CN101878019B - 含有具有基序gx1x2g、px1x2p或者px1x2k的四肽的个人护理和化妆品组合物 - Google Patents

Abstract

本发明涉及局部个人护理以及皮肤护理组合物，其包含：a)安全有效量的四肽，选自具有基序GX¹X²G、PX¹X²P或者PX¹X²K的四肽、其衍生物及其混合物的组；b)安全有效量的至少一种额外的活性成分，其选自羟基酸、自由基清除剂、UV吸收剂、维生素、抗衰老活性物、屏障脂质、脱皮活性物、类视黄质、抗痤疮活性物、美黑活性物、抗橘皮组织活性物、抗炎活性物、抗微生物活性物、抗真菌活性物、皮肤光亮剂、皮肤活力剂、皮肤愈合剂、保湿活性物、及其混合物；以及c)皮肤可接受的载体。

Description

含有具有基序GX1X2G、PX1X2P或者PX1X2K的四肽的个人护理和化妆品组合物

本申请涉及个人护理和化妆品组合物，其含有具有基序GX¹X²G、PX¹X²P或者PX¹X²K的特定四肽，其可用于处理衰老可见迹象包括皱纹、萎缩纹(stretch marks)以及黑眼圈。

发明背景

衰老的最初可见迹象通常在皮肤上发现：细纹和皱纹、年龄斑、干燥、红斑、下垂和松弛的皮肤可属于皮肤老化的最初迹象。头发的卷曲、无光泽和脱发也是熟知的症状。许多皮肤或头发护理产品可供消费者用于处理或者预防由各种外源应激而引起的这些迹象和状况，所述外源应激包括例如机械应激、大气污染、日光暴露(光老化)，以及接触家用和其它化学品。这当然也包括进一步的自然应激如饮食、痤疮和一般衰老。

皮肤持久地暴露于这些刺激，从而导致皮肤老化和损害的可见迹象，如干燥和皱纹产生、皮肤变薄及其它组织学变化。随着皮肤老化，产生蛋白质合成降低，蛋白酶解增加，湿度普遍性降低并且皮肤屏障、结缔组织以及内聚性的普遍损坏。

许多化合物已被阐明可用于改善皮肤外观和生理状况，包括减少细纹、皱纹、干燥及其他与老化或者光损伤皮肤相关的症状。在全球市场上可获得许多组合物。但是改良总是有需要的。

类视黄质(retinoids)、α和β-羟基酸、类黄酮和异黄酮已被提出可用于对抗痤疮和皱纹，加快细胞更新以及矫正激素失衡。这些疗法通常伴随着问题，如不稳定性(类视黄质、类黄酮类)、刺激性(类视黄质、羟基酸类)以及潜在的副作用(植物黄酮类(phytoflavones))。

国际专利申请No.WO 00/43,417揭示了某些肽及衍生物作为化妆品或者药物组合物在调节皮肤受损的免疫功能和炎症中的应用。所述肽和衍生物的长度为2-5个氨基酸。据报道这些肽及衍生物通过使IL-6和IL-8的组织浓度降低至接近在年轻组织中观测到的水平而起作用。举例的肽包括N-棕榈酰-Pro-Arg、N-棕榈酰-Thr-Lys-Pro-Arg、Arg-Lys-Pro-Arg和N-棕榈酰-Gly-Gln-Pro-Arg。虽然可以根据WO 00/43,417所述组合多种肽，但是相关文献并未明确鉴别三肽和四肽的特定共有基序。也可参见美国专利No.6,620,419和6,492,326揭示了化妆品和个人护理产品中例如掺入某些四肽。

目前市场上也有商品名为EYELISS的用于治疗眼袋的化妆品。这个Sederma的产品包括N-棕榈酰-Gly-Gln-Pro-Arg与二肽Val-Trp的混合物。这个二肽没有明显的胶原刺激活性，并且这种组合在该性质方面与单独使用四肽获得的水平相比未呈现出任何增强。也见Daicel Chem，Ind.Ltd.的JP07/324,097和JP 08/311,098以及Kawamoto Takafumi et al.，ChemicalAbstracts，Vol.124，No.19，6 May 1996(Abstract No.261765)所述。

关于在化妆品组合物中使用氨基酸作为保湿化合物的更多的例子在美国专利US 4,772,591、US 3,849,576、US 5,135,913、US 4,859,653和US4,760,051以及在欧洲专利EP-B 0 070 048中有所描述。具体的维生素和氨基酸被单独描述或者以多种组合描述。据报道其可透过皮肤从而保持湿度并促进皮肤的稳态以及细胞更新。

在美国专利US 5,254,331中，描述了另一种皮肤护理产品，其含有蛋白质-氨基酸-维生素-核苷酸-复合物。这个复合物由丙二醇、血清蛋白、烟酰胺、水、磷酸腺苷和Arg组成。所述混合物应可促进表皮细胞的再生以及持久性增强皮肤的含湿量。

最近在皮肤护理产品中使用氨基酸的另一实例见美国专利US6,974,799 B2所述，其中某些四肽与GHK-三肽的组合对人类皮肤老化的可见迹象可具有有益作用。

然而，最近在氨基酸化合物用于处理皮肤和头发衰老领域中进行的研究仍然未提出与其它四肽相比确实可改善皮肤的特定四肽。

因此，本发明的目的是在众多四肽中鉴定出用于个人护理和皮肤护理产品的活性成分，其可以减轻所述头发和皮肤老化的一或多个症状。除此之外，有鉴于上述现有技术已知的相关产品，所述个人护理和皮肤护理组合物应易于生产、配制和处理。

令人惊讶地是，发现包含具有特定基序GX¹X²G、PX¹X²P或PX¹X²K的特定四肽的化妆品组合物显示出生物活性并且可以增强细纹复原，减少皮肤的萎缩纹、炎症和微小损伤，从而可帮助减少衰老可见迹象。进一步地，本发明组合物可以展现出使所处理过的皮肤恢复弹性的令人意外的有益作用。

因此，本发明的主题是局部个人护理和皮肤护理组合物，其包含：

a)安全且有效量的四肽，选自具有基序GX¹X²G、PX¹X²P或者PX¹X²K的四肽、其衍生物及其混合物的组；

b)安全且有效量的至少一种额外的活性成分，其选自由羟基酸、自由基清除剂、UV吸收剂、维生素、屏障脂质、脱皮(desquamatory)活性物、类视黄质、抗痤疮活性物、美黑(tanning)活性物、抗橘皮组织(anti-cellulite)活性物、抗炎活性物、抗微生物活性物、抗真菌活性物、皮肤光亮剂、皮肤活力剂、皮肤愈合剂、保湿活性物、及其混合物组成的组；以及

c)皮肤可接受的载体。

一方面，本发明涉及局部组合物，其含有具有上述基序GX¹X²G、PX¹X²P或者PX¹X²K的四肽，与至少一种额外的皮肤护理活性成分或者包括皮肤可接受载体的额外组分一起组合配制。

本发明的某些方面还涉及使用这些组合物改善人皮肤状态和外观以及预防和/或减少衰老可见迹象的方法。这些方法一般包括在需要时以最适宜该目的的量和频率给皮肤局部应用所述组合物。本发明还包括了预防、延缓皮肤病发作或者治疗皮肤病症的方法。

本文引用的所有出版物在此均以其全部内容援引加入。

本发明的化妆品组合物含有特定的四肽、特别是具有基序GX¹X²G、PX¹X²P或者PX¹X²K之一的四肽及其衍生物和混合物。除非上下文或者有明确的陈述特别指出，则这些将在本文中被统称做“四肽”。在这些组合物中优选使用一或多种额外的成分，包括一种或多种皮肤可接受的载体。

根据本发明，“四肽”是在其结构中包含四个氨基酸连续序列的化合物。这些在本文中将使用传统的单字母或者三字母惯用缩写法在括号内从左(N-末端)向右(C-末端)示出。在这个命名法中，例如G(GIy)是甘氨酸，K(Lys)是赖氨酸，P(Pro)是脯氨酸。

如本文所用的术语“氨基酸”包括及涵盖所有天然产生的氨基酸，如果是具有旋光性的则是D-或L-构型二者，以及已知非天然的、合成的和经修饰的氨基酸，如高半胱氨酸、鸟氨酸、正亮氨酸和p-缬氨酸。非天然氨基酸的列表可见于The Peptides，Vol.5(1983)，Academic Press，Chapter VI，by D.C.Roberts and F.Vellaccio。本发明的肽中的氨基酸可以其天然L-构型、非天然D-构型或者作为外消旋混合物形式存在。

