CN101862294A - 一种伊维菌素的悬乳剂及其制备方法和应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种伊维菌素的悬乳剂及其制备方法和应用。所述每升伊维菌素悬乳剂是采用2～100g的伊维菌素原料药、200～550g的油、30～200g的乳化剂和适量的水制备得到，必要时可以加入助剂。本发明制备得到的伊维菌素悬乳剂稳定性和生物相容性好，缓释效果显著，可应用于制备伊维菌素的缓释注射剂，填补了国内技术空白，为伊维菌素的应用开辟了新的技术领域。所述悬乳剂的制备方法简单易行，制造成本低。

Description

一种伊维菌素的悬乳剂及其制备方法和应用

技术领域

本发明属于兽用抗生素医药技术领域，具体涉及一种伊维菌素的悬乳剂、其制备方法以及在制备兽用缓释注射剂方面的应用。

背景技术

伊维菌素(ivermectin，IVM)是一类广谱的抗寄生虫药物，目前已经作为兽药、农药以及人类药物进行使用。20世纪80年代后期我国成功研制出了伊维菌素，并且按照国家二类新药完成了药理及临床治疗观察。目前伊维菌素已经被多家企业开发出多种品牌和剂型，有口服液、胶囊剂、糊剂、注射液、预混剂、浇泼剂、片剂、粉剂等。

但是目前伊维菌素应用最多的是普通注射剂，其采用的溶媒为甲醛缩甘油等有机溶媒，成本较高，而且半衰期较短，一次给药维持药效时间较短，多次给药应用既不方便，又耗费大量人力物力。

悬乳剂(Suspoemulsion，SE)，是由不溶于水的固体药物，即固体悬浮体与乳状液混合形成的悬浮乳状体系。悬乳剂是一种由油相、水相和固相组成的三相混合体系，它不仅具有混悬剂和乳剂的特性，而且还具有自身独特的优越性能：(1)悬乳剂具有一剂多效的作用。悬乳剂能够同时包载多种有效成分，可把几种活性成分包载在体系中的不同相中，这样可以起到一剂多效功能。例如在水包油型悬乳剂中，乳状液可包载一种或多种活性物质，其中有些组分可是水溶性的，有些活性成分可是油溶性的，而在连续相中既可包载以固体颗粒形式存在的有效成分，也可包载水溶性活性物质。(2)悬乳剂具有较高生物活性。由于悬乳剂可同时包载多种有效成分，使具有协同或增强效应的各组分存在于同一体系中，从而能够增大药物的生物活性。(3)悬乳剂可延缓或控制药物释放，能够把油性药物或固体粉末药物制成悬乳剂剂型，发挥长效作用，同时也避免了制备液体剂型需要使用有机溶剂的缺点，降低了产品成本和毒性，尤其是农药产品，避免了使用有机溶剂和粉尘药物对环境造成的污染。(4)悬乳剂使用方便，可经口服、注射等途径使用。综上所述，悬乳剂具有独特的性能和作用。

国际上有关悬乳剂的研究是在20世纪80年代后期开始的，目前在农药制剂、工业制剂中应用较多，在医药领域尚处于研究起始阶段。王长虹等研制了O/W型甲苯咪唑悬乳剂，黄显会等研制成功了氟苯尼考悬乳剂。

但是，目前没有伊维菌素悬乳剂面市，也没有相关的技术报道。这是因为悬乳剂属粗分散体系，是一种相对新的复杂体系，该体系的流变学特征、固液滴间的相互作用、稳定性机制、质量控制标准等尚未彻底明了，悬乳剂的应用，尤其是作为递药系统方面的研究仍处于起步阶段。悬乳剂具有动力学和热力学不稳定性，是悬乳剂不稳定性的根本原因。固体颗粒的大小、浓度和润湿性，悬乳剂的pH和电解质等因素均能影响其稳定性，并导致悬乳剂的破坏。悬乳剂常出现的不稳定现象主要是异相絮凝、乳状液破乳、晶体增长和沉降与分层。制备稳定的悬乳剂难度较大，有效成分及助剂的科学配伍，是形成稳定悬乳剂体系的关键因素。每一种药物的性质不一样，其稳定悬乳剂体系的组成也相差甚远，一种药物的悬乳剂体系并不能当然的作为另一种药物的悬乳剂体系参照。

因为技术的限制，目前还没有稳定性好、缓释效果显著伊维菌素悬乳剂相关技术报道，制备伊维菌素悬乳剂是目前日益关注的技术难题。

发明内容

本发明的一个目的是克服现有技术的不足，提供一种伊维菌素的悬乳剂，稳定性好、缓释效果显著，可有效提高制剂的稳定性和药物的生物利用度，增强伊维菌素的疗效，降低伊维菌素的毒副作用。

