CN101835799A - 超敏反应调节剂 - Google Patents

超敏反应调节剂 Download PDF

Info

Publication number
CN101835799A
CN101835799A CN200880113181A CN200880113181A CN101835799A CN 101835799 A CN101835799 A CN 101835799A CN 200880113181 A CN200880113181 A CN 200880113181A CN 200880113181 A CN200880113181 A CN 200880113181A CN 101835799 A CN101835799 A CN 101835799A
Authority
CN
China
Prior art keywords
ala
leu
glu
gly
peptide
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN200880113181A
Other languages
English (en)
Inventor
迭戈·席尔瓦
大卫·利纳瑞斯·般丁
彼得·J·米尔伯恩
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Australian National University
Original Assignee
Australian National University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from AU2007904591A external-priority patent/AU2007904591A0/en
Application filed by Australian National University filed Critical Australian National University
Publication of CN101835799A publication Critical patent/CN101835799A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/5005—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells
    • G01N33/5008—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics
    • G01N33/5044—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics involving specific cell types
    • G01N33/5047—Cells of the immune system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/02—Peptides of undefined number of amino acids; Derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/55—Protease inhibitors
    • A61K38/57—Protease inhibitors from animals; from humans
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A61P27/14—Decongestants or antiallergics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/16—Otologicals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/08—Antiallergic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/46—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
    • C07K14/47—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2500/00—Screening for compounds of potential therapeutic value
    • G01N2500/04—Screening involving studying the effect of compounds C directly on molecule A (e.g. C are potential ligands for a receptor A, or potential substrates for an enzyme A)

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Ophthalmology & Optometry (AREA)

Abstract

本发明涉及调节免疫反应的肽，所述肽包含对应于Src同源3(SH3)结构域、Src同源2(SH2)结构域或pleckstrin同源(PH)结构域之一的至少一部分的氨基酸序列。