根据本发明，衍生物也被认为涵盖在术语“四肽”中。衍生物包括具有本文所述氨基酸基序GX¹X²G、PX¹X²P或者PX¹X²K之一的取代和重排四肽的衍生物。这些衍生物包括例如酰基衍生物，其是具有一或多个直链酰基链或者支链酰基链、长或短酰基链、饱和或不饱和的取代的四肽；由羟基、氨基、氨酰基、硫酸或者硫醚基团取代的四肽或者具有1-29碳原子的未被取代的四肽。N-酰基-衍生物包括可以衍生自如下的那些酰基：乙酸、癸酸、月桂酸、肉豆蔻酸、辛酸、棕榈酸、硬脂酸、山嵛酸、亚油酸、亚麻酸、硫辛酸、油酸、异硬脂酸、反油酸(elaidoic acid)、2-乙基己酸(2-ethylhexaneic acid)、椰子油脂肪酸、牛油脂肪酸、硬化牛油脂肪酸、棕榈仁油脂肪酸、羊毛脂脂肪酸等。酰基基团的优选实例包括乙酰基、棕榈酰基、反油酸酰基(elaidoyl group)、肉豆蔻酰基、生物素酰基以及辛酰基。这些可以是取代或者未取代的。如果被取代，其优选由羟基或者含硫基团取代，所述含硫基团例如但非限于SO₃H、SH或者S--S。

如本文所使用的术语“皮肤可接受的”是指所述的组合物或者成分适用于与人皮肤接触而不会有毒性、不相容性、不稳定性、过敏反应等风险。“皮肤老化迹象”包括但不限于所有外在视觉和触觉可查知的表现以及由于皮肤老化导致的任何其它宏观或微观影响。这些迹象可以由内在因素或者外在因素诱导或引起，例如随时间进行造成的老化和/或环境损伤。这些迹象可缘自如下过程，包括但不局限于纹理不连续性(discontinuities)的发展，如皱纹和粗深皱纹(coarse deep wrinkles)，皮肤细纹(skin lines)，裂隙，肿块(bump)，毛孔粗大(例如与附属结构如汗腺管、皮脂腺或者毛囊相关的)，或者不平或粗糙，皮肤弹性丧失(功能性皮肤弹性蛋白丧失和/或失活)，松弛(包括眼部和下颊浮肿)，皮肤硬度(firmness)丧失，皮肤密闭性(tightness)丧失，皮肤变形后回弹丧失，变色(包括眼下黑眼圈)，产生斑点，色素脱失(shallowness)，色素沉着过多皮肤区域如老年斑和雀斑，角化病，异常分化，过度角化，弹性组织变性，胶原断裂，以及角质层、真皮、表皮、皮肤脉管系统(如毛细管扩张或者蜘蛛痣(spider vessels))和皮下组织、特别是靠近皮肤的那些组织中的其它组织学改变。

本文所用的如“皮肤老化”、“皮肤老化迹象”、“局部应用”等所有术语均按照其在开发、检测和销售化妆品及个人护理品领域一般且广泛应用的含义来使用。

根据本发明，术语“化妆品组合物”或者更简单的“组合物”是指这样的配制品，其可用于化妆目的、卫生保健目的或作为输送一种或多种药物成分的基质。这些配制品也可以同时用于两或多个这些目的。例如，含药的去屑香波具有药理学性质，并且用作个人护理用品以清洁头发。这些组合物包括最小量的四肽、其类似物或衍生物。这些组合物也可以包括额外的成分如皮肤可接受的载体。

如本文所用，“化妆品”包括但不限于口红、睫毛膏、胭脂粉底、腮红、眼线膏、唇线笔、润唇膏、面粉或者底粉、遮光剂(sunscreens)和阻光剂(sunblocks)、指甲油、摩丝、喷雾剂、发胶、指甲护理剂(nail conditioner)：其形式可以是乳剂、洗液、凝胶、软膏、乳状液、胶体、溶液、悬浮液、粉盒(compact)、固体、笔、喷洒配制品、刷涂配制品等。个人护理用品包括但不限于沐浴及淋浴凝胶体、香波、护理剂、营养发水(cream rinses)、染发剂及涂色制品、免洗护发素、遮光剂和阻光剂、唇膏、皮肤护理剂、头发喷雾剂、肥皂、洗澡巾、磨砂膏(exfoliants)、收敛剂、脱毛剂和永久性鬈发溶液、防头屑配制品、防汗和止汗组合物、剃须用品、剃须前用品和剃须后用品、保湿剂、止汗香体剂(deoderants)、冷霜、除臭剂、清洁剂、皮肤凝胶、洗液(rinses)，其可是固体、粉末、液体、乳膏、凝胶、软膏、洗液、乳状液、胶体、溶液、悬浮液或者其它形式。根据本发明的药物制备品包括但不限于应用于皮肤病学目的的载体，包括局部和经皮应用的药物活性成分。这些物质可以是凝胶、贴剂、乳膏、鼻喷雾剂、软膏、洗液、乳状液、胶体、溶液、悬浮液、粉末等。

根据一个优选的实施方案，本发明组合物的四肽是四肽GX¹X²G、PX¹X²P或者PX¹X²K，其中X¹和X²是不同的氨基酸或者均是P。

此外，本发明的四肽优选选自具有基序GX¹X²G、PX¹X²P或者PX¹X²K的四肽的组，其中X¹和X²是不同的氨基酸或者均是P，X¹和X²选自由E、G、P和K组成的组。

本发明的四肽优选用量为占所述组合物重量的大约1ppm(0.0001％w/w，在本文也称作“重量百分比”，“重量％”或者简单以“重量”描述)到大约1000ppm(0.1％w/w)，优选大约2ppm到大约250ppm(0.025％w/w)，最优选为大约10ppm到大约100ppm。

优选的实施方案包括局部组合物，其中四肽选自GEPG(SEQ ID NO：1)、GPPG(SEQ ID NO：2)、GEKG(SEQ ID NO：3)、PGPP(SEQ ID NO：4)和/或PKEK(SEQ ID NO：5)的组。

更优选的实施方案包括N-酰基-GEPG(SEQ ID NO：6)肽，N-酰基-GPPG(SEQ ID NO：7)肽，N-酰基-GEKG(SEQ ID NO：8)肽，N-酰基-PGPP(SEQ ID NO：9)肽和/或N-酰基-PKEK(SEQ ID NO：10)肽，最优选的N-酰基是N-棕榈酰、N-月桂酰或者N-肉豆蔻酰。

出乎意料地发现相比于单独或组合使用由其它小肽生产的产物而言，组合所选择的四肽、以及其类似物和衍生物可提供明显的优势。本发明的四肽的特定基序被认为具有增强胶原、纤连蛋白、弹性蛋白和/或透明质酸的合成或者减少这些分子降解的共同能力。因此，其具有增强经处理的皮肤的外观和/或结构的活性。与现有技术中使用随机选择的四肽相比，本发明的特定四肽被认为由于其基序GX¹X²G、PX¹X²P或者PX¹X²K而在激活皮肤重要化合物的合成方面显示出更好结果，并且可以刺激细胞免疫系统防御。此外，对于四肽PKEK(SEQ ID NO：5)，实验显示出抑制促炎细胞因子的UV-诱导的表达。因此，所述四肽可帮助舒缓(calm)UV-照射的皮肤。

在本发明的另一优选实施方案中，所述局部组合物还包含GAGP(SEQID NO：11)四肽。

令人惊奇地发现具有特定基序GX¹X²G、PX¹X²P或者PX¹X²K的一种或多种四肽与四肽GAGP的混合物作为化妆品组合物中抗衰老活性成分相较于相应未加入四肽GAGP的具有特定基序GX¹X²G、PX¹X²P或者PX¹X²K的一种或多种四肽的混合物显示出甚至更好的结果。

除特定四肽、其类似物和/或衍生物之外，本发明的组合物还包含至少一种其它的各种额外成分，所述额外成分可以是活性的、功能性的，常规性的应用于化妆品、个人护理品中或其他方面。当然，具体额外成分的选择取决于具体的应用与产品配制。并且，“活性”成分与“无活性”成分之间的区别是人工的，取决于具体应用和产品类型。在一种应用或者产品中是“活性”成分的物质在另一应用或产品中可以是“功能性”的，反之亦然。特定成分可能在一种配方中提供实质性(substantivity)，在另一配方中辅助经皮应用，而在第三种配方中仅提供适当粘度。其中哪个是具功能性的，哪个是具活性的需要探讨。但是不管结果如何，所研究的材料将可作为本发明的额外成分。

