CN102010425A - 1,4-二硫-7-氮杂螺[4,4]壬烷-8-羧酸衍生物类组蛋白去乙酰化酶抑制剂及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及1，4-二硫-7-氮杂螺[4，4]壬烷-8-羧酸衍生物类组蛋白去乙酰化酶抑制剂及其制备方法和应用。所述化合物具有式(I)的结构，以(S)-7-(叔丁氧羰基)-1，4-二硫-7-氮杂螺[4，4]壬烷-8-羧酸和6-氨基正己酸甲酯盐酸盐为中间体制备。本发明提供了一类强效的组蛋白去乙酰化酶抑制剂，用于制备预防或治疗与组蛋白去乙酰化酶活性异常表达相关的哺乳动物疾病的药物。本发明还涉及含有式(I)结构化合物的药物组合物。
Description
技术领域
本发明涉及一类1，4-二硫-7-氮杂螺[4，4]壬烷-8-羧酸衍生物类组蛋白去乙酰化酶抑制剂及其制备方法和用途，属于化学技术领域。
背景技术
组蛋白去乙酰化酶(HDACs)是一类能够水解各种底物蛋白(如组蛋白等)赖氨酸残基末端氨基上的乙酰基的水解酶。组蛋白的去乙酰化(如反应式II)导致组蛋白的正电荷密度增高，继而引起组蛋白与负电性的DNA的亲和力增强，基因转录被抑制，(参见Christian，A.H.，et al.Curr.Opin.Chem.Biol.，1997，1，300；Kouzarides，T.，Curr.Opin.Genet.Dev.，1999，9，40；Wolffe，A.P.Sci.Washington，1996，272，371)。目前在人体中发现了HDACs家族有18个成员，根据其结构，功能和分布的不同可分为四类。其中，I类(HDAC1，2，3和8)，II类(IIa：HDAC4，5，7和9；IIb：HDAC6，10)，IV类(HDAC11)属于锌离子依赖性水解酶，而III类HDACs(SIRT 1-7)是NAD+依赖性的(参见Dokmanovic，M.；et al.Mol.Cancer Res.，2007，5，981；Ropero，S.；Esteller，M.Mol.Oncol.，2007，1，19；de Ruijter，A.J.；et al.Biochem.J.，2003，370，737)。
反应式II
近来，越来越多的非组蛋白被证实为HDACs的底物，如转录因子，细胞骨架蛋白，分子伴侣等，(参见Glozak，M.A.，et al.Gene，2005，363，15)。正是由于HDACs具有如此复杂的功能，它的表达和活性失调与许多疾病密切相关，包括：癌症，神经变性疾病，病毒感染，炎症，白血病，疟疾和糖尿病等，其中，癌症无疑是对人类生命健康威胁最为严重的疾病。研究表明，HDACs，尤其是HDAC I和II与肿瘤发生发展密切相关，如：抑制肿瘤细胞分化和凋亡，促进肿瘤细胞增殖，迁移和血管生成，增强肿瘤细胞对化疗药物的抵抗力等，(参见Witt，O.，et al.Cancer Letter.，2009，277，8)。此外，HDAC抑制剂(HDACsInhibitors，HDACi)能有效抑制癌细胞增殖，促进细胞分化与凋亡。而且，HDACi具有抗瘤谱广，毒副作用低的优点，它们对实体瘤，白血病，淋巴瘤都具有很好的抑制活性。因此，针对HDACs为靶点设计抑制剂已成为抗肿瘤药物研究的热点。
目前报道的HDACi药效团大都包括如下三个部分：锌离子螯合基团(ZBG，zinc bindinggroup)，蛋白表面识别区(Surface Recognition Domain)以及将以上两部分连接起来的疏水性的长链(Linker)。锌离子螯合基团可以螯合HDACs活性中心的锌离子，从而抑制酶的活性。
发明内容
本发明针对现有技术的不足，提供一种1，4-二硫-7-氮杂螺[4，4]壬烷-8-羧酸衍生物类组蛋白去乙酰化酶抑制剂及其制备方法和用途。
本发明采用异羟肟酸基团为锌离子螯合基团，将具有独特构型和生理功能的1，4-二硫-7-氮杂螺[4，4]壬烷-8-羧酸这一非天然α-氨基酸结构单元引入HDACi的蛋白表面识别区(Surface Recognition Domain)。
本发明的技术方案如下：
具有通式I的化合物，以及其光学异构体、非对映异构体和消旋体混合物，其药学上可接受的盐，溶剂合物或前药，
其中，
R1是氢，各种氨基酸制备的酰基、芳酰基、杂芳酰基、芳基C1-6烷酰基、杂芳基C1-9烷酰基、C1-6烷酰基、环烷酰基、芳磺酰基、杂磺酰基、芳基C1-6烷磺酰基或杂芳基C1-9烷磺酰基，任选被一个或多个如下基团取代：羟基、卤素、硝基、氰基、羧基、卤C1-8烷基、C1-8烷氧基、C1-6烷基羰基、C1-8烷氧羰基、芳基C1-8烷氧羰基、芳基、杂芳基、芳基C1-6烷基、杂芳基C1-9烷基、芳基C2-6烯基、杂芳基C2-6烯基、芳基C2-6炔基、杂芳基C2-6炔基、C1-6烷基、杂烷基或环烷基，其中优选被一个或多个如下基团取代：羟基、卤素、硝基、氰基、卤C1-8烷基、C1-8烷氧基、C1-6烷基羰基、C1-8烷氧羰基或芳基C1-8烷氧羰基。
R2是异羟肟酸基，羧基，甲氧羰基，酰胺基或酰肼基；
n是0-5；
*是立体构型为S或R光学纯度或其消旋体。
本文中所用的术语和定义含义如下：
“芳基”是指芳族碳环基团。优选的芳环含有6-10个碳原子。
“杂芳基”是芳族杂环，可以是单环或双环基团。优选的杂芳基包括噻吩基，呋喃基、吡咯基、吡啶基、吡嗪基、噻唑基、嘧啶基、喹啉基、四氮唑基、苯并噻唑基、苯并呋喃基或吲哚基等。
“杂烷基”指饱和或不饱和、含碳原子和至少一个杂原子的链，其中任意一个杂原子不相邻。杂烷基中含有2-15个原子(碳原子)，优选含有2-10个原子。杂烷基可以是直连或支链、取代或未取代的。
“环烷基”是取代或未取代的，饱和或不饱和的环状基团，其含有碳原子和/或一个或多个杂原子。该环可以是单环或稠环，桥环或螺环的环系。单环通常有3-9个原子，优选有4-7个原子，多环含有7-17个原子，优选含有7-13个原子。
“卤”，或“卤素”包括氟、氯、溴或碘，优选氟和氯。
“各种氨基酸制备的酰基”是指将各种氨基酸的羧基经酰化后得到的基团，优选疏水性氨基酸，如甘氨酸，丙氨酸，缬氨酸，亮氨酸，异亮氨酸，苯丙氨酸，脯氨酸。
“芳酰基”是指芳香族碳环末端连有羰基的基团，优选的芳环含有6-10个碳原子。
