CN101972294A - 杜仲化学成分作为血管保护剂的新用途 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及杜仲化学成分作为血管保护剂的新用途。具体地说,本发明涉及杜仲或杜仲提取物在制备用于作为血管保护剂和/或降血压剂的药物中的用途,或者在制备用于治疗和/或预防血管增生性疾病的药物中的用途。其中所述的杜仲提取物中包含至少一种选自以下的成分:京尼平苷、汉黄芩素、千叶素A、α-氧-β-D-葡萄吡喃糖基-4,2′,4′-三羟基二氢查耳酮、和白桦脂酸。根据本发明,所述5种化学成分或者包含它们的杜仲提取物可以用作有效的血管保护剂和/或降血压剂,用于治疗和/或预防血管增生性疾病。
Description
技术领域
本发明涉及传统中药材杜仲中的若干化学成分的新用途,特别是杜仲中的千叶素A、汉黄芩素、α-氧-β-D-葡萄吡喃糖基-4,2′,4′-三羟基二氢查耳酮、白桦酯酸、京尼平苷作为血管保护剂的制药用途。
背景技术
人体血管系统有其自身的正常代谢平衡功能,但是出现血管功能异常,可造成对血管系统的损害。如血管平滑肌细胞增殖是动脉粥样硬化斑块形成和冠状动脉成形术后发生再狭窄的病理基础;平滑肌细胞内钙离子浓度升高会引起血管收缩,而血管舒缩功能的异常会导致高血压的发生。一些血管保护剂可通过拮抗高钾引起的血管平滑肌细胞内钙离子浓度的升高以及拮抗去甲肾上腺素引起的血管收缩而发挥降压作用,通过抑制血管平滑肌细胞增殖防治动脉粥样硬化斑块形成,从而维持血管的正常生理功能,在防治高血压、动脉粥样硬化、血管成形术后再狭窄、冠心病、脑血管病中具有重要的作用。
杜仲为杜仲科植物杜仲Eucommia ulmoides Oliv.的树皮,又名思仙(《本经》),木绵、思仲(《别录》),石思仙(《本草衍义补遗》)。味甘微辛,性温入肝、肾经。具有补肝肾,强筋骨,安胎的功效。用于治疗腰脊酸疼,足膝痿弱,小便余沥,阴下湿痒,胎漏欲堕,胎动不安,高血压。
鉴于杜仲良好的效果,药物学家对其化学成分进行了广泛的研究。目前从杜仲中分离的生物活性成分主要有三类,木质素类,环烯醚萜类和黄酮类等化学成分。现代药理研究表明,杜仲的降压作用与松脂醇二葡萄糖苷、生物碱、绿原酸、桃叶珊瑚苷和糖类有关。抗肿瘤作用与木质素、苯丙素和环烯醚萜有关。其水煎液和醇提液均有补肾、增强免疫作用。杜仲药材还有抗氧化、抗衰老、抗肌肉骨骼老化、抗菌、抗病毒的作用。
CN101347418(中国专利申请号:200710044099.5,公开日:2009年1月21日)研究了8-O-4′型木质素在制备抗补体活性药物中的用途,该发明据说从中药杜仲中分离提取得到化合物8-O-4′型木脂素,经体外实验证实对在补体系统的经典和旁路途径激活所引发的细胞溶血有抑制,对补体系统的经典和旁路途径激活有明显抑制作用;药理试验结果证明,具有显著的抗补体作用,且有效浓度低。
CN101260131(中国专利申请号:200810031122.1,公开日:2008年9月10日)公开了从杜仲中提取得到环烯醚萜活性部位及单体京尼平甙酸(geniposidic acid,GPA)、京尼平甙(geniposide,GP)及桃叶珊瑚甙(aucubin,AU)的方法,该方法以杜仲(皮、叶或籽)为原料,采用常规浸提法、超声波提取法或微波提取法对原材料进行提取,以溶剂萃取、特种吸附剂吸附分离等方法对提取液进行初步纯化,得到环烯醚萜活性部位(环烯醚萜总量不低于50%),再采用制备高效液相色谱技术,以醇-水溶液为流动相,对GPA、GP和AU进行分离,低温浓缩并冷冻干燥,得到以上三种单体,其含量均不低于90%。
现有技术尚未见有关于杜仲特别是其提取物,更特别地是其单体化学成分具有例如血管保护剂和/或降血压等的作用。因此,对杜仲化学基础进行进一步的研究,探寻具有生理活性的组成,这对于为临床上相关疾病的治疗提供新的途径而言具有重要意义。
发明内容
本发明的目的是对杜仲化学基础进行进一步的研究,探寻具有生理活性的组成,为临床上相关疾病的治疗提供新的途径。本发明人对杜仲进行系统的植物化学分离,令人意外地发现,中药材杜仲,特别是其提取物,更特别地是从杜仲中提取的某些单体化学成分具有有效的血管保护剂和/或降血压等的作用。本发明基于上述发现而得以完成。
为此,本发明第一方面提供了杜仲在制备用于作为血管保护剂和/或降血压剂的药物中的用途,或者在制备用于治疗和/或预防血管增生性疾病的药物中的用途。
根据本发明第一方面任一项的用途,其中所述血管保护剂用于治疗和/或预防选自下列的疾病或病症:血管性病症包括但不限于动脉粥样硬化、高血压、血管成形术后再狭窄、冠心病、脑血管病。
根据本发明第一方面任一项的用途,其中所述血管增生性疾病选自下列的疾病或病症:血管性病症包括但不限于动脉粥样硬化、高血压、血管成形术后再狭窄、冠心病、脑血管病、肾小球疾病、肺动脉高压、糖尿病性血管病变、脉管炎,偏头痛,血管性头痛。