因此，本发明的组合物包含至少一种额外成分，其为该组合物的目标提供一些益处。这类额外的成分可包括一种或多种物质，例如但不限于清洁剂、护发剂、护肤剂、头发造型剂、抗头屑剂、头发生长促进剂、香水、遮光和/或阻光化合物、色素、保湿剂、成膜剂、染发剂、化妆剂、去污剂、药物、增稠剂、乳化剂、湿润剂、软化剂、防腐剂、除臭剂、皮肤可接受的载体以及表面活性剂。

在一个优选的实施方案中，其中组合物将与人角质组织接触，额外成分应适用于角质组织，即当其掺入所述组合物中时应适用于与人角质组织(头发、指甲、皮肤、唇)接触，而在可靠的医学判断范围内并无过度的毒性、不相容性、不稳定性、过敏反应等。CTFA化妆成分手册(Cosmetic IngredientHandbook)，Ninth Edition(2002)描述了常用于皮肤护理行业的许多种非限制性化妆和药物成分，这些成分适合用作本发明组合物中的额外成分。这些额外成分类别的非限制性例子包括：研磨剂，吸收剂，美容成分如香料，色素，色彩/着色剂，香精油，皮肤触感剂(skin sensates)，收敛剂，抗痤疮剂，防结块剂，防沫剂，抗微生物剂，抗氧化剂，粘合剂，生物添加剂，缓冲剂，膨胀剂，螯合剂，化学添加剂，着色剂，化妆用收敛剂，化妆用杀生物药剂，变性剂，药物收敛剂，外用止痛剂，成膜剂或材料如聚合物，可有助于所述组合物的成膜性质和实质性，遮光剂(opacifying agents)，pH调节剂，推进剂，还原剂，多价螯合剂，皮肤漂白剂和光亮剂(如氢醌、曲酸、抗坏血酸、抗坏血酸磷酸酯镁、抗坏血酸葡糖胺)，皮肤护理剂(如湿润剂，包括混杂的(miscellaneous)和包藏的(occlusive))，皮肤平滑和/或愈合剂(如泛醇及衍生物(如乙基泛醇)，真芦荟，泛酸及其衍生物，尿囊素，没药醇，甘草酸二钾，皮肤处理剂，增稠剂以及维生素及其衍生物。

本发明的组合物通常含有至少一种额外的成分。本发明的组合物也可含有多种额外的成分。

然而，在本发明的任何实施方案中，本发明中可用的额外成分可以通过其提供的益处或其假定的作用模式而加以分类。不过，应了解到本发明中的所述可用的额外成分在一些情况下可提供一种以上的益处或者通过一种以上的作用模式运作。因此，本发明的分类只是出于便利而不是要将所述额外成分限定在该特定应用中或所列举的应用中。

脱皮活性物(Desquamation Actives)

在本发明的组合物中可加入安全且有效量的脱皮活性物，优选其占所述组合物重量的约0.1％至约10％，更优选为约0.2％至约5％，再优选为约0.5％至约4％。脱皮活性物增强本发明中的对皮肤外观的益处。例如，脱皮活性物倾向于改善皮肤质地(如平滑性)。适用于本发明的一种脱皮系统含有作为活性成分的至少一种阴离子多氨基酸基质、至少一种多糖及任选一种或多种局部应用的渗透保护剂的组合，这个系统在Blasko-Begoihn et al的美国专利No.20060275238中有描述。

酶、酶抑制剂以及酶激活剂(辅酶)

本发明的组合物可含有安全且有效量的一种或多种酶、酶抑制剂或者酶激活剂(辅酶)。酶的例子有脂肪酶、蛋白酶、过氧化氢酶、超氧化物歧化酶、淀粉酶、葡糖醛酸糖苷酶、脂加氧酶、过氧化物酶特别是谷胱甘肽过氧化物酶或者乳糖过氧化物酶，神经酰胺酶，透明质酸酶。所有这些酶均可以通过提取或者发酵生物技术过程获得。酶抑制剂的例子包括胰蛋白酶抑制剂、Bowmann Birk抑制剂、胰凝乳蛋白酶抑制剂、有或无鞣质(tannins)的植物提取物、类黄酮、1，2-二苯乙烯、羟基1，2-二苯乙烯、可抑制酶活性的槲皮素。酶激活剂和辅酶包括辅酶A、辅酶Q10(泛醌)、甘草素啶(glycyrrhizidine)、黄连素、5，7-二羟黄酮(chrysine)。

植物提取物和海产品提取物

本发明的组合物可含有安全且有效量的得自植物或者海产品的一或多种提取物。这些提取物可以通过标准提取过程获得，可以粉末、糊状物、香脂、油或者液体(即溶液)的形式使用。这些植物和海产品提取物具有多种熟知的可用于化妆用途的属性，且可以方便地与本专利中特定四肽的功用相结合：使皮肤平滑和抗炎，酶抑制，保湿，抗皱纹，激素替代，抗氧化，润肤，清澈肤色(seboregulating)，抗脱发，促进头发生长，抗橘皮组织，愈合皮肤，皮肤美白，脂解，美黑，抗微生物等。

抗痤疮活性物

本发明的组合物可含有安全且有效量的一种或多种抗痤疮活性物。可用的抗痤疮活性物的例子包括鞘氨醇碱类(sphingoidbases)，如植物鞘氨醇或者四乙酰植物鞘氨醇，类视黄质，如异维甲酸，间苯二酚，硫，水杨酸，过氧苯甲酰，红霉素，锌等。

抗皱纹活性物/羟基酸

本发明的组合物可进一步含有安全且有效量的一种或多种抗皱纹活性物。适用于本发明组合物中的抗皱纹活性物的例子包括含硫的D和L氨基酸及其衍生物和盐，特别是N-乙酰衍生物，其一个优选实例是N-乙酰-DL-甲硫氨酸；硫醇，如乙硫醇；羟基酸(例如α-羟基酸如乳酸和羟基乙酸，或者β-羟基酸如水杨酸和水杨酸衍生物如十二酰胺；1，2-二苯乙烯；羟基1，2-二苯乙烯；透明质酸；类黄酮；氧杂蒽酮；β-葡聚糖；硬葡聚糖；三萜酸(例如阿江榄仁酸，熊果酸)；姜黄油；西门木炔酸(xymenynic acid)；肌酸；鞘脂类如水杨酰基-植物鞘氨醇，植物鞘氨醇，鞘氨醇，二氢(神经)鞘氨醇(sphinganine)以及其衍生物；植酸；硫辛酸；溶血磷脂酸；皮肤剥脱剂(如酚等)；维生素B₃化合物和类视黄质，其增强本发明中针对角质组织外观的益处，尤其是调节角质组织状况，如皮肤状况。

维生素类化合物和抗氧化剂

本发明的组合物可含有安全且有效量的维生素或者抗氧化剂化合物。生育酚及其衍生物、抗坏血酸及其衍生物、烟酰胺及其衍生物、α-硫辛酸以及泛醇均是特别优选的维生素和抗氧化剂化合物。并且，维生素B₃化合物在调节皮肤状况时尤为有用。当维生素B₃化合物存在于此发明的组合物中时，所述组合物优选含有占所述组合物重量的约0.01％至约50％、更优选约0.1％至约10％、更优选约0.5％至约10％、再优选约1％至约5％、更进一步优选约2％至约5％的维生素B₃化合物。合适的维生素B₃化合物的例子为本领域熟知且有多种商业来源，如Sigma Chemical Company(St.Louis，Mo.)；ICN Biomedicals，Inc.(Irvin，Calif.)和Aldrich Chemical Company(Milwaukee，Wis.)。

此外，其它维生素化合物如维生素E是特别优选地用于本发明的化妆品组合物中。

维生素化合物可作为基本上纯的材料被包含在内，或者是作为通过合适的物理和/或化学分离方法得自天然来源(如植物)的提取物。

类视黄质

本发明的组合物也可以含有类视黄质。如本文所用，“类视黄质”包括具有维生素A在皮肤中的生物学活性的所有天然和/或合成的维生素A的类似物或者视黄醇样化合物以及这些化合物的几何异构体和立体异构体。所述类视黄质优选视黄醇、视黄醇酯(如视黄醇的C₂-C₂₂烷基酯，包括棕榈酸视黄酯、乙酸视黄酯，丙酸视黄酯)、视黄醛，和/或视黄酸(包括全反式视黄酸和/或13-顺式视黄酸)，除视黄酸外更优选类视黄质。这些化合物为本领域熟知，且有多种商业来源，如Sigma Chemical Company(St.Louis，Mo.)和Boerhinger Mannheim(Indianapolis，Ind.)。其它合适的类视黄质有生育酚基视黄酸酯[视黄酸(反式或顺式)的生育酚酯，阿达帕林(adapalene){6-[3-(1-金刚烷基)-4-甲氧苯基]-2萘酸}，及他扎罗汀(tazarotene)(乙基6-[2-(4，4-二甲基硫代色满-6-基)-乙炔基]烟酸酯)。

