CN101973883A - 一种烟草中的酚类化合物及其制备方法和应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了烟草中一种多酚类化合物及其制备方法和应用。该化合物具有新颖通式(I)的结构，系将烟草样品粉碎后以70％的乙醇分3次用超声提取，合并提取液并浓缩成浸膏，浸膏用硅胶柱层析初分，然后采用高效液相半制备色谱进一步分离，即得到所需新化合物。对该化合物进行了抗氧化活性和清除自由基活性筛选，实验结果显示该化合物显示出较强的抗氧化和清除自由基活性。

Description

一种烟草中的酚类化合物及其制备方法和应用

技术领域

本发明属于烟草化学领域，更具体地说，本发明涉及一种烟草中的酚类化合物。同时，还涉及所述化合物的制备方法和用途。

背景技术

烟草是人类所认识的各种植物中含化学物质最多的一种，经过几十年的研究，目前从烟草中鉴定出来的单体化学物质就超过3000多种，而且还有许多成分尚未鉴定出来。烟草除主要用于卷烟生产外，还可从中提取多种有利用价值的化学成分，因此除作为卷烟消费外，加强烟草及其废弃物的综合利用具有重要意义。

多酚(Polyphenol)是一类广泛存在于植物体内的多元酚化合物，在维管植物中的含量仅次于纤维素、半纤维素和木质素，广泛存在于植物的皮、根、叶、果中。烟草中发现的多酚种类非常多，主要有丹宁类、香豆素类、黄酮类、花色素苷类和带羟基的环己烷类等，占烟草总重的3％以上，烟草中的多酚类化合物对烟草的吸味和色泽均有重要影响。大量的实验研究表明，多酚类化合物具有抗氧化、抗过敏、抗菌消炎、降血糖等功能。

发明内容

本发明的目的在于提供一种从烟草中提取的新的多酚类化合物。

本发明的另一个目的是提供一种所述化合物的制备方法。

本发明进一步的目的是提供所述化合物在在抗氧化和抗自由基中的应用。

本发明的目的通过下述技术方案予以实现：

除非另有说明，本发明中所采用的百分数均为质量百分数。

A.本发明从烟草中分离出一种新的多酚类化合物，该化合物具有下述结构式：

该化合物的命名为：烟草酚A(Tobphenol A)。

B.本发明提供了一种所述化合物的制备方法，该方法采用以下步骤：

(1)将烟草样品粉碎后，以70％的乙醇分3次用超声提取；

(2)合并提取液并浓缩成浸膏，浸膏用硅胶柱层析初分；

(3)采用高效液相半制备色谱进一步分离，即得到所需的新化合物。

C.本发明对所述的新化合物进行了抗氧化活性检测和抗自由基效果试验，该化合物具有显著的抗氧化和抗自由基活性。

与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

1.有害自由基具有强氧化性，可损害人体的组织和细胞，进而引起心脑血管等慢性疾病，加速机体的衰老。因此，对自由基的及时清除对维护人体健康具有十分重要的意义。本发明提供的新化合物具有抗氧化和自由基作用，可为医药工业提供有药用价值的新化合物或先导化合物。

