CN101856453A

CN101856453A - 一种抗原发性支气管病毒的纳米药物组合物及其制备方法

Info

Publication number: CN101856453A
Application number: CN200910011121A
Authority: CN
Inventors: 谢瑶瑶; 于海洋
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 2009-04-10
Filing date: 2009-04-10
Publication date: 2010-10-13

Abstract

本发明涉及一种抗原发性支气管病毒的纳米药物组合物，其特征在于：该组合物中主要由以下配方按重量计组成：核桃树枝50～70，黄芩苷10～25，草河车12～25，小蘖碱25～35，表儿茶素25～35，半枝莲25～35，鱼腥草15～25，沙参25～35，丹皮25～35，原儿茶酸15～25。该制备方法是按上述的各组分进行配比后，在低温状态下利用高频振荡仪进行处理成纳米级，然后再进行加水、搅拌、煎熬、过滤，制备成品。该制备方法中采用低温状态下，温度范围在零下-150～-260℃。该成品可改变剂型，做成膏、丸及冲剂。本发明的目的在于解决针对原发性支气管病毒采用常规现有的方法存在的毒副作用大、疗效较差、疗程长等方面存在的问题。

Description

一种抗原发性支气管病毒的纳米药物组合物及其制备方法

技术领域：本发明涉及一种抗原发性支气管病毒的纳米药物组合物及其制备方法。

背景技术：深部真菌感染是临床各科严重并发症之一。近年来由于临床上广谱抗生素、化疗药物和免疫抑制剂等大量应用；深部静脉高营养方法与静脉、气管插管、器官移植的广泛开展，加之糖尿病、恶性肿瘤、艾滋病等慢性消耗性疾病所造成的免疫抑制或免疫缺陷患者的增加，真菌病尤其是深部真菌病发病率大幅上升。据美国疾病控制和预防中心的国家院内感染检测系统资料证实，从1980年至1990年，院内真菌感染率显著上升，外科患者增长了124％，内科患者增长了73％。而念珠菌成为第六位最常见的院内致病菌。侵袭性真菌病大多发生在有严重基础疾病的患者，病死率高。

目前治疗深部真菌病的高效低毒药物不多，仍选用延用了近40年的二性霉素B，但其毒性较大，应用受限。5-氟胞嘧啶(5-FC)抗菌谱窄，易产生耐药，一般不单独使用。60年代末合成克霉唑和咪康唑。80年代后，酮康唑、氟康唑等新的抗真菌药相继问世，其中氟康唑是目前临床应用最广，效果最好的抗真菌药物。然而这些药物多数仅具有抑菌作用而使得疗程较长，通常需数周至数月。由于真菌与人类细胞同为真核细胞，长期用药后往往对宿主具有相当毒性。因此临床上迫切需要开发出高效、低毒、广谱的新型抗真菌药物。

原发性支气管病毒是最常见的真菌病毒感染之一。病因可能是由于吸烟过度，职业性损害如石棉、电离辐射以及环境污染等。主要特征为咳嗽、胸闷痛，气急，伴有咯血、血痰和发热等。是否能有效的抑制原发性支气管病毒是一个亟待解决的问题。

发明内容：

发明目的：针对以上提出的问题，本发明提供一种抗原发性支气管病毒的纳米药物组合物及其制备方法，起目的在于解决针对原发性支气管病毒采用常规现有的方法存在的毒副作用大、疗效较差、疗程长等方面存在的问题。

技术方案：本发明是通过以下技术方案来实现的：

一种抗原发性支气管病毒的纳米药物组合物，其特征在于：该组合物中主要由以下配方按重量计组成：核桃树枝50～70，黄芩苷10～25，草河车12～25，小蘖碱25～35，表儿茶素25～35，半枝莲25～35，鱼腥草15～25，沙参25～35，丹皮25～35，原儿茶酸15～25。

根据以上所述的一种抗原发性支气管病毒的纳米药物组合物的制备方法，其特征在于：该制备方法是按权利要求1所述的各组分按重量进行配比后，在低温状态下利用高频振荡仪进行处理成纳米级，然后再进行加水、搅拌、煎熬、过滤，制备成品。

