CN101935335A - 一类克洛皂苷及其制法与抗高致病h5n1流感病毒的应用 - Google Patents
一类克洛皂苷及其制法与抗高致病h5n1流感病毒的应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN101935335A CN101935335A CN2009100842456A CN200910084245A CN101935335A CN 101935335 A CN101935335 A CN 101935335A CN 2009100842456 A CN2009100842456 A CN 2009100842456A CN 200910084245 A CN200910084245 A CN 200910084245A CN 101935335 A CN101935335 A CN 101935335A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- reaction
- protecting group
- group
- preparation
- protecting
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 241000712461 unidentified influenza virus Species 0.000 title claims abstract description 27
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 19
- 229930182490 saponin Natural products 0.000 title claims abstract description 12
- 150000007949 saponins Chemical class 0.000 title claims abstract description 9
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 title abstract description 13
- 235000017709 saponins Nutrition 0.000 title abstract description 11
- 206010064097 avian influenza Diseases 0.000 title abstract description 5
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 52
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 13
- WQLVFSAGQJTQCK-UHFFFAOYSA-N diosgenin Natural products CC1C(C2(CCC3C4(C)CCC(O)CC4=CCC3C2C2)C)C2OC11CCC(C)CO1 WQLVFSAGQJTQCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 10
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 9
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 claims abstract description 8
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 claims abstract description 5
- 239000003443 antiviral agent Substances 0.000 claims abstract description 3
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical class CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 94
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 86
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 66
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 43
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 claims description 40
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 39
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 38
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical group C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 36
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 claims description 35
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 claims description 35
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 33
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 31
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 claims description 30
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 28
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 27
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 26
- -1 rhamnosyl Chemical group 0.000 claims description 26
- 238000000746 purification Methods 0.000 claims description 21
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 20
- VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 4-Dimethylaminopyridine Chemical group CN(C)C1=CC=NC=C1 VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical class CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 claims description 15
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- XDTMQSROBMDMFD-UHFFFAOYSA-N Cyclohexane Chemical compound C1CCCCC1 XDTMQSROBMDMFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims description 13
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 claims description 13
- 239000003480 eluent Substances 0.000 claims description 13
- 239000002808 molecular sieve Substances 0.000 claims description 13
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 claims description 13
- URGAHOPLAPQHLN-UHFFFAOYSA-N sodium aluminosilicate Chemical compound [Na+].[Al+3].[O-][Si]([O-])=O.[O-][Si]([O-])=O URGAHOPLAPQHLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 13
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 claims description 12
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 11
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims description 11
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims description 11
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 10
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- DWCSNWXARWMZTG-UHFFFAOYSA-N Trigonegenin A Natural products CC1C(C2(CCC3C4(C)CCC(O)C=C4CCC3C2C2)C)C2OC11CCC(C)CO1 DWCSNWXARWMZTG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- WQLVFSAGQJTQCK-VKROHFNGSA-N diosgenin Chemical compound O([C@@H]1[C@@H]([C@]2(CC[C@@H]3[C@@]4(C)CC[C@H](O)CC4=CC[C@H]3[C@@H]2C1)C)[C@@H]1C)[C@]11CC[C@@H](C)CO1 WQLVFSAGQJTQCK-VKROHFNGSA-N 0.000 claims description 9
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 9
- KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N Palladium on carbon Substances [Pd] KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 claims description 8
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 claims description 8
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 claims description 8
- 238000005858 glycosidation reaction Methods 0.000 claims description 7
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 6
- 125000002791 glucosyl group Chemical group C1([C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O1)CO)* 0.000 claims description 6
- UPQQXPKAYZYUKO-UHFFFAOYSA-N 2,2,2-trichloroacetamide Chemical group OC(=N)C(Cl)(Cl)Cl UPQQXPKAYZYUKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 125000000824 D-ribofuranosyl group Chemical group [H]OC([H])([H])[C@@]1([H])OC([H])(*)[C@]([H])(O[H])[C@]1([H])O[H] 0.000 claims description 5
- 125000002777 acetyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)=O 0.000 claims description 5
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 claims description 5
- 150000001335 aliphatic alkanes Chemical class 0.000 claims description 5
- 125000003525 allosyl group Chemical group 0.000 claims description 5
- 229910000323 aluminium silicate Inorganic materials 0.000 claims description 5
- 125000000089 arabinosyl group Chemical group C1([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO1)* 0.000 claims description 5
- 125000003236 benzoyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C(*)=O 0.000 claims description 5
- 125000001589 carboacyl group Chemical group 0.000 claims description 5
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 claims description 5
- HNPSIPDUKPIQMN-UHFFFAOYSA-N dioxosilane;oxo(oxoalumanyloxy)alumane Chemical compound O=[Si]=O.O=[Al]O[Al]=O HNPSIPDUKPIQMN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 125000002519 galactosyl group Chemical group C1([C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O1)CO)* 0.000 claims description 5
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 5
- 239000011968 lewis acid catalyst Substances 0.000 claims description 5
- 125000000311 mannosyl group Chemical group C1([C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O1)CO)* 0.000 claims description 5
- 238000010791 quenching Methods 0.000 claims description 5
- 230000000171 quenching effect Effects 0.000 claims description 5
- 239000001397 quillaja saponaria molina bark Substances 0.000 claims description 5
- 239000011347 resin Substances 0.000 claims description 5
- 229920005989 resin Polymers 0.000 claims description 5
- 125000000969 xylosyl group Chemical group C1([C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO1)* 0.000 claims description 5
- RGUKYNXWOWSRET-UHFFFAOYSA-N 4-pyrrolidin-1-ylpyridine Chemical compound C1CCCN1C1=CC=NC=C1 RGUKYNXWOWSRET-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- IAJILQKETJEXLJ-UHFFFAOYSA-N Galacturonsaeure Natural products O=CC(O)C(O)C(O)C(O)C(O)=O IAJILQKETJEXLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims description 4
- IAJILQKETJEXLJ-QTBDOELSSA-N aldehydo-D-glucuronic acid Chemical compound O=C[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)C(O)=O IAJILQKETJEXLJ-QTBDOELSSA-N 0.000 claims description 4
- WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N alpha-D-galactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N 0.000 claims description 4
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims description 4
- 238000005886 esterification reaction Methods 0.000 claims description 4
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 claims description 4
- 229960003082 galactose Drugs 0.000 claims description 4
- 229960002442 glucosamine Drugs 0.000 claims description 4
- 229940097043 glucuronic acid Drugs 0.000 claims description 4
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 claims description 4
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 claims description 4
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 claims description 4
- TWCMVXMQHSVIOJ-UHFFFAOYSA-N Aglycone of yadanzioside D Natural products COC(=O)C12OCC34C(CC5C(=CC(O)C(O)C5(C)C3C(O)C1O)C)OC(=O)C(OC(=O)C)C24 TWCMVXMQHSVIOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- PLMKQQMDOMTZGG-UHFFFAOYSA-N Astrantiagenin E-methylester Natural products CC12CCC(O)C(C)(CO)C1CCC1(C)C2CC=C2C3CC(C)(C)CCC3(C(=O)OC)CCC21C PLMKQQMDOMTZGG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- UJEMOXPSTTXLRE-UHFFFAOYSA-N benzotriazol-1-yl(phenyl)methanone Chemical compound N1=NC2=CC=CC=C2N1C(=O)C1=CC=CC=C1 UJEMOXPSTTXLRE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 125000004383 glucosinolate group Chemical group 0.000 claims description 3
- 239000000348 glycosyl donor Substances 0.000 claims description 3
- PFOARMALXZGCHY-UHFFFAOYSA-N homoegonol Natural products C1=C(OC)C(OC)=CC=C1C1=CC2=CC(CCCO)=CC(OC)=C2O1 PFOARMALXZGCHY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- AKHNMLFCWUSKQB-UHFFFAOYSA-L sodium thiosulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=S AKHNMLFCWUSKQB-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 3
- 235000019345 sodium thiosulphate Nutrition 0.000 claims description 3
- DPKBAXPHAYBPRL-UHFFFAOYSA-M tetrabutylazanium;iodide Chemical group [I-].CCCC[N+](CCCC)(CCCC)CCCC DPKBAXPHAYBPRL-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 3
- HOSGXJWQVBHGLT-UHFFFAOYSA-N 6-hydroxy-3,4-dihydro-1h-quinolin-2-one Chemical group N1C(=O)CCC2=CC(O)=CC=C21 HOSGXJWQVBHGLT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 238000009833 condensation Methods 0.000 claims description 2
- 230000005494 condensation Effects 0.000 claims description 2
