CN101904948B - 一种新众生丸的中药制剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种新众生丸的制备方法，是将传统众生丸制剂经两次提取、浓缩后制成浸膏，将物料温度控制在40-80℃，采用真空带式干燥机将浸膏制成干膏粉；将干膏粉、胆南星粉、人工牛黄与辅料混合均匀后，采用压制法工艺制丸，替代了传统塑制法制丸的生产工艺。新众生丸整个制备过程温和，使得中药制剂中的主要活性成分保留率提升30％-294％，生产过程能耗降低50-80％，生产周期缩短60％以上；本发明方法解决了传统塑制法丸型大小不一的缺陷，活性成分显著提高，溶散时限显著缩短，使新众生丸制剂的药物疗效显著提高；新众生丸的制备方法提高了劳动生产率、降低能耗、减少生产过程污染物排放，符合我国“节能减排增效”的政策。

Description

一种新众生丸的中药制剂及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种新众生丸中药制剂以及制备新众生丸的方法，特别涉及一种将中药浸膏用真空带式干燥成干浸膏，并采用压制法制丸的新众生丸制备方法。

背景技术

众生丸是广东众生药业股份有限公司的独家品种之一，执行部颁标准众生丸(WS₃-B-2880-98)，处方由板蓝根、柴胡、赤芍、当归、虎杖、黄芩、蒲公英、玄参、紫花地丁、防风、白芷、岗梅、胆南星、夏枯草、天花粉、人工牛黄、皂角刺等十七味药材，功能主治为清热解毒，活血凉血，消炎止痛。主要用于治疗上呼吸道感染，急、慢性咽喉炎，急性扁桃腺炎，疮毒等症。

上呼吸道感染是指自鼻腔至喉部之间的急性炎症的总称，是最常见的感染性疾病。包括鼻、咽、喉的感染，临床上一般称为上感。上呼吸道不同部位的感染，临床的表现并不尽相同，主要包括普通感冒，俗称“伤风”，病毒性咽炎、喉炎、支气管炎，疱疹性咽峡炎，咽结膜热，细菌性咽-扁桃体炎等。90％左右的上呼吸道感染由病毒引起，细菌感染常继发于病毒感染之后。该病四季、任何年龄均可发病，通过含有病毒的飞沫、雾滴，或经污染的用具进行传播。常于机体抵抗力降低时，如受寒、劳累、淋雨等情况，原已存在或由外界侵入的病毒或/和细菌，迅速生长繁殖，导致感染。

上呼吸道感染的治疗分为西医疗法和中医疗法，西医疗法需区分细菌性感染和病毒性感染，对症下药，通常细菌性感染用青霉素或其它抗生素。但大多数急性上呼吸道感染为病毒感染，抗生素非但无效，还可引起机体菌群失调，有利于病毒繁殖，必须避免滥用。病毒性感染目前尚无特殊的抗病毒药物，多需对症处理、休息、忌烟、多饮水、保持室内空气流通、防止继发细菌感染为主。对于发热或病情较重的患者，可口服解热镇痛剂及减少鼻咽充血和分泌物的抗感冒复合剂或中成药。中医疗法多采用辛凉解表，清热解毒法。临床上已有数十种治疗上呼吸道感染的中成药问世，如众生丸、九味羌活丸、感冒清热颗粒、柴胡注射液、银翘解毒丸、双黄连合剂、银黄颗粒及板蓝根颗粒等。

众生丸药效的发挥依赖于其处方中各药材所含的活性成分及其传统中医理论的组方、先进的制备工艺及适宜的辅料加工制成制剂共同作用。处方中各药材所含的活性成分及相关的药理作用文献资料如下：

板蓝根含有生物碱成分色胺酮对羊毛状小孢子菌、断发癣菌、石膏样小孢子菌、紫色癣菌、石膏样癣菌、红色癣菌、紫状表皮癣菌等7种皮肤病真菌有较强的抑菌作用。板蓝根中的4(3H)-喹唑酮具有抗病毒作用，能抑制流感病毒、柯萨奇病毒的活性，还可显著促进脾细胞增殖及刀豆蛋白诱导的淋巴细胞增殖。板蓝根中的大黄酚具有抗菌、泻下等作用。另外，板蓝根中的苯甲酸类物质如丁香酸等具有较强的抗内毒素活性。

柴胡具有显著的抗炎作用，柴胡皂苷和挥发油是其抗炎的有效成分。柴胡皂苷d的抗炎作用最强，它对多种炎症过程包括炎性渗出、毛细血管通透性升高、炎症介质释放、白细胞游走、结缔组织增生和多种变态反应炎症均有显著抑制作用。柴胡皂苷还具有镇痛作用，有报道其能抑制疼痛时磷酸组织胺5-羟色胺的释放，明显减少醋酸引起的小鼠扭体反应。另外，柴胡挥发油还具有解热作用。

芍药苷是赤芍的活性成分，主要存在于赤芍的根皮部。芍药苷具有显著的镇痛、镇静、抗惊厥作用。赤芍浸膏能拮抗士的宁所引起的惊厥。小鼠腹腔注射有显著的镇痛效果，镇痛作用可能与吗啡受体无关。能延长球已烯巴比妥钠对小鼠的睡眠时间，对五甲烯四氮唑所致的惊厥有拮抗作用。芍药苷对正常小鼠体温有降低作用，对人工发热的小鼠有导热作用。芍药苷对角叉菜胶和右旋糖酚所致的大鼠足踝肿有抑制作用，也可抑制醋酸扭体反应，对大鼠佐剂性关节炎有防治作用，对大鼠应激溃疡有预防作用和抑制胃液分泌的作用。白芍煎剂对某些致病性细菌和真菌有抑制作用。

阿魏酸是当归的有效成分之一。其对二甲苯所致的小鼠耳壳肿胀和醋酸引起的小鼠腹腔毛细血管通透性增高以及组胺引起的大鼠皮肤毛细血管通透性升高，对角叉菜胶、蛋清和甲醛所致的大鼠足跖肿胀均有明显的抑制作用；摘除双恻肾上腺后其抗炎作用仍然存在。阿魏酸能显著抑制大鼠棉球肉芽组织增牛、降低炎性组织中PGE的释放量，还能抑制角叉菜胶所致炎性渗出，但减少渗出液中白细胞数量。阿魏酸对细菌N-乙酰转移酶有较强抑制作用，同时还可使干扰素-8含量降低，抑制黄嘌呤氧化酶活性，使得阿魏酸抗菌、抗病毒作用表现为广谱。藁本内酯是当归的另一有效成分之一，其对角叉菜和右旋糖苷诱导的足肿胀、棉球肉芽肿有明显的抑制作用，并可降低啤酒酵母导致的高热，藁本内酯的抗炎，解热作用均具有剂量依耐性。

白藜芦醇苷(又名虎杖苷)和大黄素是虎杖药材中主要的活性成分，其含量高低是评价药材质量的重要指标。其中的大黄素等醌类化合物具有抗菌活性，大黄素，大黄素葡萄糖甙及白藜芦醇苷等对金黄色葡萄球菌，肝炎双球菌有抑制作用。大黄素等蒽醌类物质具有抗病毒作用，可抑制乙型肝炎抗原阳性，治疗慢性肝炎，急性黄疸性肝炎。