“杂芳酰基”指芳族杂环末端连有羰基的基团，可以是单环或双环基团。优选的杂芳基同前述“杂芳基”的解释。
“环烷酰基”指取代或为取代的，饱和或不饱和的环状末端连有羰基的基团，其含有碳原子和/或一个或多个杂原子。该环可以是单环或稠环，桥环或螺环的环系。单环通常有3-9个原子，优选有4-7个原子，多环含有7-17个原子，优选含有7-13个原子。
“药学上可接受的盐”是指式(I)化合物具有疗效且无毒的盐形式。其可由任一酸性基团(如羧基)形成阴离子盐，或由任一碱性基团(如氨基)形成阳离子盐。本领域已知许多这样的盐。在任何酸性基团(如羧基)上形成的阳离子盐，或是在任何碱性基团(如氨基)上形成的阴离子盐。这些盐有许多是本领域已知的，如阳离子盐包括碱金属(如钠和钾)和碱土金属(镁和钙)的盐以及有机盐(如铵盐)。还可通过使用相应的酸处理碱性形式的(I)方便地获得阴离子盐，这样的酸包括无机酸如硫酸、硝酸、磷酸等；或有机酸如乙酸、丙酸、羟基乙酸、2-羟基丙酸、2-氧代丙酸、草酸、丙二酸、琥珀酸、马来酸、富马酸、苹果酸、酒石酸、2-羟基-1，2，3-丙三酸、甲磺酸、乙磺酸、苯甲磺酸、4-甲基苯磺酸、环己基亚磺酸、2-羟基苯甲酸、4-氨基-2-羟基苯甲酸等。这些盐是熟练技术人员熟知的，熟练的技术人员可制备本领域知识所提供的任何盐。此外，熟练技术人员可根据溶解度、稳定性、容易制剂等因素取某种盐而舍另一种盐。这些盐的测定和最优化在熟练技术人员的经验范围内。
“溶剂合物”是溶质(如金属蛋白酶抑制剂)和溶剂(如水)组合形成的配合物。参见J.Honig等，The Van Nostrand Chemist’s Dictionary，p.650(1953)。本发明采用的药学上可接受的溶剂包括不干扰金属蛋白酶抑制剂的生物活性的那些溶剂(例如水、乙醇、乙酸、N，N-二甲基甲酰胺、二甲基亚砜以及该领域技术人员所知的或容易确定的溶剂)。
本文所用的“光学异构体”、“对映体”、“非对映体”、“消旋体”等定义了本发明化合物或其生理上的衍生物所有可能的立体异构体的形式。除非另有指示，本发明化合物的化学命名包括所有可能的立体化学形式的混合物，所属混合物包含基本结构分子的所有非对映体和对映体，以及基本纯净的本发明化合物的单个异构体形式，即其中含有低于10％，优选低于5％，特别是低于2％，最优选低于1％的其它异构体。本发明类肽化合物各种立体异构体形式均明显包含于本发明的范围内。
式(I)化合物还可以其它被保护的形式或衍生物的形式存在，这些形式对本领域技术人员而言是显而易见的，均应该包含于本发明的范围内。
如上所述的取代基自身还可被一个或多个取代基取代。这样的取代基包括在C.Hansch和A.Leo，Substituent Constants for Correlation Analysis in Chemistry and Biology(1979)中列出的那些取代基。优选的取代基包括，例如烷基，烯基，烷氧基，羟基，氧基，硝基，氨基，氨基烷基(如氨甲基等)，氰基，卤，羧基，羰基烷氧基(如羰基乙氧基等)，硫基，芳基，环烷基，杂芳基，杂环烷基(如哌啶基，吗啉基，吡咯基等)，亚氨基，羟烷基，芳基氧基，芳基烷基，及其结合。
优选的，上述化合物(I)是下列之一：
(S)-叔丁基8-(6-(羟胺基)-6-氧络己基氨甲酰基)-1，4-二硫-7-氮杂螺[4，4]壬烷-7-羧化物(6)；
(S)-N-(6-(羟胺基)-6-氧络己基)-1，4-二硫-7-氮杂螺[4，4]壬烷-8-咪唑缩酰胺盐酸盐(7)；
(S)-叔丁基2-(8-(6-(羟胺基)-6-氧络己基氨甲酰基)-1，4-二硫-7-氮杂螺[4，4]壬烷-7-基)-2-氧络乙基氨基甲酸酯(11a)；
(S)-2-叔丁基3-(8-(6-(羟胺基)-6-氧络己基氨甲酰基)-1，4-二硫-7-氮杂螺[4，4]壬烷-7-基)-3-氧络丙基氨基甲酸酯(11b)；
(S)-2-叔丁基4-(8-(6-(羟胺基)-6-氧络己基氨甲酰基)-1，4-二硫-7-氮杂螺[4，4]壬烷-7-基)-4-氧络丁基氨基甲酸酯(11c)；
叔丁基(S)-1-((S)-8-(6-(羟胺基)-6-氧络己基氨甲酰基)-1，4-二硫-7-氮杂螺[4，4]壬烷-7-基)-1-氧络异丙基-2-基氨基甲酸酯(11d)；
叔丁基(S)-1-((S)-8-(6-(羟胺基)-6-氧络己基氨甲酰基)-1，4-二硫-7-氮杂螺[4，4]壬烷-7-基)-3-甲基-1-氧络丁基-2-基氨基甲酸酯(11e)；
叔丁基(S)-1-((S)-8-(6-(羟胺基)-6-氧络己基氨甲酰基)-1，4-二硫-7-氮杂螺[4，4]壬烷-7-基)-4-甲基-1-氧络戊基-2-基氨基甲酸酯(11f)；
叔丁基(2S，3R)-1-((S)-8-(6-(羟胺基)-6-氧络己基氨甲酰基)-1，4-二硫-7-氮杂螺[4，4]壬烷-7-基)-3-甲基-1-氧络戊基-2-基氨基甲酸酯(11g)；
叔丁基(S)-3-羟基-1-((S)-8-(6-(羟胺基)-6-氧络己基氨甲酰基)-1，4-二硫-7-氮杂螺[4，4]壬烷-7-基)-1-甲基-1-氧络丙基-2-基氨基甲酸酯(11h)；
(S)-叔丁基2-((S)-8-(6-(羟胺基)-6-氧络己基氨甲酰基)-1，4-二硫-7-氮杂螺[4，4]壬烷-7-羰基)吡咯烷-1-羧化物(11i)；
(S)-叔丁基4-(8-(6-(羟胺基)-6-氧络己基氨甲酰基)-1，4-二硫-7-氮杂螺[4，4]壬烷-7-羰基)哌啶-1-羧化物(11j)；
叔丁基(S)-1-((S)-8-(6-(羟胺基)-6-氧络己基氨甲酰基)-1，4-二硫-7-氮杂螺[4，4]壬烷-7-基)-1-氧络-3-苯丙基-2-基氨基甲酸酯(11k)；
叔丁基(S)-1-((S)-8-(6-(羟胺基)-6-氧络己基氨甲酰基)-1，4-二硫-7-氮杂螺[4，4]壬烷-7-基)-3-(4-羟苯基)-1-氧络丙基-2-基氨基甲酸酯(11l)；
叔丁基(S)-1-((S)-8-(6-(羟胺基)-6-氧络己基氨甲酰基)-1，4-二硫-7-氮杂螺[4，4]壬烷-7-基)-3-(一氢-吲哚-3-基)-1-氧络丙基-2-基氨基甲酸酯(11m)；
叔丁基(S)-1-((S)-8-(6-(羟胺基)-6-氧络己基氨甲酰基)-1，4-二硫-7-氮杂螺[4，4]壬烷-7-基)-6-氧络己基-1，5-二基氨基甲酸酯(11n)；