本发明的另一个目的是提供所述伊维菌素悬乳剂的制备方法，简单易行，成本较低。

本发明还有一个目的是提供所述伊维菌素悬乳剂的应用。

本发明的目的通过以下技术方案予以实现：

提供一种伊维菌素的悬乳剂，其特征在于每升伊维菌素悬乳剂包括以下组分：

伊维菌素原料药：2～100g；

油：            200～550g；

乳化剂：        30～200g；

水：            加至1升。

所述的油优选植物油，包括大豆油、棉籽油、花生油、麻油、玉米油、茶油、葵花籽油、蓖麻油或橄榄油的一种或两种以上任何比例的混合物。

所述的乳化剂包括天然乳化剂和表面活性剂类乳化剂。天然乳化剂主要包括阿拉伯胶、西黄蓍胶、明胶、杏树胶、卵磷脂、大豆磷脂。表面活性剂类乳化剂优选非离子表面活性剂，包括脂肪酸甘油酯、蔗糖脂肪酸酯、聚氧乙烯失水山梨醇脂肪酸酯(Tween系列)、失水山梨醇脂肪酸酯(Span系列)、聚氧乙烯脂肪酸酯(Myrij系列)、聚氧乙烯脂肪醇醚(Brij系列)、蓖麻油聚氧乙烯醚(EL系列)、泊洛沙姆(Poloxamer)。它们可单一应用，也可联合应用，联合应用时混合比例不做特殊要求。

必要时所述伊维菌素悬乳剂还可以包括助剂；所述助剂为乳化剂稳定剂和/或助悬剂和/或抗氧剂和/或抑菌防腐剂和/或局部疼痛减轻剂。助剂的加入量根据制药技术领域常规技术确定即可。

所述的乳化剂稳定剂可以提高本发明乳剂的黏度，增强乳化膜的强度，防止乳滴合并，包括增加水相黏度的甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、羟丙基纤维素、海藻酸钠、琼脂、阿拉伯胶、西黄蓍胶、黄原胶、果胶和增加油相黏度的鲸蜡醇、蜂蜡、单硬脂酸甘油酯、硬脂酸或硬脂醇等。

所述的助悬剂为羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、阿拉伯胶、黄原胶、聚乙烯吡咯烷酮、分子量大于1000的聚乙二醇、氢化蓖麻油或硬脂酸铝。

所述的抗氧剂为亲油性抗氧剂和水溶性抗氧剂，优选焦亚硫酸盐、亚硫酸盐、硫脲、没食子酸及其酯类、叔丁基对羟基茴香醚(BHA)、二丁基羟基甲苯(BHT)、生育酚或抗坏血酸。

所述的抑菌防腐剂为对羟基苯甲酸酯、苄基醇、氯丁醇、苯氧乙醇、苯酚及其衍生物、苯甲酸、山梨酸及它们的碱性盐，所述的季铵化合物诸如苯扎溴铵或苄索氯胺。

所述的局部疼痛减轻剂包括：普鲁卡因、利多卡因、丁卡因、苯甲醇或三氯叔丁醇。

本发明所述伊维菌素悬乳剂的制备方法包括以下步骤：

(1)按照比例称量伊维菌素原料药和植物油，通过胶体磨混合均匀，制得油相；

(2)称取乳化剂，往乳化剂中加入少量注射用水搅拌溶解，制得水相；

(3)将步骤(2)水相加入步骤(1)制得的油相，通过胶体磨，混合均匀；

(4)加水至全量，搅匀即得伊维菌素悬乳剂。

若需要使用助剂的话，所述伊维菌素悬乳剂的制备方法包括以下步骤：

(1)按照比例量取伊维菌素和植物油，通过胶体磨混合均匀，制得油相；

(2)称取乳化剂，往乳化剂中加入少量注射用水搅拌溶解，制得水相；

(3)将水相加入油相，通过胶体磨，混合均匀；

(4)其他助剂中分别加入少量注射用水搅拌溶解，加入步骤(3)所得混合物，研磨混匀；

(5)加水至全量，搅匀即得伊维菌素的悬乳剂。

本发明所述的伊维菌素悬乳剂，药物释放延缓，可应用于制备长效缓释制剂，具体是应用于制备兽用缓释注射剂方面，尤其是应用于制备治疗动物螨病药物方面。

本发明的有益效果是：

本发明寻找到合适的组分配伍和恰当的各组分比例，成功制备得到了伊维菌素的水包油型的悬乳剂，药物以固体颗粒形式存在于连续相中，连续相是水，更容易分取剂量，更适于准确给药。