- XXTLNUAMDXGILI-UHFFFAOYSA-N pyridin-1-ium;carbonate Chemical compound [O-]C([O-])=O.C1=CC=[NH+]C=C1.C1=CC=[NH+]C=C1 XXTLNUAMDXGILI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 claims 1
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 claims 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 abstract description 8
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 abstract description 5
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 abstract description 4
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 abstract description 2
- DKVBOUDTNWVDEP-NJCHZNEYSA-N teicoplanin aglycone Chemical compound N([C@H](C(N[C@@H](C1=CC(O)=CC(O)=C1C=1C(O)=CC=C2C=1)C(O)=O)=O)[C@H](O)C1=CC=C(C(=C1)Cl)OC=1C=C3C=C(C=1O)OC1=CC=C(C=C1Cl)C[C@H](C(=O)N1)NC([C@H](N)C=4C=C(O5)C(O)=CC=4)=O)C(=O)[C@@H]2NC(=O)[C@@H]3NC(=O)[C@@H]1C1=CC5=CC(O)=C1 DKVBOUDTNWVDEP-NJCHZNEYSA-N 0.000 abstract description 2
- 125000003147 glycosyl group Chemical group 0.000 abstract 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 abstract 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 abstract 1
- 229930014626 natural product Natural products 0.000 abstract 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 abstract 1
- NWMIYTWHUDFRPL-UHFFFAOYSA-N sapogenin Natural products COC(=O)C1(CO)C(O)CCC2(C)C1CCC3(C)C2CC=C4C5C(C)(O)C(C)CCC5(CCC34C)C(=O)O NWMIYTWHUDFRPL-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 20
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 17
- 101710154606 Hemagglutinin Proteins 0.000 description 16
- 101710093908 Outer capsid protein VP4 Proteins 0.000 description 16
- 101710135467 Outer capsid protein sigma-1 Proteins 0.000 description 16
- 101710176177 Protein A56 Proteins 0.000 description 16
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 15
- 239000000185 hemagglutinin Substances 0.000 description 15
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 14
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 13
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 238000002330 electrospray ionisation mass spectrometry Methods 0.000 description 12
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 10
- 241000725303 Human immunodeficiency virus Species 0.000 description 9
- 229960001031 glucose Drugs 0.000 description 9
- 235000001727 glucose Nutrition 0.000 description 9
- 241000713772 Human immunodeficiency virus 1 Species 0.000 description 8
- 239000012046 mixed solvent Substances 0.000 description 8
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 8
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 8
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical group [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 7
- XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N Argon Chemical compound [Ar] XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- WQDUMFSSJAZKTM-UHFFFAOYSA-N Sodium methoxide Chemical group [Na+].[O-]C WQDUMFSSJAZKTM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 6
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 6
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 6
- RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N imidazole Natural products C1=CNC=N1 RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 6
- GETQZCLCWQTVFV-UHFFFAOYSA-N trimethylamine Chemical group CN(C)C GETQZCLCWQTVFV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 5
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 5
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 5
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 5
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 5
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 5
- ZOXJGFHDIHLPTG-UHFFFAOYSA-N Boron Chemical compound [B] ZOXJGFHDIHLPTG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 4
- 241000712431 Influenza A virus Species 0.000 description 4
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108060001084 Luciferase Proteins 0.000 description 4
- 239000005089 Luciferase Substances 0.000 description 4
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 4
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 4
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 4
- UORVGPXVDQYIDP-UHFFFAOYSA-N borane Chemical compound B UORVGPXVDQYIDP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229910052796 boron Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 4
- 239000007884 disintegrant Substances 0.000 description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- 125000003709 fluoroalkyl group Chemical group 0.000 description 4
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 4
- 229940126181 ion channel inhibitor Drugs 0.000 description 4
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 4
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 4
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 4
- 239000002911 sialidase inhibitor Substances 0.000 description 4
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 4
- 229940032147 starch Drugs 0.000 description 4
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 4
- BDHFUVZGWQCTTF-UHFFFAOYSA-M sulfonate Chemical compound [O-]S(=O)=O BDHFUVZGWQCTTF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 3
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 3
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 3
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 3
- 229920000168 Microcrystalline cellulose Polymers 0.000 description 3
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 101710085035 RNA-directed RNA polymerase catalytic subunit Proteins 0.000 description 3
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 3
- 229910052786 argon Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 3
- AGEZXYOZHKGVCM-UHFFFAOYSA-N benzyl bromide Chemical compound BrCC1=CC=CC=C1 AGEZXYOZHKGVCM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 3
- 235000008504 concentrate Nutrition 0.000 description 3
- 229940042406 direct acting antivirals neuraminidase inhibitors Drugs 0.000 description 3
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 3
- OAYLNYINCPYISS-UHFFFAOYSA-N ethyl acetate;hexane Chemical compound CCCCCC.CCOC(C)=O OAYLNYINCPYISS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 125000004494 ethyl ester group Chemical group 0.000 description 3
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 3
- 239000007902 hard capsule Substances 0.000 description 3
- 150000002431 hydrogen Chemical group 0.000 description 3
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 3
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 3
- 229960001855 mannitol Drugs 0.000 description 3
- 235000019813 microcrystalline cellulose Nutrition 0.000 description 3
- 239000008108 microcrystalline cellulose Substances 0.000 description 3
- 229940016286 microcrystalline cellulose Drugs 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 3
- 239000007901 soft capsule Substances 0.000 description 3
- 229930002600 steroidal saponin Natural products 0.000 description 3
- BCNZYOJHNLTNEZ-UHFFFAOYSA-N tert-butyldimethylsilyl chloride Chemical group CC(C)(C)[Si](C)(C)Cl BCNZYOJHNLTNEZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 150000003512 tertiary amines Chemical class 0.000 description 3
- FTVLMFQEYACZNP-UHFFFAOYSA-N trimethylsilyl trifluoromethanesulfonate Chemical compound C[Si](C)(C)OS(=O)(=O)C(F)(F)F FTVLMFQEYACZNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 3
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 3
- UBCHPRBFMUDMNC-UHFFFAOYSA-N 1-(1-adamantyl)ethanamine Chemical compound C1C(C2)CC3CC2CC1(C(N)C)C3 UBCHPRBFMUDMNC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 1-Ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide Substances CCN=C=NCCCN(C)C LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FPQQSJJWHUJYPU-UHFFFAOYSA-N 3-(dimethylamino)propyliminomethylidene-ethylazanium;chloride Chemical compound Cl.CCN=C=NCCCN(C)C FPQQSJJWHUJYPU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonia chloride Chemical compound [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 101710132601 Capsid protein Proteins 0.000 description 2
- 101710094648 Coat protein Proteins 0.000 description 2
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 2
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 2
- 241000234272 Dioscoreaceae Species 0.000 description 2
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 2
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 2
- 102100021181 Golgi phosphoprotein 3 Human genes 0.000 description 2
- 101710128560 Initiator protein NS1 Proteins 0.000 description 2
- 241000234280 Liliaceae Species 0.000 description 2
- 101710125418 Major capsid protein Proteins 0.000 description 2
- 102000005348 Neuraminidase Human genes 0.000 description 2
- 108010006232 Neuraminidase Proteins 0.000 description 2
- 101710144127 Non-structural protein 1 Proteins 0.000 description 2
- 101710144128 Non-structural protein 2 Proteins 0.000 description 2
- 101710199667 Nuclear export protein Proteins 0.000 description 2
- 101710141454 Nucleoprotein Proteins 0.000 description 2
- 108010061100 Nucleoproteins Proteins 0.000 description 2
- 102000011931 Nucleoproteins Human genes 0.000 description 2
- BOYVXXFJGPOZSN-UHFFFAOYSA-N OS(=O)(=O)C(F)(F)F.C[Si](C)(C)OS(=O)(=O)C(F)(F)F Chemical compound OS(=O)(=O)C(F)(F)F.C[Si](C)(C)OS(=O)(=O)C(F)(F)F BOYVXXFJGPOZSN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 2
- 101710083689 Probable capsid protein Proteins 0.000 description 2
- XUIMIQQOPSSXEZ-UHFFFAOYSA-N Silicon Chemical compound [Si] XUIMIQQOPSSXEZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BQCADISMDOOEFD-UHFFFAOYSA-N Silver Chemical compound [Ag] BQCADISMDOOEFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N acetic acid;2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanal;sodium Chemical compound [Na].CC(O)=O.OCC(O)C(O)C(O)C(O)C=O DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 2
- DKNWSYNQZKUICI-UHFFFAOYSA-N amantadine Chemical compound C1C(C2)CC3CC2CC1(N)C3 DKNWSYNQZKUICI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960003805 amantadine Drugs 0.000 description 2
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 2
- 229940124393 anti-influenza virus drug Drugs 0.000 description 2
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 2
- 229910000085 borane Inorganic materials 0.000 description 2
- OSGAYBCDTDRGGQ-UHFFFAOYSA-L calcium sulfate Chemical compound [Ca+2].[O-]S([O-])(=O)=O OSGAYBCDTDRGGQ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 239000013592 cell lysate Substances 0.000 description 2