Description

超敏反应调节剂
技术领域
本发明涉及肥大细胞活化调节剂，特别是它们在治疗和预防超敏疾病和病症中的用途。更具体地，本发明涉及能够抑制和/或防止肥大细胞活化的蛋白和肽。
背景
在过去几十年，工业化世界中与超敏反应相关病症的普遍性有显著增加。特别地，最常见类型的超敏反应相关病症，IgE介导的超敏反应，已经在发展中国家影响到超过25％的人群。
超敏反应为免疫反应不适当地起作用的结果，可由很多抗原引起。它们由几种细胞类型释放的炎性介质的组合产生。当IgE反应针对无害的环境抗原如花粉或尘螨时，发生一种形式的超敏反应。作为结果而发生的IgE致敏肥大细胞释放药理学介质产生了急性炎性反应，其具有诸如哮喘或鼻炎的症状。气管炎症为哮喘发病机理的核心，包括募集并活化肥大细胞、嗜酸性粒细胞、嗜中性粒细胞和淋巴细胞进入肺组织和支气管肺泡空间。
肥大细胞被认为是超敏反应中的关键效应子之一。这些细胞遍布整个身体，紧邻血管、神经、黏膜表面和皮肤。在这些部位，它们处于检测抗原并通过它们释放几种炎性介质的能力而引起最早期变应性反应的良好位置。肥大细胞为身体内仅有的表达特异于IgE的受体的细胞之一，IgE为负责出现变应性反应和哮喘的免疫球蛋白。
肥大细胞可通过多种刺激物活化，但是，最明确的是经由抗原与结合至细胞表面其高亲和性受体(FcεRI)的IgE的相互作用。由FcεRIα结合的IgE进行的抗原检测导致受体交联以及随后该相同受体的β和γ亚基的ITAM基序中酪氨酸残基的磷酸化。接下来，FcεRI受体的聚集诱导了复杂的细胞内途径的活化，这涉及到多种细胞相互作用，其最后导致释放预形成的颗粒和分泌类花生酸、细胞因子和趋化因子。肥大细胞活化导致引起全身和/或局部作用的一系列生物化学事件，它们通常在变应性和过敏反应中被观察到。
当前的用于治疗超敏反应相关病症的方法主要包括糖皮质激素类和其它症状缓解药物的组合。不同于直接靶向肥大细胞，这些治疗旨在干扰下游炎性介质的作用。诸如肾上腺皮质激素的抗炎药物以非选择性方式影响到多种细胞功能。因此，长期的类固醇治疗导致的并发症限制了其临床使用。
亟需新的治疗手段来治疗超敏反应相关疾病和病症。特别地，需要新的靶向肥大细胞的治疗手段，以便调节与变应性反应相关的炎性介质的释放。
发明概述
本文描述了之前未知的参与肥大细胞活化和超敏反应发作的基因。这些基因编码的蛋白包含pleckstrin同源(PH)、Src同源2(SH2)或Src同源3(SH3)结构域中的至少一个。这些结构域被认为通过与存在于肥大细胞表面的受体的特异相互作用来调节肥大细胞活化。因此本发明的某些方面和实施方案涉及通过给予含SH2/SH3/PH结构域蛋白来调节肥大细胞活化。本文还描述了能够调节肥大细胞活化的对应SH3和/或PH结构域序列的肽。本文描述的肽提供了治疗和预防超敏疾病和病症的手段。
在第一方面，本发明提供了调节肥大细胞活化的肽，所述肽包含对应以下结构域的至少一部分的氨基酸序列：
(i)Src同源3(SH3)结构域，或
(ii)pleckstrin同源(PH)结构域。
在第一方面的一实施方案中，所述肽包含SEQ ID NO：7所示的氨基酸。
在第一方面的另一实施方案中，所述肽包含SEQ ID NO：8或SEQ IDNOs：14-273中任一所示的氨基酸。
在第一方面的另一实施方案中，所述肽包含SEQ ID NO：11或SEQID NO：12所示的氨基酸。
在第一方面的一实施方案中，所述肽包含SEQ ID NO：10或SEQ IDNOs：274-488中任一所示的氨基酸。
在第一方面的另一实施方案中，所述调节抑制肥大细胞活化。
在第二方面，本发明提供了抑制或预防个体中肥大细胞活化的方法，所述方法包括给予所述个体治疗有效量的蛋白，所述蛋白包含以下至少之一：
(i)Src同源2(SH2)结构域，
(ii)Src同源3(SH3)结构域，
(iii)pleckstrin同源(PH)结构域，
(iv)权利要求1-5中任一项所述的肽。
在第二方面的一实施方案中，所述肥大细胞活化为IgE介导的。
在第二方面的另一实施方案中，所述肥大细胞活化为非IgE介导的。
在第三方面，本发明提供了治疗或预防个体中超敏疾病或病症的方法，所述方法包括向所述个体给予治疗有效量的蛋白，所述蛋白包含以下至少之一：
(i)Src同源2(SH2)结构域，
(ii)Src同源3(SH3)结构域，
(iii)pleckstrin同源(PH)结构域，
(iv)权利要求1-5中任一项所述的肽。
在第三方面的一实施方案中，所述超敏疾病或病症包括肥大细胞活化。
在第三方面的另一实施方案中，所述超敏疾病或病症包括炎性反应。
在第三方面的另一实施方案中，所述超敏疾病或病症可以为过敏反应、药物反应、皮肤变应性、湿疹、变应性鼻炎、荨麻疹、特应性皮炎、变应性接触过敏、食物变应性、变应性结膜炎、昆虫毒液变应性以及呼吸疾病和病症。该呼吸疾病或病症可以为哮喘、变应性哮喘、内源性哮喘、职业性哮喘、急性呼吸窘迫综合征(ARDS)以及慢性阻塞性肺病(COPD)。
在第四方面，本发明提供了调节个体中免疫反应的方法，所述方法包括向所述个体给予治疗有效量的蛋白，所述蛋白包含以下至少之一：
(i)Src同源2(SH2)结构域，
(ii)Src同源3(SH3)结构域，
(iii)pleckstrin同源(PH)结构域，
(iv)权利要求1-5中任一项所述的肽。
在第四方面的一实施方案中，所述蛋白为NEDD9。
在第四方面的一实施方案中，所述蛋白为PHLDA1。
在第五方面，本发明提供了抑制或预防个体中肥大细胞活化的方法，所述方法包括给予所述个体治疗有效量的肽，所述肽包含对应以下结构域的至少一部分的氨基酸序列：
(i)Src同源3(SH3)结构域，或
(ii)pleckstrin同源(PH)结构域。
在第六方面，本发明提供了治疗或预防个体中超敏疾病或病症的方法，所述方法包括给予所述个体治疗有效量的肽，所述肽包含对应以下结构域的至少一部分的氨基酸序列：
(i)Src同源3(SH3)结构域，或
(ii)pleckstrin同源(PH)结构域。
在第六方面的一实施方案中，所述超敏疾病或病症包括肥大细胞活化。
在第六方面的另一实施方案中，所述超敏疾病或病症包括炎性反应。
在第六方面的其它实施方案中，所述超敏疾病或病症选自过敏反应、药物反应、皮肤变应性、湿疹、变应性鼻炎、荨麻疹、特应性皮炎、变应性接触过敏、食物变应性、变应性结膜炎、昆虫毒液变应性以及呼吸疾病和病症。该呼吸疾病或病症可以为哮喘、变应性哮喘、内源性哮喘、职业性哮喘、急性呼吸窘迫综合征(ARDS)以及慢性阻塞性肺病(COPD)。
在第七方面，本发明提供了调节个体中免疫反应的方法，所述方法包括向所述个体给予治疗有效量的肽，所述肽包含对应以下结构域的至少一部分的氨基酸序列：
(i)Src同源3(SH3)结构域，或
(ii)pleckstrin同源(PH)结构域。
在第五、第六和第七方面的一实施方案中，所述肽包含SEQ ID NO：7所示的氨基酸序列或变体。
在第五、第六和第七方面的其它实施方案中，所述肽包含SEQ ID NO：8所示的氨基酸序列或变体。
在第五、第六和第七方面的另一实施方案中，所述肽包含SEQ ID NO：11所示的氨基酸序列。
在第五、第六和第七方面的又一实施方案中，所述肽包含SEQ ID NO：12所示的氨基酸序列或变体。
在第八方面，本发明提供了抑制肥大细胞活化的方法，所述方法包括抑制
(i)NEDD9蛋白Src同源3(SH3)结构域
(ii)PHLDA1蛋白pleckstrin同源(PH)结构域之一或二者结合至肥大细胞受体。
在第九方面，本发明提供了治疗或预防个体中超敏疾病或病症的方法，所述方法包括抑制
(i)NEDD9蛋白Src同源3(SH3)结构域
(ii)PHLDA1蛋白pleckstrin同源(PH)结构域之一或二者结合至肥大细胞受体。
在第八和第九方面的一实施方案中，所述抑制包括给予包含对应NEDD9蛋白Src同源3(SH3)结构域或PHLDA1蛋白pleckstrin同源(PH)结构域的至少一部分的氨基酸序列的肽。该肽可以包含SEQ ID NO：7或SEQ ID NO：8所示的氨基酸序列。该肽可以包含选自SEQ ID NO：10、SEQID NO：11和SEQ ID NO：12的氨基酸。
在第十方面，本发明提供了包含
(i)Src同源2(SH2)结构域，
(ii)Src同源3(SH3)结构域，
(iii)pleckstrin同源(PH)结构域，
(iv)权利要求1-5中任一项所述的肽中至少之一的蛋白在制备用于治疗超敏疾病或病症的药物中的用途。
在第十方面的一实施方案中，所述蛋白为NEDD9。
在第十方面的另一实施方案中，所述蛋白为PHLDA1。
在第十一方面，本发明提供了包含对应
(i)Src同源3(SH3)结构域，或
(ii)pleckstrin同源(PH)结构域的至少一部分的氨基酸序列的肽在制备治疗超敏疾病或病症的药物中的用途。
在第十一方面的一实施方案中，所述肽包含选自SEQ ID NO：7、SEQID NO：8、SEQ ID NO：11和SEQ ID NO：12的氨基酸序列。
在第十和第十一方面的一实施方案中，所述超敏疾病或病症选自过敏反应、药物反应、皮肤变应性、湿疹、变应性鼻炎、荨麻疹、特应性皮炎、变应性接触过敏、食物变应性、变应性结膜炎、昆虫毒液变应性以及呼吸疾病和病症。所述呼吸疾病或病症可以为哮喘、变应性哮喘、内源性哮喘、职业性哮喘、急性呼吸窘迫综合征(ARDS)以及慢性阻塞性肺病(COPD)。
在第十二方面，本发明提供了用于治疗超敏疾病或病症的蛋白，其包含以下至少之一：
(i)Src同源2(SH2)结构域，
(ii)Src同源3(SH3)结构域，
(iii)pleckstrin同源(PH)结构域，
(iv)权利要求1-5中任一项所述的肽
在第十三方面，本发明提供了用于治疗超敏疾病或病症的肽，其包含对应于以下结构域的至少一部分的氨基酸序列：
(i)Src同源3(SH3)结构域，或
(ii)pleckstrin同源(PH)结构域。
在第十四方面，本发明提供了鉴定调节包含Src同源2(SH2)结构域、Src同源3(SH3)结构域或pleckstrin同源(PH)结构域至少之一的蛋白的活性的试剂的方法，所述方法包括：
(a)让候选试剂与所述蛋白在适合于允许所述候选试剂与所述蛋白相互作用的条件下接触；以及
(b)测定所述蛋白的活性。
在第十五方面，本发明提供了筛选多种候选试剂以鉴定调节包含Src同源2(SH2)结构域、Src同源3(SH3)结构域或pleckstrin同源(PH)结构域至少之一的蛋白的活性的试剂的方法，所述方法包括：
(a)让多种候选试剂与所述蛋白在适合于允许所述候选试剂与所述蛋白相互作用的条件下接触；以及
(b)测定所述蛋白的活性。
在第十四和第十五方面的一实施方案中，所述蛋白为NEDD9或PHLDA1。
在第十四和第十五方面的另一实施方案中，测定所述蛋白的活性包括测量肥大细胞活化的水平。
在第十四和第十五方面的其它实施方案中，所述候选试剂为所述蛋白的激动剂。
在第十四和第十五方面的其它实施方案中，所述候选试剂为所述蛋白的激动剂。
缩写
BMMC        骨髓来源肥大细胞
DEAE葡聚糖  二乙基氨基乙基葡聚糖
DNA         脱氧核糖核酸
DNP-IgE     抗二硝基酚免疫球蛋白E
dsRNA       双链RNA
Fc          恒定片段
FcεRI      Fcε受体I，高亲和性IgE受体
FcεRIα    高亲和性IgE受体的α亚基
FcγR       Fcγ受体
Fyn         酪氨酸蛋白激酶Fyn
IgE         免疫球蛋白E
IgG         免疫球蛋白G
IL-10       白介素10
ITAM        基于免疫受体酪氨酸的活化基序
kg          千克
LAMP-1        脂质体相关膜蛋白-1
LAMP-2        脂质体相关膜蛋白-1
Lck           淋巴细胞特异的蛋白酪氨酸激酶
Lyn           蛋白酪氨酸激酶Lyn
m             米
mg            毫克
mRNA          信使核糖核酸
NEDD9         神经前体细胞表达的发育下调基因9
PH            pleckstrin同源
PHLDA1        pleckstrin同源样结构域家族A成员1
PHRIP         富含脯氨酸和组氨酸蛋白
RBL-2H3细胞   大鼠嗜碱性粒细胞性白血病2H3细胞
RNA           核糖核酸
SDS-PAGE      十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳
SH2           Src同源2结构域
SH3           Src同源3结构域
siRNA         小抑制RNA
TDAG51        T细胞死亡相关基因51
定义
下文为一些定义，它们可能对于理解本发明的描述有帮助。它们旨在作为一般性定义，不应将本发明的范围仅限制于这些术语，它们是为了更好地理解以下描述而提供。
除上下文另有要求或明确指出相反含义，本文中作为单数整数、步骤或元件陈述的整数、步骤或元件显然包括所陈述的整数、步骤或元件的单数和复数形式。
在整个本说明书中，除非上下文另有要求，措辞“包括(comprise)”或诸如“comprises”和“comprising”的变型应理解为暗指包含所述步骤或元件或整数或成组的步骤或元件或整数，但是不排除任何其它步骤或元件或整数或成组的元件或整数。因而，在说明书上下文中，措辞“包括(comprising)”指“主要包括，但不必仅包括”。
用在本文时，“试剂”在其范围内包括任何天然或制造的元素或化合物。因此，该术语包括但不限于任何：化学元素和化合物、核酸、氨基酸、多肽、蛋白、抗体和抗体片段，以及其它的可能在本发明上下文中合适的物质。
用在本文时，术语“调节(modulating)”、“调节(modulates)”及其变型指，在本发明的特定调节分子或试剂存在下，分子的活性、产生、分泌或功能水平与该调节分子或试剂不存在下的其活性、产生、分泌或其它功能水平相比增加或降低。这些术语不隐含对增加或降低的量化。调节可以是任何足以产生期望结果的数量，并且可以是直接的或间接的。
用在本文时，术语“免疫调节剂”指一种或多种细胞类型分泌的且在免疫反应的活化、维持、成熟、抑制、遏制或增强中起作用的分子介质。
用在本文时，术语“含SH2/SH3/PH结构域蛋白”指含有以下一种或多种结构域的蛋白：
(a)至少一个Src同源2(SH2)结构域，
(b)至少一个Src同源3(SH3)结构域，
(c)至少一个pleckstrin同源3(PH)结构域。
因此，含SH2/SH3/PH结构域蛋白包括这样的蛋白，其仅具有一个或多个SH2结构域，仅具有一个或多个SH3结构域，仅具有一个或多个PH结构域，具有一个或多个SH2结构域和一个或多个SH3结构域，具有一个或多个SH3结构域和一个或多个PH结构域，或具有一个或多个SH2和一个或多个SH3结构域以及一个或多个PH结构域。
用在本文时，术语“肥大细胞活化途径”在其范围内包括导致肥大细胞活化的发生在肥大细胞内或表面上的生物学过程中的所有组分和步骤。一般地，肥大细胞的活化可以从外部刺激物开始，导致细胞内信号级联，其涉及一系列的细胞蛋白，例如磷酸酶、激酶以及接头/调节因子，其引起肥大细胞活化。
用在本文时，术语“给予(administering)”以及该术语的包括“administer”和“administration”在内的变型包括通过任何适当的手段让本发明的化合物或组合物与有机体接触、或将其涂、输送或提供至有机体。
用在本文时，术语“抗体”包括IgG(包括IgG1、IgG2、IgG3和IgG4)、IgA(包括IgA1和IgA2)、IgD、IgE、或IgM、以及IgY，完整抗体，包括单链完整抗体，及其抗原结合片段。抗原结合抗体片段包括，但不限于，Fab、Fab′和F(ab′)2、Fd、单链Fvs(scFv)、单链抗体、二硫化物连接的Fvs(sdFv)和包含VL或VH结构域的片段。抗体可以为任何动物来源的。包括单链抗体在内的抗原结合抗体片段可以仅包含可变区或连同完整或部分的以下成分：铰链区、CH1、CH2和CH3结构域。还包括可变区和铰链区、CH1、CH2和CH3结构域的任何组合。抗体可以是单克隆的、多克隆的、嵌合的、多特异性的、人源化的、以及人单克隆和多克隆抗体，其特异结合生物学分子。
用在本文时，术语“核酸”指单链或双链形式的脱氧核糖核苷酸或核糖核苷酸聚合物，除非另有说明，还包括以类似于天然存在核苷酸的方式与核酸杂交的天然核苷酸的已知类似物。
用在本文时，术语“多肽”或“肽”指通过肽键连接在一起的由氨基酸构成的聚合物。术语“多肽”和“肽”在本文中可互换使用，尽管出于本发明的目的，“多肽”可以构成全长蛋白的一部分。
用在本文时，术语“多核苷酸”指脱氧核糖核苷酸、核糖核苷酸碱基或已知类似物或天然核苷酸或其混合物的单或双链聚合物。
用在本文时，遍及说明书使用的术语“突变”旨在包括任何和所有类型的功能性和/或非功能性核酸变化，包括与存在于样品中的相同核酸区域或等位基因或更常见的核酸分子相比时，靶核酸分子中的突变和多态性。这类变化包括但不限于一个或多个核苷酸的删除、插入、易位、倒位和碱基取代。
用在本文时，术语“多态性”指群体内基因组中基因的序列内的变异，例如等位基因变异和其它出现的或观察到的变异。遗传多态性指可作为核苷酸碱基对差异、可变mRNA剪接或翻译后修饰包括例如糖基化结果的基因序列变异形式。因此，多态性指群体内出现两个或更多个遗传上确定的可选序列或等位基因。这些差异可出现在基因组的编码和非编码部分，并且可作为差异而显露或检测到，所述差异在于核酸序列、基因表达，例如包括转录、加工、翻译、输送、蛋白加工、运输、DNA合成、表达的蛋白、其它基因产物或生化途径的产物或翻译后修饰以及任何其它显露的差异。
用在本文时，术语“治疗”指任何以及所有的应用，其补救疾病状态或症状，或以任何其它方式预防、阻止、延缓或逆转疾病进展或其它不希望的症状。
用在本文时，术语“个体”包括人和社会、经济或研究上重要的任何哺乳动物物种的个体，包括但不限于以下属：绵羊、牛、马、猪、猫、犬、灵长类和啮齿类的成员。在一实施方案中，该哺乳动物为人。
用在本文时，术语“有效量”和“治疗有效量”在其含义内包括无毒性但足够提供期望治疗效果的量的药物或化合物。所需的确切量随个体不同而变化，这取决于一些因素，例如所治疗的物种、个体的年龄和总体状况、所治疗状况的严重性、所给予的具体药物和给药模式等。因此，不可能指出确切的“有效量”。但是，对于任何给定病例，本领域普通技术人员可以仅采用任何常规实验来确定适当的“有效量”。
本领域技术人员会意识到，本文描述的发明可能有不同于所具体描述内容的变型和改动。应理解本发明包括所有的这类变型和改动。本发明还包括本说明书中个别或共同提及的或指出的所有步骤、特征、组合物和化合物，以及任何和所有组合的或任意两种或更多种的所述步骤或特征。
包括在本说明书中的任何对文献、决议、原料、设备、制品等的讨论仅出于为本发明提供背景的目的。不应认为是承认任何或所有的这些材料形成了现有技术基础的一部分或者为本发明相关领域中在本申请优先权日之前所共知的一般知识。出于描述目的，将本文中提及的所有文献通过引用并入。
附图简要说明
图1A显示人肥大细胞应答IgE刺激的NEDD9相对基因表达时间进程。
图1B显示人肥大细胞应答IgE刺激的PHLDA1相对基因表达时间进程。
图1C显示小鼠肥大细胞应答IgE刺激的NEDD9相对基因表达时间进程。
图1D显示小鼠肥大细胞应答IgE刺激的PHLDA1相对基因表达时间进程。
图2A显示RBL-2H3细胞应答IgE刺激的相对NEDD9mRNA表达。结果表示为相对于未处理样品值的相对倍数变化。
图2B显示RBL-2H3细胞应答离子霉素(ionomycin)刺激的相对NEDD9mRNA表达。结果表示为相对于未处理样品值的相对倍数变化。
图2C显示RBL-2H3细胞应答IgE刺激的相对PHLDA1 mRNA表达。结果表示为相对于未处理样品值的相对倍数变化。
图2D显示RBL-2H3细胞应答离子霉素刺激的相对PHLDA1 mRNA表达。结果表示为相对于未处理样品值的相对倍数变化。
图3显示在3种不同的靶向NEDD9基因表达的siRNAs存在下，与IgE孵育30分钟的RBL-2H3细胞中肥大细胞脱粒百分比。不靶向任何基因的另外siRNA用作对照。
图4A显示与阴性siRNA/DNP-IgE对照相比，给予针对NEDD9的siRNA与DNP-IgE的组合后，在Lewis大鼠中通过Evan蓝恢复测量的肥大细胞脱粒程度。
图4B显示与阴性siRNA/DNP-IgE对照相比，给予针对PHLDA1的siRNA与DNP-IgE的组合后，在Lewis大鼠中通过Evan蓝恢复测量的肥大细胞脱粒程度。
图5显示智人(Homo sapiens)(HS)、小家鼠(Mus musculus)(MM)、褐家鼠(Rattus norvegicus)(RN)、黑猩猩(Pan troglodytes)(PT)、欧洲牛(Bostaurus)(BT)、家犬(Canis familiaris)(CF)和红原鸡(gallus gallus)(GG)中NEDD9 SH3结构域的氨基酸序列比对。突出显示的残基指出推测的活性位点(HS、MM、RN、PT和BT中氨基酸9-28；CF中氨基酸残基41-60；GG中氨基酸残基41-59)。
图6为显示活RBL-2H3细胞中生物素化MDD1摄取的柱状图，在以链霉亲和素-APC细胞内染色后通过FACS检测。生物素化MDD1以0.001mMMDD1(2)、0.01mM MDD1(3)或0.1mM MDD1(4)的浓度给予细胞。对照细胞仅给予PBS(1)。
图7显示MDD1肽对IgE受体交联后RBL-2H3细胞脱粒的影响。(1)仅IgE包被(2)IgE包被+IgE受体交联(3)MDD1肽(0.01mM)预处理+IgE包被+IgE受体交联(4)SCR肽0.01mM预处理+IgE包被+IgE受体交联。
图8显示MDD1肽对卵清蛋白抗原(OVA)致敏小鼠肺功能的影响。对经OVA鼻内激发以诱导哮喘的小鼠，以8mg/kg静脉内共给予MDD1肽(A)或以1mg/ml鼻内雾化共给予MDD1肽(B)。通过体积描记法测量肺阻力。RL：非阻力。
图9显示哮喘诱导后OVA致敏小鼠中的炎性反应水平。通过以β-乙酰甲胆碱激发，在经盐水、SCR对照肽或MDD1肽预处理的OVA致敏小鼠中诱导哮喘。(A)％血液中嗜酸性粒细胞(B)支气管肺泡灌洗液中总细胞数(C)炎性病症处的TNF表达和(D)血清中抗原特异IgE的水平。
图10显示MDD1肽的局部给药稳定衍生自IgE受体交联后IgE致敏小鼠的耳活检组织的皮肤肥大细胞。小鼠左(L)耳仅以DMSO处理。右(L)耳以MDD1肽/DMSO或地塞米松/DMSO的混合物处理。
图11显示MPX741和MPX742肽对IgE受体交联后RBL-2H3细胞脱粒的影响。(1)仅IgE包被(2)IgE包被+IgE受体交联(3)MPX741肽(0.01mM)预处理+IgE包被+IgE受体交联(4)MPX742肽0.01mM预处理+IgE包被+IgE受体交联。
详细说明
细胞内信号转导为导致细胞活化的有序级联事件。在大多数真核细胞中，这由主要由磷酸酶、激酶和接头/调节因子组成的复杂蛋白网络所推动。通过促进关键信号分子相互作用，接头分子在细胞内信号途径中起了必不可少的作用。接头分子内的特异结构域负责促进蛋白相互作用。这包括Src同源(SH)结构域(例如Src同源2(SH2)和Src同源3(SH3)结构域)和pleckstrin同源(PH)结构域。在细胞内信号事件期间，Src同源结构域结合含磷酸酪氨酸的蛋白，触发一系列的事件，导致对含pleckstrin同源(PH)结构域的蛋白的募集。对含PH结构域蛋白的募集又催化二级信使的产生，有助于信号级联的持续。
如本文所描述的，在肥大细胞活化期间，编码含SH2/SH3/PH结构域的蛋白的多个不同基因的表达改变了。确定在肥大细胞活化期间具有改变的表达的基因有NEDD9和PHLDA1，与静息细胞相比，在活化的骨髓来源人肥大细胞中它们的表达都被上调。
人NEDD9基因(神经前体细胞表达的发育下调基因9)(GenBank IDs：NM_006403.2和NM_182966.2，Ensembl ID：ENSG00000111859，Entrez基因ID 4739和Uniprot ID Q14511)，也称为CasL(Crk相关底物淋巴细胞类型)和HEF1(人成丝增强子1)，编码表达未加工的834氨基酸前体蛋白。NEDD9为多功能的锚定蛋白，参与传播细胞内信号，并在多种组织内的细胞核、细胞质和诸如高尔基体和板状伪足的结构中表达。NEDD9含有SH3结构域和富含SH2结合位点的结构域。这些结构域有利于与Lck、Lyn和Fyn以及其它细胞内伙伴的高选择性相互作用，其中Lck、Lyn和Fyn为位于包括T细胞、B细胞和Fc受体在内的表面受体下游的重要细胞内角色。
PHLDA1(Pleckstrin同源样结构域，家族A，成员1)(GenBank ID：NM_007350，Ensembl基因ID：ENSG00000139289，Entrez基因ID：22822)编码蛋白PHLDA1(Uniprot ID：Q8WV24)，也称为PHLA1、TDAG51(T细胞死亡相关基因51)和PHRIP(富含脯氨酸和组氨酸的蛋白)。PHLDA1含有pleckstrin同源(PH)结构域。PH结构域以高亲和力结合限制于细胞膜的磷酸肌醇(磷脂酰肌醇的磷酸化衍生物)。通过结合磷酸肌醇，含PH结构域蛋白通常被募集至细胞膜，然后在这里它们在细胞信号转导中发挥功能。
在某些方面和实施方案中，本发明提供了能够调节肥大细胞活化的肽。这些肽包含对应SH3结构域序列和/或PH结构域序列的至少一部分的序列。优选地，该SH3结构域为NEDD9SH3结构域。优选地，该PH结构域为PHLDA1 PH结构域。在本发明的其它方面和实施方案中，提供了含SH2/SH3/PH结构域蛋白，它们也能够调节肥大细胞活化。
不限制于特定机制，认为含SH2/SH3/PH结构域蛋白(例如NEDD9和PHLDA1)通过它们的SH2结构域、SH3结构域和/或PH结构域结合至在肥大细胞内部具有对应结合结构域的特异靶蛋白而调节肥大细胞活性。相应地，本发明的含SH2/SH3/PH结构域蛋白和肽可以减弱、增强、阻止或以其它方式改变SH2结构域、SH3结构域或PH结构域与位于肥大细胞表面受体下游重要细胞内角色如Lck、Lyn和Fyn的相互作用。因此，可以以本发明的肽和含SH2/SH3/PH结构域蛋白给药来调节肥大细胞活化，从而提供治疗和/或预防超敏疾病和病症的手段。
含SH2/SH3/PH结构域蛋白和竞争肽
本文描述能够调节肥大细胞活化的含SH2/SH3/PH结构域蛋白。根据本发明的方面和实施方案，能够调节肥大细胞活化的蛋白包含SH2、SH3或PH结构域的至少之一。适合的含SH2/SH3/PH结构域蛋白的实例包括但不限于NEDD9和PHLDA1。
在本说明书上下文中，应理解NEDD9蛋白包括该包含SH3结构域的蛋白的所有变体和亚型。NEDD9蛋白的亚型例如包括亚型1(Q14511)(REFSEQ登记号NM_006403.2)、亚型2(UniProt：Q5XKI0)、亚型CRA_a(UniProt识别号Q5T9R4)、和亚型CRA_c(REFSEQ：EAW55302.1)。其它的NEDD9蛋白变体例如列在UniProt数据库中，包括蛋白(UniProt：Q5TI59)。也涉及源自翻译后修饰的NEDD9蛋白，例如亚型1蛋白p115、p105、p65和p55。
类似地，在本说明书上下文中，应理解PHLDA1蛋白包括该包含PH结构域的蛋白的所有变体和亚型。因此，PHLDA1蛋白可以由Entrez GeneID 22822描述的PHLDA1基因(Pleckstrin同源样结构域家族A成员1)编码，其表达产生5913核苷酸的转录本(参见NCBI REFSEQ登记号NM_007350)，并且例如可翻译成REFSEQ：NP_031376、REFSEQ：EAW97312.1或UniProt识别号Q8WV24指出的蛋白。也涉及Entrez数据库中变体PHLDA1 CRA_a(例如REFSEQ：AAH18929.3、AAI10821.1和AI26426.2)编码的PHLDA1蛋白。
本发明的含SH2/SH3/PH结构域蛋白可以具有，但不限于，SEQ IDNO：2或SEQ ID NO：4所示的多肽序列。编码本发明的含SH2/SH3/PH结构域蛋白的多核苷酸序列可以为SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：3所示，或显示出足够的序列一致性以至于与SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：3所示的序列杂交。在可选择实施方案中，编码本发明的含SH2/SH3/PH结构域蛋白的多核苷酸序列可以与SEQ ID NO：1所示的序列和/或SEQ IDNO：3所示的序列有至少40％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％的一致性。
根据其它方面和实施方案，本发明的含SH2/SH3/PH结构域蛋白可以具有但不限于SEQ ID NO：6所示的多肽序列。编码本发明的含SH2/SH3/PH结构域蛋白的多核苷酸序列可以为SEQ ID NO：5所示，或显示足够的序列一致性以至于与SEQ ID NO：5的序列杂交。在可选择实施方案中，编码本发明的含SH2/SH3/PH结构域蛋白的多核苷酸的核苷酸序列可以与SEQ ID NO：5所示的序列有至少40％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％的一致性。
本文描述了包含对应于SH3结构域的至少一部分的序列的肽。优选地，该SH3结构域为NEDD9SH3结构域。本文还描述了包含对应于PHLDA1蛋白PH结构域的至少一部分的序列的肽。本发明的肽可以认为是“竞争肽”，因为它们的序列至少部分对应于部分或全部NEDD9SH3结构域，或部分或全部PHLDA1PH结构域。根据某些方面和实施方案，本发明的肽可以具有SEQ ID NO：7、SEQ ID NO：8、SEQ ID NO：10、SEQID NO：11、SEQ ID NO：12和SEQ ID NO：13所示的序列。
根据其它方面和实施方案，本发明的肽可以具有SEQ ID NOS：14-273中任一所示的序列。
根据其它方面和实施方案，本发明的肽可以具有SEQ ID NOS：274-488中任一所示的序列。
一般而言，本发明的蛋白和为分离或纯化形式。
应理解，包括在本发明的含SH2/SH3/PH结构域蛋白和肽范围内的有其变体和片段。用在本文时，术语“变体”指基本上相似的序列。通常，如果两序列在特定区域上或未明确指出时在整个序列上具有特定百分比的相同氨基酸残基或核苷酸(“序列一致性”百分比)，则该两序列为“基本上相似的”。因此，本文公开的多核苷酸和多肽序列的“变体”与参照序列有至少40％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、83％、85％、88％、90％、93％、95％、96％、97％、98％或99％的序列一致性。
通常，序列变体具有共同的定性生物学活性。多核苷酸序列变体一般编码这样的多肽，它们一般具有共同的定性生物学活性。本发明的含SH2/SH3/PH结构域蛋白和竞争肽的同源物也包括在术语“变体”的含义之内。同源物通常来自不同科、属或种，其具有与本文公开的对应的含SH2/SH3/PH结构域蛋白或竞争肽基本上相同的生物学功能或活性。例如，含SH2/SH3/PH结构域蛋白或竞争肽同源物可以包括，但不限于源自其它不同的哺乳动物物种的那些。
另外，术语“变体”也包括本发明的含SH2/SH3/PH结构域蛋白和肽的类似物。多肽“类似物”为这样的多肽，其为本发明的含SH2/SH3/PH结构域蛋白的衍生物或本发明的肽的衍生物，该衍生物包括添加、删除、置换一个或多个氨基酸，以至于该蛋白/肽基本上保留了相同功能。术语“保守氨基酸置换”指在本发明的含SH2/SH3/PH结构域蛋白多肽链或本发明的肽内以一个氨基酸置换或替换另一具有类似性能的氨基酸。
例如，以带电氨基酸谷氨酸(Glu)置换类似的带电氨基酸天冬氨酸(Asp)为保守氨基酸置换。氨基酸添加可以产生自本发明的多肽与另一多肽或肽的融合，所述另一多肽或肽如多组氨酸标签、麦芽糖结合蛋白融合蛋白、谷胱甘肽S转移酶融合蛋白、绿色荧光蛋白融合蛋白，或产生自添加表位标签如FLAG或c-myc。
通常，可以改变本文描述的蛋白和肽的性能和特征，以便使得更适合特定治疗应用。可以被改善的这类性能和特征的非限定性实例包括但不限于溶解性、化学和生物学稳定性、细胞摄取、毒性、免疫原性以及降解产物的排泄。可以改善本文描述的肽的特征和性能的方法和手段为本领域所公知。例如，一种手段是搜寻并鉴定对特定性能为负面或正面决定基(determinant)的特定氨基酸残基。这可以例如通过采用侧链截短(side-chain amputation)技术来实现，其中沿肽序列以原始型残基(prototypic residue)L-丙氨酸一次一个地置换氨基酸。弄清关键决定位点为生成和测试在鉴定位点具有天然和非天然氨基酸置换的变体提供了基础。显示出期望的特征的先导肽可以用作设计具有改善的稳定性和药代动力学性能的模拟态分子的模板。这种方法采用合理设计和分子模型指导的结构修饰。这些包括但不限于构象限制的建筑块以及肽键等排物(参见，例如，Vagner et al，2008，“Peptidomimetics，a synthetic tool of drugdiscover(模拟肽，药物开发的合成工具)”，Current Opinion in ChemicalBiology，12：292-296.)。
两序列之间的序列一致性百分比可以通过在比较窗口中比较两最佳比对的序列来确定。比较窗口内的序列部分可以例如相对于参照序列(例如，本文公开的含SH2/SH3/PH结构域蛋白或肽的多核苷酸或多肽序列)包括删除或添加(即空位)(该参照序列不包括删除或添加)，以便最佳比对两序列。接着可这样计算序列一致性百分比：确定两序列中均存在相同核酸碱基或氨基酸残基的位置的数量，以得到匹配位置数量，以匹配位置数量除以比较窗口内的位置总数并将结果乘以100，得到序列一致性百分比。
对于两个或更多个核酸或多肽序列，序列一致性百分比指，当在比较窗口针对最大对应比较并比对时，或采用以下的序列比较算法之一测量或通过手工比对并肉眼检查而指定区域时，在指定区域上(或者，当未指定时，在整个序列上)相同的氨基酸残基或核苷酸的特定百分比。
对于序列比较，典型地是，一个序列用作参照序列，测试序列与其比较。当采用序列比较算法时，将测试和参照序列输入计算机，视情况指定亚序列坐标，并且指定序列算法程序参数。可使用默认程序参数，或者可指定可选择参数。然后，序列比较算法基于程序参数计算测试序列相对于参照序列的百分比序列一致性。用于比较的序列比对方法在本领域中是公知的。可采用已知的计算机程序常规确定用于比较的序列的最佳比对，这些程序包括但不限于：PC/Gene程序中的CLUSTAL(可从Intelligenetics，Mountain View，California获得)；ALIGN程序(2.0版)以及GCG Wisconsin遗传学软件包，第10版(可从Accelrys Inc.，9685Scranton Road，San Diego，California，USA获得)中的GAP、BESTFIT、BLAST、FASTA和TFASTA。BESTFIT程序(Wisconsin序列分析包，Unix第8版，Genetics Computer Group，University Research Park，575 ScienceDrive，Madison，Wis.53711)。BESTFIT使用Smith和Waterman的局部同源算法以发现两序列之间的最佳同源片段(Advances in AppliedMathematics 2：482-489(1981))。当采用BESTFIT或任何其它序列比对程序来确定两序列之间的同源程度时，可以设置参数以使得一致性百分比在参照序列的全长上计算，以及允许至多参照序列中核苷酸或氨基酸残基总数的5％的同源空位。
GAP采用Needleman和Wunsch(1970)J.Mol.Biol.48：443-453中描述的算法来发现匹配数最大化且空位数最小化的两完整序列比对。GAP考虑所有可能的比对和空位位置，并生成具有最大数量的匹配碱基和最少空位的比对。它允许提供空位生成罚分和以匹配碱基为单位的空位延伸罚分。GAP显示最佳比对家族的一个成员。
确定查询序列和目标序列之间的最佳整体匹配的另一方法，也称为全局序列比对，可采用基于Brutlag及其同事的算法的FASTDB计算机程序(Comp.App.Biosci.6：237-245(1990))来确定。在序列比对中，查询和目标序列都为DNA序列。可通过将U转变为T来比较RNA序列。所述全局序列比对的结果示为百分比一致性。
BLAST和BLAST 2.0算法可以用来确定百分比序列一致性和序列相似性。它们分别在Altschul et al.(1977)Nuc.Acids Res.25：3389-3402和Altschul et al(1990)J.Mol.Biol.215：403-410中有说明。用于进行BLAST分析的软件为公众可从National Center for Biotechnology Information(国家生物技术信息中心)获得的。这种算法包括首先鉴定高得分序列对(HSPs)，这通过在查询系列中鉴定长度W的短字(short words)来进行，当在数据库序列中与相同长度的字比对时，它们或者匹配或者满足某种正值的阈值得分T。T称为邻字得分阈值(neighbourhood word score threshold)(Altschul et al，同上)。这些最初的邻字命中用作起始查询的种子以发现含有它们的更长HSPs。这些字命中沿每一序列双向延伸，只要累积比对得分可增加。对于核苷酸序列，累积得分采用参数M(对于成对的匹配残基的奖赏分；总是＞0)和N(对于错配残基的罚分；总是＜0)计算。对于氨基酸序列，得分矩阵被用于计算累积得分。当出现以下情况时，每一方向上的字命中延伸停止：累积比对得分从其最大获得值减小数量X；由于一个或多个负分残基比对积累导致累积得分变为零或以下；或到达任一序列的末端。该BLAST算法参数W、T和X确定比对的灵敏度和速度。BLASTN程序(用于核苷酸序列)采用默认字长(W)11，期望值(E)10，M＝5，N＝-4，以及两条链比较。对于氨基酸序列，BLASTP程序采用默认字长3，期望值(E)10，以及BLOSUM62得分矩阵(参见Henikoff andHenikoff(1989)Proc.Natl，Acad.Sci.USA 89：10915)比对(B)50，期望值(E)10，M＝5，N＝-4，以及两条链比较。
BLAST算法也进行两序列之间相似性的统计分析(参见，例如Karlinand Altschul(1993)Proc.Natl.Acad.Sd.USA 90：5873-5787)。BLAST算法提供的对相似性的一种衡量是5最小和概率(P(N))，其提供对两核苷酸或氨基酸序列之间偶然匹配的概率的指示。例如，当测试核酸与参照核酸比较的最小和概率小于约0.2、更优选小于约0.01、且最优选小于约0.001时，认为测试核酸类似于参照核酸。
本发明还涉及本发明的含SH2/SH3/PH结构域蛋白和肽的片段。“片段”为多肽分子，其编码或为本发明含SH2/SH3/PH结构域蛋白和/或肽或其变体的组成部分。该片段通常具有与其作为组成部分的含SH2/SH3/PH结构域蛋白和/或肽共同的定性生物学活性。该肽片段可以为约3至约2000氨基酸长度，约3至约1750、约3至约1500氨基酸长度，约3至约1250氨基酸长度，约3至约1000氨基酸长度，约3至约950氨基酸长度，约3至约900氨基酸长度，约3至约850氨基酸长度，约3至约800氨基酸长度，约3至约750氨基酸长度，约3至约700氨基酸长度，约3至约650氨基酸长度，约3至约600氨基酸长度，约3至约550氨基酸长度，约3至约500氨基酸长度，约3至约450氨基酸长度，约3至约400氨基酸长度，约3至约350氨基酸长度，约3至约300氨基酸长度，约3至约250氨基酸长度，约3至约200氨基酸长度，约3至约150氨基酸长度，约3至约125氨基酸长度，约3至约100氨基酸长度，约3至约75氨基酸长度，约3至约50氨基酸长度，约3至约40氨基酸长度，约3至约35氨基酸长度，约3至约30氨基酸长度，约3至约25氨基酸长度，约3至约20氨基酸长度，约3至约15氨基酸长度，约3至约10氨基酸长度，约3至约7氨基酸长度，约5至约10氨基酸长度，约5至约15氨基酸长度，约5至约20氨基酸长度，约5至约25氨基酸长度，约5至约30氨基酸长度，约5至约35氨基酸长度，约8至约12氨基酸长度，约8至约15氨基酸长度，约8至约20氨基酸长度，约8至约25氨基酸长度，以及约8至约30氨基酸长度。
还涉及本文公开的多核苷酸的片段。多核苷酸“片段”为多核苷酸分子，其编码或为本发明多核苷酸或其变体的组成部分。多核苷酸片段可以或可以不编码保留了生物学活性的含SH2/SH3/PH结构域蛋白或肽。根据本发明使用的含SH2/SH3/PH结构域蛋白或肽的生物学活性片段通常可以具有对应全长蛋白的免疫调节活性的至少约50％，更通常具有至少约60％的这种活性，更通常具有至少约70％的这种活性、更通常具有至少约80％的这种活性、更通常具有至少约90％的这种活性、且更通常具有至少约95％的这种活性。该片段例如可用作杂交探针或PCR引物。该片段可以源于本发明的多核苷酸或可以通过一些其它手段、例如化学合成而合成。
本发明含SH2/SH3/PH结构域蛋白和肽的变体可通过诱变生成。诱变可以针对本发明的含SH2/SH3/PH结构域蛋白或肽，或编码核酸，其例如采用本领域技术人员公知的方法通过随机诱变或定点诱变进行。这类方法例如在Current Protocols In Molecular Biology(现代分子生物学规程)(第9章)，Ausubel et al，1994，John Wiley & Sons，Inc.，New York中有描述，在此通过引用将其公开内容并入本文。本文描述的变体和类似物也包括与其它化学部分复合的多肽、融合蛋白或以其它方式翻译后修饰的多肽。此外，含SH2/SH3/PH结构域蛋白、肽及其片段或变体可以具有其它的翻译后修饰，包括侧链修饰如乙酰化、脒基化、甲氨酰化、还原烷基化和本领域技术人员已知的其它修饰。
含SH2/SH3/PH结构域蛋白、肽及其变体或片段可以采用本领域已知的任何适当方法获得。例如，本发明的含SH2/SH3/PH结构域蛋白、肽及其变体或片段可以采用标准重组核酸技术获得，或者可以例如采用常规液相或固相合成技术合成。本发明的含SH2/SH3/PH结构域蛋白和肽可以例如通过以一种或多种诸如endoLys-C、endoArg-C、endoGlu-C和葡萄球菌V8蛋白酶的蛋白酶消化多肽而产生。所消化的肽片段可以通过例如高效液相色谱(HPLC)技术纯化。重组蛋白产生技术一般可以包括将编码含SH2/SH3/PH结构域蛋白的基因或编码本文描述的肽的序列克隆进用于随后在适合的微生物内过表达的质粒中。
构建表达载体或质粒的适当方法例如在标准教科书中有详细描述，例如Sambrook et al.，Molecular Cloning：A Laboratory Manual(分子克隆：实验室手册)，Cold Spring Harbor，New York，1989，和Ausubel et al.，Current Protocols in Molecular Biology(现代分子生物学规程)，John Wileyand Sons，copyright 2007。产生本发明的重组的含SH2/SH3/PH结构域蛋白和肽的方法例如在标准教科书中有详细描述，例如Coligan et al.，Current Protocols in Protein Science(现代蛋白科学规程)，(第5章)，JohnWiley and Sons，Inc.，copyright 2007，以及Pharmacia Biotech.，TheRecombinant Protein Handbook(重组蛋白手册)1994，Pharmacia Biotech。
可用于产生本发明的含SH2/SH3/PH结构域蛋白和肽的常用表达系统包括例如细菌(如，大肠杆菌(E.coli))、酵母(如，酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)曲霉菌(Aspergillus)，巴斯德毕赤酵母(Pichia pastorisis))、病毒(如，杆状病毒和牛痘病毒)、细胞(如，哺乳动物和昆虫的)以及无细胞系统。也可以采用例如Madin et al.，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.97：559-564(2000)，Pelham and Jackson，Eur.J.Biochem.，67：247-256(1976)，Robertsand Paterson，Proc.Natl.Acad.Sci.，70：2330-2334(1973)，Zubay，Ann.Rev.Genet.，7：267(1973)，Gold and Schweiger，Meth.Enzymol.，20：537(1971)，Lesley et al.，J.Biol.Chem.，266(4)：2632-2638(1991)，Baranov et al.，Gene，84：463-466(1989)以及Kudlicki et al.，Analyt.Biochem.，206：389-393(1992)中描述的方法，使用无细胞系统，例如真核兔网状细胞、麦芽提取物系统和原核E.coli无细胞系统。
本发明的含SH2/SH3/PH结构域蛋白和竞争肽(以及每一种的片段和变体)可以采用本领域公知的液相和固相化学标准方法合成(参见，例如Hackeng et al.，Proc Natl Acad Sci USA.96(18)：10068-73(1999)，以及Steward and Young，Solid Phase Peptide Synthesis(固相肽合成)(第二版)，Pierce Chemical Co.，Illinois，USA(1984)。一般而言，这种合成方法包括向生长肽链顺序添加一个或多个氨基酸或适当保护的氨基酸。第一氨基酸的氨基或羧基基团一般被适合的保护基团保护。然后经保护的氨基酸连接至惰性固体支持物，或者在适合于形成酰胺键的条件下，通过添加互补(氨基或羧基)基团被适当保护的序列中的下一氨基酸而在溶液中使用。接着从该新添加的氨基酸残基中除去保护基团，并添加下一(受保护的)氨基酸，以此类推。当所有期望的氨基酸都已连接后，顺序或同时除去任何剩余的保护基团以及任何固体支持物(有必要的话)，以生成最后的多肽。
可通过本领域的标准技术实现对本发明含SH2/SH3/PH结构域蛋白和肽的氨基酸序列的改变。例如，只要保持了正确的阅读框。可以通过包括添加、删除或置换核苷酸(保守和/或非保守的)在内的核苷酸替换技术实现氨基酸改变。示例性技术包括随机诱变、定点诱变、寡核苷酸介导的或多核苷酸介导的诱变、通过使用现有的或改造的限制酶位点删除所选区域、以及聚合酶链式反应。出于本发明目的的免疫调节活性测试可以通过本领域已知的多种技术的任一种来进行。
对本发明的含SH2/SH3/PH结构域蛋白和肽(及其每一种的片段和变体)的纯化可以采用本领域标准技术实现，例如Coligan et al.，CurrentProtocols in Protein Science(现代蛋白科学规程)，(第6章)，John Wiley andSons，Inc.，copyright 2007中描述的那些方法。例如，如果蛋白或肽为可溶状态，可以采用标准方法如柱层析来分离。本文描述的含SH2/SH3/PH结构域蛋白和肽可以经遗传改造而含有辅助纯化的各种亲和标签或载体蛋白。例如，使用工程化进含有本发明的含SH2/SH3/PH结构域蛋白和/或肽的表达载体中的组氨酸和蛋白标签可以促进例如通过天然或变性条件下金属螯合层析(MCAC)进行的纯化。可以为大规模生产而按比例扩大纯化。
技术人员应理解，本发明不被所使用的产生或纯化方法所限，以上描述的方法和技术是仅出于示例目的而提供。
免疫反应调节和抑制肥大细胞活化
本文描述了调节个体中免疫反应的方法。该方法包括向个体给予治疗有效量的蛋白，该蛋白包括以下的至少之一：
(i)Src同源2(SH2)结构域，
(ii)Src同源3(SH3)结构域，
(iii)pleckstrin同源(PH)结构域，
(iv)本发明的肽。
在一实施方案中，该蛋白为NEDD9或其片段或变体。在另一实施方案中，该蛋白为PHLDA1或其片段或变体。
通过本发明的方法可以增强或抑制免疫反应。例如，给予有效量的负调节肥大细胞活化途径的本文描述的含SH2/SH3/PH结构域蛋白或肽可以导致肥大细胞活化遏制。于是，给药后个体内的超敏反应可以被减弱或防止。
可选择地，给予有效量的正调节肥大细胞活化的本文描述的含SH2/SH3/PH结构域蛋白或肽可以导致肥大细胞活化增强。于是，给药后可以增强个体内的超敏反应。
本文还提供了抑制或防止肥大细胞活化的方法。在本发明的某些方面，抑制或防止肥大细胞活化的方法可以包括给予包含以下的至少之一的蛋白：
(i)Src同源2(SH2)结构域，
(ii)Src同源3(SH3)结构域，
(iii)pleckstrin同源(PH)结构域，
(iv)本发明的肽。
优选地，该蛋白为NEDD9或PHLDA1。
在本发明的其它方面，抑制或防止肥大细胞活化的方法包括给予治疗有效量的肽，该肽包含对应于(i)Src同源3(SH3)结构域或(ii)pleckstrin同源(PH)结构域的至少一部分的氨基酸序列。
优选地，该肽的序列至少部分对应于NEDD9 Src同源3(SH3)结构域。优选地，该肽的序列至少部分对应于PHLDA1 pleckstrin同源(PH)结构域。
在本发明的某些实施方案中，至少部分对应于NEDD9 Src同源3(SH3)结构域的肽可以具有SEQ ID NO：7或SEQ ID NO：8所示的氨基酸序列。在本发明的其它实施方案中，至少部分对应于NEDD9 Src同源3(SH3)结构域的肽可以具有SEQ ID NOS：14-273中任一所示的氨基酸序列。
在本发明的某些实施方案中，至少部分对应于PHLDA1 pleckstrin同源(PH)结构域的肽可以具有SEQ ID NO：10、SEQ ID NO：11或SEQ IDNO：12所示的氨基酸序列。在本发明的其它实施方案中，至少部分对应于PHLDA1 pleckstrin同源(PH)结构域的肽可以具有SEQ ID NO：13所示或SEQ ID NOs：274-488中任一所示的氨基酸序列。
肥大细胞活化可以通过IgE依赖机制发生，例如通过肥大细胞表面上的IgE交联。另外地或可选择地，肥大细胞活化可以通过IgE非依赖机制发生。
可以采用本领域已知的方法来测量和比较给予了或未给予本文描述的含SH2/SH3/PH结构域蛋白或肽的肥大细胞中的活化水平。例如，可通过检测活化的肥大细胞脱粒后释放的因子的标准测定法，来测量肥大细胞活化水平。这些因子包括例如组胺、类胰蛋白酶、丝氨酸蛋白酶类胰蛋白酶(serine protease tryptase)、β-己糖胺酶、肝素、硫酸软骨素E、前列腺素D2、白细胞三烯B4和C4、血小板活化因子、或细胞因子释放，包括IL-3、IL-4、IL-5、IL-6、IL-8、IL-10、IL-13、GM-CSF、TNF、CCL2、CCL3和CCL5。另外地或可选择地，肥大细胞活化程度可以通过肥大细胞活化的特定标志物的表达变化来测量，例如通过流式细胞术或免疫细胞化学进行。可以采用这类技术，通过本领域已知的由肥大细胞表达的各种表面受体的表达来鉴定肥大细胞，其包括但不限于CD9、CD29、CD33、CD43、CD44、CD45、CD46、CD51、CD54、CD55、CD58、CD59、CD61、和CD117、CD47、CD48、CD49d、CD53、CD60、CD63、CD81、CD82、CD84、CD87、CD92、CD97、CD98、和CD99、CD147、CD149、CD151、以及CD157。如此鉴定的肥大细胞的活化水平可以例如通过肥大细胞活化标志物的表达来测量，所述标志物例如CD107A(LAMP-1)、CD107B(LAMP-2)、类胰蛋白酶和PGD2。
如本文所附实施例中显示的，已确认，给予在序列上对应于NEDD9SH3或PHLDA1PH结构域内特异区域的“竞争肽”具有使肥大细胞脱敏并抑制它们在IgE交联时活化的效果。不希望局限于特定机制，可认为对应于NEDD9SH3的肽通过干扰NEDD9SH3结构域与肥大细胞内部靶蛋白SH3结合结构域的正常结合而对肥大细胞活化起这种作用。可认为这是改变了与位于这些肥大细胞表面受体下游的三个重要细胞内角色Lck、Lyn和Fyn的高选择性相互作用，由此破坏了活化途径。类似地，可认为对应于PHLDA1 PH结构域的肽通过干扰PHLDA1 PH结构域与肥大细胞内靶蛋白中存在的PH结合结构域的正常结合而抑制肥大细胞活化。
本发明人已证实，干扰NEDD9 SH3结构域和/或PHLDA1 PH结构域与肥大细胞内靶蛋白的结合提供了调节肥大细胞活化的手段。除了示例的肽，可设计使用大量的基于NEDD9 SH3结构域或PHLDA1 PH结构域序列的肽，并且应理解这些也包括在本发明范围内。
本发明还涉及可以通过改变含SH2/SH3/PH结构域蛋白的表达而发挥对个体免疫反应调节作用的试剂。这种情况下，可以通过将候选试剂存在下含SH2/SH3/PH结构域蛋白的表达与候选试剂不存在下含SH2/SH3/PH结构域蛋白的表达水平进行比较来鉴定这类试剂。编码含SH2/SH3/PH结构域蛋白的基因的表达可以通过试剂来增强，例如通过接触基因的调节序列并由此增强其转录。可选择地，编码含SH2/SH3/PH结构域蛋白的基因的表达可以被试剂减弱或抑制，例如通过以阻碍包括在该基因的转录机构中的蛋白接近或防止其起作用的方式结合该基因。
另外，可通过给予同源反义核酸减少或抑制含SH2/SH3/PH结构域蛋白如NEDD9或PHLDA1的生成而实现对免疫反应和肥大细胞活化的调节作用。本文还提供了至少5核苷酸、一般至多约200核苷酸的这类核酸(其对编码含SH2/SH3/PH结构域蛋白的互补DNA(cDNA)基因反义)的治疗或预防用途。这种反义核酸能够通过一定程度的序列互补而通常在高严紧条件下杂交至含SH2/SH3/PH结构域蛋白的RNA前体(一般为mRNA)的一部分。反义核酸可以互补于含SH2/SH3/PH结构域蛋白的RNA前体的编码和/或非编码区。不必要完全互补于全长RNA前体。这种形式的反义核酸可用作减弱或抑制肥大细胞活化的治疗剂，并且可用在治疗或预防本文描述的疾病状态中。
互补于含SH2/SH3/PH结构域蛋白如NEDD9或PHLDA1的RNA前体的反义核酸可以为至少5核苷酸，并一般为长度范围5至约200核苷酸的寡核苷酸。例如，该反义寡核苷酸为至少10核苷酸、至少15核苷酸、至少100核苷酸、至少125核苷酸、至少150核苷酸或至少175核苷酸。该寡核苷酸可为DNA或RNA或嵌合混合物或其衍生物或修饰形式，单链或双链的。
可采用本领域普遍已知的取代基修饰互补于RNA前体的反义核酸结构上的任何位置。该反义核酸可以包括至少一个经修饰的碱基部分，其选自包括但不限于5-氟尿嘧啶、5-溴尿嘧啶、5-氯尿嘧啶、5-碘尿嘧啶、次黄嘌呤、黄嘌呤、4-乙酰基胞嘧啶、5-(羧基羟甲基)尿嘧啶、5-羧甲基氨基甲基-2-硫尿苷、5-羧甲基氨基甲基尿嘧啶、二氢尿嘧啶、β-D-半乳糖基Q核苷(β-D-galactosylqueosine)、次黄嘌呤核苷、2，2-二甲基鸟嘌呤、2-甲基-腺嘌呤、2-甲基鸟嘌呤、3-甲基胞嘧啶、5-甲基胞嘧啶、N6-腺嘌呤、7-甲基鸟嘌呤、5-甲基氨基甲基尿嘧啶、5-甲氧基氨基甲基-2-硫尿嘧啶、β-D-甘露糖基Q核苷、5′-甲氧基羧基甲基尿嘧啶、假尿嘧啶、2-硫胞嘧啶、5-甲基-2-硫尿嘧啶、2-硫尿嘧啶、4-硫尿嘧啶、5-甲基尿嘧啶、尿嘧啶-5-氧基乙酸甲酯、尿嘧啶-5-氧基乙酸(v)、Q核苷、wybutoxosine、5-甲基-2-硫尿嘧啶、3-(3-氨基-3-N-2-羧丙基)尿嘧啶、以及2，6-二氨基嘌呤的组。
互补于RNA前体的反义核酸可以包括至少一个修饰的糖部分，例如阿拉伯糖、2-氟阿拉伯糖、木酮糖和己糖。该反义核酸还可以包括至少一个经修饰的磷酸骨架，选自硫代磷酸酯、二硫代磷酸酯、氨基硫代磷酸酯、氨基磷酸酯、二氨基磷酸酯、甲基膦酸酯、烷基磷酸三酯和formacetal及其类似物。该反义核酸可偶联至另一分子，例如肽、杂交触发的交联剂、转运试剂(transport agent)或杂交触发的切割试剂。
编码互补于含SH2/SH3/PH结构域蛋白(例如NEDD9或PHLDA1)RNA前体的反义核酸的序列的表达可通过本领域已知的在哺乳动物(包括人)、细胞内起作用的任何启动子进行，并且可以包括诱导型或组成型启动子。
RNA干扰(RNAi)(参见，例如Chuang et al.，Proc Natl Acad Sci USA 97：4985-4990(2000))可用来抑制编码含SH2/SH3/PH结构域蛋白如NEDD9或PHLDA1的基因的表达。干扰RNA(RNAi)片段，特别是双链RNAi，可用来引起蛋白减少。与使用RNAi在有机体内沉默基因有关的方法是已知的，例如Fire et al.，Nature 391：806-811(1998)；Hammond et al.，Nature Rev，Genet.2：110-1119(2001)；Hammond et al.，Nature 404：293-296(2000)；Bernstein et al.，Nature 409：363-366(2001)；Elbashir et al.，Nature411：494-498(2001)；国际PCT申请WO 01/29058；以及国际PCT申请WO 99/32619)，通过引用将它们的公开内容并入本文。
采用保持在染色体之外或整合进基因组的可复制载体将双链RNA表达构建体引入宿主。通过选择适当的序列，dsRNA的表达可干扰编码IL-10同源物的内源mRNA的积累。
治疗和/或预防超敏反应
一方面，本发明涉及抑制或预防超敏疾病或病症的方法。该方法包括给予治疗有效量的蛋白的步骤，所述蛋白包括以下的至少之一：
(i)Src同源2(SH2)结构域，
(ii)Src同源3(SH3)结构域，
(iii)pleckstrin同源(PH)结构域，
(iv)本发明的肽。
优选地，该蛋白为NEDD9或其片段或变体。优选地，该蛋白为PHLDA1或其片段或变体。
本文还描述了治疗或预防超敏疾病或病症的方法，包括给予治疗有效量的肽，该肽包含对应于(i)Src同源3(SH3)结构域或(ii)pleckstrin同源(PH)结构域的至少一部分的氨基酸序列。
优选地，该蛋白为NEDD9或其片段或变体。优选地，该蛋白为PHLDA1或其片段或变体。
优选地，该肽包含选自SEQ ID NO：7、SEQ ID NO：8、SEQ ID NO：10、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：12及其变体和片段的氨基酸序列。
在一实施方案中，该肽包含SEQ ID NOs：14-273所示的氨基酸。
在另一实施方案中，该肽包含SEQ ID NOs：274-488任一所示的氨基酸。
本发明还提供了治疗或预防超敏疾病或病症的方法，包括抑制：
(i)NEDD9蛋白Src同源3(SH3)结构域
(ii)PHLDA1蛋白pleckstrin同源(PH)结构域之一或二者结合肥大细胞受体。
该抑制结合可以包括给予包含对应于NEDD9蛋白Src同源3(SH3)结构域或PHLDA1蛋白pleckstrin同源(PH)结构域的至少一部分的氨基酸序列的肽。
优选地，该肽包含选自SEQ ID NO：7、SEQ ID NO：8、SEQ ID NO：10、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：12及其变体和片段的氨基酸序列。
在一实施方案中，该肽包含SEQ ID NOs：14-273所示的氨基酸。
在另一实施方案中，该肽包含SEQ ID NOs：274-488任一所示的氨基酸。
该超敏疾病或病症可以完全或部分地产生自肥大细胞活化。该肥大细胞活化可以通过IgE依赖或IgE非依赖机制发生。该超敏疾病或病症可以包括炎性反应。
根据本文描述的方法可以预防或治疗的超敏疾病或病症的实例包括，但不限于，过敏反应、药物反应、皮肤变应性、湿疹、变应性鼻炎、荨麻疹、特应性皮炎、变应性接触过敏、食物变应性、变应性结膜炎、昆虫毒液变应性以及呼吸疾病和病症，例如哮喘、变应性哮喘、内源性哮喘、职业性哮喘、急性呼吸窘迫综合征(ARDS)以及慢性阻塞性肺病(COPD)。
治疗或预防超敏疾病或病症的方法还可以包括给予至少一种其它试剂。该其它试剂可以为免疫调节剂，在本发明上下文中，其指一种或多种细胞类型分泌的且在免疫反应的活化、维持、成熟、抑制、遏制或增强中起作用的分子介质。在另一实施方案中，该免疫调节剂可以为I型干扰素。
根据本发明的方面和实施方案，可以向需要治疗的个体给予有效量的含SH2/SH3/PH结构域蛋白如NEDD9或PHLDA1，或肽(例如，SEQ IDNO：7、SEQ ID NO：8、SEQ ID NO：10、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：12)。本领域普通技术人员理解，该含SH2/SH3/PH结构域蛋白可以以物种特异方式给药，这样该蛋白可以源自待治疗的物种。
本发明的蛋白和肽可以以组合物的形式给予个体。一般而言，适合于根据本发明方法使用的组合物可以按本领域普通技术人员已知的方法制备，因此可以包括药物可接受载体、稀释剂和/或佐剂。本发明的组合物可以制备为仅包含含SH2/SH3/PH结构域蛋白或肽，也涉及不同的含SH2/SH3/PH结构域蛋白的混合物、肽混合物以及含SH2/SH3/PH结构域蛋白和肽的组合。这类组合物可以包括在包含药物可接受载体、佐剂和/或稀释剂的药物组合物中。可选择地，本发明的组合物还可以包含免疫抑制剂。
本发明的实施方案还涉及给予多核苷酸，该多核苷酸编码含SH2/SH3/PH结构域蛋白(例如NEDD9或PHLDA1)和/或包含对应于SH3或PH结构域的至少一部分的氨基酸序列的肽。这种情况下，该多核苷酸通常可操作地连接至启动子，使得在向个体给予该多核苷酸之后产生适当的多肽序列。该多核苷酸可以在载体中给予个体。该载体可以为质粒载体、病毒载体或经改造用于插入外源序列、将它们引入真核细胞并表达引入序列的任何其它适合载体。待给药的核酸构建体可以包括裸DNA，或可以为组合物的形式，连同一种或多种药物可接受载体。
该载体一般为真核表达载体，可以包含表达控制和加工序列，例如启动子、增强子、核糖体结合位点、多腺苷酸化信号和转录终止序列。采用本领域已知的各种基因递送方法，可以增强编码含SH2/SH3/PH结构域蛋白如NEDD9或PHLDA1或本发明的肽的基因在个体的肥大细胞中的表达。例如，可以向个体给予包含可操作地连接至表达控制序列如诱导型启动子的编码肥大细胞活化途径的含SH2/SH3/PH结构域蛋白调节物的核酸序列的表达载体，来增强所述蛋白在肥大细胞中的生成。可选择地，可以向个体给予含有编码含SH2/SH3/PH结构域蛋白和/或本发明的肽的核酸序列的病毒载体(例如逆转录和腺病毒载体)，以导致所述蛋白的生成。也可以通过从个体提取细胞、给予含目的基因的载体并随后再将细胞回输个体，来实现编码本文描述的含SH2/SH3/PH结构域蛋白或肽的基因的递送。通过基因递送技术的编码本发明的含SH2/SH3/PH结构域蛋白或肽的基因的表达可用作调节个体内肥大细胞活化的手段。因此，这类方法也可以适合于治疗和预防个体内超敏疾病或病症。
筛选调节剂
本发明还涉及使用含SH2/SH3/PH结构域蛋白的激动剂和拮抗剂调节个体免疫反应，并提供鉴定这类激动剂和拮抗剂的方法。本发明的含SH2/SH3/PH结构域蛋白的激动剂和拮抗剂可以根据它们对肥大细胞活化的作用而具体设计或筛选。
一方面，本发明涉及鉴定调节蛋白活性的试剂的方法，该蛋白包含Src同源2(SH2)结构域、Src同源3(SH3)结构域或pleckstrin同源(PH)结构域的至少之一。该方法包括让候选试剂在适合于允许候选试剂与该蛋白相互作用的条件下接触该蛋白，然后分析该蛋白的活性。
另一方面，本发明涉及筛选多个候选试剂以鉴定调节蛋白活性的试剂的方法，该蛋白包含Src同源2(SH2)结构域、Src同源3(SH3)结构域或pleckstrin同源(PH)结构域的至少之一。该方法包括让多种候选试剂在适合于允许候选试剂与该蛋白相互作用的条件下接触该蛋白，然后测定该蛋白的活性。