(S)-7-(2-氨基乙酰基)-N-(6-(羟胺基)-6-氧络己基)-1，4-二硫-7-氮杂螺[4，4]壬烷-8-甲酰胺基)己酸盐酸盐(12a)；
(S)-7-(3-氨基丙酰基)-N-(6-(羟胺基)-6-氧络己基)-1，4-二硫-7-氮杂螺[4，4]壬烷-8-甲酰胺基盐酸盐(12b)；
(S)-7-(4-氨基丁酰基)-N-(6-(羟胺基)-6-氧络己基)-1，4-二硫-7-氮杂螺[4，4]壬烷-8-甲酰胺基盐酸盐(12c)；
(S)-7-((S)-2-氨基丙酰基)-N-(6-(羟胺基)-6-氧络己基)-1，4-二硫-7-氮杂螺[4，4]壬烷-8-甲酰胺基盐酸盐(12d)；
(S)-7-((S)-2-氨基-3-甲基丁酰基)-N-(6-(羟胺基)-6-氧络己基)-1，4-二硫-7-氮杂螺[4，4]壬烷-8-甲酰胺基盐酸盐(12e)；
(S)-7-((S)-2-氨基-4-甲基戊酰基)-N-(6-(羟胺基)-6-氧络己基)-1，4-二硫-7-氮杂螺[4，4]壬 烷-8-甲酰胺基盐酸盐(12f)；
(S)-7-((2S，3R)-2-氨基-3-甲基戊酰基)-N-(6-(羟胺基)-6-氧络己基)-1，4-二硫-7-氮杂螺[4，4]壬烷-8-甲酰胺基盐酸盐(12g)；
(S)-7-((S)-2-氨基-3-羟基丙酰基)-N-(6-(羟胺基)-6-氧络己基)-1，4-二硫-7-氮杂螺[4，4]壬烷-8-甲酰胺基盐酸盐(12h)；
(S)-N-(6-(羟胺基)-6-氧络己基)-7-((S)-吡咯烷-2-羰基)-1，4-二硫-7-氮杂螺[4，4]壬烷-8-甲酰胺基盐酸盐(12i)；
(S)-N-(6-(羟胺基)-6-氧络己基)-7-(哌啶-4-羰基)-1，4-二硫-7-氮杂螺[4，4]壬烷-8-甲酰胺基盐酸盐(12j)；
(S)-7-((S)-2-氨基-3-苯丙基)-N-(6-(羟胺基)-6-氧络己基)-1，4-二硫-7-氮杂螺[4，4]壬烷-8-甲酰胺基盐酸盐(12k)；
(S)-7-((S)-2-氨基-3-(4-羟基苯基)丙基)-N-(6-(羟胺基)-6-氧络己基)-1，4-二硫-7-氮杂螺[4，4]壬烷-8-甲酰胺基盐酸盐(121)；
(S)-7-((S)-2-氨基-3-(一氢-吲哚-3-基)丙酰基)-N-(6-(羟胺基)-6-氧络己基)-1，4-二硫-7-氮杂螺[4，4]壬烷-8-甲酰胺基盐酸盐(12m)；
(S)-7-((S)-2，6-二氨基己基)-N-(6-(羟胺基)-6-氧络己基)-1，4-二硫-7-氮杂螺[4，4]壬烷-8-甲酰胺基盐酸盐(12n)。
本发明还提供了这些化合物在预防或治疗与组蛋白去乙酰化酶活性异常表达相关的哺乳动物疾病的药物中的应用。所述的与组蛋白去乙酰化酶活性异常表达的相关哺乳动物疾病包括：癌症，神经变性疾病，病毒感染，炎症，白血病，疟疾或糖尿病等。因此，本发明还涉及含有(I)结构化合物的药物组合物。
此外，本发明还包括一种适于口服给予哺乳动物的药物组合物，包含上述通式(I)的任一化合物，和药学上可接受载体，任选包含一种或多种药学上可接受的赋形剂。
此外，本发明还包括一种适于胃肠外给予哺乳动物的药物组合物，包含上述通式(I)的任一化合物，和药学上可接受载体，任选包含一种或多种药学上可接受的赋形剂。
制备上述通式(I)的类肽化合物中间体为：(S)-7-(叔丁氧羰基)-1，4-二硫-7-氮杂螺[4，4]壬烷-8-羧酸和6-氨基正己酸甲酯盐酸盐。
所述化合物的制备方法，步骤如下：
以光学纯的(S)-1，4-二硫-7-氮杂螺[4，4]壬烷-8-羧酸为原料，经仲胺基保护后，与6-氨基正己酸甲酯盐酸盐进行缩合得关键中间体5，然后制成羟肟酸得目标产物6，进一步脱掉叔丁氧羰基(Boc)得目标产物7。或者，
将中间体5的Boc基团脱掉，引入各种Boc保护的氨基酸残基，再转化成相应的羧酸10和羟肟酸11，11脱掉Boc得到目标产物12。
反应路线如下：
其中，R1的定义与式(1)化合物相同。
上述合成路线反应式中的试剂：(a)碳酸二叔丁酯，1mol/L氢氧化钠溶液，四氢呋喃；(b)乙酰氯，无水甲醇；(c)三乙胺，二环己基碳二亚胺，1-羟基苯并三氮唑，无水四氢呋喃；(d)羟胺钾，无水甲醇；(e)氯化氢饱和的乙酸乙酯；(f)三氟乙酸，二氯甲烷；(g)各种Boc保护的氨基酸，O-苯并三氮唑-N，N，N′，N′-四甲基脲四氟硼酸酯，三乙胺，无水四氢呋喃；(h)2mol/L氢氧化钠溶液，乙醇；(i)氯甲酸异丁酯，三乙胺，盐酸羟胺，甲醇，无水四氢呋喃。
合成路线的目标化合物的结构式如下所示：
所述化合物制备的具体操作步骤在实施例中将加以详细说明。
本领域技术人员可以对上述步骤进行变动以提高收率，他们可据本领域的基本知识确定合成的路线，如选择反应物，溶剂和温度，可以通过使用各种常规保护基以避免副反应的发生从而提高收率。这些常规的保护方法可参见例如T.Greene，Protecting Groups inOrganic Synthesis。
显然，上述路线为立体选择性合成，通过上述路线还可制备得到其光学活性的类肽化合物。例如将原料(S)-1，4-二硫-7-氮杂螺[4，4]壬烷-8-羧酸替换为其光学异构体(R构型)。本领域技术人员可方便地获得各种其他异构体，并可通过常规分离手段纯化，如手性盐或手性层析柱等。
由于锌离子依赖性组蛋白去乙酰化酶(HDACs)各亚型催化中心的高度同源性，选择目前已知X-衍射晶体结构的组蛋白去乙酰化酶8亚型(HDAC8)来进行酶活性测试。HDACs活性荧光分析方法(两步法)，能快速、方便检测HDACs活性，操作简单，灵敏度高。第一步，含一个乙酰化侧链的赖氨酸HDACs荧光底物Boc-Lys(acetyl)-AMC(Boc-Lys(acetyl)-AMC)，用含表达的HDAC8样本孵育，使底物脱去乙酰基，激活底物。第二步，用胰酶水解Boc-Lys-AMC，产生4-氨基-7-甲基-香豆素(AMC)这一荧光基团(即发色团)，在激发波长/发射波长(390nm/460nm)测定荧光强度，从而根据抑制剂组及对照组的荧光强度计算抑制率，并求算IC50值。酶活性测试原理见反应式III。
化合物的细胞活性的测试使用噻唑兰检测方法(MTT法)，人乳腺癌细胞株MDA-MB-231和MCF-7的细胞悬液分别接种于96孔板，每孔中加入含不同浓度化合物的培养基，经孵育后，用MTT染色，继续孵育后，于酶标仪上在570nm处测定每孔的吸光度(OD值)，计算出细胞生长抑制率，从而确定化合物的活性。
