是包含甲氧胺和抗叶酸抗癌药的制剂,其中甲氧胺可以以足够增强抗叶酸抗癌药毒性的量施用。优选地,抗叶酸抗癌药是培美曲塞。
在另一实施方式中,任何如上所述的方法中甲氧胺与抗叶酸抗癌药的比例可以是1∶5至1∶500。
在另一实施方式中,任何如上所述方法中用甲氧胺和抗叶酸抗癌药治疗之前或之后可以施用另一种抗癌药。
在另一实施方式中,描述了在被诊断患有癌症的患者中治疗癌症的方法,包括向该患者施用抗代谢抗癌药,该方法具有如下改进:以足以增强所述抗代谢抗癌药毒性的量向该患者施用甲氧胺。抗代谢抗癌药可是抗叶酸抗癌药。抗叶酸抗癌药可是培美曲塞,所述甲氧胺与抗叶酸抗癌药的比例可是1∶5至1∶500。癌症可对单独培美曲塞治疗耐药。
附图的简要说明
图1A-B显示了用碱性(图1A)和中性(图1B)彗星分析法测定的培美曲塞和MX对DNA链断裂的作用。
图1C-D显示了以碱性(图1C)和中性(图1D)彗星分析法测定,单独培美曲塞或单独MX,和培美曲塞加MX处理细胞后彗星拖尾长度的比较。
图2显示了以20mg/kg体重的量静脉和口服快速灌注给药MX后不同时间点雄性Sprague-Dawley大鼠的平均血浆MX浓度图。
图3显示了以20mg/kg体重的量静脉和口服快速灌注给药MX后不同时间点雌性Sprague-Dawley大鼠的平均血浆MX浓度图。
图4A显示了用培美曲塞和MX处理24小时后在H460细胞中探测到的AP位点的相对量图。
图4B显示了在24小时、48小时和72小时的时候在H460细胞中探测到的AP位点的相对量图。
图5A显示了制备具有规则AP位点或MX-AP位点的DNA底物的示意图。
图5B显示了MX-连接的AP位点对AP-核酸内切酶(APE)切割作用的抵抗。
图6显示了培美曲塞和MX联用对DNA双链断裂和凋亡的作用。
图7显示了培美曲塞和MX联用对H460细胞中BER蛋白水平的作用。
图8显示了培美曲塞和MX对裸小鼠中生长的中等体积的NCI-H460肿瘤、A549肿瘤、HCT116肿瘤和MDA-MB-468肿瘤的作用。
详细说明
本发明的某些实施方式一般地涉及包含甲氧胺和抗叶酸抗癌药的新组合物,和使用这些组合物治疗某些癌症。
定义
除非另外指出,当用于本文和附加的权利要求中时,下述术语具有如下含义。没有在下面或说明书别处定义的术语具有本领域公认的含义。
用于说明书和权利要求,本文使用的术语“药剂(agent)”和“药物”是指被怀疑具有治疗性质的化合物、化合物的混合物、生物大分子、或来自生物材料如细菌、植物、真菌、或动物特别是哺乳动物的细胞或组织的提取物。药剂或药物可以是纯化的、基本纯化的或部分纯化的。
用于说明书和权利要求,本文使用的术语“抗代谢药”是指与正常生化反应所需物质(代谢产物如核苷)结构相似,然而其结构的不同又不足以干扰细胞的正常功能,包括细胞分裂的化学治疗药物。
用于说明书和权利要求,本文使用的术语“抗叶酸剂”是指与叶酸结构相似,然而其结构的不同又不足以阻断叶酸的活性和破坏细胞复制所需的叶酸依赖性机制的化学治疗药物。如本文所用,抗叶酸剂是一类抗代谢药。
用于说明书和权利要求,本文使用的术语“抗肿瘤药”是指通过靶向DNA用于抑制或阻止可变为恶性的瘤(肿瘤)的成熟和增殖的化学治疗药物。
用于说明书和权利要求,本文使用的术语“染色”是指本领域技术人员已知的用于更好显示、区分或鉴别细胞的特定成分和/或特征的任何方法。
用于说明书和权利要求,本文使用的术语“可操作的联合”、“可操作的顺序”和“可操作的连接”是指核酸序列以这样一种方式连接,即产生能引导给定基因转录和/或所需蛋白分子合成的核酸分子。该术语也指氨基酸序列以以产生功能蛋白的方式连接。
用于说明书和权利要求,本文使用的术语“抗原”是指与抗体具有反应性的蛋白、糖蛋白、脂蛋白、脂质或其他物质,所述抗体对所述分子的部分具有特异性。
用于说明书和权利要求,本文使用的术语“形态学”是适当地指当使用眼睛、光学显微镜、共焦显微镜或电子显微镜观察时细胞或有机体的可视性外观。
用于说明书和权利要求,本文使用的术语“受试者(subject)”、“个体(individual)”和“患者(patient)”是指人或其他动物,例如农场动物或实验室动物(如豚鼠或小鼠),它们能够患有自然发生的或者是人工诱导的细胞周期(影响的)决定的疾病,包括但不限于癌症。
术语“逆转耐药”是指在初始化学治疗药物单独不能使肿瘤体积与未受处理的肿瘤体积相比统计学显著地减少的情形中,与未受处理肿瘤的肿瘤体积相比,和初始化学治疗药物联合的第二种药物的使用能够使肿瘤体积减少统计学显著的水平(例如p<0.05),。这通常应用于未受处理的肿瘤以对数节奏生长时的肿瘤体积测量。
本文使用的术语“增强(potentiate)”是指增强(enhance)或增加(increase)抗癌药有益活性或效力超过单独抗癌药或单独增强剂所期望的有益活性或效力。
本文使用的术语“使......敏感”是指以允许抗癌药或放射治疗更加有效地治疗相关的肿瘤性疾病的方式改变癌细胞或肿瘤细胞。在一些实施方式中,正常细胞在一定程度上不受影响,即由化疗或放射治疗不引起正常细胞不适当的损伤。
本文使用的术语“协同作用”是指两种或更多种抗癌药或化学治疗药物的联合效果可以比单独的抗癌药或化学治疗药物的分别效果的总和更强。例如,诸如甲氧胺的BER抑制剂和诸如培美曲塞的抗癌药的联合效果比单独的甲氧胺和培美曲塞的分别效果的总和更强。
术语“治疗有效量”是指将产生所期望响应的受试化合物的量,例如,由研究者、兽医、医师或其他临床医生寻找的组织、系统、动物或人的生物学或医学响应。
用于说明书和权利要求,本文使用的术语“野生型”(wt)细胞或细胞系是指对于要检查的生理学过程或形态学特征来说,保留了通常与细胞或细胞系类型相关的特征的细胞或细胞系。只要它们不显著影响被检测的过程或特征,就允许细胞或细胞系在不是被检测的生理过程或形态学特征上具有非野生型特征。
术语“药学可接受的盐”是指化合物的盐,其不会对所施用的生物体引起显著刺激和不会使该化合物的生物活性和性质消失。在一些实施方式中,盐是化合物的酸加成盐。药用盐可通过将化合物与有无机酸例如氢卤酸(如盐酸或氢溴酸)、硫酸、硝酸、磷酸等反应而获得。药用盐也可以通过将化合物与有机酸如脂肪族或芳香族羧酸或磺酸反应而获得,例如乙酸、琥珀酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、抗坏血酸、烟酸、甲磺酸、乙磺酸、对甲苯磺酸、水杨酸或萘磺酸。药用盐也可以通过将化合物与碱反应而获得,形成例如铵盐,碱金属盐例如钠盐或钾盐,碱土金属盐例如钙盐或镁盐,有机碱例如二环己基胺、N-甲基-D-葡萄糖胺、三(羟基甲基)甲胺、C1-C7烷基胺、环己胺、三乙醇胺、乙二胺的盐,和与氨基酸如精氨酸、赖氨酸等形成的盐。
对DNA的损伤被酶降低到最小程度,这些酶识别错误、消除错误、并用校正的核苷酸替换受损的DNA。当单链断裂被引入,碱基被除去离开先前不成对的配偶体,碱基被共价修饰,碱基被转换为与配偶体碱基不能适当配对的另一碱基,或者在互补链碱基之间引入共价键时,就会出现DNA损伤。切除修复系统从DNA链上除去错配或受损的碱基,然后合成新的DNA将其替换。碱基切除修复(BER)在DNA复制期间开始,并且在复制完成之前可使得受损的碱基/错配的碱基得到校正。
碱基切除修复(BER)作用是由DNA糖基化酶引发的,该酶除去N-糖苷(碱基-糖)键,释放受损的碱基和产生脱碱基位点(例如无嘌呤或无嘧啶(AP)位点)。无嘌呤或无嘧啶(AP)位点由从DNA(脱氧核糖核酸)分别丧失嘌呤或嘧啶残基而产生。尿嘧啶残基可以由胞嘧啶的自发脱氨作用形成,而且如果不经修复可以导致C→T转变。还存在一种识别和切除次黄嘌呤(腺嘌呤的脱氨基产物)的糖基化酶。其他的糖基化酶消除烷基化碱基(例如3-甲基腺嘌呤、3-甲基鸟嘌呤和7-甲基鸟嘌呤)、开环的嘌呤、氧化损伤的碱基、和一些生物体中的UV光二聚物。尿嘧啶DNA糖基化酶(UDG)是DNA糖基化酶的一个实例。UDG的BER蛋白水平受培美曲塞和MX联合处理的影响(图7)。
AP位点进一步被5′-3′核酸内切酶(AP核酸内切酶(APE))处理,切断了受损的嘌呤或嘧啶碱基两侧上键合的磷酸二酯键。通过切断AP位点的磷酸二酯键,AP核酸内切酶引起断链。
PARP帮助处理BER期间引起的DNA链断裂。PARP是DNA切口监视蛋白(nick surveillance protein),其在单核苷酸BER正常进行至完成时微弱地结合在BER中间体上。相反,当单核苷酸BER由切除步骤中的阻断而停止时,PARP和AP核酸内切酶(APE)、DNA聚合酶β和FEN-1便牢固地结合在BER中间体上。
在哺乳动物细胞中,5′-脱氧核糖磷酸糖(5′-deoxyribosesugar phosphate)被DNA聚合酶β(pol β)的内在AP裂解酶(dRP)活性所除去。DNA聚合酶还用新的核苷酸弥补了缺口。
最终,DNA连接酶共价地将新物质的3′端连接到原物质上。因此,恢复了野生型序列。
拓扑异构酶I和II也参与DNA修复,因为它们能识别自发的AP位点,形成稳定的可切割复合物。拓扑异构酶II抑制剂促进了DNA切割和其他的染色体畸变反应,包括姐妹染色单体互换。
本文描述的一些实施方式可以涉及方法,包括:
提供i)被诊断患有癌症的患者,ii)包含抗叶酸抗癌药的第一制剂和iii)包含甲氧胺的第二制剂;
向患者施用第一制剂;和向所述患者施用所述第二制剂,其中甲氧胺可以以足够增强或增加抗叶酸抗癌药效果的量施用。可使用任何抗叶酸抗癌药,条件是在该方法的某些实施方式中,5-FU特别地被排除。
在典型的实施方式中,抗癌药可以选自:培美曲塞、卡培他滨、依达曲沙、氨甲喋呤、洛美曲索、诺拉曲塞、ralitrexed、PT523、三甲曲沙、氨喋呤、5,10-二去氮杂四氢叶酸(DDATHF)、吡曲克辛、雷替曲塞、GW1843[(S)-2-[5-[(1,2-二氢-3-甲基-1-氧苯并[f]喹唑啉-9-基)甲基]氨基-1-氧-2-异吲哚基]-戊二酸],它们的药用盐和任意的组合。在更典型的实施方式中,抗癌药可以选自:培美曲塞、卡培他滨、依达曲沙、氨甲喋呤、洛美曲索、诺拉曲塞、ralitrexed、PT523、三甲曲沙、氨喋呤,它们的药用盐和任意的组合。在最典型的实施方式中,抗癌药可以是培美曲塞和其药学可接受的盐。例如,培美曲塞可以是二钠盐的形式。在示例性实施方式中,培美曲塞可以是二钠盐七水合物。
在某些实施方式中,本发明预期了能引起AP位点形成的抗癌药和BER抑制剂的使用。
在典型的实施方式中,抗癌药可以选自:培美曲塞、卡培他滨、依达曲沙、氨甲喋呤、洛美曲索、诺拉曲塞、ralitrexed、PT523、三甲曲沙、氨喋呤,5,10-二去氮杂四氢叶酸(DDATHF)、吡曲克辛、雷替曲塞、GW1843[(S)-2-[5-[(1,2-二氢-3-甲基-1氧苯并[f]喹唑啉-9-基)甲基]氨基-1-氧-2-异吲哚基]-戊二酸],其药用盐和任意的组合。在更典型的实施方式中,抗癌药可以选自:培美曲塞、卡培他滨、依达曲沙、氨甲喋呤、洛美曲索、诺拉曲塞、ralitrexed、PT523、三甲曲沙、氨喋呤,它们的药用盐和任意的组合。在最典型的实施方式中,抗癌药可以是培美曲塞和其药学可接受的盐。例如,培美曲塞可以是二钠盐。在示例性实施方式中,培美曲塞可以是二钠盐七水合物。