- 229940121657 clinical drug Drugs 0.000 description 2
- 239000006184 cosolvent Substances 0.000 description 2
- 239000003405 delayed action preparation Substances 0.000 description 2
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 2
- 239000002662 enteric coated tablet Substances 0.000 description 2
- MJEMIOXXNCZZFK-UHFFFAOYSA-N ethylone Chemical compound CCNC(C)C(=O)C1=CC=C2OCOC2=C1 MJEMIOXXNCZZFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- 229940090044 injection Drugs 0.000 description 2
- 230000009545 invasion Effects 0.000 description 2
- 229960004592 isopropanol Drugs 0.000 description 2
- 239000008297 liquid dosage form Substances 0.000 description 2
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 2
- 229960003752 oseltamivir Drugs 0.000 description 2
- VSZGPKBBMSAYNT-RRFJBIMHSA-N oseltamivir Chemical compound CCOC(=O)C1=C[C@@H](OC(CC)CC)[C@H](NC(C)=O)[C@@H](N)C1 VSZGPKBBMSAYNT-RRFJBIMHSA-N 0.000 description 2
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 2
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 2
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 2
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 2
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 2
- 239000002798 polar solvent Substances 0.000 description 2
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 2
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 2
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 2
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 229960000888 rimantadine Drugs 0.000 description 2
- 239000008299 semisolid dosage form Substances 0.000 description 2
- 229910052710 silicon Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000010703 silicon Substances 0.000 description 2
- 239000004332 silver Substances 0.000 description 2
- 229910052709 silver Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000002002 slurry Substances 0.000 description 2
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 2
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000007909 solid dosage form Substances 0.000 description 2
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- 150000003460 sulfonic acids Chemical class 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- FPGGTKZVZWFYPV-UHFFFAOYSA-M tetrabutylammonium fluoride Chemical compound [F-].CCCC[N+](CCCC)(CCCC)CCCC FPGGTKZVZWFYPV-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 229940126585 therapeutic drug Drugs 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 2
- 229960001028 zanamivir Drugs 0.000 description 2
- ARAIBEBZBOPLMB-UFGQHTETSA-N zanamivir Chemical compound CC(=O)N[C@@H]1[C@@H](N=C(N)N)C=C(C(O)=O)O[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)CO ARAIBEBZBOPLMB-UFGQHTETSA-N 0.000 description 2
- HDXIQHTUNGFJIC-UHFFFAOYSA-N (25R)-spirost-5-en-3beta-ol 3-O-<O-alpha-L-rhamnopyranosyl-(1-->2)-beta-D-glucopyranoside> Natural products O1C2(OCC(C)CC2)C(C)C(C2(CCC3C4(C)CC5)C)C1CC2C3CC=C4CC5OC1OC(CO)C(O)C(O)C1OC1OC(C)C(O)C(O)C1O HDXIQHTUNGFJIC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HBZBAMXERPYTFS-SECBINFHSA-N (4S)-2-(6,7-dihydro-5H-pyrrolo[3,2-f][1,3]benzothiazol-2-yl)-4,5-dihydro-1,3-thiazole-4-carboxylic acid Chemical compound OC(=O)[C@H]1CSC(=N1)c1nc2cc3CCNc3cc2s1 HBZBAMXERPYTFS-SECBINFHSA-N 0.000 description 1
- ODIGIKRIUKFKHP-UHFFFAOYSA-N (n-propan-2-yloxycarbonylanilino) acetate Chemical compound CC(C)OC(=O)N(OC(C)=O)C1=CC=CC=C1 ODIGIKRIUKFKHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000040650 (ribonucleotides)n+m Human genes 0.000 description 1
- BDNKZNFMNDZQMI-UHFFFAOYSA-N 1,3-diisopropylcarbodiimide Chemical compound CC(C)N=C=NC(C)C BDNKZNFMNDZQMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 1-palmitoyl-2-arachidonoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCC IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 0.000 description 1
- NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N Acrylic acid Chemical compound OC(=O)C=C NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004925 Acrylic resin Substances 0.000 description 1
- 229920000178 Acrylic resin Polymers 0.000 description 1
- 241000746976 Agavaceae Species 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 241000272814 Anser sp. Species 0.000 description 1
- 241000272517 Anseriformes Species 0.000 description 1
- 108010001857 Cell Surface Receptors Proteins 0.000 description 1
- VNONINPVFQTJOC-RXEYMUOJSA-N Collettiside III Natural products O([C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)O2)[C@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1CC=2[C@@](C)([C@@H]3[C@H]([C@H]4[C@@](C)([C@H]5[C@H](C)[C@@]6(O[C@H]5C4)OC[C@H](C)CC6)CC3)CC=2)CC1)[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)O1 VNONINPVFQTJOC-RXEYMUOJSA-N 0.000 description 1
- 229920002785 Croscarmellose sodium Polymers 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- 101710118188 DNA-binding protein HU-alpha Proteins 0.000 description 1
- 101710158312 DNA-binding protein HU-beta Proteins 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 description 1
- 206010059866 Drug resistance Diseases 0.000 description 1
- 239000001856 Ethyl cellulose Substances 0.000 description 1
- ZZSNKZQZMQGXPY-UHFFFAOYSA-N Ethyl cellulose Chemical compound CCOCC1OC(OC)C(OCC)C(OCC)C1OC1C(O)C(O)C(OC)C(CO)O1 ZZSNKZQZMQGXPY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 108060003393 Granulin Proteins 0.000 description 1
- 208000031886 HIV Infections Diseases 0.000 description 1
- 208000037357 HIV infectious disease Diseases 0.000 description 1
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000002979 Influenza in Birds Diseases 0.000 description 1
- 239000005909 Kieselgur Substances 0.000 description 1
- SHZGCJCMOBCMKK-JFNONXLTSA-N L-rhamnopyranose Chemical compound C[C@@H]1OC(O)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O SHZGCJCMOBCMKK-JFNONXLTSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 101710199771 Matrix protein 1 Proteins 0.000 description 1
- 101710199769 Matrix protein 2 Proteins 0.000 description 1
- 229920000715 Mucilage Polymers 0.000 description 1
- 229940123424 Neuraminidase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 241000712464 Orthomyxoviridae Species 0.000 description 1
- 241000013557 Plantaginaceae Species 0.000 description 1
- RVGRUAULSDPKGF-UHFFFAOYSA-N Poloxamer Chemical compound C1CO1.CC1CO1 RVGRUAULSDPKGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108050000930 Polymerase acidic proteins Proteins 0.000 description 1
- 229920001214 Polysorbate 60 Polymers 0.000 description 1
- 108700008625 Reporter Genes Proteins 0.000 description 1
- 229920002125 Sokalan® Polymers 0.000 description 1
- 241000208292 Solanaceae Species 0.000 description 1
- 235000002595 Solanum tuberosum Nutrition 0.000 description 1
- 244000061456 Solanum tuberosum Species 0.000 description 1
- 101710172711 Structural protein Proteins 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N Tartaric acid Natural products [H+].[H+].[O-]C(=O)C(O)C(O)C([O-])=O FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000711975 Vesicular stomatitis virus Species 0.000 description 1
- TVXBFESIOXBWNM-UHFFFAOYSA-N Xylitol Natural products OCCC(O)C(O)C(O)CCO TVXBFESIOXBWNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000159213 Zygophyllaceae Species 0.000 description 1
- FCDYAJBVISGNLC-RZDXDWDHSA-N [(2r,3r,4s,5r,6s)-3,4,5-tribenzoyloxy-6-hydroxyoxan-2-yl]methyl benzoate Chemical compound C([C@H]1O[C@@H]([C@@H]([C@@H](OC(=O)C=2C=CC=CC=2)[C@@H]1OC(=O)C=1C=CC=CC=1)OC(=O)C=1C=CC=CC=1)O)OC(=O)C1=CC=CC=C1 FCDYAJBVISGNLC-RZDXDWDHSA-N 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 1
- 235000019270 ammonium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000000843 anti-fungal effect Effects 0.000 description 1
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 229940121375 antifungal agent Drugs 0.000 description 1
- 239000000010 aprotic solvent Substances 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- SQVRNKJHWKZAKO-UHFFFAOYSA-N beta-N-Acetyl-D-neuraminic acid Natural products CC(=O)NC1C(O)CC(O)(C(O)=O)OC1C(O)C(O)CO SQVRNKJHWKZAKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002246 beta-d-glucopyranose Drugs 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 1
- 239000006189 buccal tablet Substances 0.000 description 1
- 125000004063 butyryl group Chemical group O=C([*])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000010216 calcium carbonate Nutrition 0.000 description 1
- FUFJGUQYACFECW-UHFFFAOYSA-L calcium hydrogenphosphate Chemical compound [Ca+2].OP([O-])([O-])=O FUFJGUQYACFECW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229940095672 calcium sulfate Drugs 0.000 description 1
- 235000011132 calcium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 229960001631 carbomer Drugs 0.000 description 1
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 230000005792 cardiovascular activity Effects 0.000 description 1
- 239000006143 cell culture medium Substances 0.000 description 1
- 235000010980 cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 239000007910 chewable tablet Substances 0.000 description 1
- QSKWJTXWJJOJFP-UHFFFAOYSA-N chloroform;ethoxyethane Chemical compound ClC(Cl)Cl.CCOCC QSKWJTXWJJOJFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WORJEOGGNQDSOE-UHFFFAOYSA-N chloroform;methanol Chemical compound OC.ClC(Cl)Cl WORJEOGGNQDSOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000015165 citric acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000000084 colloidal system Substances 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 239000007822 coupling agent Substances 0.000 description 1
- 229960001681 croscarmellose sodium Drugs 0.000 description 1
- 235000010947 crosslinked sodium carboxy methyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000263 cytotoxicity test Toxicity 0.000 description 1
- 125000003074 decanoyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 1
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 1
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 1
- 235000019700 dicalcium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- VNONINPVFQTJOC-ZGXDEBHDSA-N dioscin Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H]([C@@H]([C@H]1O)O[C@H]1[C@@H]([C@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)O1)O)O[C@@H]1CC2=CC[C@H]3[C@@H]4C[C@H]5[C@@H]([C@]4(CC[C@@H]3[C@@]2(C)CC1)C)[C@@H]([C@]1(OC[C@H](C)CC1)O5)C)[C@@H]1O[C@@H](C)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O VNONINPVFQTJOC-ZGXDEBHDSA-N 0.000 description 1