该制备方法所述的温度范围在零下-150～-260℃。

该成品可改变剂型，做成膏、丸及冲剂，或经过滤后提取上清夜制备成注射剂。

优点及效果：纳米是一种长度单位，一纳米等于十亿分之一米，千分之一微米。自从扫描隧道显微镜发明后，世界上便诞生了一门以0.1至100纳米这样的尺度为研究对象的新学科，这就是纳米科技。当金属或非金属被制造成小于100纳米的物质时，其物理性质和化学性能都会发生很大变化，并具有高强度、高韧性、高比热、高导电率、高扩散率、磁化率以及对电磁波具有强吸收性等新的特征。超细微粒作为药剂，在外磁场的引导下集中于病患部位，非常利于提高药效。本发明依据现代医学理论，采用综合治疗的方法，在现有的抗病毒的方法的基础上，运用纳米制药技术制成的药物组合物，改变了传统药物不足之处，对治疗原发性支气管病毒有独到疗效，可大大提高药物的疗效和靶向性，更利于药物发挥作用，在治疗原发性支气管病毒的临床中开辟了一条新型有效的途径。本发明将技术方案中提到的药物成分在低温状态下利用高频振荡仪进行处理成纳米级，其成品率高，占原料的90％以上。

所得的固体脂质纳米粒剂，GC指纹图谱为：色谱条件：6890N GC(美国Agilent公司)，色谱柱：HP-5(30m×320μm×0.25μm)，进样口温度250℃，柱温60～220℃，程序升温，升温速率：8℃/min，N₂作载气，流速1.0ml·min^-1，FID检测器，检测室温度300℃，四氢呋喃为内标；纳米粒GC指纹图谱共有指纹峰保留时间(min)为：4.50～4.68、4.70～4.80、5.40～5.58、6.00～6.20、7.90～8.10、8.20～8.34、8.35～8.45、9.00～9.20、10.00～10.29、10.30～10.45、11.70～11.90、11.91～12.10、12.12～12.30、12.80～13.10、14.90～15.20(内标峰)、15.00～16.00、20.0～21.0、23.0～25。