优选的类视黄质是视黄醇、棕榈酸视黄酯、乙酸视黄酯、丙酸视黄酯，视黄醛及其组合。

所述类视黄质可作为基本上纯的材料被包含在内，或者是作为通过合适的物理和/或化学分离方法得自天然来源(如植物)的提取物。所述类视黄质优选是基本上(substantially)纯的，更优选是实质上(essentially)纯的。

本发明的组合物可含有安全且有效量的类视黄质，从而所得组合物对于调节角质组织状况、优选调节皮肤可见和/或可触及的不连续性、更优选用于调节皮肤老化迹象、甚至更优选用于调节与皮肤老化相关的皮肤质地中可见和/或可触及的不连续性是安全且有效的。所述组合物优选含有约0.005％至或约2％、更优选为约0.01％至或约2％的类视黄质。视黄醇优选用量为或约0.01％至或约0.15％；视黄醇酯优选用量为或约0.01％至或约2％(如约1％)；视黄酸优选用量为约或0.01％至或约0.25％；生育酚基视黄酸酯、阿达帕林和他扎罗汀优选用量为或约0.01％至或约2％。

在本发明的组合物即含有类视黄质又含有维生素B₃化合物时，所述类视黄质优选以上述量使用，所述维生素B₃化合物优选用量为或约0.1％至或约10％，更优选为或约2％至或约5％。

本发明的组合物可包括安全且有效量的抗氧化剂/自由基清除剂或者氧化剂/还原剂。针对可导致角质层脱皮(scaling)增加或者质地改变的UV照射以及针对可导致皮肤损害的其它环境因素，所述抗氧化剂/自由基清除剂或者氧化剂/还原剂在提供防护时尤其有用。这些化合物在使头发变干及其它化妆应用中也有用途。

在本发明的组合物中可以加入安全且有效量的抗氧化剂/自由基清除剂或者氧化剂/还原剂，优选占所述组合物的约0.1％至约10％，更优选为约1％至约5％。

可以使用抗氧化剂/自由基清除剂如抗坏血酸(维生素C)及其盐、脂肪酸的抗坏血酸酯、抗坏血酸衍生物(如抗坏血酸磷酸酯镁、抗坏血酸磷酸酯钠、抗坏血酸山梨酸酯(ascorbyl sorbate))，生育酚(维生素E)，生育酚山梨酸酯，生育酚乙酸酯，生育酚的其它酯，丁羟安息香酸及其盐，过氧化物包括过氧化氢，过硼酸盐，巯基乙酸盐，过硫酸盐，6-羟基-2，5，7，8-四甲基色满-2-羧酸(作为商品名TROLOX.RTM可由商业途径获得)，没食子酸及其烷基酯，尤其是没食子酸丙酯，尿酸及其盐和烷基酯，山梨酸及其盐，硫辛酸，胺类(如N，N-二乙基羟胺，氨基胍)，巯基化合物(如谷胱甘肽)，二羟基反丁烯二酸及其盐，甜菜碱氧脯氨酸盐(lycine pidolate)，精氨酸氧脯氨酸盐(argininepidolate)，去甲二氢愈创木酸，生物类黄酮，姜黄素，赖氨酸，1-甲硫氨酸，脯氨酸，超氧化物歧化酶，水飞蓟素，茶提取物，葡萄皮/种子提取物，黑色素以及迷迭香提取物。优选的抗氧化剂/自由基清除剂选自生育酚山梨酸酯及生育酚的其它酯，更优选生育酚乙酸酯。

类黄酮

本发明的组合物可任选含有类黄酮化合物。适用于本发明的类黄酮是黄酮酮类，其选自未取代的黄酮酮类、单取代的黄酮酮类及其混合物；查耳酮类，选自未取代的查耳酮、单取代的查耳酮、双取代的查耳酮、三取代的查耳酮及其混合物；黄酮类，选自未取代的黄酮类、单取代的黄酮类、双取代的黄酮类及其混合物；一种或多种异黄酮类；香豆素类，选自未取代的香豆素类、单取代的香豆素类、双取代的香豆素类及其混合物；色酮类，选自未取代的色酮类、单取代的色酮类、双取代的色酮类及其混合物；一种或多种双香豆素；一种或多种二氢色原酮；一种或多种色原烷醇；其异构体(如顺式/反式异构体)；以及其混合物。如本文所用术语“取代”是指类黄酮的一个或多个氢原子已经独立地由羟基、C1-C8烷基、C1-C4烷氧基、O-糖苷等或者这些取代基的混合物置换的类黄酮。

合适的类黄酮的例子包括但不限于未取代的黄烷酮、一羟基黄烷酮(如2′-羟基黄烷酮、6-羟基黄烷酮、7-羟基黄烷酮等)、单烷氧基黄烷酮(如5-甲氧基黄烷酮、6-甲氧基黄烷酮、7-甲氧基黄烷酮、4′-甲氧基黄烷酮等)、未取代的查耳酮(尤其是未取代的反式查耳酮)、一羟基查耳酮(如2′-羟基查耳酮、4′-羟基查耳酮等)、二羟基查耳酮(如2′，4-二羟基查耳酮、2′，4′-二羟基查耳酮、2，2′-二羟基查耳酮、2′，3-二羟基查耳酮、2′，5′-二羟基查耳酮等)及三羟基查耳酮(如2′，3′，4′-三羟基查耳酮、4，2′，4′-三羟基查耳酮、2，2′，4′-三羟基查耳酮等)、未取代的黄酮、7，2′-二羟基黄酮、3′，4′-二羟基萘黄酮、4′-羟基黄酮、5，6-苯并黄酮及7，8-苯并黄酮、未取代的异黄酮、黄豆苷元(7，4′-二羟基异黄酮)、5，7-二羟基-4′-甲氧基异黄酮、大豆异黄酮(从大豆中提取的混合物)、未取代的香豆素、4-羟基香豆素、7-羟基香豆素、6-羟基-4-甲基香豆素、未取代的色酮、3-甲酰基色酮、3-甲酰基-6-异丙基色酮、未取代的双香豆素、未取代的二氢色原酮、未取代的色原烷醇，以及其混合物。

它们可以是合成的材料或者作为提取物得自天然来源(如植物)。所述天然来源的材料也可以被进一步衍生(例如在从天然来源中提取之后制备的酯或醚衍生物)。可用于本发明中的类黄酮化合物可商购自许多来源，如Indofine Chemical Company，Inc.(Somerville，N.J.)，Steraloids，Inc.(Wilton，N.H.)以及Aldrich Chemical Company，Inc.(Milwaukee，Wis.)。

也可以使用上述类黄酮化合物的混合物。

本文所述类黄酮化合物优选以约0.01％至约20％，更优选约0.1％至约10％和再优选约0.5％至约5％的浓度存在于本发明中。

抗炎剂

本发明的组合物中可以加入安全且有效量的抗炎剂，优选占所述组合物的约0.1％至约10％，更优选约0.5％至约5％。所述抗炎剂增强本发明的皮肤表观益处，如此类试剂有助于更均一且更合意的皮肤色泽或颜色。所述组合物中抗炎剂的确切量将取决于所用的特定抗炎剂，因为此类试剂的效力变化大。

抗炎剂可以分为类固醇和非类固醇试剂。可用于本发明组合物中的具体类固醇和非类固醇抗炎剂包括但不限于没药醇、尿囊素、植烷三醇(phytantriol)、辅酶Q10、甘草提取物、甘草素啶和艾地苯醌(idebenone)。

也可以使用这些抗炎剂的混合物及这些试剂的皮肤可接受的盐和酯。抗橘皮组织剂

本发明的组合物也可含有安全且有效量的抗橘皮组织剂。适宜的抗橘皮组织剂可包括但不限于黄嘌呤类化合物如咖啡因、茶碱、可可碱和氨茶碱。

美黑(tanning)活性物

本发明的组合物可含有美黑活性物。当其存在时，优选所述组合物含有占组合物重量大约0.1％至约20％、更优选约2％至约7％以及再优选约3％至约6％的二羟基丙酮或者赤藓酮糖作为人工美黑活性物。