黄芩苷是黄芩的活性成分，对金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌、绿脓杆菌、流感杆菌、枯草杆菌、大肠杆菌、甲型链球菌、乙型链球菌、肺炎球菌等常见病原菌均有不同程度的抑菌和杀菌作用，且抗菌谱广，抗菌作用强。研究表明黄芩苷对发热大鼠有明显的解热作用，并具有一定的量效关系。黄芩苷有明显的抑制内毒素性发热的作用，还可通过抑制下丘脑中PGE和cAMP含量升高而发挥其解热作用。

蒲公英含有的咖啡酸，具有良好的抗菌作用，特别能有效抑制金黄色葡萄球菌和皮肤真菌。并有轻泻和健胃的功效。蒲公英煎剂对大肠杆菌、绿脓杆菌、葡萄球菌、弗氏痢疾杆菌、副伤寒杆菌甲、白色念珠菌等均有一定抑制作用。

玄参为常用中药，具有凉血滋阴、泻火解毒之功效，用于热病伤阴、舌绛烦渴、温毒发斑、津伤便秘、骨蒸劳嗽、目赤、咽痛、瘰疬、白喉、痈肿疮毒等症。有文献报道玄参中的哈巴俄苷具有抗慢性炎症、降压、镇痛、解痉、抗乙肝病毒以及免疫促进作用。哈巴俄苷可促进阴虚小鼠脾淋巴细胞增殖，诱导脾淋巴细胞产生IL-2，能降低阴虚小鼠血浆中cAMP的含量，并能调整cAMP/cGMP比值至正常对照组水平，使抑制的免疫功能得以恢复。

有报道紫花地丁对金葡菌、表皮葡萄球菌、腐生菌、粪肠球菌、大肠埃希菌、变形杆菌等有较强的抑菌作用，并发现紫花地丁和蒲公英按质量比1∶4配伍使用时体外抗菌活性较强，对4种革兰氏阳性球菌和4种革兰氏阴性杆菌均有较好的抑菌作用，且对大肠埃希氏菌和克雷伯氏菌表现出一定的杀菌作用。紫花地丁煎剂对二甲苯所致的小白鼠皮肤毛细血管通透性亢进有显著的抑制作用，而且对小鼠棉球肉芽增生以及大白鼠甲醛性足蹠肿胀均有很强的抑制作用。体外试验证明，紫花地丁提取液对细菌内毒素有拮抗作用。紫花地丁中的秦皮乙素对病原微生物具有抑制作用，对肠道中的O₁₅₇大肠杆菌的繁殖具有明显的抑制作用，对自由基清除作用明显。腹腔注射秦皮乙素对对大鼠蛋清、右旋糖酐足肿胀有抑制作用。

防风味辛、甘，性温，具有解表祛风、胜湿止痉的功能。有文献报道防风中活性成分升麻苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷具有较好的解热，镇痛、抗炎等药理活性。防风香豆素类成分如花椒毒素，东莨菪素，欧前胡素及香豆内酯等具有抗菌，抗炎，止痛和祛痰等活性。

东莨菪素为白芷的有效成分之一，具有抗炎、祛风、止痛和祛痰作用。白芷总挥发油能通过对单胺类和肽类2种神经递质的调节而发挥镇痛作用。欧前胡素是白芷中主要的香豆素类生物活性物质，相关研究表明欧前胡素有抗痉挛、抗炎镇痛、抗癌、抗HIV、增强免疫等作用。

岗梅为两广地区的药材，有清热解毒、生津止渴、利咽消肿、散瘀止痛之功，民间多用于凉茶。现代药理学研究表明：岗梅在体外试验中对金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌有抑制作用；可增加豚鼠离体心脏冠脉流量和心收缩力；对垂体后叶素所致家兔急性心肌缺血T波改变有保护作用。岗梅水提取物能明显抑制二甲苯所致的小鼠耳廓肿胀和角叉菜胶所致的大鼠足跖肿胀及炎性组织中PGE的生成，减少大鼠棉球肉芽肿的形成，同时对醋酸所致小鼠毛细血管通透性增高具有显著抑制作用。

夏枯草为唇形科多年生草本植物，夏枯草的果穗所含的化学成分主要有夏枯草甙、咖啡酸、生物碱和水溶性盐类，其中甙元为齐墩果酸及熊果酸等，性味苦辛而寒，具有清肝火，散郁结之功效。体外抗结核分支杆菌的试验显示夏枯草有一定抗菌作用，其机制可能是夏枯草甙和挥发油所起的抗菌活性。夏枯草的化学成分中，以熊果酸的抗炎活性最强。

天然的牛黄来源稀少，国内大部分厂家生产含有牛黄的制剂均采用人工牛黄替代。它由贝斯素、胆酸、猪去氧胆酸、胆红素、胆固醇、无机盐等配制而成。具有清热、解毒、祛痰、定惊之功效，用于热痰谵狂，神昏不语，小儿急热惊风，咽喉肿痛；外用治疗疔疽，口疮等。人工牛黄中胆酸是一种具有类固醇结构的有机酸，能乳化脂肪，促进其消化作用，其具有解热、抗炎、抗过敏、抗病毒等作用，此外还很强的溶血作用。胆红素则具有中枢镇静、抗惊厥、解热、降压、抗病毒、抗癌和促红细胞新生等作用，效果明显。

由上述处方各药材活性成分的综述资料可见，众生丸制剂中各活性成分含量的高低将直接影响到众生丸的疗效，最大限度上提高制剂中的活性成分极为重要。众生丸的质量标准生产工艺将处方中的部分药材采用传统的多功能提取罐水煎煮，提取液用三效浓缩器浓缩成浸膏，浸膏用喷雾干燥器喷雾干燥成干膏粉，干膏粉与胆南星粉、人工牛黄混匀，传统塑制法工艺制丸，该生产工艺存在明显缺陷。众生丸药材的提取液浓缩成浸膏后，浸膏用喷雾干燥器喷雾干燥，喷雾干燥器进风温度达200-300℃，浸膏会因干燥温度过高，造成提取液中有效成分被破坏，极大的降低了干膏粉中活性成分的含量，采用此干膏粉制成的众生丸制剂，在服用相同剂量众生丸的前提下，众生丸的治疗效果将大打折扣。另外，采用传统塑制法制丸的生产工艺需要经过物料混合、制丸块、制丸条、分粒、搓圆、热风干燥等工序，制备工艺繁琐、湿丸干燥温度高及时间长(将导致活性成分的损失、丸溶散时限的延长)、机器设备利用率低，劳动生产效率也低，生产过程粉尘易飞扬造成污染物排放增加，且传统塑制法制备的众生丸丸型大小不一，难以保证众生丸疗效的稳定性。

发明内容

本发明的目的之一是提供一种新众生丸中药制剂的处方组成；

本发明的目的之二是提供一种新众生丸的制备方法；

本发明的目的之三是提供一种新众生丸的质量控制方法。

新众生丸由蒲公英、紫花地丁、黄芩、岗梅、赤芍、天花粉、玄参、当归、防风、柴胡、皂角刺、人工牛黄、白芷、胆南星、虎杖、夏枯草、板蓝根、羟丙纤维素、微晶纤维素、乳糖、二氧化硅、硬脂酸镁、包衣材料等23个成分组成。