在典型的实施方式中,BER抑制剂可以选自:甲氧胺、依托泊苷(VP-16,VP-16-123)、内消旋(meso)-4,4′-(2,3-丁烷二基)-二-(2,6-哌嗪二酮)(ICRF-193,双二氧代哌嗪)、多柔比星(DOX)、安吖啶(4′,9-吖啶基氨基甲磺酰-间-甲氧基苯胺(anisidide);mAMSA)、帕折普汀、萘啶酸、奥索利酸、新生霉素、香豆霉素A1、福司曲星、替尼泊苷、米托蒽醌、柔红霉素、N-[2-二甲基氨基)乙基]吖啶-4-甲酰胺(DACA)、美巴龙(merbarone)、米帕林、椭圆玫瑰树碱、表鬼臼毒素、溴乙锭、表柔比星、吡柔比星、3′-去氨基-3′-吗啉代-13-去氧-10-羟基洋红霉素;4′-磷酸盐-4′-二甲基表鬼臼毒素2N-甲基葡糖胺盐的2″,3″-双五氟苯氧乙酰基-4′,6′-亚乙基-β-D葡萄糖苷(F11782;氟化亲脂性epipodophylloid)、阿霉素、放线菌素D、蒽环类抗生素(例如9-氨基蒽环类抗生素)、吡唑啉吖啶(pyrazoloacridine)(PZA)、喜树碱、托泊替康,其药用盐和溶剂化物和任意的组合。在更典型的实施方式中,BER抑制剂可以选自:甲氧胺(MX)、N-乙基马来酰亚胺、O6-苄基鸟嘌呤,其药学可接受的盐和任意的组合。在最典型的实施方式中,BER抑制剂可以是甲氧胺(MX)或其盐。
其中,X是O或NH,
Y是O、S、或NH,
Z不存在或代表O、S、或NH,
R代表氢或烃部分,和
其药学可接受的盐。
在一些实施方式中,BER抑制剂可以用于治疗患有肿瘤性疾病的患者或受试者。例如,肿瘤性疾病可以是选自下述的癌症:癌、黑素瘤、肉瘤、淋巴瘤、白血病、星形细胞瘤、神经胶质瘤、恶性黑色素瘤、慢性淋巴细胞性白血病、肺癌、前列腺癌、结肠直肠癌、卵巢癌、胰腺癌、肾癌、子宫内膜癌、胃癌、肝癌、头颈部癌。
在一些实施方式中,BER抑制剂可以用于治疗正使用抗癌药治疗的患有肿瘤性疾病的患者或个体。
在典型的实施方式中,BER抑制剂可以选自:甲氧胺、依托泊苷(VP-16,VP-16-123)、内消旋(meso)-4,4′-(2,3-丁烷二基)-二-(2,6-哌嗪二酮)(ICRF-193,双二氧代哌嗪)、多柔比星(DOX)、安吖啶(4′,9-吖啶基氨基甲磺酰-间-甲氧基苯胺;mAMSA)、帕折普汀、萘啶酸、奥索利酸、新生霉素、香豆霉素A1、福司曲星、替尼泊苷、米托蒽醌、柔红霉素、N-[2-二甲基氨基)乙基]吖啶-4-甲酰胺(DACA)、美巴龙、米帕林、椭圆玫瑰树碱、表鬼臼毒素、溴乙锭、表柔比星、吡柔比星、3′-去氨基-3′-吗啉代-13-去氧-10-羟基洋红霉素;4′-磷酸盐-4′-二甲基表鬼臼毒素2N-甲基葡糖胺盐的2″,3″-双五氟苯氧乙酰基-4′,6′-亚乙基-β-D葡萄糖苷(F11782;氟化亲脂性epipodophylloid)、阿霉素、放线菌素D、蒽环类抗生素(例如9-氨基蒽环类抗生素)、吡唑啉吖啶(PZA)、喜树碱、托泊替康,其药用盐和任意的组合。在更典型的实施方式中,BER抑制剂可以选自:甲氧胺(MX)、N-乙基马来酰亚胺、O6-苄基鸟嘌呤,其药学可接受的盐和任意的组合。在最典型的实施方式中,BER抑制剂可以是甲氧胺(MX)或其盐。
在典型的实施方式中,抗癌药可以选自:培美曲塞、卡培他滨、依达曲沙、氨甲喋呤、洛美曲索、诺拉曲塞、ralitrexed、PT523、三甲曲沙、氨喋呤、5,10-二去氮杂四氢叶酸(DDATHF)、吡曲克辛、雷替曲塞、GW1843[(S)-2-[5-[(1,2-二氢-3-甲基-1-氧苯并[f]喹唑啉-9-基)甲基]氨基-1-氧-2-异吲哚基]-戊二酸],它们的药用盐和任意的组合。在更典型的实施方式中,抗癌药可以选自:培美曲塞、卡培他滨、依达曲沙、氨甲喋呤、洛美曲索、诺拉曲塞、ralitrexed、PT523、三甲曲沙、氨喋呤,它们的药用盐和任意的组合。在最典型的实施方式中,抗癌药可以是培美曲塞和其药学可接受的盐和溶剂化物。例如,培美曲塞可以是二钠盐。在示例性实施方式中,培美曲塞可以是二钠盐七水合物。
在一些实施方式中,可以将BER抑制剂和抗癌药联合向个体给药。例如,可以将BER抑制剂和抗癌药以一种胃肠外制剂的形式一起向个体施用。可选择地,BER抑制剂和抗癌药可以一种口服制剂的形式一起向个体施用,例如固体剂型制剂。
在一些实施方式中,可以将BER抑制剂和抗癌药连续地向个体施用,其中首先向该个体给予抗癌药,然后给予BER抑制剂。例如,可以将抗癌药以胃肠外制剂形式向个体给药,例如静脉制剂,或者口服制剂,例如固体剂型制剂,然后以胃肠外制剂形式给予BER抑制剂,例如静脉制剂,或者口服制剂,例如固体剂型制剂。
可选择地,在一些实施方式中,可以将BER抑制剂和抗癌药连续地向个体施用,其中首先向该个体给予BER抑制剂,然后给予抗癌药。例如,可以将BER抑制剂以胃肠外制剂形式向个体给药,例如静脉制剂,或者口服制剂,例如固体剂型制剂,然后以胃肠外制剂形式给予抗癌药,例如静脉制剂,或者口服制剂,例如固体剂型制剂。
在一些实施方式中,抗癌药和BER抑制剂可以产生比各个药物单独的抗癌效果更强的抗癌效果。例如,抗癌药和BER抑制剂的联合抗癌效果可以比单独使用抗癌药和BER抑制剂抗癌效果之和更强。
其中,X是O或NH,
Y是O、S、或NH,
Z不存在或代表O、S、或NH,和
R代表氢或烃部分,
和其药学可接受的盐。
在单核苷酸BER中,脱碱基位点的脱氧核糖磷酸盐(dRP)被DNA聚合酶β的裂解酶活性除去。诸如甲氧胺的化合物与脱碱基位点的醛反应,使其抵抗dRP裂解酶机制的β-消除步骤,因而阻断单核苷酸BER。
在一些实施方式中,适当的化合物可以防止AP核酸内切酶的底物被轻易断裂。抗癌药可通过与AP位点结合并阻止APE-介导的磷酸二酯键断裂而起作用。其他可与AP位点结合并阻止APE-介导的磷酸二酯键断裂的化合物包括O-苄基羟胺;氨基氧乙酸乙酯;氨基氧乙酸;氨基氧乙酸乙酯;H2N-OCHMeCO2H;羧基甲氧胺;氨基氧乙酸;HN=C(NH2)SCH2CH2ONH2;H2N-O(CH2)3SC(NH2)=NH;MeOC(O)CH(NH2)CH2O-NH2;H2NOCH2CH(NH2)CO2H;副刀豆氨酸;H2N-O(CH2)4O-NH2;O-(对-硝基苄基)羟胺;2-氨基-4-(氨基氧甲基)噻唑;4-(氨基氧甲基)噻唑;O,O′-(邻-次苯基二亚甲基)二羟胺;2,4-二硝基苯氧基胺;O,O′-(间-次苯基二亚甲基)二羟胺;O,O′-(对-次苯基二亚甲基)二羟胺;H2C=CHCH2O-NH2;H2N-O(CH2)4O-NH2;H3C(CH2)15O-NH2,2,2′-(1,2-乙烷二基)双(3-氨基氧)丁烯二酸二甲基二乙基酯;具有任何下述结构的化合物:
和任何这些化合物的药学可接受的盐。
用作BER抑制剂的化合物包括PARP抑制剂,例如4-氨基-1,8-萘二甲酰亚胺(naphthalimide)(ANI)、PD128763、3-AB、6-AN和8-羟基-2-甲基-喹唑啉-4-[3H]酮(NU-1025)。
用作BER抑制剂的化合物包括DNA聚合酶抑制剂(例如DNA聚合酶β、γ或ε),例如野黑樱苷、阿非迪霉素、2′,3′-双脱氧胞苷三磷酸(ddCTP)、2′,3′-双脱氧胸苷三磷酸(ddTTP)、2′,3′-双脱氧腺苷三磷酸(ddATP)、2′,3′-双脱氧鸟苷三磷酸(ddGTP)、1-β-D-阿拉伯呋喃糖基胞嘧啶(Ara-C)、咖啡因、阿糖胞苷(arabinocytidine)和博来霉素。
用作BER抑制剂的化合物包括DNA连接酶抑制剂(例如DNA连接酶I、II或III),例如熊果酸和齐墩果醇酸、紫胶桐油酸、原苔甾酸、swertifrancheside、茶色鸡蛋花素、耳翼花椒碱氯化物和博来霉素。XRCC1是DNA连接酶III的蛋白配偶体,且XRCC1抑制剂如3-AB也用作BER抑制剂。
拓扑异构酶II抑制剂诱导DNA裂解和其他染色体畸变反应,包括姐妹染色单体互换。用作BER抑制剂的化合物还包括:拓扑异构酶II抑制剂,例如依托泊苷(VP-16,VP-16-123)、内消旋-4,4′-(2,3-丁烷二基)-二-(2,6-哌嗪二酮)(ICRF-193,双二氧代哌嗪)、多柔比星(DOX)、安吖啶(4′,9-吖啶基氨基甲磺酰-间-甲氧基苯胺;mAMSA)、帕折普汀、萘啶酸、奥索利酸、新生霉素、香豆霉素A1、福司曲星、替尼泊苷、米托蒽醌、柔红霉素、N-[2-二甲基氨基)乙基]吖啶-4-甲酰胺(DACA)、美巴龙、米帕林、椭圆玫瑰树碱、表鬼臼毒素、溴乙锭、表柔比星、吡柔比星、3′-去氨基-3′-吗啉代-13-去氧-10-羟基洋红霉素;4′-磷酸盐-4′-二甲基表鬼臼毒素2N-甲基葡糖胺盐的2″,3″-双五氟苯氧乙酰基-4′,6′-亚乙基-β-D葡萄糖苷(F11782;氟化亲脂性epipodophylloid)、阿霉素、放线菌素D、蒽环类抗生素(例如9-氨基蒽环类抗生素),和吡唑啉吖啶(PZA)。拓扑异构酶I抑制剂,例如喜树碱和托泊替康也可以用作BER抑制剂。
在一些实施方式中,其他酶抑制剂,无论是现有技术已知的或此后被证明的,以及BER途径的其他元件的抑制剂,例如DNA烷基转移酶,在不脱离本实施方式的范围和精神的情况下,可用于本实施方式的组合物和方法。
在某些实施方式中,本发明关注的是能引起AP位点形成的抗癌药如培美曲塞和BER抑制剂(拓扑异构酶抑制剂除外)如甲氧胺的用途。
在典型的实施方式中,抗癌药可以选自:培美曲塞、卡培他滨、依达曲沙、氨甲喋呤、洛美曲索、诺拉曲塞、ralitrexed、PT523和三甲曲沙。在更典型的实施方式中,抗癌药可以是培美曲塞和其药学可接受的盐。例如,培美曲塞可以是二钠盐。在示例性实施方式中,培美曲塞可以是二钠盐七水合物。
在一些实施方式中,抗癌药可以以约25mg/m2至约5,000mg/m2体表面积的剂量给药。例如,剂量可以是约25mg/m2至约200mg/m2体表面积;剂量可以是约150mg/m2至约500mg/m2体表面积;剂量可以是约400mg/m2至约1000mg/m2体表面积;剂量可以是约900mg/m2至约5,000mg/m2体表面积;剂量可以是约200mg/m2至约1,000mg/m2体表面积;或者剂量可以是约500mg/m2至约600mg/m2体表面积。抗叶酸剂是非限制性优选的一类抗癌药。在一些实施方式中,抗癌药可以选自:培美曲塞、卡培他滨、依达曲沙、氨甲喋呤、洛美曲索、诺拉曲塞、ralitrexed、PT523和三甲曲沙。在更典型的实施方式中,抗癌药可以是培美曲塞和其药学可接受的盐。例如,培美曲塞可以是二钠盐。在示例性实施方式中,培美曲塞可以是二钠盐七水合物。