本发明制剂稳定性和生物相容性好，缓释效果显著，可应用于制备伊维菌素的缓释注射剂，填补了国内技术空白，为伊维菌素的应用开辟了新的技术领域。

本发明悬乳剂的制备方法简单易行，制造成本低。

具体实施方式

下面结合具体实施例来进一步详细说明本发明。可简单替代的油、乳化剂或助剂不一一在实施例中赘述，但并不因此限定本发明实施范围。

实施例1：3％伊维菌素悬乳剂

按照以下比例准备各组分，所有组分均为药用常规用料(市购)：

伊维菌素原料药    30g；

茶油              500g；

吐温80            50g；

注射用水          加至1000mL。

制备方法为：

(1)按照比例称量伊维菌素原料药和茶油，通过胶体磨混合均匀，制得油相；胶体磨不做特殊要求，能达到混合均匀的效果即可。

(2)称取吐温80，加入少量注射用水搅拌溶解吐温80，制得水相；

(3)将水相加入油相，通过胶体磨混合均匀；

(4)加水至全量，搅匀即得伊维菌素的悬乳剂。

实施例2：2％伊维菌素悬乳剂

按照以下比例准备各组分，所有组分均为药用常规用料：

伊维菌素原料药    20g；

花生油              300g；

玉米油              200g；

泊洛沙姆            70g；

大豆磷脂            30g；

注射用水            加至1000mL。

制备方法为：

(1)按照比例称量伊维菌素原料药、花生油、玉米油，通过胶体磨混合均匀，制得油相；

(2)称取泊洛沙姆和大豆磷脂，加入少量注射用水搅拌溶解，制得水相；

(3)将水相加入油相，通过胶体磨混合均匀；

(4)加水至全量，搅匀即得伊维菌素的悬乳剂。

实施例3：0.2％伊维菌素悬乳剂

按照以下比例准备各组分，所有组分均为药用常规用料：

伊维菌素          2g；

花生油            550g；

泊洛沙姆          70g；

甲基纤维素        3.5g；

注射用水          加至1000mL。

制备方法为：

(1)按照比例称量伊维菌素原料药、花生油，通过胶体磨混合均匀，制得油相；

(2)称取泊洛沙姆和甲基纤维素，加入少量注射用水搅拌溶解，制得水相；

(3)将水相加入油相，通过胶体磨混合均匀；

(4)加水至全量，搅匀即得伊维菌素的悬乳剂。

实施例4：10％伊维菌素悬乳剂

按照以下比例准备各组分，所有组分均为药用常规用料：

伊维菌素       100g；

玉米油         100g；

大豆油         100g；

吐温80         30g；

司盘80         30g；

利多卡因       5g；

注射用水       加至1000mL。

制备方法为：

按照比例称量伊维菌素原料药、玉米油、大豆油，通过胶体磨，使伊维菌素均匀分散在油相中；加入处方量的吐温80、司盘80和适量注射用水，通过胶体磨，混合均匀；加入处方量的利多卡因，加水至全量，搅匀即得含伊维菌素的悬乳剂。

实施例5：1％伊维菌素悬乳剂

按照以下比例准备各组分，所有组分均为药用常规用料：

伊维菌素       10g；

大豆油         500g；

吐温80              30g；

司盘80              30g；

甲基纤维素          3.5g；

没食子酸丙酯        0.5g；

对羟基苯甲酸甲酯    1.8g；

对羟基苯甲酸丙酯    0.2g；

盐酸普鲁卡因        5g；

注射用水            加至1000mL。

制备方法为：

按照比例称量伊维菌素原料药、大豆油，通过胶体磨，使伊维菌素均匀分散在大豆油中；加入处方量的吐温80、司盘80、甲基纤维素胶浆和适量注射用水，通过胶体磨，混合均匀；加入处方量的其他助剂，加水至全量，搅匀即得含伊维菌素的悬乳剂。

