CN101953838A - 吴茱萸次碱用于治疗银屑病的应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及8，13-Dihydro-indolo[2′，3′：3，4]pyrido[2，1-b]quinazolin-5(7H)-one化合物(吴茱萸次碱)在治疗银屑病方面的应用。上述物质在治疗银屑病时，以软膏剂、凝胶剂、贴剂、洗剂、擦剂和涂膜剂等形式局部施用。吴茱萸次碱结构式：

Description

吴茱萸次碱用于治疗银屑病的应用

技术领域

本发明涉及吴茱萸次碱新用途。

背景技术

银屑病是一种多基因遗传背景下免疫异常的慢性皮肤病，因其具有发病率及复发率较高、主要累及青壮年等特点而在皮肤科临床和科研领域倍受重视。银屑病特征性病理改变表现为真皮浅层血管周围的炎症细胞(尤其是T淋巴细胞)浸润，角质形成细胞过度增生。银屑病发病机制尚未完全阐明，外周血T淋巴细胞经趋化浸润于真皮并被活化，继而产生IL-6、IL-8、INF-γ等多种细胞因子的过程在银屑病的发生发展中起重要作用。近期的文献报道，某些感觉神经递质(如P物质、血管活性肠肽)在银屑病皮损组织感觉神经纤维与末梢的表达高于其自身正常皮肤，推测感觉神经可能也与银屑病有关^[3]。

银屑病发病机制复杂，因此针对其机制治疗手段多样化，维A酸类药物和蒽林的主要作用机理是调节角质形成细胞的异常增殖和分化状态；传统免疫抑制剂(糖皮质激素和甲氨蝶呤等)以及新型免疫抑制剂(环孢素A，他克莫司，匹美克莫司，西洛莫司等)的主要作用机理是抑制T细胞的增殖和活化；生物类制剂(如TNF-α，CD4，CD25，CD11a，IL-2R，IL-6R，IL-12等抗体)主要是阻断T细胞活化及其相关作用。但由于银屑病个体差异较大，长期单用一种药物副作用明显，其治疗效果及应用前景尚不令人满意。因此，开发新机制的治疗药物是十分必要的。

吴茱萸次碱是芸香科植物吴茱萸(Evodia rutaecarpa)的主要成分。吴茱萸次碱通过抑制某些炎性因子和激活辣椒素受体促进降钙素基因相关肽等神经递质的释放来发挥一系列药理作用，如降血压、抗炎、抗过敏、抗肿瘤等。但吴茱萸次碱在银屑病方面的应用尚未见研究报道。

降钙素基因相关肽(Calcitonin Gene-Related Peptide，CGRP)是感觉神经的主要递质，由37个氨基酸残基组成。研究发现，除了感觉神经能合成与释放CGRP，其它细胞如T淋巴细胞、肺上皮细胞和内皮细胞也能合成与分泌CGRP，这些细胞通过自分泌或旁分泌CGRP，在调节局部组织细胞功能中发挥重要作用。表皮下组织有丰富的感觉神经末梢分布，作为感觉神经主要递质之一的CGRP在调节皮肤组织的功能以及在某些皮肤疾病(如特应性皮炎与瘙痒症)的病理过程中的作用已被初步确认。新近的文献表明，银屑病患者不仅血浆中CGRP水平显著高于健康人^[11]，银屑病斑块的CGRP阳性表达量也明显高于其自身正常皮肤^[12]。这些发现提示CGRP可能参与银屑病发生发展的病理过程。

辣椒素受体(Vanilloid Receptor，VR1)是调控CGRP合成与释放的关键受体，有文献报道，VR1受体激活时，可促进CGRP的合成与释放，但VR1过度激活可能会耗竭感觉神经内递质。患者局部应用辣椒素治疗银屑病的机制可能是通过激活皮肤中的辣椒素受体以耗竭CGRP达到治疗目的。但是，由于辣椒素对皮肤和粘膜的局部刺激性较强，而银屑病是慢性炎症性皮肤病，不利于长期使用。因此开发与辣椒素作用机制相同的吴茱萸次碱可能也能获得治疗银屑病的效果。

大量专利文献已公开了多种中药、中成药、化学药物、药物组合及制剂以外用或内服的形式治疗银屑病。上述专利不包含或者类推出本发明申请化合物对银屑病的治疗作用，更无其外用抗银屑病的专利公开。