在一些实施方式中,BER抑制剂和抗癌药的比例可以是约1∶2至约1∶10000。例如,BER抑制剂和抗癌药的比例可以是约1∶2至约1∶100;BER抑制剂和抗癌药的比例可以是约1∶50至约1∶500;BER抑制剂和抗癌药的比例可以是约1∶450至约1∶10000;BER抑制剂和抗癌药的比例可以是约1∶5至约1∶500;BER抑制剂和抗癌药的比例可以是约1∶10至约1∶50;BER抑制剂和抗癌药的比例可以是约1∶15至约1∶40;或者BER抑制剂和抗癌药的比例可以是约1∶20至约1∶30。在典型的实施方式中,BER抑制剂可以选自:甲氧胺(MX)、N-乙基马来酰亚胺、O6-苄基鸟嘌呤,其药学可接受的盐和任意的组合。在更典型的实施方式中,BER抑制剂可以是甲氧胺(MX)。
在一些实施方式中,BER抑制剂以足以增强或增加抗癌药效果的量施用。
在典型的实施方式中,抗癌药可以选自:培美曲塞、卡培他滨、依达曲沙、氨甲喋呤、洛美曲索、诺拉曲塞、ralitrexed、PT523、三甲曲沙、氨喋呤,5,10-二去氮杂四氢叶酸(DDATHF)、吡曲克辛、雷替曲塞、GW1843[(S)-2-[5-[(1,2-二氢-3-甲基-1-氧苯并[f]喹唑啉-9-基)甲基]氨基-1-氧-2-异吲哚基]-戊二酸],它们的药用盐和任意的组合。在更典型的实施方式中,抗癌药可以选自:培美曲塞、卡培他滨、依达曲沙、氨甲喋呤、洛美曲索、诺拉曲塞、ralitrexed、PT523、三甲曲沙、氨喋呤,它们的药用盐和任意的组合。在最典型的实施方式中,抗癌药可以是培美曲塞和其药学可接受的盐。例如,培美曲塞可以是二钠盐。在示例性实施方式中,培美曲塞可以是二钠盐七水合物。
在典型的实施方式中,BER抑制剂可以选自:甲氧胺、依托泊苷(VP-16,VP-16-123)、内消旋-4,4′-(2,3-丁烷二基)-二-(2,6-哌嗪二酮)(ICRF-193,双二氧代哌嗪)、多柔比星(DOX)、安吖啶(4′,9-吖啶基氨基甲磺酰-间-甲氧基苯胺;mAMSA)、帕折普汀、萘啶酸、奥索利酸、新生霉素、香豆霉素A1、福司曲星、替尼泊苷、米托蒽醌、柔红霉素、N-[2-二甲基氨基)乙基]吖啶-4-甲酰胺(DACA)、美巴龙、米帕林、椭圆玫瑰树碱、表鬼臼毒素、溴乙锭、表柔比星、吡柔比星、3′-去氨基-3′-吗啉代-13-去氧-10-羟基洋红霉素;4′-磷酸盐-4′-二甲基表鬼臼毒素2N-甲基葡糖胺盐的2″,3″-双五氟苯氧乙酰基-4′,6′-亚乙基-β-D葡萄糖苷(F11782;氟化亲脂性epipodophylloid)、阿霉素、放线菌素D、蒽环类抗生素(例如9-氨基蒽环类抗生素)、吡唑啉吖啶(PZA)、喜树碱、托泊替康,其药用盐和任意的组合。在更典型的实施方式中,BER抑制剂可以选自:甲氧胺(MX)、N-乙基马来酰亚胺、O6-苄基鸟嘌呤,其药学可接受的盐和任意的组合。在最典型的实施方式中,BER抑制剂可以是甲氧胺(MX)或其盐。例如,BER抑制剂可以是甲氧胺盐酸盐(MX)。
在一些实施方式中,BER抑制剂和抗癌药的比例可以是约1∶2至约1∶10000。例如,BER抑制剂和抗癌药的比例可以是约1∶2至约1∶100;BER抑制剂和抗癌药的比例可以是约1∶50至约1∶500;BER抑制剂和抗癌药的比例可以是约1∶450至约1∶10000;BER抑制剂和抗癌药的比例可以是约1∶5至约1∶500;BER抑制剂和抗癌药的比例可以是约1∶10至约1∶50;BER抑制剂和抗癌药的比例可以是约1∶15至约1∶40;或者BER抑制剂和抗癌药的比例可以是约1∶20至约1∶30。在典型的实施方式中,BER抑制剂可以选自:甲氧胺(MX)、N-乙基马来酰亚胺、O6-苄基鸟嘌呤,其药学可接受的盐和任意的组合。在更典型的实施方式中,BER抑制剂可以是甲氧胺(MX)。在最典型的实施方式中,BER抑制剂可以是甲氧胺(MX),抗癌药可以是培美曲塞。例如,培美曲塞可以是培美曲塞的二钠盐。在示例性实施方式中,培美曲塞可以是二钠盐七水合物。
一些实施方式提供了治疗癌症的方法,包括
提供可以分开施用或作为联合制剂施用的包含抗癌药的第一制剂和包含BER抑制剂的第二制剂;
选择被诊断患有癌症的受试者,其中所述的癌症对抗癌药单独或者与其他抗癌药联合治疗耐药;
施用所述第一制剂和所述第二制剂;
其中,所述第一制剂的量和所述第二制剂的量可以是这样一种量,当向所述受试者施用时,其抗癌效果可以比单独用第一制剂抗癌效果更强。
在一些实施方式中,第一制剂可以包含选自下述的抗癌药:培美曲塞、卡培他滨、依达曲沙、氨甲喋呤、洛美曲索、诺拉曲塞、ralitrexed、PT523、三甲曲沙、氨喋呤,它们的药用盐和任意的组合。在典型的实施方式中,抗癌药可以是培美曲塞。在一些实施方式中,第二制剂可以包含选自下述的BER抑制剂:甲氧胺(MX)、N-乙基马来酰亚胺、O6-苄基鸟嘌呤,其药学可接受的盐和任意的组合。在典型的实施方式中,BER抑制剂可以是甲氧胺。
在一些实施方式中,抗癌药可以约25mg/m2至约5,000mg/m2体表面积的量给药。例如,剂量可以是约25mg/m2至约200mg/m2体表面积;剂量可以是约150mg/m2至约500mg/m2体表面积;剂量可以是约400mg/m2至约1000mg/m2体表面积;剂量可以是约900mg/m2至约5,000mg/m2体表面积;剂量可以是约200mg/m2至约1,000mg/m2体表面积;或者剂量可以是约500mg/m2至约600mg/m2体表面积。在一些实施方式中,抗癌药可以选自:培美曲塞、卡培他滨、依达曲沙、氨甲喋呤、洛美曲索、诺拉曲塞、ralitrexed、PT523和三甲曲沙。在更典型的实施方式中,抗癌药可以是培美曲塞和其药学可接受的盐。例如,培美曲塞可以是二钠盐。在示例性实施方式中,培美曲塞可以是二钠盐七水合物。
在一些实施方式中,BER抑制剂和抗癌药的比例可以是约1∶2至约1∶10000。例如,BER抑制剂和抗癌药的比例可以是约1∶2至约1∶100;BER抑制剂和抗癌药的比例可以是约1∶50至约1∶500;BER抑制剂和抗癌药的比例可以是约1∶450至约1∶10000;BER抑制剂和抗癌药的比例可以是约1∶5至约1∶500;BER抑制剂和抗癌药的比例可以是约1∶10至约1∶50;BER抑制剂和抗癌药的比例可以是约1∶15至约1∶40;或者BER抑制剂和抗癌药的比例可以是约1∶20至约1∶30。在典型的实施方式中,BER抑制剂可以选自:甲氧胺(MX)、N-乙基马来酰亚胺、O6-苄基鸟嘌呤,其药学可接受的盐和任意的组合。在更典型的实施方式中,BER抑制剂可以是甲氧胺(MX)。
一些实施方式提供了治疗癌症的方法,包括
提供可以分开施用或作为联合制剂施用的包含抗癌药的第一制剂和包含BER抑制剂的第二制剂;
选择被诊断患有癌症的受试者;
施用所述第一制剂和所述第二制剂:
其中,所述第一制剂的量和所述第二制剂的量可以是这样一种量,当向所述受试者施用时,其抗癌效果比包含抗癌药的第一制剂和包含BER抑制剂的第二制剂的累加抗癌效果更强。
在一些实施方式中,第一制剂可以包含选自下述的抗癌药:培美曲塞、卡培他滨、依达曲沙、氨甲喋呤、洛美曲索、诺拉曲塞、ralitrexed、PT523、三甲曲沙、氨喋呤,它们的药用盐和任意的组合。在典型的实施方式中,抗癌药可以是培美曲塞。在一些实施方式中,第二制剂可以包含选自下述的BER抑制剂:甲氧胺(MX)、N-乙基马来酰亚胺、O6-苄基鸟嘌呤,其药学可接受的盐和任意的组合。在典型的实施方式中,BER抑制剂可以是甲氧胺。
在一些实施方式中,抗癌药可以以约25mg/m2至约5,000mg/m2体表面积的剂量给药。例如,剂量可以是约25mg/m2至约200mg/m2体表面积;剂量可以是约150mg/m2至约500mg/m2体表面积;剂量可以是约400mg/m2至约1000mg/m2体表面积;剂量可以是约900mg/m2至约5,000mg/m2体表面积;剂量可以是约200mg/m2至约1,000mg/m2体表面积;或者剂量可以是约500mg/m2至约600mg/m2体表面积。在一些实施方式中,抗癌药可以选自:培美曲塞、卡培他滨、依达曲沙、氨甲喋呤、洛美曲索、诺拉曲塞、ralitrexed、PT523和三甲曲沙。在更典型的实施方式中,抗癌药可以是培美曲塞和其药学可接受的盐。例如,培美曲塞可以是二钠盐。在示例性实施方式中,培美曲塞可以是二钠盐七水合物。
在一些实施方式中,BER抑制剂和抗癌药的比例可以是约1∶2至约1∶10000。例如,BER抑制剂和抗癌药的比例可以是约1∶2至约1∶100;BER抑制剂和抗癌药的比例可以是约1∶50至约1∶500;BER抑制剂和抗癌药的比例可以是约1∶450至约1∶10000;BER抑制剂和抗癌药的比例可以是约1∶5至约1∶500;BER抑制剂和抗癌药的比例可以是约1∶10至约1∶50;BER抑制剂和抗癌药的比例可以是约1∶15至约1∶40;或者BER抑制剂和抗癌药的比例可以是约1∶20至约1∶30。在典型的实施方式中,BER抑制剂可以选自:甲氧胺(MX)、N-乙基马来酰亚胺、O6-苄基鸟嘌呤,其药学可接受的盐和任意的组合。在更典型的实施方式中,BER抑制剂可以是甲氧胺(MX)。
本发明实施方式的另一方面是意外的效果,即某些BER抑制剂以协同方式与某些抗叶酸剂联合作用意外地逆转了某些抗叶酸剂的耐药性。因此,在非限制性优选实施方式中,抗代谢抗癌药是抗叶酸抗癌药。这些抗叶酸剂破坏了对细胞复制必需的叶酸-依赖性代谢过程。抗叶酸剂与其他化学治疗药物的区别在于它们破坏了参与叶酸代谢的细胞过程。这包括抑制叶酸依赖性酶,包括但不限于胸核苷酸合成酶(TS)。叶酸-依赖性过程的中断导致包括癌细胞在内的快速分裂细胞的不适当DNA复制和细胞凋亡。在一个实施方式中,MX和抗代谢抗癌药的比例是约1∶5至1∶500。在某些实施方式中,MX和抗代谢抗癌药的比例是约1∶10至约1∶100,约1∶25至约1∶75,约1∶15至约1∶40,或者约1∶20至约1∶30。除此之外,可在联合使用MX和抗代谢抗癌药之前或之后使用另一种抗癌药。药物组合物
将被理解的是,本文提供的组合物可以是允许组合物向患者施用的任何形式。例如,该组合物可是固体、液体或气体(例如气雾剂)的形式。其他合适的给药途径包括但不限于,口服给药、局部给药、胃肠外给药(例如舌下或口腔给药)、舌下给药、直肠给药、阴道给药和鼻内给药。本文使用的术语胃肠外包括皮下注射、静脉、肌内、胸骨内(intrasternal)、海绵窦内、鞘内、intrameatal、尿道内注射或输注技术。该药物组合物以向患者施用之后允许其包含的活性成分生物可利用的方式制备。向患者施用的组合物采用一个或更多个剂量单位的形式,其中例如,片剂可是单一的剂量单位,以气雾剂形式的一种或更多种本发明的化合物的容器可包含复数个剂量单位。