制备1000丸的新众生丸，由蒲公英330g、紫花地丁330g、黄芩100g、岗梅130g、赤芍100g、天花粉100g、玄参100g、当归100g、防风100g、柴胡100g、皂角刺130g、白芷30g、虎杖130g、夏枯草65g、板蓝根130g等15味药材，用多功能提取罐水煎煮二次，第一次加入3～10倍药材量的水，控制微沸状态，蒸汽压力控制在0.04～0.1Mpa，温度控制在98～101℃，提取2小时，第二次加入2～6倍药材量的水，控制微沸状态，蒸汽压力控制在0.04～0.1Mpa，温度控制在98～101℃，提取1小时，合并两次提取液。将提取液过滤后，用三效浓缩器浓缩成浸膏；浓缩时温度控制在60～85℃，蒸汽压力控制在0.04～0.12Mpa，真空度控制在0.02～0.09Mpa，浓缩至相对密度为1.25～1.35的浸膏；将浸膏进行真空带式干燥成干浸膏，干燥时物料温度控制在40-80℃，真空压力控制在-0.07Mpa～-0.12Mpa，进料速度控制在10-20L/h，料带传送速度控制在20-30cm/min，优选物料温度为45-55℃，真空压力为-0.1MPa，进料速度为15L/h，料带传送速度为25cm/min；干燥后将干浸膏粉碎过40-80目，制备出众生丸干膏粉，综合不同批次或产地的药材重复实验，众生丸干膏粉约160-200g；之后取众生丸干膏粉、胆南星粉、人工牛黄与辅料混合均匀后采用压制法工艺制备新众生丸：首先将胆南星药材，粗碎过8～12mm筛网成粗粒，进行灭菌，灭菌温度110℃±5℃，灭菌时间40-60分钟；在温度70～80℃范围内沸腾干燥至水分≤8％，粉碎成细粉；取1/2胆南星粉与乳糖交叉用整粒机在50Hz下过0.8mm号筛，然后与剩余的胆南星粉、人工牛黄、羟丙纤维素、微晶纤维素一起上料至混合机中，预混合20分钟后将物料放出；取众生丸干膏粉，胆南星粉与乳糖、人工牛黄、羟丙纤维素、微晶纤维素的预混合料，二氧化硅、硬脂酸镁交叉用整粒机在45Hz下过2.5mm号筛后一起上料至混合机中，总混30分钟。之后用高速压丸机制丸，冲模为球形冲，球形冲模大小为7.0-8.0mm，素丸的丸重为0.26-0.35g/丸，调整压力控制素丸的脆碎度在0.3-0.9％、崩解时限在24-34min；所述的新众生丸的配方为：众生丸干膏粉160-200g、胆南星粉30g、人工牛黄20g、羟丙纤维素12.5-50g、微晶纤维素10-37.5g、乳糖10-38.5g、硬脂酸镁1.25-5g、二氧化硅2.5-5g，制成1000丸新众生丸素丸，素丸包糖衣或包薄膜衣0.27-0.42g/丸。

新众生丸的制备方法中，浸膏用真空带式干燥机干燥成干膏粉，改变了原众生丸一直采用的喷雾干燥器喷雾干燥工艺，使新众生丸的主要活性成分比原众生丸平均具有大幅度的提高：秦皮乙素提高178％，咖啡酸提高286％，阿魏酸提高186％，虎杖苷提高30％，黄芩苷提高166％，芍药苷提高41％，哈巴俄苷提高294％。在生产产能上，真空带式干燥机干膏粉为80～100kg/小时，喷雾干燥器机干膏粉为20～25kg/小时，生产能力提高了4倍，生产过程能耗降低50％以上。

新众生丸的制备方法中，采用压制法制丸的成型工艺替代传统塑制法制丸工艺，解决了原制丸工艺存在的缺陷：如工艺步骤多，生产周期长，成本高，效率低；干燥时间长，不利于中药成分的稳定；溶散时限长，不利于溶散吸收；表面凹凸不平，丸重差异大，每次服用生药量不稳定。而新的制丸方法具有以下优点：(1)工艺简单。制丸过程只有混合、压丸两个工序，改变原来塑制法生产工艺需要混合、制丸块、制丸条、分粒、搓圆、热风干燥工序，制丸时间从原来每批生产400万丸的40小时减少到15小时，缩短生产周期，节能减排，降低成本，提高效率。(2)减少干燥工序，可以降低能耗，提高生产效率，原塑制法工艺素丸大，需要长时间干燥，每批干燥时间达20小时以上。(3)缩短了溶散时限。采用压制法生产工艺素丸溶散时限从原来塑制法生产工艺60-80分钟左右缩短到约30分钟，有利于产品溶散吸收。(4)减少了丸重差异，使众生丸的质量更加可控，更好保证每次服用生药量的稳定性。重量差异众生丸每次的最大服用量1份进行称重控制，压制法制丸工艺生产的素丸大小均匀，改变了原来塑制法生产丸重差异较大的缺陷，这样可使众生丸的质量更加可控，更好保证每次服用生药量的稳定性。

原众生丸质量标准包括3个理化显色反应和人工牛黄的薄层鉴别，未制订含量测定项，在目前对药品质量与安全要求越来越高的环境下，此质量标准已经不能满足产品质量监控的要求。为此，新众生丸质量标准删除了不具有代表性的理化鉴别反应，采用薄层色谱方法鉴别人工牛黄、紫花地丁、赤芍、虎杖等药材，增加了高效液相色谱法对黄芩中黄芩苷的含量测定，使标准更加完善，产品质量更加稳定可控。

鉴于众生丸传统生产工艺存在的明显缺陷，本发明众生丸采用真空带式干燥机进行浸膏干燥，浸膏干燥过程温和(物料温度在40-60℃)；加入最适合的辅料及用量与众生丸的干膏粉、胆南星粉、人工牛黄混合均匀后压丸。明显减少了生产过程物料的加热时间及显著降低生产过程加热的温度，新众生丸可使主要成分保留率提升30％或以上，生产过程能耗降低50-80％，生产周期缩短60％以上，最大程度上保留了众生丸制剂中的活性成分，显著提高了众生丸的疗效；压制法成型工艺显著改善了丸剂传统成型工艺的缺点，使制备的众生丸丸型大小均匀，丸间重量差异小，降低了由于服药丸重差异而引起的疗效差异。采用压制法生产工艺生产的新众生丸溶散时限从原来60-80分钟缩短到约30分钟，缩短了溶散时限，有利于产品的溶散吸收。

喷雾干燥器喷雾干燥是用喷雾的方法，使物料成为雾滴分散在热空气中，物料与热空气呈并流、逆流或混流的方式互相接触，使水分迅速蒸发，达到干燥目的。但喷雾干燥热效率低(热效率一般为30-50％)、体积庞大、生产能力低、投资高也是最大缺点。喷雾干燥热空气进口温度逆流操作时为200-300℃，在中药浸膏的干燥过程中易出现粘壁和结块问题，造成粘壁的主要因素是壁温高，粘壁的物料大幅度地降低了活性成分的含量。