发明内容

本发明的目的是开发一种用于治疗银屑病的，含吴茱萸次碱的外用药物。更进一步地，本发明的目的是提供一种治疗银屑病的局部外用制剂。

本发明提供一种吴茱萸次碱在制备治疗银屑病药物中的用途，并采用皮肤局部给药途径。

吴茱萸次碱皮肤局部试用时，所采用的制剂可以是本领域常规的外用制剂，包括软膏剂、凝胶剂、贴剂、洗剂、擦剂和涂膜剂等。药物也能以柔性纳米脂质体、固体脂质纳米粒、微乳、固体分散体等形式存在于软膏、凝胶、贴剂、洗剂和涂膜剂基质中。

吴茱萸次碱上述制剂的浓度为0.01％-20％(wt)，常用0.1％-2％(wt)，有效剂量为10μg-100mg。给药剂量为50-100μg/次，1-3次/天。

具体实施方案：

下面通过具体实施方案进一步说明本发明。所述实施例仅用于说明或解释本发明的实施方案，而不能限制本发明的保护范围。

实施例1吴茱萸次碱软膏剂

处方组成

成分              用量(g)

药物微粉/微粒     20.0g

硬脂酸            150.0g

羊毛脂            20.0g

液体石蜡          120.0g

甘油              50.0g

三乙醇胺          20.0g

十二烷基硫酸钠    20.0g

尼泊金乙酯        1.0g

纯净水            加至1000g

制备方法

首先将硬脂酸、羊毛脂、液体石蜡放置于适当的容器中，加热至70℃；再将三乙醇胺、纯净水、十二烷基硫酸钠、尼泊金乙酯置于适当的容器中，加热至80℃；药物微粉或微粒加入水相中，搅拌混合均匀；缓缓的将水相注入油相中，搅拌混匀，得到软膏，使其温度下降至约55℃；甘油与等体积的水预热至相同温度后，加入上述软膏中，搅拌均匀，并使其温度降至室温，得到平滑均匀细腻的软膏。

实施例2吴茱萸次碱凝胶剂

处方组成

成分             用量(wt/wt)

药物微粉/微粒    1-20.0％

卡波姆940        0.5-2％

甘油             1-5％

三乙醇胺         0.5-2％

尼泊金乙酯       0.1％

吐温-80          适量

纯净水           70-90％

制备方法

取卡波姆940加蒸馏水充分溶胀后，加入吐温-80，搅拌均匀，再加入三乙醇胺，搅拌成凝胶；将药物微粉或微粒溶于无水乙醇中，加入尼泊金乙酯溶解，再加入甘油后，混匀，再加入凝胶中，添加水至足量，搅拌均匀，即得。实施例3吴茱萸次碱固体脂质纳米粒

处方组成

成分            用量(mg)

药物微粉        2.0

单硬脂酸甘油酯  2.0-20.0

豆油            20.0

泊洛沙姆188     80.0

甘油            90.0

纯净水          8mL

制备方法

称取单硬脂酸甘油酯2-20mg，在70±5℃下熔融，高速磁力搅拌条件下加入以微量乙酸乙酯溶解的大豆卵磷脂20mg和药物微粉2mg，混匀溶解，挥干乙酸乙酯，使成熔融有机相；称取泊洛沙姆18880mg和甘油90mg溶解于相同温度的3mL纯净水中，构成水相。在高速磁力搅拌条件下，将水相趁热迅速倾入70±5℃的油相中，立即将混合物经超声波细胞粉碎仪处理8min(400W，50％脉冲)，迅速转移至3mL0-2℃纯净水中，在冰浴、1500rpm条件下持续搅拌1h，定容于10mL棕色容量瓶中，以0.45μm微孔滤膜过滤，取续滤液即得。

实施例4吴茱萸次碱治疗银屑病的动物模型实验

鼠尾鳞片银屑病模型：鼠尾鳞片因表皮正常角化缺乏颗粒层，其天然的角化形成与人类银屑病表皮相似，故可模拟银屑病角化不全的特点。利用此模型可评价药物促进颗粒层形成的作用，药物如能促进鼠尾颗粒层形成，则可能具有抗银屑病作用。