又一方面，本发明涉及筛选多种候选试剂以鉴定调节肥大细胞活化途径的含SH2/SH3/PH结构域蛋白调节剂活性的试剂。该方法包括让多种候选试剂在适合于允许候选试剂与肥大细胞活化途径的含SH2/SH3/PH结构域蛋白调节剂相互作用的条件下与肥大细胞活化途径的含SH2/SH3/PH结构域蛋白调节剂接触并测定所述肥大细胞活化途径的含SH2/SH3/PH结构域蛋白调节剂活性的步骤。
优选地，在上述方法中提到的含SH2/SH3/PH结构域蛋白为NEDD9或PHLDA1。
多种适合的方法可用于确定一种候选试剂或多种候选试剂是否与含SH2/SH3/PH结构域蛋白如NEDD9或PHLDA1相互作用或结合。非限定性方法包括双杂交法、免疫共沉淀、亲和纯化、质谱学、串联亲和纯化、噬菌体展示、标签转移(label transfer)、DNA微阵列/基因共表达和蛋白微阵列。
例如，双杂交测定法可以用于确定一种候选试剂或多种候选试剂是否与本发明的含SH2/SH3/PH结构域蛋白相互作用或结合。该酵母双杂交测定系统为基于酵母的遗传测定法，一般用于检测蛋白-蛋白相互作用(Fields and Song.，Nature 340：245-246(1989))。该测定利用了转录激活因子的多结构域性质。例如，已知的转录激活因子的DNA结合结构域可以被融合至本发明的含SH2/SH3/PH结构域蛋白且转录激活因子的激活结构域被融合至候选试剂。候选试剂与含SH2/SH3/PH结构域蛋白之间的相互作用促使转录激活因子的DNA结合和激活结构域紧密靠近。随后转录激活因子激活的特定报告基因的转录，使得能检测相互作用。
在上述技术的修饰中，可以将本发明的含SH2/SH3/PH结构域蛋白与可检测标签如碱性磷酸酶融合而构建融合蛋白，并采用如Flanagan和Leder描述的修饰形式的免疫沉淀(Flanagan and Leder，Cell 63：185-194(1990))。
可选择地，免疫共沉淀可用于确定一种候选试剂或多种候选试剂是否与本发明的含SH2/SH3/PH结构域蛋白相互作用或结合。采用这种技术，活化的肥大细胞可以在适合于保持蛋白-蛋白相互作用的非变性条件下被裂解。然后可以将得到的溶液与特异于本发明的含SH2/SH3/PH结构域蛋白的抗体一起孵育，并例如通过以连接至固体支持物的抗体结合蛋白捕获，将其从本体溶液中免疫沉淀。以这种方法免疫沉淀含SH2/SH3/PH结构域蛋白促进了与该蛋白结合的试剂的免疫共沉淀。可采用多种本领域已知的方法来建立对结合试剂的鉴定，所述方法包括但不限于SDS-PAGE、western印迹和质谱学。
可选择地，噬菌体展示技术可以用来确定一种候选试剂或多种候选试剂是否与本发明的含SH2/SH3/PH结构域蛋白相互作用或结合。噬菌体展示为通过将来自基因库的多种基因整合进噬菌体而筛选蛋白相互作用的测试。在这种方法下，重组DNA技术被用于将多种基因表达为与噬菌体的外壳蛋白的融合蛋白，这样每一基因的肽或蛋白产物都展示在病毒颗粒的表面。以此方式，可以产生噬菌体展示目的肽或蛋白产物的整个文库。然后，可以就结合本发明的含SH2/SH3/PH结构域蛋白的能力而筛选所得到的噬菌体展示肽或蛋白产物的文库。从相互作用的噬菌体提取的DNA含有相互作用蛋白的序列。
可选择地，亲和层析可用于确定一种候选试剂或多种候选试剂是否与本发明的含SH2/SH3/PH结构域蛋白相互作用或结合。例如，含SH2/SH3/PH结构域蛋白可以固定在支持物(例如琼脂糖)上并让细胞裂解物穿过柱。然后可以从柱洗脱结合至固定的含SH2/SH3/PH结构域蛋白的蛋白并例如通过N-末端氨基酸测序进行鉴定。
确定候选试剂与本发明的含SH2/SH3/PH结构域蛋白相互作用或结合是否调节所述蛋白活性的方法，可以通过测量刺激后肥大细胞活化程度来确定。例如，可以测量给予了候选试剂的肥大细胞的活化水平，并与未给予候选试剂的肥大细胞活化水平进行比较。
肥大细胞对候选试剂的摄取可以通过天然扩散发生，或者可以通过本领域已知的各种方法诱导，包括但不限于显微注射、电穿孔、蛋白与一种或多种病毒蛋白转导结构域(PTDs)融合以及阳离子脂质递送。可选择地，可以在肥大细胞内诱导候选试剂的产生，例如通过将含有编码候选试剂的基因的质粒表达载体或病毒引入肥大细胞来进行。以质粒转染细胞的方法在本领域是公知的，包括例如磷酸钙共沉淀、DEAE葡聚糖协助的转染、电穿孔、显微注射和阳离子脂质体。
然后，可以通过各种方法诱导肥大细胞活化，例如通过与IgE一起孵育并随后以DNP/白蛋白交联。也可以使用各种其它的IgE非依赖肥大细胞活化触发剂，可以例如经由FcγR，Toll样受体(TLRs)或通过给予离子霉素来诱导活化。
可通过本领域已知的方法实现对给予了或未给予候选试剂肥大细胞的活化水平的测量和比较。肥大细胞活化的水平可以通过标准测定法来测量，它们检测活化的肥大细胞脱粒后释放的因子，例如组胺、类胰蛋白酶、丝氨酸蛋白酶类胰蛋白酶、β-己糖胺酶、肝素、硫酸软骨素E、前列腺素D2、白细胞三烯B4和C4、血小板活化因子、或细胞因子释放，包括IL-3、IL-4、IL-5、IL-6、IL-8、IL-10、IL-13、GM-CSF、TNF、CCL2、CCL3和CCL5。可选择地，肥大细胞活化程度可以通过肥大细胞活化的特定标志物的表达变化来测量，例如通过流式细胞术或免疫细胞化学进行。可以采用这类技术，通过本领域已知的由肥大细胞表达的各种表面受体的表达来鉴定肥大细胞，其包括但不限于CD9、CD29、CD33、CD43、CD44、CD45、CD46、CD51、CD54、CD55、CD58、CD59、CD61、和CD117、CD47、CD48、CD49d、CD53、CD60、CD63、CD81、CD82、CD84、CD87、CD92、CD97、CD98、和CD99、CD147、CD149、CD151、以及CD157。如此鉴定的肥大细胞的活化水平可以例如通过肥大细胞活化标志物的表达来测量，所述标志物例如CD107A(LAMP-1)、CD107B(LAMP-2)、类胰蛋白酶和PGD2。
应理解，上文描述的方法仅为用来鉴定能够与本文描述的本发明含SH2/SH3/PH结构域蛋白(例如NEDD9和PHLDA1)相互作用或调节其活性的试剂的方法类型实例。本领域技术人员会知道其它的适当方法，它们也包括在本发明的范围内。
采用上文描述的方法，可以鉴定作为本发明的SH2/SH3/PH结构域激动剂的试剂。作为激动剂的试剂增强本发明的含SH2/SH3/PH结构域蛋白的一种或多种生物学活性。可选择地，上文描述的方法可以鉴定作为本发明的含SH2/SH3/PH结构域蛋白的拮抗剂的试剂。作为拮抗剂的试剂妨碍本发明的SH2/SH3/PH结构域的一种或多种生物学活性。
通过各种本领域技术人员已知的方法，可以生成含SH2/SH3/PH结构域蛋白如NEDD9或PHLDA1的活性的潜在调节剂，用于通过以上方法进行筛选。例如，诸如X射线晶体学和核磁共振光谱学的方法可以被用于对本发明的含SH2/SH3/PH结构域蛋白的结构建模，因此有助于采用基于计算机的建模设计潜在调节剂。各种形式的组合化学也可以用于生成推断的调节剂。
抗体可以用作本发明的含SH2/SH3/PH结构域蛋白的激动剂或拮抗剂。优选地，从含SH2/SH3/PH结构域蛋白多肽的不连续区域或片段制备适合的抗体。抗原性的含SH2/SH3/PH结构域多肽含有至少约5氨基酸并优选至少约10氨基酸。
本领域技术人员容易地知道产生适合抗体的方法。例如，可以采用Antibodies-A Laboratory Manual(抗体-实验室手册)，Harlow and Lane，eds.，Cold Spring Harbor Laboratory，N.Y.(1988)中描述的杂交瘤技术制备通常含Fab部分的特异于本发明的含SH2/SH3/PH结构域蛋白或肽的单克隆抗体。
本质上，对于制备针对本发明的含SH2/SH3/PH结构域蛋白或肽的单克隆抗体，任何用于通过培养的连续细胞系产生抗体分子的技术都可以使用。这些包括最初由Kohler et al.，Nature，256：495-497(1975)开发的杂交瘤技术，以及三瘤体技术、人B细胞杂交瘤技术(Kozbor et al.，Immunology Today，4：72(1983))，以及产生人单克隆抗体的EBV杂交瘤技术(Cole et al.，in Monoclonal Antibodies and Cancer Therapy，pp.77-96，Alan R.Liss，Inc.，(1985))。可通过不同于融合的技术生成永生的抗体产生细胞系，例如以癌基因DNA直接转化B淋巴细胞或以Epstein-Barr病毒转染。参见，例如M.Schreier et al.，“Hybridoma Techniques(杂交瘤技术)”Cold Spring Harbor Laboratory，(1980)；Hammerling et al.，“MonoclonalAntibodies and T-cell Hybridomas(单克隆抗体与T细胞杂交瘤)”Elsevier/North-Holland Biochemical Press，Amsterdam(1981)；Kennett et al.，“Monoclonal Antibodies(单克隆抗体)”，Plenum Press(1980)。
总之，产生从其产生单克隆抗体的杂交瘤的手段，将骨髓瘤或其它自身永存细胞系与获得自经其识别因子结合部分、或识别因子或来源特异的其DNA结合部分超免疫的哺乳动物脾的淋巴细胞融合。通过与当前识别因子免疫作用的能力以及抑制靶细胞中特定转录活性的能力，鉴定产生可用于实施本发明的产生单克隆抗体的杂交瘤。
可用于实施本发明的单克隆抗体可通过起始单克隆杂交瘤培养物来产生，该单克隆杂交瘤培养物包含含有分泌具有适当抗原特异性的抗体分子的杂交瘤的营养培养基。在足以让杂交瘤向培养基分泌抗体分子的条件和时间段下维持培养。然后收集含抗体的培养基。接着可通过公知的技术进一步分离该抗体分子。
类似地，本领域已知各种可用于产生单克隆抗体的操作。为了产生针对本发明的含SH2/SH3/PH结构域蛋白如NEDD9或PHLDA1或本发明的肽的多克隆抗体，可通过注射蛋白免疫各种宿主动物，包括但不限于兔、鸡、小鼠、大鼠、绵羊、山羊等。另外，多肽或其片段或类似物可以偶联至免疫原性载体，例如牛血清白蛋白(BSA)或钥孔戚血蓝素(KLH)。各种佐剂也可以用于增强免疫反应，包括但不限于弗氏(完全和不完全)佐剂，矿物凝胶如氢氧化铝，表面活性物质如溶血卵磷脂(rysolecithin)，复合多元醇，聚阴离子，肽、油乳剂、钥孔戚血蓝素、二硝基酚以及可能有用的人佐剂，如BCG(卡介苗)和短小棒状杆菌(Corynebacterium parvum)。
筛选期望的抗体也可通过本领域已知的各种技术来完成。测定抗体的免疫特异性结合可以包括但不限于放射免疫测定、ELISAs(酶联免疫吸附测定)、夹心法免疫测定、免疫放射测定、凝胶扩散沉淀反应、免疫扩散测定、原位免疫测定、Western印迹、沉淀反应、凝集测定、补体结合测定、免疫荧光测定、蛋白A测定以及免疫电泳测定，等等(参见例如Ausubel et al.，Current Protocols in Molecular Biology(现代分子生物学规程)，Vol.1，John Wiley & Sons，Inc.，New York(1994))。可通过初级抗体上的可检测标签来检测抗体结合。可选择地，抗体可以通过其与适当标记的次级抗体或试剂结合来检测。在免疫测定中检测结合的各种方法在本领域是已知的，并包括在本发明的范围内。
针对本发明的含SH2/SH3/PH结构域蛋白或肽而产生的抗体(或其片段)对该蛋白有结合亲和性。优选地，该抗体(或其片段)具有高于约105M-1的结合亲和性或亲和力(avidity)，更优选高于约106M-1，还更优选高于约107M-1，且最优选高于约108M-1。
就获得适当量的本发明抗体而言，可以采用无血清培养基成批发酵制备抗体。发酵后，可以通过包括层析和病毒灭活/去除步骤在内的多步操作纯化抗体。例如，可以先通过蛋白A亲和层析分离抗体，接着以溶剂/去垢剂处理来灭活任何脂质包被的病毒。进一步的纯化(一般为阴离子和阳离子交换层析)可以用来除去残余蛋白、溶剂/去垢剂和核酸。经纯化的抗体还可以采用凝集过滤柱进一步纯化并配制在0.9％盐水中。所配制的大量制剂随后可以被灭菌、病毒过滤和分发。
诊断超敏素质
在另一方面，本发明涉及诊断个体出现超敏相关疾病或病症的素质的方法。该方法包括从个体获得核酸样品并分析核酸样品在编码本发明含SH2/SH3/PH结构域蛋白的核酸内是否存在至少一个突变的步骤。优选地，该含SH2/SH3/PH结构域蛋白为NEDD9或PHLDA1。
可以通过本发明方法诊断的超敏相关疾病或病症包括但不限于，过敏反应、药物反应、皮肤变应性、湿疹、变应性鼻炎、荨麻疹、特应性皮炎、变应性接触过敏、食物变应性、变应性结膜炎、昆虫毒液变应性以及与呼吸道感染相关的呼吸疾病。
该呼吸道感染相关的呼吸疾病可以包括但不限于哮喘、变应性哮喘、内源性哮喘、职业性哮喘、急性呼吸窘迫综合征(ARDS)以及慢性阻塞性肺病(COPD)。
用于诊断的核酸可以从源自个体各种来源的细胞获得，这些来源包括但不限于血液、尿、唾液、组织活检和尸检材料。多种技术已被用于鉴定核酸的序列变化。例如，高分辨率熔解曲线分析(Hi-Res Melting)，一种用于匀质突变扫描和基因分型的PCR后技术(Hi-Res LightScanner)，检测核苷酸序列中由于突变或改变产生的限制性位点的限制性片段长度多态性(RFLP)分析(参见Kan et al.，Lancet 2(8096)：910，(1978))，通过电泳凝胶中带泳动率的改变鉴定核苷酸序列差异的变性梯度凝胶电泳和单链DNA电泳迁移率研究(参见，Myers et al.，Nature 313：495，(1985)；Orita etal.，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 86：2766，(1989))，鉴定异源双链DNA中错配位点的化学切割分析(参见Cotton，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 85：4397，(1988))，以及鉴定RNA-DNA或RNA-RNA异源双链中错配位点的RNA酶切割分析(参见Myers et al.，Science 230：1242，(1985)；Maniatis et al.，U.S.Pat.No.4,946,773)。
可采用本领域已知的各种技术在DNA水平检测突变。基因组DNA可以被直接用于检测，或者可以在分析之前采用聚合物链式反应(PCR)(Saiki et al.，Nature 324：163-166(1986))酶学扩增。RNA或cDNA也可以用于该目的。举例而言，互补于编码本发明的含SH2/SH3/PH结构域蛋白的核酸的PCR引物可被用于鉴定并分析突变。例如，通过与野生型基因型相比的扩增产物大小差异可以检测删除和插入。可以通过让扩增的DNA与编码含SH2/SH3/PH结构域蛋白的放射标记RNA或可选择地放射标记的反义DNA序列杂交来鉴定点突变。通过RNA酶A消化或通过解链温度差异可将完全匹配的序列与错配双链体区分开。
也可以通过核酸片段或蛋白在含有或不含变性剂的凝胶中的电泳迁移率变化来检测突变。小的序列删除和插入可以通过高分辨率凝胶电泳来观察。不同序列的核酸片段可以在变性甲酰胺梯度凝胶上区分开，其中不同片段的迁移根据它们的特异解链或部分解链温度而被阻滞在凝胶中的不同位置(例如，参见Myers et al.，Science 230：1242(1985))。
还可以通过诸如RNA酶和S1保护的核酸酶保护测定或化学切割方法(例如参见Cotton et al.，Proc.Natl.Acad.Sci(USA)85：4397-4401(1985))，来解释特定位置的序列变化。
因此，可通过诸如杂交、RNA酶保护、化学切割、直接DNA测序或使用限制酶(例如限制性片段长度多态性(RFLP))以及基因组DNA的Southern印迹的方法实现对特定DNA序列的检测。除了多种常规凝胶电泳和DNA测序外，也可通过原位分析来检测突变。
根据本发明，可以制备这样的试剂盒，其包括从个体获得核酸样品的装置和分析该核酸样品是否存在至少一个调节本发明的含SH2/SH3/PH结构域蛋白的活性的突变的装置。
这类试剂盒可以例如用于诊断个体出现变应性疾病或状况的素质。本发明的试剂盒包括一个或多个从个体细胞获取核酸样品的装置。细胞可以来自个体的各种来源，包括但不限于血液、尿、唾液、组织活检和尸检材料。另外，本发明的试剂盒包括分析核酸样品是否存在至少一个调节本发明的含SH2/SH3/PH结构域蛋白如NEDD9或PHLDA1的活性的突变的装置。这类突变的实例包括但不限于一个或多个核苷酸的删除、插入、易位、倒位和碱基置换。
本发明的试剂盒还可以包括其它进行本发明方法所需的其它组分，例如缓冲剂和/或稀释剂。该试剂盒一般包括用于容纳各种组分的容器和在本发明方法中使用试剂盒组分的说明书。
组合物和给药途径
本发明涉及使用组合物，该组合物包含含SH2/SH3/PH结构域蛋白如NEDD9或PHLDA1、本发明的肽、不同的含SH2/SH3/PH结构域蛋白的混合物、肽的混合物以及含SH2/SH3/PH结构域蛋白和肽的组合。该组合物可以包括在包含药物可接受载体、佐剂和/或稀释剂的药物组合物中。另外地或可选择地，本发明的组合物可以包含免疫抑制剂，例如抗炎化合物或支气管扩张化合物。
在其它实施方案中，免疫抑制剂可以为环孢霉素、他克莫司、西罗莫司、吗替麦考酚酯、氨甲喋呤、chromoglycalates、茶碱、白细胞三烯拮抗剂和抗组胺剂，或它们的组合。
免疫抑制剂也可以为针对B或T淋巴细胞或介导它们活化的表面受体的免疫抑制药或特异抗体。例如该免疫抑制药可以为环孢霉素、他克莫司、西罗莫司、吗替麦考酚酯、氨甲喋呤、chromoglycalates、茶碱、白细胞三烯拮抗剂和抗组胺剂，或它们的组合。
另外，根据本发明使用的药物组合物还可以包含类固醇，例如皮质类固醇。
在另一实施方案中，该组合物还包含类固醇。
本发明还涉及治疗或预防个体超敏疾病或病症的方法，包括给予有效量的该组合物。
本发明的其它实施方案提供包含Src同源2(SH2)结构域、Src同源3(SH3)结构域、pleckstrin同源(PH)结构域中至少一种的蛋白在制备治疗超敏疾病或病症的药物中的用途。优选地，该蛋白为NEDD9或其片段或变体。优选地，该蛋白为PHLDA1或其片段或变体。
本发明还描述了包含对应
(i)Src同源3(SH3)结构域，或
(ii)pleckstrin同源(PH)结构域的至少一部分的氨基酸序列的肽在制备治疗超敏疾病或病症的药物中的用途。优选地，该肽包含选自SEQ ID NO：7、SEQ ID NO：8、SEQ ID NO：10、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：12及其变体和片段的氨基酸序列。
在一实施方案中，该肽包含SEQ ID SEQ ID NOs：14-273所示的氨基酸。
在另一实施方案中，该肽包含SEQ ID SEQ ID NOs：274-488中任一所示的氨基酸。
组合物可以通过标准途径给药。一般而言，该组合物可以通过胃肠外(例如，静脉内、脊柱内、皮下或肌内)途径给药。更优选地，该组合物可以局部、口服或鼻内给药。给药可以是全身的、区域的或局部的。在任意给定时间使用的特定给药途径将取决于多种因素，包括待治疗状况的性质、状况的严重性和程度、待递送的特定组合物所需剂量以及组合物的潜在副作用。
就与组合物其它成分的相容性而言，载体、稀释剂和佐剂必需是“可接受的”，并且对其接受者无害。药物可接受载体或稀释剂的实例为去矿物质水或蒸馏水；盐水溶液；基于植物的油如花生油、红花油、橄榄油、棉籽油、玉米油、芝麻油如花生油、红花油、橄榄油、棉籽油、玉米油、芝麻油、花生油或椰子油；硅油，包括聚硅氧烷，例如甲基聚硅氧烷、苯基聚硅氧烷和甲基苯基聚硅氧烷；挥发性硅酮；矿物油如液体石蜡、软石蜡或角鲨烷；纤维素衍生物如甲基纤维素、乙基纤维素、羧甲基纤维素、羧甲基纤维素钠或羟丙基甲基纤维素；低级烷醇，例如乙醇或异丙醇；低级芳醇；低级聚亚烷基二醇或低级亚烷基二醇，例如聚乙二醇、聚丙二醇、乙二醇、丙二醇、1，3-丁二醇或甘油；脂肪酸酯如棕榈酸异丙酯、豆蔻酸异丙酯或油酸乙酯；聚乙烯吡咯烷酮；琼脂；黄蓍胶或阿拉伯树胶以及凡士林。一种或多种载体一般占组合物重量的10％至99.9％。
本发明的组合物可以为适合于通过注射给药的形式，适合于口服的制剂的形式(例如胶囊、片剂、囊片、酏剂)，适合于局部给药的软膏、乳膏或洗剂的形式，适合于作为滴眼剂递送的形式，适合于通过吸入给药(例如通过鼻内吸入或口腔吸入)的气雾剂形式，适合于胃肠外给药(即皮下、肌内或静脉内注射)的形式。
对于作为可注射溶液或悬浮液给药，无毒性的胃肠外可接受稀释剂或载体可包括Ringer溶液、等渗盐水、磷酸盐缓冲盐水、乙醇和1，2丙二醇。
适合于口服的载体、稀释剂、赋形剂和佐剂的一些实例包括花生油、液体石蜡、羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、海藻酸钠、阿拉伯树胶、黄蓍胶、葡萄糖、蔗糖、山梨醇、甘露醇、明胶和卵磷脂。另外，这些口服制剂可以含有适当的调味和着色剂。当以胶囊形式使用时，胶囊可以涂覆有诸如甘油单硬脂酸酯或甘油硬脂酸酯这类延缓崩解的化合物。
佐剂一般包括润滑剂、乳化剂、增稠剂、防腐剂、杀菌剂和缓冲剂。
用于口服给药的固体形式可以含有人和兽医药物实践中可接受的粘合剂，甜味剂，崩解剂，稀释剂，调味品，涂层剂，防腐剂，润滑剂和/或延释剂。适合的粘合剂包括阿拉伯树胶、明胶、玉米淀粉、黄蓍胶、海藻酸钠、羧甲基纤维素或聚乙二醇。适合的甜味剂包括蔗糖、乳糖、葡萄糖、阿斯巴甜或糖精。适合的崩解剂包括玉米淀粉、甲基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、瓜儿胶、黄原胶、膨润土、褐藻酸或琼脂。适合的稀释剂包括乳糖、山梨醇、甘露醇、葡萄糖、高岭土、纤维素、碳酸钙、硅酸钙或磷酸二钙。适合的调味剂包括薄荷油、冬青油、樱桃、柑橘或木莓调味品。适合的涂层剂包括丙烯酸和/或甲基丙烯酸和/或其酯的聚合物或共聚物、蜡、脂肪醇、玉米蛋白、虫胶或麸质。适合的防腐剂包括苯甲酸钠、维生素E、α-生育酚、抗坏血酸、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯或亚硫酸氢钠。适合的润滑剂包括硬脂酸镁、硬脂酸、油酸钠、氯化钠或滑石。适合的延释剂包括甘油单硬脂酸酯或甘油二硬脂酸酯。
除了上述试剂，用于口服给药的液体形式还可以含有液体载体。适合的液体载体包括水，油类如橄榄油、花生油、芝麻油、向日葵油、红花油、落花生油、椰子油、液体石蜡、乙二醇、丙二醇、聚乙二醇、乙醇、丙醇、异丙醇、甘油、脂肪醇、甘油三酯或它们的混合物。
用于口服给药的悬浮剂还可以包含分散剂和/或助悬剂。适合的助悬剂包括羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、海藻酸钠或乙酰基醇。适合的分散剂包括卵磷脂，脂肪酸如硬脂酸的聚氧乙烯酯，聚氧乙烯山梨醇单或二油酸脂、硬脂酸酯或月桂酸酯，聚氧乙烯山梨聚糖单或二油酸脂、硬脂酸酯或月桂酸酯，等等。
用于口服给药的乳剂还可以包含一种或多种乳化剂。适合的乳化剂包括上文例举的分散剂或天然胶如瓜儿胶、阿拉伯树胶或黄蓍胶。
制备可胃肠外给药组合物的方法对本领域技术人员而言是显而易见的，例如在Remington’s Pharmaceutical Science(Remington药物科学)，15thed.，Mack Publishing Company，Easton，Pa.中有更详细的说明，在此通过引用将其并入本文。
本发明的局部制剂包括活性成分和一种或多种可接受的载体，以及任选地任何其它治疗性成分。适合于局部给药的制剂包括适合于透过皮肤到达需要治疗部位的液体或半液体制剂，例如擦剂、洗剂、乳膏、软膏或贴剂，以及适合于眼、耳或鼻给药的滴剂。
本发明的滴剂可以包含无菌水或油性溶液或悬浮液。可以通过将活性成分溶解在杀菌剂和/或杀真菌剂和/或任何其它适合的防腐剂的水性溶液中并任选地包括表面活性剂，来制备它们。然后可通过过滤来澄清得到的溶液，转移至适当的容器并灭菌。灭菌可以这样进行：高压灭菌或在90℃-100℃维持半小时，或者通过过滤，然后通过无菌技术转移至容器。适合于包含在滴剂中的杀菌和杀真菌剂的实例为硝酸苯汞或乙酸苯汞(0.002％)、苯扎氯铵(0.01％)和醋酸洗必泰(0.01％)。适合于制备油性溶液的溶剂包括甘油、稀释的醇和丙二醇。
本发明的洗剂包括适合于应用至皮肤或眼的那些洗剂。眼的洗剂可以含有无菌水性溶液，其任选地含有杀菌剂，并且可以按类似于上文描述的与制备滴剂有关的方法来制备。应用至皮肤的洗剂或擦剂也可以包括加速干燥和冷却皮肤的试剂，例如醇或丙酮，和/或增湿剂如甘油，或油如蓖麻油或花生油。
本发明的乳膏、软膏或贴剂为用于外部应用的活性成分的半固体制剂。它们可以通过将细粉或粉末形式的、单独的或溶液中的或水性或非水性液体悬浮液中的活性成分与油脂或非油脂主成分混合来制备。该主成分可以包含烃类如硬、软或液体石蜡、甘油、蜂蜡、金属皂；黏胶；天然来源的油如杏仁油、玉米油、落花生油、蓖麻油或橄榄油，羊毛脂或其衍生物，或脂肪酸如硬脂酸或油酸连同诸如丙二醇或聚乙二醇的醇。
该组合物可以并入任何适合的表面活性剂，例如阴离子、阳离子或非离子表面活性剂如山梨聚糖酯或其聚氧乙烯衍生物。也可以包括助浮剂如天然胶、纤维素衍生物或无机材料如硅石，以及其它成分，如羊毛脂。
也可以给予脂质体形式的组合物。脂质体通常衍生自磷脂或其它脂质，并且通过分散在水性介质中的单或多薄层含水液体结晶形成。可以使用任何能够形成脂质体的无毒、生理学上可接受的和可代谢的脂质。脂质体形式的组合物可以含有稳定剂、防腐剂、赋形剂等。优选的脂质为磷脂和磷脂酰胆碱(卵磷脂)，无论是天然还是合成的。形成脂质体的方法在本领域是已知的，对此可具体参考：Prescott，Ed.，Methods in CellBiology(细胞生物学方法)，Volume XIV，Academic Press，New York，N.Y.(1976)，p.33 et seq.，通过引用将其内容并入本文。
剂量
适合于用在本发明方法中的本发明组合物可以治疗性或预防性地作为组合物给药。在治疗性应用中，组合物被给予已经患有疾病或状况的患者，其量足以治愈或至少部分地阻止该疾病或状况及其并发症。该组合物应提供足以有效治疗该患者的量的药剂。
对于任意特定患者的治疗有效剂量水平将依赖于多种因素，包括：正治疗的病症和病症严重性；所采用的化合物或药剂的活性；所采用的组合物；患者年龄、体重、总体健康状况、性别和饮食；给药时间；给药途径；药剂或化合物的吸收率(rate of sequestration)；治疗持续时间；与该治疗组合或同时使用的药物，以及药学中公知的其它相关因素。
本领域技术人员能够通过常规实验来确定治疗适当疾病所需的药剂或化合物的有效、无毒量。
一般地，预期有效剂量范围为每kg体重每24小时约0.0001mg至约1000mg；典型地，每kg体重每24小时约0.001mg至约750mg；每kg体重每24小时约0.01mg至约500mg；每kg体重每24小时约0.1mg至约500mg；每kg体重每24小时约0.1mg至约250mg；每kg体重每24小时约1.0mg至约250mg。更典型地，预期有效剂量范围为每kg体重每24小时约1.0mg至约200mg；每kg体重每24小时约1.0mg至约100mg；每kg体重每24小时约1.0mg至约50mg；每kg体重每24小时约1.0mg至约25mg；每kg体重每24小时约5.0mg至约50mg；每kg体重每24小时约5.0mg至约20mg；每kg体重每24小时约5.0mg至约15mg。
可选择地，有效剂量可以多至约500mg/m2。一般地，预期有效剂量的范围为约25至约500mg/m2，优选约25至约350mg/m2，更优选地，约25至约300mg/m2，还更优选约25至约250mg/m2，甚至更优选约50至约250mg/m2，且还甚至更优选约75至约150mg/m2。
在治疗性应用中，治疗一般在疾病状态或状况持续时进行。另外，对本领域普通技术人员显而易见的是，个体给药的最佳量和间隔将由正治疗的疾病状态或状况的性质和程度、给药形式、途径和部位、以及正治疗的特定个体的性质所决定。另外，这种最佳条件可以通过常规技术来确定。
对本领域普通技术人员还显而易见的是，最佳的疗程，例如对于指定天数每天以组合物给药的次数，可以由本领域技术人员采用常规的疗程确定测试来确定。
以下将参照具体实施例来描述本发明，这些实施例不应以任何方式理解为限制本发明的范围。
实施例
实施例1：鉴定参与肥大细胞活化的含推定的SH2/SH3/PH结构域蛋白
基于计算机的方法被用于鉴定活化的肥大细胞中编码细胞内信号产物的新基因。这通过就从静息和活化骨髓来源人肥大细胞获得的基因表达数据筛选编码SH2和/或SH3和/或PH结构域的基因而实现。
按Liu et al.(J.Allergy Clin Immunol 118：496-503，(2006))中所述产生骨髓来源肥大细胞(BMMC)，从静息和IgE交联刺激的BMMC分离mRNA，并按Lui et al.(J Allergy Clin Immunol 118：496-503，(2006))中阐释的Affymetrix标准操作进行基因表达阵列分析。
采用用于基因序列扫描的基于LINUX的平台进行结构域序列查询，以鉴定BMMC表达的含SH2/SH3/PH结构域蛋白。在肥大细胞中被表达的近15000 Affymetrix探针中，207个基因编码具有SH2、SH3和/或PH结构域的蛋白，其中的23个(11％)被发现在FcεR1交联后上调或下调。
基于报道的基因序列特征和在其它细胞类型中的生物学功能，多个编码之前未被鉴定为肥大细胞IgE信号途径成员的分子的基因被认为可能在肥大细胞活化过程中起作用。其中，NEDD9(神经前体细胞表达的发育下调基因9)和PHLDA1基于它们的结构特征和生物学活性而被选择用于进一步的研究。
实施例2：NEDD9和PHLDA1在肥大细胞活化中的作用
(i)NEDD9，一种参与信号转导的高选择性锚定蛋白
人NEDD9基因(神经前体细胞表达的发育下调基因9)(GenBank，IDs：NM_006403.2和NM_182966.2，Ensembl ID：ENSG00000111859，Entrez基因ID 4739和Uniprot ID Q14511)，也称为CasL(Crk相关底物淋巴细胞类型)和HEF1(人成丝增强子1)，编码表达未加工的834氨基酸前体蛋白。NEDD9含有SH3结构域和富含SH2结合位点的结构域。
NEDD9同工型1具有UniProt识别号Q14511，与同工型CRA_b(UniProt识别号Q5T9R4)相同。NEDD9同工型1在位置10-64处具有SH3结构域，在位置633-656处具有CC基序，在位置92、166、177和189处具有三个磷酸化位点，并且在位置363处具有切割位点。
同工型CRA_a(UniProt识别号Q5T9R4)也为834氨基酸蛋白，与同工型1的区别在于序列位置2、3和4。它属于Cas家族，如同所有的家族成员，以N末端SH3结构域为特征，该结构域包含对应REFSEQ登录号NM_006403.2(其为同工型1(Q14511))所定义的序列中残基7至66的60个氨基酸。它还含有包含多个可能的SH2结合位点的中心结构域和具有不同螺旋-环-螺旋(HLH)基序的C末端结构域。推测该SH2结合位点结合CRK、NCK和ABL SH2结构域。HLH基序赋予了与HLH蛋白ID2、E12和E47的特异相互作用。细胞周期调节的加工导致的翻译后修饰从同工型1产生了4种蛋白：p115、p105、p65和p55。蛋白同工型1 p115产生于同工型1 p105磷酸化，在细胞周期中较晚出现。同工型1 p55作为caspase切割相关位点处切割的结果产生于同工型1 p105，特定出现在有丝分裂中。
人NEDD9基因转录本的剪接差异可以产生蛋白同工型2(UniProt：Q5XKI0)、同工型CRA_c(REFSEQ：EAW55302.1)和同工型CRA_d(REFSEQ：EAW55303.1)。HEF1蛋白同工型CRA_c包含800个氨基酸，类似于同工型1和CRA_a，差别在于中心富含SH2基序结构域中丢失了小量潜在的配体基序。CRA_d的转录本编码缺乏N末端SH3结构域的688氨基酸蛋白。相比之下，同工型2为仅174氨基酸蛋白，与HEF1同工型1的1至154N末端残基相同，基本上仅为SH3结构域和大大减少的SH2配体结构域。其它的人NEDD9编码蛋白变体列在UniProt数据库中，包括残基Pro-148后截短的蛋白(UniProt：Q5TI59)，其基本上是同工型2的稍稍缩小的形式。
除了CRA_d同工型外，N末端SH3结构域存在于上文提到的每一NEDD9同工型中。
NEDD9为参与细胞内信号传播的多功能锚定蛋白，在多种组织的细胞核、细胞质和如高尔基体和板状伪足的结构中被表达。NEDD9的SH3结构域(aa 2-64)和卷曲螺旋(coiled-coil)结构域(aa 633-656)赋予以高选择性与三种细胞表面受体下游信号转导分子Lck、Lyn和Fyn相互作用的可能性。其它的蛋白相互作用基序为富含丝氨酸结构域(aa 400-558)和含螺旋-环-螺旋(HLH)基序的保守C末端结构域(aa 710-760)。NEDD9的SH3折叠由成直角的两反向平行β片层组成。在该折叠内有两可变环，称为RT和n-Src环。当SH3结合其配体时，富含脯氨酸配体采取聚L-脯氨酸II型螺旋构象，其中PPII螺旋结构被结合螺旋转角的SH3结构域表面上的一对凹槽所识别。该SH3凹槽由一系列几乎平行的、高度保守的芳香残基构成。
已鉴定NEDD 9与几种参与细胞信号转导的细胞内蛋白相互作用。表1描述了相互作用蛋白、相互作用类型和用于鉴定的实验方法。
表1
Figure GPA00001114963700461
Figure GPA00001114963700471
(ii)PHLDA1，一种参与受体结合下游细胞内信号的分子
人PHLDA1基因(Entrez基因ID 22822；Pleckstrin同源样结构域家族A成员1)，也称为TDAG51(T细胞死亡相关基因51)，编码表达5913核苷酸转录本，NCBI REFSEQ登录号NM_007350，有报道称cDNA序列可以翻译为401(REFSEQ：NP_031376)或400(REFSEQ：EAW97312.1)氨基酸的蛋白。PHLDA1基因编码蛋白的首选名称为Pleckstrin同源样结构域家族A成员1(PHLDA1)，具有UniProt识别号Q8WV24。PHLDA1在多种组织的细胞质、细胞质囊泡膜、细胞核和和核仁中被表达，以N末端pleckstrin同源或PH结构域为特征，该结构域包含对应REFSEQ登录号NP_031376所定义的序列中残基9至141的133个氨基酸。PHLDA1还含有15(脯氨酰谷氨酰胺酰-)重复序列，朝向C末端紧接有14(脯氨酰组氨酰-)重复序列。该PH结构域自身包括15(NP_031376)或14(EAW97312.1)残基聚(谷氨酰氨)元件。
UniProt知识库中列出的蛋白没有翻译后修饰。UniProt知识库仅描述了圈定为变体的259氨基酸蛋白(Q8WV24)，在Entrez数据库中为PHLDA1 CRA_a(例如REFSEQ：AAH18929.3、AAI10821.1和AI26426.2)。该蛋白缺乏所预测的较长形式的N末端起的141残基序列，且与NP_031376的区别在于在PH结构域中聚(谷氨酰氨)重复序列开始处具有单谷氨酰氨残基缺失，在这种形式中其为14残基长度。蛋白名称PHLDA1一般指这种259残基的较短形式。预测cDNA序列(REFSEQ：AAI30428)编码312残基的蛋白，其PH结构域包括在残基62至194中。
该PH结构域存在于以上描述的所有同工型中，并通常地包含约100个氨基酸。PH结构域具有由两垂直的反平行β片层和其后的C末端两亲螺旋构成的共同结构。连接β链的环在长度上有很大区别，使得PH结构域的检测相对困难。存在有pleckstrin同源样结构域家族A的三个成员，PHLDA1至PHLDA 3，它们中的每一个在组成部分PH结构域的氨基酸序列上差异显著。PHLDA1不同于其它的A家族成员，因为其在环中包含了另外的43氨基酸插入，所述环包括聚(谷氨酰氨)元件。
表2列出了一些已知与PHLDA1基因产物PHLDA1相互作用的分子，以及相互作用类型和用于鉴定的实验方法。
表2
  相互作用者名称   实验类型   类型
  EIF3S7   体内、体外、酵母双杂交   直接
  角蛋白相关蛋白4-12   酵母双杂交   直接
  MyoD家族抑制剂   酵母双杂交   直接
  磷脂爬行酶1   酵母双杂交   直接
  Poly(A)结合蛋白4   体内、体外、酵母双杂交   直接
  核糖体蛋白L14   体内、体外、酵母双杂交   直接
实施例3：IgE刺激后人和小鼠肥大细胞的NEDD9的表达动力学
在IgE刺激人和小鼠肥大细胞(衍生自人或小鼠骨髓干细胞)后评估NEDD9的表达动力学。让细胞与抗DNP/IgE单抗(10-500ng/ml)一起孵育2小时，并通过与DNP/白蛋白溶液(100ng/ml)交联特定时长(0至4小时)进行FcεRI活化。采用用于两物种的NEDD9特异引物通过定量实时PCR测量基因表达，并采用相对定量的比较Ct法进行分析(参见Livak and Schmittgen，Methods 25：402-408，(2001))。在人肥大细胞IgE交联后早期，NEDD9上调，2.5小时时达到峰值，5小时后下降至仅高于基线表达的稳态表达(图1A)。在人肥大细胞中也发现PHLDA1的表达水平应答IgE交联而上调，IgE刺激后5小时时达到峰值(图1B)。类似地，在小鼠肥大细胞IgE刺激后不久，观察到NEDD9和PHLDA1表达的早期上调，对于NEDD9在IgE刺激后1小时达到峰值，对于PHLDA1为30分钟，二者都在6小时前降至基线(图1C和图1D)。
实施例4：RBL-2H3细胞中应答FcεRI交联和离子霉素刺激的NEDD9和PHLDA1表达动力学
在表达FcεRI的大鼠肥大细胞系RBL-2H3细胞中评估NEDD9和PHLDA1的表达动力学。采用每一基因的特异引物通过基于SYBR绿的定量实时PCR测量基因表达。对每一引物采用三次重复来测定每一实验样品，包括用作内标的β-肌动蛋白特异引物。缺乏cDNA模板的阴性对照与每次测定一起进行以评估特异性。引物表达软件(Applied Biosystems)被用于引物设计。对每一样品确定阈值循环数(Ct)。将终点时显示非特异产物的PCR测定排除在进一步的数据分析之外。采用比较Ct法的相对定量被用于结果分析(参见Livak and Schmittgen，Methods 25：402-408，(2001))。NEDD9和PHLDA1的表达应答通过FcεRI交联的细胞活化而显著上调(图2A和图2C)。简言之，让5×106RBL-2H3细胞与抗DNP/IgE单抗(100ng/ml)在补充了5％胎牛血清、L-谷氨酰胺、青霉素/链霉素的F15组织培养基中一起孵育2小时。接着以DNP/白蛋白溶液(100ng/ml)交联FcεRI指定时长。FcεRI交联后的表达动力学分析显示两基因在刺激后早期发挥作用，提示其参与了调节导致肥大细胞活化的级联事件。
尽管大多数的特异肥大细胞活化途径包括FcεRI结合的IgE在细胞表面上的聚集，但是肥大细胞也可通过各种手段活化，包括FcγR、Toll样受体(TLR)和其它IgE非依赖触发物。因此，评估了NEDD9和PHLDA1是否参与了除了产生自FcεRI交联的细胞内信号级联之外的其它细胞内信号级联。离子霉素为将钙从细胞外转移至细胞内空间的离子载体，其导致细胞内游离钙增加并随后刺激肥大细胞效应子功能，包括释放预先形成的颗粒内的内容物。让肥大细胞与1μM离子霉素一起孵育，通过QRT-PCR在不同时间点分析NEDD9和PHLDA1的表达水平。两种情况下，在所有分析的时间点都发现基因表达水平应答离子霉素而上调(30、60和120min)(图2B和图2D)。类似于通过FcεRI交联的活化，对应答离子霉素的表达动力学的分析显示NEDD9和PHLDA1在刺激后早期发挥作用，从而再次支持它们参与了调节导致肥大细胞活化的级联事件。
实施例5：体外和体内沉默NEDD9表达后增加的肥大细胞脱粒
肥大细胞脱粒测定被用于评估沉默NEDD9表达是否能体外影响肥大细胞效应子功能。让RBL-2H3大鼠肥大细胞与DNP-IgE在3种不同的靶向NEDD9基因表达的siRNA存在下一起孵育30分钟，这些siRNA特异设计成干扰NEDD9表达。从AMBION Silencer Validated(沉默子验证)siRNA购买siRNA，采用推荐的操作进行转染(www.ambion.com)。不靶向任何基因的其它siRNA用作对照。与IgE/DNP孵育过夜后，通过以DNP/白蛋白偶联物交联活化FcεRI。然后通过β-己糖胺酶释放计算肥大细胞脱粒，并将其用作应答FcεRI交联的肥大细胞效应子功能的指示。如图3所示，与siRNA阴性对照相比，通过siRNA抑制NEDD9蛋白表达导致肥大细胞脱粒百分比增加。
然后采用被动皮肤过敏(PCA)反应体内评估减弱NEDD9和PHLDA1表达的作用。以NEDD9 siRNAs或PHLDA1 siRNAs(来自AMBION的沉默子验证siRNA)与IgE-DNP的组合，在耳根部皮下注射Lewis大鼠。对照siRNA/DNP-IgE注射在左耳内。通过24小时后以DNP/白蛋白静脉内激发而诱导FcεRI交联。30分钟后通过Evan蓝恢复来测量耳肥大细胞脱粒。与以siRNA对照处理的左耳相比，对右耳的局部NEDD9或PHLDA1 siRNA给药导致增加的脱粒(图4A和图4B)。
实施例6：靶向NEDD9的SH3结构域的肽在体外和体内中和肥大细胞活化材料与方法
(i)肽设计
SH3结构域识别参与了组装细胞内信号复合物以及信号转导和细胞活化中的调节过程的富含脯氨酸线性基序。NEDD9的SH3结构域在跨越人至蝇类的物种中保守(同源基因(Homologene)NCBI和图5)，提示其在信号转导活性中的重要性。N末端SH3结构域的序列对应REFSEQ登录号NM_006403.2(HEF1同工型1 UniProt：Q14511)定义的序列中的残基7至66。
HEF1同工型1(UniProt：Q14511.1)的残基7-66，人NEDD9(Entrez基因ID 4739)编码的N末端SH3结构域MARALYDNVP10 ECAEELAFRK20 GDILTVIEQN30 TGGLEGWWLC40SLHGRQGIVP50 GNRVKLLIGP60(SEQ ID NO：7)
构建NEDD9竞争肽以特异破坏NEDD9 SH3结构域与靶配体的结合。在Australian National University Australian Cancer Research FoundationBiomolecular Resource Facility(澳大利亚国立大学澳大利亚癌症研究基金会生物分子资源研究室)化学合成肽。采用标准Fmoc(9-芴甲氧羰基)方法在Symphony肽合成仪(Rainin Instrument Company Oakland CA)上进行Rink树脂(4-(2’，4’-二甲氧基苯基-Fmoc-氨基乙基)-苯氧基聚苯乙烯)上的固相合成，并通过反相HPLC纯化。对纯化产物的鉴定通过质谱学来证实。
构建了20聚体肽(MDD1)，其对应于图5中显示的NEDD9 SH3结构域的人序列(HS)的残基3-22。该肽MDD1被首先选来用于活性测试，因为其包括SH3结构域的RT(可变)环中的带负电残基簇。通过针对所有物种的肽blast证实了该MDD1肽为NEDD9特异的。MDD1的序列在包括智人、小家鼠、褐家鼠、黑猩猩、欧洲牛、家犬和红原鸡在内的哺乳动物以及红原鸡中是保守的(图5-参见突出显示的序列)。
也合成在错义序列(scrambled sequence)中含有相同氨基酸的肽(MDD1scram)来确定保持天然序列的必要性。将它们合成为N-乙酰基α-羧胺的形式以抑制末端离子化和被外肽酶降解。也生成生物素化的形式。以下详细列出这些肽序列：
MDD1肽：   RALYDNVPECAEELAFRKGD(SEQ ID NO：8)
MDD1scram  EALPGEDCAFRKDANRLVEY(SEQ ID NO：9)
也合成两另外的类似物，MDD1S10和MDD1A10，二者缺乏位置10处的半胱氨酸残基。
(ii)MDD1被RBL-2H3摄取
让RBL-2H3细胞在补加了10％胎牛血清(FCS)和抗生素的F15培养基中生长。用细胞刮刀小心地从培养瓶剥离细胞并以5×105细胞/孔的浓度接种在96孔微量滴定板中。细胞与各种浓度的生物素化MDD1(0.1mM、0.01mM和0.001mM)一起孵育过夜。根据制造商的说明(Becton Dickinson，BD)，采用链霉亲和素-APC在经组合的cytofix/cytoperm固定和透化溶液试剂盒预先处理的单细胞悬浮液中检测肝细胞对生物素化MDD1的摄取。然后采用BD FACscan流式细胞仪分析细胞。
(iii)RBL-2H3脱粒测定
采用β-己糖胺酶释放法测量肥大细胞脱粒。让RBL-2H3细胞在补加了10％胎牛血清(FCS)和抗生素的F15培养基中生长。用细胞刮刀小心地从培养瓶剥离细胞，以5×105细胞/孔的浓度接种在96孔微量滴定板中，并在MDD1或SCR肽存在下孵育过夜。然后让RBL-2H3细胞与500ng/ml抗DNP IgE mb(SIGMA)37℃孵育2小时。洗涤后，以100ng/ml DNP/白蛋白刺激细胞30分钟。对于非IgE特异刺激，仅将1nM离子霉素添加至培养物30分钟。接着收集上清液，并采用0.1％Triton X-100制备细胞裂解液。将裂解液和上清液样品(10μl)转移至96孔板，向每孔添加50μl的含1mM对硝基苯基-N-乙酰基-β-D-吡喃葡萄糖苷的50mM柠檬酸盐缓冲液，并在黑暗中37℃孵育1小时。通过向每孔添加100μl 0.1MNaHCO3/0.1M Na2CO3而终止反应，在405nm处测量吸收值。通过下式计算脱粒百分比：OD上清液/(OD上清液+OD裂解液)×100。
(iii)OVA诱导的哮喘模型
用含10μg卵清蛋白抗原(OVA)的盐水腹膜内致敏C57BL/6小鼠，隔日给药，共7次。首次致敏给药后40天，用鼻内OVA(每鼻孔20μl的5mg/ml OVA盐水溶液)激发小鼠。小鼠在第一次以OVA激发后的第3和第6天再接受两次鼻内OVA激发。对照小鼠以OVA致敏，但是以盐水鼻内激发。接受胃肠外MDD1治疗的小鼠组静脉内注射8mg/Kg的MDD1共3次，在每次OVA激发前的6小时进行。雾化的MDD1或MDDscram(SCR)肽在每次OVA激发前6小时给予，其通过以8ml的1mg/ml MDD1或对照肽让每笼5只小鼠雾化吸入。
在最后的OVA激发后1天进行肺功能分析和器官收集。在增加β-乙酰甲胆碱剂量后，在麻醉的小鼠中测量肺阻力。通过手术暴露气管，插入导管并连接至啮齿动物呼吸机(flexivent；Scireq)。让小鼠稳定，以盐水气雾剂激发，接着增加乙酰甲胆碱的浓度。采用Buxco提供的设备和软件，通过体积描记术测量肺阻力。肺阻力值表示为针对每一乙酰甲胆碱剂量的每组小鼠的均值。对于每只小鼠，通过对每一乙酰甲胆碱剂量计算收集数据(每5秒1次，持续5分钟)的均值来计算各个值。
免疫染色，细胞因子表达
制备血涂片，并通过May-Grünwald Giemsa染色后的形态学标准计算嗜酸性细胞百分比。通过气管插管术在轻轻按摩胸腔的同时以1mlHANKS溶液灌洗气道两次，来重获支气管肺泡灌洗液(BAL)。收集肺左下叶并匀浆。通过细胞过滤网过滤细胞并在染色培养基(PBS，含1％FCS)中制备细胞悬浮液。让BAL和肺样品与抗CD11b、抗CCR3、抗CD4和抗B220单抗标志物一起孵育，用于采用配备了CellQuest软件的FACScan进行流式细胞术分析。
收集肺右上叶并在冰上匀浆。采用Trizol(GIBCO，Invitrogen)制备总RNA。RNA的纯度通过A260/A280来确定。采用Omniscript RT试剂盒(Qiagen)将每一样品的5μg RNA逆转录为cDNA。细胞因子特异的预设计TaqMan基因表达测定(Applied Biosystems)被用于测量细胞因子相对基因表达，其按制造商的说明进行(Applied Biosystems)。每一实验样品以三次重复进行测定。β-肌动蛋白特异的引物用作内标。无空cDNA模板的阴性对照与每次测定一起操作以评估特异性。循环条件如下：95℃10分钟1个循环，接着是PCR扩增的40个循环，每一个循环由95℃15秒和60℃45秒构成。序列检测软件(SDS v 1.2.2，Applied Biosystems)被用于结果分析。为每一样品确定阈值循环数(Ct)。将终点时显示出非特异产物的PCR测定排除在进一步的数据分析之外。采用比较Ct法的相对定量被用于结果分析。结果表示为相对于未过敏小鼠的值的相对倍数变化。
血清Ig水平
OVA特异的IgE检测：在4℃用抗小鼠IgE包被96孔maxisorp板过夜。2％脱脂乳被用于非特异结合封闭。将预先稀释的血清样品孵育过夜，让板负载OVA-生物素1.5小时并采用ABTS按制造商的说明显示比色反应。对于OVA特异的IgG，用0.2％戊二醛预处理96孔maxisorp微量滴定板，并以含10μg/ml OVA的10mM碳酸盐缓冲液(pH 9.6)在37℃包被3小时。在加湿室内以含2％BSA的10mM碳酸盐缓冲液(pH 9.6)在4℃封闭孔过夜。血清样品于37℃孵育1小时。相继将过氧化物酶偶联的抗大鼠IgG和ABTS用于显示比色反应。采用405nm滤色片读取酶标板中的光密度。IgE和IgG的水平表示为OD单位。
小鼠中的被动皮肤过敏测定(PCA)
左耳以DMSO处理，右耳以含0.2％MDD1或含0.1％地塞米松的DMSO处理，每天两次，持续4天。然后以抗DNP致敏小鼠-采用胰岛素注射器通过皮内注射将20μl IgE抗体给予耳部。通过应答注射后24小时FcεRI交联的染色恢复来测量局部肥大细胞活化：静脉内注射含100μg DNP-白蛋白/1％Evans蓝的PBS，并将30分钟后取得的耳活检组织于80℃在1ml甲酰胺中孵育2小时。在620nm测量上清液吸收值。
结果
(i)MDD1肽在体外有生物学活性
发现MDD1肽渗入细胞膜。MDD1肽直接偶联至生物素并给予至RBL-2H3肥大细胞。MDD1肽摄取通过采用将链霉亲和素APC用作荧光染料的细胞内FACS染色来检测。所有的细胞都对MDD1肽呈阳性，并且观察到水平随肽浓度增加(图6)。
(ii)MDD1肽抑制IgE受体交联后RBL-2H3细胞内的脱粒
观察到MDD1肽(SEQ ID NO：8)在IgE受体交联后以及非特异刺激后(数据未示出)抑制肥大细胞活化。未经MDD1肽预处理的RBL-2H3细胞在IgE受体交联后脱粒(图7)。但是，观察到以MDD1肽预处理RBL-2H3细胞会抑制IgE受体交联时的脱粒(图7)。以错义肽MDD1scram(SEQ IDNO：9)预处理RBL-2H3细胞仅对IgE受体交联后的脱粒有较次要的抑制作用(图7)。
(iii)MDD1肽改善以β-乙酰甲胆碱激发后OVA致敏小鼠中的肺功能
在肥大细胞活化驱使的小鼠哮喘模型中测试MDD1肽在控制哮喘反应中的功效。这种模型中的肺炎症和哮喘反应依赖于肥大细胞活化，因为无肥大细胞的小鼠不出现这种疾病。
与以对照肽处理的小鼠相比，在接触抗原时以MDD1处理的OVA致敏小鼠在β-乙酰甲胆碱激发后具有改善的肺功能(图8)。在增加β-乙酰甲胆碱剂量后测量以MDD1肽或对照(SRC)肽处理的OVA致敏小鼠的肺阻力。与以对照肽处理的小鼠相比，以MDD1肽处理的小鼠肺阻力(RL)减小。当肽静脉内给予(图8A)或采用雾化的鼻内途径局部给予肺(图8B)时观察到这种作用。
(iv)MDD1肽减弱以β-乙酰甲胆碱激发后OVA致敏小鼠哮喘反应期间的炎性反应
MDD1肽减弱哮喘反应中的总体炎性反应，这通过与对照处理的小鼠相比减少的血液中嗜酸性粒细胞增多(图9A)、支气管肺泡灌洗液中的细胞结构(图9B)、炎性病灶中的细胞因子产生(图9CA)和过敏小鼠血清中抗原特异的IgE水平(图9D)来证实。在一些测试的参数中MDD1肽表现好于地塞米松治疗(2mg/kg i.p.)(图9)。
(v)局部给予MDD1肽减弱变应性反应
特应性皮炎和其它变应性皮肤状况被认为是肥大细胞反应所驱动的。局部给予MDD1肽被证实会稳定皮肤肥大细胞。在以抗DNP IgE抗体IgE局部致敏之前，将0.2％MDD1肽/DMSO制剂局部涂至每只小鼠的一耳。来自经MDD1肽/DMSO处理耳的活检组织中的肥大细胞被发现在IgE受体交联后具有降低的活化水平，这通过与仅以DMSO处理的对侧耳相比的染料外渗来确认(图10)。MDD1局部起作用，具有最小的全身效应，而局部地塞米松处理导致全身免疫抑制。
实施例7：PHLDA1基因产物的PH结构域的肽竞争者中和肥大细胞活化材料与方法
(i)肽设计
PHLDA1的PH结构域包含133个氨基酸，范围为REFSEQ登录号NM_006403.2定义的序列中氨基酸残基9至141。该序列在哺乳动物中是高度保守的。该PHLDA1 PH结构域包括大环插入序列，其如以下所示(参见加粗斜体序列：残基37至79)。
PHLDA1(UniProt：Q8WV24.1)的残基9-141，人PHLDA1(Entrez基因ID 22822)编码的PH结构域ALKEGVLEKR10 SDGLLQLWKK20 KCCILTEEGL30 LLIPPK
Figure GPA00001114963700562
ELHFSNMKTV90 DCVERKGKYM100 YFTVVMAEGK110 EIDFRCPQDQ120GWNAEITLQM130 VQY(SEQ ID NO：10)
两人同工型中以及哺乳动物物种之间的序列变异位于聚(谷氨酰胺)元件侧翼，并且均聚序列的长度也是可变的。
为了特异干扰PHLDA1的PH结构域的活性，设计并合成了两竞争肽序列(MPX741、MPX742和MPX743)。竞争肽的设计基于聚(谷氨酰胺)重复元件上游(即N-末端)和下游(即C末端)的序列。MPX741对应于聚(谷氨酰胺)元件N末端的序列(预测的用于磷脂酰脂质的结合位点)，MPX742对应于大概位于PHLDA1PH结构域中心的序列，而MPX743对应于聚(谷氨酰胺)元件C末端序列。将这些肽合成为N-乙酰基α-羧胺的形式以抑制末端离子化和被外肽酶降解。以下详细列出这些肽。
MPX741 KRSDGLLQLWKKKCCILTEEGLLLIPPK(SEQ ID NO：11)
MPX742 LEPPVKLKELHFSNMKTVD(SEQ ID NO：12)
MPX743 PQDQGWNAEITLQMVQY(SEQ ID NO：13)
MPX741对应SEQ ID NO：11所示的PH结构域的残基9至36，其组成氨基酸中的15个与其它PHLDA家族成员的PH结构域存在差异。MPX742对应SEQ ID NO：12所示的PH结构域的残基73至91，其组成氨基酸与其它PHLDA家族成员的PH结构域仅共有4氨基酸。MPX742的N末端5氨基酸对应独特的PHLDA1环插入序列的C末端(这为PHLDA1的PH结构域所特有)。MPX743对应SEQ ID NO：13所示的PH结构域的残基117至130，其组成氨基酸与其它PHLDA家族成员的PH结构域有11氨基酸的差异。
在Australian National University Australian Cancer ResearchFoundation Biomolecular Resource Facility(澳大利亚国立大学澳大利亚癌症研究基金会生物分子资源研究室)化学合成肽。采用标准Fmoc(9-芴甲氧羰基)操作在Symphony肽合成仪(Rainin Instrument Company OaklandCA)上进行Rink树脂(4-(2’，4’-二甲氧基苯基-Fmoc-氨基乙基)-苯氧基聚苯乙烯)上的固相合成，并通过反相HPLC纯化。对纯化产物的鉴定通过质谱学来证实。
(ii)RBL-2H3脱粒测定
采用β-己糖胺酶释放法测量肥大细胞脱粒。让RBL-2H3细胞在补加了10％胎牛血清(FCS)和抗生素的F15培养基中生长。用细胞刮刀小心地从培养瓶剥离细胞，以5×105细胞/孔的浓度接种在96孔微量滴定板中，并在MPX741肽或MPX742肽存在下孵育过夜。然后让RBL-2H3细胞在37℃与500ng/ml抗DNP IgE mb(SIGMA)一起孵育2小时。洗涤后，以100ng/ml DNP/白蛋白刺激细胞30分钟。对于非IgE特异刺激，仅将1nM离子霉素添加至培养物30分钟。接着收集上清，并采用0.1％Triton X-100制备细胞裂解液。将裂解液和上清液样品(10μl)转移至96孔板，向每一孔添加50μl的含1mM对硝基苯基-N-乙酰基-β-D-吡喃葡萄糖苷的50mM柠檬酸盐缓冲液，并在黑暗中于37℃孵育1小时。通过向每一孔添加100μl 0.1M NaHCO3/0.1M Na2CO3而终止反应，在405nm处测量吸收值。通过下式计算脱粒百分比：OD上清液/(OD上清液+OD裂解液)×100。
结果
(i)MPX741和MPX742中和肥大细胞活化
观察到MPX743(SEQ ID NO：13)溶解性差，因此在进一步测试前需要进行修饰。证实MPX741(SEQ ID NO：11)和MPX742(SEQ ID NO：12)显著减弱IgE受体交联后的脱粒(图11)。因此，以MPX741或MPX742处理RBL-2H3细胞会显著抑制肥大细胞活化。
实施例8：另外的NEDD 9SH3结构域竞争肽
在本文中肽MDD1被证实为肥大细胞活化的抑制剂，因此给予该肽提供了治疗和/或预防超敏反应的手段。如上文实施例6中所描述的，MDD1为对应NEDD9 SH3结构域的人序列(显示在图5中)的残基3-22的竞争肽。
涉及通过修饰MDD1肽中的一个或多个氨基酸残基而产生的变体将在很多情况下能仿效或改善该肽的一种或多种性能，例如使肥大细胞脱敏的能力、溶解性、化学和生物学稳定性、细胞摄取、毒性、免疫原性和降解产物的排泄。通过鉴定MDD1肽序列中可能为一种或多种特定目的性能的负面或正面决定基的一个或多个特定氨基酸，来设计具有类似或改善性能的MDD1肽的变体。可采用类似于以上实施例6中描述的方法以及本领域公知的其它方法来测试那些MDD1肽变体的功能活性。
例如，侧链截断可用于以丙氨酸沿MDD1肽的序列一次置换一个氨基酸(例如Gautam et al.1995，“Binding of an invariant-chain peptide，CLIP，to I-A major histocompatibility complex class II molecules(恒定链肽CLIP与I-A组织相容性复合物II类分子的结合)”Proc Natl Acad Sci USA，92：335-9中描述的)。待通过这种方法测试的MDD1肽变体包括示于SEQ IDNOs 33-49中的那些序列。另外，丙氨酸可沿MDD1肽置换多个残基，特别是存在带负电残基的位置(参见SEQ ID NOs：24-26)。
还涉及增加或减小MDD1肽的长度也将在很多情况下能仿效或改善该肽的一种或多种性能。因此将采用本文描述的方法和/或本领域公知的其它方法测试减小长度的MDD1变体对肥大细胞活化和超敏性的作用。这类MDD1肽变体的示例性序列示于SEQ ID NOs：18-19和122-144)。
设计了并将测试其它的MDD1肽变体，这些变体包括MDD1肽序列的10位半胱氨酸残基被丝氨酸(SEQ ID NO：16)或丙氨酸(SEQ ID NO：17)置换的那些。还采用SEQ ID NOs：20-23和145-184所示的序列测试在残基10处包含丝氨酸或丙氨酸置换的MDD1肽的长度变体(即SEQ ID NO：16和SEQ ID NO：17的长度变体)。另外，根据SEQ ID NOs：90-121所示的序列，将测试具有10位半胱氨酸残基置换(如SEQ ID NO：16或SEQ IDNO：17中)以及沿该链其它一个或多个残基处的单/多丙氨酸置换的其它系列的MDD1变体肽。
还涉及对应全长NEDD9 SH3结构域(SEQ ID NO：7)以及NEDD9SH3结构域中其它特定区域的竞争肽将能够调节肥大细胞活化，因此影响到超敏反应。采用类似于上文实施例6中描述的方法和/或本领域公知的其它方法测试一系列重叠的20聚体肽(SEQ ID NOs 14、15和185-225)和12聚体肽(SEQ ID NOs：226-273)。那些肽的具有沿该链的单/多丙氨酸置换的变体包括具有SEQ ID NOs：50-89)所示序列的变体。
对应于NEDD9 SH3结构域(及其变体)的至少一部分的示例性肽序列示于SEQ ID NOs：14-273，将合成它们并测试对肥大细胞活化的作用/对超敏反应的影响。
实施例9：衍生自NEDD9 SH3结构域的其它竞争肽
肽MPX741和MPX742在本文中被证实为肥大细胞活化抑制剂，因此给予这些肽提供了治疗和/或预防超敏反应的手段。如在上文实施例7中描述的，MPX741和MPX742为分别对应PHLDA1 PH结构域的人序列PH结构域的残基9-36和残基73-91的竞争肽。
涉及通过修饰MPX741和MPX742肽之一中的一个或多个氨基酸残基而产生的变体将在很多情况下能仿效或改善该肽的一种或多种性能，例如使肥大细胞脱敏的能力、溶解性、化学和生物学稳定性、细胞摄取、毒性、免疫原性和降解产物的排泄。通过鉴定MPX741和MPX742肽序列中可能为一种或多种特定目的性能的负面或正面决定基的一个或多个特定氨基酸残基，来设计具有类似或改善性能的MPX741和MPX742肽的变体。可采用类似于以上实施例6中描述的方法以及本领域公知的方法来测试这些MPX741和MPX742肽变体的功能活性。
例如，侧链截断可用于以丙氨酸沿MPX741和MPX742肽的序列一次置换一个氨基酸(例如Gautam et al.1995，“Binding of an invariant-chainpeptide，CLIP，to I-A major histocompatibility complex class II molecules(恒定链肽CLIP与I-A组织相容性复合物II类分子的结合)”Proc Natl AcadSci USA，92：335-9中描述的)。待通过这种方法测试的MPX741和MPX742肽变体包括示于SEQ ID NOs 274-320的那些序列。另外，丙氨酸可沿MPX741和MPX742肽置换多个残基，特别是存在带负电残基的位置。
还涉及增加或减小MPX741和MPX742肽的长度也将在很多情况下仿效或改善该肽的一种或多种性能。因此将采用本文描述的方法和/或本领域公知的其它方法测试减小长度的MPX741和MPX742变体对肥大细胞活化和超敏性的作用。这类MDD1肽变体的示例性序列示于SEQ IDNOs：321-374。
还涉及对应全长PHLDA1 PH结构域(SEQ ID NO：10)以及PHLDA1PH结构域中其它特定区域的竞争肽将能够调节肥大细胞活化，因此影响到超敏反应。采用类似于上文实施例6中描述的方法和/或本领域公知的其它方法测试一系列重叠的20聚体肽(SEQ ID NOs 14、15和185-225)和12聚体肽(SEQ ID NOs：375-488)。也将测试这些肽的具有沿该链的单/多丙氨酸置换的变体。
对应于PHLDA1 PH结构域的示例性肽序列(及其变体)示于SEQ IDNOs：274-488，将合成它们并测试其对肥大细胞活化/超敏性的作用。
实施例10：组合物
(i)可注射的胃肠外组合物
可通过将0.005mg至5g的再一种适合的药剂或本发明的化合物混合进10％体积比的丙二醇和水中，来制备适合于注射给药形式的本发明药物组合物。
(ii)用于口服给药的组合物
可以通过将0.005mg至5g的粉末形式药剂或化合物、100mg乳糖、35mg滑石粉和10mg硬脂酸镁填充进标准的两件式硬明胶胶囊，来制备胶囊形式的本发明的再一种适合的药剂或本发明的化合物的组合物。
(iii)吸入给药的组合物
对于容量20-30mL的气雾剂容器：将0.005mg至5g的再一种适合的药剂或本发明的化合物、0.5-0.8％重量比的润滑剂如聚山梨醇酯85或油酸的混合物分散在诸如氟利昂的推进剂中，并将其装入适当的气雾剂容器中用于鼻内或口腔吸入给药。
序列表
<110>澳大利亚国立大学
<120>超敏反应调节剂
<130>818010C
<160>488
<170>PatentIn version 3.2
 