另一方面,本发明的公开涉及药物组合物,该组合物包含生理学可接受的表面活性剂、载体、稀释剂、赋形剂、光滑剂、助悬剂、成膜物质和包衣助剂,或其组合;和本文公开的化合物。治疗用途可接受的载体或稀释剂在药物领域是公知的,例如描述在Remington’s Pharmaceutical Sciences,18th Ed.,Mack Publishing Co.,Easton,PA(1990)中,其全部内容通过援引引入本文。防腐剂、稳定剂、染料、增甜剂、芳香剂、调味剂等可提供在该药物组合物中。例如,苯甲酸钠、抗坏血酸和对羟基苯甲酸酯可作为防腐剂添加。除此之外,可使用抗氧化剂和助悬剂。在各种实施方式中,醇类、酯类、硫酸化脂肪族醇等可用作表面活性剂;蔗糖、葡萄糖、乳糖、淀粉、结晶纤维素、甘露醇、轻质无水硅酸盐、铝酸镁、甲基硅酸铝酸镁(magnesium methasilicate aluminate)、合成硅酸铝、碳酸钙、碳酸氢钠、磷酸氢钙、羧甲基纤维素钙等可用作赋形剂;硬脂酸镁、滑石粉、硬化油等可用作光滑剂;椰子油、橄榄油、芝麻油、花生油、大豆可用作助悬剂或润滑剂;醋酸邻苯二甲酸纤维素作为碳水化合物如纤维素或糖的衍生物,或者甲基乙酸酯-异丁烯酸酯共聚物作为聚乙烯的衍生物可用作助悬剂;和增塑剂例如邻苯二甲酸酯等可用作助悬剂。
术语“药物组合物”是指本文公开的化合物与其他化学成分的混合物,例如稀释剂或载体。该药物组合物使化合物向有机体的给药变得容易。本领域存在的多种化合物给药技术包括但不限于,口服给药、注射给药、气雾剂给药、胃肠外给药和局部给药。药物组合物也可以通过将化合物与无机或有机酸例如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸、甲磺酸、乙磺酸、对甲苯磺酸、水杨酸等反应而获得。
术语“载体”定义为能促进化合物进入细胞或组织的化合物。例如二甲亚砜(DMSO)是常用的载体,因为其促进生物体的细胞或组织吸收多种有机化合物。
术语“稀释剂”定义为在水中稀释的化合物,其能溶解感兴趣的化合物和使该化合物的生物学活性形式稳定。在缓冲溶液中溶解的盐在本领域中用作稀释剂。一种常用的缓冲溶液是磷酸盐缓冲盐水,因为其模拟了人血液中的盐类环境。由于缓冲盐可以在低浓度控制溶液的pH值,因此缓冲稀释剂很少影响化合物的生物活性。
术语“生理学可接受的”定义为不会使化合物的生物活性和性质消失的载体或稀释剂。
本文描述的药物组合物本身可以向人类患者施用,或者在组合物中向患者施用,在该组合物中它们与作为联合治疗的其他活性成分、或适当的载体或赋形剂混合。本申请化合物的制剂和给药技术可在“Remington’s Pharmaceutical Sciences,”Mack Publishing Co.,Easton,PA,18th edition,1990中找到。
适当的给药途径可包括,例如口服给药、直肠给药、经粘膜给药、局部给药或者肠内给药;胃肠外递送,包括肌内注射、皮下注射、静脉注射、髓内注射,和鞘内注射、直接心室内注射、腹膜内注射、鼻内注射或眼内注射。为了持久地和/或以预定速度定时地、脉冲式给药,化合物还可以以缓释或控释剂型施用,包括贮库注射剂、渗透泵、丸剂、经皮(包括电转运)贴剂等。
本发明的药物组合物可以本身已知的方式制备,例如通过常规的混合、溶解、制粒、制作锭剂、研磨、乳化、包封、截留(entrapping)或压片方法。
因此,用于本发明的药物组合物可以常规方式制备,使用一种或更多种包含能使活性化合物容易处理成可以在药学上使用的制剂的赋形剂和助剂的生理学可接受的载体。适当的制剂依赖于所选择的给药途径。可使用本领域适当的和了解的任何公知的技术、载体和赋形剂;例如上述Remington’s Pharmaceutical Sciences中的那些。
注射剂可以制备成常规形式,如液体溶液或混悬剂、适用于注射前的溶液或液体中的混悬剂的固体形式,或者乳剂。适合的赋形剂是,例如水、盐水、葡萄糖、甘露醇、乳糖、卵磷脂、白蛋白、谷氨酸钠、盐酸半胱氨酸等。除此之外,如果需要,可注射药物组合物可包含少量的无毒辅助物质,例如湿润剂、pH缓冲剂等。 生理学相容的缓冲剂包括,但不限于Hanks’s溶液、Ringer’s溶液或生理盐水缓冲剂。如果需要,可使用吸收增强制剂(例如脂质体)。
对于经粘膜给药来说,可在制剂中使用适合于要渗透屏障的渗透剂。
胃肠外给药的药物制剂,例如通过推注(blous injection)或连续输注,包括水溶形式活性化合物的水溶液。另外,活性化合物的混悬剂可制成适当的含油注射混悬剂。合适的亲脂性溶剂或赋形剂包括脂肪油例如芝麻油,或者其他有机油例如大豆油、圆柚油或杏仁油,或者合成脂肪酸酯,例如油酸乙酯或甘油三酯,或者脂质体。含水注射混悬剂可包含能增加混悬剂粘度的物质,例如羧甲基纤维素钠、山梨醇或葡聚糖。任选地,混悬剂还可包含适当的稳定剂或增加化合物溶解度以允许制备高浓度溶液的试剂。用于注射的制剂可以具有额外防腐剂的单位剂型的形式存在,例如在安瓿或多剂量容器中。组合物可采用位于油性或含水载体中的混悬剂、溶液或乳剂的形式,并且可包含配方试剂(formulatory agents)例如助悬剂、稳定剂和/或分散剂。可选择地,活性成分可以是用于使用前用适当载体如灭菌无热原水重构的粉末形式。
对于口服给药来说,通过将活性化合物与本领域公知的药学可接受的载体组合可以容易地将化合物制成制剂。这些载体能使本发明的化合物制成被需要治疗的患者口服摄取的片剂、丸剂、锭剂、胶囊、液体、凝胶剂、糖浆剂、膏剂、混悬剂等。口服使用的药物制剂可以通过下述方法获得:将活性化合物与固体赋形剂组合,任选研磨所得混合物,和处理颗粒混合物,如果需要的话,随后加入适当的助剂,以获得片剂或锭剂核。特别地,合适的赋形剂是填充剂如糖,包括乳糖、蔗糖、甘露醇或山梨醇;纤维素制品例如,玉米淀粉、小麦淀粉、大米淀粉、马铃薯淀粉、明胶、黄蓍树胶、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羧甲基纤维素钠和/或聚乙烯吡咯酮(PVP)。如果需要,可加入崩解剂,例如交联聚乙烯吡咯烷酮、琼脂、或海藻酸或其盐例如海藻酸钠。为锭剂核提供适当的包衣。为此目的,可使用浓缩的糖溶液,该糖溶液可任选地包含阿拉伯胶、滑石、聚乙烯吡咯烷酮、carbopol凝胶、聚乙二醇、和/或二氧化钛、漆溶液(lacquer solutions)和适当的有机溶剂或溶剂混合物。为了识别或表征活性化合物剂量的不同组合物,可将染料或颜料加入到片剂或锭剂包衣中。为此目的,可使用浓缩的糖溶液,该糖溶液可任选地包含阿拉伯胶、滑石、聚乙烯吡咯烷酮、carbopol凝胶、聚乙二醇、和/或二氧化钛、漆溶液和适当的有机溶剂或溶剂混合物。为了识别或表征活性化合物剂量的不同组合物,可将染料或颜料加入到片剂或锭剂包衣中。
可口服使用的药物制剂包括由明胶制成的推入配合(push-fit)胶囊,和由明胶和例如甘油或山梨醇的增塑剂制成的软的、密封胶囊。推入配合胶囊可以包含活性成分与填充剂例如乳糖,粘合剂例如淀粉,和/或润滑剂例如滑石或硬脂酸镁,以及任选的稳定剂的混合物形式。在软胶囊中,活性化合物可在适当的液体中溶解或混悬,例如脂肪油、液体石蜡或液体聚乙二醇。除此之外,可以加入稳定剂。所有用于口服给药的制剂都应当是适合于所述给药的剂量。
对于口腔给药来说,组合物可采用以常规方式制成的片剂或锭剂的形式。
对于吸入给药来说,本发明使用的化合物以包装在加压部件或喷雾器中的气雾剂形式方便地递送,同时使用适当的推进剂,例如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷、二氯四氟乙烷、二氧化碳或其他适当的气体。对于加压气雾剂,剂量单位可通过提供阀门以递送确定的量来确定。例如,用于吸入器或吹入器的明胶胶囊和药筒可被制成包含化合物和适当粉末基质例如乳糖或淀粉的粉末混合物。
本文进一步公开的是药物领域公知的各种药物组合物,这些组合物用于包括眼内、鼻内和耳内递送的用途。适于这些用途的渗透剂在本领域中通常是已知的。眼内递送的药物组合物包括活性化合物水溶形式的含水眼用溶液,例如滴眼剂,或者gellan胶(Shedden等人,Clin.Ther.,23(3):440-50(2001))或水凝胶(Mayer等人,Ophthalmologica,210(2):101-3(1996))的形式;眼用软膏;眼用混悬剂,例如微粒,混悬在液体载体介质中的含药小聚合颗粒(Joshi,A.,J.Ocul.Pharmacol.,10(1):29-45(1994)),脂溶性制剂(Alm等人,Prog.Clin.Biol.Res.,312:447-58(1989)),和微球(Mordenti,Toxicol.Sci.,52(1):101-6(1999));和眼用嵌入剂。上述提及的所有参考文献的全部内容均通过援引引入本文。为了稳定和舒适,最经常和最优选地将这些适当的药物制剂制成无菌、等渗和缓冲的形式。鼻内递送的药物组合物还可包括常被制成在各个方面模拟鼻分泌物的滴剂和喷剂,以确保维持正常的纤毛作用。如Remington’s Pharmaceutical Sciences,18thEd.,Mack Publishing Co.,Easton,PA(1990)中公开的,其全部内容通过援引引入本文,并且是本领域技术人员所公知的,合适的制剂最经常和最优选是等渗的,轻微缓冲的以维持5.5至6.5的pH值,最经常和最优选包含抗微生物的防腐剂和适当的药物稳定剂。耳内递送的药物制剂包括耳朵内局部应用的混悬剂和软膏剂。耳用制剂的一般溶剂包括甘油和水。
化合物还可制成直肠组合物例如栓剂或保留灌肠剂,例如包含常规的栓剂基质例如可可豆脂或其他甘油酯。
除了前面描述的制剂外,本发明的化合物还可制成贮库制剂。这样的长效制剂可通过植入(例如皮下植入或肌内植入)或肌内注射而施用。因此,例如,化合物可与适当的聚合材料或疏水的材料(如作为可接受油中的乳剂)或离子交换树脂一起制成制剂,或者作为略溶的衍生物,例如作为略溶的盐。
对于疏水性化合物,适合的药用载体可为包含苯甲醇、非极性表面活性剂、水可混合的有机聚合物和水相的共溶剂系统。通常使用的共溶剂系统是VPD共溶剂系统,其是3%w/v的苯甲醇、8%w/v的非极性表面活性剂Polysorbate 80TM和65%w/v的聚乙二醇300,并用无水乙醇加至规定体积组成的溶液。自然地,在不破坏溶解度和毒性特性的前提下,共溶剂系统的组成比例可以显著改变。而且,共溶剂成分可变化:例如,其他低毒的非极性表面活性剂可代替POLYSORBATE 80TM使用;聚乙二醇的含量大小可变化;其他生物相容的聚合物可代替聚乙二醇,例如聚乙烯吡咯烷酮;其他的糖或多糖可代替葡萄糖。
可选择地,可使用用于疏水性药物化合物的其他递送系统。脂质体和乳剂是公知的用于疏水药物的递送赋形剂或载体的实例。尽管通常以更大的毒性为代价,某些有机溶剂例如二甲亚砜也可使用。另外,这些化合物可使用缓释系统递送,例如包含治疗药物的固体疏水聚合物的半透性基质。各种缓释材料已经被确定,并且是本领域技术人员公知的。根据其化学性质,缓释胶囊可在数周至超过100天的时间内释放化合物。根据治疗试剂的化学性质和生物稳定性,可使用额外的策略用于稳定蛋白质。
可使用本领域普通技术人员公知的技术施用打算在细胞内给药的药物。例如,这些药物可包封入脂质体中。含水溶液中存在的所有分子在脂质体形成的时候掺入到水内部。因为脂质体与细胞膜融合,因此脂质体成分与外部微环境隔离,并被有效地递送到细胞质中。可使用组织特异性抗体对脂质体包衣。脂质体将选择性地靶向到所期望的器官并被其吸收。可选择地,小的疏水性有机分子可直接细胞内给药。