真空带式干燥机是一种连续进料、连续出料形式的接触式真空干燥设备，由于物料直接进入高真空度下经过一段时间逐步干燥(通常是30-60分钟)，干燥后所得的颗粒有一定程度的结晶效应，同时从微观结构上看内部有微孔。直接粉碎到所需要的粒径后，颗粒的流动性很好，可以直接压片或者灌胶囊，同时由于颗粒具有微观的疏松结构，速溶性极好。而且颗粒的外观好，对于速溶(冲剂)产品，可以大大提升产品的档次。真空带式干燥机适用于粘性高、易结团、热塑性、热敏性的物料，不适于或者无法采用喷雾干燥的物料采用带式真空干燥机是最佳选择。而且，可以直接将浓缩浸膏送入带式真空干燥机进行干燥无须添加任何辅料，这样可以减少最终产品的服药量，提高产品档次。产品在整个干燥过程中，处于真空、封闭环境，干燥过程温和(产品温度40-60℃)，可以最大限度的得到高质量的最终产品。

本发明新众生丸(编号：R2)与原众生丸(编号：R1)进行抗炎、镇痛、抗菌等实验比较，结果表明：在抗炎作用方面：R2各剂量组均较R1各剂量组明显减轻二甲苯致炎小鼠的耳肿胀度，提示众生丸对二甲苯引起小鼠耳肿胀的抗炎抑制作用，R2有优于R1的趋势；对减少醋酸所致的小鼠腹腔内炎性物质的渗出，抑制毛细血管通透性增高的抗炎作用，R2有优于R1的趋势。在镇痛试验方面：对延长醋酸致痛小鼠的潜伏期，减少其扭体次数的镇痛作用，R2有优于R1的趋势；对增加热板致痛雌鼠的痛阈提高百分率的镇痛作用，R2有优于R1的趋势。在体外抑菌试验方面：众生丸对金黄色葡萄球菌、化脓性链球杆菌、伤寒杆菌、绿脓杆菌等常见病原菌有明显抑制作用，R2的抗菌效应优于R1。在抗炎、镇痛、抗菌等试验中，新众生丸(R2)总体表现优于原众生丸(R1)。另外，从众生丸相关活性成分含量测定结果也证实，新众生丸能更大程度上保留活性成分，对提高众生丸疗效具有积极的效果。

本发明采用高效液相色谱法测定新旧两种众生丸中活性成分的含量，并结合药效学试验比较新旧两种众生丸的产品实验结果，证明新众生丸具有显著的改变作用。

下面将通过试验数据证明本发明具有的积极效果。

第一部分：新众生丸与原众生丸的制剂活性成分含量测定比较

采用高效液相色谱法对原众生丸20批次样品和新众生丸14批次样品进行检验，比较两种众生丸活性成分的含量。测定结果见表1、表2。

1.众生丸中秦皮乙素、咖啡酸、阿魏酸、虎杖苷、黄芩苷的含量测定：

照高效液相色谱法(中华人民共和国药典2005年版一部附录VID)测定。

色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇为流动相A，以0.5％甲酸为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱；检测波长为双波长：在323nm处测定咖啡酸、阿魏酸、虎杖苷、黄芩苷；在353nm处测定秦皮乙素；理论塔板数按黄芩苷峰计算应不低于5000。

对照品溶液的制备精密称取黄芩苷、虎杖苷、秦皮乙素、咖啡酸、阿魏酸适量，加流动相使溶解并稀释，制成以下浓度：黄芩苷、秦皮乙素分别为0.05mg/ml，虎杖苷为0.03mg/ml，咖啡酸、阿魏酸为0.01mg/ml混合对照品溶液。

供试品溶液制备取本品10丸，研细，精密称取1.0g，精密加入70％乙醇25ml，称定重量，超声处理30分钟，冷却，再称定重量，用70％乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精取续滤液10ml，水浴蒸干，加流动相溶解并稀释至刻度，滤过，取续滤液，即得。

测定法精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得，见图1、图2。

2.众生丸中芍药苷、哈巴俄苷的含量测定：

照高效液相色谱法(中华人民共和国药典2005年版一部附录VID)测定。

色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇为流动相A，以水为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱；检测波长为双波长：在230nm处测定芍药苷；在280nm处测定哈巴俄苷；理论塔板数按黄芩苷峰计算应不低于5000。

对照品溶液的制备精密称取芍药苷、哈巴俄苷适量，加70％甲醇使溶解并稀释，制成以下浓度：芍药苷为0.02mg/ml，哈巴俄苷为0.01mg/ml的混合对照品溶液。

供试品溶液制备取本品10丸，研细，精密称取1.0g，精密加入70％甲醇25ml，称定重量，超声处理30分钟，冷却，再称定重量，用70％乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

测定法精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得，见图3、图4。

表1原众生丸制剂各成分检验结果(单位：mg/丸)

批号	秦皮乙素	咖啡酸	阿魏酸	虎杖苷	黄芩苷	芍药苷	哈巴俄苷
								R1-1	0.145	0.016	未检出	0.114	0.895	0.435	0.019
R1-2	0.256	0.013	未检出	0.243	0.71	0.42	0.014
								R1-3	0.347	0.022	0.009	0.407	1.028	0.924	0.035
R1-4	0.141	0.009	未检出	0.159	0.446	0.359	未检出
								R1-5	0.345	0.02	0.005	0.325	1.006	0.507	0.033
R1-6	0.219	0.011	未检出	0.205	0.435	1.025	0.014
								R1-7	0.366	0.027	0.012	0.261	1.368	0.806	0.033
R1-8	0.415	0.023	未检出	0.204	1.193	0.995	0.025
								R1-9	0.329	0.024	0.008	0.283	0.868	0.641	0.045
R1-10	0.419	0.024	0.01	0.212	1.176	0.614	0.041
								R1-11	0.33	0.019	0.006	0.166	0.939	0.555	0.042

R1-12	0.255	0.019	0.013	0.287	0.707	0.479	0.005
								R1-13	0.31	0.011	0.013	0.338	0.688	0.579	0.007
R1-14	0.245	0.019	0.012	0.346	0.59	0.588	0.011
								R1-15	0.276	0.01	0.013	0.383	0.937	0.751	0.003
R1-16	0.275	0.022	0.012	0.307	0.938	0.735	0.013
								R1-17	0.427	0.04	0.017	0.201	1.214	0.968	0.013
R1-18	0.131	0.019	未检出	0.217	0.711	0.597	0.003
								R1-19	0.13	0.044	0.008	0.211	0.665	0.921	0.007
R1-20	0.124	0.043	0.007	0.217	0.679	0.996	0.006
								平均	0.274	0.022	0.007	0.254	0.860	0.695	0.018

表2新众生丸制剂各成分检验结果(单位：mg/丸)