<210>1
<211>4532
<212>DNA
<213>智人
<400>1
agtgacttga gggaggcgct gcgactgaca agcggctctg cccgggacct tctcgctttc      60
atctagcgct gcactcaatg gaggggcggg caccgcagtg cttaatgctg tcttaactag     120
tgtaggaaaa cggctcaacc caccgctgcc gaaatgaagt ataagaatct tatggcaagg     180
gccttatatg acaatgtccc agagtgtgcc gaggaactgg cctttcgcaa gggagacatc     240
ctgaccgtca tagagcagaa cacaggggga ctggaaggat ggtggctgtg ctcgttacac     300
ggtcggcaag gcattgtccc aggcaaccgg gtgaagcttc tgattggtcc catgcaggag     360
actgcctcca gtcacgagca gcctgcctct ggactgatgc agcagacctt tggccaacag     420
aagctctatc aagtgccaaa cccacaggct gctccccgag acaccatcta ccaagtgcca     480
ccttcctacc aaaatcaggg aatttaccaa gtccccactg gccacggcac ccaagaacaa     540
gaggtatatc aggtgccacc atcagtgcag agaagcattg ggggaaccag tgggccccac     600
gtgggtaaaa aggtgataac ccccgtgagg acaggccatg gctacgtata cgagtaccca     660
tccagatacc aaaaggacgt ctatgatatc cctccttctc ataccactca aggggtatac     720
gacatccctc cctcatcagc aaaaggccct gtgttttcag ttccagtggg agagataaaa     780
cctcaagggg tgtatgacat cccgcctaca aaaggggtat atgccattcc gccctctgct     840
tgccgggatg aagcagggct tagggaaaaa gactatgact tcccccctcc catgagacaa     900
gctggaaggc cggacctcag accggagggg gtttatgaca ttcctccaac ctgcaccaag     960
ccagcaggga aggaccttca tgtaaaatac aactgtgaca ttccaggagc tgcagaaccg    1020
gtggctcgaa ggcaccagag cctgtccccg aatcacccac ccccgcaact cggacagtca    1080
gtgggctctc agaacgacgc atatgatgtc ccccgaggcg ttcagtttct tgagccacca    1140
gcagaaacca gtgagaaagc aaacccccag gaaagggatg gtgtttatga tgtccctctg    1200
cataacccgc cagatgctaa aggctctcgg gacttggtgg atgggatcaa ccgattgtct    1260
ttctccagta caggcagcac ccggagtaac atgtccacgt cttccacctc ctccaaggag    1320
tcctcactgt cagcctcccc agctcaggac aaaaggctct tcctggatcc agacacagct    1380
attgagagac ttcagcggct ccagcaggcc cttgagatgg gtgtctccag cctaatggca    1440
ctggtcacta ccgactggcg gtgttacgga tatatggaaa gacacatcaa tgaaatacgc    1500
acagcagtgg acaaggtgga gctgttcctg aaggagtacc tccactttgt caagggagct    1560
gttgcaaatg ctgcctgcct cccggaactc atcctccaca acaagatgaa gcgggagctg    1620
caacgagttg aagactccca ccagatcctg agtcaaacca gccatgactt aaatgagtgc    1680
agctggtccc tgaatatctt ggccatcaac aagccccaga acaagtgtga cgatctggac    1740
cggtttgtga tggtggcaaa gacggtgccc gatgacgcca agcagctcac cacaaccatc    1800
aacaccaacg cagaggccct cttcagaccc ggccctggca gcttgcatct gaagaatggg    1860
ccggagagca tcatgaactc aacggagtac ccacacggtg gctcccaggg acagctgctg    1920
catcctggtg accacaaggc ccaggcccac aacaaggcac tgcccccagg cctgagcaag    1980
gagcaggccc ctgactgtag cagcagtgat ggttctgaga ggagctggat ggatgactac    2040
gattacgtcc acctacaggg taaggaggag tttgagaggc aacagaaaga gctattggaa    2100
aaagagaata tcatgaaaca gaacaagatg cagctggaac atcatcagct gagccagttc    2160
cagctgttgg aacaagagat tacaaagccc gtggagaatg acatctcgaa gtggaagccc    2220
tctcagagcc tacccaccac aaacagtggc gtgagtgctc aggatcggca gttgctgtgc    2280
ttctactatg accaatgtga gacccatttc atttcccttc tcaacgccat tgacgcactc    2340
ttcagttgtg tcagctcagc ccagcccccg cgaatcttcg tggcacacag caagtttgtc    2400
atcctcagtg cacacaaact ggtgttcatt ggagacacgc tgacacggca ggtgactgcc    2460
caggacattc gcaacaaagt catgaactcc agcaaccagc tctgcgagca gctcaagacc    2520
atagtcatgg caaccaagat ggccgccctc cattacccca gcaccacggc cctgcaggaa    2580
atggtgcacc aagtgacaga cctttctaga aatgcccagc tgttcaagcg ctctttgctg    2640
gagatggcaa cgttctgaga agaaaaaaaa gaggaagggg actgcgttaa cggttactaa    2700
ggaaaactgg aaatactgtc tggtttttgt aaatgttatc tatttttgta gatattttat    2760
ataaaaatga aatattttaa cattttatgg gtcagtcaac tttcagaaat tcagggagct    2820
ggagagggaa atcttttttt ttccccctga gtggttctta tgtacataga ggtatctgag    2880
acataaactg tacagaaaac ttgtccacgt gcttttgtat gcccatgtat tcatgtttgt    2940
ttgtagatgt ttgtctgatg catttcatta aaaaaaaaac catgaattac gaagcacctt    3000
agtaagcacc tcctaatgct gcattttttt tgttgttgtt aaaaacatac cagctggtta    3060
taatattgtt ctccacgtcc ttgtgatgat tctgagcctg gcactcccaa atctgggaag    3120
catagtttat ttgcaagtgt tcaccttcca aatcatgagg catagcatga cttattcttg    3180
tttggaaaac tcttttcaaa actgaccatc ttaaacacat gatggccaag tgcccaaaag    3240
ccctcttgcg gagcaaattt cagaatatat atgtggatcc aagctctgat agttcaggtg    3300
ctggagggaa gagagacctg tgtgtttaga ggccaggacc acagttagga ttgggttgtt    3360
tcaatactga gagacagcta caataaaagg agagcaattg cctccctggg gctgttcaat    3420
cttctgcatt tgtgagtggt tcagtcatga ggttttccaa aagatgtttt tagagttgta    3480
aaaaccatat ttgcagcaaa gatttacaaa ggcgtatcag actatgattg ttcaccaaaa    3540
taggggaatg gtttgatccg ccagttgcaa gtagaggcct ttctgactct taatattcac    3600
tttggtgcta ctacccccat tacctgaggg aaactggcca ggtccttgat catggaacta    3660
tagagctacc aggacatatc ctgctctcta agggaattta ttgctatctt gcaccttctt    3720
taaaactcac atatgcagac ctgacactca agagtggcta gctacacaga gtccatctaa    3780
tttttgcaac ttcctgtggc cagtgtgtat aaccccttcc actatctcac agatagtcac    3840
agcgtccatt ccatagtctg tctcctcaca tctgttagta ttgacacagc acagacacca    3900
caagccatca ggttcttcat ggggcaggtg aaatacttct accccatggg taaatgtatt    3960
cacatattac caagagaaga agcacattat ctatgatctt ttggcccagt tcttatttag    4020
catttttatt ccagcctact tggaaacatg tttttatttg caatatatgc ctgactgaat    4080
taagcttgct tgttttaaac aaccaaatca ttggaacaga aaaggattta aaaaacaaga    4140
atgcatgatc tcagagtgat taaaaaaaaa tcagtggaaa taaatgatca tagaaggtgc    4200
ttttcaaaac aactgctatt ataattctca aagtcctact ctgccaaaag aagattaaaa    4260
gtcatacatt acattacaag gaaatgttca tgtgggaaga gggttgctga aaatcaacaa    4320
cgcttgaagt taaaaagtgt gtctttgtag atttcattgt ataatgtgta tttcttagga    4380
gatggctgac ttgattgatc tacgctaagt ggagacattt cacattttta aaaccaaatg    4440
ttcaatctgt attactcttt gccgtcttgt atgtagaggc tatttttaaa tcattaaatt    4500
tttagatctc tgttttcaaa aaaaaaaaaa aa                                  4532
 