可向药物组合物加入另外的治疗剂或诊断剂。可选择地或额外地,药物组合物可与包含其他治疗剂或诊断剂的其他组合物联合。给药方法
化合物或药物组合物可通过任何适合的方式向患者施用。非限制性给药方法的实例包括,(a)通过口服途径给药,该给药方法包括以胶囊、片剂、颗粒、喷雾剂、糖浆剂、或其他此类形式给药;(b)通过非口服途径给药,例如直肠、阴道、尿道内、眼内、鼻内或耳内给药,该给药方法包括以含水混悬剂、含油制剂等,或者以滴剂、喷雾剂、栓剂、药膏、软膏等形式给药;(c)通过注射给药,皮下注射、腹膜内注射、静脉注射、肌内注射、皮内注射、眼眶内注射、囊内注射、脊柱内注射、胸骨内注射等,包括输注泵递送;(d)局部性给药,例如通过直接在肾脏内或心区注射,例如通过贮库植入剂给药;和(e)局部给药;当本领域技术人员认为适于将本发明的化合物与活组织接触时,以及其它给药方法。
适合于给药的药物组合物包括其中包含获得预期目的有效量的活性成分的组合物。作为剂量需求的本文公开化合物的治疗有效量将取决于给药途径,受治疗动物的类型,包括人,和被考察特定动物的体格特征。可以特别制定剂量以获得所需效果,但是将取决于这样的因素,如体重、饮食、同时施用的药物疗法和医学领域的技术人员将认识到的其他因素。更特别地,治疗有效量是指有效预防、减轻或改善疾病的症状或者延长受试者生存的化合物的量。确定治疗有效量在本领域技术人员的能力范围内,特别是在本文具体公开的教导上。
有用的体内给药剂量和特别的给药模式将根据年龄、体重和受治疗哺乳动物的种类、所使用的具体化合物和所使用化合物的特定用途而变化,这对本领域技术人员来说是很明显的。本领域技术人员可以使用常规药理学方法来测定有效剂量水平,即获得所希望结果需要的剂量水平。通常,产品的人类临床应用以较低剂量水平开始,剂量水平逐步增加直至获得所需效果。可选择地,利用已建立的药理学方法,可接受的体外研究可以用于确立本发明方法鉴定的组合物的有用剂量和给药途径。
在非人动物研究中,有效产品的应用以较高剂量水平开始,剂量水平逐步降低直至不再获得所需效果或者不良副作用消失。取决于所需效果和治疗适应症,剂量可在很宽的范围内变化。通常,剂量可为约10微克/kg至100mg/kg体重,优选约100微克/kg至10mg/kg体重。可选择地,如本领域技术人员所理解,剂量可以患者表面积为基础和计算。
个体医师可根据患者的状况选择本发明的药物组合物的确切的制剂、给药途径和剂量。(参见例如Fingl等人,1975,“ThePharmacological Basis of Therapeutics”中,其全部内容通过援引引入本文,特别援引第1章第1页)。通常,向患者施用的组合物的剂量范围可以是约0.5至1000mg/kg患者体重。根据患者的需要,剂量可以是在一日或更多日之内单次或一系列两次或更多次给药。当对于至少一些状况已经确定了化合物的人类剂量时,本发明将使用相同的剂量,或者是已确定的人类剂量的约0.1%至500%,更优选约25%至250%的剂量。当没有已确定的人类剂量时,如对于新发现的药物化合物的情况,可以从动物毒性研究和有效性研究中取得的ED50或ID50值,或者从体外或体内研究得到其他适当的值推断出合适的人类剂量。
应当注意的是由于毒性或者器官功能异常,主治医师知道如何和何时终止、中断或调整给药。相反地,如果临床响应不够(毒性除外),主治医师也知道将给药调整到更高的水平。在所关注的状况的治疗过程中,给药剂量的大小将随着要治疗状况的严重程度和给药途径变化。例如,状况的严重性可部分通过标准的预后评价方法评估。而且,剂量和大概给药频率将根据个体患者的年龄、体重和响应而变化。在兽医学中可使用与上述所讨论类似的方案。
尽管准确的剂量将以“药物通过药物”(drug-by-drug)的基础来确定,但是在多数情况下,可以对剂量进行一些概括。对成年人类患者来说,例如,每日给药方案可以是每种活性成分0.1mg/m2至2000mg/m2体表面积每天的口服剂量,通常是1mg/m2至500mg/m2体表面积每天,例如5mg/m2至200mg/m2体表面积每天。在其他实施方式中,各种活性成分的静脉、皮下或肌内剂量是0.01mg/m2至100mg/m2体表面积每天,通常是0.1mg/m2至60mg/m2体表面积每天,例如,可以使用1mg/m2至40mg/m2体表面积每天的剂量。以药学可接受的盐给药时,剂量可以游离碱的形式计算得出。在一些实施方式中,组合物每日给药1至4次。可选择地,本发明的组合物可通过连续静脉输注的方式给药,各种活性成分的剂量优选最高至1000mg/m2体表面积每天。如本领域技术人员将理解的那样,在某些情况下,需要以超出或者远远超出上述优选剂量范围的量施用本文公开的化合物以有效地和积极性地治疗特别恶性的疾病或感染。在一些实施方式中,化合物将在一段连续治疗的时期内施用,例如一周或更多,或者几个月或几年。
可单独调整给药量和间隔以提供足以维持治疗效果或最低有效浓度(MEC)的活性部分血浆水平。每种化合物的MEC将变化,但是可根据体外数据估计。获得MEC所需要的剂量将取决于个体的特性和给药途径。无论如何,HPLC测定法或生物测定法可用于确定血浆浓度。
利用MEC值还可以确定给药间隔。应当使用能维持血浆水平在10-90%时间高于MEC的方案来施用组合物,通常30-90%,最通常50-90%。
对于局部性给药或者选择性吸收,药物的有效局部浓度可与血浆浓度不相关。
所施用组合物的量取决于受治疗的受试者、受试者的体重、痛苦的严重程度、给药方式和处方医师的判断。
利用已知方法可以评估本文公开化合物的效能和毒性。例如,特定化合物或者共享某些化学部分的化合物亚组的毒理学可通过测定对细胞系的体外毒性而确定,例如哺乳动物细胞系,优选人细胞系。这类研究的结果经常可以预测对动物的毒性,例如哺乳动物,或更特别地,人。可选择地,可使用已知方法确定动物模型中特定化合物的毒性,例如小鼠、大鼠、家兔或猴子。使用几种公认的方法可确定特定化合物的效能,例如体外方法、动物模型、或人临床试验。几乎每种状况都存在公认的体外模型,包括但不限于癌症、心血管疾病和各种免疫功能异常。相似地,可接受的动物模型可用于确定用于治疗这些状况的化学物质的效能。当选择模型来测定效能时,本领域技术人员可以受到本领域状况的引导而选择适当的模型、剂量、和给药途径、和给药方案。当然,人临床试验也可以用于测定化合物对人类的效能。
如果需要,本发明的组合物可存在于包装或分配装置中,其可包含一种或更多种包含活性成分的单位剂量。包装可例如包含金属或塑料箔,例如罩泡包装(blister pack)。包装或分配装置也可附带给药说明书。包装或分配装置也可附带连同容器的告示,该告示以管理药物制造、使用或销售的政府机构规定的形式,其中告示反应了该机构批准的人用或兽用药物形式。例如,这样的告示可以是美国食品与药品管理局对处方药批准的标签,或者是批准的产品说明书(productinsert)。还可将包含本发明化合物的组合物制备到相容的药物载体中,放入适当的容器中,标明所治疗的适应症。
在整个说明书当中,特定化合物的任何详细描述应当被理解为包括该化合物和其任何(其他)药学可接受的盐。
在BER的第一步骤中,一连串的糖基化酶识别异常的碱基例如N3 mA和N7 mG(O’Connor等人,“Isolation and structure of acDNA expressing a mammalian 3-methyladenine-DNA glycosylase”EMBO J.9:3337-3342,1990;Samson等人,“Cloning andcharacterization of a 3-methyladenine DNA glycosylase cDNA fromhuman cells whose gene maps to chromosome 16”Proc.Natl.Acad.Sci.USA 88:9127-9131,1991)、T:G 错配(Neddermann等人“Functionalexpression of soluble human interleukin-11(IL-11)receptor alpha andstoichiometry of in vitro IL-11 receptor complexes with gp 130”J.Biol.Chem.271:12767-12774,1996)、和脱氨碱基例如次黄嘌呤/被氧化的8-氧-7,8-二氢鸟嘌呤或尿嘧啶:A(Vollberg等人“Isolation andcharacterization of the human uracil DNA glycosylase gene”Proc.Natl.Acad.Sci.USA 86:8693-8697,1989;Olsen等人“Molecular cloning ofhuman uracil-DNA glycosylase,a highly conserved DNA repair enzyme”EMBO J.8:3121-3125,1989;Radicella等人“Cloning andcharacterization of hOGG1,a human homolog of the OGG1 gene ofSaccharomyces cerevisiae”Proc.Natl.Acad.Sci.USA 94.8010-8015,1997;Rosenquist等人“Cloning and characterization of a mammalian8-oxoguanine DNA glycosylase”Proc.Natl.Acad.Sci.USA94:7429-7434,1997)。N-糖苷键经过酶或者自然水解和释放异常碱基之后,AP(无嘌呤/无嘧啶)核酸内切酶水解磷酸二酯主链5′导致损伤,并且dRpase(一种DNA脱氧核糖磷酸二酯酶,其活性与聚合酶β相关)切除残留的dRp,产生一个核苷酸缺口。DNA聚合酶β填补了缺口,DNA连接酶封住切口。这个途径称为短补缀BER。BER可替换的途径包括DNA合成以填补2至13个核苷酸的缺口。该长补缀修复需要增殖细胞核抗原(PCNA)和PCNA-依赖的DNA聚合酶(Wilson“Mammalian base excision repair and DNA polymerase beta”MutationRes.407:203-215,1998)。