批号	秦皮乙素	咖啡酸	阿魏酸	虎杖苷	黄芩苷	芍药苷	哈巴俄苷
								R2-1	0.9204	0.0728	0.0234	0.2002	1.7446	0.6578	0.091
R2-2	0.9126	0.0754	0.0338	0.3666	2.197	0.8242	0.104
								R2-3	0.8996	0.0728	0.0286	0.4446	2.2282	0.7228	0.0936
R2-4	0.3406	0.0494	0.0156	0.2392	2.1658	1.2792	0.0312
								R2-5	0.6344	0.0832	0.0182	0.2886	2.3738	1.0686	0.0234
R2-6	0.7436	0.0936	0.0156	0.3432	2.327	1.0894	0.039
								R2-7	0.7514	0.0962	0.0156	0.3484	2.3686	1.0582	0.0806
R2-8	0.7358	0.0988	0.0156	0.3068	2.2386	0.9984	0.0832
								R2-9	0.741	0.1014	0.0156	0.312	2.2828	0.988	0.091
R2-10	0.8502	0.0884	0.0182	0.429	2.3452	1.027	0.0754
								R2-11	0.8424	0.0702	0.0182	0.2314	2.5116	0.897	0.0572

R2-12	0.8242	0.0884	0.0182	0.4784	2.6806	0.9152	0.065
								R2-13	0.6734	0.0884	0.0182	0.3458	2.4856	1.1518	0.091
R2-14	0.8086	0.104	0.0208	0.299	2.0592	1.0504	0.0676
								平均	0.763	0.085	0.020	0.331	2.286	0.981	0.071

实验分析数据说明：新众生丸制剂能更大程度上保留活性成分，对提高众生丸疗效具有积极的效果。新众生丸比原众生丸的主要活性成分提高幅度为：秦皮乙素178％，咖啡酸286％，阿魏酸186％，虎杖苷30％，黄芩苷166％，芍药苷41％，哈巴俄苷294％。

第二部分：新众生丸与原众生丸的药效学研究

试验由广州中医药大学中药学院药理教研室开展，样品选择原众生丸(编号：R1)和新众生丸(编号：R2)产品各1批，选择2批产品丸重相同或相近，结果平均丸重0.36g/丸，将2批众生丸分别粉碎成细粉，编号为：众生丸药粉R1和众生丸药粉R2。

1、抗炎作用

1.1试验材料

1.1.1药物与试剂

众生丸药粉(R1、R2两种样品)，吲哚美辛肠溶片：广东华南药业集团有限公司，批号070807。冰醋酸：广州化学试剂厂，批号20080702-2。

1.1.2试验剂量

众生丸药粉(每0.36g粉相当于1丸)，成人临床每日3次，一次6丸，即每天最大用量为6.48g药粉/d，以成人体重60kg计，平均用药剂量为0.108g药粉/kg/d。本试验小鼠低、中、高三个剂量组，分别设为1.08、2.16、4.32g药粉/kg，上述剂量为临床用药剂量的10、20、40倍(按体重计算)。吲哚美辛肠溶片，成人临床一次25～50mg，一日2～3次，即每天最大用量为150mg，以成人体重60kg计，平均用药剂量为2.5mg/kg/d。本试验小鼠设25mg/kg剂量组，上述剂量为临床用药剂量的20倍(按体重计算)。

1.1.3动物

SPF级KM小鼠，18-22g，雌雄各半，由广州中医药大学实验动物中心提供。合格证号；0062582

1.1.4仪器

SHIMADZU分析天平，广州湘仪机电设备有限公司，型号AUY120。分光光度计：尤尼柯(上海)仪器有限公司，型号UNIC07200。

1.2方法与结果

1.2.1对二甲苯所致耳肿胀的抗炎作用

取KM小鼠80只，雌雄各半，随机分为8组，空白组，阳性对照组，众生丸R1样品低(1.08g药粉/kg)、中(2.16g药粉/kg)、高(4.32g药粉/kg)剂量组；众生丸R2样品低(1.08g药粉/kg)、中(2.16g药粉/kg)、高(4.32g药粉/kg)剂量组。阳性对照组按吲哚美辛(25mg/kg)灌胃，空白组给予等容积蒸馏水，每d给药1次，连续5d。于末次给药后30min将二甲苯0.02ml滴于小鼠右耳，左耳不涂作对照，20min后将小鼠颈部脱臼处死，用打孔器分别在左右耳同一部位打下圆耳片，称重，求左右耳片重量之差作为肿胀度，进行t检验，比较组间差异。结果见表3。

表3众生丸两种样品对二甲苯所致耳肿胀的影响

注：与空白组比较*p＜0.05，**p＜0.01

表3结果表明：与空白组相比，众生丸R2样品各剂量组均可明显减轻二甲苯致炎小鼠的耳肿胀度，与空白组相比均具有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01)，虽无明显作用，但具有减轻耳肿胀度的趋势(P＞0.05)。提示众生丸两种受试物均具有抑制二甲苯引起耳重增加的抗炎消肿作用。

同时对两种受试药物实验结果进行比较发现，与众生丸R1样品中剂量组相比，R2样品中剂量组虽无明显作用，但具有减轻耳肿胀度的趋势(P＞0.05)。且R2样品各剂量组均较R1样品各剂量组明显减轻二甲苯致炎小鼠的耳肿胀度。提示对二甲苯引起小鼠耳肿胀的抗炎抑制作用，众生丸R2样品有优于R1样品的趋势。

1.2.2对毛细血管通透性的抗炎作用

取KM小鼠80只，雌雄各半，随机分为8组，空白组，阳性对照组，众生丸R1样品低(1.08g药粉/kg)、中(2.16g药粉/kg)、高(4.32g药粉/kg)剂量组；众生丸R2样品低(1.08g药粉/kg)、中(2.16g药粉/kg)、高(4.32g药粉/kg)剂量组。阳性对照组按吲哚美辛(25mg/kg)灌胃，空白组给予等容积蒸馏水，每d给药1次，连续5d。末次给药后30min尾静脉注射1％伊文思兰生理盐水液10ml.kg^-1，立即腹腔注射0.6％醋酸0.2ml/只，20min后处死小鼠，剪开腹腔，用5ml生理盐水冲洗腹腔数次收集洗涤液，1000r/min，离心5分钟，用720分光光度计在590nm处比色测OD值，进行t检验，比较组间差异。结果见表4。

表4众生丸两种样品对毛细血管通透性的影响

注：与空白组比较*p＜0.05，**p＜0.01

表4结果表明：与空白组相比，众生丸R1样品的高、低剂量组及R2样品各剂量组活肺通片高剂量组能显著减少小鼠腹腔清洗液OD值(P＜0.01)，中剂量组均能明显减少小鼠腹腔清洗液OD值，即均可明显减少醋酸所致的小鼠腹腔内炎性物质的渗出，抑制毛细血管通透性的增高，与空白组相比有统计学差异(P＜0.05或0.01)，R1样品中剂量组虽无明显差异性，但具有减少小鼠腹腔清洗液OD值趋势(P＞0.05)。吲哚美辛亦可显著减少小鼠腹腔清洗液OD值(P＜0.01)。提示众生丸两种样品均具有抑制醋酸引起小鼠腹腔毛细血管通透性的抗炎消肿作用。