<210>2
<211>834
<212>PRT
<213>智人
<400>2
Met Lys Tyr Lys Asn Leu Met Ala Arg Ala Leu Tyr Asp Asn Val Pro
1               5                   10                  15
Glu Cys Ala Glu Glu Leu Ala Phe Arg Lys Gly Asp Ile Leu Thr Val
            20                  25                  30
Ile Glu Gln Asn Thr Gly Gly Leu Glu Gly Trp Trp Leu Cys Ser Leu
        35                  40                  45
His Gly Arg Gln Gly Ile Val Pro Gly Asn Arg Val Lys Leu Leu Ile
    50                  55                  60
Gly Pro Met Gln Glu Thr Ala Ser Ser His Glu Gln Pro Ala Ser Gly
65                  70                  75                  80
Leu Met Gln Gln Thr Phe Gly Gln Gln Lys Leu Tyr Gln Val Pro Asn
                85                  90                  95
Pro Gln Ala Ala Pro Arg Asp Thr Ile Tyr Gln Val Pro Pro Ser Tyr
            100                 105                 110
Gln Asn Gln Gly Ile Tyr Gln Val Pro Thr Gly His Gly Thr Gln Glu
        115                 120                 125
Gln Glu Val Tyr Gln Val Pro Pro Ser Val Gln Arg Ser Ile Gly Gly
    130                 135                 140
Thr Ser Gly Pro His Val Gly Lys Lys Val Ile Thr Pro Val Arg Thr
145                 150                 155                 160
Gly His Gly Tyr Val Tyr Glu Tyr Pro Ser Arg Tyr Gln Lys Asp Val
                165                 170                 175
Tyr Asp Ile Pro Pro Ser His Thr Thr Gln Gly Val Tyr Asp Ile Pro
            180                 185                 190
Pro Ser Ser Ala Lys Gly Pro Val Phe Ser Val Pro Val Gly Glu Ile
        195                 200                 205
Lys Pro Gln Gly Val Tyr Asp Ile Pro Pro Thr Lys Gly Val Tyr Ala
    210                 215                 220
Ile Pro Pro Ser Ala Cys Arg Asp Glu Ala Gly Leu Arg Glu Lys Asp
225                 230                 235                 240
Tyr Asp Phe Pro Pro Pro Met Arg Gln Ala Gly Arg Pro Asp Leu Arg
                245                 250                 255
Pro Glu Gly Val Tyr Asp Ile Pro Pro Thr Cys Thr Lys Pro Ala Gly
            260                 265                 270
Lys Asp Leu His Val Lys Tyr Asn Cys Asp Ile Pro Gly Ala Ala Glu
        275                 280                 285
Pro Val Ala Arg Arg His Gln Ser Leu Ser Pro Asn His Pro Pro Pro
    290                 295                 300
Gln Leu Gly Gln Ser Val Gly Ser Gln Asn Asp Ala Tyr Asp Val Pro
305                 310                 315                 320
Arg Gly Val Gln Phe Leu Glu Pro Pro Ala Glu Thr Ser Glu Lys Ala
                325                 330                 335
Asn Pro Gln Glu Arg Asp Gly Val Tyr Asp Val Pro Leu His Asn Pro
            340                 345                 350
Pro Asp Ala Lys Gly Ser Arg Asp Leu Val Asp Gly Ile Asn Arg Leu
        355                 360                 365
Ser Phe Ser Ser Thr Gly Ser Thr Arg Ser Asn Met Ser Thr Ser Ser
    370                 375                 380
Thr Ser Ser Lys Glu Ser Ser Leu Ser Ala Ser Pro Ala Gln Asp Lys
385                 390                 395                 400
Arg Leu Phe Leu Asp Pro Asp Thr Ala Ile Glu Arg Leu Gln Arg Leu
                405                 410                 415
Gln Gln Ala Leu Glu Met Gly Val Ser Ser Leu Met Ala Leu Val Thr
            420                 425                 430
Thr Asp Trp Arg Cys Tyr Gly Tyr Met Glu Arg His Ile Asn Glu Ile
        435                 440                 445
Arg Thr Ala Val Asp Lys Val Glu Leu Phe Leu Lys Glu Tyr Leu His
    450                 455                 460
Phe Val Lys Gly Ala Val Ala Asn Ala Ala Cys Leu Pro Glu Leu Ile
465                 470                 475                 480
Leu His Asn Lys Met Lys Arg Glu Leu Gln Arg Val Glu Asp Ser His
                485                 490                 495
Gln Ile Leu Ser Gln Thr Ser His Asp Leu Asn Glu Cys Ser Trp Ser
            500                 505                 510
Leu Asn Ile Leu Ala Ile Asn Lys Pro Gln Asn Lys Cys Asp Asp Leu
        515                 520                 525
Asp Arg Phe Val Met Val Ala Lys Thr Val Pro Asp Asp Ala Lys Gln
    530                 535                 540
Leu Thr Thr Thr Ile Asn Thr Asn Ala Glu Ala Leu Phe Arg Pro Gly
545                 550                 555                 560
Pro Gly Ser Leu His Leu Lys Asn Gly Pro Glu Ser Ile Met Asn Ser
                565                 570                 575
Thr Glu Tyr Pro His Gly Gly Ser Gln Gly Gln Leu Leu His Pro Gly
            580                 585                 590
Asp His Lys Ala Gln Ala His Asn Lys Ala Leu Pro Pro Gly Leu Ser
        595                 600                 605
Lys Glu Gln Ala Pro Asp Cys Ser Ser Ser Asp Gly Ser Glu Arg Ser
    610                 615                 620
Trp Met Asp Asp Tyr Asp Tyr Val His Leu Gln Gly Lys Glu Glu Phe
625                 630                 635                 640
Glu Arg Gln Gln Lys Glu Leu Leu Glu Lys Glu Asn Ile Met Lys Gln
                645                 650                 655
Asn Lys Met Gln Leu Glu His His Gln Leu Ser Gln Phe Gln Leu Leu
            660                 665                 670
Glu Gln Glu Ile Thr Lys Pro Val Glu Asn Asp Ile Ser Lys Trp Lys
        675                 680                 685
Pro Ser Gln Ser Leu Pro Thr Thr Asn Ser Gly Val Ser Ala Gln Asp
    690                 695                 700
Arg Gln Leu Leu Cys Phe Tyr Tyr Asp Gln Cys Glu Thr His Phe Ile
705                 710                 715                 720
Ser Leu Leu Asn Ala Ile Asp Ala Leu Phe Ser Cys Val Ser Ser Ala
                725                 730                 735
Gln Pro Pro Arg Ile Phe Val Ala His Ser Lys Phe Val Ile Leu Ser
            740                 745                 750
Ala His Lys Leu Val Phe Ile Gly Asp Thr Leu Thr Arg Gln Val Thr
        755                 760                 765
Ala Gln Asp Ile Arg Asn Lys Val Met Asn Ser Ser Asn Gln Leu Cys
    770                 775                 780
Glu Gln Leu Lys Thr Ile Val Met Ala Thr Lys Met Ala Ala Leu His
785                 790                 795                 800
Tyr Pro Ser Thr Thr Ala Leu Gln Glu Met Val His Gln Val Thr Asp
                805                 810                 815
Leu Ser Arg Asn Ala Gln Leu Phe Lys Arg Ser Leu Leu Glu Met Ala
            820                 825                 830
Thr Phe
 