二羟基丙酮也称作DHA或者1，3-二羟基-2-丙酮，其是一种白色至灰白色的晶体粉末。

此化合物可以单体和二聚体的混合物存在，其中固体晶体状态以二聚体为主。在加热或者熔化时，二聚体分解产生单体。这种二聚体形式向单体形式的转变也在水溶液中发生。也已知二羟基丙酮在酸性pH值更稳定。见The Merck Index，Tenth Edition，entry 3167，p.463(1983)以及″Dihydroxyacetone for Cosmetics，″E.Merck Technical Bulletin，03-304 110，319897，180 588所述。

皮肤光亮剂

本发明的组合物可含有皮肤光亮剂。当使用时，所述组合物优选含有占组合物重量约0.1％至约10％、更优选约0.2％至约5％、再优选约0.5％至约2％的皮肤光亮剂。合适的皮肤光亮剂包括本领域已知的那些，包括曲酸、熊果苷、肌酸酐、姜黄油、四氢姜黄素类、抗坏血酸及其衍生物、植物鞘氨醇、N-乙酰植物鞘氨醇、磷酸胆碱鞘氨醇和氢醌。

皮肤舒缓和皮肤愈合活性物

本发明的组合物可包含皮肤舒缓或者皮肤愈合活性物。适用于本发明的皮肤舒缓或者皮肤愈合活性物包括泛酸衍生物，包括泛醇、右泛醇、乙基泛醇、真芦荟、尿囊素、没药醇和甘草酸二钾。在本发明组合物中可以加入安全且有效量的皮肤舒缓或者皮肤愈合活性物，优选占所形成的组合物重量的约0.1％至约30％，更优选约0.5％至约20％，再优选约0.5％至约10％。

抗微生物和抗真菌活性物

本发明的组合物可含有抗微生物或者抗真菌活性物。此类活性物能破坏微生物、防止微生物发育或者防止微生物的致病作用。可以在本发明组合物中加入安全且有效量的抗微生物或者抗真菌活性物，优选为约0.001％至约10％，更优选为约0.01％至约5％，再优选为大约0.05％至约2％。

抗微生物和抗真菌活性物的例子包括β-内酰胺药物、胍盐化合物、喹諾酮药物、环丙沙星、诺氟沙星、四环素、红霉素、阿米卡星、2，4，4′-三氯-2′-羟基二苯醚、3，4，4′-trichlorobanilide、苯氧乙醇、苯氧丙醇、苯氧异丙醇、多西环素、卷曲霉素、氯己定、N-辛基乳酰胺、金霉素、土霉素、克林霉素、乙胺丁醇、羟乙磺酸己脒定、甲硝唑、喷他脒、庆大霉素、卡那霉素、林可霉素、甲烯土霉素、乌洛托品、米诺环素、新霉素、奈替米星、巴龙霉素、链霉素、妥布霉素、咪康唑、盐酸四环素、红霉素、红霉素锌、依托红霉素、硬脂酸红霉素、硫酸阿米卡星、盐酸多西环素、硫酸卷曲霉素、葡萄糖酸氯己定、盐酸氯己定、盐酸金霉素、盐酸土霉素、盐酸克林霉素、盐酸乙胺丁醇、盐酸甲硝唑、盐酸喷他脒、硫酸庆大霉素、硫酸卡那霉素、盐酸林可霉素、盐酸甲烯土霉素、马尿酸乌洛托品、扁桃酸乌洛托品、盐酸米诺环素、硫酸新霉素、硫酸奈替米星、硫酸巴龙霉素、硫酸链霉素、硫酸妥布霉素、盐酸咪康唑、酮康唑、盐酸金刚烷胺(amanfadinehydrochloride)、硫酸金刚烷胺、羟甲辛吡酮、对氯间二甲酚、制霉菌素、托萘酯、吡硫翁锌以及克霉唑。

可用于本发明中的活性物的优选例子包括选自水杨酸、过氧化苯甲酰、3-羟基安息香酸、羟基乙酸、乳酸、4-羟基安息香酸、乙酰水杨酸、2-羟基丁酸、2-羟基戊酸、2-羟基己酸、顺式视黄酸，反式视黄酸、视黄醇、植酸、N-乙酰基-L-半胱氨酸、硫辛酸，壬二酸、花生四烯酸、过氧化苯甲酰、四环素、布洛芬、萘普生、氢化可的松、对乙酰氨基酚、间苯二酚、苯氧基乙醇、苯氧基丙醇、苯氧基异丙醇、2，4，4′-三氯-2′-羟基二苯醚、3，4，4′-三氯碳酰苯胺、羟甲辛吡酮、盐酸利多卡因、克霉唑、咪康唑、酮康唑、硫酸新霉素，以及其混合物的那些。

遮光活性物与UV吸收物

暴露于紫外光可导致角质层过度脱皮和质地改变。因此，本发明的组合物可以任选包含遮光活性物。如本文所用，“遮光活性物”包括遮光剂(sunscreen agents)和物理性阻光剂(sunblocks)。合适的遮光活性物可以是有机或者无机的。

可用于本发明中的无机遮光剂包括如下金属氧化物：二氧化钛、氧化锌、氧化锆、氧化铁及其混合物。当在本发明中使用时，所述无机遮光剂的用量占所述组合物重量的大约0.1％至约20％，优选约0.5％至约10％，更优选约1％至约5％。

多种常规的有机遮光活性物适用于本发明。Sagarin，et al.，at ChapterVIII，pages 189 et seq.，of Cosmetics Science and Technology(1972)揭示了许多合适的活性物。安全且有效量的有机遮光活性物被应用，其典型地占所述组合物重量的约1％至约20％，更典型为约2％至约10％。精确用量将根据所选的遮光剂以及所需的防日光系数(SPF)而变化。

保湿剂

本发明的组合物可含有保湿剂。许多此类材料均可以应用，其存在水平为所述组合物重量的大约0.01％至约20％，更优选为约0.1％至约10％，再优选为约0.5％至约7％。此类材料包括但不限于氨基酸及其衍生物、肌酸及其衍生物、三甲基甘氨酸、肌醇、焦谷氨酸及其衍生物、牛磺酸、尿素、乳酸、胍及其衍生物以及羟基酸。

屏障脂质

本发明的组合物可含有一种或多种屏障脂质。优选的屏障脂质包括但不限于神经酰胺、植物鞘氨醇、鞘氨醇、假神经酰胺、磷脂、胆固醇、胆固醇酯、游离脂肪酸和溶血磷脂质。

结构剂

本发明的组合物、特别是其中的乳状液可以含有结构剂。在本发明的水包油乳状液中特别优选结构剂。不受理论限制，据信所述结构剂有助于为所述组合物提供流变性，其可有助于所述组合物的稳定性。例如，所述结构剂趋于辅助液态晶体凝胶网结构的形成。所述结构剂也可以起乳化剂或者表面活性剂的功能。本发明优选的组合物含有大约0.1％至约20％、更优选约0.1％至约10％、再优选约0.5％至约9％的一种或多种结构剂。

优选的结构剂是有大约1到大约8的HLB以及有至少约45℃熔点的那些。

本发明优选的结构剂选自硬脂酸、棕榈酸、硬脂酰醇、鲸蜡醇、山萮醇、硬脂酸、棕榈酸，含有平均约1至约5个环氧乙烷单元的硬脂酰醇的聚乙二醇醚，具有平均大约1至约5个环氧乙烷单元的鲸蜡醇的聚乙二醇醚，或者其混合物。本发明更优选的结构剂选自硬脂酰醇、鲸蜡醇、山萮醇、具有平均大约2个环氧乙烷单元的硬脂酰醇的聚乙二醇醚(steareth-2)，具有平均大约2个环氧乙烷单元的鲸蜡醇的聚乙二醇醚，及其混合物。更优选的结构剂选自硬脂酸、棕榈酸、硬脂酰醇、鲸蜡醇、山萮醇、steareth-2以及其混合物。

增稠剂(包括稠化剂和胶凝剂)

本发明的组合物可含有一种或多种增稠剂，优选占所述组合物重量的大约0.1％至约5％，更优选为约0.1％至约4％，再优选为约0.25％至约3％。

增稠剂的非限制性种类包括选自如下的那些：羧酸聚合物、交联的聚丙烯酸酯聚合物、聚丙烯酰胺聚合物、多糖、树胶，以及其它包括主要源自天然来源如黄原胶或纤维素及纤维素衍生物的材料的增稠剂和胶凝剂。