同时对两种受试药物实验结果进行比较发现，与众生丸R1样品中剂量组相比，R2样品中剂量组虽无明显作用，但具有抑制毛细血管通透性的增高的趋势(P＞0.05)，且R2样品各剂量组均较R1样品各剂量组明显降低腹腔清洗液OD值。提示对减少醋酸所致的小鼠腹腔内炎性物质的渗出，抑制毛细血管通透性增高的抗炎作用，众生丸R2样品有优于R1样品的趋势。

2、镇痛试验

2.1试验材料

2.1.1药物与试剂

众生丸药粉(R1、R2两种样品)，罗通定片：四川康福来药业集团有限公司，批号：090602，，冰醋酸：广州化学试剂厂，批号20080702-2。

2.1.2试验剂量

众生丸药粉(每0.36g粉相当于1丸)，成人临床每日3次，一次6丸，即每天最大用量为6.48g药粉/d，以成人体重60kg计，平均用药剂量为0.108g药粉/kg/d。本试验小鼠低、中、高三个剂量组，分别设为1.08、2.16、4.32g药粉/kg，上述剂量为临床用药剂量的10、20、40倍(按体重计算)。罗通定片，成人临床一次60～90mg，一日2～3次，即每天最大用量为180mg，以成人体重60kg计，平均用药剂量为3mg/kg/d。本试验小鼠设60mg/kg剂量组，上述剂量为临床用药剂量的20倍(按体重计算)。

2.1.3动物

SPF级KM小鼠，18～22g，由广州中医药大学实验动物中心提供。合格证号；0062582。

1.1.4仪器

SHIMADZU分析天平，广州湘仪机电设备有限公司，型号AUY120。热板仪。

1.2方法与结果

1.2.1对醋酸致痛小鼠扭体反应的影响

取KM小鼠80只，雌雄各半，随机分为8组，空白组，阳性对照组，众生丸R1样品低(1.08g药粉/kg)、中(2.16g药粉/kg)、高(4.32g药粉/kg)剂量组；众生丸R2样品低(1.08g药粉/kg)、中(2.16g药粉/kg)、高(4.32g药粉/kg)剂量组。阳性对照组按罗通定(60mg/kg)灌胃，空白组给予等容积蒸馏水，每d给药1次，连续5d。末次给药30min后，各鼠均腹腔注射0.6％醋酸0.2ml/只，观察各组小鼠出现扭体反应的时间及25min内出现扭体反应的次数，进行t检验，比较各组间差异，结果见表5。

表5众生丸两种样品对醋酸致痛小鼠的影响(

n＝10)

注：与空白组比较*p＜0.05，**p＜0.01

表5结果表明，与空白对照组比较，罗通定组、众生丸R2样品高、低剂量组均能显著延长醋酸致痛小鼠的潜伏期(P＜0.05或0.01)；罗通定组、众生丸R1样品高、中剂量组、R2样品各剂量组均能显著减少25min内扭体次数(P＜0.05或0.01)；其余给药组虽无明显差异，但具有延长醋酸致痛小鼠的潜伏期，减少25min内扭体次数的趋势(P＞0.05)。提示各实验组均有较好的镇痛作用。

同时对两种受试药物实验结果进行比较发现，与众生丸R1样品中剂量组相比，R2样品中剂量组虽无明显作用，但具有延长醋酸致痛小鼠的潜伏期，减少25min内扭体次数的趋势(P＞0.05)，且R2样品各剂量组对醋酸致痛的镇痛效果均较R1样品各剂量组好。提示对延长醋酸致痛小鼠的潜伏期，减少其扭体次数的镇痛作用，众生丸R2样品有优于R1样品的趋势。

1.2.2对小鼠热板法痛阈值的影响

调节恒温装置使其温度控制在(55±0.5)℃，热板预热30min。测小鼠正常痛阈值：取18～22g雌性小鼠数只，每次一只放在热板上，记录其开始舔后足所需时间(秒)为此鼠的正常痛阈值(小于5秒或大于60秒或中跳跃者不用)。测量其痛阈值为其给药前痛阈值。将合格雌鼠随机分为8组，空白组，阳性对照组，众生丸R1样品低(1.08g药粉/kg)、中(2.16g药粉/kg)、高(4.32g药粉/kg)剂量组；众生丸R2样品低(1.08g药粉/kg)、中(2.16g药粉/kg)、高(4.32g药粉/kg)剂量组。阳性对照组按罗通定(60mg/kg)灌胃给药，空白组给予等容积蒸馏水，每d给药1次，连续5d。末次给药30min后，分别测量小鼠痛阈值。若60秒无反应，其痛阈值按60秒计算，按下式计算痛阈提高百分率。实验数据采用单因素方差分析比较各组间差异，结果见表6。

痛阈提高百分率(％)＝(药后痛阈-药前痛阈)÷药前痛阈×100％

表6众生丸两种样品对小鼠热板法痛阈值的影响(

n＝10)

注：与空白组比较*p＜0.05，**p＜0.01

表6结果表明，与空白对照组比较，罗通定组、众生丸R1样品高剂量组、R2样品高、中剂量组均能显著抑制热板所致小鼠的疼痛，提示各实验组均有较好的镇痛作用(P＜0.05或0.01)。其余给药组虽无明显差异，但均具有增加其痛阈提高百分率的趋势(P＞0.05)，提示各实验组均对热板致痛雌鼠有较好的镇痛作用。

同时对两种受试药物实验结果进行比较发现，与众生丸R1样品中剂量组相比，R2样品中剂量组虽无明显作用，但具有具有增加其痛阈提高百分率的趋势(P＞0.05)，且R2样品各剂量组对热板致痛雌鼠的镇痛效果均较R1样品各剂量组好。提示对增加热板致痛雌鼠的痛阈提高百分率的镇痛作用，众生丸R2样品有优于R1样品的趋势。

从上述抗炎、镇痛实验结果表明：总体表现为众生丸R2优于众生丸R1。

3、众生丸抗菌作用实验(体外抑菌试验)

本实验菌种选用九种有代表性的，主要是呼吸道道感染的常见病原菌和条件致病菌，包括金黄色葡萄球菌(26112-5)、乙型溶血性链球菌(32210)、大肠埃希氏菌(44113-5)、绿脓假单胞菌(10211)、白色念珠菌(98001)、甲型溶血性链球菌(32209)、白喉棒状杆菌(38101)、肺炎链球菌(31001)、卡他球菌。卡他球菌由细菌检验室从咽喉标本分离，白色念珠菌为广州市药品检定所惠赠，其余菌种均来自北京中国药品生物制品检定所。实验时，用肉膏汤将众生丸R1和R2配制成每5.5ml含生药量5.5g，即1g/ml，流通蒸气灭菌。对链球菌的试验尚需在灭菌药液中添加1％葡萄糖，对肺炎球菌和白喉杆菌则另加10％兔血清，对白色念珠菌的试验应用沙氏培养液稀释药液。空白对照为不含药物的培养基。每排药液的各个浓度管及空白对照管分别加入1∶2000的试验菌液(8小时培养物)0.1ml，37℃培养24小时观察结果。判定最小抑菌浓度(MIC)，MIC是指完全抑制试验菌种生长所含的最小药物浓度。结果见表7。