- CJNUQCDDINHHHD-APRUHSSNSA-N dioscin Natural products C[C@@H]1CC[C@@]2(OC1)O[C@H]3C[C@H]4[C@@H]5CC=C6C[C@H](CC[C@@H]6[C@H]5CC[C@]4(C)[C@H]3[C@@H]2C)O[C@@H]7O[C@H](CO)[C@@H](O[C@@H]8O[C@@H](C)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]8O)[C@H](O)[C@H]7O[C@@H]9O[C@@H](C)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]9O CJNUQCDDINHHHD-APRUHSSNSA-N 0.000 description 1
- 239000007919 dispersible tablet Substances 0.000 description 1
- 239000008298 dragée Substances 0.000 description 1
- 239000006196 drop Substances 0.000 description 1
- 238000012377 drug delivery Methods 0.000 description 1
- 239000007938 effervescent tablet Substances 0.000 description 1
- 230000026502 entry into host cell Effects 0.000 description 1
- 108700004025 env Genes Proteins 0.000 description 1
- 235000019325 ethyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 229920001249 ethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 1
- 210000001508 eye Anatomy 0.000 description 1
- 239000003889 eye drop Substances 0.000 description 1
- 229940012356 eye drops Drugs 0.000 description 1
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 1
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 1
- 239000010408 film Substances 0.000 description 1
- 239000007941 film coated tablet Substances 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 235000013355 food flavoring agent Nutrition 0.000 description 1
- 239000003205 fragrance Substances 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 229930182470 glycoside Natural products 0.000 description 1
- 125000000268 heptanoyl group Chemical group O=C([*])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 235000012907 honey Nutrition 0.000 description 1
- 208000033519 human immunodeficiency virus infectious disease Diseases 0.000 description 1
- XMBWDFGMSWQBCA-UHFFFAOYSA-N hydrogen iodide Chemical compound I XMBWDFGMSWQBCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001866 hydroxypropyl methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010979 hydroxypropyl methyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 229920003088 hydroxypropyl methyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 229960003943 hypromellose Drugs 0.000 description 1
- 206010022000 influenza Diseases 0.000 description 1
- 239000003978 infusion fluid Substances 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 description 1
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- BAUYGSIQEAFULO-UHFFFAOYSA-L iron(2+) sulfate (anhydrous) Chemical compound [Fe+2].[O-]S([O-])(=O)=O BAUYGSIQEAFULO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000359 iron(II) sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000003292 kidney cell Anatomy 0.000 description 1
- 229960001375 lactose Drugs 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 125000000400 lauroyl group Chemical group O=C([*])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 235000010445 lecithin Nutrition 0.000 description 1
- 239000000787 lecithin Substances 0.000 description 1
- 229940067606 lecithin Drugs 0.000 description 1
- 239000000865 liniment Substances 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 229940057995 liquid paraffin Drugs 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 239000006210 lotion Substances 0.000 description 1
- 229940031703 low substituted hydroxypropyl cellulose Drugs 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 1
- 102000006240 membrane receptors Human genes 0.000 description 1
- HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N meso ribitol Natural products OCC(O)C(O)C(O)CO HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920000609 methyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000001923 methylcellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010981 methylcellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000011859 microparticle Substances 0.000 description 1
- 210000002200 mouth mucosa Anatomy 0.000 description 1
- 210000003928 nasal cavity Anatomy 0.000 description 1
- 239000007923 nasal drop Substances 0.000 description 1
- 229940100662 nasal drops Drugs 0.000 description 1
- 108700004028 nef Genes Proteins 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 231100001083 no cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 125000001402 nonanoyl group Chemical group O=C([*])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000002801 octanoyl group Chemical group C(CCCCCCC)(=O)* 0.000 description 1
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 1
- 239000006191 orally-disintegrating tablet Substances 0.000 description 1
- AICOOMRHRUFYCM-ZRRPKQBOSA-N oxazine, 1 Chemical compound C([C@@H]1[C@H](C(C[C@]2(C)[C@@H]([C@H](C)N(C)C)[C@H](O)C[C@]21C)=O)CC1=CC2)C[C@H]1[C@@]1(C)[C@H]2N=C(C(C)C)OC1 AICOOMRHRUFYCM-ZRRPKQBOSA-N 0.000 description 1
- 125000001312 palmitoyl group Chemical group O=C([*])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 239000006072 paste Substances 0.000 description 1
- 230000007918 pathogenicity Effects 0.000 description 1
- 125000001147 pentyl group Chemical group C(CCCC)* 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 235000021317 phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 125000002467 phosphate group Chemical group [H]OP(=O)(O[H])O[*] 0.000 description 1
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 1
- 229960000502 poloxamer Drugs 0.000 description 1
- 229920001983 poloxamer Polymers 0.000 description 1
- VNONINPVFQTJOC-UHFFFAOYSA-N polyphyllin III Natural products O1C2(OCC(C)CC2)C(C)C(C2(CCC3C4(C)CC5)C)C1CC2C3CC=C4CC5OC(C(C1O)OC2C(C(O)C(O)C(C)O2)O)OC(CO)C1OC1OC(C)C(O)C(O)C1O VNONINPVFQTJOC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 125000001501 propionyl group Chemical group O=C([*])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 1
- 210000000664 rectum Anatomy 0.000 description 1
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 1
- 210000002345 respiratory system Anatomy 0.000 description 1
- 238000002390 rotary evaporation Methods 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- SQVRNKJHWKZAKO-OQPLDHBCSA-N sialic acid Chemical compound CC(=O)N[C@@H]1[C@@H](O)C[C@@](O)(C(O)=O)OC1[C@H](O)[C@H](O)CO SQVRNKJHWKZAKO-OQPLDHBCSA-N 0.000 description 1
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 1
- 235000012239 silicon dioxide Nutrition 0.000 description 1
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000015424 sodium Nutrition 0.000 description 1
- 235000019812 sodium carboxymethyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 229920001027 sodium carboxymethylcellulose Polymers 0.000 description 1
- 229960002668 sodium chloride Drugs 0.000 description 1
- 235000002639 sodium chloride Nutrition 0.000 description 1
- DAJSVUQLFFJUSX-UHFFFAOYSA-M sodium;dodecane-1-sulfonate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCS([O-])(=O)=O DAJSVUQLFFJUSX-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 235000010356 sorbitol Nutrition 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 229960002920 sorbitol Drugs 0.000 description 1
- 208000010110 spontaneous platelet aggregation Diseases 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 125000003696 stearoyl group Chemical group O=C([*])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 229960004793 sucrose Drugs 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 239000007940 sugar coated tablet Substances 0.000 description 1
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 1
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011975 tartaric acid Substances 0.000 description 1
- 235000002906 tartaric acid Nutrition 0.000 description 1
- ODLHGICHYURWBS-LKONHMLTSA-N trappsol cyclo Chemical compound CC(O)COC[C@H]([C@H]([C@@H]([C@H]1O)O)O[C@H]2O[C@@H]([C@@H](O[C@H]3O[C@H](COCC(C)O)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](COCC(C)O)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](COCC(C)O)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](COCC(C)O)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O3)[C@H](O)[C@H]2O)COCC(O)C)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]3O[C@@H]1COCC(C)O ODLHGICHYURWBS-LKONHMLTSA-N 0.000 description 1
- 150000003641 trioses Chemical class 0.000 description 1
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 1
- 125000000297 undecanoyl group Chemical group O=C([*])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 229940096998 ursolic acid Drugs 0.000 description 1
- PLSAJKYPRJGMHO-UHFFFAOYSA-N ursolic acid Natural products CC1CCC2(CCC3(C)C(C=CC4C5(C)CCC(O)C(C)(C)C5CCC34C)C2C1C)C(=O)O PLSAJKYPRJGMHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 1
- 210000001215 vagina Anatomy 0.000 description 1
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 1
- 108700026215 vpr Genes Proteins 0.000 description 1
- 239000000811 xylitol Substances 0.000 description 1
- 235000010447 xylitol Nutrition 0.000 description 1
- 229960002675 xylitol Drugs 0.000 description 1
- HEBKCHPVOIAQTA-SCDXWVJYSA-N xylitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO HEBKCHPVOIAQTA-SCDXWVJYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
- Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
- Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
- Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups
Landscapes
- Steroid Compounds (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
Abstract
本发明公开了一类克洛皂苷及其制法与抗高致病H5N1流感病毒的应用。本发明以天然产物薯蓣苷元为原料，通过结构修饰首先在C-6位引入羟基，得到克洛皂苷元，然后在C-3位引入糖基，得到系列克洛皂苷，最后在C-6羟基引入不同酰基得到系列化合物。药理实验表明，它们对H5N1高致病流感病毒的侵入宿主细胞过程有明显的抑制作用，可以用作预防或治疗抗流感病毒的药物。本发明还涉及本发明化合物与其它抗病毒药的联合用药以及包含它们的药物组合物。
Description
技术领域
本发明涉及一类新的克洛皂苷，制备这类克洛皂苷的方法，含有这类克洛皂苷的药物组合物，以及这类克洛皂苷在制备抗流感病毒药物，尤其是抗高致病H5N1流感病毒的药物中的应用；属于化学药物技术领域。
背景技术
甲型流感病毒属于正粘病毒科，基因组由8个单链节段式的负链RNA组成，编码至少10种蛋白：血凝素蛋白(Hemagglutinin，HA)、神经氨酸酶(Neuraminidase，NA)、聚合酶(Polymerase basic protein 1，PB1；Polymerase basic protein 1，PB2；Polymerase acidic protein，PA)、核蛋白(Nucleoprotein，NP)、基质蛋白(Matrix protein 1，M1；Matrixprotein 2，M2)、非结构蛋白(Non-structural protein1，NS1；Non-structuralprotein 2，NS2)。野生水禽是甲型流感病毒的原生宿主，当经过变异，甲型流感病毒会感染其它物种(包括人类)。H5N1高致病流感病毒即是如此，1997年在中国香港首次证实了H5N1高致病流感病毒感染人类的病例，说明该病毒已具备以人为宿主的跨种属传播的能力。WHO的数据显示，截止至2008年2月22日，全世界共有368人感染H5N1高致病流感病毒，其中的234人死亡(死亡率63.6％)(http://www.who.int/csr/disease/avian_influenza/country/cases_table_2008_02_26/en/index.html，2008.)，并且传播速度和范围未见下降趋势。