多-(ADP-核糖)-聚合(PARP)通过本身或与XRCC1相互作用而充当DNA链断裂的切口传感器,参与BER。PARP与受损的DNA结合,产生自动核糖基化作用。然后经修饰的蛋白释放和允许其他蛋白质进入并修复DNA链断裂(Wilson“Mammalian base excision repairand DNA polymerase beta”Mutation Res.407:203-215,1998;Molinete等人,“Over production of the poly(ADP-ribose)polymeraseDNA-binding domain blocks alkylation-induced DNA repair synthesis inmammalian cells”EMBO J.12:2109-2117,1993;Caldecott等人,“XRCCI polypeptide interacts with DNA polymerase β and possibly poly(ADP-ribose)polymerase,and DNA ligase III is a novel molecular‘nick-sensor’in vitro”Nucleic Acids Res.24:4387-4394,1996)。因此,切口形成之后PARP在短补缀和长补缀修复中参与BER。看起来BER在可替代(长补缀修复)途径中最有效。图6显示了培美曲塞和MX的联合增加了断裂的PARP形成。DNA双链断裂和凋亡的增加不依赖Bcl-2途径。
通常,下文使用的命名和下面描述的在细胞培养、组织培养、肿瘤生物学和分子遗传学方面的实验室操作在本领域中是公知和常用的。使用标准技术用于细胞培养方法、试验设计和化合物制剂及命名。根据制造商的说明书来进行一般的化学反应和纯化步骤。通常根据本领域的常规方法和各种一般性参考文献来完成这些技术和操作(通常参见Sambrook等人,Molecular Cloning:A Laboratory Manual,2d ed.(1989)Cold Spring Harbor Laboratory Press,Cold Spring Harbor,N.Y.,和Current Protocols in Molecular Biology(1996)John Wiley andSons,Inc.,N.Y.,其通过援引引入本文),这些技术和方法遍布在该文献当中。那其中包含的所有信息通过援引引入本文。
培美曲塞(2-[4-[2-(4-氨基-2-氧-3,5,7-三氮杂二环[4.3.0]壬-3,8,10-三烯-9-基)乙基]苯甲酰基]氨基戊二酸)(ALIMTATM;Eli Lilly& Co.)是具有下述结构的抗代谢化学治疗药物:
培美曲塞是通过破坏细胞复制所需的叶酸依赖性机制而起作用的抗叶酸剂抗肿瘤药。培美曲塞抑制胸核苷酸合成酶(TS)、二氢叶酸还原酶(DHFR)和甘氨酰胺核糖核苷酸转甲酰酶(GARFT)、参与胸苷和嘌呤核苷酸从头生物合成的酶。培美曲塞被FDA批准用于治疗非小细胞肺癌和被批准与顺铂(以铂为基础的化疗药物)联合治疗恶性胸膜间皮瘤。治疗间皮瘤(与顺铂联用)或非小细胞肺癌的推荐剂量是约500mg/m2体表面积每天,作为静脉输注剂在每个21-天周期的第一天施用超过10分钟。对于和甲氧胺的治疗联用,培美曲塞代表性的剂量范围通常是200mg/m2至1,000mg/m2体表面积每天,或者500mg/m2至600mg/m2体表面积每天;甲氧胺代表性的剂量范围是1至200mg/m2体表面积每天,或者6至120mg/m2体表面积每天。在一个实施方式中,培美曲塞以和如上描述相同的方式施用;然而,静脉输注可进行超过15分钟、20分钟、30分钟、45分钟、60分钟或更长时间,并且可在第1天进行,加上给定周期的一个或更多个额外的天数,给定周期可以是1周、2周、3周、1月或更长。
实施例
材料和方法
化学物质和试剂。甲氧胺(MX)购自Sigma(ST.Louis,Mo.)。MX溶于无菌水(pH 7.0)中。
蛋白质印迹法(Western Blotting)用于探测PARP断裂。150V条件下在Bio-Rad微型胶装置中用SDS-PAGE(12%聚丙烯酰胺)溶解细胞提取物1小时。在100V条件下使用Bio-Rad微型转移印迹槽(mini Trans-Blot cell)1小时,将蛋白质转移到PVDV膜上。用15TBS缓冲溶液中的5%的奶粉阻断沾上印迹的膜,然后用抗-PARP抗体C2-10(Trevigen,Gaithersburg,Md.)探测2小时。用TBS-Tween20(0.05%)洗涤三个5分钟后,用第二种抗体抗-小鼠HRP-抗IgG培养印迹1小时(Amersham Life Science,Arlington Height Ill.)。根据制造者的说明书(Amersham Life Science,Arlington Heights,Ill.)用ECL使抗体结合显现。
裸小鼠肿瘤。将肿瘤细胞(5x106)注射到6-8周龄的雌性无胸腺HSD裸小鼠的侧腹部。动物接受每日5次下列腹膜内注射:盐水、单独的培美曲塞(150mg/kg)、单独的MX(4mg/kg),或者培美曲塞与MX比例为26.7∶1.0的培美曲塞(150mg/kg)和MX(4mg/kg)联合。以测径器测量肿瘤,使用National Cancer Institute公式:V=L(mm)xI2(mm)/2,其中L是肿瘤的最大直径,I是肿瘤的最小直径。当肿瘤的体积达到约100-150mm3时,荷瘤小鼠被随机指定用于对照组或治疗组(6-9只小鼠/组)。
实施例1
图8显示在人NCI-H460 NSCLC细胞系模型、A549 NSCLC细胞系模型、HCT116结肠癌细胞系模型和MDA-MB-468乳腺癌细胞系模型中,所有接受甲氧胺(MX)+培美曲塞的组比单独接受培美曲塞的组表现出更强的肿瘤生长延迟。MX逆转了NCI-H460 NSCLC细胞系和HCT116结肠癌细胞系对培美曲塞化学治疗效果的耐药性。
实施例2
为了测定培美曲塞+甲氧胺(MX)相对于单独培美曲塞对产生AP位点数量的影响,使用醛反应性探针(ARP)试剂来测定由培美曲塞形成的和由MX阻断的AP位点。ARP和MX对AP位点具有相似的反应性,它们尤其与醛基反应,醛基是AP位点的一种开环形式。这样的测定发描述于Liu等人,(Molecular Cancer Therapeutics2:1061-1066,2003)中,并基本根据Nakamura等人,(Cancer Res.58:222-225,1998)的描述进行操作。用培美曲塞(0、100、200或400μm)处理H460细胞24小时。然后从细胞中提取DNA(15μg),并在37℃下用1mM ARP培养10分钟。用乙醇沉淀和洗涤DNA,然后重悬于TE缓冲液(10mM Tris-HCl,pH 7.2,1mM EDTA)中,在100℃下使之变性5分钟。然后迅速在冰上冷冻DNA,并与等量的醋酸铵(2M)混合。然后使用真空过滤装置在硝酸纤维素膜上固定单链DNA。室温下用抗生蛋白链菌素-结合的辣根过氧化物酶培养该膜30分钟,用洗涤缓冲液(20mM Tris-HCl,1mM EDTA,0.26M NaCl,1%Tween-20)漂洗。用ECL试剂(Amersham,Piscataway,NJ)使ARP-AP位点显现。结果显示在4A中。100、200和400μM剂量的培美曲塞诱导AP位点的形成,AP位点诱导作用程度与培美曲塞剂量成比例(图4A)。在培美曲塞中加入MX与单独培美曲塞相比显著地减少了可探测AP位点的数量。在24小时、48小时和72小时观察200μM培美曲塞和6mMMX的联合效果。结果显示在图4B中。随着时间的过去,单独培美曲塞组和培美曲塞与MX联合组都减少了可探测的AP位点的数量。
概括来说,培美曲塞诱导AP位点的形成,而培美曲塞和100μM MX的联合将可探测AP位点降低到对照水平,这并不是AP位点缺失的原因,而是由于AP位点被MX所占据,致使它们不能被APR利用。AP位点的占据是时间依赖性的,这表明持续的MX水平对于最大效果来说是必需的。
实施例3
使用DNA链断裂测定法来测定培美曲塞和甲氧胺(MX)增加由细胞凋亡和DNA链断裂介导的肿瘤细胞死亡的能力。彗星分析测定法描述在Liu等人(前文)中,其基于在电场影响下变性的、断裂的DNA片段迁移出细胞的能力。当通电流时,未受损的DNA移动较慢,并且其保留在细胞核区域范围内。基于对DNA“彗星”拖尾形状和迁移距离的评估来评价细胞内DNA损伤(Helma等人,,Mutat.Res.466:9-15,2000)。在各自暴露于200μM培美曲塞、6mM MX或200μM培美曲塞+6mM MX 4小时之后采集细胞并用PBS洗涤。在42℃下,以1∶10(v/v)比例将H460细胞的混悬液(1x105/ml冷PBS)与1%低胶凝温度琼脂糖混合,迅速用移液管将75μl转移到彗星载玻片(CometSlide)(Trevigen,Inc.,Gaithersburg,MD)上。当放置低胶凝温度琼脂糖之后,在4℃下将载玻片沉入预冷的溶胞缓冲液(10mMTris-HCl,pH 10.5-11.5,2.5M NaCl,100mM EDTA,包含使用前加入的1%Triton X-100)1小时。溶胞后,用蒸馏水洗涤载玻片,将其纵向排列在电泳槽中,沉入碱性缓冲液(50mM NaOH,pH 12-12.5,1mMEDTA)30分钟。然后在18V(0.6V/cm)、250mA的条件下,使载玻片在碱性(pH>13,300mM NaOH,1mM EDTA)和中性溶液(1XTBE)中电泳25分钟。碱性电泳探测的是从AP位点和其他对碱性不稳定的DNA加合物产生的单链和双链DNA断裂,而中性电泳主要探测的是双链DNA断裂。取出载玻片,用中和缓冲液(0.5M Tris-HCl,pH 7.5)洗涤10分钟,然后用PBS洗涤,之后将其在室温下过夜风干。根据制造者的说明书利用银染色试剂盒(Trevigen)将DNA染色。使用Olympus显微镜观察彗星。用数码相机捕获图象并利用NIH图象软件分析。
彗星图象显示在图1 A(碱性测定法)和1B(中性测定法)中。用培美曲塞和MX处理之后,观察不同的彗星,其拖尾长度是用单独MX处理长度的大约4倍,是用单独培美曲塞处理长度的大约2倍(图1C-D)。
来自异种嫁接有效性研究、AP位点测定法和彗星测定法的结果显示,MX充当了AP位点的结构性调节剂,通过逆转对化疗的耐药性,增强了抗代谢药培美曲塞的治疗效果,从而产生协同作用。
实施例4
分析AP位点或MX-AP位点对拓扑异构酶II-介导的DNA切割的影响。位置-特异性无嘌呤位点通过下列步骤而引入:用脱氧尿苷在拓扑异构酶II切割部位替换单核苷,然后用尿嘧啶-DNA糖基化酶除去尿嘧啶碱基,产生AP位点,进一步用MX培养该AP位点以制备MX-AP位点(图5A)。
首先,确定APE是否在规则AP位点和MX-AP位点间具有不同的效果,AP位点和MX-AP位点位于对拓扑异构酶II切割来说位置特异的位点。结果显示APE能切割规则AP位点而不能切割MX-结合的AP位点(图5B),然而,AP和MX-AP位点都可以被拓扑异构酶II切割,表明MX-AP位点能刺激拓扑异构酶II-介导的DNA切割。
实施例5
通过向Sprague Dawley大鼠(Non-GLP)快速灌注(singlebolus)给药来研究MX的口服和静脉生物利用度。进行下面描述的研究,通过比较MX快速灌注口服和静脉施用后的药代动力学参数,来评估安全剂量水平下甲氧胺(MX)的生物利用度。