该抗原发性支气管病毒的纳米药物组合物成分科学合理，经临床实验后疗效明显，且毒副作用小，制备简单，比较使用于临床的应用。

附图说明：

图1为本发明的GC指纹图谱；

图2为本发明给予注射剂后72h的兔耳缘静脉病理切片照片；

图3为本发明给予注射剂后14天的兔耳缘静脉病理切片照片。

具体实施方式：

实施例1：

按以下配方，按重量计准备原料：核桃树枝50，黄芩苷10，草河车12，小蘖碱25，表儿茶素25，半枝莲25，鱼腥草15，沙参25，丹皮25，原儿茶酸15；

将上述配方按所述的进行配比后，采用液氮冷却的方法，在低温状态下利用高频振荡仪进行处理成纳米级，温度是零下-150℃，然后再进行加水、搅拌、煎熬、过滤，制备成品。

在不影响疗效的前提下，可改变剂型，如膏、丸及冲剂等，更方便患者服用，或经过滤后提取上清夜制备成注射剂。

实施例2：

按以下配方，按重量计准备原料：核桃树枝70，黄芩苷25，草河车25，小蘖碱35，表儿茶素35，半枝莲35，鱼腥草25，沙参35，丹皮35，原儿茶酸25；

将上述配方按所述的进行配比后，采用液氮冷却的方法，在低温状态下利用高频振荡仪进行处理成纳米级，温度是零下-260℃，然后再进行加水、搅拌、煎熬、过滤，制备成品。

实施例3：

按以下配方，按重量计准备原料：核桃树枝55，黄芩苷15，草河车15，小蘖碱30，表儿茶素28，半枝莲28，鱼腥草18，沙参26，丹皮26，原儿茶酸18；

将上述配方按所述的进行配比后，采用液氮冷却的方法，在低温状态下利用高频振荡仪进行处理成纳米级，温度是零下-180℃，然后再进行加水、搅拌、煎熬、过滤，制备成品。

实施例4：

按以下配方，按重量计准备原料：核桃树枝60，黄芩苷20，草河车20，小蘖碱28，表儿茶素30，半枝莲31，鱼腥草20，沙参30，丹皮28，原儿茶酸20；

将上述配方按所述的进行配比后，采用液氮冷却的方法，在低温状态下利用高频振荡仪进行处理成纳米级，温度是零下-200℃，然后再进行加水、搅拌、煎熬、过滤，制备成品。

实施例5：

实施例6：

按以下配方，按重量计准备原料：核桃树枝65，黄芩苷20，草河车20，小蘖碱25，表儿茶素30，半枝莲35，鱼腥草20，沙参30，丹皮28，原儿茶酸22；

将上述配方按所述的进行配比后，采用液氮冷却的方法，在低温状态下利用高频振荡仪进行处理成纳米级，温度是零下-155℃，然后再进行加水、搅拌、煎熬、过滤，制备成品。

实施例7：

实施例8：

按以下配方，按重量计准备原料：核桃树枝70，黄芩苷18，草河车24，小蘖碱35，表儿茶素30，半枝莲35，鱼腥草20，沙参35，丹皮28，原儿茶酸23；

将上述配方按所述的进行配比后，采用液氮冷却的方法，在低温状态下利用高频振荡仪进行处理成纳米级，温度是零下-245℃，然后再进行加水、搅拌、煎熬、过滤，制备成品。

实施例9：

按以下配方，按重量计准备原料：核桃树枝52，黄芩苷12，草河车13，小蘖碱35，表儿茶素35，半枝莲35，鱼腥草20，沙参35，丹皮28，原儿茶酸15；

实施例10：

按以下配方，按重量计准备原料：核桃树枝50，黄芩苷12，草河车13，小蘖碱35，表儿茶素35，半枝莲35，鱼腥草16，沙参35，丹皮28，原儿茶酸15；

将上述配方按所述的进行配比后，采用液氮冷却的方法，在低温状态下利用高频振荡仪进行处理成纳米级，温度是零下-185℃，然后再进行加水、搅拌、煎熬、过滤，制备成品。

实施例11：

按以下配方，按重量计准备原料：核桃树枝50，黄芩苷25，草河车13，小蘖碱35，表儿茶素35，半枝莲33，鱼腥草16，沙参35，丹皮28，原儿茶酸24；

将上述配方按所述的进行配比后，采用液氮冷却的方法，在低温状态下利用高频振荡仪进行处理成纳米级，温度是零下-170℃，然后再进行加水、搅拌、煎熬、过滤，制备成品。

实施例12：

按以下配方，按重量计准备原料：核桃树枝50，黄芩苷10，草河车12，小蘖碱25，表儿茶素35，半枝莲35，鱼腥草24，沙参30，丹皮35，原儿茶酸15；

将上述配方按所述的进行配比后，采用液氮冷却的方法，在低温状态下利用高频振荡仪进行处理成纳米级，温度是零下-240℃，然后再进行加水、搅拌、煎熬、过滤，制备成品。

如图1所示，所得的固体脂质纳米粒剂，GC指纹图谱为：色谱条件：6890NGC(美国Agilent公司)，色谱柱：HP-5(30m×320μm×0.25μm)，进样口温度250℃，柱温60～220℃，程序升温，升温速率：8℃/min，N₂作载气，流速1.0ml·min^-1，FID检测器，检测室温度300℃，四氢呋喃为内标；纳米粒GC指纹图谱共有指纹峰保留时间(min)为：4.50～4.68、4.70～4.80、5.40～5.58、6.00～6.20、7.90～8.10、8.20～8.34、8.35～8.45、9.00～9.20、10.00～10.29、10.30～10.45、11.70～11.90、11.91～12.10、12.12～12.30、12.80～13.10、14.90～15.20(内标峰)、15.00～16.00、20.0～21.0、23.0～25。

对本发明制得的药物的安全性试验：

考察用本发明的安全性，如：急性毒性、溶血性、血管刺激性、热原及致敏试验等。

①、急性毒性试验

选取健康小鼠40只，体重18～22g，随机分为4组，雌雄各半，每组10只，考察毒性。结果该药物组合物的LD₅₀为184mg/kg，LD₅₀的95％置信区间为：163.8～207.0mg/kg

②、溶血性实验

取供试家兔，从耳动脉采血9mL，玻璃棒轻轻搅动除去纤维蛋白，使成脱纤血液，加10倍量的氯化钠注射液，摇匀、离心，除去上清液，沉淀的红细胞再用氯化钠注射液如法洗涤3次至上清液不显红色，将所得红细胞用氯化钠注射液配成2％的混悬液，供实验用。

取试管7只，依次加入2％红细胞混悬液和氯化钠注射液，混匀后，于37℃水浴中放置10min，将本发明的注射剂于1～5号管分别加入此稀释药液0.5mL、0.4mL、0.3mL、0.2mL、0.1mL，6号管加入氯化钠注射液2.5mL，7号管加入无菌水2.5mL，使各管最终体积均为5mL，轻轻混匀后，置37℃水浴中，分别于不同时间观察溶血情况。如溶液呈透明红色，即表示溶血，如溶液中有棕红色絮状沉淀，表示有红细胞凝聚作用。如有红细胞凝聚现象，应震荡试管或在显微镜下观察，判定是真凝聚还是假凝聚。

在规定时间内观察，发现该注射剂的1～6号管上层液体无色透明，红细胞逐渐沉于管底，第7号管上层液体呈红色透明，上述各管均无红棕色絮状沉淀，也未见红细胞凝聚作用，表明本发明的注射剂无溶血作用。