<210>3
<211>1300
<212>DNA
<213>智人
<400>3
gcgctgcgac tgacaagcgg ctctgcccgg gaccttctcg ctttcatcta gcgctgcact    60
caatggaggg gcgggcaccg cagtgcttaa tgctgtctta actagtgtag gaaaacggct    120
caacccaccg ctgccgaaat gaagtataag aatcttatgg caagggcctt atatgacaat    180
gtcccagagt gtgccgagga actggccttt cgcaagggag acatcctgac cgtcatagag    240
cagaacacag ggggactgga aggatggtgg ctgtgctcgt tacacggtcg gcaaggcatt    300
gtcccaggca accgggtgaa gcttctgatt ggtcccatgc aggagactgc ctccagtcac    360
gagcagcctg cctctggact gatgcagcag acctttggcc aacagaagct ctatcaagtg    420
ccaaacccac aggctgctcc ccgagacacc atctaccaag tgccaccttc ctaccaaaat    480
cagggaattt accaagtccc cactggccac ggcacccaag aacaagaggt atatcaggtg    540
ccaccatcag tgcagagaag cattggggga accagtgggc cccacgtggg taaaaaggtg    600
ttccagagag atgggcaagt gtcctatttc ttagtgagag cctctaaaca aaccagcttg    660
tgaacctcca ctgaaaagat ctcatctgat gagcatttta ataaagtgtc ctgagtttgg    720
aggcttgccg tctttctctt ggataaatat cttcatctcc tagacttgga aaaacacatt    780
ttctcctggg gtttcccatt ggcgtgtctt gagctgctct ggtgataacc gtaataatgc    840
caatactgat acgaacagca gaaaacagta accccaagaa ctctacagat gatcatcaag    900
gaccactgtc tcttaccatt tgctgctttg gtttgaaatt ctcactgcct cgtagatctc    960
attttgagca ctatacattc ctaaagattg atttctttct atctgactta aatttaggaa   1020
tgattaaatc ttcatttctc ccatgatttg atcctaaaac attttgaaag gaaacagcct   1080
tgagatctgt gattactaag acatacataa cattcttatc acattagaaa gcaagaattg   1140
actgttgctt gtcttgttcc tgttgtcttg tcccctgaat tcctgtttat ctttgattgt   1200
atgtgggaca ttgtattttc agtacatttg tagaaataat gtgaagccta taaagatgtt   1260
ctctgcctcc aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa                         1300
 
<210>4
<211>174
<212>PRT
<213>智人
<400>4
Met Lys Tyr Lys Asn Leu Met Ala Arg Ala Leu Tyr Asp Asn Val Pro
1               5                   10                  15
Glu Cys Ala Glu Glu Leu Ala Phe Arg Lys Gly Asp Ile Leu Thr Val
            20                  25                  30
Ile Glu Gln Asn Thr Gly Gly Leu Glu Gly Trp Trp Leu Cys Ser Leu
        35                  40                  45
His Gly Arg Gln Gly Ile Val Pro Gly Asn Arg Val Lys Leu Leu Ile
    50                  55                  60
Gly Pro Met Gln Glu Thr Ala Ser Ser His Glu Gln Pro Ala Ser Gly
65                  70                  75                  80
Leu Met Gln Gln Thr Phe Gly Gln Gln Lys Leu Tyr Gln Val Pro Asn
                85                  90                  95
Pro Gln Ala Ala Pro Arg Asp Thr Ile Tyr Gln Val Pro Pro Ser Tyr
            100                 105                 110
Gln Asn Gln Gly Ile Tyr Gln Val Pro Thr Gly His Gly Thr Gln Glu
        115                 120                 125
Gln Glu Val Tyr Gln Val Pro Pro Ser Val Gln Arg Ser Ile Gly Gly
   130                 135                 140
Thr Ser Gly Pro His Val Gly Lys Lys Val Phe Gln Arg Asp Gly Gln
145                 150                 155                 160
Val Ser Tyr Phe Leu Val Arg Ala Ser Lys Gln Thr Ser Leu
                165                 170
 
<210>5
<211>5913
<212>DNA
<213>智人
<400>5
gtggacgcag cgggctttgg aaaggcccca agttaatgag gcgtgcgccg gctgccgagc      60
gcctcttgga gctgggcttt cccccgcggt gcgggcgcca ggagccgcct tttccgctgg     120
gtgtcactcg ggggtgggga agatggccca ttcaaaagcg ccgcgagggg gcccggccag     180
tgcccttcag tgagcgctcg caagaggacg gcagaggccc ggcagctcgg agctccggga     240
ccttgtggcg catcaggacg cggctgtccc tctgccggga cccagagccg ccgccgccgc     300
tctgcctcct gcgtgttagc ctcctctgcg cgctccgggc aggcggccgt gggagccgct     360
ggggcgagga cggcgcgagg ctgctgctgc tgcccccggc ccgcgcggct ggaaacggag     420
aggccgagcc aagcggcggc ccctcttatg ctgggaggat gctggagagt agcggctgca     480
aagcgctgaa ggagggcgtg ctggagaagc gcagcgacgg gttgttgcag ctctggaaga     540
aaaagtgttg catcctcacc gaggaagggc tgctgcttat cccgcccaag cagctgcaac     600
accagcagca gcagcagcaa cagcagcagc agcagcagca acaacagccc gggcaggggc     660
cggccgagcc gtcccaaccc agtggccccg ctgtcgccag cctcgagccg ccggtcaagc     720
tcaaggaact gcacttctcc aacatgaaga ccgtggactg tgtggagcgc aagggcaagt     780
acatgtactt cactgtggtg atggcagagg gcaaggagat cgactttcgg tgcccgcaag     840
accagggctg gaacgccgag atcacgctgc agatggtgca gtacaagaat cgtcaggcca     900
tcctggcggt caaatccacg cggcagaagc agcagcacct ggtccagcag cagcccccct     960
cgcagccgca gccgcagccg cagctccagc cccaacccca gcctcagcct cagccgcaac    1020
cccagcccca atcacaaccc cagcctcagc cccaacccaa gcctcagccc cagcagctcc    1080
acccgtatcc gcatccacat ccacatccac actctcatcc tcactcgcac ccacaccctc    1140
acccgcaccc gcatccgcac caaataccgc acccacaccc acagccgcac tcgcagccgc    1200
acgggcaccg gcttctccgc agcacctcca actctgcctg aaaggggcag ctcccgggca    1260
agacaaggtt ttgaggactt gaggaagtgg gacgagcaca tttctattgt cttcacttgg    1320
atcaaaagca aaacagtctc tccgccccgc accagatcaa gtagtttgga catcacccta    1380
ctgaaaactt gcgattcttc ttagttttct gcatactttt catcacgatg caggaaacga    1440
tttcgagtca agaagacttt tatttatgaa cctttgaaag gatcgtcttg tatggtgaat    1500
tttctaggag cgatgatgta ctgtaatttt attttaatgt attttgattt atgattattt    1560
attagttttt ttttaaatgc ttgttctaag acatttctga atgtagacca ttttccaaaa    1620
aggaaacttt attttcaaaa acctaatccg tagtaattcc taatcttgga gaataaaaaa    1680
gggcggtgga ggggaaaaca ttaagaattt attcattatt tctcgagtac tttcagaaag    1740
tctgacactt tcattgttgt gccagctggt tgaaattaaa actctgatat tacttttttt    1800
gaggattttt atttttgttt ttgcttaaac atatagtttg tctagaagtt taaaaagcta    1860
aaagttaaaa atggtgtaat tatgaaaatc taacactcaa gatagtttct aaaaggaaat    1920
cagtagttaa ggatacctga tttcaaaata tttaaagcat aacctaactg atggtaggat    1980
gattgtatct tgaatatgtg gtagggccac atctattgta ggaaaacctt gcttttatca    2040
tctgtgtgta aagggcttaa taaggagaag aggccttttg actgatttgt gagtataaat    2100
gcatttgctg tttcatttca aaaatgttgt ggaggaaaag agtacattta acttgtataa    2160
gagaatattt gtactcctgt ccaggctgca ggacctttct tcgagagctt tgcacacttg    2220
acttgaacca cattttctga tccctttact ttgttttaga agcacactga aaaatctcgt    2280
tgtttaaagt acaatttgta aatatttcaa aggtctagga gtcataactt ttgttttcat    2340
actgaaaatg atgttgatca gagaaaccaa ctgttttgct tttcattgct ctgtgagaaa    2400
tttgaggatt ctgttttgct gttaggtaag ctaaactcag aaattgaaaa ggaaaagact    2460
ggataaacac aggattttca gtaagaaaac aaccccagtc ttgtcttaga agccacttgt    2520
tgaggagtct gttgggggaa aaaagaggat atgcttttaa aggtagaaca aaccttcttc    2580
tgtgttaaat caaaaggatg ttcaaaatcc accaggacag atgctacttg ggtttaaatg    2640
gagccataga tgatacaaag tcctcttggg gctgaaaatc acttcctatt tgcatggctt    2700
tactaactgg tttctgtttt ccattatctt tttcacagaa agtcttggtc agtatttttc    2760
cagcatttaa attgaaacgg tcagtattag accactgcta ggttatgtag tcaagaaata    2820
aaaatagaat tacatgctac agatgtcttt attctccttc catctagaaa ggagttccaa    2880
ggtcaaatta ctttttagtg caatagttaa atgacatttt gagatcataa ctcatatcca    2940
aaaagttgca gggaaaatta aaatagcttt cccctattaa gctaatggca aacaaaactt    3000
aagtggaccc ccacttccag tggttgttta ggttgcagtt gtgaaaatat gctgccaaca    3060
tttaaaaact tgtttcatat gtatatatgt atacacatat atgaatatgt atgtatatat    3120
acatatatga gaacatgtgt gtacacatat atgaatatgt atatatgtgt atgtatgtat    3180
atatgtatat gaaatgagag ccacatctaa agatttctta aatcaagttt ggttcagctt    3240
ccttagaact gtggctgtac tttttgagga gtacctcata gtactatatt tttaatgcat    3300
gcaaatcata atagctccaa atgaaccaca gttttttccc aatggaggat ttttttttaa    3360
ttcttgtact aaaaaaaaaa aatccatacc aaatattttt acaaattaag attgatgtag    3420
gttttaaaaa aggcatttgt atgttgttag cttacatatg gggctaggta atttcattgc    3480
ttaaaaagat gcgcctaggc tccctcttgg tggctggatt tctttttctt cgcccgtggt    3540
ggccatggtt cttaataggg ccaccggaat catggtttct tttttttttt ttttttttga    3600
gatggagtct cgccctgtga cccaggctgg agtgcagtgg cacgatctcg gctcactgca    3660
acctctgcct cctgggttca cgccattctc ctgtctcagc ctcctgagta gctgggacta    3720
caggtgaatg ccaccacgcc cggctgattt ttgtattttt agtagagatg gggtttcacc    3780
atagtggtca ggctgttctc gaactcctga cctcaggtga tccacctgcc ttggcctccc    3840
aaagtgctag gattacaggt gtgagccacc acacccggcc ccagaataat ggtttcttga    3900
ctttctgtag cccttgttcc ttagtctgct gtgatattta tgttgacctt tatcattttc    3960
tattctgaac ccctcttagc atttaatgtg aaatctaaga aattagaagt agaatggctt    4020
ttattgtttt gacacctttg aaattattat taataatttt tccagagcaa aaaagcaaac    4080
acgctcaata agactaaaca aaacaaaata taaatgtaca tcatttaatg tcccagtggc    4140
tctattctac ctgtaagaaa atgatacaaa accacctaag atattttgaa gcctgacaaa    4200
tcagcttcat ggaaaaaggt aaaaaatgca tttttcaacc gaaagggcag atccaataga    4260
agacccgctc cttaaataaa cataaaatgt aaaaagttgg aaaattaaga gtaatgttcc    4320
atctggaaac tgaacttttg tccttgaact tgtgttggca ccaagcctca tacacagtga    4380
gctcaataac tgttgggaca aaggaaggaa ggacaaaatg tgtaacttcc cagcatctgg    4440
gagatgctgt ctcttgcctc actgagtgtt ccttttcttt gctctcatgt cattccctga    4500
gaacaatgaa ttctgggaca ggctaaacat catgatgaag tttcttaaac agactttctt    4560
agtggaaatc catttagatc tgggtgtgct ctatggggag tgctgacgtc aaagagcaaa    4620
tgtctataag gggccctttt aaaatgaaca ttttcctcat tgagcaagct gggattctct    4680
aatgtagaaa tcaagccatc tttataattt cacttcagat gtttatgttt ttgttttttt    4740
tgtctccaat gatggtaaaa ataaaaacta cgcattactt aaaggagtttccctcacatg     4800
taaacactgt taggaagtct ggattaagtt gaaagtcctg ttttaacttt ttttctctca    4860
tataccaaac actctgtatt tctcttaaag aagcccttta agagaaagcc ctaattttat    4920
atctgacagt aaagtttgct gcaagtgtat gagttcaaac acatcccttg ttttctgtcc    4980
ctaggggaaa agtcatgtag ttttagcttg gctccagtgt taatattata ttcagtagca    5040
gccttagaag agtggtctaa gacttgaacc tggagcaatt ttatagcaca gaatcctacg    5100
aagataggac tgtgaacatt tgttttcttt ttcgtgtgtg tcaaactaac tggtttttgc    5160
tttaccaata aaatgtcctc ggcagagtaa attttaaacg tgaaaattat agatcttgat    5220
attgaatcca tcagtgattc aagagataca cctatttgcc taaaacaacc taagatgtat    5280
tggttatgga atcatgtgtt ggataggttc ttaagacctg tttcctcaaa tcttgacaca    5340
gttttcaagg gtggcttatt gacttgcacg gttgggcaga taatccagat ttacctaaga    5400
ttgggtaaaa aagtcatctg tgactttgct ggcagggcat ttgctaagtg gagtacagga    5460
tctaaaaggg ttttcttaga aagggcaata ttgtccaatg aagtaagcag aaggactctg    5520
ggttagaagc atctgcacaa aaactggtga gacctactct ccactgctct gcagctggat    5580
ggctgatggc aggctgagca gtggggaagc aggttttaac aacagggagt ccttccaggt    5640
cactgtatat tgagaagaaa cataaaacta ttgtctgtta cattccgagg tcagccttct    5700
tcttaacgtt ttataatatg caaatgccag cttctggaaa gcaagtatca tcatgtacca    5760
aatgctttat acaccatcac attcatgaat tttttagcat ggtcagaact tgtgtaaata    5820
tgtctcttag atgattttgg ggagatgtga tttatttttc atattttcaa aatgcatttc    5880
atttcaaata aagttatcta ttgagacaac cga                                 5913
 
<210>6
<211>401
<212>PRT
<213>智人
<400>6
Met Arg Arg Ala Pro Ala Ala Glu Arg Leu Leu Glu Leu Gly Phe Pro
1               5                   10                  15
Pro Arg Cys Gly Arg Gln Glu Pro Pro Phe Pro Leu Gly Val Thr Arg
            20                  25                  30
Gly Trp Gly Arg Trp Pro Ile Gln Lys Arg Arg Glu Gly Ala Arg Pro
        35                  40                  45
Val Pro Phe Ser Glu Arg Ser Gln Glu Asp Gly Arg Gly Pro Ala Ala
    50                  55                  60
Arg Ser Ser Gly Thr Leu Trp Arg Ile Arg Thr Arg Leu Ser Leu Cys
65                  70                  75                  80
Arg Asp Pro Glu Pro Pro Pro Pro Leu Cys Leu Leu Arg Val Ser Leu
                85                  90                  95
Leu Cys Ala Leu Arg Ala Gly Gly Arg Gly Ser Arg Trp Gly Glu Asp
            100                 105                 110
Gly Ala Arg Leu Leu Leu Leu Pro Pro Ala Arg Ala Ala Gly Asn Gly
        115                 120                 125
Glu Ala Glu Pro Ser Gly Gly Pro Ser Tyr Ala Gly Arg Met Leu Glu
    130                 135                 140
Ser Ser Gly Cys Lys Ala Leu Lys Glu Gly Val Leu Glu Lys Arg Ser
145                 150                 155                 160
Asp Gly Leu Leu Gln Leu Trp Lys Lys Lys Cys Cys Ile Leu Thr Glu
                165                 170                 175
Glu Gly Leu Leu Leu Ile Pro Pro Lys Gln Leu Gln His Gln Gln Gln
            180                 185                 190
Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln Pro Gly Gln Gly
        195                 200                 205
Pro Ala Glu Pro Ser Gln Pro Ser Gly Pro Ala Val Ala Ser Leu Glu
    210                 215                 220
Pro Pro Val Lys Leu Lys Glu Leu His Phe Ser Asn Met Lys Thr Val
225                 230                 235                 240
Asp Cys Val Glu Arg Lys Gly Lys Tyr Met Tyr Phe Thr Val Val Met
                245                 250                 255
Ala Glu Gly Lys Glu Ile Asp Phe Arg Cys Pro Gln Asp Gln Gly Trp
            260                 265                 270
Asn Ala Glu Ile Thr Leu Gln Met Val Gln Tyr Lys Asn Arg Gln Ala
        275                 280                 285
Ile Leu Ala Val Lys Ser Thr Arg Gln Lys Gln Gln His Leu Val Gln
    290                 295                 300
Gln Gln Pro Pro Ser Gln Pro Gln Pro Gln Pro Gln Leu Gln Pro Gln
305                 310                 315                 320
Pro Gln Pro Gln Pro Gln Pro Gln Pro Gln Pro Gln Ser Gln Pro Gln
                325                 330                 335
Pro Gln Pro Gln Pro Lys Pro Gln Pro Gln Gln Leu His Pro Tyr Pro
            340                 345                 350
His Pro His Pro His Pro His Ser His Pro His Ser His Pro His Pro
        355                 360                 365
His Pro His Pro His Pro His Gln Ile Pro His Pro His Pro Gln Pro
    370                 375                 380
His Ser Gln Pro His Gly His Arg Leu Leu Arg Ser Thr Ser Asn Ser
385                 390                 395                 400
Ala
 
<210>7
<211>60
<212>PRT
<213>智人
<400>7
Met Ala Arg Ala Leu Tyr Asp Asn Val Pro Glu Cys Ala Glu Glu Leu
1               5                   10                  15
Ala Phe Arg Lys Gly Asp Ile Leu Thr Val Ile Glu Gln Asn Thr Gly
            20                  25                  30
Gly Leu Glu Gly Trp Trp Leu Cys Ser Leu His Gly Arg Gln Gly Ile
        35                  40                  45
Val Pro Gly Asn Arg Val Lys Leu Leu Ile Gly Pro
    50                  55                  60
 
<210>8
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>8
Arg Ala Leu Tyr Asp Asn Val Pro Glu Cys Ala Glu Glu Leu Ala Phe
1               5                   10                  15
Arg Lys Gly Asp
            20
 
<210>9
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>9
Glu Ala Leu Pro Gly Glu Asp Cys Ala Phe Arg Lys Asp Ala Asn Arg
1               5                   10                  15
Leu Val Glu Tyr
            20
 
<210>10
<211>133
<212>PRT
<213>智人
<400>10
Ala Leu Lys Glu Gly Val Leu Glu Lys Arg Ser Asp Gly Leu Leu Gln
1               5                   10                  15
Leu Trp Lys Lys Lys Cys Cys Ile Leu Thr Glu Glu Gly Leu Leu Leu
            20                  25                  30
Ile Pro Pro Lys Gln Leu Gln His Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln
        35                  40                  45
Gln Gln Gln Gln Gln Gln Pro Gly Gln Gly Pro Ala Glu Pro Ser Gln
    50                  55                  60
Pro Ser Gly Pro Ala Val Ala Ser Leu Glu Pro Pro Val Lys Leu Lys
65                  70                  75                  80
Glu Leu His Phe Ser Asn Met Lys Thr Val Asp Cys Val Glu Arg Lys
                85                  90                  95
Gly Lys Tyr Met Tyr Phe Thr Val Val Met Ala Glu Gly Lys Glu Ile
            100                 105                 110
Asp Phe Arg Cys Pro Gln Asp Gln Gly Trp Asn Ala Glu Ile Thr Leu
        115                 120                 125
Gln Met Val Gln Tyr
    130
 
<210>11
<211>28
<212>PRT
<213>智人
<400>11
Lys Arg Ser Asp Gly Leu Leu Gln Leu Trp Lys Lys Lys Cys Cys Ile
1               5                   10                  15
Leu Thr Glu Glu Gly Leu Leu Leu Ile Pro Pro Lys
            20                  25
 
<210>12
<211>19
<212>PRT
<213>智人
<400>12
Leu Glu Pro Pro Val Lys Leu Lys Glu Leu His Phe Ser Asn Met Lys
1               5                   10                  15
Thr Val Asp
<210>13
<211>17
<212>PRT
<213>智人
<400>13
Pro Gln Asp Gln Gly Trp Asn Ala Glu Ile Thr Leu Gln Met Val Gln
1               5                   10                  15
Tyr
 
<210>14
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>14
Arg Lys Gly Asp Ile Leu Thr Val Ile Glu Gln Asn Thr Gly Gly Leu
1               5                   10                  15
Glu Gly Trp Trp
            20
 
<210>15
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>15
Ser Leu His Gly Arg Gln Gly Ile Val Pro Gly Asn Arg Val Lys Leu
1               5                   10                  15
Leu Ile Gly Pro
            20
 
<210>16
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>16
Arg Ala Leu Tyr Asp Asn Val Pro Glu Ser Ala Glu Glu Leu Ala Phe
1               5                   10                  15
Arg Lys Gly Asp
    20
 
<210>17
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>17
Ala Ala Leu Tyr Asp Asn Val Pro Glu Ala Ala Glu Glu Leu Ala Phe
1               5                   10                  15
Arg Lys Gly Asp
            20
 
<210>18
<211>15
<212>PRT
<213>智人
<400>18
Asn Val Pro Glu Cys Ala Glu Glu Leu Ala Phe Arg Lys Gly Asp
1               5                   10                  15
 
<210>19
<211>15
<212>PRT
<213>智人
<400>19
Arg Ala Leu Tyr Asp Asn Val Pro Glu Cys Ala Glu Glu Leu Ala
1               5                   10                  15
 
<210>20
<211>15
<212>PRT
<213>智人
<400>20
Asn Val Pro Glu Ser Ala Glu Glu Leu Ala Phe Arg Lys Gly Asp
1               5                   10                  15
 
<210>21
<211>15
<212>PRT
<213>智人
<400>21
Arg Ala Leu Tyr Asp Asn Val Pro Glu Ser Ala Glu Glu Leu Ala
1               5                   10                  15
 
<210>22
<211>15
<212>PRT
<213>智人
<400>22
Asn Val Pro Glu Ala Ala Glu Glu Leu Ala Phe Arg Lys Gly Asp
1               5                   10                  15
 
<210>23
<211>15
<212>PRT
<213>智人
<400>23
Ala Ala Leu Tyr Asp Asn Val Pro Glu Ala Ala Glu Glu Leu Ala
1               5                   10                  15
 
<210>24
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>24
Arg Ala Leu Tyr Ala Asn Val Pro Ala Cys Ala Glu Glu Leu Ala Phe
1               5                   10                  15
Arg Lys Gly Asp
            20
 
<210>25
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>25
Arg Ala Leu Tyr Ala Asn Val  Pro Ala Cys Ala Ala Glu Leu Ala Phe
1               5                    10                  15
Arg Lys Gly Asp
            20
 
<210>26
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>26
Arg Ala Leu Tyr Ala Asn Val  Pro Ala Cys Ala Ala Ala Leu Ala Phe
1               5                  10                  15
Arg Lys Gly Asp
            20
 
<210>27
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>27
Arg Ala Leu Tyr Ala Asn Val Pro Ala Ser Ala Glu Glu Leu Ala Phe
1               5                   10                  15
Arg Lys Gly Asp
            20
 
<210>28
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>28
Arg Ala Leu Tyr Ala Asn Val Pro Ala Ser Ala Ala Glu Leu Ala Phe
1               5                   10                  15
Arg Lys Gly Asp
           20
 
<210>29
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>29
Arg Ala Leu Tyr Ala Asn Val Pro Ala Ser Ala Ala Ala Leu Ala Phe
1               5                   10                  15
Arg Lys Gly Asp
            20
 
<210>30
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>30
Arg Ala Leu Tyr Ala Asn Val Pro Ala Ala Ala Glu Glu Leu Ala Phe
1               5                   10                  15
Arg Lys Gly Asp
            20
 
<210>31
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>31
Arg Ala Leu Tyr Ala Asn Val Pro Ala Ala Ala Ala Glu Leu Ala Phe
1               5                   10                  15
Arg Lys Gly Asp
            20
 
<210>32
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>32
Arg Ala Leu Tyr Ala Asn Val Pro Ala Ala Ala Ala Ala Leu Ala Phe
1               5                   10                  15
Arg Lys Gly Asp
          20
 
<210>33
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>33
Ala Ala Leu Tyr Asp Asn Val Pro Glu Cys Ala Glu Glu Leu Ala Phe
1               5                   10                  15
Arg Lys Gly Asp
            20
 
<210>34
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>34
Arg Ala Ala Tyr Asp Asn Val Pro Glu Cys Ala Glu Glu Leu Ala Phe
1               5                   10                  15
Arg Lys Gly Asp
            20
 
<210>35
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>35
Arg Ala Leu Ala Asp Asn Val Pro Glu Cys Ala Glu Glu Leu Ala Phe
1               5                   10                  15
Arg Lys Gly Asp
            20
 
<210>36
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>36
Arg Ala Leu Tyr Ala Asn Val Pro Glu Cys Ala Glu Glu Leu Ala Phe
1               5                   10                  15
Arg Lys Gly Asp
            20
 
<210>37
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>37
Arg Ala Leu Tyr Asp Ala Val Pro Glu Cys Ala Glu Glu Leu Ala Phe
1               5                   10                  15
Arg Lys Gly Asp
            20
 
<210>38
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>38
Arg Ala Leu Tyr Asp Asn Ala Pro Glu Cys Ala Glu Glu Leu Ala Phe
1               5                   10                  15
Arg Lys Gly Asp
            20
<210>39
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>39
Arg Ala Leu Tyr Asp Asn Val Ala Glu Cys Ala Glu Glu Leu Ala Phe
1               5                   10                  15
Arg Lys Gly Asp
            20
 
<210>40
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>40
Arg Ala Leu Tyr Asp Asn Val Pro Ala Cys Ala Glu Glu Leu Ala Phe
1               5                   10                  15
Arg Lys Gly Asp
            20
 
<210>41
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>41
Arg Ala Leu Tyr Asp Asn Val Pro Glu Ala Ala Glu Glu Leu Ala Phe
1               5                   10                  15
Arg Lys Gly Asp
            20
 
<210>42
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>42
Arg Ala Leu Tyr Asp Asn Val Pro Glu Cys Ala Ala Glu Leu Ala Phe
1               5                   10                  15
Arg Lys Gly Asp
            20
 
<210>43
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>43
Arg Ala Leu Tyr Asp Asn Val Pro Glu Cys Ala Glu Ala Leu Ala Phe
1               5                   10                  15
Arg Lys Gly Asp
            20
 
<210>44
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>44
Arg Ala Leu Tyr Asp Asn Val Pro Glu Cys Ala Glu Glu Ala Ala Phe
1               5                   10                  15
Arg Lys Gly Asp
            20
 
<210>45
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>45
Arg Ala Leu Tyr Asp Asn Val Pro Glu Cys Ala Glu Glu Leu Ala Ala
1               5                   10                  15
Arg Lys Gly Asp
            20
 
<210>46
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>46
Arg Ala Leu Tyr Asp Asn Val Pro Glu Cys Ala Glu Glu Leu Ala Phe
1               5                   10                  15
Ala Lys Gly Asp
            20
 
<210>47
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>47
Arg Ala Leu Tyr Asp Asn Val Pro Glu Cys Ala Glu Glu Leu Ala Phe
1               5                   10                  15
Arg Ala Gly Asp
            20
 
<210>48
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>48
Arg Ala Leu Tyr Asp Asn Val Pro Glu Cys Ala Glu Glu Leu Ala Phe
1               5                   10                  15
Arg Lys Ala Asp
            20
 
<210>49
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>49
Arg Ala Leu Tyr Asp Asn Val Pro Glu Cys Ala Glu Glu Leu Ala Phe
1               5                   10                  15
Arg Lys Gly Ala
            20
 
<210>50
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>50
Ala Lys Gly Asp Ile Leu Thr Val Ile Glu Gln Asn Thr Gly Gly Leu
1               5                   10                  15
Glu Gly Trp Trp
            20
 
<210>51
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>51
Arg Ala Gly Asp Ile Leu Thr Val Ile Glu Gln Asn Thr Gly Gly Leu
1               5                   10                  15
Glu Gly Trp Trp
            20
 
<210>52
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>52
Arg Lys Ala Asp Ile Leu Thr Val Ile Glu Gln Asn Thr Gly Gly Leu
1               5                   10                  15
Glu Gly Trp Trp
            20
 
<210>53
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>53
Arg Lys Gly Ala Ile Leu Thr Val Ile Glu Gln Asn Thr Gly Gly Leu
1               5                   10                  15
Glu Gly Trp Trp
            20
 