通式(I)的类肽化合物的体外抑酶试验证明该类化合物为一种1，4-二硫-7-氮杂螺[4，4]壬烷-8-羧酸衍生物类组蛋白去乙酰化酶抑制剂。
本发明的1，4-二硫-7-氮杂螺[4，4]壬烷-8-羧酸衍生物在空间上与组蛋白去乙酰化酶的活性位点相匹配，因此在体外显示了较高的抑制活性。
反应式III(酶活性测试原理)
反应式III中Histone deacetylase为组蛋白去乙酰化酶，Trypsin为胰蛋白酶，4-amino-7-methylcoumarin为4-氨基-7-甲基香豆素。
含有本发明化合物的药物组合物
本发明的部分衍生物可以游离形式或以盐形式存在。本领域技术人员已知许多化合物类型的药学上可接受的盐及其制备方法。药学上可接受的盐包括常规的无毒性的盐，包括这样的化合物碱与无机或有机酸形成的季铵盐。
本发明的化合物可形成水合物或溶剂合物。本领域熟练人员已知将化合物与水一起冻干时所形成的水合物或在溶液中与合适的有机溶剂浓缩时形成溶剂合物的方法。
本发明包含含有治疗量本发明化合物的药物，和一种或多种药学上可接受载体和/或赋形剂的药物组合物。载体包括如盐水，缓冲盐水，葡萄糖，水，甘油，乙醇和它们的结合物，下文更详细地论述。如果需要，该组合物还可以包含较小量的润湿剂或乳化剂，或 pH缓冲剂。该组合物可以是液体，悬浮液，乳剂，片剂，丸剂，胶囊，持续释放制剂或粉末。该组合物可以用传统的黏合剂和载体如三酸甘油酯配制成栓剂。口服制剂可以包括标准载体如药物品级的甘露糖醇，乳糖，淀粉，硬脂酸镁，糖精钠，纤维素和碳酸镁等等。视需要制剂而定，配制可以设计混合，制粒和压缩或溶解成分。在另一个途径中，该组合物可以配制成纳米颗粒。
使用的药物载体可以为固体或者液体。
典型的固体载体包括乳糖，石膏粉，蔗糖，滑石，凝胶，琼脂，果胶，阿拉伯胶，硬脂酸镁，硬脂酸等等。固体载体可以包括一种或多种可能同时作为增香剂，润滑剂，增溶剂，悬浮剂，填料，助流剂，压缩助剂，粘合剂或片剂-崩解剂的物质；它还可以是包封材料。在粉末中，载体为精细粉碎的固体，它与精细粉碎的活性成分的混合。在片剂中活性成分与具有必要的压缩性质的载体以合适的比例混合，以需要的形状和大小压缩。粉末和片剂优选包含至多99％活性成分。合适的固体载体包括，例如，磷酸钙，硬脂酸镁，滑石，糖，乳糖，糊精，淀粉，凝胶，纤维素，甲基纤维素，羧甲基纤维素钠盐，聚乙烯吡咯烷酮烷酮，低熔点蜡和离子交换树脂。
典型的液体载体包括糖浆，花生油，橄榄油，水等等。液体载体用于制备溶液，悬浮液，乳剂，糖浆，酊剂和密封的组合物。活性成分可以溶解或悬浮于药学上可接受的液体载体如水，有机溶剂，二者的混合物或药学上可接受的油类或脂肪。液体载体可以包含其他合适的药物添加剂如增溶剂，乳化剂，缓冲剂，防腐剂，增甜剂，增香剂，悬浮剂，增稠剂，颜料，粘度调节剂，稳定形或渗透压-调节剂。用于口服和肠胃外给药的液体载体的合适的例子包括水(部分地包含如同上述的添加剂，例如纤维素衍生物，优选羧甲基纤维素钠盐溶液)，醇(包括一元醇和多元醇，例如乙二醇)和它们的衍生物，和油类(例如分馏椰子油和花生油)。用于肠胃外给药的载体还可以为油脂如油酸乙酯和异丙基肉豆蔻酸盐。无菌的液体载体用于肠胃外给药的无菌的液态组合物。用于加压组合物的液体载体可以为卤代烃或其他药学上可接受的推进剂。无菌溶液或悬浮溶液液体药物组合物可以用来，例如，静脉内，肌内，腹膜内或皮下注射。注射时可单次推入或逐渐注入，入30分钟的经脉内灌注。该化合物还可以以液体或者固体组合物的形式口服给药。
载体或赋形剂可以包括本领域已知的时间延迟材料，如单硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯，还可包括蜡，乙基纤维素，羟丙基甲基纤维素，异丁烯酸甲酯等等。当制剂用于口服时，公认PHOSALPG-50(磷脂(phospholipid)与1，2-丙二醇浓缩，A.Nattermann&Cie.GmbH)中的0.01％吐温80用于其他化合物的可接受的口服制剂的配制，可以适应于本发明各种化合物的配制。
给予本发明化合物时可以使用各式各样的药物形式。如果使用固体载体，制剂可以为片剂，被放入硬胶囊中的粉末或小药丸形式或锭剂或糖锭形式。固体载体的量在很大程度上变化，但是优选从约25mg到约1.0g。如果使用液体载体，制剂可以为糖浆，乳剂，软胶囊，在安瓿或小瓶或非水的液体悬浮液中的无菌注射溶液或悬浮液。
为了获得稳定的水溶性的剂型，可以将化合物或其药学上可接受的盐溶于有机或无机酸的水溶液，0.3M琥珀酸或柠檬酸溶液。选择性地，酸性的衍生物可以溶于合适的碱性溶液。如果得不到可溶形式，可将化合物溶于合适的共溶剂或它们的结合。这样的合适的共溶剂的例子包括，但是不局限于，浓度范围从0-60％总体积的乙醇，丙二醇，聚乙二醇 300，聚山梨酸酯80，甘油，聚氧乙烯脂肪酸酯，脂肪醇或甘油羟脂肪酸酯等等。
各种释放系统是已知的并且可以用于化合物或其他各种制剂的给药，这些制剂包括片剂，胶囊，可注射的溶液，脂质体中的胶囊，微粒，微胶囊，等等。引入的方法包括但是不局限于皮肤的，皮内，肌内，腹膜内的，静脉内的，皮下的，鼻腔内的，肺的，硬膜外的，眼睛的和(通常优选的)口服途径。化合物可以通过任何方便的或者其它适当的途径给药，例如通过注入或快速浓注，通过上皮的或粘膜线路(例如，口腔粘膜，直肠和肠粘膜，等等)吸收或通过负载药物的支架以及可以于其他生物活性剂一起给药。可以全身或局部给药。用于鼻，支气管或肺疾病的治疗或预防时，优选的给药途径为口服，鼻给药或支气管烟雾剂或喷雾器。
本发明中的化合物11k，11l，12l，11m，12m，11f，11n对组蛋白去乙酰化酶8亚型(HDAC8)的抑制活性优于阳性对照药，具有良好的开发前景，并可作为发现新型高效组蛋白去乙酰化酶抑制剂的先导化合物。此外，化合物11f，11k和11m在体外抗肿瘤细胞增殖的试验中显示出一定的活性，值得进一步进行结构优化和开发。
附图说明