根据本发明第一方面任一项的用途,其中所述药物给予哺乳动物,其给药剂量为所述哺乳动物每天每kg体重相当于杜仲药材1-40g,优选2-20g,更优选5-10g。
本发明第二方面提供了杜仲提取物在制备用于作为血管保护剂和/或降血压剂的药物中的用途,或者在制备用于治疗和/或预防血管增生性疾病的药物中的用途。
根据本发明第二方面任一项的用途,其中所述血管保护剂用于治疗和/或预防选自下列的疾病或病症:血管性病症包括但不限于动脉粥样硬化、高血压、血管成形术后再狭窄、冠心病、脑血管病、肾小球疾病、肺动脉高压、糖尿病性血管病变、脉管炎,偏头痛,血管性头痛。根据本发明第二方面任一项的用途,其中所述血管增生性疾病选自下列的疾病或病症:血管性病症包括但不限于动脉粥样硬化、高血压、血管成形术后再狭窄、冠心病、脑血管病、肾小球疾病、肺动脉高压、糖尿病性血管病变、脉管炎,偏头痛,血管性头痛。
根据本发明第二方面任一项的用途,其中所述的杜仲提取物中包含至少一种选自以下的成分:京尼平苷(在本文可称为EUB30-1)、汉黄芩素(在本文可称为EUC-4)、千叶素A(在本文可称为EUC-6)、α-氧-β-D-葡萄吡喃糖基-4,2′,4′-三羟基二氢查耳酮(在本文可称为EUE-3)、和白桦脂酸(在本文可称为EUC-2)。
根据本发明第二方面任一项的用途,其中所述的杜仲提取物中包含以下的成分:京尼平苷、汉黄芩素、千叶素A、α-氧-β-D-葡萄吡喃糖基-4,2′,4′-三羟基二氢查耳酮、和白桦脂酸。
根据本发明第二方面任一项的用途,其中所述京尼平苷、汉黄芩素、千叶素A、α-氧-β-D-葡萄吡喃糖基-4,2′,4′-三羟基二氢查耳酮、和白桦脂酸的总量占所述提取物总重量的10-90%(w/w,即重量百分数,下同),优选20~80%(w/w),更优选30~60%(w/w)。
根据本发明第二方面任一项的用途,其中所述的药物的剂量为所述哺乳动物每天每kg体重相当于杜仲药材1-40g,优选2-20g,更优选5-10g。
根据本发明第二方面任一项的用途,其中所述的杜仲提取物是经如下步骤制备的:将杜仲用含水乙醇溶液提取;使所得醇提取物用石油醚萃取,弃醚层,将残余物浓缩,干燥,得提取物;或者使所得醇提取物依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取,将各萃取物分别回收溶剂后得固形物,合并氯仿部分、乙酸乙酯部分和正丁醇部分的固形物,得提取物。
根据本发明第二方面任一项的用途,其中所述的杜仲提取物是经如下步骤制备的:
a)将杜仲用2~20倍量(优选5~15倍量,更优选8~12倍量,例如10倍量)的60~98%(优选70~98%,更优选80~98%,例如80%、85%、90%、95%或98%)乙醇浸泡5~24小时(优选5~18小时,更优选8~15小时);
b)回流提取0.5~10小时(优选0.5~8小时,更优选0.5~6小时,更优选0.5~4小时,更优选1~4小时,例如1小时、2小时、3小时、4小时),倾出提取液;
c)任选地使步骤b)的药渣重复进行步骤a)和步骤b)1~3次(例如1次、2次、3次);
d)合并步骤b)和步骤c)的提取液,过滤,滤液回收乙醇至在室温下的密度约为1.15-1.20的浓缩液;
e)使步骤d)的浓缩液用石油醚萃取,弃醚层,将残余物浓缩,干燥,得提取物;或者,e)使步骤d)的浓缩液依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取,将各萃取物分别回收溶剂后得固形物,合并氯仿部分、乙酸乙酯部分和正丁醇部分的固形物,得提取物。
上述方法所得的提取物的化学组成可通过本发明下文所述的纯化步骤知晓,或者直接进行色谱分析测得该提取物中包含至少一种选自以下的成分:京尼平苷、汉黄芩素、千叶素A、α-氧-β-D-葡萄吡喃糖基-4,2′,4′-三羟基二氢查耳酮、和白桦脂酸。优选的是包含全部的上述5种成分。
本发明第三方面提供了选自下列成分的一种或多种的组合在制备作为血管保护剂和/或降血压剂的药物中的用途,或者在制备用于治疗和/或预防血管增生性疾病的药物中的用途:京尼平苷、汉黄芩素、千叶素A、α-氧-β-D-葡萄吡喃糖基-4,2′,4′-三羟基二氢查耳酮、和白桦脂酸。
根据本发明第三方面任一项的用途,其中所述血管保护剂用于治疗和/或预防选自下列的疾病或病症:血管性病症包括但不限于动脉粥样硬化、高血压、血管成形术后再狭窄、冠心病、脑血管病、肾小球疾病、肺动脉高压、糖尿病性血管病变、脉管炎,偏头痛,血管性头痛。根据本发明第三方面任一项的用途,其中所述血管增生性疾病选自下列的疾病或病症:血管性病症包括但不限于动脉粥样硬化、高血压、血管成形术后再狭窄、冠心病、脑血管病、肾小球疾病、肺动脉高压、糖尿病性血管病变、脉管炎,偏头痛,血管性头痛。
根据本发明第三方面任一项的用途,其为下列成分在制备作为血管保护剂和/或降血压剂的药物中的用途:京尼平苷、汉黄芩素、千叶素A、α-氧-β-D-葡萄吡喃糖基-4,2′,4′-三羟基二氢查耳酮、和白桦脂酸。