本发明制备得到的伊维菌素悬乳剂，制剂稳定性好，生物相容性好，缓释效果显著，可采用现有常规技术制备成伊维菌素的缓释注射剂。

实施例6：本发明制备得到的伊维菌素悬乳剂性状试验：

1、物理性状

本发明伊维菌素悬乳剂为乳白色液体，可被亚甲蓝均匀染色，为O/W型乳剂。取伊维菌素悬乳剂样品用蒸馏水100倍稀释，充分摇匀，取一滴稀释样品滴于载玻片上，在显微镜400倍视野下观察到乳滴呈圆球形，界面光滑，乳滴中包裹着混悬的伊维菌素药物，形成的是O/W型悬乳剂。乳滴大小均匀，大部分粒子粒径在1～4μm之间，占粒子总数的95％以上。悬乳剂室温放置30d，未见药物颗粒增长、转型和凝结现象。

2、重分散性试验

在室温环境中，将本发明悬乳剂置于100mL具塞量筒内静止放置30d后，以每分钟20次的速度翻转量筒，均匀用力翻动2～3次，即可均匀分散，瓶底无沉淀，悬乳剂中无凝块，悬乳剂的重分散性良好。

3、通针性试验

选用7、9及12号针头，于剧烈摇振后抽取悬乳剂样品，测定不同型号针头抽取悬乳剂的难易程度和速度。7号针头抽取伊维菌素悬乳剂相对较难，1分钟仅可吸取3mL左右，9号和12号针头抽取悬乳剂较容易，1分钟分别达12mL和25mL，说明该悬乳剂具有良好的通针性。

4、强光照射试验

将伊维菌素悬乳剂置于(4500±500)LX强光照射条件下，于第1、3、5及第10天间隔取样，悬乳剂的外观色泽始终保持为乳白色，未见乳剂破乳，重分散性良好，药物颗粒细腻，有效成分含量略有降低，但未发生明显变化，pH值稳定，表明该制剂对光稳定。

5、加速试验

将伊维菌素悬乳剂置于人工气候培养箱中，调节温度至30±2℃，湿度至相对湿度60±5％，定期观察12个月，每月取样一次，制剂的外观色泽始终保持为乳白色，未见乳剂破乳，重分散性良好，药物颗粒细腻，有效成分含量未发生明显变化，pH值稳定，表明该制剂在加速条件下稳定。

6、安全性评价

采用豚鼠和家兔分别进行伊维菌素悬乳剂的全身用药过敏性、肌肉局部刺激性及家兔红细胞体外溶血性试验研究，用改良寇氏法对小鼠的LD₅₀进行了测定。结果显示本品临床给药剂量对豚鼠无全身过敏性、对家兔肌肉注射给药无明显局部刺激性、对家兔红细胞无体外溶血性，表明伊维菌素悬乳剂的各项安全性均良好，为实际应用提供了有力依据。

7、药物动力学试验

以实施例5的1％伊维菌素悬乳剂为例。试验用家兔16只，随机分为2组，按0.5mg/kg体重分别背部皮下注射害获灭注射液和伊维菌素悬乳剂。给药后一定时间自耳静脉采血，肝素抗凝分离血浆，高效液相色谱法测定血浆中伊维菌素的含量。

表1害获灭在家兔体内的血药浓度(ng/mL)

时间(h)	1	2	4	8	12	16	24	36	48	72	120	168
													平均浓度	1.05	4.04	7.12	12.55	19.08	22.27	21.70	18.58	13.81	9.47	6.43	1.69
±SD	1.11	1.04	1.25	2.52	3.06	4.21	3.72	4.19	2.95	1.82	1.76	2.31

表2伊维菌素悬乳剂在家兔体内的血药浓度(ng/mL)

时间(d)	0.25	0.5	1	2	4	6	8	10	14	21	28	35
													平均浓度	5.16	9.69.	13.83	16.47	15.95	13.52	11.05	8.37	6.21	3.54	2.60	1.24
±SD	2.13	2.52	1.99	2.77	3.96	3.05	2.70	3.68	2.53	2.01	1.84	2.03

比较表1和表2可见，伊维菌素悬乳剂比普通注射液(害获灭)在家兔体内吸收减慢，消除减慢，达峰时间延迟，峰浓度降低，具有极显著的长效缓释效果。

8、临床应用试验

以实施例5的1％伊维菌素悬乳剂为例。选择自然感染螨病的家兔48只，临床症状表现为病兔足部、口部、耳部等多处结有厚痴，并有出血甚至皮肤溃烂，瘙痒严重，常用四肢不停地在全身搔抓。随机分为2组，按0.5mg/kg体重分别背部皮下注射害获灭注射液和伊维菌素悬乳剂。给药前后定期对试验兔称重，并观察试验兔的活动情况及有无瘙痒等症状。以给药后痂皮松动脱落，溃烂部位愈合并开始长出新毛，镜检病料无活螨为治疗有效。