图1为化合物叔丁基(S)-1-((S)-8-(6-(羟胺基)-6-氧络己基氨甲酰基)-1，4-二硫-7-氮杂螺[4，4]壬烷-7-基)-3-(4-羟苯基)-1-氧络丙基-2-基氨基甲酸酯(111)与组蛋白去乙酰化酶8亚型的活性区域的对接结果通过Sybyl8.0以三维显示示意图。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明做进一步的说明，但不限于此。
实施例1.本发明化合物的合成
以化合物(6)，(7)，(11a)和(12a)为例：
1)(S)-7-(叔丁氧羰基)-1，4-二硫-7-氮杂螺[4，4]壬烷-8-羧酸2
将化合物1(5.72g，20.0mmol)溶于44mL1mol/L的氢氧化钠溶液中，并加入10mL碳酸二叔丁酯(4.80g，22.0mmol)的四氢呋喃溶液。反应过程中用1mol/L的氢氧化钠溶液控制反应液pH在9-11。室温反应6小时后，蒸除反应液中的四氢呋喃，再用石油醚将反应液萃取3次，并用1mol/L的柠檬酸溶液酸化至pH4-5，然后用乙酸乙酯萃取三次，有机相合并后用饱和食盐水洗涤，无水硫酸镁干燥，蒸干溶剂得5.80g浅棕色化合物2固体。产率：94％，1H-NMR(DMSO-d6)δ1.36(s，9H)，2.32-2.39(m，1H)，2.70-2.73(m，1H)，3.32-3.39(m，4H)，3.58-3.63(m，1H)，3.74-3.78(m，1H)，4.12-4.17(m，1H)，12.83(br s，1H)；ESI-MS m/z：306.5[M+H]+。
2)6-氨基正己酸价值盐酸盐4
冰浴条件下，将化合物3(13.1g，100mmol)混悬于100mL无水甲醇中，向其中缓慢滴加乙酰氯(15.7g，200mmol)。滴加完毕后，油浴75℃加热回流反应8小时。反应完毕后，蒸除大部分甲醇，向剩余物中加入适量乙醚，放于冰箱中冷冻过夜，过滤得16.3g化合物4。产率：90％
3)(S)-叔丁基8-(6-甲氧基-6-氧络己基氨甲酰基)-1，4-二硫-7-氮杂螺[4，4]壬烷-7-羧化物5将化合物2(3.05g，10.0mmol)和1-羟基苯并三氮唑(1.49g，11.0mmol)溶于40mL无水四氢呋喃中，冰浴条件下滴加含有二环己基碳二亚胺(2.27g，11.0mmol)的四氢呋喃溶液10mL。30分钟后，加入三乙胺(1.11g，11.0mmol)和化合物4(1.82g，11.0mmol)，继续室温反 应过夜。反应结束后，蒸除四氢呋喃，加入乙酸乙酯，放入冰箱中冷冻过夜使二环己基脲(DCU)充分析出，滤除二环己基脲(DCU)，滤液依次用饱和碳酸钠溶液，1mol/L的盐酸溶液和饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸镁干燥后蒸除溶剂得到粗品，经硅胶柱(200-300目)(石油醚∶乙酸乙酯＝3∶1体积比)得2.89g无色油状物5。产率：67％，1H-NMR(DMSO-d6)δ1.22-1.26(m，2H)，1.36-1.43(m，2H)，1.38(s，9H)，1.44-1.52(m，2H)，2.30(t，J＝7.2Hz，2H)，2.32-2.44(m，1H)，2.53-2.76(m，1H)，2.98-3.09(m，2H)，3.36-3.40(m，4H)，3.73(d，J＝10.8Hz，1H)，3.97(d，J＝10.8Hz，1H)，4.26-4.28(m，1H)，7.88(s，1H)，8.67(s，1H)，10.34(s，1H)；ESI-MS m/z：433.4[M+H]+。
4)(S)-叔丁基8-(6-(羟胺基)-6-氧络己基氨甲酰基)-1，4-二硫-7-氮杂螺[4，4]壬烷-7-羧化物6羟胺钾(NH2OK)溶液的制备：14mL氢氧化钾的饱和无水甲醇溶液滴加到24mL含有4.67g(67mmol)盐酸羟胺的无水甲醇溶液中，控制内温低于40℃，滴加完毕，冷却反应液至室温，滤除白色氯化钾沉淀，所得滤液密闭保存备用。
化合物5(2.16g，5.0mmol)溶于20mL无水甲醇后，向其中加入8.8mL上述羟胺钾(NH2OK)溶液。0.5小时后，蒸除甲醇，2mol/L的盐酸溶液酸化至pH3-4，然后用乙酸乙酯萃取，合并乙酸乙酯层后用饱和食盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥，蒸干溶剂得粗品，粗品经乙酸乙酯/乙醇重结晶得0.89g化合物6白色粉末。产率：41％，mp：103-105℃。 1H-NMR(DMSO-d6)δ1.16-1.19(m，2H)，1.33+1.39(s，9H，cis/trans)，1.35-1.46(m，2H)，1.47-1.49(m，2H)，1.92(t，J＝7.2Hz，2H)，2.24-2.28(m，1H)，2.53-2.57(m，1H)，2.96-2.99(m，1H)，3.05-3.09(m，1H)，3.31-3.39(m，4H)，3.56(d，J＝10.8Hz，1H)，3.80(d，J＝10.8Hz，1H)，4.08-4.13(m，1H)，7.96(s，1H)，8.65(s，1H)，10.33(s，1H)；HRMS(AP-ESI)m/z calcd forC18H32N3O5S2[M+H]+434.1783，found 434.1795。
5)(S)-N-(6-(羟胺基)-6-氧络己基)-1，4-二硫-7-氮杂螺[4，4]壬烷-8-咪唑缩酰胺盐酸盐7
化合物6(0.45g，1.04mmol)溶于15mL无水乙酸乙酯后，向其中加入15mL氯化氢饱和的乙酸乙酯溶液。反应过程中逐渐有白色沉淀析出，5小时后将沉淀滤出，用乙醚充分洗涤，干燥后得0.35g化合物7白色粉末。产率：92％，mp：114-116℃.。1H-NMR(DMSO-d6)δ1.22-1.27(m，2H)，1.34+1.39(s，9H，cis/trans)，1.41-1.45(m，2H)，1.46-1.51(m，2H)，1.94(t，J＝7.2Hz，2H)，2.41-2.45(m，1H)，2.83-2.86(m，1H)，3.07-3.17(m，2H)，3.38-3.46(m，4H)，3.59-3.65(m，2H)，4.28-4.32(m，1H)，8.69(s，1H)，8.88(s，1H)，10.32(s，1H)，10.41(s，1H)，10.58(s，1H)；HRMS(AP-ESI)m/z calcd for C13H24N3O3S2[M+H]+ 334.1259，found334.1223。