目前，临床上针对甲型流感病毒的药物主要有两个靶点：M2离子通道抑制剂和神经氨酸酶抑制剂。前者包括有Amantadine和Rimantadine，后者包括Oseltamivir和Zanamivir等(J.Clin.Virol.30，(2004)：115-133)。但由于流感病毒的高变异性，目前已经对所有M2离子通道抑制剂产生耐药性(自2007年起，美国FDA已经禁止这类药物用作流感治疗药物)；因而神经氨酸酶抑制剂几乎是唯一一类临床用药，但自2006年起，在泰国和越南出现了对该类药物耐药的H5N1高致病流感病毒株(Nippon Rinsho.64，(2006)：1845-1852；Antiviral Res.73(2007)：228-231)。同时，还是由于流感病毒的高变异性，目前尚无一劳永逸的针对流感病毒的疫苗。
血凝素蛋白(HA)是流感病毒表面的糖蛋白，其主要功能是与宿主细胞表面的受体(唾液酸)相互识别、结合，并介导病毒进入宿主细胞，即病毒感染的第一步。因此，若能在这个环节上阻断流感病毒的入侵，则可以有效地进行预防和治疗。
甾体皂苷在自然界中分布广泛，主要集中在单子叶植物的百合科(Liliaceae)、薯蓣科(Dioscoreaceae)和龙舌兰科(Agavaceae)等植物中；在双子叶植物的豆科(Fabaceae)、玄参科(Scrophulariaceae)、蒺藜科(Zygophyllaceae)、苦木科(Simaroubiaeae)和茄科(Solanaceae)的少数植物中也有分布。自上世纪七十年代以来，在海洋动物中也发现了许多甾体皂苷迹。甾体皂苷具有广泛的药理活性，主要有抗真菌、抗细菌、抗病毒、细胞毒性、抗肿瘤、心血管活性、抗炎、护肝、抑制血小板凝聚等药理活性，是一类颇有前景的药物。一些研究结果表明皂苷中的糖链与其生物活性有着密切的关系，因而皂苷研究日益引起国内外学者的极大兴趣。
薯蓣皂苷Dioscin(diosgenin 3-O- -chacotrioside)是最具代表性的螺旋甾烷类皂苷，它广泛存在于蔬菜和传统药用植物中，对肿瘤细胞具有抑制作用，而且该活性与3-O-糖链结构密切相关。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一类新的克洛皂苷化合物；
本发明要解决的另一个技术问题是提供这类克洛皂苷化合物的制备方法；
本发明要解决的又一个技术问题是提供含有这类克洛皂苷化合物的药物组合物；
本发明要解决的再一个技术问题是提供这类克洛皂苷化合物在制备抗流感病毒药物，尤其是抗高致病H5N1流感病毒药物中的应用。
具体而言，为解决上述技术问题，本发明采用如下技术方案：
本发明涉及的克洛皂苷化合物如通式(I)所示
其中，R1、R2独立的选自氢、葡萄糖基、阿拉伯糖基、鼠李糖基、半乳糖基、木糖基、核糖基、甘露糖基、2-氨基葡萄糖基、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、山梨糖基、阿洛糖基、阿洛酮糖基，或由这些单糖2-3个组成的直链或支链寡糖基；
R3选自H、C1-C18直链或支链的烷酰基。
C1-18直链或支链的烷基选自甲烷酰、乙酰基、丙酰基、丁酰基、异丙酰基、异丁酰基、叔丁烷酰基、仲丁烷酰基、戊烷基、己烷酰基、庚烷酰基、辛烷酰基、壬烷酰基、葵烷酰基、十一烷酰基、十二烷酰基、十三烷酰基、十四烷酰基、十五烷酰基、十六烷酰基、十七烷酰基、十八烷酰基。
优选的R1、R2独立的选自葡萄糖基、阿拉伯糖基、鼠李糖基、半乳糖基、木糖基、核糖基、甘露糖基、山梨糖基、阿洛糖基、阿洛酮糖基；
R3选自H、C1-C8直链或支链的烷酰基。
更优选的R1、R2独立的选自葡萄糖基、鼠李糖基；
R3选自H、C1-C4直链或支链的烷酰基。
更优选(I)化合物，包括但不限定于(IA)所示的化合物
其中，R1、R2独立的选自氢、葡萄糖基、阿拉伯糖基、鼠李糖基、半乳糖基、木糖基、核糖基、甘露糖基、2-氨基葡萄糖基、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、山梨糖基、阿洛糖基、阿洛酮糖基，或由这些单糖2-3个组成的直链或支链寡糖基；
R3选自C1-C18直链或支链的烷酰基。
更优选(I)化合物，包括但不限定于(IB)所示的化合物
其中，R1、R2独立的选自氢、葡萄糖基、阿拉伯糖基、鼠李糖基、半乳糖基、木糖基、核糖基、甘露糖基、2-氨基葡萄糖基、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、山梨糖基、阿洛糖基、阿洛酮糖基，或由这些单糖2-3个组成的直链或支链寡糖基；
本发明还提供了制备通式(I)所示化合物的方法，包括如下步骤：将薯蓣苷元的5，6-双键转化为6-OH，即得克洛皂苷元，在其C3-OH引入马铃薯三糖(-Chacotriose)、将6-OH酰化即得到系列克洛皂苷。
P0，P1，P2，P3为保护基
(1)对薯蓣苷元的3β-OH进行保护制备3β-O-保护基薯蓣苷元；
优选的保护基选自苄基保护基；
优选溶剂选自THF，DMF，优选是THF；
优选在碱性条件下进行，优选的碱是NaH；
反应优选在催化剂存在的条件下进行，优选的催化剂选自四丁基碘化铵；
反应的温度-10-90℃，优选是0-30℃，更优选是在室温下进行；
反应的时间1-24小时；反应的时间1.5-10小时；反应的时间2-4小时；
反应产物可以通过重结晶或硅胶柱纯化，优选进行重结晶纯化，所述重结晶纯化中的溶剂优选为三氯甲烷、C1-C4的烷基醇、乙酸乙酯、丙酮、正己烷、石油醚、环己烷、二氯甲烷、水中一种或多种的混合物。优选是氯仿和甲醇。
(2)在3β-O-保护基薯蓣苷元的C-6位引入羟基制备3β-O-苄基克洛苷元
先将3β-O-苄基薯蓣苷元、NaBH4、BF3·Et2O进行反应，
再破坏过量硼烷至无气体生成，
最后加入NaOH和H2O2；NaOH和H2O2的优选浓度是20-40％；NaOH和H2O2的优选体积比是1∶1。
反应产物可以通过重结晶或硅胶柱纯化，优选使用硅胶柱纯化，所述柱层析纯化中洗脱用的溶剂优选为石油醚、正己烷、环己烷、二氯甲烷、三氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇中一种或多种的混合物；优选的洗脱剂是是使用EtOAc-石油醚的混合溶剂，EtOAc-石油醚混合溶剂的优选体积比为1∶6。
(3)3β-O-保护基克洛苷元的6-羟基上引入保护基。
优选的保护基选自叔丁基二甲基氯硅烷；
反应优选在咪唑和DMAP存在的条件下进行，
反应产物可以通过重结晶或硅胶柱纯化，优选使用硅胶柱纯化，所述柱层析纯化中洗脱用的溶剂优选为石油醚、正己烷、环己烷、二氯甲烷、三氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇中一种或多种的混合物；优选的洗脱剂是是使用EtOAc-己烷的混合溶剂，EtOAc-己烷混合溶剂的优选体积比为1∶20。
(4)脱去3β-O-保护基-6α-O-保护基克洛苷元的3位羟基上的保护基脱除苷元上的苄基保护基使用Pd-C和H2；
脱保护基反应的溶剂选自四氢呋喃、甲醇、乙醇、二氯甲烷、水中的一种或多种的混合物；优选的有机溶剂是CH2Cl2-MeOH(1∶1)
反应在有机胺存在的条件下进行。
反应的时间是8-30小时，优选是10-24小时，更优选是12-20小时。
反应完成后经硅胶柱纯化。
(5)在克洛苷元的C-3引入β--葡萄糖基；
优选的糖基供体含有保护基，优选是酰基保护基，优选的酰基保护基选自乙酰基、苯甲酰基、叔戊酰基；最优选是苯甲酰基。
葡萄糖C-1活化基团选自三氯乙酰亚胺酯、乙硫苷、苯硫苷或对-甲苯硫苷；最优选的活化基团是三氯乙酰亚胺酯。
糖苷化反应优选在路易斯酸催化剂存在的条件下进行，优选的路易斯酸催化剂选自C3-C9的卤代酰胺、C1-C6的氟代烃基磺酸、C2-C8的硅基氟代烃基磺酸酯、C1-C6的氟代烃基磺酸银、三氟化硼-乙醚络合物或三氟化硼-乙醚混合物；更优选的是三氟甲基磺酸三甲基硅酯(trimethylsilyl trifluoromethanesulfonate，TMSOTf)；
所述糖苷化反应中的有机溶剂优选为C1-C4的氯代烷烃、甲苯或乙醚；优选的有机溶剂是CH3Cl、CH2Cl2；更优选的是CH2Cl2；
所述淬灭剂优选为有机胺或硫代硫酸钠；优选的有机胺是三甲胺、三乙胺；更有选的淬灭剂选自三乙胺。
所述的分子筛优选为3-5
型硅铝酸盐分子筛；更优选为4
型硅铝酸盐分子筛；
反应产物可以通过重结晶或硅胶柱纯化，优选使用硅胶柱纯化，所述柱层析纯化中洗脱用的溶剂优选为石油醚、正己烷、环己烷、二氯甲烷、三氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇中一种或多种的混合物；优选的洗脱剂是是使用EtOAc-石油醚的混合溶剂，EtOAc-石油醚混合溶剂的优选体积比为1∶8。
(6)脱除克洛苷元-葡萄糖苷上的酰基保护基；
脱除葡萄糖上的酰基保护基，优选使用碱，优选的碱是CH3ONa；优选在CH3ONa/CH3OH存在的条件下进行。
脱保护基反应中极性溶剂优选为四氢呋喃、甲醇、乙醇、二氯甲烷、水中的一种或多种的混合物；优选的溶剂是CH3OH-CHCl3(1∶1，60ml)，
反应的温度是10-40℃，优选是20-30℃，更优选是在室温下进行；
反应的时间1-4小时；反应的时间1.5-2.5小时；反应的时间2小时；
反应完成后用酸将反应液中和到中性，优选使用阳离子树脂(H+)中和反应液至中性
产物可以重结晶或经过经硅胶柱纯化；硅胶柱纯化的洗脱剂优选为石油醚、正己烷、环己烷、二氯甲烷、三氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇中一种或多种的混合物；更优选的洗脱剂选自体积比20∶1→8∶1的CHCl3-MeOH梯度洗脱剂。
(7)选择性的保护克洛苷元葡萄糖上3，6-OHs；
优选利用位阻试剂1-(苯甲酰基)苯并三唑(BBTZ)选择性的保护葡萄糖上3，6-OHs得到3-β-O-(3，6-二-O-β-D-苯甲酰基葡萄糖)熊果酸酯；
有机溶剂优选为C1-C4的氯代烷烃、甲苯或乙醚；优选的有机溶剂是CH3Cl、CH2Cl2；最优选的溶剂是CH2Cl2；；
反应优选在有机胺存在的条件下进行；优选的有机胺是三甲胺、三乙胺；
反应的温度反应的温度是10℃-40℃；优选20-30℃；更优选是室温；
反应的时间5-20小时；优选是10-14小时；更优选的时间是12小时；
所述柱层析纯化中洗脱用的溶剂优选为石油醚、正己烷、环己烷、二氯甲烷、三氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇中一种或多种的混合物；更优选的洗脱剂是乙酸乙酯-石油醚-三氯甲烷的混合溶剂，EtOAc-petroleumether-CHCl3的优选的体积比为1∶8∶2。
(8)分别或同时在步骤(7)所得的克洛苷元的吡喃葡萄糖的2，4-OHs引入糖基；
优选的糖基上带有保护基，优选的保护基是酰基保护基，优选的酰基保护基选自乙酰基、苯甲酰基、叔戊酰基；糖基上最优选的保护基是乙酰基；
葡萄糖C-1活化基团选自三氯乙酰亚胺酯、乙硫苷、苯硫苷或对-甲苯硫苷；最优选的活化基团是三氯乙酰亚胺酯。
糖苷化反应优选在路易斯酸催化剂存在的条件下进行，优选的路易斯酸催化剂选自C3-C9的卤代酰胺、C1-C6的氟代烃基磺酸、C2-C8的硅基氟代烃基磺酸酯、C1-C6的氟代烃基磺酸银、三氟化硼-乙醚络合物或三氟化硼-乙醚混合物；更优选的是三氟甲基磺酸三甲基硅酯(trimethylsilyl trifluoromethanesulfonate，TMSOTf)；
所述糖苷化反应中的有机溶剂优选为C1-C4的氯代烷烃、甲苯或乙醚；优选的有机溶剂是CH3Cl、CH2Cl2；最优选的溶剂是CH2Cl2；
在-40℃--20℃反应0.5h，再在-5℃-5℃反应1h；优选在-30℃反应0.5h，再在0℃反应1h。
所述淬灭剂优选为有机胺或硫代硫酸钠；优选的有机胺是三甲胺、三乙胺；更有选的淬灭剂选自三乙胺。
所述的分子筛优选为3
-5型硅铝酸盐分子筛；更优选为4
型硅铝酸盐分子筛；优选的分子筛为4分子筛；
可以使用重结晶或硅胶柱纯化，优选进行硅胶柱纯化，所述柱层析纯化中洗脱用的溶剂优选为石油醚、正己烷、环己烷、二氯甲烷、三氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇中一种或多种的混合物；更优选的洗脱剂是乙酸乙酯-石油醚，优选进行梯度洗脱，梯度洗脱剂为的体积比1∶5→1∶2.5的乙酸乙酯-石油醚。
(9)脱除新引入的糖基上的保护基；
脱酰基保护基反应优选在极性溶剂中进行，优选的溶剂选自四氢呋喃、甲醇、乙醇、二氯甲烷、水中的一种或多种的混合物；优选的溶剂选自CH3OH-CHCl3；优选的CH3OH-CHCl3混合溶剂的体积比1∶1。
脱去保护基优选在碱性条件下进行，优选的碱选自NaOMe。
反应温度是10-40℃；优选的反应温度是20-30℃；更优选的反应温度是室温。
反应的时间是8-16小时；优选的反应时间是10-14小时；更优选的反应时间是12小时。
使用酸中和反应液；最优选是的使用阳离子树脂。
可以使用重结晶或硅胶柱纯化，优选进行硅胶柱纯化，所述柱层析纯化中洗脱用的溶剂优选为石油醚、正己烷、环己烷、二氯甲烷、三氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇中一种或多种的混合物；优选的体积洗脱剂是CHCl3-MeOH；优选进行梯度洗脱，梯度洗脱剂的为体积比10∶1→3∶1的CHCl3-MeOH。
(10)将糖基上的所有羟基进行保护；
优选使用苄基进行保护；
反应的优选在碱存在的条件下进行，优选的碱选自NaH；
反应的优选在催化剂存在的条件下进行，优选的催化剂选自四丁基碘化铵；
溶剂选自四氢呋喃，N，N-二甲基甲酰胺。
反应完成后优选经硅胶柱纯化；洗脱剂是选自石油醚、正己烷、环己烷、二氯甲烷、三氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇中一种或多种的混合物；优选的洗脱剂选自乙酸乙酯-石油醚；优选的乙酸乙酯-石油醚体积比为1∶15→1∶10。
(11)脱除克洛苷元6α-羟基上的保护基；
优选在TBAF存在的条件下进行；
溶剂选自四氢呋喃，N，N-二甲基甲酰胺；
反应的温度在10℃～40℃之间，优选的温度是20℃～30℃，更优选的温度是室温。
反应的时间是8-30小时，优选是10-24小时，更优选是12-20小时。
反应完成后优选经硅胶柱纯化；洗脱剂是选自石油醚、正己烷、环己烷、二氯甲烷、三氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇中一种或多种的混合物；优选的洗脱剂选自乙酸乙酯-石油醚；优选的乙酸乙酯-石油醚体积比为1∶8→1∶5。
(12)脱除糖基上的所有保护基；
脱除苷元上的苄基保护基使用Pd-C和H2；
脱保护基反应的溶剂选自四氢呋喃、甲醇、乙醇、二氯甲烷、水中的一种或多种的混合物；优选的有机溶剂是CH2Cl2-MeOH(1∶1)
反应在有机胺存在的条件下进行。
反应的时间是8-30小时，优选是10-24小时，更优选是12-20小时。
反应完成后经硅胶柱纯化。
(13)将步骤(11)获得的化合物的6α-羟基进行酯化反应；
酯化反应优选在偶合剂和/或催化剂存在的条件下进行。优选的缩合试剂是包括1，3二环己基碳二亚胺(DCC)、二吡啶碳酸酯(2-DPC)、1-(3-二甲胺丙基)-3-乙基碳酰亚胺盐酸盐(EDCI)、1，3-二异丙基碳酰亚胺(DIPC)、4-吡咯烷基吡啶。更优选的缩合剂是1-(3-二甲胺丙基)-3-乙基碳酰亚胺盐酸盐(EDCI)。
优选的催化剂是三级胺。优选的三级胺选自4-二甲氨基吡啶(DMAP)，4-吡咯烷基吡啶。更优选的三级胺选自4-二甲氨基吡啶(DMAP)。
反应的温度在0℃～120℃之间，优选的温度是20℃～30℃，更优选的温度是室温。
反应在适宜的溶剂下进行，优选的溶剂是无水的非质子性溶剂，更优选的是卤代烷、四氢呋喃(THF)，N，N-二甲基甲酰胺(DMF)等。最优选的是二氯甲烷，DMF。
(14)将步骤(13)获得的化合物的糖基上的所有保护基脱除。
脱除苷元上的苄基保护基使用Pd-C和H2；
脱保护基反应的溶剂选自四氢呋喃、甲醇、乙醇、二氯甲烷、水中的一种或多种的混合物；优选的有机溶剂是CH2Cl2-MeOH(1∶1)
反应在有机胺存在的条件下进行。
反应的时间是8-30小时，优选是10-24小时，更优选是12-20小时。
反应完成后经硅胶柱纯化。
反应产物可以通过重结晶或硅胶柱纯化，优选使用硅胶柱纯化，硅胶柱纯化时使用的洗脱剂是优选为石油醚、正己烷、环己烷、二氯甲烷、三氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇中一种或多种的混合物。
本发明即针对此环节，发现克洛皂苷有抑制H5N1高致病流感病毒的感染宿主细胞的作用。
反应的产物还可以使用重结晶纯化，所述重结晶纯化中的溶剂优选为三氯甲烷、C1-C4的烷基醇、乙酸乙酯、丙酮、正己烷、石油醚、环己烷、二氯甲烷、水中一种或多种的混合物。
本发明再一方面还涉及以本发明化合物作为活性成份的药物组合物。该药物组合物可根据本领域公知的方法制备。可通过将本发明化合物与一种或多种药学上可接受的固体或液体赋形剂和/或辅剂结合，制成适于人或动物使用的任何剂型。本发明化合物在其药物组合物中的含量通常为0.1-95重量％。
本发明化合物或含有它的药物组合物可以单位剂量形式给药，给药途径可为肠道或非肠道，如口服、静脉注射、肌肉注射、皮下注射、鼻腔、口腔粘膜、眼、肺和呼吸道、皮肤、阴道、直肠等。
给药剂型可以是液体剂型、固体剂型或半固体剂型。液体剂型可以是溶液剂(包括真溶液和胶体溶液)、乳剂(包括o/w型、w/o型和复乳)、混悬剂、注射剂(包括水针剂、粉针剂和输液)、滴眼剂、滴鼻剂、洗剂和搽剂等；固体剂型可以是片剂(包括普通片、肠溶片、含片、分散片、咀嚼片、泡腾片、口腔崩解片)、胶囊剂(包括硬胶囊、软胶囊、肠溶胶囊)、颗粒剂、散剂、微丸、滴丸、栓剂、膜剂、贴片、气(粉)雾剂、喷雾剂等；半固体剂型可以是软膏剂、凝胶剂、糊剂等。
本发明化合物可以制成普通制剂、也制成是缓释制剂、控释制剂、靶向制剂及各种微粒给药系统。
为了将本发明化合物制成片剂，可以广泛使用本领域公知的各种赋形剂，包括稀释剂、黏合剂、润湿剂、崩解剂、润滑剂、助流剂。稀释剂可以是淀粉、糊精、蔗糖、葡萄糖、乳糖、甘露醇、山梨醇、木糖醇、微晶纤维素、硫酸钙、磷酸氢钙、碳酸钙等；湿润剂可以是水、乙醇、异丙醇等；粘合剂可以是淀粉浆、糊精、糖浆、蜂蜜、葡萄糖溶液、微晶纤维素、阿拉伯胶浆、明胶浆、羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、乙基纤维素、丙烯酸树脂、卡波姆、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇等；崩解剂可以是干淀粉、微晶纤维素、低取代羟丙基纤维素、交联聚乙烯吡咯烷酮、交联羧甲基纤维素钠、羧甲基淀粉钠、碳酸氢钠与枸橼酸、聚氧乙烯山梨糖醇脂肪酸酯、十二烷基磺酸钠等；润滑剂和助流剂可以是滑石粉、二氧化硅、硬脂酸盐、酒石酸、液体石蜡、聚乙二醇等。
还可以将片剂进一步制成包衣片，例如糖包衣片、薄膜包衣片、肠溶包衣片，或双层片和多层片。
为了将给药单元制成胶囊剂，可以将有效成分本发明化合物与稀释剂、助流剂混合，将混合物直接置于硬胶囊或软胶囊中。也可将有效成分本发明化合物先与稀释剂、黏合剂、崩解剂制成颗粒或微丸，再置于硬胶囊或软胶囊中。用于制备本发明化合物片剂的各稀释剂、黏合剂、润湿剂、崩解剂、助流剂品种也可用于制备本发明化合物的胶囊剂。
为将本发明化合物制成注射剂，可以用水、乙醇、异丙醇、丙二醇或它们的混合物作溶剂并加入适量本领域常用的增溶剂、助溶剂、pH调剂剂、渗透压调节剂。增溶剂或助溶剂可以是泊洛沙姆、卵磷脂、羟丙基-β-环糊精等；pH调剂剂可以是磷酸盐、醋酸盐、盐酸、氢氧化钠等；渗透压调节剂可以是氯化钠、甘露醇、葡萄糖、磷酸盐、醋酸盐等。如制备冻干粉针剂，还可加入甘露醇、葡萄糖等作为支撑剂。
此外，如需要，也可以向药物制剂中添加着色剂、防腐剂、香料、矫味剂或其它添加剂。
本发明的发明人发现克洛皂苷衍生物能特异性的抑制H5N1高致病流感病毒侵入宿主细胞。
克洛皂苷衍生物还可以和其他的抗病毒药物进行联合用药，其他的抗病毒药物包括但不限定于，M2离子通道抑制剂、神经氨酸酶抑制剂。优选的M2离子通道抑制剂选自Amantadine或Rimantadine，优选的神经氨酸酶抑制剂选自Oseltamivir或Zanamivir。
为达到用药目的，增强治疗效果，本发明的药物或药物组合物可用任何公知的给药方法给药。
本发明化合物药物组合物的给药剂量依照所要预防或治疗疾病的性质和严重程度，患者或动物的个体情况，给药途径和剂型等可以有大范围的变化。一般来讲，本发明化合物的每天的合适剂量范围为0.001-150mg/Kg体重，优选为0.1-100mg/Kg体重，更优选为1-60mg/Kg体重，最优选为2-30mg/Kg体重。上述剂量可以一个剂量单位或分成几个剂量单位给药，这取决于医生的临床经验以及包括运用其它治疗手段的给药方案。
本发明的化合物或组合物可单独服用，或与其他治疗药物或对症药物合并使用。当本发明的化合物与其它治疗药物存在协同作用时，应根据实际情况调整它的剂量。
具体实施方式
下面的实施例用来进一步说明本发明，但这并不意味着对本发明的任何限制。
实施例1.3β-O-苄基薯蓣苷元：
于THF(70mL)中加入diosgenin(10.5g，25.3mmol)，室温下搅拌溶解后，冰浴下加入NaH(60％，2.75g，68.7mmol)。0.5h后依次加入Bu4N+I-(催化量)和BnBr(5mL，41.7mmol)。室温下反应1.5h后，加热回流至反应完全。旋蒸除去溶剂和多余BnBr，加入Et2O(400mL)溶解。依次用水、5％盐酸(80mL×3)、饱和碳酸氢钠水溶液(80mL×2)和饱和氯化钠水溶液(80mL)洗涤，无水硫酸钠干燥、浓缩，所得油状物用氯仿-甲醇重结晶得白色固体(12.1g，94.4％)；Rf0.56(1∶5EtOAc-etroleum ether)；[α]D 20 -97.4(c 0.9，CHCl3)，lit.-94.4(c 0.9，CHCl3)；1H NMR(CDCl3)：δ7.37-7.36(m，5H，Ar-H)，5.34(d，1H，J＝5.5Hz，H-6)，4.56(d，2H，J＝4.0Hz，CHPh)，4.41(q，1H，J＝7.3Hz，H-16)，3.46(ddd，1H，J＝1.7，4.0，11.0Hz，H-26)，3.38(t，1H，J＝10.6Hz，H-26)，3.29-3.26(m，1H，H-3)，2.42(ddd，1H，J＝2.6，4.7，13.2Hz)，2.30-2.26(m，1H)，1.03(s，3H)，0.97(d，3H，J＝7.0Hz)，0.79-0.78(m，6H)。
实施例2.3β-O-苄基克洛苷元：
在500mL三口瓶中加入3β-O-苄基薯蓣苷元(11.0g，21.8mmol)、NaBH4(4.14g，109.0mmol)和THF(100mL)，冰盐浴下搅拌30min后缓慢滴加BF3·Et2O(3.10mL，24.0mmol)，0℃反应1h后缓慢升至室温，反应过夜。冰浴下用水小心破坏过量硼烷至无气体生成，加入NaOH(30％)-H2O2(30％)(1∶1，300mL)，室温下反应过夜。将反应液用浓盐酸中和至pH中性，用Et2O反复萃取反应相。合并Et2O层，依次用FeSO4水溶液和饱和氯化钠水溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩后经硅胶柱纯化(1∶6 EtOAc-petroleum ether)得白色固体(8.12g，71.3％)；Rf0.26(1∶3 EtOAc-petroleum ether)；[α]D 20 -51.9(c 0.80，CHCl3)；1H NMR(CDCl3)：δ7.35-7.26(m，5H，Ar-H)，4.61(d，1H，J＝11.7Hz，CHPh)，4.55(d，1H，J＝11.7Hz，CH′Ph)，4.40(q，1H，J＝7.3Hz，H-16)，3.48-3.30(m，4H，H-26×2，H-6，H-3)，2.37-2.34(m，1H)，0.96(d，3H，J＝7.0Hz)，0.84(s，3H)，0.79(d，3H，J＝6.2Hz)，0.76(s，3H)；ESIMS(m/z)：523.231[M+H]+(calcd 523.379).