根据本发明第一方面任一项的用途,其中所述药物给予哺乳动物,其给药剂量为所述哺乳动物每天每kg体重相当于杜仲药材1-40g,优选2-20g,更优选5-10g。
根据本发明第三方面任一项的用途,其中所述药物给予哺乳动物,以所述哺乳动物每天每kg体重计,其中所述各成分单独或任意组合时的剂量可以相互独立地分别为:
根据本发明第三方面任一项的用途,其中下列成分的一种或多种的组合是从杜仲中提取得到:京尼平苷、汉黄芩素、千叶素A、α-氧-β-D-葡萄吡喃糖基-4,2′,4′-三羟基二氢查耳酮、和白桦脂酸。
根据本发明第三方面任一项的用途,其中从杜仲中提取京尼平苷、汉黄芩素、千叶素A、α-氧-β-D-葡萄吡喃糖基-4,2′,4′-三羟基二氢查耳酮、和白桦脂酸的步骤如下:
将杜仲用含水乙醇溶液提取;
使所得醇提取物依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取,将各萃取物分别回收溶剂后得各萃取溶剂部分的固形物;
氯仿部分经过硅胶柱层析(石油醚-丙酮洗脱)后,33~36馏分经反复硅胶柱层析后分别得到白桦脂酸,43~56馏分以氯仿-丙酮进行硅胶柱层析,所得馏分经聚酰胺柱层析后分别得到汉黄芩素和千叶素A;
乙酸乙酯部分通过硅胶柱层析,采取氯仿:甲醇溶剂系统梯度洗脱,所得49~55馏分通过乙酸乙酯-甲醇、氯仿-甲醇溶剂系统反复硅胶柱层析后,得到黄色粉末状物质为EUE-3;
正丁醇部分经过D101大孔吸附树脂后,30%乙醇水溶剂洗脱部分过硅胶柱层析(乙酸乙酯-甲醇梯度洗脱),18~20流分以氯仿:甲醇:H2O系统进行硅胶柱层析,所得8~14流分中析出白色粉末为京尼平苷(EUB30-1)。
本发明第四方面提供了一种用于作为血管保护剂和/或降血压剂或者用于治疗和/或预防哺乳动物(特别是人)血管增生性疾病的药物组合物,其中包含治疗和/或预防有效量的杜仲提取物以及任选的药学可接受的赋形剂。
根据本发明第四方面任一项的药物组合物,其中所述的杜仲提取物中包含至少一种选自以下的成分:京尼平苷、汉黄芩素、千叶素A、α-氧-β-D-葡萄吡喃糖基-4,2′,4′-三羟基二氢查耳酮、和白桦脂酸。
根据本发明第四方面任一项的药物组合物,其中所述的杜仲提取物中包含以下的成分:京尼平苷、汉黄芩素、千叶素A、α-氧-β-D-葡萄吡喃糖基-4,2′,4′-三羟基二氢查耳酮、和白桦脂酸。
根据本发明第四方面任一项的药物组合物,其中所述京尼平苷、汉黄芩素、千叶素A、α-氧-β-D-葡萄吡喃糖基-4,2′,4′-三羟基二氢查耳酮、和白桦脂酸的总量占所述提取物总重量的10-90%(w/w,即重量百分数,下同),优选20~80%(w/w),更优选30~60%(w/w)。
根据本发明第四方面任一项的药物组合物,其中所述的药物组合物给予所述哺乳动物的剂量为所述哺乳动物每天每kg体重相当于杜仲药材1-40g,优选2-20g,更优选5-10g。
根据本发明第四方面任一项的药物组合物,其中所述的杜仲提取物是经如下步骤制备的:将杜仲用含水乙醇溶液提取;使所得醇提取物用石油醚萃取,弃醚层,将残余物浓缩,干燥,得提取物;或者使所得醇提取物依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取,将各萃取物分别回收溶剂后得固形物,合并氯仿部分、乙酸乙酯部分和正丁醇部分的固形物,得提取物。制备所述提取物的进一步优选的步骤参见本发明第二方面所提及的。
本发明第五方面提供了一种用于作为血管保护剂和/或降血压剂或者用于治疗和/或预防哺乳动物(特别是人)血管增生性疾病的药物组合物,其中包含治疗和/或预防有效量的至少一种药物活性成分以及任选的药学可接受的赋形剂,所述的药物活性成分选自:京尼平苷、汉黄芩素、千叶素A、α-氧-β-D-葡萄吡喃糖基-4,2′,4′-三羟基二氢查耳酮、和白桦脂酸。
根据本发明第五方面任一项的药物组合物,其中包含治疗和/或预防有效量的京尼平苷、汉黄芩素、千叶素A、α-氧-β-D-葡萄吡喃糖基-4,2′,4′-三羟基二氢查耳酮、和白桦脂酸,以及任选的药学可接受的赋形剂。
本发明第六方面提供了一种在有需要的哺乳动物(特别是人)中进行血管保护和/或降血压治疗和/或预防的方法,或者在有需要的哺乳动物(特别是人)中治疗和/或预防血管增生性疾病的方法,所述方法包括给所述哺乳动物施用治疗和/或预防有效量的杜仲,或者施用治疗和/或预防有效量的杜仲提取物,或者施用治疗和/或预防有效量的至少一种选自下列的成分:京尼平苷、汉黄芩素、千叶素A、α-氧-β-D-葡萄吡喃糖基-4,2′,4′-三羟基二氢查耳酮、和白桦脂酸。
根据本发明第六方面任一项的方法,其中所述血管增生性疾病选自:血管性病症包括但不限于动脉粥样硬化、高血压、血管成形术后再狭窄、冠心病、脑血管病、肾小球疾病、肺动脉高压、糖尿病性血管病变、脉管炎,偏头痛,血管性头痛。
