CN101851158A

CN101851158A - 一种连续中压柱层析制备高纯度鼠尾草酸的方法

Info

Publication number: CN101851158A
Application number: CN201010184345A
Authority: CN
Inventors: 祖元刚; 杨磊; 祖柏实; 刘芳; 刘婷婷; 马春慧; 赵春建; 孙震; 王涵
Original assignee: Northeast Forestry University
Current assignee: Northeast Forestry University
Priority date: 2010-05-27
Filing date: 2010-05-27
Publication date: 2010-10-06

Abstract

一种连续中压柱层析制备高纯度鼠尾草酸的方法，本方法使用含量不低于15％的鼠尾草酸原料，制备纯度98％以上的鼠尾草酸，将鼠尾草酸粗品用乙酸乙酯溶解，滤除不溶物，得上柱样品，使用硅胶填充柱，将硅胶用乙酸乙酯分散后湿法装柱，上样后以乙酸乙酯为洗脱剂，柱塞式溶剂泵进液，洗脱后的流分分段收集，减压浓缩至干回收洗脱剂，得层析产物，回收的洗脱剂重复使用，层析产物用烃溶剂重结晶，结晶产物减压干燥，可获得纯度98％以上的鼠尾草酸纯品，母液减压回收乙酸乙酯后可做为柱层析原料再次纯化，使用后的层析柱用含乙酸乙酯-乙醇混合溶剂再生，乙酸乙酯为平衡剂平衡，平衡后的层析柱可重复使用，使用次数达30次以上。本方法的主要特点为纯化过程无污染，所有溶剂均可回收使用，便于工业连续化生产。

Description

一种连续中压柱层析制备高纯度鼠尾草酸的方法

所属技术领域：

本发明涉及天然产物化学领域，特别是涉及一种连续中压柱层析制备高纯度鼠尾草酸的方法。

背景技术：

鼠尾草酸(Carnosic acid)是唇形科(Labiatae)迷迭香属迷迭香Rosemary(Rosmarinus officinalis L.)中的主要脂溶性抗氧化成分。迷迭香原产地中海沿岸国家，现在世界各地广为栽培，近年来，在我国广西、云南、浙江、贵州、海南和新疆等地均有大面积种植。鼠尾草酸作为天然脂溶性抗氧化剂广泛应用于药品、食品加工和和化妆品等领域。

公开号为CN1441030的中国专利介绍了一种提取迷迭香天然抗氧化剂的方法，该法直接采用迷迭香鲜草在新鲜状态下经水蒸汽蒸馏得到迷迭香精油及含抗氧化剂的原料；将含抗氧化剂的原料粗粉碎后加入食用级有机溶剂，并以1∶5至1∶3的比例混合于浸提器中，提取迷迭香浸提液，并经浓缩后得浸膏，再进行超临界萃取，高压分离得萃取液，将萃取液回收溶剂，喷雾或冷冻干燥得淡黄色抗氧化剂成品。此法得到的是含有鼠尾草酸抗氧化剂的粗提物，抗氧化活性不强。

公开号为CN1327038的中国专利介绍了超临界CO2反向萃取法提取迷迭香抗氧化剂的方法，该法首先制取迷迭香粗提物，然后将粉碎的粗提物装到多层料筒、放入萃取釜中，在40-60℃，CO2压力10-20MPa下萃取迷迭香精油；然后升高压力到25-35MPa，并加入10-20％乙醇或乙酸乙酯改性剂，提取迷迭香抗氧化剂。最后再用超临界CO2脱除残留溶剂，得迷迭香抗氧化剂产品，纯度95.9％。采用超临界CO2制备含有鼠尾草酸的迷迭香抗氧化剂，仍为鼠尾草酸的粗提物，且目前受设备条件限制，难以扩大生产。

发明内容：

本发明的目的在于提供一种连续中压柱层析制备高纯度鼠尾草酸的方法。

为了达到上述目的，本发明采用的技术方案包括：

使用含量不低于15％的鼠尾草酸原料，制备纯度98％以上的鼠尾草酸，将鼠尾草酸粗品用乙酸乙酯溶解，滤除不溶物，得上柱样品，使用硅胶填充柱，将硅胶用乙酸乙酯分散后湿法装柱，上样后以乙酸乙酯为洗脱剂，柱塞式溶剂泵进液，洗脱后的流分分段收集，减压浓缩至干回收洗脱剂，得层析产物。回收的洗脱剂重复使用，层析产物用烃溶剂重结晶，结晶产物减压干燥，可获得纯度98％以上的鼠尾草酸纯品，母液减压回收乙酸乙酯后可做为柱层析原料再次纯化，使用后的层析柱用含乙酸乙酯-乙醇混合溶剂再生，乙酸乙酯为平衡剂平衡，平衡后的层析柱可重复使用。