6)(S)-甲基6-(1，4-二硫-7-氮杂螺[4，4]壬烷-8-甲酰基)己酸酯8
向化合物5(4.33g，10.0mmol)的无水二氯甲烷(40mL)溶液中，加入25mL三氟乙酸。室温反应4小时后，向反应液中加入饱和的碳酸钠水溶液直至pH为弱碱性，静止分层，有机相用蒸馏水洗涤后再用无水硫酸镁干燥，蒸干溶剂得2.95g淡黄色油状化合物8。产率：89％，ESI-MS m/z：333.6[M+H]+。
7)(S)-甲基6-(7-(2-(叔丁氧羰基氨基)乙酰基)-1，4-二硫-7-氮杂螺[4，4]壬烷-8-甲酰胺)己酸酯9a
室温条件下，向叔丁氧羰基保护的甘氨酸(0.88g，5.0mmol)的无水四氢呋喃(20mL)溶液中加入三乙胺(0.56g，5.5mmol)和O-苯并三氮唑-N，N，N′，N′-四甲基脲四氟硼酸酯(1.78g， 5.5mmol)。十五分钟后，再加入化合物8(1.67g，5.0mmol)。8小时候后，蒸除四氢呋喃，加入乙酸乙酯，依次用饱和碳酸钠溶液，1mol/L的盐酸溶液和饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸镁干燥后蒸除溶剂得到粗品，经硅胶柱(200-300目)分离(石油醚∶乙酸乙酯＝2∶1体积比)得1.25g无色油状化合物9a。产率：51％，1H-NMR(DMSO-d6)δ1.23-1.27(m，2H)，1.36-1.42(m，2H)，1.38(s，9H)，1.48-1.53(m，2H)，2.29(t，J＝7.2Hz，2H)，2.30-2.44(m，1H)，2.53-2.76(m，1H)，2.98-3.09(m，2H)，3.37-3.43(m，4H)，3.58(s，3H)，3.61-3.64(m，1H)，3.73(d，J＝10.8Hz，1H)，3.78-3.82(m，1H)，3.97(d，J＝10.8Hz，1H)，4.26-4.28(m，1H)，6.88(s，1H)，7.87(s，1H)；ESI-MS m/z：476.4[M+H]+。
8)(S)-甲基6-(7-(2-(叔丁氧羰基氨基)乙酰基)-1，4-二硫-7-氮杂螺[4，4]壬烷-8-甲酰胺)己酸10a
向化合物9a(1.1g，2.25mmol)的20mL乙醇溶液中加入4mL 2mol/L的氢氧化钠溶液，油浴75℃反应1小时候，蒸除大部分乙醇，用1mmol/L盐酸调节pH至3-4，然后用乙酸乙酯萃取，有机相合并后用饱和食盐水洗涤，无水硫酸镁干燥，蒸干得0.99g化合物10a白色固体。产率：93％，1H-NMR(DMSO-d6)δ1.24-1.28(m，2H)，1.37-1.42(m，2H)，1.38(s，9H)，1.48-1.54(m，2H)，2.28(t，J＝7.2Hz，2H)，2.30-2.44(m，1H)，2.53-2.74(m，1H)，2.98-3.08(m，2H)，3.37-3.45(m，4H)，3.60-3.64(m，1H)，3.73(d，J＝10.8Hz，1H)，3.78-3.81(m，1H)，3.97(d，J＝10.8Hz，1H)，4.27-4.30(m，1H)，6.88(s，1H)，7.87(s，1H)，12.83(s，1H)；ESI-MSm/z：462.5[M+H]+。
9)(S)-叔丁基2-(8-(6-(羟胺基)-6-氧络己基氨甲酰基)-1，4-二硫-7-氮杂螺[4，4]壬烷-7-基)-2-氧络乙基氨基甲酸酯11a
冰浴条件下，向化合物10a(0.85g，1.79mmol)和三乙胺(0.20g，1.97mmol)的15mL无水四氢呋喃中滴加氯甲酸异丁酯(0.27g，1.97mmol)，五分钟后，加入3mL羟胺的无水甲醇溶液(1.8mmol/mL)。反应6小时后，蒸除四氢呋喃，加入1mmol/L盐酸30mL酸化，乙酸乙酯萃取。饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸镁干燥，蒸干溶剂得粗品，经C18反相柱分离(水∶甲醇＝3∶7)得0.55化合物11a白色粉末。产率：62％，熔点：98-100℃。1H-NMR(DMSO-d6)δ1.17-1.22(m，2H)，1.38(s，9H)，1.35-1.40(m，2H)，1.45-1.48(m，2H)，1.92(t，J＝7.2Hz，2H)，2.26-2.29(m，1H)，2.39-2.44(m，1H)，2.99-3.07(m，2H)，3.34-3.37(m，4H)，3.60-3.64(m，1H)，3.72(d，J＝10.8Hz，1H)，3.79-3.83(m，1H)，3.97(d，J＝10.8Hz，1H)，4.26-4.29(m，1H)，6.90(s，1H)，7.89(s，1H)，8.66(s，1H)，10.34(s，1H)；HRMS(AP-ESI)m/zcalcd for C20H34N4NaO6S2[M+H]+513.1817，found 513.1861。
10)(S)-7-(2-氨基乙酰基)-N-(6-(羟胺基)-6-氧络己基)-1，4-二硫-7-氮杂螺[4，4]壬烷-8-甲酰胺基)己酸盐酸盐12a
化合物11a(0.25g，0.51mmol)溶于8mL无水乙酸乙酯后，向其中加入8mL氯化氢饱和的乙酸乙酯溶液。反应过程中逐渐有白色沉淀析出，3小时后将沉淀滤出，用乙醚充分洗涤，干燥后得0.20g化合物12a白色粉末。产率：90％，mp：147-149℃，1H-NMR(DMSO-d6)δ1.17-1.21(m，2H)，1.36-1.40(m，2H)，1.46-1.49(m，2H)，1.93(t，J＝7.2Hz，2H)，2.26-2.29(m，1H)，2.39-2.44(m，1H)，2.99-3.08(m，2H)，3.30-3.37(m，4H)，3.58-3.63(m，1H)，3.72(d，J＝10.8Hz，1H)，3.75-3.81(m，1H)，3.97(d，J＝10.8Hz，1H)，4.26-4.29(m，1H)，7.96(s，1H)，8.11(s，3H)，8.68(s，1H)，10.37(s，1H)；HRMS(AP-ESI)m/z calcd for C15H27N4O482[M+H]+391.1474，found 391.1452。