本发明任一方面或该任一方面的任一项所具有的特征同样适用于其它任一方面或该其它任一方面的任一项,只要它们不会相互矛盾,当然在相互之间适用时,必要的话可对相应特征作适当修饰。在本发明中,例如,提及“本发明第一方面任一项”时,该“任一项”是指本发明第一方面的任一子方面;在其它方面以类似方式提及时,亦具有相同含义。
发明详述:
下面对本发明的各个方面和特点作进一步的描述。
本发明所引述的所有文献,它们的全部内容通过引用并入本文,并且如果这些文献所表达的含义与本发明不一致时,以本发明的表述为准。此外,本发明使用的各种术语和短语具有本领域技术人员公知的一般含义,即便如此,本发明仍然希望在此对这些术语和短语作更详尽的说明和解释,提及的术语和短语如有与公知含义不一致的,以本发明所表述的含义为准。
如本文所述的,术语“杜仲”符合2005年版《中华人民共和国药典》相应项下的规定。
本文中使用的术语“约”,例如在修饰制备产物的产率时,其通常是指本领域允许的误差范围,例如±10%,例如±5%,例如±2%。
本文中使用的短语“血管增生性疾病”具有本领域技术人员公知的一类疾病或症状,并且通常包括但不限于:与血管损伤有关的疾病或病症,血管性病症包括但不限于动脉粥样硬化、高血压、血管成形术后再狭窄、冠心病、脑血管病、肾小球疾病、肺动脉高压、糖尿病性血管病变、脉管炎,偏头痛,血管性头痛,等等。
尽管本发明对所涉及的活性成分作了详细描述,本发明人仍然愿意在此强调,这些活性成分(其包括,但不限于,京尼平苷、汉黄芩素、千叶素A、α-氧-β-D-葡萄吡喃糖基-4,2′,4′-三羟基二氢查耳酮、和白桦脂酸)具有本领域技术人员已知的化学结构、物理化学性质。
如本文所述的,术语“有效量”是指可在受试者中实现治疗、预防、减轻和/或缓解本发明所述疾病或病症的剂量。
如本文所述的,术语“药物组合物”,是指可用于在受试者中实现治疗、预防、减轻和/或缓解本发明所述疾病、病症、症状的物质。
如本文所述的,术语“受试者”可以指患者或者其它接受本发明组合物和提取物以治疗、预防、减轻和/或缓解本发明所述疾病、病症、症状的动物,特别是哺乳动物,例如人、狗、猴、牛、马等。
如本文所述的,术语“疾病或症状”是指所述受试者的一种身体状态,该身体状态与本发明所述疾病或症状有关。
如本文所述的,“%”,如未特别指明,对于总物料是固体时一般是指重量/重量的百分比,对于总物料是液体时一般是指重量/体积的百分比。当然,对于总物料是液体并且溶质是液体时,表征该液态溶质的百分比一般是指体积/体积的百分比。
本发明药物组合物中使用的“药学可接受的赋形剂”可以是药物制剂领域中任何常规的赋形剂。特定赋形剂的选择将取决于用于治疗特定患者的给药方式或疾病类型和状态。用于特定给药模式的合适药物组合物的制备方法完全在药物领域技术人员的知识范围内。例如,可以作为药学可接受的赋形剂包括药学领域常规的稀释剂、载体、填充剂、粘合剂、湿润剂、崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、吸附载体和润滑剂等。必要时,还可以在药物组合物中加入香味剂、防腐剂和甜味剂等。
本发明的药物组合物可以制成片剂、粉剂、颗粒剂、胶囊、口服液、膏剂、霜剂、注射乳剂(注射用无菌粉针)等多种形式。上述各种剂型的药物均可以按照药学领域的常规方法制备。
本发明人发现杜仲中化学成分千叶素A、汉黄芩素可以受体调控性Ca2+通道发挥快速舒张血管的作用,而千叶素A、α-氧-β-D-葡萄吡喃糖基-4,2′,4′-三羟基二氢查耳酮、白桦脂酸、京尼平苷可通过电压调控性Ca2+通道抑制血管平滑肌细胞内钙离子浓度升高而快速舒张血管,提示上述五种化合物具有降血压作用。更令人惊奇的是其中汉黄芩素和白桦脂酸还可以抑制血管平滑肌细胞增殖,血管平滑肌细胞的过度增殖是动脉粥样硬化、高血压、和血管成形术后再狭窄等疾病共同的细胞病理基础之一,抑制VSMC异常增殖是防治血管增生性疾病的重要途径之一,因此本发明的研究结果提示二者可以用于防治动脉粥样硬化、高血压、和血管再狭窄等疾病药物的制备。另外,本发明研究结果表明,千叶素A、汉黄芩素、α-氧-β-D-葡萄吡喃糖基-4,2′,4′-三羟基二氢查耳酮、尤其适合应用于绝经期妇女的高血压和心血管等疾病。
附图说明
图1显示了千叶素A可降低高钾引起的细胞内钙离子浓度的升高。该图为千叶素A对60mM K+引起的大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞(A7r5)内钙离子浓度影响的时程图。图中表示的是60mM K+能显著刺激A7r5细胞内钙离子浓度的升高,千叶素A(0.001mM,0.01mM,0.1mM)可浓度依赖地抑制高钾刺激后的A7r5细胞内钙离子浓度的升高,该效应不被雌激素受体拮抗剂(ICI)所拮抗,0.01mM千叶素A单独作用A7r5细胞,不引起钙离子浓度的升高。数据用每孔细胞每个时间点的荧光强度占该孔细胞0秒时的荧光强度的%表示。**p<0.01组与对照组比较有显著性差异。图1及其它各图中出现的control表示对照。