具体操作：取雄性ICR小鼠50只，体重25～30g，随机分成5组，每组10只。给药组为：三个剂量吴茱萸次碱软膏组，一个剂量空白软膏组。各组每日涂抹小鼠尾部2次(80μg/只/天)。连续用药14天，末次涂抹后次日处死动物，在距鼠尾根部2cm处取表皮。进行常规组织切片，HE染色。光镜下观察，凡两个毛囊之间的鳞片表皮有连续成行的颗粒细胞层者，称为有颗粒层形成的鳞片。计数每100个鳞片中有颗粒层的鳞片数(凡两个毛囊口之间的鳞片表皮有排列成行的颗粒层者计为有颗粒层形成的鳞片)，比较各组数据。实验结果见表1。

表1不同剂量吴茱萸次碱软膏对小鼠尾部鳞片表皮颗粒层形成的影响

注：与空白软膏组对比，**P＜0.01

结果表明，2％-10％吴茱萸次碱软膏组与空白软膏组相比，P＜0.05，有统计学意义，即不同剂量的吴茱萸次碱软膏剂对鼠尾鳞片表皮颗粒层形成的作用与空白软膏基质对鼠尾鳞片表皮颗粒层形成的作用相比，差异有显著性。提示吴茱萸次碱对鼠尾鳞片表皮颗粒层形成有明显的促进作用，颗粒层的鳞片数显著增多。因此，吴茱萸次碱可以改变表皮的角化程度，从角化不全恢复到正常角化，进而对银屑病有治疗作用。

普萘洛尔诱发银屑病模型：将普萘洛尔涂于豚鼠耳、背部皮肤诱发了角化不全、棘层肥厚等类似银屑病的组织学改变，可用于药物治疗银屑病的药效评估。取50只雄性豚鼠，随机分为5组，即正常对照组、空白软膏组及三个剂量吴茱萸次碱爱软膏组，除正常对照组外，其余各组用棉签涂普萘洛尔搽剂于左侧耳廓(0.3g/cm²)，2次/天，连续2周以造成耳部皮肤银屑样皮损模型。此后开始用药，正常对照组不用药，其余组每日给药2次(80μg/只/天)，用药2周后，取豚鼠左侧耳廓皮肤，用10％甲醛液固定，石腊包埋，HE染色，观察耳廓皮肤角质层、颗粒层、棘细胞层、基底细胞层等变化。同时在光镜下(×400)用测微尺测表皮厚度，然后换算成实际厚度(μm)，进行各组间差异性比较。实验结果见表2。

表2不同剂量吴茱萸次碱对普萘诺尔诱发银屑病模型的影响

注：与空白软膏组相比*P＜0.05

结果表明，2％-10％吴茱萸次碱软膏组与空白软膏组相比，P＜0.05有统计学意义，即不同剂量吴茱萸次碱软膏对表皮增厚的作用与空白软膏相比，差异有显著性，提示吴茱萸次碱对表皮增厚有明显的促进作用，也就是说吴茱萸次碱对普萘诺尔诱发的银屑病模型有治疗作用。

实施例5吴茱萸次碱治疗银屑病患者的效果

病例选择：60例寻常性斑块状银屑病(已做病理确诊)志愿者，年龄20～54岁，临床表现典型，随机平均分为3组(男女各半)。安慰剂组(空白软膏基质)，10％吴茱萸次碱软膏组，阳性药物阿维A组。三组间年龄、症状无统计学差异，且无其他系统疾病。

治疗方法：涂于局部皮损处，一天两次，连续给药4周。

疗效判定标准：①临床痊愈或基本痊愈：红斑、鳞屑等皮损消退90％以上或完全消退；②显效：红斑、鳞屑等皮损消退≥60％；③好转：红斑、鳞屑等皮损消退≥30％；④无效：红斑、鳞屑等皮损消退＜30％。采用银屑病皮损面积-严重性指数(PASI评分)对治疗前后的银屑病患者进行评分，分析其变化。实验结果见表3。

表3斑块状银屑病患者治疗情况

结果显示，10％吴茱萸次碱对银屑病治疗效果明显，但亚于经典药物阿维A。

Claims (4)

1.吴茱萸次碱在制备治疗银屑病药物中的用途，其中所述的药物是适于皮肤局部给药的剂型。

2.按照权利要求1的用途，其中所述的制剂主要包括软膏剂、凝胶剂、贴剂、洗剂、擦剂和涂膜剂。

3.按照权利要求2的应用，其中所述的制剂浓度为0.01％-20％(wt)，常用0.1％-2％(wt)。

4.按照权利要求3的应用，有效剂量为10μg-100mg；给药剂量为50-100μg/次，1-3次/天。