表7众生丸的抑菌作用[猪猪猫.CN5]

注：空白对照管的试验菌种生长正常。

表7结果表明，众生丸对所试菌种，主要引起呼吸道感染的常见致病菌和条件致病菌均有一定的抗菌作用，对各菌的最小抑菌浓度(MIC)介于0.025g/ml～0.4g/ml之间，其中对大肠杆菌没有抑制作用。本次实验结果表明，众生丸R2的抗菌效应优于众生丸R1。

附图说明

图1为323nm测定黄芩苷(65.9min)、虎杖苷(41.1)、咖啡酸(26.6)、阿魏酸(40.2)；

图2为353nm测定秦皮乙素(25.2min)；

图3为230nm测定芍药苷(5.9min)；

图4为280nm测定哈巴俄苷(20.4min)。

具体实施方式

下面将描述本发明的几个实施例，但本发明的内容完全不局限于此。

实施例1(新众生丸的制备)：

众生丸干膏粉160g、胆南星粉30g、人工牛黄20g、羟丙纤维素50g、微晶纤维素37.5g、乳糖38.5g、二氧化硅4g、硬脂酸镁5g，制成1000丸。

取1/2胆南星粉与乳糖交叉用整粒机过0.8mm号筛(50Hz)，然后与剩余的胆南星粉、人工牛黄、羟丙纤维素、微晶纤维素一起上料至混合机中，预混合20分钟后将物料放出，[U6]取众生丸干膏粉，胆南星粉与乳糖、人工牛黄、羟丙纤维素、微晶纤维素的预混合料，二氧化硅、硬脂酸镁交叉用整粒机过2.5mm号筛(45Hz)后一起上料至混合机中，总混30分钟。用高速压丸机制丸，球形冲模大小为7.9mm，素丸的丸重为0.345g/丸，素丸包薄膜衣，薄膜包衣材料为胃溶型薄膜包衣粉，薄膜衣丸重0.36g/丸。

实施例2(新众生丸的制备)：

众生丸干膏粉200g、胆南星30g、人工牛黄20g、羟丙纤维素40g、微晶纤维素25g、乳糖25g、二氧化硅5g、硬脂酸镁5g，制成1000丸。

取1/2胆南星粉与乳糖交叉用整粒机过0.8mm号筛(50Hz)，然后与剩余的胆南星粉、人工牛黄、羟丙纤维素、微晶纤维素一起上料至混合机中，预混合20分钟后将物料放出，取众生丸干膏粉，胆南星粉与乳糖、人工牛黄、羟丙纤维素、微晶纤维素的预混合料，二氧化硅、硬脂酸镁交叉用整粒机过2.5mm号筛(45Hz)后一起上料至混合机中，总混30分钟。用高速压丸机制丸，球形冲模大小为7.9mm，素丸的丸重为0.35g/丸，素丸包薄膜衣，薄膜包衣材料为胃溶型薄膜包衣粉，薄膜衣丸重0.36g/丸。

实施例3(新众生丸的制备)：

众生丸干膏粉160g、胆南星粉30g、人工牛黄20g、羟丙纤维素14.5g、微晶纤维素18.5g、乳糖18.5g、硬脂酸镁1.25g、二氧化硅2.5g，制成1000丸。

取1/2胆南星粉与乳糖交叉用整粒机过0.8mm号筛(50Hz)，然后与剩余的胆南星粉、人工牛黄、羟丙纤维素、微晶纤维素一起上料至混合机中，预混合20分钟后将物料放出，取众生丸干膏粉，胆南星粉与乳糖、人工牛黄、羟丙纤维素、微晶纤维素的预混合料，二氧化硅、硬脂酸镁交叉用整粒机过2.5mm号筛(45Hz)后一起上料至混合机中，总混30分钟。用高速压丸机制丸，球形冲模大小为7.2mm，素丸的丸重为0.265g/丸，素丸包糖衣，包糖衣的材料由蔗糖、明胶、滑石粉、柠檬黄、亮蓝等组成，糖衣丸重0.36-0.42g/丸；素丸包薄膜衣，薄膜包衣材料为胃溶型薄膜包衣粉，薄膜衣丸重0.27-0.28g/丸。

实施例4(新众生丸的制备)：

众生丸干膏粉180g、胆南星粉30g、人工牛黄20g、羟丙纤维素12.5g、微晶纤维素10g、乳糖10g、硬脂酸镁1.5g、二氧化硅3g，制成1000丸。

取1/2胆南星粉与乳糖交叉用整粒机过0.8mm号筛(50Hz)，然后与剩余的胆南星粉、人工牛黄、羟丙纤维素、微晶纤维素一起上料至混合机中，预混合20分钟后将物料放出，取众生丸干膏粉，胆南星粉与乳糖、人工牛黄、羟丙纤维素、微晶纤维素的预混合料，二氧化硅、硬脂酸镁交叉用整粒机过2.5mm号筛(45Hz)后一起上料至混合机中，总混30分钟。用高速压丸机制丸，球形冲模大小为7.2mm，素丸的丸重为0.267g/丸，素丸包糖衣，包糖衣的材料由蔗糖、明胶、滑石粉、柠檬黄、亮蓝等组成，糖衣丸重0.36-0.42g/丸；素丸包薄膜衣，薄膜包衣材料为胃溶型薄膜包衣粉，薄膜衣丸重0.27-0.28g/丸。

实施例5(新众生丸的干膏粉制备)：

制备1000丸的新众生丸，由蒲公英330g、紫花地丁330g、黄芩100g、岗梅130g、赤芍100g、天花粉100g、玄参100g、当归100g、防风100g、柴胡100g、皂角刺130g、白芷30g、虎杖130g、夏枯草65g、板蓝根130g等15味药材，采用传统的多功能提取罐水煎煮2次，第一次加入5倍药材量的水煮沸提取2小时(控制微沸状态，蒸汽压力控制在0.04～0.1Mpa，温度控制在98～101℃)，第二次加入4倍药材量的煮沸提取1小时(控制微沸状态，蒸汽压力控制在0.04～0.1Mpa，温度控制在98～101℃)，合并两次提取液。将两次提取液过滤后，用三效浓缩器浓缩成浸膏，浓缩时温度控制在60～85℃，蒸汽压力控制在0.04～0.12Mpa，真空度控制在0.02～0.09Mpa，浓缩至相对密度为1.25～1.35(60～70℃测)的浸膏。将浸膏用真空带式干燥机干燥成干膏粉，加热控制物料温度在45～55℃，真空压力-0.1MPa，进料速度为15L/h，料带传送速度为25cm/min，干膏粉碎过60目，制备得众生丸干膏粉。

通过不同批次或产地的药材重复实验，制备1000丸的新众生丸，众生丸干膏粉在160～200g范围内。

实施例6

新众生丸胆南星粉的制备方法为：取胆南星药材，粗碎过10mm筛网成粗粒，用中成药灭菌柜进行灭菌，灭菌温度110℃±5℃，灭菌时间60分钟；在温度70～80℃范围内沸腾干燥至水分≤8％，粉碎成细粉。