皮肤可接受的载体

本发明的组合物可用于多种化妆品及/或个人护理产品中，例如皮肤护理、头发护理、指甲护理、面部和身体护理以及遮光组合物，如洗液、凝胶、喷雾剂等，洗手液、沐浴组合物、防晒油(suntan oil)、止汗组合物、香水及科隆香水、冷霜、头发遮光组合物、剃须液、除臭剂、局部药物软膏、皮肤保湿剂、洁面剂、洁肤霜、皮肤凝胶、香波、护发素、洗涤剂、家用清洁用品、化妆品、口红产品、睫毛膏以及染发产品。因此，除了上面提到的任何皮肤护理或者头发护理肽及其它活性物之外，本发明所述化妆品组合物通常包含皮肤可接受的载体作为额外成分。所述载体的形式以及组合所述四肽与任何额外的活性物及所述载体的终产物可以是如下任何形式：液体、凝胶、乳液、油包水和水包油，及硅酮乳状液、泡沫以及固体；它们可以是澄清或者是不透明的；且可以以水溶液和非水溶液制品两种形式配制，包括但不限于局部配制品。

为了以任何这些物理形式实现本发明，其它物质、制剂和化合物会有用处但并不是必须的，如调理剂(conditioning agent)、结构剂和增稠剂。这些化合物有时也具有佐剂的作用，而有时还具有额外成分的作用。当与本发明的四肽或四肽混合物及其衍生物相结合时，上述这两种作用都将使这些化合物不能被排除在本发明之外。

所述皮肤可接受的载体的性质、终产物的性质以及制备它们的方法在本文不需要详细描述，在可用的文献中可找到许多实例。

在大多数情况下，所述额外成分将包括单独的皮肤可接受的载体或者其与其它额外成分的组合。额外成分的量的范围可以是所述组合物的大约99.5％至约99.99999％，优选为99.9％至约99.9999％，更优选为约99.99％至约99.999％。简而言之，其是所述组合物的平衡物。如果使用载体(单独的，如水，或者复杂的共溶剂)，其可以补足所述组合物的整体平衡。

所述载体可以是各种形式。例如，乳状液载体包括但不限于水包油、油包水、水包油包水以及硅酮包水包油(oil-in-water-in-silicone)乳状液均可用于本发明中。

优选的载体含有乳状液如水包油乳状液、油包水乳状液以及硅酮包水(water-in-silicone)乳状液。正如本领域技术人员将理解的那样，给定成分将主要分布于或者水相或者油/硅酮相，这取决于所述组合物中该成分的水溶性/可分散性。水包油乳状液是特别优选的。

本发明的乳状液一般含有如上述的溶液以及脂质或者油。脂质和油可以源自动物、植物或者石油，且可以是天然或者合成的。优选的乳状液还含有湿润剂，如甘油。基于所述载体重量，优选乳状液进一步含有大约0.01％至约10％、更优选约0.1％至约5％的乳化剂。乳化剂可以是非离子的、阴离子的或者阳离子的。合适的乳化剂在例如McCutcheon′s Detergents andEmulsifiers，North American Edition，pages 317-324(1986)中揭示。

乳状液

优选的局部载体包括水包油乳状液，其具有连续水相以及分散于其中的疏水性水不溶相(油相)。水包油乳状液将在后文详细描述。

优选的水包油乳状液含有占所述局部载体重量大约25％至约98％、优选约65％至约95％、更优选约70％至约90％的水。

所述油相可包含任何化妆用油或者其混合物。这类油的例子包括但不限于脂肪烃如液体石蜡、鲨烯、凡士林和地蜡，植物油如橄榄油、杏仁油、芝麻油、鳄梨油、蓖麻油、可可油和棕榈油，动物油，如鲨鱼肝油、鳕鱼肝油、鲸鱼油、牛油和乳脂，蜡类如蜂蜡、巴西棕榈蜡、鲸蜡和羊毛脂，脂肪酸如月桂酸、肉豆蔻酸、棕榈酸、硬脂酸、油酸和山嵛酸；脂肪醇如月桂醇、硬脂酰醇、鲸蜡醇和油醇，以及脂族酯如异丙酯、异鲸蜡酯(isocetyl)或十八烷基肉豆蔻酸酯、硬脂酸丁酯、月桂酸己酯、己二酸的二异丙酯或者癸二酸二异丙酯。用于油-醇洗液或者油-醇凝胶或者醇凝胶中的优选的一元醇或者多元醇包括乙醇、异丙醇、丙二醇、己烯乙二醇、甘油和山梨醇。

本发明的局部组合物包括但不限于洗剂和乳剂，可含有皮肤可接受的软化剂。这类组合物优选含有大约1％至约50％的软化剂。如本文所用“软化剂”是指一种用于防止或者减轻干燥以及保护皮肤的材料。许多合适的软化剂是已知的且可用于本发明中。援引加入本文的Sagarin，CosmeticsScience and Technology，2nd Edition，Vol.1，pp.32-43(1972)含有适于用作软化剂材料的许多实例。一种优选的软化剂为甘油。甘油优选用量为或大约0.001％至或约30％，更优选或约0.01％至或约20％，再优选或约0.1％至或约10％，例如5％。

本发明的组合物也可以包含各式各样的杂项成分。一些常用于化妆品和个人护理产业中的合适的杂项成分在The CTFA Cosmetic IngredientHandbook，(9.sup.th Ed.，2002)中有描述，所述文献援引加入本文。这些成分将以常规用量使用。

在本发明一个优选实施方案中，所述局部组合物包含占所述组合物重量的约10ppm至约100ppm的GEPG、GPPG、GEKG、PKEK或者PGPP；皮肤可接受的载体以及至少一种额外的活性成分，所述额外的活性成分选自：

a)占所述组合物重量的约0.05％至约1.5％的肌酸；

b)占所述组合物重量的约0.01％至约1.0％的神经酰胺和/或鞘脂；

c)占所述组合物重量的约0.01％至约0.5％的透明质酸和/或β-葡聚糖；

d)占所述组合物重量的约0.05％至约1.0％的阿江榄仁酸和/或姜黄油。

一般来说，个人护理产品和皮肤护理产品的典型配方在本领域是广泛熟知的，并且可源自例如所述成分的厂商手册。关于可能配方信息的另一来源例如是Kosmetik-Jahrbuch手册(Editor：B.Ziolkowsky，Verlag furChemische Industrie)。

一个典型的油/水乳剂配方实例如下所示：

Ceteareth-25                  2.0％w/w

硬脂酸甘油酯                  4.0％w/w

硬脂酰醇                      2.0％w/w

乙基丙烯酸硬脂酸酯            8.5％w/w

辛酸/癸酸甘油三酯             8.5％w/w

防腐剂(Conservation means)    0.1％w/w

水                        加至100.0％w/w

四肽GX¹X²G、PX¹X²P或者PX¹X²K，0.0001％w/w至0.1％w/w

本发明的所述组合物的物理形式并不重要：乳剂、洗剂、软膏、凝胶、乳状液、分散液、溶液、悬浮液、清洁剂、粉底、无水制品(涂棒(sticks)，特别是唇膏，体油和沐浴油)、淋浴和沐浴凝胶和洗剂(washes)、香波和去头屑洗液、皮肤“精华素”、浆液(serums)、粘附剂或者吸收材料、经皮贴以及粉末，均可掺入所述四肽、其类似物和衍生物以及这类化合物与其它额外成分的组合。

本发明也虑及各种应用。首先，本发明虑及具有基序GX¹X²G、PX¹X²P或者PX¹X²K的特定四肽在化妆品和个人护理产品中的应用以及其在化妆品和个人护理用途中的应用。

特别地，根据本发明生产的产品可用于帮助减轻衰老的可见迹象，其包括所有表面上可见及可触及的表现以及由于皮肤老化所致的其它宏观或微观影响。此类迹象可以由内在或者外在因素诱导或引起。降低这些迹象的应用可以是一般性的或者也可以特异用于降低如下进展的可见迹象：组织结构不连续性、皮肤细纹、裂缝、肿块、毛孔粗大或者皮肤不平或粗糙、皮肤弹性丧失、松弛、皮肤强度丧失、皮肤密闭性丧失、变形后皮肤回弹丧失、变色、产生斑点、皮肤色素脱失、过度色素沉着皮肤区域、角化症、异常分化、角化过度、弹性组织变性、胶原断裂、萎缩纹、黑眼圈等。这些配制品在此类化妆用途方面的应用可以使皮肤产生的持续性改变，但是通常使各种状况的可见表现产生更短暂的减轻。

本发明的组合物可用于防止和/或减轻衰老的可见迹象，以及用于改善人皮肤或者头发的状态及其外观。这包括对皮肤预防性和治疗性的处理。例如，此类方法用来使各个皮肤层和组织变厚，防止皮肤变薄，减轻、防止和/或延迟皱纹的出现，改善皮肤的强度和弹性，使唇、头发和指甲软化和/或平滑，防止和/或解除瘙痒，减少皱纹和细纹，减少萎缩纹和黑眼圈，和/或刺激I型胶原合成。