图2显示了α-氧-β-D-葡萄吡喃糖基-4,2′,4′-三羟基二氢查耳酮可降低高钾引起的细胞内钙离子浓度的升高。该图为α-氧-β-D-葡萄吡喃糖基-4,2′,4′-三羟基二氢查耳酮对60mM K+引起的大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞(A7r5)内钙离子浓度影响的时程图。图中表示的是60mM K+能显著刺激A7r5细胞内钙离子浓度的升高,α-氧-β-D-葡萄吡喃糖基-4,2′,4′-三羟基二氢查耳酮(0.001mM,0.01mM,0.1mM)可浓度依赖地抑制高钾刺激后的A7r5细胞内钙离子浓度的升高,该效应不被雌激素受体拮抗剂(ICI)所拮抗,0.01mM千叶素A单独作用A7r5细胞,不引起钙离子浓度的升高。数据用每孔细胞每个时间点的荧光强度占该孔细胞0秒时的荧光强度的%表示。*p<0.05组与对照组比较有差异,**p<0.01组与对照组比较有显著性差异。
图3显示了白桦脂酸可降低高钾引起的细胞内钙离子浓度的升高。该图为白桦脂酸对60mM K+引起的大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞(A7r5)内钙离子浓度影响的时程图。60mM K+能显著刺激A7r5细胞内钙离子浓度的升高,白桦脂酸(0.001mM,0.01mM,0.1mM)可浓度依赖地抑制高钾刺激后的A7r5细胞内钙离子浓度的升高,0.01mM白桦脂酸单独作用A7r5细胞,不引起钙离子浓度的升高。数据用每孔细胞每个时间点的荧光强度占该孔细胞0秒时的荧光强度的%表示。
图4显示了京尼平苷可降低高钾引起的细胞内钙离子浓度的升高。该图为京尼平苷对60mM K+引起的大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞(A7r5)内钙离子浓度影响的时程图。60mM K+能显著刺激A7r5细胞内钙离子浓度的升高,京尼平苷(0.001mM,0.01mM,0.1mM)可浓度依赖地抑制高钾刺激后的A7r5细胞内钙离子浓度的升高,0.01mM京尼平苷单独作用A7r5细胞,不引起钙离子浓度的升高。数据用每孔细胞每个时间点的荧光强度占该孔细胞0秒时的荧光强度的%表示。
图5a、图5b显示了千叶素A对可舒张去甲肾上腺素引起的大鼠胸主动脉收缩。图5a和图5b显示用终浓度10-6M的去甲肾上腺素(NE)刺激内皮完整血管收缩,累计加入千叶素A使其终浓度分别为10-6、10-5、10-4M,千叶素A可浓度依赖性舒张去甲肾上腺素(NE)引起的血管收缩,与对照相比有显著性差异(P<0.05或P<0.01)。图5b中纵座标以及其它图中出现的Channel表示通道。
图6a、图6b显示了汉黄芩素可舒张去甲肾上腺素引起的大鼠胸主动脉收缩。图6a和图6b显示用终浓度10-6M的去甲肾上腺素(NE)刺激内皮完整血管收缩,累计加入汉黄芩素使其终浓度分别为10-6、10-5、10-4M,汉黄芩素有舒张血管的趋势,浓度为10-4M时能明显松弛预收缩的血管环,与对照相比有显著性差异(P<0.01)。
图7显示了E2和汉黄芩素可抑制血小板源生长因子-BB诱导的A7r5血管平滑肌细胞增殖(n=6)。其中显示汉黄芩素对PDGF-BB诱导的A7r5细胞增殖的影响(n=6)。汉黄芩素(10-7、10-6、10-5M)可浓度依赖性抑制血小板源生长因子-BB刺激的A7r5细胞增殖,与对照组比较有显著性差异。图中纵坐标“cell viability(% of control)”表示“细胞存活率(对照的%)”,wogonin表示汉黄芩素。
图8显示了白桦酯酸可抑制血小板源生长因子-BB诱导的A7r5血管平滑肌细胞细胞增殖(n=6)。其中显示白桦脂酸对PDGF-BB诱导的A7r5细胞增殖的影响(n=6)。血小板源生长因子-BB(10ng·ml-1)能明显刺激A7r5细胞增殖,白桦脂酸(10-7、10-6、10-5M)可浓度依赖性抑制血小板源生长因子-BB刺激的A7r5细胞增殖,与对照组比较有显著性差异。图中纵坐标“cell viability(% of control)”表示“细胞存活率(对照的%)”,betulinic acid表示白桦酯酸。
具体实施方式
通过下面的实施例可以对本发明进行进一步的描述,然而,本发明的范围并不限于下述实施例。本领域的专业人员能够理解,在不背离本发明的精神和范围的前提下,可以对本发明进行各种变化和修饰。本发明对试验中所使用到的材料以及试验方法进行一般性和/或具体的描述。虽然为实现本发明目的所使用的许多材料和操作方法是本领域公知的,但是本发明仍然在此作尽可能详细描述。
实施例1:杜仲中5个化合物的制备
取杜仲药材(购自河南信阳药材公司)31.5Kg,95%的乙醇提取两次,60%的乙醇提取一次,合并提取液,浓缩至无醇味,分散于水中,依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取,四个溶剂萃取物分别回收溶剂后得固形物。结果如下:杜仲石油醚萃取部分153g,杜仲氯仿萃取部分384g,杜仲乙酸乙酯萃取部分126g,杜仲正丁醇萃取部分520g。其中,杜仲正丁醇萃取部分采用D101大孔吸附树脂柱层析,通过30%、50%等乙醇水系统梯度洗脱后分别得到140g、50g。