实施例2目标化合物抑制组蛋白去乙酰化酶活性试验(In vitro)
采用HDACs活性荧光分析方法进行酶活性试验，主要分两步：(1)含一个乙酰化侧链的赖氨酸HDACs荧光底物(Boc-Lys(acetyl)-AMC)，用含表达的HDAC8样本孵育，使底物脱去乙酰基，激活底物。(2)用胰酶水解含一个乙酰化侧链的赖氨酸HDACs荧光底物(Boc-Lys-AMC)，产生AMC这一荧光基团，在激发波长/发射波长(390nm/460nm)测定荧光强度，从而根据抑制剂组及对照组的荧光强度计算抑制率，并求算IC50值。酶活性测试原理见前述反应式III及相关内容。实验结果见表1。
表1.化合物(I)的体外抑酶试验结果
a表中数值为三次试验的平均值，“±”后的数值表示标准偏差。
SAHA商品名为Zolinza，通用名为Vorinostat，为美国食品药品监督管理局(FDA)于2006年批准上市的组蛋白去乙酰化酶抑制剂。
上述测试结果表明，1，4-二硫-7-氮杂螺[4，4]壬烷-8-羧酸衍生物类化合物均表现出对组蛋白去乙酰化酶8亚型(HDAC8)较强的抑制活性，其中化合物11k，11l，12l，11m，12m，11f，11n对组蛋白去乙酰化酶8亚型(HDAC8)的抑制活性优于阳性对照药Vorinostat(SAHA)，具有良好的开发前景，并可作为发现新型高效组蛋白去乙酰化酶抑制剂的先导 化合物。
实施例3目标化合物抑制细胞增殖的活性试验(In vitro)
选取化合物11k，11l，12l，11m，11f，11n进行体外抑制癌细胞增殖的活性试验，结果见表2。
术语说明：
MDA-MB-231：人乳腺癌细胞株。
MCF-7：人乳腺癌细胞株。
SAHA：商品名为Zolinza，通用名为Vorinostat，为美国食品药品监督管理局(FDA)于2006年批准上市的组蛋白去乙酰化酶抑制剂。
DMSO：二甲基亚砜。
IC50：半数抑制浓度。
1.[材料]MDA-MB-231，MCF-7细胞株，四甲基偶氮唑蓝MTT，10％胎牛血清，96孔板。
2.[方法]
细胞培养MDA-MB-231，MCF-7两种肿瘤细胞株都采用常规培养。实验时均用对数生长期细胞。
细胞生长检测(MTT法)MDA-MB-231，MCF-7细胞悬液均调整至1×105/ml，分别接种于96孔板(50μl/孔)，5000个细胞/孔。铺板4h后，每孔中加入50ul含不同浓度化合物的培养基，使孔中化合物终浓度分别为：200、40、8、1.6、0.32uM，每个浓度设三个复孔，不加细胞的孔读数时作空白，加细胞不加化合物的孔作化合物空白孔，SAHA作化合物阳性对照。于37℃，5％二氧化碳中孵育48h，每孔加入10μl 0.5％的MTT染色液，继续孵育4h后，2500rpm，离心30min，然后抛弃板孔中培养基，加入二甲基亚砜，200ul/孔。酶标仪上于570nm处测定每孔的吸光度OD值，细胞生长抑制率按下式计算：
表2细胞增殖实验结果
a表中数值为三次试验的平均值，“±”后的数值表示标准偏差。
上表测试数据表明，化合物11f，11k和11m在体外抗肿瘤细胞增殖的试验中显示出一定的活性，值得进一步进行结构优化和开发。
Claims (7)
1.具有通式(I)的化合物，以及其光学异构体、非对映异构体和消旋体混合物，其药学上可接受的盐，溶剂合物或前药，
其中，
R1是氢，各种氨基酸制备的酰基、芳酰基、杂芳酰基、芳基C1-6烷酰基、杂芳基C1-9烷酰基、C1-6烷酰基、环烷酰基、芳磺酰基、杂磺酰基、芳基C1-6烷磺酰基或杂芳基C1-9烷磺酰基，任选被一个或多个如下基团取代：羟基、卤素、硝基、氰基、羧基、卤C1-8烷基、C1-8烷氧基、C1-6烷基羰基、C1-8烷氧羰基、芳基C1-8烷氧羰基、芳基、杂芳基、芳基C1-6烷基、杂芳基C1-9烷基、芳基C2-6烯基、杂芳基C2-6烯基、芳基C2-6炔基、杂芳基C2-6炔基、C1-6烷基、杂烷基或环烷基，其中优选被一个或多个如下基团取代：羟基，卤素，硝基，氰基，卤C1-8烷基，C1-8烷氧基，C1-6烷基羰基，C1-8烷氧羰基或芳基C1-8烷氧羰基；
R2是异羟肟酸基、羧基、甲氧羰基、酰胺基或酰肼基；
n是0-5；
*是立体构型为S或R光学纯度或其消旋体。
2.如权利要求1的化合物，其特征在于是下述化合物之一：
(S)-叔丁基8-(6-(羟胺基)-6-氧络己基氨甲酰基)-1，4-二硫-7-氮杂螺[4，4]壬烷-7-羧化物(6)；
(S)-N-(6-(羟胺基)-6-氧络己基)-1，4-二硫-7-氮杂螺[4，4]壬烷-8-咪唑缩酰胺盐酸盐(7)；
(S)-叔丁基2-(8-(6-(羟胺基)-6-氧络己基氨甲酰基)-1，4-二硫-7-氮杂螺[4，4]壬烷-7-基)-2-氧络乙基氨基甲酸酯(11a)；
(S)-2-叔丁基3-(8-(6-(羟胺基)-6-氧络己基氨甲酰基)-1，4-二硫-7-氮杂螺[4，4]壬烷-7-基)-3-氧络丙基氨基甲酸酯(11b)；
(S)-2-叔丁基4-(8-(6-(羟胺基)-6-氧络己基氨甲酰基)-1，4-二硫-7-氮杂螺[4，4]壬烷-7-基)-4-氧络丁基氨基甲酸酯(11c)；
叔丁基(S)-1-((S)-8-(6-(羟胺基)-6-氧络己基氨甲酰基)-1，4-二硫-7-氮杂螺[4，4]壬烷-7-基)-1-氧络异丙基-2-基氨基甲酸酯(11d)；
叔丁基(S)-1-((S)-8-(6-(羟胺基)-6-氧络己基氨甲酰基)-1，4-二硫-7-氮杂螺[4，4]壬烷-7-基)-3-甲基-1-氧络丁基-2-基氨基甲酸酯(11e)；
叔丁基(S)-1-((S)-8-(6-(羟胺基)-6-氧络己基氨甲酰基)-1，4-二硫-7-氮杂螺[4，4]壬烷-7-基)-4-甲基-1-氧络戊基-2-基氨基甲酸酯(11f)；
叔丁基(2S，3R)-1-((S)-8-(6-(羟胺基)-6-氧络己基氨甲酰基)-1，4-二硫-7-氮杂螺[4，4]壬烷-7-基)-3-甲基-1-氧络戊基-2-基氨基甲酸酯(11g)；
叔丁基(S)-3-羟基-1-((S)-8-(6-(羟胺基)-6-氧络己基氨甲酰基)-1，4-二硫-7-氮杂螺[4，4]壬烷-7-基)-1-甲基-1-氧络丙基-2-基氨基甲酸酯(11h)；