这种改善皮肤外观的方法包括在皮肤和头发局部应用有效量的本发明的组合物。所述组合物的需要量、使用频率以及使用持续时间将取决于所述组合物中含有的具有基序GX¹X²G、PX¹X²P或者PX¹X²K的四肽或其衍生物的量和与其它额外成分的特定组合以及所期望的化妆效果的强度，所述其它额外成分可包括例如药物活性物质、维生素、α-羟基酸等。

本发明的组合物最有利的是在一段持续时间内每天一次或者优选每天两次的应用于皮肤或头发，所述一段持续时间为至少1周、优选1个月、更优选3个月、再优选为至少约6个月以及再更优选至少约1年。

为实施本方法，可将形式为皮肤洗剂、乳剂、凝胶、泡沫、软膏、糊状物、乳状液、喷雾剂、护理剂(conditioner)、补剂(tonic)、化妆品、唇膏、粉底、指甲油、须后水等的组合物用于皮肤并留在该处(免洗(leave-on))。所述组合物可以用手或借助于抹板(spatulas)、涂抹片(wipes)或类似的化妆工具使用。其也可以通过使用封闭性或者半封闭性贴片、粘性或者非粘性的纸或织物(tissue)来应用。

在本发明的另一个实施方案中，所述局部组合物可用于在皮肤组织中上调纤连蛋白1的表达的方法中；此处最优选SEQ ID NO：2或者SEQ ID NO：4所示四肽被用作该组合物中的成分。

在本发明的另一个实施方案中，所述局部组合物可用于在皮肤组织中上调透明质酸合成酶表达的方法中；此处最优选SEQ ID NO：1或者SEQ IDNO：3所示四肽被用作该组合物的成分。

在本发明的另一个实施方案中，所述局部组合物可用于在皮肤组织中上调I型胶原α-1链表达的方法中；此处最优选SEQ ID NO：11所示四肽以及SEQ ID NO：1、2、3、11所示四肽的混合物被用作该组合物的成分。

在本发明的另一个实施方案中，所述局部组合物可用于在皮肤组织中上调I型胶原α-2链表达的方法中；此处优选SEQ ID NO：1或者SEQ ID NO：4所示四肽以及更优选SEQ ID NO：1、2、3、11的四肽混合物被用作该组合物的成分。

在本发明的另一个实施方案中，所述局部组合物可用于在皮肤组织中上调胶原表达的方法中；此处优选SEQ ID NO：3或者SEQ ID NO：4所示四肽以及更优选SEQ ID NO：1、2、3、11的四肽混合物被用作该组合物的成分。

本发明现将通过参考如下实施例和附图加以描述，所述实施例和附图只是用作例证说明而不应被理解为对本发明范围的限制。

附图简述

图1：纤连蛋白1(FN1)在人皮肤成纤维细胞(HDF)中的表达。将HDF与1μg/ml各个四肽(SEQ ID NO：1-SEQ ID NO：4和SEQ ID NO：11)或者与全部四种四肽的组合(SEQ ID NO：1、2、3、11)一起温育。对照组接受PBS。温育24小时后收获细胞并分离RNA。FN1的表达通过定量PCR确定。18srRNA作为持家基因以用来进行归一化。给出三个独立实验的平均值。

图2：透明质酸合成酶1(HAS1)在人皮肤成纤维细胞(HDF)中的表达。将HDF与1μg/ml各个四肽(SEQ ID NO：1-SEQ ID NO：4和SEQ ID NO：11)或者与全部四种四肽的组合(SEQ ID NO：1、2、3、11)一起温育。对照组接受PBS。温育24小时后收获细胞并分离RNA。FN1的表达通过定量PCR确定。18s rRNA作为持家基因以用来进行归一化。给出三个独立实验的平均值。

图3：I型胶原α-1(COL1A1)在人皮肤成纤维细胞(HDF)中的表达。将HDF与1μg/ml各个四肽(SEQ ID NO：1-SEQ ID NO：4和SEQ ID NO：11)或者与全部四种四肽的组合(SEQ ID NO：1、2、3、11)一起温育。对照组接受PBS。温育24小时后收获细胞并分离RNA。FN1的表达通过定量PCR确定。18s rRNA作为持家基因以用来进行归一化。给出三个独立实验的平均值。

图4：I型胶原α-2(COL1A2)在人皮肤成纤维细胞(HDF)中的表达。将HDF与1μg/ml各个四肽(SEQ ID NO：1-SEQ ID NO：4和SEQ ID NO：11)或者与全部四种四肽的组合(SEQ ID NO：1、2、3、11)一起温育。对照组接受PBS。温育24小时后收获细胞并分离RNA。FN1的表达通过定量PCR确定。18s rRNA作为持家基因以用来进行归一化。给出三个独立实验的平均值。

图5：人皮肤成纤维细胞(HDF)中胶原的产生。将HDF与1μg/ml各个四肽(SEQ ID NO：1-SEQ ID NO：4和SEQ ID NO：11)或者与全部四种四肽的组合(SEQ ID NO：1、2、3、11)一起温育。对照组接受PBS。温育24小时后收集细胞培养上清。胶原的量按上述方法确定。给出三个独立实验的平均值。

实施例1：

使用人皮肤成纤维细胞(HDF)细胞培养在体外研究单独的SEQ IDNO：1-SEQ ID NO：4或者SEQ ID NO：11或者SEQ ID NO：1-3及11(SEQ IDNO：1、2、3、11)每种四肽各含有25％的组合的作用。纤连蛋白(FN1)、透明质酸合成酶(HAS)、I型胶原α1(COL1A1)和COL1A2的mRNA表达及胶原产生被用作确定胞外基质(ECM)分子生产的参数。

因此，将从新生儿包皮制备的HDF在补充了5％胎牛血清(Greiner，Frickenhausen，Germany)、0.1％L-谷氨酰胺、2.5％NaHCO₃和1％链霉素/两性霉素B的EMEM(Life Technologies GmbH，Eggenstein，Germany)中、并在含有5％CO₂的湿化空气中培养4天，直至达到如Schieke et al.J InvestDermatol 2002，119：1323-9中所述的铺满(conflunce)。对于所有研究，仅使用早期传代(＜12)的成纤维细胞，以避免其在传代培养期间原始表型的改变。将细胞保持在6孔平板中以培养。加入溶于PBS中的肽至浓度为1μg/ml，温育24小时。

根据厂商指导使用RNeasy Total RNA试剂盒(Qiagen，Hilden；Germany)分离总RNA。RNA浓度通过在260/280的光度计测量而确定(Biophotometer，Eppendorf，Hamburg，Germany)。

将总RNA的等份(100ng)用于cDNA-合成，使用Superscript^TM IIIFirst-Strand合成系统由随机healers(Invitrogen，Karlsruhe，Germany)进行逆转录步骤。对于每个基因，基于(表1)所显示的公开的cDNA序列通过PrimetExpress^TM 2.0软件(Applied Bio systems，Darmstadt，Germany)设计具体的引物对。各基因表达使用18S rRNA作为持家基因进行归一化。进行三次独立实验，每个实验进行3次测定，计算这些结果的平均值。PCR反应使用SYBRGreen

PCR Master Mix(Applied Bio systems，Darmstadt，Germany)在Option1(MJ Research，Waltham，MA，USA)中进行。使用通用方案经46次循环一式两份分析每个样品。具体是10分钟94℃激活热启动taw聚合酶，20秒95℃穿透(penetration)，20秒55℃退火，30秒72℃延伸。为了对比在实时PCR对照细胞与处理的细胞的相对表达，使用2^{(-delta delta)C(T))}方法。

使用Biocolor Ltd.(Newtownabbay，Northern Ireland，UK)的Sircol^TMSoluble Collagen Assay(#S1000)根据厂商指导确定细胞培养上清中胶原的量。

表1：引物序列

基因	引物序列
		FN1	5′-GAAAGTACACCTGTTGTCATTCAACA-3′5′-ACCTTCACGTCTGTCACTTCCA-3′
HAS1	5′-GCGGGCTTGTCAGAGCTACT-3′5′-AACTGCTGCAAGAGGTTATTCCTATAT-3′
		COL1A1	5′-CCTGCGTGTACCCCACTCA-3′5′-ACCAGACATGCCTCTTGTCCTT-3′
COL1A2	5′-GATTGAGACCCTTCTTACTCCTGAA-3′5′-GGGTGGCTGAGTCTCAAGTCA-3′
		18S rRNA	5′-GCCGCTAGAGGTGAAATTCTTG-3′5′-CATTCTTGGCAAATGCTTTCG′-3′