杜仲乙醇提取物氯仿萃取部分分离纯化过程:杜仲氯仿萃取物350g,进行硅胶柱色谱分离,用石油醚:丙酮系统梯度洗脱,共得105个流分。33~36流分用石油醚:丙酮系统经反复硅胶柱层析后,分别标记为EUC-2。跟文献值比对后,确定EUC-2为白桦脂酸。43~56流分以氯仿:丙酮系统进行硅胶柱层析,所得流分经两次聚酰胺柱层析后得到汉黄芩素和千叶素A。
杜仲乙醇提取物的乙酸乙酯萃取部分,通过硅胶柱层析,采取氯仿:甲醇溶剂系统梯度洗脱,19~27流分再利用硅胶柱层析,通过石油醚:乙酸乙酯溶剂系统梯度洗脱,得到白色粉末状物质,命名为EUE-1。跟文献值比对后,确定EUE-1京尼平。49~55流分再通过乙酸乙酯:甲醇,氯仿:甲醇溶剂系统反复硅胶柱层析后,得到黄色粉末状物质EUE-3。跟文献值比对后,确定EUE-3为α-氧-β-D-葡萄吡喃糖基-4,2′,4′-三羟基二氢查耳酮。
杜仲正丁醇部分500g过D101大孔吸附树脂后,30%部分130g进行硅胶柱色谱分离,乙酸乙酯:甲醇溶剂系统梯度洗脱,18~20流分以氯仿:甲醇:H2O系统进行硅胶柱层析,所得8~14流分中有白色粉末析出,标记为EUB30-1,跟文献值比对后,确定EUB30-1为京尼平苷。
实施例2:杜仲中5个化合物的结构确证
对实施例1获得的5个化合物进行了结构确认(委托天津大学分析测试中心检测,500MHz核磁)。分析结果显示这些化合物的结构与文献报道的结构一致,具体如下。
京尼平苷(EUB30-1),白色粉末:1HNMR(DMSO-d6,400MHz):δ7.47(1H,s,H-3),5.68(1H,s,H-7),5.12(1H,d,J=6.8Hz,H-1),4.53(1H,d,J=7.6Hz,H-1′),4.14(1H,br d,J=14.4Hz,H-10a),3.97(1H,br d,J=14.4Hz,H-10b),3.66(3H,s,-OCH3),3.15(1H,m,H-5),2.70(1H,m,H-6a),2.64(1H,m,H-9),2.05(1H,br d,J=14.4Hz,H-6b)。
汉黄芩素(EUC-4),黄色针晶;1HNMR(DMSO-d6,500MHz):δ12.50(s),8.05(2H,m,H-2′,6′),7.60(3H,m,H-3′,4′,5′),6.99(1H,s,H-6),6.30(1H,s,H-3),3.84(3H,s).13CNMR(DMSO-d6,125MHz):δ182.7(C-4),163.7(C-2),158.0(C-7),157.0(C-5),150.3(C-9),132.8(C-1′),131.5(C-4′),130.0(C-3′,5′),128.4(C-8),127.0(C-2′,6′),105.8(C-3),104.4(C-10),99.9(C-6),61.7(-OCH3).
千叶素A(EUC-6),黄色针晶;1HNMR(DMSO-d6,500MHz):δ12.92(s),10.82(s),8.06(2H,m,H-2′,6′),7.56(3H,m,H-3′,4′,5′),6.97(1H,s,H-8),6.63(1H,s,H-3),3.74(3H,s)。
α-氧-β-D-葡萄吡喃糖基-4,2′,4′-三羟基二氢查耳酮(EUE-3),黄色粉末;1HNMR(CD3OD,500MHz):δ7.43(2H,d,J=9.0Hz,H-2,6),7.14(2H,d,J=9.0Hz,H-3,5),5.46(1H,dd,J=12.5,13Hz,H-α),2.73(1H,m,β-H),3.04(1H,m,H-β),6.37(1H,d,J=2.0Hz,H-3′),6.52(1H,dd,J=9.0,2.0Hz,H-5′),7.74(1H,d,J=9.0Hz,H-6′),4.95(1H,d,J=7.0Hz,H-1″).
13C-NMR(CD3OD,125MHz):δ193.2(C=O),80.7(C-α),45.0(C-β),129.9(C-1),128.8(C-2,6),117.8(C-3,5),159.2(C-4),115.0(C-1′),165.4(C-2′),103.8(C-3′),166.8(C-4′),111.8(C-5′),134.4(C-6′),102.2(C-1″)。
白桦脂酸(EUC-2),白色粉末;1HNMR(C5D5N-d5,500MHz):δ4.90(1H,s,H-29a),4.72(1H,s,H-29b),3.49(1H,m,H-3),1.74(3H,s,H-30),1.18(3H,s,H-26),1.02(3H,s,H-27),1.01(3H,s,H-23),0.96(3H,s,H-25),0.77(3H,s,H-24).