实施例7(新众生丸的质量控制方法)：

【性状】本品为糖衣浓缩丸或薄膜衣浓缩丸，除去包衣后，显棕色至棕黑色；味苦、微辛。

【鉴别】(1)取本品3丸，研碎，加甲醇20ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加热水20ml使溶解，滤过，滤液用乙酸乙酯振摇提取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取紫花地丁对照药材0.5g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸(5∶3∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

(2)取本品20丸，研碎，加甲醇50ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，用水饱和正丁醇振摇提取2次，每次20ml，合并正丁醇提取液，蒸干，残渣加甲醇5ml使溶解，加在中性氧化铝柱(100～200目，4g，内径为10mm)上，以甲醇40ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取芍药苷对照品，加甲醇制成每1ml含4mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(40∶5∶10∶0.2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，热风吹至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

(3)取本品10丸，研碎，加甲醇20ml，超声处理15分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加硫酸溶液(15→100)10ml，水浴加热30分钟，放冷，用三氯甲烷振摇提取2次，每次10ml，合并三氯甲烷液，蒸干，残渣加三氯甲烷1ml使溶解，作为供试品溶液。另取虎杖对照药材0.3g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取供试品溶液4μl、对照药材溶液2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(30～60℃)-甲酸乙酯-甲酸(15∶5∶1)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

(4)取本品20丸，研碎，加三氯甲烷25ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取胆酸对照品、猪去氧胆酸对照品，分别加乙醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正已烷-乙酸乙酯-醋酸-甲醇(20∶25∶2∶3)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃烘约10分钟，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的两个荧光斑点。

【检查】应符合丸剂项下有关的各项规定(中国药典2005年版一部附录I A)。

【含量测定】照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VI D)测定。

色谱条件与系统适用性试验  以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水-磷酸(43∶57∶0.2)为流动相；检测波长为280nm。理论板数按黄芩苷峰计算应不低于3000。

对照品溶液的制备  取黄芩苷对照品适量，精密称定，加流动相制成每1ml含50μg的溶液，即得。

供试品溶液的制备  取本品10丸，糖衣丸除去糖衣，精密称定，研细，取约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70％乙醇25ml，称定重量，超声处理(功率250W，频率40KHz)30分钟，放冷，再称定重量，用70％乙醇补足减失的重量，摇匀，离心(转速为每分钟5000转)10分钟，精密量取上清液10ml，水浴蒸干，残渣加流动相溶解并转移至10ml量瓶中，加流动相至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

测定法  分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

本品含黄芩以黄芩苷(C₂₁H₁₈O₁₁)计，每丸不得少于1.0mg。

Claims (2)

1.一种中药丸剂的制备方法，包括如下步骤：

(1)一种中药丸剂的制备方法，其特征在于所述的中药丸剂由蒲公英、紫花地丁、黄芩、岗梅、赤芍、天花粉、玄参、当归、防风、柴胡、皂角刺、白芷、虎杖、夏枯草、板蓝根、胆南星、人工牛黄、羟丙纤维素、微晶纤维素、二氧化硅和硬脂酸镁组成；

其中15味中药材提取制成干膏粉，配方为：

    蒲公英  330g    紫花地丁 330g    黄芩     100g

    岗梅    130g    赤芍     100g    天花粉   100g

    玄参    100g    当归     100g    防风     100g

    柴胡    100g    皂角刺   130g    白芷      30g

    虎杖    130g    夏枯草    65g    板蓝根   130g

上述15味中药材提取制成1000丸干膏粉；

得到干膏粉  160-200g     和 胆南星粉       30g

   人工牛黄        20g          羟丙纤维素    12.5-50g

   微晶纤维素    10-37.5g       乳糖          10-38.5g

   硬脂酸镁      1.25-5g        二氧化硅      2.5-5g

制成1000丸中药丸剂素丸；

(2)干膏粉的制备方法：①将中药丸剂中15味中药材用多功能提取罐水煎煮二次，第一次加入3～10倍药材量的水，提取2小时，第二次加入2～6倍药材量的水，提取1小时，两次提取均控制微沸状态，蒸汽压力控制在0.04～0.1Mpa，温度控制在98～101℃，之后，合并两次提取液；②将提取液过滤后，在温度为60～85℃，蒸汽压力为0.04～0.12Mpa，真空度为0.02～0.09Mpa的条件下，将提取液浓缩成相对密度为1.25～1.35的浸膏；③将浸膏进行真空带式干燥成干浸膏；④将干浸膏粉碎过40-80目，制备出干膏粉；

⑶取胆南星药材，在温度为110℃±5℃时，灭菌时间40-60分钟；在温度为70～80℃范围内干燥至水分≤8%，之后粉碎成细粉；

⑷取1/2胆南星细粉与乳糖交叉过筛，然后与剩余的胆南星粉以及人工牛黄、羟丙纤维素、微晶纤维素一起上料至混合机中，预混合20分钟；然后取干膏粉与上述混合物以及二氧化硅、硬脂酸镁交叉过筛后一起上料至混合机中，总混30分钟；

⑸用高速压丸机在10-15KN条件下制丸；

⑹中药丸剂质量标准采用薄层色谱方法鉴别人工牛黄、紫花地丁、赤芍、虎杖等药材，增加了高效液相色谱法对黄芩苷的含量测定。

2.如权利要求1所述的中药丸剂的制备方法，其特征在于所述的真空带式干燥是在压力为-0.07Mpa～-0.12Mpa，物料温度为40-80℃，进料速度为10-20L/h，料带传送速度为20-30cm/min的条件下进行的。

3.如权利要求2所述的中药丸剂的制备方法，其特征在于所述的真空干燥是在压力为-0.1Mpa，物料温度为45-55℃，进料速度为15L/h，料带传送速度为25cm/min的条件下进行的。

4.如权利要求1所述的中药丸剂的制备方法，其特征在于所述的中药丸剂配方为：

    干膏粉    160g         胆南星粉        30g

    人工牛黄        20g          羟丙纤维素      14.5g

    微晶纤维素      18.5g        乳糖            18.5g

    硬脂酸镁        1.25g        二氧化硅        2.5g

制成1000丸中药丸剂素丸。

5.如权利要求1所述的中药丸剂的制备方法，其特征在于所述的胆南星药材是经粗碎后过8-12mm筛网的粗粒。

6.如权利要求1所述的中药丸剂的制备方法，其特征在于所述的胆南星粉与乳糖交叉用整粒机在50Hz下过0.8mm号筛；干膏粉与胆南星粉、乳糖、人工牛黄、羟丙纤维素、微晶纤维素的预混合物料，二氧化硅及硬脂酸镁交叉用整粒机在45Hz下过2.5mm号筛。

7.如权利要求1所述的中药丸剂的制备方法，其特征在于在压丸时冲模为球形冲，大小为7.0-8.0mm，素丸重为0.26-0.35g/丸，控制素丸的脆碎度在0.3-0.9％、崩解时限在24-34min。

8.如权利要求1、7所述的中药丸剂的制备方法，其特征在于所述的丸重为0.27-0.42g/丸，素丸包糖衣或包薄膜衣。

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