试验动物 在研究过程中使用30只雄性和30只雌性体重为250-350g的7-10周龄Sprague Dawley大鼠。
给药制剂和浓度 在给药的当天配制单剂量溶液,调整检品为98%纯度,为了获得4.00mg/mL浓度的“活性”MX,在200-mL的容量瓶中将816.77mg的MX溶入5%葡萄糖中。将所制备的溶液平均分到两个琥珀色瓶中用于口服给药或静脉给药。在制备时和给药后取整分试样用于分析,用干冰运输,在<-70℃的温度下贮藏。
剂量给药 在给药那天对所有的动物称重。各个动物的剂量以该体重为基础。使用5mL/kg的恒定剂量体积。使用连接到26Gx1”针头的3-mL注射器,将静脉剂量通过快速灌注注射到尾静脉中。静脉剂量以大约2mL/min的速度给药。用连接到3-mL注射器的18Gx2”输送针头以快速灌注的方式施用口服剂量。
血样采集 在给药后5、15、30分钟和1、2、4、6、8、12和24小时采集血样,每只动物在两个时间点采集血样。在较早时间点通过颈静脉采集血样,在较后的时间点在处死动物时通过腹静脉采集血样。血液从抽取注射器(drawing syringe)转移到包含K3-EDTA作为抗凝血剂的2mL血液采集试管中,并倒转以使其混合。在用CO2安乐死之后迅速进行腹静脉血采集。
血浆样品制备和贮藏条件 在离心制备血浆之前将血液试管放置在湿冰(wet ice)上。在4℃下以3000rpm的速度将全血样品离心分离10分钟。将血浆吸取到试管中,开始放置在干冰上,随后在<-70℃的温度下贮藏。
质谱(MS) 根据如下列出的说明,通过有阳性涡轮喷雾(positive turbo spray)的电喷离子化作用进行质谱检测。MS仪器:Applied Biosystems 3000HPLC仪器:Agilent 1100 Series Binary Pump自动采样器:LEAP Technologies CTC-PAL电喷离子化(ESI)条件:温度: 500 ℃喷雾器气体: 氮气CAD气体: 氮气DP: 40帘气(curtain gas)(CUR): 10碰撞气体: 6离子喷雾电压(IS): 5000出口电位(EP): 10NEB: 12监视器:分析物: 207.0/149.3和207.0/178.4原子量IS(硝苄香豆素(Acenocoumerol)):354.2/296.0和354.2/163.1原子量HPLC条件(在Agilent 1100上进行):流动相A:0.1%甲酸水溶液流动相B:0.1%甲酸的乙腈溶液柱:Thermo Aquasil C18,50x3mm保护柱:Thermo Aquasil C18,10x4mm流速:1.0mL/min注射量:50μL梯度:时间(分) %B0.0 0%2.0 10%2.2 90%4.5 90%4.6 0%5.6 0%
血浆样品LC-MS/MS分析 在环境温度下将各个血浆样品解冻,如果不需要稀释则取250μL整分试样进行分析。在5分钟至1小时从静脉给药动物所取的样品和在15分钟至8小时从口服给药动物所取的样品需要稀释5至40倍以落入该方法的线性范围内(1至1,000ng/mL)。对于需要稀释的样品,取适当的量并与含相同抗凝血剂的空白大鼠血浆混合以达到250μL的总量。用稀释因子对定量结果进行校正。如下制备用于LC-MS/MS分析的血浆:●将各部分血浆涡旋30秒,以14,000rpm的速度离心10分钟以使干扰颗粒沉淀。●从上清液取100μL整分试样,置于1.5mL的微量离心管中。●向该100μL血浆整分试样加入310μL的水∶甲酸(2∶1)、30μL硝苄香豆素(IS)的水溶液(10μg/mL)和100μL二乙基氨基苯甲醛的2∶1水∶甲酸溶液(10mg/mL),并均匀混合。●然后将混合物在80℃的水浴中培养2小时。培养过后,将上清液转移到HPLC瓶中进行LC-MS/MS定量。
甲氧胺(MX)药代动力学和生物利用度分析药代动力学分析 以20mg/kg体重的剂量经静脉和口服将MX快速灌注给药后,在雄性和雌性Sprague Dawley大鼠中测定甲氧胺(MX)药代动力学(PK)曲线和口服生物利用度。每个给药途径有30只大鼠(15只雄性和15只雌性)用于药代动力学分析。为了获得MX药代动力学特征,在预剂量标称取样(nominal sampling)时间之时,以及给药5、15、30分钟和1、2、4、6、8、12和24小时后获取血浆样品。为了维持正常的健康状况,在预定时间点对每只大鼠最多抽血两次以产生血浆。代表性的MX浓度是通过将来自每个时间点上相同性别和给药途径的三只大鼠的值进行平均而获得的。对于平均剂量,平均实际取样时间相应地来自每个标称时间点上相同性别和给药途径的三只大鼠。平均血浆MX浓度、平均剂量、和平均实际取样时间用于每个给药途径的药代动力学分析。
利用Microsoft Excel 2000-SR1TM创建各个性别和给药途径的平均血浆MX浓度对平均取样时间曲线(图2-3)。为了药代动力学建模的目的,所记载的低于可定量范围(BQL)或者检测不到的血浆MX浓度,即便有也认为是0.00ng/mL。
通过WinNonlin 5.1(Pharsight Corporation,Mountain View,CA)使用无房室模型进行药代动力学参数分析。药代动力学参数包括最大血浆浓度(Cmax)、最大血浆浓度的时间(Tmax)、清除半衰期(t1/2)、从时间零点至最后可测量血浆浓度的血浆浓度对时间曲线下的面积(AUClast),和从时间零点延伸至无穷的血浆浓度对时间曲线下的面积(AUC0-∞)。为了比较,AUC0-∞被标准化至5mg标称总MX剂量(AUC0-∞5)。药代动力学参数以先前陈述的方式缩写。
生物利用度分析 以Microsoft Excel 2000-SR1TM利用下述方程式,由口服与静脉甲氧胺(MX)AUC0-∞的比值(标准化至总剂量5mg的MX)来确定绝对口服生物利用度(MX=TRC102):在静脉给药组中雄性和雌性大鼠的实际MX剂量水平分别是20.1mg/kg和20.1mg/kg,在口服给药组中雄性和雌性大鼠的实际MX剂量水平分别是19.9mg/kg和20.0mg/kg。
药代动力学和生物利用度 表1中列出了以20mg/kg体重的剂量经静脉和口服快速灌注给药后雄性和雌性Sprague Dawley大鼠的甲氧胺(MX)药代动力学参数。表1以20mg/kg体重的剂量经静脉和口服快速灌注给药MX后雄性和雌性Sprague Dawley大鼠的血浆MX药代动力学参数。 aAUC0-∞5(ng/mL*hr)是通过将AUC0-∞(ng/mL*hr)标准化至总剂量5mg MX得到的。
对于静脉和口服给药的雄性大鼠来说,在整个24小时的取样时期内血浆中都具有可定量的MX浓度。目检雄性静脉平均血浆MX浓度与平均时间曲线显示了快速的分布相,这在给药后大约2小时完成。静脉途径Cmax为15,510ng/mL,并在推注给药完成时立即产生。如AUClast和AUC0-∞所表明的,全身性MX接触分别为12,518ng/mL*hr和12,706ng/mL*hr。被调整为标称总剂量5mg的静脉AUC0-∞(AUC0-∞5)为11,284ng/mL*hr。
对于口服给药途径的雄性大鼠来说,MX吸收迅速,Tmax为1.0小时。2,205ng/mL的Cmax被认为比静脉给药途径低。如口服AUClast和AUC0-∞所表明的,全身性MX接触分别为13,596ng/mL*hr和13,811ng/mL*hr。被调整为标称总剂量5mg的口服AUC0-∞(AUC0-∞5)为12,420ng/mL*hr。清除半衰期很短,类似介于两种给药途径之间(静脉:5.2hr,口服:4.2hr)。雄性Sprague Dawley大鼠经口服给药所计算出的绝对生物利用度是110%。
对于静脉和口服给药的雌性大鼠来说,在整个24小时的取样时期内都具有可定量的MX血浆浓度。与雄性大鼠相似,目检雌性静脉平均血浆MX浓度与平均时间曲线显示了快速的分布相,这出现在给药后大约2小时。静脉途径Cmax为10,965ng/mL,在推注给药完成时立即出现。如AUClast和AUC0-∞所表明的,全身性MX接触分别为12,971ng/mL*hr和13,142ng/mL*hr。被调整为标称总剂量5mg的静脉AUC0-∞(AUC0-∞5)为13,892 ng/mL*hr。
对于口服给药途径的雌性大鼠来说,MX吸收迅速,Tmax为0.5小时。2959ng/mL的Cmax显著低于静脉途径,这也与口服给药途径的雄性大鼠相似。如口服AUClast和AUC0-∞所表明的,全身性MX接触分别为11,643ng/mL*hr和12,029ng/mL*hr。被调整为标称总剂量5mg的口服AUC0-∞(AUC0-∞5)为13,047ng/mL*hr。清除半衰期很短,类似介于两种给药途径之间(静脉:4.6hr,口服:5.7hr),且与雄性大鼠相当。雌性Sprague Dawley大鼠所计算出的绝对生物利用度是94%。
以20mg/kg体重(BW)剂量静脉或口服给药的大鼠没有显示临床毒性迹象。
在雄性和雌性Sprague Dawley大鼠中,以20mg/kg BW剂量经快速灌注口服给药施用的MX被迅速(Tmax 0.5-1.0hr)和完全地吸收,全身绝对生物利用度为大约100%。尽管口服MX Cmax明显低于静脉Cmax,但是如AUClast和AUC0-∞所示,两种给药途径之间全身MX接触是相似的。而且,口服给药后在各个时间点血清水平超过了与在人癌症小鼠模型中活性相关的目标Cmax值(50ng/mL),这将允许使用每天一次或每天两次的给药方案。
这些数据在下述方面是显著的,即它们表明甲氧胺完全口服生物有效并具有4-6小时的半衰期,这允许每天一次或每天两次给药而获得最低有效浓度。这些发现是意外的。足量的多数抗癌药口服都是不可生物利用的从而不允许口服给药。应当注意的是口服施用其他特别抗癌药的尝试获得了比本文低得多的生物利用度。参见例如博来霉素、卡铂、顺铂、奥沙利铂、紫杉醇、雷替曲塞(一种抗叶酸剂)、托泊替康、长春碱、长春新碱、长春瑞滨,所有这些抗癌药具有低于50%的生物利用度(Chu E and DeVita VT.Physicians’CancerChemotherapy Drug manual 2002.Boston:Jones and Bartlett Publishers,2002),第二,证明的半衰期比分子量<100道尔顿的小分子的预期半衰期长,这些小分子容易与可存在于血浆中的醛发生反应,并且比预期更长的血浆半衰期允许每天一次或每天两次口服给药方案具有持续的药物水平(高于最低有效浓度)。完全的生物利用度和4至6小时的半衰期可以允许对癌症患者方便的每天一次或每天两次给药方法口服给药。
通过上述描述,上述方法和组合物的各种变形可以在不脱离本发明精神和范围的情况下作出,这对本领域技术人员来说将是显而易见的。相应地,在不脱离其精神或必要特征的前提下本发明可以其他特定形式具体实施。因此,目前的实施方式和实施例在所有方面当以示例性而非限制性地被考虑,因此在权利要求等同的意义和范围内的所有改变都意欲包含在本文之内。