13CNMR(C5D5N-d5,125MHz):δ178.8(C-28),151.3(C-20),109.9(C-29),78.1(C-3),56.6(C-17),55.9(C-5),50.9(C-9),49.7(C-18),47.7(C-19),42.8(C-14),41.1(C-8),39.5(C-4),39.2(C-13),38.5(C-1),37.6(C-22),37.5(C-10),34.8(C-7),32.8(C-16),31.2(C-21),30.2(C-15),28.6(C-2),28.3(C-23),26.1(C-12),21.1(C-11),19.4(C-6),18.8(C-26),16.4(C-30),16.4(C-25),16.3(C-24),14.9(C-27)。
实施例3:杜仲中5个化合物对高K+刺激的A7r5细胞内Ca
2+
浓度
的影响
试验方法:
无酚红含10%CS-FBS的DMEM培养液常规培养A7r5细胞(大鼠胸大动脉平滑肌细胞),以5×104细胞/孔接种于96孔板,培养24h,每孔加入100μLCalcium 4荧光试剂(Molecular Devices,美国)后,于37℃孵箱中孵育1h。取出后,向每孔里分别加入50μL含/不含KCl(60mmol·L-1)和不同浓度药物,在激发波长485nm,发射波长525nm条件下实时检测每孔细胞的荧光值,检测时间5min,读取相应荧光值。数据用每孔细胞加药后荧光值占相应细胞加药前荧光值(即0秒时的荧光值)的百分比表示。
试验结果:
60mM高钾溶液能显著促进细胞内钙离子浓度的升高。千叶素A(10-6M、10-5M、10-4M)和α-氧-β-D-葡萄吡喃糖基-4,2′,4′-三羟基二氢查耳酮(10-6M、10-5M、10-4M)、白桦脂酸(10-6M、10-5M、10-4M)、京尼平苷(10-6M、10-5M、10-4M)同样能浓度依赖性降低高钾引起的细胞内钙离子浓度升高,与高钾组相比具有统计学意义(P<0.01)。参见图1、图2、图3和图4。
实施例4、杜仲活性成分的大鼠血管动脉环实验
试验方法:
①.实验缓冲液(Kreb’s液)配置,调pH=7.4(新鲜配制最佳,通95%O2/5%CO2平衡)。
②.打开实验仪器,设置通道,血管张力基线调零。
③.处死动物,原位剥离动脉(不得牵拉,以免破坏内皮功能),取合适长度放在预冷的Kreb’s液中。
④.进一步剥离血管,手术刀截取3mm长度的动脉环(不得牵拉),其余血管仍放在预冷的Kreb’s液中继续下步实验。
⑤.将处理好的动脉环放在张力传感器上,动脉环应处于松弛状态,固定好后调整动脉环张力至0.5g。
⑥.1-1.5h内程序性调整动脉环张力至3.0g,换液两次(20mineach),待稳定后正式实验。
⑦.首先加入累计浓度分别为15、30、60、120mM的高K+溶液(各浓度作用时间2-4min),刺激血管收缩,作量效曲线。
⑧.洗脱,待血管环张力调整至3.0g时,加入累计浓度分别为10-8、10-7、10-6、10-5M的去甲肾上腺素(NE)溶液(各浓度作用时间4min),刺激血管收缩,作量效曲线。
⑨.洗脱,待血管环张力调整至3.0g时,首先用NE(10-6M)刺激血管收缩,然后加入累计浓度分别为10-8、10-7、10-6、10-5M的乙酰胆碱(Ach)溶液(各浓度作用时间4min),刺激血管收缩,作量效曲线。
⑩.洗脱,待血管环张力调整至3.0g时,首先用NE(10-6M)刺激血管收缩,然后加入累计浓度分别为10-8、10-7、10-6、10-5M的受试药物溶液(各浓度作用时间8-10min),刺激血管收缩,作量效曲线。
试验结果:
千叶素A(10-6、10-5、10-4M)、可浓度依赖性舒张去甲肾上腺素(NE)引起的血管收缩,舒张率分别为89.84%、58.57%、28.48%,与对照相比有显著性差异(P<0.05或P<0.01)。结果见图5a、图5b。
汉黄芩素(10-6、10-5M)有舒张血管的趋势,浓度为10-4M时能明显松弛预收缩的血管环舒张率为48.09%,与对照相比有显著性差异(P<0.01)。结果见图6a、图6b。
实施例5:杜仲化学成分对PDGF-BB刺激的A7r5细胞增殖的影响
试验方法:
A7r5细胞以含10%FBS的DMEM培养液常规培养,至80%融合时用0.25%胰酶消化,以4×103个细胞每孔接种于96孔板。置于37℃,5%CO2培养箱中培养24h后,细胞贴壁良好,铺展生长。此时吸去培养液,用D-Hank’s液200μl每孔洗涤1次,加入无酚红无血清DMEM培养液培养24h,使细胞静止于G0/G1期。实验分为溶剂对照组(0.1%DMSO)、雌二醇(E2)组(0.01μM)、E2(0.01μM)+雌激素受体提起拮抗剂(ICI)(0.1μM)组、药物各浓度组、以及药物+ICI(0.1μM)组,除对照组外,每孔细胞加入终浓度为10ng·ml-1的血小板源生长因子-BB(PDGF-BB),继续培养24h,试剂盒检测细胞增殖。
试验结果:
PDGF-BB(10ng·ml-1)能明显刺激A7r5细胞增殖。汉黄芩素(10-7、10-6、10-5M)可浓度依赖性抑制PDGF-BB刺激的A7r5细胞增殖,且其抑制效应可被ICI 182,780所拮抗,表明汉黄芩素可通过激活ER发挥抑制血管平滑肌细胞增殖的作用,见图7。此外,杜仲中的活性成分白桦酯酸(10-7、10-6、10-5M)可浓度依赖性抑制PDGF-BB刺激的A7r5细胞增殖,见图8。
从本发明可见,千叶素A可对NE预收缩的血管环产生快速舒张效应,并且可以通过非ER依赖途径降低高钾引起的血管平滑肌细胞内钙离子浓度升高;汉黄芩素既可发挥快速的血管舒张作用,又可以通过ER介导途径抑制血管平滑肌细胞增殖;α-氧-β-D-葡萄吡喃糖基-4,2′,4′-三羟基二氢查耳酮可通过ER非依赖途径降低高钾引起的血管平滑肌细胞内钙离子浓度升高。白桦脂酸能够降低高钾引起的血管平滑肌细胞内钙离子浓度升高,同时也具有抑制血管平滑肌细胞增殖的作用;京尼平苷降低高钾引起的血管平滑肌细胞内钙离子浓度升高,发挥舒张血管作用。