③、血管刺激性试验

用5％葡萄糖注射液稀释本发明的注射剂，给药浓度相当于临床真菌感染的最大给药量。取体重2.0～2.5kg健康家兔4只，雌雄兼用，随即分为两组。将家兔置于固定器内。家兔左耳缘静脉滴注该注射剂20mL/kg，右耳缘静脉滴注5％葡萄糖注射液20mL/kg，滴注速度为20滴(1mL)/min，每天上午滴注一次，连续3天，观察兔左耳缘静脉反应，并于末次给药后72h、14天将家兔处死，取注射部位或远离注射部位5cm处耳缘静脉，进行组织切片检查。

每次滴注期间及给药后观察，肉眼观察见左耳缘静脉进针处无血管发红、肿、热等局部刺激反应，组织病理学检查对照组与用药组皮肤、皮下组织形态正常，耳缘静脉血管内皮细胞排列正常，未见层次增多，排列紊乱的改变，官腔内无附壁血栓，无炎细胞浸润，管壁无增厚，管壁周围未见明显变性、坏死及炎症等形态学改变。结果表明大蒜油静脉注射乳剂无明显血管刺激性。病理切片照片见图2、图3。

④、热原检查

依据《中国药典》2005年版热原检查法，观察家兔体温升高情况，判断本发明的注射剂热原限度是否合格。

取合格家兔3只，在测定其正常体温后15min，自耳缘静脉缓缓注入预热至37℃的本发明的注射剂稀释液10mL·kg^-1，每隔30min测家兔肛温1次，共测6次。结果表明每只家兔体温升高均低于0.6℃，并且3只家兔体温升高总和低于1.4℃，说明本发明的注射剂热原限度符合要求，可以安全使用。

⑤、致敏试验

动物：雄性豚鼠，250～350g；药物：本发明的注射剂，牛血清白蛋白；方法：取白色健康雄性豚鼠24只，体重250～350g，随机分为4组，每组6只，分别为本发明的注射剂低剂量组、本发明的注射剂高剂量组、阳性组(牛血清白蛋白)、阴性组(空白乳)。按无菌操作，连续隔日每组分别腹腔注射供试品0.5ml/只，共3次。致敏期间，每日观察每只动物的症状。初次，最后一次致敏和激发当日测定每组每只动物的体重。然后于末次注射后第10天，各组取3只豚鼠，分别静脉注射供试品1ml/只进行激发，给药后立即按全身过敏性反应评级标准详细观察注射后每只动物，症状的出现及消失时间，观察3h，判定豚鼠过敏反应级数。再于首次注射后第21天，各组取另3只豚鼠同法进行激发，进行观察。结果药物组豚鼠的过敏反应呈阴性，表明大蒜油静脉注射亚微乳过敏试验合格，

粒度测定：本发明中应用PSS.NICOMPTM380作为测定粒径的仪器。

另外，本发明的临床应用效果如下：

(一)病例选择：按照原发性支气管肺癌临床诊断标准选择患者60例，其中男女各一半，35-65岁。选择随机对照组60例，其中男女各一半，35-65岁。

(二)实验方法：治疗组：病毒感染方随症加减每日用本发明的药物一剂，水煎服，连用两个月。

对照组：普通药方随症加减每日一剂，水煎服，连用两个月。

(三)实验结果：疗效判断标准：

本治疗组治愈12例，显效31例，好转17例，无效0例。对照组治愈3例，显效18例，好转30例，无效9例。

本发明将技术方案中提到的药物成分在低温状态下利用高频振荡仪进行处理成纳米级，其成品率高，占原料的90％以上。

Claims

1.一种抗原发性支气管病毒的纳米药物组合物，其特征在于：该组合物中主要由以下配方按重量计组成：核桃树枝50～70，黄芩苷10～25，草河车12～25，小蘖碱25～35，表儿茶素25～35，半枝莲25～35，鱼腥草15～25，沙参25～35，丹皮25～35，原儿茶酸15～25。

2.根据权利要求1所述的一种抗原发性支气管病毒的纳米药物组合物的制备方法，其特征在于：该制备方法是按权利要求1所述的各组分按重量进行配比后，在低温状态下利用高频振荡仪进行处理成纳米级，然后再进行加水、搅拌、煎熬、过滤，制备成品。

3.根据权利要求2所述的一种抗原发性支气管病毒的纳米药物组合物的制备方法，其特征在于：该制备方法所述的温度范围在零下-150～-260℃。

4.根据权利要求2所述的一种抗原发性支气管病毒的纳米药物组合物的制备方法，其特征在于：该成品可改变剂型，做成膏、丸及冲剂，或经过滤后提取上清夜制备成注射剂。