<210>54
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>54
Arg Lys Gly Asp Ala Leu Thr Val Ile Glu Gln Asn Thr Gly Gly Leu
1               5                   10                  15
Glu Gly Trp Trp
            20
 
<210>55
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>55
Arg Lys Gly Asp Ile Ala Thr Val Ile Glu Gln Asn Thr Gly Gly Leu
1               5                   10                  15
Glu Gly Trp Trp
            20
 
<210>56
<211>21
<212>PRT
<213>智人
<400>56
Arg Lys Gly Asp Ile Leu Ala Thr Val Ile Glu Gln Asn Thr Gly Gly
1               5                   10                  15
Leu Glu Gly Trp Trp
            20
 
<210>57
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>57
Arg Lys Gly Asp Ile Leu Thr Ala Ile Glu Gln Asn Thr Gly Gly Leu
1               5                   10                  15
Glu Gly Trp Trp
            20
 
<210>58
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>58
Arg Lys Gly Asp Ile Leu Thr Val Ala Glu Gln Asn Thr Gly Gly Leu
1                5                  10                  15
Glu Gly Trp Trp
            20
 
<210>59
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>59
Arg Lys Gly Asp Ile Leu Thr Val Ile Ala Gln Asn Thr Gly Gly Leu
1               5                   10                  15
Glu Gly Trp Trp
            20
 
<210>60
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>60
Arg Lys Gly Asp Ile Leu Thr Val Ile Glu Ala Asn Thr Gly Gly Leu
1               5                   10                  15
Glu Gly Trp Trp
            20
 
<210>61
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>61
Arg Lys Gly Asp Ile Leu Thr Val Ile Glu Gln Ala Thr Gly Gly Leu
1               5                   10                  15
Glu Gly Trp Trp
            20
 
<210>62
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>62
Arg Lys Gly Asp Ile Leu Thr Val Ile Glu Gln Asn Ala Gly Gly Leu
1               5                   10                  15
Glu Gly Trp Trp
            20
 
<210>63
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>63
Arg Lys Gly Asp Ile Leu Thr Val Ile Glu Gln Asn Thr Ala Gly Leu
1               5                   10                  15
Glu Gly Trp Trp
            20
 
<210>64
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>64
Arg Lys Gly Asp Ile Leu Thr Val Ile Glu Gln Asn Thr Gly Ala Leu
1               5                   10                  15
Glu Gly Trp Trp
            20
 
<210>65
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>65
Arg Lys Gly Asp Ile Leu Thr Val Ile Glu Gln Asn Thr Gly Gly Ala
1               5                   10                  15
Glu Gly Trp Trp
            20
 
<210>66
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>66
Arg Lys Gly Asp Ile Leu Thr Val Ile Glu Gln Asn Thr Gly Gly Leu
1               5                   10                  15
Ala Gly Trp Trp
            20
 
<210>67
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>67
Arg Lys Gly Asp Ile Leu Thr Val Ile Glu Gln Asn Thr Gly Gly Leu
1               5                   10                  15
Glu Ala Trp Trp
            20
 
<210>68
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>68
Arg Lys Gly Asp Ile Leu Thr Val Ile Glu Gln Asn Thr Gly Gly Leu
1               5                   10                  15
Glu Gly Ala Trp
            20
 
<210>69
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>69
Arg Lys Gly Asp Ile Leu Thr Val Ile Glu Gln Asn Thr Gly Gly Leu
1               5                   10                  15
Glu Gly Trp Ala
            20
<210>70
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>70
Ala Leu His Gly Arg Gln Gly Ile Val Pro Gly Asn Arg Val Lys Leu
1               5                   10                  15
Leu Ile Gly Pro
            20
 
<210>71
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>71
Ser Ala His Gly Arg Gln Gly Ile Val Pro Gly Asn Arg Val Lys Leu
1               5                   10                  15
Leu Ile Gly Pro
            20
 
<210>72
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>72
Ser Leu Ala Gly Arg Gln GlyIle Val Pro Gly Asn Arg Val Lys Leu
1               5                  10                  15
Leu Ile Gly Pro
            20
 
<210>73
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>73
Ser Leu His Ala Arg Gln Gly Ile Val Pro Gly Asn Arg Val Lys Leu
1               5                   10                  15
Leu Ile Gly Pro
            20
<210>74
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>74
Ser Leu His Gly Ala Gln Gly Ile Val Pro Gly Asn Arg Val Lys Leu
1               5                   10                  15
Leu Ile Gly Pro
            20
 
<210>75
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>75
Ser Leu His Gly Arg Ala Gly Ile Val Pro Gly Asn Arg Val Lys Leu
1               5                   10                  15
Leu Ile Gly Pro
            20
 
<210>76
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>76
Ser Leu His Gly Arg Gln Ala Ile Val Pro Gly Asn Arg Val Lys Leu
1               5                   10                  15
Leu Ile Gly Pro
            20
 
<210>77
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>77
Ser Leu His Gly Arg Gln Gly Ala Val Pro Gly Asn Arg Val Lys Leu
1               5                   10                  15
Leu Ile Gly Pro
            20
 
<210>78
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>78
Ser Leu His Gly Arg Gln Gly Ile Ala Pro Gly Asn Arg Val Lys Leu
1               5                   10                  15
Leu Ile Gly Pro
            20
<210>79
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>79
Ser Leu His Gly Arg Gln GlyIle Val Ala Gly Asn Arg Val Lys Leu
1               5                  10                  15
Leu Ile Gly Pro
            20
<210>80
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>80
Ser Leu His Gly Arg Gln Gly Ile Val Pro Ala Asn Arg Val Lys Leu
1               5                   10                  15
Leu Ile Gly Pro
            20
 
<210>81
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>81
Ser Leu His Gly Arg Gln Gly Ile Val Pro Gly Ala Arg Val Lys Leu
1               5                   10                  15
Leu Ile Gly Pro
            20
 
<210>82
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>82
Ser Leu His Gly Arg Gln Gly Ile Val Pro Gly Asn Ala Val Lys Leu
1               5                   10                  15
LeuIle Gly Pro
           20
 
<210>83
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>83
Ser Leu His Gly Arg Gln Gly Ile Val Pro Gly Asn Arg Ala Lys Leu
1               5                   10                  15
Leu Ile Gly Pro
            20
 
<210>84
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>84
Ser Leu His Gly Arg Gln Gly Ile Val Pro Gly Asn Arg Val Ala Leu
1               5                   10                  15
Leu Ile Gly Pro
            20
 
<210>85
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>85
Ser Leu His Gly Arg Gln Gly Ile Val Pro Gly Asn Arg Val Lys Ala
1               5                   10                  15
Leu Ile Gly Pro
            20
 
<210>86
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>86
Ser Leu His Gly Arg Gln Gly Ile Val Pro Gly Asn Arg Val Lys Leu
1               5                   10                  15
Ala Ile Gly Pro
            20
 
<210>87
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>87
Ser Leu His Gly Arg Gln Gly Ile Val Pro Gly Asn Arg Val Lys Leu
1               5                   10                  15
Leu Ala Gly Pro
            20
<210>88
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>88
Ser Leu His Gly Arg Gln Gly Ile Val Pro Gly Asn Arg Val Lys Leu
1               5                   10                  15
Leu Ile Ala Pro
            20
 
<210>89
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>89
Ser Leu His Gly Arg Gln Gly Ile Val Pro Gly Asn Arg Val Lys Leu
1               5                   10                  15
Leu Ile Gly Ala
            20
 
<210>90
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>90
Ala Ala Leu Tyr Asp Asn Val  Pro Glu Ser Ala Glu Glu Leu Ala Phe
1               5                    10                  15
Arg Lys Gly Asp
            20
 
<210>91
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>91
Arg Ala Ala Tyr Asp Asn Val Pro Glu Ser Ala Glu Glu Leu Ala Phe
1               5                   10                  15
Arg Lys Gly Asp
            20
 
<210>92
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>92
Arg Ala Leu Ala Asp Asn Val Pro Glu Ser Ala Glu Glu Leu Ala Phe
1               5                   10                  15
Arg Lys Gly Asp
            20
 
<210>93
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>93
Arg Ala Leu Tyr Ala Asn Val Pro Glu Ser Ala Glu Glu Leu Ala Phe
1               5                   10                  15
Arg Lys Gly Asp
            20
 
<210>94
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>94
Arg Ala Leu Tyr Asp Ala Val Pro Glu Ser Ala Glu Glu Leu Ala Phe
1               5                   10                  15
Arg Lys Gly Asp
            20
 
<210>95
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>95
Arg Ala Leu Tyr Asp Asn Ala Pro Glu Ser Ala Glu Glu Leu Ala Phe
1               5                   10                  15
Arg Lys Gly Asp
            20
 
<210>96
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>96
Arg Ala Leu Tyr Asp Asn Val Ala Glu Ser Ala Glu Glu Leu Ala Phe
1               5                   10                  15
Arg Lys Gly Asp
            20
 
<210>97
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>97
Arg Ala Leu Tyr Asp Asn Val Pro Ala Ser Ala Glu Glu Leu Ala Phe
1               5                   10                  15
Arg Lys Gly Asp
            20
 
<210>98
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>98
Arg Ala Leu Tyr Asp Asn Val Pro Glu Ser Ala Ala Glu Leu Ala Phe
1               5                   10                  15
Arg Lys Gly Asp
            20
 
<210>99
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>99
Arg Ala Leu Tyr Asp Asn Val Pro Glu Ser Ala Glu Ala Leu Ala Phe
1               5                   10                  15
Arg Lys Gly Asp
            20
 
<210>100
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>100
Arg Ala Leu Tyr Asp Asn Val Pro Glu Ser Ala Glu Glu Ala Ala Phe
1               5                   10                  15
Arg Lys Gly Asp
            20
<210>101
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>101
Arg Ala Leu Tyr Asp Asn Val Pro Glu Ser Ala Glu Glu Leu Ala Ala
1               5                   10                  15
Arg Lys Gly Asp
            20
 
<210>102
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>102
Arg Ala Leu Tyr Asp Asn Val Pro Glu Ser Ala Glu Glu Leu Ala Phe
1               5                   10                  15
Ala Lys Gly Asp
            20
 
<210>103
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>103
Arg Ala Leu Tyr Asp Asn Val Pro Glu Ser Ala Glu Glu Leu Ala Phe
1               5                   10                  15
Arg Ala Gly Asp
            20
 
<210>104
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>104
Arg Ala Leu Tyr Asp Asn Val Pro Glu Ser Ala Glu Glu Leu Ala Phe
1               5                   10                  15
Arg Lys Ala Asp
            20
 
<210>105
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>105
Arg Ala Leu Tyr Asp Asn Val Pro Glu Ser Ala Glu Glu Leu Ala Phe
1               5                   10                  15
Arg Lys Gly Ala
            20
 
<210>106
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>106
Ala Ala Leu Tyr Asp Asn Val Pro Glu Ala Ala Glu Glu Leu Ala Phe
1               5                   10                  15
Arg Lys Gly Asp
            20
<210>107
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>107
Arg Ala Ala Tyr Asp Asn Val Pro Glu Ala Ala Glu Glu Leu Ala Phe
1               5                   10                  15
Arg Lys Gly Asp
            20
 
<210>108
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>108
Arg Ala Leu Ala Asp Asn Val Pro Glu Ala Ala Glu Glu Leu Ala Phe
1               5                   10                  15
Arg Lys Gly Asp
            20
 
<210>109
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>109
Arg Ala Leu Tyr Ala Asn Val Pro Glu Ala Ala Glu Glu Leu Ala Phe
1               5                   10                  15
Arg Lys Gly Asp
            20
 
<210>110
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>110
Arg Ala Leu Tyr Asp Ala Val Pro Glu Ala Ala Glu Glu Leu Ala Phe
1               5                   10                  15
Arg Lys Gly Asp
            20
 
<210>111
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>111
Arg Ala Leu Tyr Asp Asn Ala Pro Glu Ala Ala Glu Glu Leu Ala Phe
1               5                   10                  15
Arg Lys Gly Asp
            20
 
<210>112
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>112
Arg Ala Leu Tyr Asp Asn Val Ala Glu Ala Ala Glu Glu Leu Ala Phe
1               5                   10                  15
Arg Lys Gly Asp
            20
 
<210>113
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>113
Arg Ala Leu Tyr Asp Asn Val Pro Ala Ala Ala Glu Glu Leu Ala Phe
1               5                   10                  15
Arg Lys Gly Asp
            20
 
<210>114
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>114
Arg Ala Leu Tyr Asp Asn Val Pro Glu Ala Ala Ala Glu Leu Ala Phe
1               5                   10                  15
Arg Lys Gly Asp
            20
 
<210>115
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>115
Arg Ala Leu Tyr Asp Asn Val Pro Glu Ala Ala Glu Ala Leu Ala Phe
1               5                   10                  15
Arg Lys Gly Asp
            20
 
<210>116
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>116
Arg Ala Leu Tyr Asp Asn Val Pro Glu Ala Ala Glu Glu Ala Ala Phe
1               5                   10                  15
Arg Lys Gly Asp
            20
 
<210>117
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>117
Arg Ala Leu Tyr Asp Asn Val Pro Glu Ala Ala Glu Glu Leu Ala Ala
1               5                   10                  15
Arg Lys Gly Asp
            20
 
<210>118
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>118
Arg Ala Leu Tyr Asp Asn Val Pro Glu Ala Ala Glu Glu Leu Ala Phe
1               5                   10                  15
Ala Lys Gly Asp
            20
 
<210>119
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>119
Arg Ala Leu Tyr Asp Asn Val Pro Glu Ala Ala Glu Glu Leu Ala Phe
1               5                   10                  15
Arg Ala Gly Asp
            20
 
<210>120
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>120
Arg Ala Leu Tyr Asp Asn Val Pro Glu Ala Ala Glu Glu Leu Ala Phe
1               5                   10                  15
Arg Lys Ala Asp
            20
 
<210>121
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>121
Arg Ala Leu Tyr Asp Asn Val Pro Glu Ala Ala Glu Glu Leu Ala Phe
1               5                   10                  15
Arg Lys Gly Ala
            20
 
<210>122
<211>19
<212>PRT
<213>智人
<400>122
Arg Ala Leu Tyr Asp Asn Val Pro Glu Cys Ala Glu Glu Leu Ala Phe
1               5                   10                  15
Arg Lys Gly
 
<210>123
<211>18
<212>PRT
<213>智人
<400>123
Arg Ala Leu Tyr Asp Asn Val Pro Glu Cys Ala Glu Glu Leu Ala Phe
1               5                   10                  15
Arg Lys
 
<210>124
<211>17
<212>PRT
<213>智人
<400>124
Arg Ala Leu Tyr Asp Asn Val Pro Glu Cys Ala Glu Glu Leu Ala Phe
1               5                   10                  15
Arg
 
<210>125
<211>16
<212>PRT
<213>智人
<400>125
Arg Ala Leu Tyr Asp Asn Val Pro Glu Cys Ala Glu Glu Leu Ala Phe
1               5                   10                  15
<210>126
<211>14
<212>PRT
<213>智人
<400>126
Arg Ala Leu Tyr Asp Asn Val Pro Glu Cys Ala Glu Glu Leu
1               5                   10
 
<210>127
<211>13
<212>PRT
<213>智人
<400>127
Arg Ala Leu Tyr Asp Asn Val Pro Glu Cys Ala Glu Glu
1               5                   10
 
<210>128
<211>12
<212>PRT
<213>智人
<400>128
Arg Ala Leu Tyr Asp Asn Val Pro Glu Cys Ala Glu
1               5                   10
 
<210>129
<211>11
<212>PRT
<213>智人
<400>129
Arg Ala Leu Tyr Asp Asn Val Pro Glu Cys Ala
1               5                   10
 
<210>130
<211>10
<212>PRT
<213>智人
<400>130
Arg Ala Leu Tyr Asp Asn Val Pro Glu Cys
1               5                   10
 
<210>131
<211>9
<212>PRT
<213>智人
<400>131
Arg Ala Leu Tyr Asp Asn Val Pro Glu
1               5
 
<210>132
<211>8
<212>PRT
<213>智人
<400>132
Arg Ala Leu Tyr Asp Asn Val Pro
1               5
 
<210>133
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>133
Arg Ala Leu Tyr Asp Asn Val Pro Glu Cys Ala Glu Glu Leu Ala Phe
1               5                   10                  15
Arg Lys Gly Asp
            20
 
<210>134
<211>19
<212>PRT
<213>智人
<400>134
Ala Leu Tyr Asp Asn Val Pro Glu Cys Ala Glu Glu Leu Ala Phe Arg
1               5                   10                  15
Lys Gly Asp
 
<210>135
<211>18
<212>PRT
<213>智人
<400>135
Leu Tyr Asp Asn Val Pro Glu Cys Ala Glu Glu Leu Ala Phe Arg Lys
1           5                   10                  15
Gly Asp
 
<210>136
<211>17
<212>PRT
<213>智人
<400>136
Tyr Asp Asn Val Pro Glu Cys Ala Glu Glu Leu Ala Phe Arg Lys Gly
1               5                   10                  15
Asp
 
<210>137
<211>16
<212>PRT
<213>智人
<400>137
Asp Asn Val Pro Glu Cys Ala Glu Glu Leu Ala Phe Arg Lys Gly Asp
1               5                   10                  15
 
<210>138
<211>14
<212>PRT
<213>智人
<400>138
Val Pro Glu Cys Ala Glu Glu Leu Ala Phe Arg Lys Gly Asp
1               5                   10
 
<210>139
<211>13
<212>PRT
<213>智人
<400>139
Pro Glu Cys Ala Glu Glu Leu Ala Phe Arg Lys Gly Asp
1               5                   10
 
<210>140
<211>12
<212>PRT
<213>智人
<400>140
Glu Cys Ala Glu Glu Leu Ala Phe Arg Lys Gly Asp
1               5                   10
 
<210>141
<211>11
<212>PRT
<213>智人
<400>141
Cys Ala Glu Glu Leu Ala Phe Arg Lys Gly Asp
1               5                   10
 
<210>142
<211>10
<212>PRT
<213>智人
<400>142
Ala Glu Glu Leu Ala Phe Arg Lys Gly Asp
1               5                   10
 
<210>143
<211>9
<212>PRT
<213>智人
<400>143
Glu Glu Leu Ala Phe Arg Lys Gly Asp
1               5
 
<210>144
<211>8
<212>PRT
<213>智人
<400>144
Glu Leu Ala Phe Arg Lys Gly Asp
1               5
 
<210>145
<211>19
<212>PRT
<213>智人
<400>145
Arg Ala Leu Tyr Asp Asn Val Pro Glu Ser Ala Glu Glu Leu Ala Phe
1               5                   10                  15
Arg Lys Gly
 
<210>146
<211>18
<212>PRT
<213>智人
<400>146
Arg Ala Leu Tyr Asp Asn Val Pro Glu Ser Ala Glu Glu Leu Ala Phe
1               5                   10                  15
Arg Lys
 
<210>147
<211>17
<212>PRT
<213>智人
<400>147
Arg Ala Leu Tyr Asp Asn Val Pro Glu Ser Ala Glu Glu Leu Ala Phe
1               5                   10                  15
Arg
 
<210>148
<211>16
<212>PRT
<213>智人
<400>148
Arg Ala Leu Tyr Asp Asn Val Pro Glu Ser Ala Glu Glu Leu Ala Phe
1               5                   10                  15
 
<210>149
<211>15
<212>PRT
<213>智人
<400>149
Arg Ala Leu Tyr Asp Asn Val Pro Glu Ser Ala Glu Glu Leu Ala
1               5                   10                  15
 
<210>150
<211>14
<212>PRT
<213>智人
<400>150
Arg Ala Leu Tyr Asp Asn Val Pro Glu Ser Ala Glu Glu Leu
1               5                   10
 
<210>151
<211>13
<212>PRT
<213>智人
<400>151
Arg Ala Leu Tyr Asp Asn Val Pro Glu Ser Ala Glu Glu
1               5                   10
 
<210>152
<211>12
<212>PRT
<213>智人
<400>152
Arg Ala Leu Tyr Asp Asn Val Pro Glu Ser Ala Glu
1               5                   10
 
<210>153
<211>11
<212>PRT
<213>智人
<400>153
Arg Ala Leu Tyr Asp Asn Val Pro Glu Ser Ala
1               5                   10
 
<210>154
<211>10
<212>PRT
<213>智人
<400>154
Arg Ala Leu Tyr Asp Asn Val Pro Glu Ser
1               5                   10
<210>155
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>155
Arg Ala Leu Tyr Asp Asn Val Pro Glu Ser Ala Glu Glu Leu Ala Phe
1               5                   10                  15
Arg Lys Gly Asp
            20
 
<210>156
<211>19
<212>PRT
<213>智人
<400>156
Ala Leu Tyr Asp Asn Val Pro Glu Ser Ala Glu Glu Leu Ala Phe Arg
1               5                   10                  15
Lys Gly Asp
 
<210>157
<211>18
<212>PRT
<213>智人
<400>157
Leu Tyr Asp Asn Val Pro Glu Ser Ala Glu Glu Leu Ala Phe Arg Lys
1               5                   10                  15
Gly Asp
 
<210>158
<211>17
<212>PRT
<213>智人
<400>158
Tyr Asp Asn Val Pro Glu Ser Ala Glu Glu Leu Ala Phe Arg Lys Gly
1               5                   10                  15
Asp
 
<210>159
<211>16
<212>PRT
<213>智人
<400>159
Asp Asn Val Pro Glu Ser Ala Glu Glu Leu Ala Phe Arg Lys Gly Asp
1               5                   10                  15
 
<210>160
<211>15
<212>PRT
<213>智人
<400>160
Asn Val Pro Glu Ser Ala Glu Glu Leu Ala Phe Arg Lys Gly Asp
1               5                   10                  15
 
<210>161
<211>14
<212>PRT
<213>智人
<400>161
Val Pro Glu Ser Ala Glu Glu Leu Ala Phe Arg Lys Gly Asp
1               5                   10
 
<210>162
<211>13
<212>PRT
<213>智人
<400>162
Pro Glu Ser Ala Glu Glu Leu Ala Phe Arg Lys Gly Asp
1               5                   10
 
<210>163
<211>12
<212>PRT
<213>智人
<400>163
Glu Ser Ala Glu Glu Leu Ala Phe Arg Lys Gly Asp
1               5                   10
 
<210>164
<211>11
<212>PRT
<213>智人
<400>164
Ser Ala Glu Glu Leu Ala Phe Arg Lys Gly Asp
1               5                   10
 
<210>165
<211>19
<212>PRT
<213>智人
<400>165
Arg Ala Leu Tyr Asp Asn Val Pro Glu Ala Ala Glu Glu Leu Ala Phe
1               5                   10                  15
Arg Lys Gly
 
<210>166
<211>18
<212>PRT
<213>智人
<400>166
Arg Ala Leu Tyr Asp Asn Val Pro Glu Ala Ala Glu Glu Leu Ala Phe
1               5                   10                  15
Arg Lys
 
<210>167
<211>17
<212>PRT
<213>智人
<400>167
Arg Ala Leu Tyr Asp Asn Val Pro Glu Ala Ala Glu Glu Leu Ala Phe
1               5                   10                  15
Arg
 
<210>168
<211>16
<212>PRT
<213>智人
<400>168
Arg Ala Leu Tyr Asp Asn Val Pro Glu Ala Ala Glu Glu Leu Ala Phe
1               5                   10                  15
 
<210>169
<211>15
<212>PRT
<213>智人
<400>169
Arg Ala Leu Tyr Asp Asn Val Pro Glu Ala Ala Glu Glu Leu Ala
1               5                   10                  15
 
<210>170
<211>14
<212>PRT
<213>智人
<400>170
Arg Ala Leu Tyr Asp Asn Val Pro Glu Ala Ala Glu Glu Leu
1               5                   10
 
<210>171
<211>13
<212>PRT
<213>智人
<400>171
Arg Ala Leu Tyr Asp Asn Val Pro Glu Ala Ala Glu Glu
1               5                   10
 
<210>172
<211>12
<212>PRT
<213>智人
<400>172
Arg Ala Leu Tyr Asp Asn Val Pro Glu Ala Ala Glu
1               5                   10
 
<210>173
<211>11
<212>PRT
<213>智人
<400>173
Arg Ala Leu Tyr Asp Asn Val Pro Glu Ala Ala
1               5                   10
 
<210>174
<211>10
<212>PRT
<213>智人
<400>174
Arg Ala Leu Tyr Asp Asn Val Pro Glu Ala
1               5                   10
 
<210>175
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>175
Arg Ala Leu Tyr Asp Asn Val Pro Glu Ala Ala Glu Glu Leu Ala Phe
1               5                   10                  15
Arg Lys Gly Asp
            20
 
<210>176
<211>19
<212>PRT
<213>智人
<400>176
Ala Leu Tyr Asp Asn Val Pro Glu Ala Ala Glu Glu Leu Ala Phe Arg
1               5                   10                  15
Lys Gly Asp
 
<210>177
<211>18
<212>PRT
<213>智人
<400>177
Leu Tyr Asp Asn Val Pro Glu Ala Ala Glu Glu Leu Ala Phe Arg Lys
1               5                   10                  15
Gly Asp
 
<210>178
<211>17
<212>PRT
<213>智人
<400>178
Tyr Asp Asn Val Pro Glu Ala Ala Glu Glu Leu Ala Phe Arg Lys Gly
1               5                   10                  15
Asp
 
<210>179
<211>16
<212>PRT
<213>智人
<400>179
Asp Asn Val Pro Glu Ala Ala Glu Glu Leu Ala Phe Arg Lys Gly Asp
1               5                   10                  15
 
<210>180
<211>15
<212>PRT
<213>智人
<400>180
Asn Val Pro Glu Ala Ala Glu Glu Leu Ala Phe Arg Lys Gly Asp
1               5                   10                  15
 
<210>181
<211>14
<212>PRT
<213>智人
<400>181
Val Pro Glu Ala Ala Glu Glu Leu Ala Phe Arg Lys Gly Asp
1               5                   10
 
<210>182
<211>13
<212>PRT
<213>智人
<400>182
Pro Glu Ala Ala Glu Glu Leu Ala Phe Arg Lys Gly Asp
1               5                   10
 
<210>183
<211>12
<212>PRT
<213>智人
<400>183
Glu Ala Ala Glu Glu Leu Ala Phe Arg Lys Gly Asp
1               5                   10
 
<210>184
<211>11
<212>PRT
<213>智人
<400>184
Ala Ala Glu Glu Leu Ala Phe Arg Lys Gly Asp
1               5                   10
 
<210>185
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>185
Met Ala Arg Ala Leu Tyr Asp Asn Val Pro Glu Cys Ala Glu Glu Leu
1               5                   10                  15
Ala Phe Arg Lys
            20
 
<210>186
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>186
Ala Arg Ala Leu Tyr Asp Asn Val Pro Glu Cys Ala Glu Glu Leu Ala
1               5                   10                  15
Phe Arg Lys Gly
            20
 
<210>187
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>187
Arg Ala Leu Tyr Asp Asn Val Pro Glu Cys Ala Glu Glu Leu Ala Phe
1               5                   10                  15
Arg Lys Gly Asp
            20
 
<210>188
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>188
Ala Leu Tyr Asp Asn Val Pro Glu Cys Ala Glu Glu Leu Ala Phe Arg
1               5                   10                  15
Lys Gly Asp Ile
            20
 
<210>189
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>189
Leu Tyr Asp Asn Val Pro Glu Cys Ala Glu Glu Leu Ala Phe Arg Lys
1               5                   10                  15
Gly Asp Ile Leu
            20
 
<210>190
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>190
Tyr Asp Asn Val Pro Glu Cys Ala Glu Glu Leu Ala Phe Arg Lys Gly
1               5                   10                  15
Asp Ile Leu Thr
            20
 
<210>191
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>191
Asp Asn Val Pro Glu Cys Ala Glu Glu Leu Ala Phe Arg Lys Gly Asp
1               5                   10                  15
Ile Leu Thr Val
            20
 
<210>192
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>192
Asn Val Pro Glu Cys Ala Glu Glu Leu Ala Phe Arg Lys Gly Asp Ile
1               5                   10                  15
Leu Thr Val Ile
            20
 
<210>193
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>193
Val Pro Glu Cys Ala Glu Glu Leu Ala Phe Arg Lys Gly Asp Ile Leu
1               5                   10                  15
Thr Val Ile Glu
            20
 
<210>194
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>194
Pro Glu Cys Ala Glu Glu Leu Ala Phe Arg Lys Gly Asp Ile Leu Thr
1               5                   10                  15
Val Ile Glu Gln
            20
 
<210>195
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>195
Glu Cys Ala Glu Glu Leu Ala Phe Arg Lys Gly Asp Ile Leu Thr Val
1               5                   10                  15
Ile Glu Gln Asn
            20
<210>196
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>196
Cys Ala Glu Glu Leu Ala Phe Arg Lys Gly Asp Ile Leu Thr Val Ile
1               5                   10                  15
Glu Gln Asn Thr
            20
 
<210>197
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>197
Ala Glu Glu Leu Ala Phe Arg Lys Gly Asp Ile Leu Thr Val Ile Glu
1               5                   10                  15
Gln Asn Thr Gly
            20
 
<210>198
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>198
Glu Glu Leu Ala Phe Arg Lys Gly Asp Ile Leu Thr Val Ile Glu Gln
1               5                   10                  15
Asn Thr Gly Gly
            20
 
<210>199
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>199
Glu Leu Ala Phe Arg Lys Gly Asp Ile Leu Thr Val Ile Glu Gln Asn
1               5                   10                  15
Thr Gly Gly Leu
            20
 
<210>200
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>200
Leu Ala Phe Arg Lys Gly Asp Ile Leu Thr Val Ile Glu Gln Asn Thr
1               5                   10                  15
Gly Gly Leu Glu
            20
 
<210>201
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>201
Ala Phe Arg Lys Gly Asp Ile Leu Thr Val Ile Glu Gln Asn Thr Gly
1               5                   10                  15
Gly Leu Glu Gly
            20
 
<210>202
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>202
Phe Arg Lys Gly Asp Ile Leu Thr Val Ile Glu Gln Asn Thr Gly Gly
1               5                   10                  15
Leu Glu Gly Trp
            20
 
<210>203
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>203
Arg Lys Gly Asp Ile Leu Thr Val Ile Glu Gln Asn Thr Gly Gly Leu
1               5                   10                  15
Glu Gly Trp Trp
            20
 
<210>204
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>204
Lys Gly Asp Ile Leu Thr Val Ile Glu Gln Asn Thr Gly Gly Leu Glu
1               5                   10                  15
Gly Trp Trp Leu
            20
 