2.本发明从烟草中提取出新的具有药物活性的化合物，这些活性是现有的烟草提取物未见报导过的，为烟草的综合利用与深度开发，开拓了新的思路。

附图说明

图1为化合物的高分辨质谱(HRESIMS)；

图2为化合物的核磁共振氢谱(¹H NMR)；

图3为化合物的核磁共振炭谱(¹³C NMR)；

图4为化合物主要HMBC相关(→)。

具体实施方式

通过下面给出的具体实施例和典型应用实施例，可以进一步清楚地了解本发明。但它们并不是对本发明保护范围的限定。

实施例1

——化合物的制备

烟草样品采于云南玉溪，品种为红花大金元。将烟草样品取样2.5kg粉碎到30目，以70％的乙醇用超声提取3次，提取液合并浓缩成浸膏，得浸膏212g。浸膏用适量丙酮溶解后用300g粗硅胶(80～100目)拌样，2.5kg硅胶(160-200目)装柱进行硅胶柱层析，氯仿∶丙酮(1∶0→0∶1)梯度洗脱，TLC监测合并相同的部分，得到8个部分(纯氯仿、氯仿-丙酮20∶1、氯仿-丙酮9∶1、氯仿-丙酮8∶2、氯仿-丙酮3∶2、氯仿-丙酮1∶1、氯仿-丙酮1∶2、纯丙酮)，其中氯仿-丙酮(1∶1)洗脱部分15.4g用安捷仑1100半制备高效液相色谱分离，以30％的甲醇为流动相，Zorbax SB-C₁₈(9.4×250mm，5μm)半制备柱为固定相，紫外检测器检测波长为254nm，每次进样50μL，收集21.2min的色谱峰，多次累加后蒸干，再次用纯甲醇溶解，再以甲醇为流动相，用Sephadex LH-20凝胶柱层析分离，即制得该化合物。

实施例2

——化合物的鉴定

本专利化合物为淡黄色粉末；紫外光谱(溶剂为甲醇)，λ_max(logε)278(3.12)，238(3.31)，210(3.97)nm；红外光谱(溴化钾压片)v_max3490，3024，2897，2852，1708，1655，1632，1590，1450，1392，1154，1038，918，848cm^-1；HRESIMS(图-1)给出准分子离子峰m/z 433.1499[M+H]⁺(计算值433.1492)。结合¹H和¹³C NMR谱给出一个分子式C₂₂H₂₄O₉，不饱和度为11。从¹H和¹³CNMR谱(图-2和图-3)信号可以看出化合物中有2个苯环(包括5个双键次甲基碳，δ_C106.3、106.3、111.3、113.2、121.8)；此外还有1个脂羰基(δ_C168.1)，一个羧酸羰基(δ_C173.4)，1个次甲基(δ_C38.5)，1个氧化的亚甲基(δ_C75.0)，一组双键((δ_C143.9、116.5)，4个甲氧基(δ_C55.6，55.6，55.8，60.6)。经HMBC(附图-4)相关证实，双键(C-7、C-8)和C-1相连，而脂羰基(C-9)和双键相连；亚甲基(C-7’)和苯(C-1’)、氧化次甲基(C-8’)相连，羧基(C-9’)则和氧化次甲基(C-8’)相连。进一步经HMBC相关证实苯环上C-3、C-3’、C-4’、C-5’为甲氧基取代，C-4为羟基取代；至此本专利化合物的结构得以确定。

实施例3

——化合物抗氧化活性检测

抗氧化活性以清除DPPH自由基能力的大小表示；以50μg/mL为初筛浓度，测定其清除脂性自由基DPPH的活性。取一块costar 96孔板，加入新鲜配制的DPPH乙醇溶液(6.5×10⁵mol/L)190μL/孔，加入待测样品10μL/孔，空白孔加10μL生理盐水，充分混匀，用封板膜封板后室温下避光静置30分钟，于UV2401分光光度计上测定仪上测定各孔吸光度值，测定波长为517nm；样品对脂性自由基DPPH清除率按下式计算：

DPPH清除率(％)＝(A_空白-A_样品)/A_空白×100％

A_空白：空白对照组吸光度值；A_样品：加样品组吸光度值。

样品平行5次检测，计算半数清除浓度IC50测定结果为5.87μg/L，表明化合物具有良好的抗氧化活性和清除自由基活性。

Claims (4)

1.一种具有下述结构式的化合物：

其命名为烟草酚A。

2.一种权利要求1所述化合物的制备方法，其特征在于，该方法采用以下步骤：

(1)烟草样品粉碎后以70％的乙醇分3次用超声提取；

(2)合并提取液并液浓缩成浸膏；

(3)浸膏用硅胶柱层析初分，然后采用高效液相半制备色谱进一步分离，即得到所需的化合物。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：所用的烟草样品的原料为采于云南玉溪的红花大金元。

4.权利要求1所述的化合物在制备抗氧化的药物中的应用。

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