实施例3.3β-O-苄基-6α-O-叔丁基二甲基硅基克洛苷元：
将实施例2所得化合物(3.39g)、咪唑(1.19g，17.5mmol)和DMAP(催化量)溶于CH2Cl2(120mL)中，缓慢滴加叔丁基二甲基氯硅烷(TBDMSCl，1.32g，8.74mmol)。反应液室温过夜后，蒸除溶剂，经硅胶柱纯化(1∶20 EtOAc-hexane)得浅黄色固体(3.91g，94.5％)，Rf0.35(1∶20 EtOAc-petroleum ether)；[α]D 20 -33.6(c 0.4，CHCl3)；1H NMR(CDCl3)：δ7.34-7.26(m，5H，Ar-H)，4.59(d，1H，J＝11.9Hz，CHPh)，4.53(d，1H，J＝11.9Hz，CH′Ph)，4.40(q，1H，J＝7.3Hz，H-16)，3.48-3.25(m，4H，H-26×2，H-6，H-3)，2.38-2.36(m，1H)，0.96(d，3H，J＝6.8Hz)，0.89(s，9H)，0.83(s，3H)，0.79(d，3H，J＝6.4Hz)，0.76(s，3H)，0.05(s，3H)，0.02(s，3H)；ESIMS(m/z)：637.287[M+H]+(calcd 637.465).
实施例4.6α-O-叔丁基二甲基硅基克洛苷元：
将实施例3所得化合物(4.07g，6.39mmol)溶于CH2Cl2-EtOH(1∶3，32mL)中，加入2滴三乙胺，氩气保护下加入适量Pd-C(10％)，氢气氛围下室温反应过夜。滤除Pd-C(硅藻土助滤)，蒸除溶剂，CHCl3-MeOH重结晶得浅黄色固体(3.16g，90.4％)；Rf 0.4(1∶3EtOAc-petroleum ether)；[α]D 20-24.5(c 0.2，CHCl3)；1H NMR(CDCl3)：δ4.40(q，1H，J＝7.4Hz，H-16)，3.58-3.53(m，1H，H-3)，3.47(ddd，1H，J＝2.3，4.1，10.5Hz，H-26)，3.40-3.34(m，2H，H-6，H-26)，1.59(s，6H，-CH3×2)，0.96(d，3H，J＝6.9Hz)，0.88(s，9H，-CH3×3)，0.82(s，3H)，0.79(d，3H，J＝6.4Hz)，0.76(s，3H)，0.03(s，3H)，0.02(s，3H)；ESIMS(m/z)：547.270[M+H]+(calcd 547.418).
实施例5.6α-O-叔丁基二甲基硅基-克洛苷元-3β-O-(2，3，4，6-四-O-苯甲酰基)-β-D-吡喃葡萄糖苷：
将实施例4所得化合物(2.64g，5.0mmol)、2，3，4，6-四-O-苯甲酰基-α-D-葡萄糖三氯亚胺酯(4.87g，6.6mmol)、4
分子筛和CH2Cl2(100mL)混合，0℃下搅拌0.5h后加入TMSOTf(142μL，0.82mmol)。0℃反应0.5h后，室温继续反应0.5h，用Et3N终止反应。滤除分子筛，滤液浓缩后经硅胶柱纯化(1∶8 EtOAc-petroleum ether)得化合物浅黄色固体(5.40g，99.4％)；Rf 0.32(1∶4 EtOAc-petroleum ether)；[α]D 20 -3.2(c 0.5，CHCl3)；1H NMR(CDCl3)：δ8.03-7.26(m，20H，Ar-H)，5.88(t，1H，J＝9.6，H-3′)，5.62(t，1H，J＝10.1Hz)，5.51(dd，1H，J＝8.2，10.1Hz)，4.92(d，1H，J＝7.8Hz，H-1′)，4.58(dd，1H，J＝3.7，12.4Hz，H-6′)，4.53(dd，1H，J＝5.9，12.4Hz，H-6′)，4.39(q，1H，J＝7.3Hz，H-16)，4.12-4.10(m，1H，H-5′)，3.57-3.52(m，1H)，3.46(ddd，1H，J＝1.9，3.7，12.6Hz)，3.36(t，1H，J＝11.0Hz)，3.28(td，1H，J＝4.6，10.6Hz)，0.96(d，3H，J＝7.3Hz)，0.78(m，12H)，0.74(s，3H)，0.72(s，3H)，-0.10(s，3H)，-0.17(s，3H).
实施例6.6α-O-叔丁基二甲基硅基-克洛苷元-3β-O-β-D-吡喃葡萄糖苷：
将实施例5所得化合物(5.48g，4.87mmol)溶于CH3OH-CH2Cl2(1∶1，60mL)，加入NaOMe适量。室温搅拌2h后，用阳离子树脂(H+)中和反应液至中性，滤除固体颗粒，浓缩后经硅胶柱纯化(15∶1CHCl3-MeOH→10∶1 CHCl3-MeOH)得白色固体(3.22g，93.3％)；Rf 0.31(8∶1CHCl3-MeOH)；[α]D 20 -38.9(c 0.4，MeOH)；1H NMR(DMSO-d6)：δ4.92(d，1H，J＝4.4Hz，-OH)，4.87-4.86(m，2H，-OH×2)，4.44(t，1H，J＝5.9Hz，6′-OH)，4.28(dd，1H，J＝7.3，13.9Hz，H-16)，4.20(d，1H，J＝7.7Hz，H-1′)，3.63(ddd，1H，J＝1.9，5.9，11.7Hz，H-5′)，3.56-3.51(m，1H，H-3)，3.43-3.40(m，3H，H-26×2，H-6)，3.19(t，1H，J＝11.0Hz)，3.07-2.88(m，4H)，0.90(d，3H，J＝9.0Hz)，0.86(s，9H，-CH3×3)，0.78(s，3H)，0.73(d，3H，J＝6.4Hz)，0.71(s，3H)，0.03(s，3H)，0.02(s，3H)；ESIMS(m/z)：731.252[M+Na]+(calcd 731.453).
实施例7.6α-O-叔丁基二甲基硅基-克洛苷元-3β-O-3，6-二-O-苯甲酰基-β-D-吡喃葡萄糖苷：
将实施例6所得化合物(3.22g，4.54mmol)和1-(苯甲酰基)苯并三唑(BBTZ，2.73g，11.35mmol)溶于CH2Cl2(60mL)中，加入三乙胺(1.70mL，12.26mmol)后室温反应过夜。浓缩后经硅胶柱纯化(1∶8∶2 EtOAc-petroleum ether-CHCl3)得白色固体(2.92g，70.1％)；Rf0.28(1∶3 EtOAc-petroleum ether)；[α]D 20 -11.5(c 0.2，CHCl3)；1H NMR(CDCl3)：δ8.10-7.44(m，10H，Ar-H)，5.18(t，1H，J＝9.2，H-3′)，4.69(dd，1H，J＝5.5，12.1Hz，H-6′)，4.62(dd，1H，J＝2.5，12.1Hz，H-6′)，4.54(d，1H，J＝7.7Hz，H-1′)，4.41(dd，1H，J＝7.3，14.6Hz，H-16)，3.75(t，1H，J＝9.5Hz，H-4′)，3.70-3.64(m，3H，H-2′，H-5′，H-6)，3.49-3.46(m，1H，H-26)，3.40-3.35(m，2H，H-26，H-3)，0.97(d，3H，J＝7.0Hz)，0.88(s，9H，-CH3×3)，0.80(s，3H)，0.79(d，3H，J＝6.4Hz)，0.76(s，3H)，0.03(s，3H)，0.02(s，3H)；13C NMR(CDCl3)：δ167.9，166.8，133.5，133.2，130.0，129.9，129.8，129.4，128.4(2C)，109.2，100.9，80.6，78.9，78.7，74.4，72.1，70.1，69.8，66.8，63.8，62.2，55.9，53.7，51.5，42.1，41.6，40.6，39.8，37.2，36.5，33.9，31.8，31.4，30.3，29.2，28.9，28.8，25.9，20.9，18.2，17.1，16.4，14.5，13.5，-4.2，-4.6；ESIMS(m/z)：939.380[M+Na]+(calcd 939.506).
实施例8.6α-O-叔丁基二甲基硅基-克洛苷元-3β-O-2，4-二-O-(2，3，4-三-O-乙酰基-α-L-鼠李糖基)-3，6-二-O-苯甲酰基-β-D-吡喃葡萄糖苷：
将实施例7所得化合物(1.477g，1.61mmol)和4
分子筛加入干燥的CH2Cl2(60mL)中，于-40℃搅拌20min后，加入BF3·Et2O(250μL，1.93mmol)，5min后，加入2，3，4-三-O-乙酰基-α-L-鼠李糖三氯亚胺酯(3.5g，8.05mmol)的CH2Cl2(20mL)溶液。-40℃反应15min，室温搅拌20min后，用Et3N终止反应。滤除分子筛，滤液浓缩后经硅胶柱纯化(1∶5bEtOAc-petroleum ether→1∶2.5 EtOAc-petroleum ether)得化合物1.98g；Rf 0.27(1∶2 EtOAc-petroleum ether)。该化合物的结构可由C-6TBDMS保护基产物A的谱图数据确证：
[α]D 20 -42.8(c 0.2，CHCl3)；1H NMR(CDCl3)：δ8.07-7.42(m，10H，Ar-H)，5.60(t，1H，J＝8.7Hz，H-3′)，5.33(dd，1H，J＝3.7，10.1Hz，Rha-H-3)，5.16(dd，1H，J＝3.2，10.1Hz，Rha-H-3)，5.12-5.11(m，1H，Rha-H-2)，4.99(dd，1H，J＝1.9，3.7Hz，Rha-H-2)，4.94(t，1H，J＝10.1Hz，Rha-H-4)，4.87(t，1H，J＝10.1Hz，Rha-H-4)，4.86(d，1H，J＝1.8Hz，Rha-H-1)，4.81(dd，1H，J＝2.3，12.4Hz，H-6′)，4.79(d，1H，J＝1.4Hz，Rha-H-1)，4.70(d，1H，J＝7.8Hz，H-1′)，4.51(dd，1H，J＝5.5，12.4Hz，H-6′)，4.46-4.40(m，2H，Rha-H-5，H-16)，4.00(t，1H，J＝9.2Hz，H-4′)，3.86-3.83(m，2H，H-5′，H-2′)，3.74-3.69(m，1H，Rha-H-5)，3.62-3.57(m，1H，H-3)，3.49-3.47(m，1H，H-26)，3.41-3.36(m，2H，H-26，H-6)，2.00，1.97，1.95，1.93，1.92，1.79(s，3H×6，-OAc×6)，1.17(d，3H，J＝6.4Hz，Rha-CH3)，0.97(d，3H，J＝6.9Hz)，0.79(d，3H，J＝5.9Hz)，0.78(s，3H)，0.75(s，3H)，0.68(d，3H，J＝5.9Hz，Rha-CH3)；ESIMS(m/z)：1369.414[M+Na]+(calcd 1369.598).
实施例9.6α-O-叔丁基二甲基硅基-克洛苷元-3β-O-2，4-二-O-(α-L-鼠李糖基)-β-D-葡萄糖苷：
将实施例8所得的样品(1.66g)溶于CH3OH-CH2Cl2(1∶1，50mL)，加入NaOMe适量。室温搅拌36h后，用阳离子树脂(H+)中和反应液至中性，滤除固体颗粒，浓缩后经硅胶柱纯化(10∶1 CHCl3-MeOH→3∶1CHCl3-MeOH)得白色固体(682mg，两步收率50.5％)，Rf 0.16(5∶1CHCl3-MeOH)；[α]D 20 -64.8(c 0.2，MeOH)；1H NMR(CD3OD)：δ5.18(d，1H，J＝1.4Hz，Rha-H-1)，4.83(d，1H，J＝1.5Hz，Rha-H-1)，4.49(d，1H，J＝7.7Hz，H-1′)，4.39(dd，1H，J＝7.3，14.3Hz)，4.15-4.11(m，1H)，3.94-3.89(m，2H)，3.83(dd，1H，J＝1.5，2.9Hz)，3.79(dd，1H，J＝1.9，12.1Hz)，3.74-3.61(m，4H)，3.55-3.31(m，8H)，3.20-3.17(m，1H)，1.25(d，3H，J＝6.2Hz)，1.22(d，3H，J＝6.2Hz)，0.95(d，3H，J＝7.3Hz)，0.91(s，9H，-CH3×3)，0.86(s，3H)，0.79-0.78(m，6H)，0.10(s，3H)，0.07(s，3H)；13C NMR(CD3OD)：δ110.5，103.0，102.4，98.9，82.1，79.9，79.0，78.2，77.0，76.9，73.6，73.7，72.4，72.2，71.6，70.7，69.8，67.9，63.8，61.9，57.3，55.3，52.9，43.5，42.9，41.0，38.7，37.8，35.2，32.6，32.4，31.4，30.3，29.9，29.2，26.5，22.1，19.1，18.0，17.9，17.5，16.9，14.9，13.9；ESIMS(m/z)：1023.434[M+Na]+(calcd 1023.569).