(S)-叔丁基2-((S)-8-(6-(羟胺基)-6-氧络己基氨甲酰基)-1，4-二硫-7-氮杂螺[4，4]壬烷-7-羰基)吡咯烷-1-羧化物(11i)；
(S)-叔丁基4-(8-(6-(羟胺基)-6-氧络己基氨甲酰基)-1，4-二硫-7-氮杂螺[4，4]壬烷-7-羰基)哌啶-1-羧化物(11j)；
叔丁基(S)-1-((S)-8-(6-(羟胺基)-6-氧络己基氨甲酰基)-1，4-二硫-7-氮杂螺[4，4]壬烷-7-基)-1-氧络-3-苯丙基-2-基氨基甲酸酯(11k)；
叔丁基(S)-1-((S)-8-(6-(羟胺基)-6-氧络己基氨甲酰基)-1，4-二硫-7-氮杂螺[4，4]壬烷-7-基)-3-(4-羟苯基)-1-氧络丙基-2-基氨基甲酸酯(11l)；
叔丁基(S)-1-((S)-8-(6-(羟胺基)-6-氧络己基氨甲酰基)-1，4-二硫-7-氮杂螺[4，4]壬烷-7-基)-3-(一氢-吲哚-3-基)-1-氧络丙基-2-基氨基甲酸酯(11m)；
叔丁基(S)-1-((S)-8-(6-(羟胺基)-6-氧络己基氨甲酰基)-1，4-二硫-7-氮杂螺[4，4]壬烷-7-基)-6-氧络己基-1，5-二基氨基甲酸酯(11n)；
(S)-7-(2-氨基乙酰基)-N-(6-(羟胺基)-6-氧络己基)-1，4-二硫-7-氮杂螺[4，4]壬烷-8-甲酰胺基)己酸盐酸盐(12a)；
(S)-7-(3-氨基丙酰基)-N-(6-(羟胺基)-6-氧络己基)-1，4-二硫-7-氮杂螺[4，4]壬烷-8-甲酰胺基盐酸盐(12b)；
(S)-7-(4-氨基丁酰基)-N-(6-(羟胺基)-6-氧络己基)-1，4-二硫-7-氮杂螺[4，4]壬烷-8-甲酰胺基盐酸盐(12c)；
(S)-7-((S)-2-氨基丙酰基)-N-(6-(羟胺基)-6-氧络己基)-1，4-二硫-7-氮杂螺[4，4]壬烷-8-甲酰胺基盐酸盐(12d)；
(S)-7-((S)-2-氨基-3-甲基丁酰基)-N-(6-(羟胺基)-6-氧络己基)-1，4-二硫-7-氮杂螺[4，4]壬烷-8-甲酰胺基盐酸盐(12e)；
(S)-7-((S)-2-氨基-4-甲基戊酰基)-N-(6-(羟胺基)-6-氧络己基)-1，4-二硫-7-氮杂螺[4，4]壬烷-8-甲酰胺基盐酸盐(12f)；
(S)-7-((2S，3R)-2-氨基-3-甲基戊酰基)-N-(6-(羟胺基)-6-氧络己基)-1，4-二硫-7-氮杂螺[4，4]壬烷-8-甲酰胺基盐酸盐(12g)；
(S)-7-((S)-2-氨基-3-羟基丙酰基)-N-(6-(羟胺基)-6-氧络己基)-1，4-二硫-7-氮杂螺[4，4]壬烷-8-甲酰胺基盐酸盐(12h)；
(S)-N-(6-(羟胺基)-6-氧络己基)-7-((S)-吡咯烷-2-羰基)-1，4-二硫-7-氮杂螺[4，4]壬烷-8-甲酰胺基盐酸盐(12i)；
(S)-N-(6-(羟胺基)-6-氧络己基)-7-(哌啶-4-羰基)-1，4-二硫-7-氮杂螺[4，4]壬烷-8-甲酰胺基盐酸盐(12j)；
(S)-7-((S)-2-氨基-3-苯丙基)-N-(6-(羟胺基)-6-氧络己基)-1，4-二硫-7-氮杂螺[4，4]壬烷-8-甲酰胺基盐酸盐(12k)；
(S)-7-((S)-2-氨基-3-(4-羟基苯基)丙基)-N-(6-(羟胺基)-6-氧络己基)-1，4-二硫-7-氮杂螺[4，4]壬烷-8-甲酰胺基盐酸盐(12l)；
(S)-7-((S)-2-氨基-3-(一氢-吲哚-3-基)丙酰基)-N-(6-(羟胺基)-6-氧络己基)-1，4-二硫-7-氮杂螺[4，4]壬烷-8-甲酰胺基盐酸盐(12m)；
(S)-7-((S)-2，6-二氨基己基)-N-(6-(羟胺基)-6-氧络己基)-1，4-二硫-7-氮杂螺[4，4]壬烷-8-甲酰胺基盐酸盐(12n)。
3.权利要求1所述化合物的制备方法，其特征在于所用中间体为(S)-7-(叔丁氧羰基)-1，4-二硫-7-氮杂螺[4，4]壬烷-8-羧酸和6-氨基正己酸甲酯盐酸盐。
4.权利要求1所述化合物的制备方法，包括如下步骤：
以光学纯的(S)-1，4-二硫-7-氮杂螺[4，4]壬烷-8-羧酸为原料，经仲胺基保护后，与6-氨基正己酸甲酯盐酸盐进行缩合反应得关键中间体5，然后制成羟肟酸得目标产物6，进一步脱掉叔丁氧羰基(Boc)得目标产物7；或者，
将中间体5的Boc基团脱掉，引入各种Boc保护的氨基酸残基，再转化成相应的羧酸10和羟肟酸11，11脱掉Boc得到目标产物12；合成路线如下：
其中，R1的定义与权利要求1的式(1)化合物相同；
合成路线中的试剂为：(a)碳酸二叔丁酯，1mol/L氢氧化钠溶液，四氢呋喃；(b)乙酰氯，无水甲醇；(c)三乙胺，二环己基碳二亚胺，1-羟基苯并三氮唑，无水四氢呋喃；(d)羟胺钾，无水甲醇；(e)氯化氢饱和的乙酸乙酯；(f)三氟乙酸，二氯甲烷；(g)各种Boc保护的氨基酸，O-苯并三氮唑-N，N，N′，N′-四甲基脲四氟硼酸酯，三乙胺，无水四氢呋喃；(h)2mol/L氢氧化钠溶液，乙醇；(i)氯甲酸异丁酯，三乙胺，盐酸羟胺，甲醇，无水四氢呋喃。
5.权利要求1或2所述的化合物在制备预防或治疗与组蛋白去乙酰化酶活性异常表达相关的哺乳动物疾病的药物中的应用；所述的与组蛋白去乙酰化酶活性异常表达的相关哺乳动物疾病包括：癌症，神经变性疾病，病毒感染，炎症，白血病，疟疾或糖尿病。
6.一种适于口服给予哺乳动物的药物组合物，包含权利要求1或2的化合物和一种或多种药学上可接受载体或赋形剂。
7.一种适于胃肠外给予哺乳动物的药物组合物，包含权利要求1或2的化合物和一种或多种药学上可接受载体或赋形剂。
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| 《2008年山东省学会药物化学与抗生素专业委员会会议资料》 20081231 方浩 组蛋白去酰化酶抑制剂的研究进展 45-51 1-7 , * |
| 方浩: "组蛋白去酰化酶抑制剂的研究进展", 《2008年山东省学会药物化学与抗生素专业委员会会议资料》 * |
Cited By (2)
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|---|---|---|---|---|
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