因此,将理解的是,没有以这些术语和表达的使用来排除所显示和描述特征的任何等同形式或者它们的一部分的意图,但是,可以认识到的是,在所请求的本发明的范围内进行各种修饰是可能的。也将理解的是各种落入一般公开范围内的较窄的种类和一般之下的(subgeneric)组也组成了本发明的部分。这包括附有从一般性中排除任何主题的条件或否定性限制从一般性中排除任何主题的本发明的一般性叙述,不管被排除的内容是否在本文中被特别叙述。
本文援引或提及的所有专利、出版物、科技文章、网站和其他文献和材料显示了本发明所属领域技术人员的技术水平,因此每个援引的文献和材料以与其各自全部内容已经通过援引的方式引入或者其全部内容已在本文阐述的相同程度通过援引由此引入。
Claims (31)
1.一种方法,包括:
提供i)被诊断患有癌症的受试者,ii)包含抗叶酸抗癌药的第一制剂和iii)包含甲氧胺的第二制剂;
向所述受试者施用所述第一制剂;和
向所述受试者施用所述第二制剂,其中甲氧胺以足够增强或增加抗叶酸抗癌药效果的量施用。
2.权利要求1的方法,其中,第二制剂以口服方式施用。
3.一种方法,包括:
提供i)被诊断患有癌症的患者,其中所述癌症至少部分对培美曲塞单独治疗耐药,ii)包含培美曲塞的第一制剂;和iii)包含甲氧胺的第二制剂;
向所述患者施用所述第一制剂;和
向所述患者施用所述第二制剂,其中甲氧胺以足够增强所述培美曲塞活性和克服所述耐药性的量施用。
4.权利要求1-3中任一项的方法,其中,所述甲氧胺和所述抗叶酸抗癌药作为一种制剂施用。
5.权利要求1-3中任一项的方法,其中,所述甲氧胺和所述抗叶酸抗癌药以任何顺序连续施用。
6.权利要求1-3中任一项的方法,其中,所述甲氧胺口服施用,所述抗叶酸抗癌药口服或静脉施用。
7.权利要求1-3中任一项的方法,其中,所述甲氧胺的量是足以使癌症细胞敏感而不引起正常细胞不适当的致敏作用的量。
8.权利要求1-3中任一项的方法,其中,施用所述甲氧胺和所述抗叶酸抗癌药以获得协同作用。
9.权利要求1-3中任一项的方法,其中,所述抗叶酸抗癌药口服或静脉施用,所述甲氧胺以足以增强所述抗叶酸抗癌药活性的量不超过每天两次口服施用。
10.权利要求1-3中任一项的方法,其中,选择患有对单独抗叶酸抗癌药治疗至少部分耐药的癌症的患者,且其中包含甲氧胺的所述第二制剂以能有效增强所述抗叶酸抗癌药活性并克服所述耐药性的量施用。
11.权利要求1-3中任一项的方法,其中,所述甲氧胺与所述抗叶酸抗癌药的比例是1∶5至1∶500。
12.权利要求11的方法,其中,所述甲氧胺与所述抗叶酸抗癌药的比例是1∶15至1∶40。
13.权利要求11的方法,其中,所述甲氧胺与所述抗叶酸抗癌药的比例是约1∶20至1∶30。
14.权利要求1-13中任一项的方法,其中所述的癌症选自:癌、黑素瘤、肉瘤、淋巴瘤、白血病、星形细胞瘤、神经胶质瘤、恶性黑色素瘤、慢性淋巴细胞性白血病、肺癌、结肠直肠癌、卵巢癌、胰腺癌、肾癌、子宫内膜癌、胃癌、肝癌、头颈部癌和乳腺癌。
15.权利要求1-14中任一项的方法,其中,所述抗叶酸抗癌药是培美曲塞。
16.在治疗被诊断患有癌症的患者的癌症的方法中,包括向患者施用抗叶酸抗癌药,
向患者以足够增强所述抗叶酸抗癌药毒性的量施用甲氧胺的改良。
17.权利要求16的改良方法,其中,所述甲氧胺和所述抗叶酸抗癌药作为一种制剂施用。
18.权利要求16的改良方法,其中,所述甲氧胺和所述抗叶酸抗癌药以任何顺序连续地施用。
19.权利要求16的改良方法,其中,所述甲氧胺口服施用,所述抗叶酸抗癌药口服或静脉施用。
20.权利要求16的改良方法,其中,所述甲氧胺的量是足以使癌症细胞敏感而不引起正常细胞不适当的致敏作用的量。
21.权利要求16的改良方法,其中,施用所述甲氧胺和所述抗叶酸抗癌药以获得协同作用。
22.权利要求16的改良方法,其中,所述抗叶酸抗癌药口服或静脉施用,甲氧胺以足以增强所述抗叶酸抗癌药活性的量每天一次或两次口服施用。
23.权利要求16的改良方法,其中,选择患有对单独抗叶酸抗癌药治疗至少部分耐药的癌症的患者,且其中包含甲氧胺的所述第二制剂以有效增强所述抗叶酸抗癌药活性并克服所述耐药性的量施用。
24.权利要求23的改良方法,其中,所述甲氧胺与所述抗叶酸抗癌药的比例是1∶5至1∶500。
25.权利要求24的改良方法,其中,所述甲氧胺与所述抗叶酸抗癌药的比例是1∶15至1∶40。
26.权利要求25的改良方法,其中,所述甲氧胺与所述抗叶酸抗癌药的比例是约1∶20至1∶30。
27.权利要求16-26中任一项的改良方法,其中,所述癌症选自:癌、黑素瘤、肉瘤、淋巴瘤、白血病、星形细胞瘤、神经胶质瘤、恶性黑色素瘤、慢性淋巴细胞性白血病、肺癌、结肠直肠癌、卵巢癌、胰腺癌、肾癌、子宫内膜癌、胃癌、肝癌、头颈部癌和乳腺癌。
28.权利要求16-27中任一项的改良方法,其中,所述抗叶酸抗癌药是培美曲塞。
29.抗癌制剂,包含含培美曲塞的剂型和含协同量甲氧胺的剂型。
30.使用权利要求29的制剂的方法,包含根据权利要求1-28中任一项的方法施用所述制剂。
31.甲氧胺的用途,用于抗叶酸抗癌药治疗患者癌症的用途,包括在所述患者中以足以增强所述抗叶酸抗癌药毒性的量使用甲氧胺。
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---|---|---|---|---|
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CN109689104A (zh) * | 2016-08-12 | 2019-04-26 | L.E.A.F.控股集团公司 | α和γ-D聚谷氨酸化抗叶酸剂及其用途 |
WO2018147437A1 (ja) * | 2017-02-10 | 2018-08-16 | 学校法人神戸学院 | 低分子医薬化合物の経粘膜吸収促進剤 |
US20210161899A1 (en) * | 2018-02-07 | 2021-06-03 | L.E.A.F. Holdings Group Llc | Gamma polyglutamated pemetrexed and uses thereof |
JP7490240B2 (ja) * | 2018-02-07 | 2024-05-27 | エル.イー.エー.エフ. ホールディングス グループ エルエルシー | ガンマポリグルタミン酸化葉酸代謝拮抗薬およびその使用 |
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Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2003070234A1 (en) * | 2002-02-19 | 2003-08-28 | Case Western Reserve University | Alkylating agent combinations in the treatment of cancer |
Family Cites Families (15)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
AU3386597A (en) * | 1996-06-11 | 1998-01-07 | Advanced Research And Technology Institute, Inc. | Methods and compositions for the use of apurinic/apyrimidinic endonucleases |
US6406917B1 (en) * | 1996-06-11 | 2002-06-18 | Advanced Research And Technology Institute | Methods and compositions for the use of apurinic/apyrimidinic endonucleases |
US6245759B1 (en) * | 1999-03-11 | 2001-06-12 | Merck & Co., Inc. | Tyrosine kinase inhibitors |
US6465448B1 (en) * | 1999-08-13 | 2002-10-15 | Case Western Reserve University | Methoxyamine potentiation of temozolomide anti-cancer activity |
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AU2003215112A1 (en) * | 2002-02-07 | 2003-09-02 | Axys Pharmaceuticals | Novel bicyclic hydroxamates as inhibitors of histone deacetylase |
GB2385523B (en) * | 2002-02-25 | 2004-01-07 | Ronan Anthony Byrne | Descent apparatus |
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ATE521341T1 (de) * | 2003-12-01 | 2011-09-15 | Kudos Pharm Ltd | Dna-schäden-reparatur-hemmer zur behandlung von krebs |
US8246949B2 (en) * | 2004-10-27 | 2012-08-21 | Aciont, Inc. | Methods and devices for sustained in-vivo release of an active agent |
WO2007038687A2 (en) * | 2005-09-27 | 2007-04-05 | Aciont, Inc. | Ocular administration of immunosuppressive agents |
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Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
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CN111356445B (zh) * | 2017-12-13 | 2023-08-29 | 株式会社艾跨Bnp | 包含培美曲塞的口服用药学组合物及其制备方法 |
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