实施例10.6α-O-叔丁基二甲基硅基-克洛苷元-3β-O-[2，4-二-O-(2，3，4三-O-苄基-α-L-鼠李糖基)-3，6-二-O-苄基-β-D-葡萄吡喃糖苷]：
于DMF(10mL)中加入实施例9所得化合物(460mg，0.46mmol)，冰浴搅拌30min后加入NaH(60％，250mg，6.25mmol)，0℃反应30min.氩气保护下加入四丁基碘化铵(催化量)后，缓慢加入苄溴(0.70mL，5.9mmol)，0℃反应1h后，室温下反应过夜。将反应液用乙酸乙酯(400mL)稀释，依次用水、5％盐酸(1mol/L，30mL×3)、饱和碳酸氢钠(30mL×2)、饱和氯化钠(30mL×2)洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥后浓缩，经硅胶柱纯化(1∶15 EtOAc-petroleum ether→1∶10EtOAc-petroleum ether)得浅黄色泡沫状固体(595mg，75.8％)；Rf 0.31(1∶5 EtOAc-petroleum ether)；[α]D 20 -32.8(c 0.2，CHCl3)；1H NMR(CDCl3)：δ7.33-7.03(m，40H，Ar-H)，5.20(d，1H，J＝1.4Hz，Rha-H-1)，5.00(d，1H，J＝1.5Hz，Rha-H-1)，4.92(d，1H，J＝11.0Hz，-CH-Ph)，4.82(dd，2H，J＝2.6，11.3Hz)，4.75(d，1H，J＝11.0Hz)，4.62-4.39(m，12H)，4.28-4.23(m，1H)，4.16(d，1H，J＝12.5Hz)，4.11(d，1H，J＝12.5Hz)，3.81-3.64(m，8H)，3.56-3.41(m，6H)，3.37(t，1H，J＝11.0Hz)，3.27(td，1H，J＝4.4，10.3Hz)，3.23-3.20(m，1H)，1.29(d，3H，J＝6.2Hz)，0.97(d，3H，J＝7.0Hz)，0.93(d，3H，J＝6.5Hz)，0.87(s，9H)，0.79(d，3H，J＝6.6Hz)，0.77(s，3H)，0.61(s，3H)，0.02(s，3H)，-0.02(s，3H)；13C NMR(CDCl3)：δ139.2，138.8，138.6，138.5，138.3，138.1，128.3-127.2，127.1，126.2，109.2，98.5，98.3，97.8，84.1，80.6，80.5，80.4，79.5，77.4，75.7，75.3，75.0，74.9，73.9，73.4，72.5，72.0，71.9，70.3，68.7，67.9，66.8，62.2，55.9，53.6，51.3，42.1，41.7，40.6，39.8，37.4，36.5，33.8，31.8，31.4，30.3，29.5，28.8，28.7，27.5，26.0，20.8，18.2，17.9，17.8，17.1，16.4，14.5，13.1，-4.2，-4.3；ESIMS(m/z)：1759.652[M+K]+(calcd 1759.918).
实施例11.克洛苷元-3β-O-[2，4-二-O-(2，3，4-三-O-苄基-α-L-鼠李吡喃糖基)-3，6-二-O-苄基-β-D-吡喃葡萄糖苷]：
氩气保护下将实施例10所得化合物(840mg，0.487mmol)，TBAF(1.0mol/L in THF，5.5mL)溶于THF(5mL)中，室温下搅拌过夜，浓缩后经硅胶柱纯化(1∶8 EtOAc-petroleum ether→1∶5 EtOAc-petroleum ether)得浅黄色固体(792mg，quant.)；Rf 0.38(1∶3 EtOAc-petroleum ether)；[α]D 20 -34.2(c 0.2，CHCl3)；1H NMR(CDCl3)：δ7.33-7.03(m，40H，Ar-H)，5.25(d，1H，J＝1.5Hz，Rha-H-1)，4.97(d，1H，J＝1.5Hz，Rha-H-1)，4.89(d，1H，J＝10.6Hz，-CHPh)，4.81(dd，2H，J＝4.7，11.3Hz)，4.68(d，1H，J＝12.1Hz)，4.62-4.48(m，10H)，4.42-4.31(m，3H)，4.19(d，1H，J＝12.4Hz)，4.12(d，1H，J＝12.1Hz)，3.81(dd，1H，J＝2.9，9.2Hz)，3.78-3.70(m，5H)，3.63-3.43(m，8H)，3.38(t，1H，J＝11.0Hz)，3.31-3.29(m，1H)，2.99-2.94(m，1H)，1.30(d，3H，J＝6.2Hz)，0.97(d，3H，J＝7.0Hz)，0.92(d，3H，J＝5.8Hz)，0.80(d，3H，J＝6.6Hz)，0.77(s，3H)，0.58(s，3H)；13CNMR(CDCl3)：δ138.8，138.6，138.4，138.3，138.1，137.9，128.5，127.1，126.2，109.2，100.3，98.5，97.7，84.2，80.7，80.6，80.5，80.1，79.5，78.6，75.5，75.3，75.2，74.8，73.7，73.5，74.5，72.1，72.0，71.9，69.0，68.7，67.6，66.9，62.1，55.9，53.6，51.3，41.6，41.3，40.5，39.8，37.1，36.3，33.8，31.8，31.4，30.3，29.1，28.8，28.6，20.8，17.8，17.1，16.4，14.5，13.1；ESIMS(m/z)：1629.877[M+Na]+(calcd 1629.858).
实施例12.克洛苷元3β-O-(2，4-二-O-α-L-鼠李吡喃糖基)-β-D-吡喃葡萄糖苷：
将实施例11所得化合物溶于CH2Cl2-MeOH(1∶1)中，加入10％Pd-C，H2氛围下反应过夜。滤除不溶物，滤液蒸干后经硅胶柱纯化。Rf 0.35(5∶2 CHCl3-MeOH)；yield 60.0％；[α]D 20 -69.3(c 0.2，MeOH)；1H NMR(CD3OD)：δ5.18(d，1H，J＝1.4Hz，Rha-H-1)，4.83(d，1H，J＝1.4Hz，Rha-H-1)，4.52(d，1H，J＝8.2Hz，H-1′)，4.38(q，1H，J＝7.3Hz，H-16)，4.17-4.12(m，1H)，3.93-3.91(m，2H)，3.82(dd，1H，J＝1.8，3.2Hz)，3.78(dd，1H，J＝1.9，12.4Hz)，3.67-3.60(m，4H)，3.57(t，1H，J＝9.1Hz)，3.52(t，1H，J＝9.1Hz)，3.45-3.28(m，7H)，2.38-2.28(m，2H)，1.25(d，3H，J＝6.4Hz)，1.23(d，3H，J＝6.4Hz)，0.95(d，3H，J＝6.9Hz)，0.85(s，3H)，0.79-0.78(m，6H)；13C NMR(CD3OD)：δ110.5，103.0，102.3，100.2，82.1，80.0，79.4，78.6，78.1，76.6，74.0，73.7，72.5，72.3，72.2(2C)，70.6，69.9，69.7，67.8，63.8，61.9，57.3，55.3，52.8，42.9，42.7，41.7，41.0，38.7，37.6，35.2，32.7，32.4，31.4，30.4，29.9，29.3，22.1，18.0，17.9，17.5，16.9，14.9，13.8；ESIMS(m/z)：909.626[M+Na]+(calcd 909.482).
实施例13.6α-乙酰基-克洛苷元3β-O-[2，4-二-O-(2，3，4-三-O-苄基-α-L-鼠李吡喃糖基)-3，6-二-O-苄基-β-D-吡喃葡萄糖苷]：
将实施例11所得化合物(0.1mmol)、乙酸(0.5mmol)、DCC(0.7mmol)、DMAP(0.7mmol)溶于CH2Cl2(7mL)中，室温反应过夜后滤除不溶物，滤液蒸除溶剂，硅胶柱纯化。Rf 0.27(1∶5EtOAc-petroleum ether)；[α]D 20 -31.6(c 0.2，CHCl3)；1H NMR(DMSO-d6)：δ7.34-6.98(m，40H，Ar-H)，5.10(s，1H，Rha-H-1)，4.99(s，1H，Rha-H-1)，4.82-4.45(m，16H，-CHPh×14，H-1′，H-16)，4.27(q，1H，J＝6.9Hz，H-16)，4.23-4.18(m，1H，Rha-H-5)，4.11(d，1H，J＝11.9Hz，-CHPh)，3.95(d，1H，J＝11.9Hz，-CHPh)，3.88(s，1H，Rha-H-2)，3.72-3.31(m，15H)，1.99(s，3H)，1.12(d，3H，J＝5.9Hz，Rha-CH3)，0.90(d，3H，J＝6.4Hz)，0.83(d，3H，J＝5.9Hz，Rha-CH3)，0.74(d，3H，J＝6.4Hz)，0.70(s，3H)，0.38(s，3H)；13C NMR(DMSO-d6)：δ170.0，138.8，138.7，138.6，138.5，138.4，138.3，138.2，128.2-126.0，108.5，97.6(2C)，97.3，83.3，80.1，79.9，79.7，79.6，78.7，75.9，75.7，75.3，74.8，74.6，74.4，73.7(2C)，73.3，72.3，72.0，71.7，71.3，68.6，67.8，67.2，66.0，61.6，55.1，52.5，47.4，41.1，40.1-39.1(2C)，37.5，36.3，36.1，33.4，33.1，31.3，30.9，29.8，29.0，28.5，27.3，25.3，24.5，22.1，21.1，20.3，17.8，17.7，16.0，14.6，12.3；ESIMS(m/z)：1671.868[M+Na]+(calcd 1671.869).
实施例14.6α-乙酰基-克洛苷元3β-O-(2，4-二-O-α-L-鼠李吡喃糖基)-β-D-吡喃葡萄糖苷：
将实施例12所得化合物溶于CH2Cl2-MeOH(1∶1)中，加入10％Pd-C，H2氛围下反应过夜。滤除不溶物，滤液蒸干后经硅胶柱纯化。Rf0.36(5∶1 CHCl3-MeOH)；two steps 51.8％；[α]D 20 -43.1(c 0.2，MeOH)；1HNMR(DMSO-d6)：δ4.99(s，1H，Rha-H-1)，4.94(d，1H，J＝6.4Hz，-OH)，4.75-4.73(m，2H，-OH×2)，4.70-4.69(m，2H，-OH，Rha-H-1)，4.60(d，1H，J＝4.6Hz，-OH)，4.60(d，1H，J＝4.1Hz，-OH)，4.57(d，1H，J＝5.9Hz，-OH)，4.53(td，1H，J＝4.1，11.0Hz)，4.50(d，1H，J＝6.0Hz，-OH)，4.39(d，1H，J＝7.8Hz，H-1′)，4.26(q，1H，J＝6.8Hz)，3.89-3.83(m，2H，Rha-H-5×2)，3.69(t，1H，Rha-H-2)，3.60-3.57(m，2H，Rha-H-2，H-6′)，3.53-3.49(m，1H，H-3)，3.42-3.37(m，5H)，3.21-3.17(m，5H)，2.03(s，3H)，1.10(d，3H，J＝6.0Hz)，1.04(d，3H，J＝6.4Hz，Rha-CH3)，0.89(d，3H，J＝6.8Hz，Rha-CH3)，0.80(s，3H)，0.74(d，3H，J＝6.4Hz)，0.72(s，3H)；13C NMR(DMSO-d6)：δ170.3，108.4，100.5(2C)，98.7，80.1，77.6，76.7，76.3，76.0，75.1，71.9(2C)，71.5，70.7(2C)，70.6，70.4，68.6，68.0，65.9，61.7，60.1，55.1，52.8，47.5，41.1，40.1，37.5，36.5，36.2，33.2，31.2，30.9，29.8，28.8，28.5，27.7，21.1，20.4，17.8(2C)，17.1，16.1，14.6，12.8；ESIMS(m/z)：948.517[2M+Ca]2+(calcd 948.485).