FN1是由许多细胞、最显著地是成纤维细胞所产生的糖蛋白，且其可通过将这些细胞与胶原纤维连接从而保证这些细胞对ECM的附着。因此，FN1是涉及皮肤强度和弹性的主要因素之一。此处我们证明了用每种所述四肽处理以及用这些四肽的组合(SEQ ID NO：1、2、3、11)处理诱导了FN1表达的显著上调，其中观测到SEQ ID NO：2和SEQ ID NO：4的作用最强(图1)。

此外，如图2所示，在所测的经每种四肽及其组合处理的HDF中，HAS1表达也发现显著上调，并且对于SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：3可观测到最强作用。这种酶涉及透明质酸(HA)的产生，HA是一种非硫酸化的糖胺聚糖，广泛分布于结缔组织、上皮组织和神经组织中。HA代表ECM的一种主要成分，且据报道其显著地有助于细胞的增殖和迁移。胶原是主要的结缔组织蛋白，其占动物蛋白质含量的25％。胶原具有三链条索样卷曲结构。发现于皮肤、腱和骨中的主要胶原是含有2条α-1多肽链(COL1A1)和1条α-2链的相同蛋白质。每种四肽均诱导COL1A1在成纤维细胞中表达的上调。对于SEQ ID NO：11以及四肽SEQ ID NO：1、2、3、11的组合可观测到最强作用，从而证实所述组合的协同效用(图3)。关于COL1A2表达，可观测到SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：4的引发效应，以及更显著的SEQ ID NO：11及SEQ ID NO：1、2、3、11组合的效应(图4).

由于胶原纤维的常见形式胶原三螺旋的形成需要翻译后修饰的各个步骤，包括氨基酸的糖基化和衍生化，我们进一步确定了细胞培养上清中胶原蛋白的浓度。根据COL1A1和COL1A2表达数据，观测到四肽SEQ ID NO：1、2、3、11的四肽组合对于胶原产生最强作用(图5)。此外，用SEQ ID NO：3和SEQ ID NO：4处理可明显提高成纤维细胞中胶原的产生。

序列表

<110>赢创高施米特有限公司

<120>含有具有基序GX¹X²G、PX¹X²P或者PX¹X²K的四肽的个人护理和化妆品组合物

<130>2007P00830

<160>21

<170>PatentIn version 3.4

<210>1

<211>4

<212>PRT

<213>Artificial

<220>

<223>Synthetic Peptide

<400>1

Gly Glu Pro Gly

1

<210>2

<211>4

<212>PRT

<213>Artificial

<220>

<223>Synthetic Peptide

<400>2

Gly Pro Pro Gly

1

<210>3

<211>4

<212>PRT

<213>Artificial

<220>

<223>Synthetic Peptide

<400>3

Gly Glu Lys Gly

1

<210>4

<211>4

<212>PRT

<213>Artificial

<220>

<223>Synthetic Peptide

<400>4

Pro Gly Pro Pro

1

<210>5

<211>4

<212>PRT

<213>Artificial

<220>

<223>Synthetic Peptide

<400>5

Pro Lys Glu Lys

1

<210>6

<211>4

<212>PRT

<213>Artificial

<220>

<223>Synthetic Peptide with an N-acyl-group

<400>6

Gly Glu Pro Gly

1

<210>7

<211>4

<212>PRT

<213>Artificial

<220>

<223>Synthetic Peptide with an N-acyl-group

<400>7

Gly Pro Pro Gly

1

<210>8

<211>4

<212>PRT

<213>Artificial

<220>

<223>Synthetic Peptide with an N-acyl-group

<400>8

Gly Glu Lys Gly

1

<210>9

<211>4

<212>PRT

<213>Artificial

<220>

<223>Synthetic Peptide with an N-acyl-group

<400>9

Pro Gly Pro Pro

1

<210>10

<211>4

<212>PRT

<213>Artificial

<220>

<223>Synthetic Peptide with an N-acyl-group

<400>10

Pro Lys Glu Lys

1

<210>11

<211>4

<212>PRT

<213>Artificial

<220>

<223>Synthetic Peptide

<400>11

Gly Ala Gly Pro

1

<210>12

<211>26

<212>DNA

<213>Artificial

<220>

<223>Primer

<400>12

gaaagtacac ctgttgtcat tcaaca                                             26

<210>13

<211>22

<212>DNA

<213>Artificial

<220>

<223>Primer

<400>13

accttcacgt ctgtcacttc ca                                                 22

<210>14

<211>20

<212>DNA

<213>Artificial

<220>

<223>Primer

<400>14

gcgggcttgt cagagctact                                                    20

<210>15

<211>27

<212>DNA

<213>Artificial

<220>

<223>Primer

<400>15

aactgctgca agaggttatt cctatat                                            27

<210>16

<211>19

<212>DNA

<213>Artificial

<220>

<223>Primer

<400>16

cctgcgtgta ccccactca                                                     19

<210>17

<211>22

<212>DNA

<213>Artificial

<220>

<223>Primer

<400>17

accagacatg cctcttgtcc tt                                                  22

<210>18

<211>25

<212>DNA

<213>Artificial

<220>

<223>Primer

<400>18

gattgagacc cttcttactc ctgaa                                               25

<210>19

<211>21

<212>DNA

<213>Artificial

<220>

<223>Primer

<400>19

gggtggctga gtctcaagtc a                                                   21

<210>20

<211>22

<212>DNA

<213>Artificial

<220>

<223>Primer

<400>20

gccgctagag gtgaaattct tg                                                  22

<210>21

<211>21

<212>DNA

<213>Artificial

<220>

<223>Primer

<400>21

cattcttggc aaatgctttc g                                                   21

Claims (10)

1.局部个人护理以及皮肤护理组合物，其包含：

a)安全有效量的四肽，选自GEPG(SEQ ID NO:1)肽、GPPG(SEQ ID NO:2)肽、GEKG(SEQ ID NO:3)肽、PGPP(SEQ ID NO:4)肽、N-酰基-GEPG(SEQ ID NO:6)肽、N-酰基-GPPG(SEQ ID NO:7)肽、N-酰基-GEKG(SEQ IDNO:8)肽和N-酰基-PGPP(SEQ ID NO:9)肽组成的组；

b)安全有效量的至少一种额外的活性成分，其选自羟基酸、自由基清除剂、UV吸收剂、维生素、抗衰老活性物、屏障脂质、脱皮活性物、类视黄质、抗痤疮活性物、美黑活性物、抗橘皮组织活性物、抗炎活性物、抗微生物活性物、抗真菌活性物、皮肤光亮剂、皮肤活力剂、皮肤愈合剂、保湿活性物、及其混合物；以及

c)皮肤可接受的载体。

2.权利要求1的局部组合物，其中所述四肽的用量是所述组合物重量的1ppm至1000ppm。

3.权利要求1的局部组合物，其中所述四肽的用量是所述组合物重量的2ppm至250ppm。

4.权利要求1的局部组合物，其中所述四肽的用量是所述组合物重量的10ppm至100ppm。

5.权利要求1、2、3或4任一项的局部组合物，其中N-酰基-GEPG(SEQID NO:6)肽、N-酰基-GPPG(SEQ ID NO:7)肽、N-酰基-GEKG(SEQ ID NO:8)肽和/或N-酰基-PGPP(SEQ ID NO:9)肽用作四肽。

6.权利要求1、2、3或4任一项的局部组合物，其中所述局部组合物进一步包含GAGP(SEQ ID NO:11)四肽。

7.权利要求5的局部组合物，其中所述局部组合物进一步包含GAGP(SEQ ID NO:11)四肽。

8.权利要求1、2、3或4任一项的局部组合物，其中所述局部组合物包含占所述组合物重量10ppm至100ppm的GEPG、GPPG、GEKG或者PGPP，皮肤可接受的载体以及至少一种额外的活性成分，所述活性成分选自：

a)占所述组合物重量0.05%至1.5%的肌酸；

b)占所述组合物重量0.01%至1.0%的神经酰胺和/或鞘脂；

c)占所述组合物重量0.01%至0.5%的透明质酸和/或β葡聚糖；

d)占所述组合物重量0.05%至1.0%的阿江榄仁酸和/或姜黄油。

9.一种减少皮肤和/或毛发的可见衰老迹象的非治疗方法，包括：在需要这类治疗的皮肤和毛发上在一段延续的时间内至少一天一次应用权利要求1-8任一项的局部组合物。

10.权利要求1-8任一项的局部组合物在制备用于减少皮肤和/或毛发的可见衰老迹象的药物中的应用。

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