给药后，害获灭组及伊维菌素悬乳剂组家兔均可见明显疗效，主要表现为活螨检出率明显下降，耳道痂皮松动脱落，耳道内分泌物减少，四肢(主要爪部)及鼻端痂皮脱落，溃疡灶开始愈合，溃烂部位开始长出新的肉芽组织，边缘长出新毛。

害获灭组第10d时，活螨检出率升高，故需进行第2次给药治疗。伊维菌素悬乳剂组至第35d，绝大多数家兔痂皮完全脱落，病灶基本愈合，并长出新毛，多数兔未检出活螨。由此可见，伊维菌素普通制剂需重复给药才能获得较好的疗效，而伊维菌素悬乳剂治疗组家兔在35d内没有重复感染，说明伊维菌素悬乳剂有一定的长效缓释作用。

Claims (10)

1.一种伊维菌素的悬乳剂，其特征在于每升伊维菌素悬乳剂包括以下组分：

伊维菌素原料药：2～100g；

油：            200～550g；

乳化剂：        30～200g；

水：            加至1升。

2.根据权利要求1所述的伊维菌素悬乳剂，其特征在于所述的油为植物油。

3.根据权利要求2所述的伊维菌素悬乳剂，其特征在于所述植物油为大豆油、棉籽油、花生油、麻油、玉米油、茶油、葵花籽油、蓖麻油或橄榄油的一种或两种以上任何比例的混合物。

4.根据权利要求1所述的伊维菌素悬乳剂，其特征在于所述的乳化剂为阿拉伯胶、西黄蓍胶、明胶、杏树胶、卵磷脂、大豆磷脂、脂肪酸甘油酯、蔗糖脂肪酸酯、Tween系列聚氧乙烯失水山梨醇脂肪酸酯、Span系列失水山梨醇脂肪酸酯、Myrij系列聚氧乙烯脂肪酸酯、Brij系列聚氧乙烯脂肪醇醚、EL系列蓖麻油聚氧乙烯醚或泊洛沙姆的一种或两种以上任何比例的混合物。

5.一种权利要求1所述的伊维菌素悬乳剂的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

(1)按照比例称量伊维菌素原料药和植物油，通过胶体磨混合均匀，制得油相；

(2)称取乳化剂，往乳化剂中加入少量注射用水搅拌溶解，制得水相；

(3)将水相加入油相，通过胶体磨混合均匀；

(4)加水至全量，搅匀即得伊维菌素的悬乳剂。

6.一种权利要求1所述的伊维菌素悬乳剂，其特征在于还包括助剂；所述助剂为乳化剂稳定剂和/或助悬剂和/或抗氧剂和/或抑菌防腐剂和/或局部疼痛减轻剂。

7.根据权利要求6所述的伊维菌素悬乳剂，其特征在于：

所述的乳化剂稳定剂为甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、羟丙基纤维素、海藻酸钠、琼脂、阿拉伯胶、西黄蓍胶、黄原胶、果胶、鲸蜡醇、蜂蜡、单硬脂酸甘油酯、硬脂酸或硬脂醇；

所述的助悬剂为羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、阿拉伯胶、黄原胶、聚乙烯吡咯烷酮、分子量大于1000的聚乙二醇、氢化蓖麻油或硬脂酸铝；

所述的抗氧剂为焦亚硫酸盐、亚硫酸盐、硫脲、没食子酸及其酯类、叔丁基对羟基茴香醚、二丁基羟基甲苯、生育酚或抗坏血酸；

所述的抑菌防腐剂为对羟基苯甲酸酯、苄基醇、氯丁醇、苯氧乙醇、苯酚及其衍生物、季铵化合物、苯甲酸、山梨酸或它们的碱性盐；

所述的局部疼痛减轻剂包括普鲁卡因、利多卡因、丁卡因、苯甲醇或三氯叔丁醇。

8.一种权利要求6所述的伊维菌素悬乳剂的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

(1)按照比例量取伊维菌素和植物油，通过胶体磨混合均匀，制得油相；

(2)称取乳化剂，往乳化剂中加入少量注射用水搅拌溶解，制得水相；

(3)将水相加入油相，通过胶体磨混合均匀；

(4)其他助剂中分别加入少量注射用水搅拌溶解，加入步骤(3)所得混合物，研磨混匀；

(5)加水至全量，搅匀即得伊维菌素的悬乳剂。

9.一种权利要求1或6所述的伊维菌素悬乳剂的应用，其特征在于应用于制备兽用缓释注射剂。

10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于应用于制备治疗动物螨病药物方面。