药理实验
试验例1.化合物对H5N1高致病流感病毒感染宿主细胞的影响筛选模型的原理：
血凝素是流感病毒表面的糖蛋白，其主要作用是与宿主细胞表面受体结合和融合，在流感病毒对宿主细胞的分子识别和选择性结合起决定作用。基于血凝素特性，我们建立了以HIV为核心的流感病毒的重组病毒系统(HA/HIV)，具体方法如下。将HIV载体质粒(pNL4-3.Luc.R-.E-.，从NIH获得)与克隆至哺乳动物细胞表达载体pcDNA-3的HA的质粒共转染至293T细胞(人胚胎肾细胞)后，细胞可产生以HIV为核心并包裹有HA外壳蛋白的病毒颗粒(HA/HIV)。该病毒颗粒具有以下特点：1)病毒对宿主细胞的选择性取决于血凝素的特性；2)由于HIV载体上env、nef和vpr基因缺失，因此该病毒只能一次性进入宿主细胞并且不能复制，所以该病毒是安全的；3)该HIV载体上带有一个荧光素酶报告基因，因此被感染的细胞会表达荧光素酶，通过检测荧光素酶活性就可标示细胞被病毒感染的程度。
另外，我们采用用水泡性口炎病毒外壳蛋白(VSV-G)包装HIV-1核心，构建VSVG/HIV-1重组病毒同时检测化合物，以排除HIV-1核心对实验的影响，即化合物可抑制HA/HIV-1的进入，而不抑制VSVG/HIV-1的进入时，认为化合物是流感病毒侵入宿主细胞的特异性抑制剂。
实验方法：
在本发明中应用了三株流感病毒对实施例进行药理活性评价：
1.H5N1，Goose/Qinghai/59/05，(简称QH)
2.H5N1，InfluenzaA/Vietnam/1203/04(简称Viet)
3.H5N2，CK/Michoacan/28159-530/95，(简称：USDA)
感染前一天，按每孔6×104个细胞的密度将A549细胞接种到24孔板上。用DMSO溶解阳性对照化合物或待筛选化合物，感染前15分钟加入细胞培养液中，以DMSO溶剂作空白对照。加入适宜稀释度的病毒液(HA/HIV-1或VSV-G/HIV-1)感染细胞。感染48小时后，被感染的细胞每孔加入50μl细胞裂解液(Promega)裂解细胞，将30μl荧光素酶底物(Promega)与20μl细胞裂解液混合后用FB15荧光检测器(Sirius)仪器测定细胞荧光素酶的相对活性，其活性的强弱反映了病毒的感染的水平。结果显示，化合物可有效抑制H5N1高致病流感病毒和H5N2低致病流感病毒对宿主细胞的侵入，结果见表1。
表1化合物对HA(Viet)/HIV，HA(QH)/HIV and HA(USDA)/HIV感染作用的比较
注：两个化合物在10μM的终浓度下对VSV-G/HIV-1的抑制率均小于10％。
试验例2.细胞毒性试验
应用MTT法测定了所有涉及的化合物对A549和293ET细胞的细胞毒性，所有实施例化合物在10μM的终浓度下均无细胞毒性。
Claims (14)
1.如通式(I)所示的克洛皂苷，
其中，R1、R2独立的选自氢、葡萄糖基、阿拉伯糖基、鼠李糖基、半乳糖基、木糖基、核糖基、甘露糖基、2-氨基葡萄糖基、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、山梨糖基、阿洛糖基、阿洛酮糖基，或由这些单糖2-3个组成的直链或支链寡糖基；
R3选自H、C1-C18直链或支链的烷酰基。
2.制备权利要求1所述的克洛皂苷的方法，其特征在于，包括如下步骤：
其中，R1、R2和R3的定义和权利要求1中的定义相同；P0，P1，P2，P3为保护基；
(1)对薯蓣苷元的3β-OH进行保护制备3β-O-保护基薯蓣苷元；
(2)在3β-O-保护基薯蓣苷元的C-6位引入羟基制备3β-O-苄基克洛苷元
(3)3β-O-保护基克洛苷元的6-羟基上引入保护基。
(4)脱去3β-O-保护基-6α-O-保护基克洛苷元的3位羟基上的保护基
(5)在克洛苷元的C-3引入β--葡萄糖基；
(6)脱除克洛苷元-葡萄糖苷上的酰基保护基；
(7)选择性的保护克洛苷元葡萄糖上3，6-OHs；
(8)分别或同时在步骤(7)所得的克洛苷元的吡喃葡萄糖的2，4-OHs引入糖基；
(9)脱除新引入的糖基上的保护基；
(10)将糖基上的所有羟基进行保护；
(11)脱除克洛苷元6α-羟基上的保护基；
(12)脱除糖基上的所有保护基；
(13)将步骤(11)获得的化合物的6α-羟基进行酯化反应；
(14)将步骤(13)获得的化合物的糖基上的所有保护基脱除。
3.根据权利要求2的制备方法，其特征在于，
用苄基保护时；
反应的碱选自NaH；
催化剂选自四丁基碘化铵；
溶剂选自四氢呋喃，N，N-二甲基甲酰胺。
4.根据权利要求2的制备方法，其特征在于，
脱除苷元上的苄基保护基使用Pd-C和H2；
脱保护基反应的溶剂选自四氢呋喃、甲醇、乙醇、二氯甲烷、水中的一种或多种的混合物；
反应在有机胺存在的条件下进行。
5.根据权利要求2的制备方法，其特征在于，
所述的糖基供体上的保护基选自乙酰基、苯甲酰基、叔戊酰基、苄基；所述的糖基供体的活化基团选自三氯乙酰亚胺酯、乙硫苷、苯硫苷或对-甲苯硫苷；
糖苷化反应的在路易斯酸催化剂存在的条件下进行；
所述糖苷化反应中的有机溶剂选自C1-C4的氯代烷烃、甲苯或乙醚；
糖苷化反应在
型硅铝酸盐分子筛存在的条件下进行；
糖苷化反应的淬灭剂选自硫代硫酸钠、有机胺。
6.根据权利要求2的制备方法，其特征在于，
脱除糖基上的苯甲酰基保护基使用CH3ONa；
脱保护基反应的溶剂选自四氢呋喃、甲醇、乙醇、二氯甲烷、水中的一种或多种的混合物；
脱保护基反应完成后使用阳离子树脂(H+)中和反应液至中性。
7.根据权利要求2的制备方法，其特征在于，
步骤(7)选择性的保护葡萄糖上3，6-OHs使用位阻试剂1-(苯甲酰基)苯并三唑；
有机溶剂优选为C1-C4的氯代烷烃、甲苯或乙醚；
反应在有机胺存在的条件下进行。
8.根据权利要求2的制备方法，其特征在于，
酯化反应的缩合试剂选自1，3二环己基碳二亚胺、二吡啶碳酸酯、1-(3-二甲胺丙基)-3-乙基碳酰亚胺盐酸盐、1，3-二异丙基碳酰亚胺、4-吡咯烷基吡啶；
催化剂选自4-二甲氨基吡啶(DMAP)，4-吡咯烷基吡啶。
9.根据权利要求2的制备方法，其特征在于，各步骤的产物可以通过重结晶或硅胶柱纯化。
10.根据权利要求的制备方法，其特征在于，
所述的硅胶柱纯化时使用的洗脱剂是选自石油醚、正己烷、环己烷、二氯甲烷、三氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇中一种或多种的混合物；
所述重结晶纯化中的溶剂优选为三氯甲烷、C1-C4的烷基醇、乙酸乙酯、丙酮、正己烷、石油醚、环己烷、二氯甲烷、水中一种或多种的混合物。
11.一种药物组合物，其特征在于，含有作为有效成分的通式(I)所示的克洛皂苷和药效学上可接受的载体。
12.根据权利要求11的药物组合物，其特征在于，还含有其它的抗病毒药。
13.权利要求1所述的克洛皂苷在制备预防或治疗抗流感病毒的药物中的应用。
14.根据权利要求13的应用，其特征在于，所述的流感病毒为H5N1、H5N2。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN200910084245.6A CN101935335B (zh) | 2009-05-18 | 2009-05-18 | 一类克洛皂苷及其制法与抗高致病h5n1流感病毒的应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN200910084245.6A CN101935335B (zh) | 2009-05-18 | 2009-05-18 | 一类克洛皂苷及其制法与抗高致病h5n1流感病毒的应用 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN101935335A true CN101935335A (zh) | 2011-01-05 |
| CN101935335B CN101935335B (zh) | 2014-05-21 |
Family
ID=43388928
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN200910084245.6A Expired - Fee Related CN101935335B (zh) | 2009-05-18 | 2009-05-18 | 一类克洛皂苷及其制法与抗高致病h5n1流感病毒的应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN101935335B (zh) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105669820A (zh) * | 2014-11-19 | 2016-06-15 | 复旦大学 | 单糖单元为d-甘露糖的皂苷及其制备方法和在制药中的用途 |
| CN109553653A (zh) * | 2018-05-15 | 2019-04-02 | 苏州济尔生物医药有限公司 | 一种人参二醇苷衍生物及其制备方法和应用 |
-
2009
- 2009-05-18 CN CN200910084245.6A patent/CN101935335B/zh not_active Expired - Fee Related
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| BIAO YU ET AL: "Glycosyl Trifluoroacetimidates. 2. Synthesis of Dioscin and Xiebai Saponin I", 《J.ORG.CHEM》 * |
| NOBUKO SAKURAI ET AL: "Anti-AIDS Agents. Part 57:y Actein, an anti-HIV principle from the rhizome of Cimicifuga racemosa (blackcohosh), and the anti-HIV activity of related saponins", 《BIOORGANIC & MEDICINAL CHEMISTRY LETTERS》 * |
| YICHUN ZHANG ET AL: "Syntheses of chlorogenin 6a-O-acyl-3-O-b-chacotriosides and their antitumor activities", 《CARBOHYDRATE RESEARCH》 * |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105669820A (zh) * | 2014-11-19 | 2016-06-15 | 复旦大学 | 单糖单元为d-甘露糖的皂苷及其制备方法和在制药中的用途 |
| CN109553653A (zh) * | 2018-05-15 | 2019-04-02 | 苏州济尔生物医药有限公司 | 一种人参二醇苷衍生物及其制备方法和应用 |
| CN109553653B (zh) * | 2018-05-15 | 2024-04-09 | 苏州济尔生物医药有限公司 | 一种人参二醇苷衍生物及其制备方法和应用 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN101935335B (zh) | 2014-05-21 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US7157433B2 (en) | Compounds, compositions as carriers for steroid/nonsteroid anti-inflammatory; antienoplastic and antiviral active molecules | |
| US7091187B2 (en) | Compounds, compositions and methods for treatment of inflammatory diseases and conditions | |
| KR100281265B1 (ko) | 신규한 스핀고당지질 및 그의 사용 | |
| JP6441807B2 (ja) | トリテルペン誘導体とその抗インフルエンザへの使用 | |
| KR20100097111A (ko) | 신규한 황산화된 올리고사카라이드 유도체 | |
| SA98190501B1 (ar) | Appetite suppressant تركيبات صيدلانية ذات نشاط كابت للشهية | |
| CA2816789A1 (en) | Aminoglycosides and uses thereof in treating genetic disorders | |
| CN108350014A (zh) | 氨基糖苷衍生物及其在治疗遗传性病症中的应用 | |
| CN101817862A (zh) | 熊果酸-3-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸苷及其衍生物、其制备方法及医药用途 | |
| CN101863934B (zh) | 水杨酸甲酯糖苷类化合物、其合成方法与用途 | |
| CN101941996B (zh) | 一类熊果酸皂苷及其制法与抗高致病h5n1流感病毒的应用 | |
| US11633484B2 (en) | Method for improving the oral bioavailability of a drug | |
| CN101935335A (zh) | 一类克洛皂苷及其制法与抗高致病h5n1流感病毒的应用 | |
| CN101402667B (zh) | 糖基化修饰的一氧化氮供体型齐墩果酸类化合物、其制备方法及用途 | |
| CN101781352A (zh) | 20-o-糖基及其原人参二醇类化合物及其制备方法 | |
| K Kapoor et al. | Drug-glycosidation and drug development | |
| CN108929353A (zh) | 一种鼠李糖或核糖修饰的小檗碱盐衍生物及其制备方法和用途 | |
| WO2017190419A1 (zh) | 一种罗汉果醇衍生物单体及其组合物的用途 | |
| CN111961110A (zh) | 一种齐墩果酸c-3位糖偶联物其制备方法及抗流感病毒应用 | |
| KR100355131B1 (ko) | 7-글리코실옥시벤조피란유도체및이를활성성분으로서함유하는항알레르기성약제학적조성물 | |
| EP2514759A1 (en) | Triterpene derivative, and prophylactic or therapeutic agent for chronic hepatitis c | |
| WO2006124720A1 (en) | Multidrug resistant anticancer anthracyclines | |
| JP5283033B2 (ja) | シアリルα（２→６）ラクトース含有化合物及びその使用 | |
| CN115947769B (zh) | 磺酸化四糖结构化合物及其制药应用 | |
| CN105017346B (zh) | 三六支化甘露五糖六糖对甲氧基苯基糖苷及其制备方法与应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20140521 Termination date: 20150518 |
|
| EXPY | Termination of patent right or utility model |