硅胶填充柱有效柱长30～350cm，柱直径5～20cm，填充硅胶粒径为100～400目，柱压为0.1～5MPa。所用的硅胶为含水硅胶，含水率3％-12％。

所用的再生剂乙酸乙酯-乙醇混合溶剂的比例为100∶2-100∶15。

每次上柱样品中固形物的质量与柱中硅胶质量之比在1∶15～1∶100之间。

分段收集的流分含量高于92％的进入烃溶剂重结晶过程。

再生剂用量为1～10倍柱体积(BV)，平衡剂用量为5～20倍柱体积(BV)。

烃溶剂为正己烷、环己烷、石油醚和溶剂汽油中的一种。

本发明的优点是：

1.本发明改变了传统的生产工艺，本法的层析柱可重复使用，使用次数达30次以上。

2、纯化过程无污染，所有溶剂均可回收使用，便于工业连续化生产。

具体实施方式：

下面对本发明实施作进一步详细描述：

使用含量不低于15％的鼠尾草酸原料，制备纯度98％以上的鼠尾草酸，将鼠尾草酸粗品用乙酸乙酯溶解，滤除不溶物，得上柱样品，使用硅胶填充柱，将硅胶用乙酸乙酯分散后湿法装柱，上样后以乙酸乙酯为洗脱剂，柱塞式溶剂泵进液，洗脱后的流分分段收集，减压浓缩至干回收洗脱剂，得层析产物，回收的洗脱剂重复使用，层析产物用烃溶剂重结晶，结晶产物减压干燥，可获得纯度98％以上的鼠尾草酸纯品，母液减压回收乙酸乙酯后可做为柱层析原料再次纯化，使用后的层析柱用含乙酸乙酯-乙醇混合溶剂再生，乙酸乙酯为平衡剂平衡，平衡后的层析柱可重复使用。

分段收集的流分含量高于92％的进入烃溶剂重结晶过程。

烃溶剂为正己烷、环己烷、石油醚和溶剂汽油中的一种。

下面，本发明将用实施例进行进一步的说明，但是它并不限于这些实施例的任一个或类似实例。

实施例1：

400g 15％鼠尾草酸粗品搅拌回流溶解于2L乙酸乙酯中，冷却，滤除不溶物，将含水率12％的100～200目硅胶8kg用乙酸乙酯混悬后，驱除气泡，均匀加入到有效柱长350cm，内径5cm的玻璃层析柱中，上述溶解鼠尾草酸的样品用柱塞式溶剂泵上于柱头，然后泵入乙酸乙酯洗脱，分段收集流分，HPLC监测，合并含量92％以上的流出液，减压回收洗脱剂后得层析产物65g，加入石油醚130mL回流溶解，冷却析晶，结晶物再用正己烷重结晶1次，减压过滤，干燥，得鼠尾草酸纯品55g，纯度98.5％，母液减压回收溶剂后得浓缩物作为下次柱层析的原料。含量90％以下的流出液减压回收洗脱剂后得浓缩物也作为下次柱层析的原料，回收的洗脱剂下次重复使用，洗脱后的硅胶柱泵入乙酸乙酯-乙醇(100∶2，v/v)40L再生，然后再泵入60L乙酸乙酯平衡，平衡后的硅胶柱待下次直接使用。

实施例2：

400g 18％鼠尾草酸粗品搅拌回流溶解于2L乙酸乙酯中，冷却，滤除不溶物，将含水率12％的200～300目硅胶8kg用乙酸乙酯混悬后，驱除气泡，均匀加入到有效柱长120cm，内径10cm的玻璃层析柱中，上述溶解鼠尾草酸的样品用柱塞式溶剂泵上于柱头，然后泵入乙酸乙酯洗脱，分段收集流分，HPLC监测，合并含量92％以上的流出液，减压回收洗脱剂后得层析产物68g，加入环己烷130mL回流溶解，冷却析晶，结晶物再用正己烷重结晶1次，减压过滤，干燥，得鼠尾草酸纯品58g，纯度98.4％，母液减压回收溶剂后得浓缩物作为下次柱层析的原料。含量90％以下的流出液减压回收洗脱剂后得浓缩物也作为下次柱层析的原料，回收的洗脱剂下次重复使用，洗脱后的硅胶柱泵入乙酸乙酯-乙醇(100∶15，v/v)40L再生，然后再泵入60L乙酸乙酯平衡，平衡后的硅胶柱待下次直接使用。