Claims (13)
1.杜仲在制备用于作为血管保护剂和/或降血压剂的药物中的用途,或者在制备用于治疗和/或预防血管增生性疾病的药物中的用途。
2.杜仲提取物在制备用于作为血管保护剂和/或降血压剂的药物中的用途,或者在制备用于治疗和/或预防血管增生性疾病的药物中的用途。
3.根据权利要求2的用途,其中所述血管增生性疾病选自下列的疾病或病症:血管性病症包括但不限于动脉粥样硬化、高血压、血管成形术后再狭窄、冠心病、脑血管病、肾小球疾病、肺动脉高压、糖尿病性血管病变、脉管炎,偏头痛,血管性头痛。
4.根据权利要求2至3任一项的用途,其中所述的杜仲提取物中包含至少一种选自以下的成分:京尼平苷、汉黄芩素、千叶素A、α-氧-β-D-葡萄吡喃糖基-4,2′,4′-三羟基二氢查耳酮、和白桦脂酸。
5.根据权利要求2至4任一项的用途,其中所述京尼平苷、汉黄芩素、千叶素A、α-氧-β-D-葡萄吡喃糖基-4,2′,4′-三羟基二氢查耳酮、和白桦脂酸的总量占所述提取物总重量的10-90%(w/w)。
6.根据权利要求2至5任一项的用途,其中所述的杜仲提取物是经如下步骤制备的:将杜仲用含水乙醇溶液提取;使所得醇提取物用石油醚萃取,弃醚层,将残余物浓缩,干燥,得提取物;或者使所得醇提取物依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取,将各萃取物分别回收溶剂后得固形物,合并氯仿部分、乙酸乙酯部分和正丁醇部分的固形物,得提取物。
7.选自下列成分的一种或多种的组合在制备作为血管保护剂和/或降血压剂的药物中的用途,或者在制备用于治疗和/或预防血管增生性疾病的药物中的用途:京尼平苷、汉黄芩素、千叶素A、α-氧-β-D-葡萄吡喃糖基-4,2′,4′-三羟基二氢查耳酮、和白桦脂酸。
8.根据权利要求7的用途,其中所述血管增生性疾病选自下列的疾病或病症:血管性病症包括但不限于动脉粥样硬化、高血压、血管成形术后再狭窄、冠心病、脑血管病、肾小球疾病、肺动脉高压、糖尿病性血管病变、脉管炎,偏头痛,血管性头痛。
10.根据权利要求7至9任一项的用途,其中下列成分的一种或多种的组合是从杜仲中提取得到:京尼平苷、汉黄芩素、千叶素A、α-氧-β-D-葡萄吡喃糖基-4,2′,4′-三羟基二氢查耳酮、和白桦脂酸。
11.一种用于作为血管保护剂和/或降血压剂或者用于治疗和/或预防哺乳动物(特别是人)血管增生性疾病的药物组合物,其中包含治疗和/或预防有效量的杜仲提取物以及任选的药学可接受的赋形剂。
12.根据权利要求11的药物组合物,其中所述的杜仲提取物中包含至少一种选自以下的成分:京尼平苷、汉黄芩素、千叶素A、α-氧-β-D-葡萄吡喃糖基-4,2′,4′-三羟基二氢查耳酮、和白桦脂酸。
13.一种用于作为血管保护剂和/或降血压剂或者用于治疗和/或预防哺乳动物(特别是人)血管增生性疾病的药物组合物,其中包含治疗和/或预防有效量的至少一种药物活性成分以及任选的药学可接受的赋形剂,所述的药物活性成分选自:京尼平苷、汉黄芩素、千叶素A、α-氧-β-D-葡萄吡喃糖基-4,2′,4′-三羟基二氢查耳酮、和白桦脂酸。
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Cited By (6)
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CN102225088A (zh) * | 2011-06-22 | 2011-10-26 | 欧阳冬生 | 杜仲木脂素在制备防治高血压肾损害药物上的应用 |
CN105250352A (zh) * | 2015-10-20 | 2016-01-20 | 欧阳冬生 | 杜仲木脂素提取物在制备肺动脉高压治疗药物中的应用 |
CN110862425A (zh) * | 2019-11-08 | 2020-03-06 | 河南中医药大学 | 一种从水栀子中提取京尼平苷化合物的方法及其应用 |
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Cited By (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102198166A (zh) * | 2011-05-23 | 2011-09-28 | 天津中医药大学 | 杜仲化学成分作为肾脏保护剂的新用途 |
CN102198166B (zh) * | 2011-05-23 | 2013-05-08 | 天津中医药大学 | 杜仲化学成分作为肾脏保护剂的新用途 |
CN102225088A (zh) * | 2011-06-22 | 2011-10-26 | 欧阳冬生 | 杜仲木脂素在制备防治高血压肾损害药物上的应用 |
CN102225088B (zh) * | 2011-06-22 | 2012-09-12 | 欧阳冬生 | 杜仲木脂素在制备防治高血压肾损害药物上的应用 |
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Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C02 | Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001) | ||
WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Open date: 20110216 |