实施例3：

80g 16％鼠尾草酸粗品搅拌回流溶解于2L乙酸乙酯中，冷却，滤除不溶物，将含水率12％的300～400目硅胶8kg用乙酸乙酯混悬后，驱除气泡，均匀加入到有效柱长30cm，内径20cm的玻璃层析柱中，上述溶解鼠尾草酸的样品用柱塞式溶剂泵上于柱头，然后泵入乙酸乙酯洗脱，分段收集流分，HPLC监测，合并含量92％以上的流出液，减压回收洗脱剂后得层析产物13g，加入正己烷130mL回流溶解，冷却析晶，结晶物再用正己烷重结晶1次，减压过滤，干燥，得鼠尾草酸纯品10.5g，纯度98.2％，母液减压回收溶剂后得浓缩物作为下次柱层析的原料。含量90％以下的流出液减压回收洗脱剂后得浓缩物也作为下次柱层析的原料，回收的洗脱剂下次重复使用，洗脱后的硅胶柱泵入乙酸乙酯-乙醇(100∶10，v/v)20L再生，然后再泵入30L乙酸乙酯平衡，平衡后的硅胶柱待下次直接使用。

实施例4：

400g 16％鼠尾草酸粗品搅拌回流溶解于2L乙酸乙酯中，冷却，滤除不溶物，将含水率12％的200～300目硅胶6kg用乙酸乙酯混悬后，驱除气泡，均匀加入到有效柱长350cm，内径5cm的玻璃层析柱中，上述溶解鼠尾草酸的样品用柱塞式溶剂泵上于柱头，然后泵入乙酸乙酯洗脱，分段收集流分，HPLC监测，合并含量92％以上的流出液，减压回收洗脱剂后得层析产物65g，加入6^#溶剂油120mL回流溶解，冷却析晶，结晶物再用6^#溶剂油重结晶1次，减压过滤，干燥，得鼠尾草酸纯品57g，纯度98.1％，母液减压回收溶剂后得浓缩物作为下次柱层析的原料。含量90％以下的流出液减压回收洗脱剂后得浓缩物也作为下次柱层析的原料，回收的洗脱剂下次重复使用，洗脱后的硅胶柱泵入乙酸乙酯-乙醇(100∶8，v/v)40L再生，然后再泵入60L乙酸乙酯平衡，平衡后的硅胶柱待下次直接使用。

Claims

1.一种连续中压柱层析制备高纯度鼠尾草酸的方法，本方法使用含量不低于15％的鼠尾草酸原料，制备纯度98％以上的鼠尾草酸，将鼠尾草酸粗品用乙酸乙酯溶解，滤除不溶物，得上柱样品，使用硅胶填充柱，将硅胶用乙酸乙酯分散后湿法装柱，上样后以乙酸乙酯为洗脱剂，柱塞式溶剂泵进液，洗脱后的流分分段收集，减压浓缩至干回收洗脱剂，得层析产物，回收的洗脱剂重复使用，层析产物用烃溶剂重结晶，结晶产物减压干燥，可获得纯度98％以上的鼠尾草酸纯品，母液减压回收乙酸乙酯后可做为柱层析原料再次纯化，使用后的层析柱用含乙酸乙酯-乙醇混合溶剂再生，乙酸乙酯为平衡剂平衡，平衡后的层析柱可重复使用。

2.按照权利要求1所述的连续中压柱层析制备高纯度鼠尾草酸的方法，其特征在于：硅胶填充柱有效柱长30～350cm，柱直径5～20cm，填充硅胶粒径为100～400目，柱压为0.1～5MPa。

3.按照权利要求1所述的连续中压柱层析制备高纯度鼠尾草酸的方法，其特征在于：所用的硅胶为含水硅胶，含水率3％-12％。

4.按照权利要求1所述的连续中压柱层析制备高纯度鼠尾草酸的方法，其特征在于：所用的再生剂乙酸乙酯-乙醇混合溶剂的比例为100∶2-100∶15。

5.按照权利要求1所述的连续中压柱层析制备高纯度鼠尾草酸的方法，其特征在于：每次上柱样品中固形物的质量与柱中硅胶质量之比在1∶15～1∶100之间。

6.按照权利要求1所述的连续中压柱层析制备高纯度鼠尾草酸的方法，其特征在于：分段收集的流分含量高于92％的进入烃溶剂重结晶过程。

7.按照权利要求1所述的连续中压柱层析制备高纯度鼠尾草酸的方法，其特征在于：再生剂用量为1～10倍柱体积(BV)，平衡剂用量为5～20倍柱体积(BV)。

8.按照权利要求1和6所述的连续中压柱层析制备高纯度鼠尾草酸的方法，其特征在于：烃溶剂为正己烷、环己烷、石油醚或溶剂汽油中的一种。