<210>205
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>205
Gly Asp Ile Leu Thr Val Ile Glu Gln Asn Thr Gly Gly Leu Glu Gly
1               5                   10                  15
Trp Trp Leu Cys
            20
 
<210>206
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>206
Asp Ile Leu Thr Val Ile Glu Gln Asn Thr Gly Gly Leu Glu Gly Trp
1               5                   10                  15
Trp Leu Cys Ser
            20
 
<210>207
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>207
Ile Leu Thr Val Ile Glu Gln Asn Thr Gly Gly Leu Glu Gly Trp Trp
1               5                   10                  15
Leu Cys Ser Leu
            20
 
<210>208
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>208
Leu Thr Val Ile Glu Gln Asn Thr Gly Gly Leu Glu Gly Trp Trp Leu
1               5                   10                  15
Cys Ser Leu His
            20
 
<210>209
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>209
Thr Val Ile Glu Gln Asn Thr Gly Gly Leu Glu Gly Trp Trp Leu Cys
1               5                   10                  15
Ser Leu His Gly
            20
 
<210>210
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>210
Val Ile Glu Gln Asn Thr Gly Gly Leu Glu Gly Trp Trp Leu Cys Ser
1               5                   10                  15
Leu His Gly Arg
            20
 
<210>211
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>211
Ile Glu Gln Asn Thr Gly Gly Leu Glu Gly Trp Trp Leu Cys Ser Leu
1               5                   10                  15
His Gly Arg Gln
            20
 
<210>212
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>212
Glu Gln Asn Thr Gly Gly Leu Glu Gly Trp Trp Leu Cys Ser Leu His
1               5                   10                  15
Gly Arg Gln Gly
            20
 
<210>213
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>213
Gln Asn Thr Gly Gly Leu Glu Gly Trp Trp Leu Cys Ser Leu His Gly
1               5                   10                  15
Arg Gln Gly Ile
            20
 
<210>214
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>214
Asn Thr Gly Gly Leu Glu Gly Trp Trp Leu Cys Ser Leu His Gly Arg
1               5                   10                  15
Gln Gly Ile Val
            20
 
<210>215
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>215
Thr Gly Gly Leu Glu Gly Trp Trp Leu Cys Ser Leu His Gly Arg Gln
1               5                   10                  15
Gly Ile Val Pro
            20
 
<210>216
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>216
Gly Gly Leu Glu Gly Trp Trp Leu Cys Ser Leu His Gly Arg Gln Gly
1               5                   10                  15
Ile Val Pro Gly
            20
 
<210>217
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>217
Gly Leu Glu Gly Trp Trp Leu Cys Ser Leu His Gly Arg Gln Gly Ile
1               5                   10                  15
Val Pro Gly Asn
            20
 
<210>218
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>218
Leu Glu Gly Trp Trp Leu Cys Ser Leu His Gly Arg Gln Gly Ile Val
1               5                   10                  15
Pro Gly Asn Arg
            20
 
<210>219
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>219
Glu Gly Trp Trp Leu Cys Ser Leu His Gly Arg Gln Gly Ile Val Pro
1               5                   10                  15
Gly Asn Arg Val
            20
 
<210>220
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>220
Gly Trp Trp Leu Cys Ser Leu His Gly Arg Gln Gly Ile Val Pro Gly
1               5                   10                  15
Asn Arg Val Lys
            20
 
<210>221
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>221
Trp Trp Leu Cys Ser Leu His Gly Arg Gln Gly Ile Val Pro Gly Asn
1               5                   10                  15
Arg Val Lys Leu
            20
 
<210>222
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>222
Trp Leu Cys Ser Leu His Gly Arg Gln Gly Ile Val Pro Gly Asn Arg
1               5                   10                  15
Val Lys Leu Leu
            20
 
<210>223
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>223
Leu Cys Ser Leu His Gly Arg Gln Gly Ile Val Pro Gly Asn Arg Val
1               5                   10                  15
Lys Leu Leu Ile
            20
 
<210>224
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>224
Cys Ser Leu His Gly Arg Gln Gly Ile Val Pro Gly Asn Arg Val Lys
1               5                   10                  15
Leu Leu Ile Gly
            20
 
<210>225
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>225
Ser Leu His Gly Arg Gln Gly Ile Val Pro Gly Asn Arg Val Lys Leu
1               5                   10                  15
Leu Ile Gly Pro
            20
 
<210>226
<211>12
<212>PRT
<213>智人
<400>226
Met Ala Arg Ala Leu Tyr Asp Asn Val Pro Glu Cys
1               5                   10
 
<210>227
<211>12
<212>PRT
<213>智人
<400>227
Ala Arg Ala Leu Tyr Asp Asn Val Pro Glu Cys Ala
1               5                   10
 
<210>228
<211>12
<212>PRT
<213>智人
<400>228
Arg Ala Leu Tyr Asp Asn Val Pro Glu Cys Ala Glu
1               5                   10
 
<210>229
<211>12
<212>PRT
<213>智人
<400>229
Ala Leu Tyr Asp Asn Val Pro Glu Cys Ala Glu Glu
1               5                   10
 
<210>230
<211>12
<212>PRT
<213>智人
<400>230
Leu Tyr Asp Asn Val Pro Glu Cys Ala Glu Glu Leu
1               5                   10
 
<210>231
<211>12
<212>PRT
<213>智人
<400>231
Tyr Asp Asn Val Pro Glu Cys Ala Glu Glu Leu Ala
1               5                   10
 
<210>232
<211>12
<212>PRT
<213>智人
<400>232
Asp Asn Val Pro Glu Cys Ala Glu Glu Leu Ala Phe
1               5                   10
 
<210>233
<211>12
<212>PRT
<213>智人
<400>233
Asn Val Pro Glu Cys Ala Glu Glu Leu Ala Phe Arg
1               5                   10
 
<210>234
<211>12
<212>PRT
<213>智人
<400>234
Val Pro Glu Cys Ala Glu Glu Leu Ala Phe Arg Lys
1               5                   10
 
<210>235
<211>12
<212>PRT
<213>智人
<400>235
Pro Glu Cys Ala Glu Glu Leu Ala Phe Arg Lys Gly
1               5                   10
 
<210>236
<211>12
<212>PRT
<213>智人
<400>236
Glu Cys Ala Glu Glu Leu Ala Phe Arg Lys Gly Asp
1               5                   10
 
<210>237
<211>12
<212>PRT
<213>智人
<400>237
Cys Ala Glu Glu Leu Ala Phe Arg Lys Gly Asp Ile
1               5                   10
 
<210>238
<211>12
<212>PRT
<213>智人
<400>238
Ala Glu Glu Leu Ala Phe Arg Lys Gly Asp Ile Leu
1               5                   10
 
<210>239
<211>12
<212>PRT
<213>智人
<400>239
Glu Glu Leu Ala Phe Arg Lys Gly Asp Ile Leu Thr
1               5                   10
 
<210>240
<211>12
<212>PRT
<213>智人
<400>240
Glu Leu Ala Phe Arg Lys Gly Asp Ile Leu Thr Val
1               5                   10
 
<210>241
<211>12
<212>PRT
<213>智人
<400>241
Leu Ala Phe Arg Lys Gly Asp Ile Leu Thr Val Ile
1               5                   10
 
<210>242
<211>12
<212>PRT
<213>智人
<400>242
Ala Phe Arg Lys Gly Asp Ile Leu Thr Val Ile Glu
1               5                   10
 
<210>243
<211>12
<212>PRT
<213>智人
<400>243
Phe Arg Lys Gly Asp Ile Leu Thr Val Ile Glu Gln
1               5                   10
 
<210>244
<211>12
<212>PRT
<213>智人
<400>244
Arg Lys Gly Asp Ile Leu Thr Val Ile Glu Gln Asn
1               5                   10
 
<210>245
<211>12
<212>PRT
<213>智人
<400>245
Lys Gly Asp Ile Leu Thr Val Ile Glu Gln Asn Thr
1               5                   10
 
<210>246
<211>13
<212>PRT
<213>智人
<400>246
Gly Asp Ile Leu Thr Val Ile Glu Gln Asn Thr Gly Gly
1               5                   10
 
<210>247
<211>13
<212>PRT
<213>智人
<400>247
Asp Ile Leu Thr Val Ile Glu Gln Asn Thr Gly Gly Leu
1               5                   10
 
<210>248
<211>13
<212>PRT
<213>智人
<400>248
Ile Leu Thr Val Ile Glu Gln Asn Thr Gly Gly Leu Glu
1               5                   10
 
<210>249
<211>13
<212>PRT
<213>智人
<400>249
Leu Thr Val Ile Glu Gln Asn Thr Gly Gly Leu Glu Gly
1               5                   10
<210>250
<211>13
<212>PRT
<213>智人
<400>250
Thr Val Ile Glu Gln Asn Thr Gly Gly Leu Glu Gly Trp
1               5                   10
 
<210>251
<211>13
<212>PRT
<213>智人
<400>251
Val Ile Glu Gln Asn Thr Gly Gly Leu Glu Gly Trp Trp
1               5                   10
 
<210>252
<211>13
<212>PRT
<213>智人
<400>252
Ile Glu Gln Asn Thr Gly Gly Leu Glu Gly Trp Trp Leu
1               5                   10
 
<210>253
<211>13
<212>PRT
<213>智人
<400>253
Glu Gln Asn Thr Gly Gly Leu Glu Gly Trp Trp Leu Cys
1               5                   10
 
<210>254
<211>13
<212>PRT
<213>智人
<400>254
Gln Asn Thr Gly Gly Leu Glu Gly Trp Trp Leu Cys Ser
1               5                   10
 
<210>255
<211>13
<212>PRT
<213>智人
<400>255
Asn Thr Gly Gly Leu Glu Gly Trp Trp Leu Cys Ser Leu
1               5                   10
 
<210>256
<211>13
<212>PRT
<213>智人
<400>256
Thr Gly Gly Leu Glu Gly Trp Trp Leu Cys Ser Leu His
1               5                   10
 
<210>257
<211>13
<212>PRT
<213>智人
<400>257
Gly Gly Leu Glu Gly Trp Trp Leu Cys Ser Leu His Gly
1               5                   10
 
<210>258
<211>13
<212>PRT
<213>智人
<400>258
Gly Leu Glu Gly Trp Trp Leu Cys Ser Leu His Gly Arg
1               5                   10
 
<210>259
<211>13
<212>PRT
<213>智人
<400>259
Leu Glu Gly Trp Trp Leu Cys Ser Leu His Gly Arg Gln
1               5                   10
 
<210>260
<211>13
<212>PRT
<213>智人
<400>260
Glu Gly Trp Trp Leu Cys Ser Leu His Gly Arg Gln Gly
1               5                   10
 
<210>261
<211>13
<212>PRT
<213>智人
<400>261
Gly Trp Trp Leu Cys Ser Leu His Gly Arg Gln Gly Ile
1               5                   10
 
<210>262
<211>13
<212>PRT
<213>智人
<400>262
Trp Trp Leu Cys Ser Leu His Gly Arg Gln Gly Ile Val
1               5                   10
 
<210>263
<211>13
<212>PRT
<213>智人
<400>263
Trp Leu Cys Ser Leu His Gly Arg Gln Gly Ile Val Pro
1               5                   10
 
<210>264
<211>13
<212>PRT
<213>智人
<400>264
Leu Cys Ser Leu His Gly Arg Gln Gly Ile Val Pro Gly
1               5                   10
 
<210>265
<211>13
<212>PRT
<213>智人
<400>265
Cys Ser Leu His Gly Arg Gln Gly Ile Val Pro Gly Asn
1               5                   10
 
<210>266
<211>13
<212>PRT
<213>智人
<400>266
Ser Leu His Gly Arg Gln Gly Ile Val Pro Gly Asn Arg
1               5                   10
 
<210>267
<211>13
<212>PRT
<213>智人
<400>267
Leu His Gly Arg Gln Gly Ile Val Pro Gly Asn Arg Val
1               5                   10
 
<210>268
<211>13
<212>PRT
<213>智人
<400>268
His Gly Arg Gln Gly Ile Val Pro Gly Asn Arg Val Lys
1               5                   10
 
<210>269
<211>12
<212>PRT
<213>智人
<400>269
Arg Gln Gly Ile Val Pro Gly Asn Arg Val Lys Leu
1               5                   10
 
<210>270
<211>12
<212>PRT
<213>智人
<400>270
Gln Gly Ile Val Pro Gly Asn Arg Val Lys Leu Leu
1               5                   10
 
<210>271
<211>12
<212>PRT
<213>智人
<400>271
Gly Ile Val Pro Gly Asn Arg Val Lys Leu Leu Ile
1               5                   10
 
<210>272
<211>12
<212>PRT
<213>智人
<400>272
Ile Val Pro Gly Asn Arg Val Lys Leu Leu Ile Gly
1               5                   10
<210>273
<211>12
<212>PRT
<213>智人
<400>273
Val Pro Gly Asn Arg Val Lys Leu Leu Ile Gly Pro
1               5                   10
 
<210>274
<211>28
<212>PRT
<213>智人
<400>274
Ala Arg Ser Asp Gly Leu Leu Gln Leu Trp Lys Lys Lys Cys Cys Ile
1               5                   10                  15
Leu Thr Glu Glu Gly Leu Leu Leu Ile Pro Pro Lys
            20                  25
 
<210>275
<211>28
<212>PRT
<213>智人
<400>275
Lys Ala Ser Asp Gly Leu Leu Gln Leu Trp Lys Lys Lys Cys Cys Ile
1               5                   10                  15
Leu Thr Glu Glu Gly Leu Leu Leu Ile Pro Pro Lys
            20                  25
 
<210>276
<211>28
<212>PRT
<213>智人
<400>276
Lys Arg Ala Asp Gly Leu Leu Gln Leu Trp Lys Lys Lys Cys Cys Ile
1               5                   10                  15
Leu Thr Glu Glu Gly Leu Leu Leu Ile Pro Pro Lys
            20                  25
 
<210>277
<211>28
<212>PRT
<213>智人
<400>277
Lys Arg Ser Ala Gly Leu Leu Gln Leu Trp Lys Lys Lys Cys Cys Ile
1               5                   10                  15
Leu Thr Glu Glu Gly Leu Leu Leu Ile Pro Pro Lys
            20                  25
 
<210>278
<211>28
<212>PRT
<213>智人
<400>278
Lys Arg Ser Asp Ala Leu Leu Gln Leu Trp Lys Lys Lys Cys Cys Ile
1               5                   10                  15
Leu Thr Glu Glu Gly Leu Leu Leu Ile Pro Pro Lys
            20                  25
 
<210>279
<211>28
<212>PRT
<213>智人
<400>279
Lys Arg Ser Asp Gly Ala Leu Gln Leu Trp Lys Lys Lys Cys Cys Ile
1               5                   10                  15
Leu Thr Glu Glu Gly Leu Leu Leu Ile Pro Pro Lys
            20                  25
 
<210>280
<211>28
<212>PRT
<213>智人
<400>280
Lys Arg Ser Asp Gly Leu Ala Gln Leu Trp Lys Lys Lys Cys Cys Ile
1               5                   10                  15
Leu Thr Glu Glu Gly Leu Leu Leu Ile Pro Pro Lys
            20                  25
 
<210>281
<211>28
<212>PRT
<213>智人
<400>281
Lys Arg Ser Asp Gly Leu Leu Ala Leu Trp Lys Lys Lys Cys Cys Ile
1               5                   10                  15
Leu Thr Glu Glu Gly Leu Leu Leu Ile Pro Pro Lys
            20                  25
 
<210>282
<211>28
<212>PRT
<213>智人
<400>282
Lys Arg Ser Asp Gly Leu Leu Gln Ala Trp Lys Lys Lys Cys Cys Ile
1               5                   10                  15
Leu Thr Glu Glu Gly Leu Leu Leu Ile Pro Pro Lys
            20                  25
 
<210>283
<211>28
<212>PRT
<213>智人
<400>283
Lys Arg Ser Asp Gly Leu Leu Gln Leu Ala Lys Lys Lys Cys Cys Ile
1               5                   10                  15
Leu Thr Glu Glu Gly Leu Leu Leu Ile Pro Pro Lys
            20                  25
 
<210>284
<211>28
<212>PRT
<213>智人
<400>284
Lys Arg Ser Asp Gly Leu Leu Gln Leu Trp Ala Lys Lys Cys Cys Ile
1               5                   10                  15
Leu Thr Glu Glu Gly Leu Leu Leu Ile Pro Pro Lys
            20                  25
 
<210>285
<211>28
<212>PRT
<213>智人
<400>285
Lys Arg Ser Asp Gly Leu Leu Gln Leu Trp Lys Ala Lys Cys Cys Ile
1               5                   10                  15
Leu Thr Glu Glu Gly Leu Leu Leu Ile Pro Pro Lys
            20                  25
 
<210>286
<211>28
<212>PRT
<213>智人
<400>286
Lys Arg Ser Asp Gly Leu Leu Gln Leu Trp Lys Lys Ala Cys Cys Ile
1               5                   10                  15
Leu Thr Glu Glu Gly Leu Leu Leu Ile Pro Pro Lys
            20                  25
 
<210>287
<211>28
<212>PRT
<213>智人
<400>287
Lys Arg Ser Asp Gly Leu Leu Gln Leu Trp Lys Lys Lys Ala Cys Ile
1               5                   10                  15
Leu Thr Glu Glu Gly Leu Leu Leu Ile Pro Pro Lys
            20                  25
 
<210>288
<211>28
<212>PRT
<213>智人
<400>288
Lys Arg Ser Asp Gly Leu Leu Gln Leu Trp Lys Lys Lys Cys Ala Ile
1               5                   10                  15
Leu Thr Glu Glu Gly Leu Leu Leu Ile Pro Pro Lys
            20                  25
 
<210>289
<211>28
<212>PRT
<213>智人
<400>289
Lys Arg Ser Asp Gly Leu Leu Gln Leu Trp Lys Lys Lys Cys Cys Ala
1               5                   10                  15
Leu Thr Glu Glu Gly Leu Leu Leu Ile Pro Pro Lys
            20                  25
 
<210>290
<211>28
<212>PRT
<213>智人
<400>290
Lys Arg Ser Asp Gly Leu Leu Gln Leu Trp Lys Lys Lys Cys Cys Ile
1               5                   10                  15
Ala Thr Glu Glu Gly Leu Leu Leu Ile Pro Pro Lys
            20                  25
 
<210>291
<211>28
<212>PRT
<213>智人
<400>291
Lys Arg Ser Asp Gly Leu Leu Gln Leu Trp Lys Lys Lys Cys Cys Ile
1               5                   10                  15
Leu Ala Glu Glu Gly Leu Leu Leu Ile Pro Pro Lys
            20                  25
 
<210>292
<211>28
<212>PRT
<213>智人
<400>292
Lys Arg Ser Asp Gly Leu Leu Gln Leu Trp Lys Lys Lys Cys Cys Ile
1               5                   10                  15
Leu Thr Ala Glu Gly Leu Leu Leu Ile Pro Pro Lys
            20                  25
 
<210>293
<211>28
<212>PRT
<213>智人
<400>293
Lys Arg Ser Asp Gly Leu Leu Gln Leu Trp Lys Lys Lys Cys Cys Ile
1               5                   10                  15
Leu Thr Glu Ala Gly Leu Leu Leu Ile Pro Pro Lys
            20                  25
 
<210>294
<211>28
<212>PRT
<213>智人
<400>294
Lys Arg Ser Asp Gly Leu Leu Gln Leu Trp Lys Lys Lys Cys Cys Ile
1               5                   10                  15
Leu Thr Glu Glu Ala Leu Leu Leu Ile Pro Pro Lys
            20                  25
 
<210>295
<211>28
<212>PRT
<213>智人
<400>295
Lys Arg Ser Asp Gly Leu Leu Gln Leu Trp Lys Lys Lys Cys Cys Ile
1               5                   10                  15
Leu Thr Glu Glu Gly Ala Leu Leu Ile Pro Pro Lys
            20                  25
 
<210>296
<211>28
<212>PRT
<213>智人
<400>296
Lys Arg Ser Asp Gly Leu Leu Gln Leu Trp Lys Lys Lys Cys Cys Ile
1               5                   10                  15
Leu Thr Glu Glu Gly Leu Ala Leu Ile Pro Pro Lys
            20                  25
 
<210>297
<211>28
<212>PRT
<213>智人
<400>297
Lys Arg Ser Asp Gly Leu Leu Gln Leu Trp Lys Lys Lys Cys Cys Ile
1               5                   10                  15
Leu Thr Glu Glu Gly Leu Leu Ala Ile Pro Pro Lys
            20                  25
<210>298
<211>28
<212>PRT
<213>智人
<400>298
Lys Arg Ser Asp Gly Leu Leu Gln Leu Trp Lys Lys Lys Cys Cys Ile
1               5                   10                  15
Leu Thr Glu Glu Gly Leu Leu Leu Ala Pro Pro Lys
            20                  25
 
<210>299
<211>28
<212>PRT
<213>智人
<400>299
Lys Arg Ser Asp Gly Leu Leu Gln Leu Trp Lys Lys Lys Cys Cys Ile
1               5                   10                  15
Leu Thr Glu Glu Gly Leu Leu Leu Ile Ala Pro Lys
            20                  25
 
<210>300
<211>28
<212>PRT
<213>智人
<400>300
Lys Arg Ser Asp Gly Leu Leu Gln Leu Trp Lys Lys Lys Cys Cys Ile
1               5                   10                  15
Leu Thr Glu Glu Gly Leu Leu Leu Ile Pro Ala Lys
            20                  25
 
<210>301
<211>28
<212>PRT
<213>智人
<400>301
Lys Arg Ser Asp Gly Leu Leu Gln Leu Trp Lys Lys Lys Cys Cys Ile
1               5                   10                  15
Leu Thr Glu Glu Gly Leu Leu Leu Ile Pro Pro Ala
            20                  25
 
<210>302
<211>19
<212>PRT
<213>智人
<400>302
Ala Glu Pro Pro Val Lys Leu Lys Glu Leu His Phe Ser Asn Met Lys
1               5                   10                  15
Thr Val Asp
 
<210>303
<211>19
<212>PRT
<213>智人
<400>303
Leu Ala Pro Pro Val Lys Leu Lys Glu Leu His Phe Ser Asn Met Lys
1               5                   10                  15
Thr Val Asp
 
<210>304
<211>19
<212>PRT
<213>智人
<400>304
Leu Glu Ala Pro Val Lys Leu Lys Glu Leu His Phe Ser Asn Met Lys
1               5                   10                  15
Thr Val Asp
 
<210>305
<211>19
<212>PRT
<213>智人
<400>305
Leu Glu Pro Ala Val Lys Leu Lys Glu Leu His Phe Ser Asn Met Lys
1               5                   10                  15
Thr Val Asp
 
<210>306
<211>19
<212>PRT
<213>智人
<400>306
Leu Glu Pro Pro Ala Lys Leu Lys Glu Leu His Phe Ser Asn Met Lys
1               5                   10                  15
Thr Val Asp
 
<210>307
<211>19
<212>PRT
<213>智人
<400>307
Leu Glu Pro Pro Val Ala Leu Lys Glu Leu His Phe Ser Asn Met Lys
1               5                   10                  15
Thr Val Asp
 
<210>308
<211>19
<212>PRT
<213>智人
<400>308
Leu Glu Pro Pro Val Lys Ala Lys Glu Leu His Phe Ser Asn Met Lys
1               5                   10                  15
Thr Val Asp
 
<210>309
<211>19
<212>PRT
<213>智人
<400>309
Leu Glu Pro Pro Val Lys Leu Ala Glu Leu His Phe Ser Asn Met Lys
1               5                   10                  15
Thr Val Asp
 
<210>310
<211>19
<212>PRT
<213>智人
<400>310
Leu Glu Pro Pro Val Lys Leu Lys Ala Leu His Phe Ser Asn Met Lys
1               5                   10                  15
Thr Val Asp
 
<210>311
<211>19
<212>PRT
<213>智人
<400>311
Leu Glu Pro Pro Val Lys Leu Lys Glu Ala His Phe Ser Asn Met Lys
1               5                   10                  15
Thr Val Asp
 
<210>312
<211>19
<212>PRT
<213>智人
<400>312
Leu Glu Pro Pro Val Lys Leu Lys Glu Leu Ala Phe Ser Asn Met Lys
1               5                   10                  15
Thr Val Asp
 
<210>313
<211>19
<212>PRT
<213>智人
<400>313
Leu Glu Pro Pro Val Lys Leu Lys Glu Leu His Ala Ser Asn Met Lys
1               5                   10                  15
Thr Val Asp
 
<210>314
<211>19
<212>PRT
<213>智人
<400>314
Leu Glu Pro Pro Val Lys Leu Lys Glu Leu His Phe Ala Asn Met Lys
1               5                   10                  15
Thr Val Asp
 
<210>315
<211>19
<212>PRT
<213>智人
<400>315
Leu Glu Pro Pro Val Lys Leu Lys Glu Leu His Phe Ser Ala Met Lys
1               5                   10                  15
Thr Val Asp
 
<210>316
<211>19
<212>PRT
<213>智人
<400>316
Leu Glu Pro Pro Val Lys Leu Lys Glu Leu His Phe Ser Asn Ala Lys
1               5                   10                  15
Thr Val Asp
 
<210>317
<211>19
<212>PRT
<213>智人
<400>317
Leu Glu Pro Pro Val Lys Leu Lys Glu Leu His Phe Ser Asn Met Ala
1               5                   10                  15
Thr Val Asp
 
<210>318
<211>19
<212>PRT
<213>智人
<400>318
Leu Glu Pro Pro Val Lys Leu Lys Glu Leu His Phe Ser Asn Met Lys
1               5                   10                  15
Ala Val Asp
 
<210>319
<211>19
<212>PRT
<213>智人
<400>319
Leu Glu Pro Pro Val Lys Leu Lys Glu Leu His Phe Ser Asn Met Lys
1               5                   10                  15
Thr Ala Asp
 
<210>320
<211>19
<212>PRT
<213>智人
<400>320
Leu Glu Pro Pro Val Lys Leu Lys Glu Leu His Phe Ser Asn Met Lys
1               5                   10                  15
Thr Val Ala
 
<210>321
<211>27
<212>PRT
<213>智人
<400>321
Lys Arg Ser Asp Gly Leu Leu Gln Leu Trp Lys Lys Lys Cys Cys Ile
1               5                   10                  15
Leu Thr Glu Glu Gly Leu Leu Leu Ile Pro Pro
            20                  25
 
<210>322
<211>26
<212>PRT
<213>智人
<400>322
Lys Arg Ser Asp Gly Leu Leu Gln Leu Trp Lys Lys Lys Cys Cys Ile
1               5                   10                  15
Leu Thr Glu Glu Gly Leu Leu Leu Ile Pro
            20                  25
 
<210>323
<211>25
<212>PRT
<213>智人
<400>323
Lys Arg Ser Asp Gly Leu Leu Gln Leu Trp Lys Lys Lys Cys Cys Ile
1               5                   10                  15
Leu Thr Glu Glu Gly Leu Leu Leu Ile
            20                  25
 
<210>324
<211>24
<212>PRT
<213>智人
<400>324
Lys Arg Ser Asp Gly Leu Leu Gln Leu Trp Lys Lys Lys Cys Cys Ile
1               5                   10                  15
Leu Thr Glu Glu Gly Leu Leu Leu
            20
 
<210>325
<211>23
<212>PRT
<213>智人
<400>325
Lys Arg Ser Asp Gly Leu Leu Gln Leu Trp Lys Lys Lys Cys Cys Ile
1               5                   10                  15
Leu Thr Glu Glu Gly Leu Leu
            20
 
<210>326
<211>22
<212>PRT
<213>智人
<400>326
Lys Arg Ser Asp Gly Leu Leu Gln Leu Trp Lys Lys Lys Cys Cys Ile
1               5                   10                  15
Leu Thr Glu Glu Gly Leu
            20
 
<210>327
<211>21
<212>PRT
<213>智人
<400>327
Lys Arg Ser Asp Gly Leu Leu Gln Leu Trp Lys Lys Lys Cys Cys Ile
1               5                   10                  15
Leu Thr Glu Glu Gly
            20
 
<210>328
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>328
Lys Arg Ser Asp Gly Leu Leu Gln Leu Trp Lys Lys Lys Cys Cys Ile
1               5                   10                  15
Leu Thr Glu Glu
            20
<210>329
<211>19
<212>PRT
<213>智人
<400>329
Lys Arg Ser Asp Gly Leu Leu Gln Leu Trp Lys Lys Lys Cys Cys Ile
1               5                   10                  15
Leu Thr Glu
 
<210>330
<211>18
<212>PRT
<213>智人
<400>330
Lys Arg Ser Asp Gly Leu Leu Gln Leu Trp Lys Lys Lys Cys Cys Ile
1               5                   10                  15
Leu Thr
 
<210>331
<211>17
<212>PRT
<213>智人
<400>331
Lys Arg Ser Asp Gly Leu Leu Gln Leu Trp Lys Lys Lys Cys Cys Ile
1               5                   10                  15
Leu
 
<210>332
<211>16
<212>PRT
<213>智人
<400>332
Lys Arg Ser Asp Gly Leu Leu Gln Leu Trp Lys Lys Lys Cys Cys Ile
1               5                   10                  15
 
<210>333
<211>15
<212>PRT
<213>智人
<400>333
Lys Arg Ser Asp Gly Leu Leu Gln Leu Trp Lys Lys Lys Cys Cys
1               5                   10                  15
 
<210>334
<211>14
<212>PRT
<213>智人
<400>334
Lys Arg Ser Asp Gly Leu Leu Gln Leu Trp Lys Lys Lys Cys
1               5                   10
 
<210>335
<211>13
<212>PRT
<213>智人
<400>335
Lys Arg Ser Asp Gly Leu Leu Gln Leu Trp Lys Lys Lys
1               5                   10
<210>336
<211>12
<212>PRT
<213>智人
<400>336
Lys Arg Ser Asp Gly Leu Leu Gln Leu Trp Lys Lys
1               5                   10
 
<210>337
<211>11
<212>PRT
<213>智人
<400>337
Lys Arg Ser Asp Gly Leu Leu Gln Leu Trp Lys
1               5                   10
 
<210>338
<211>10
<212>PRT
<213>智人
<400>338
Lys Arg Ser Asp Gly Leu Leu Gln Leu Trp
1               5                   10
 
<210>339
<211>27
<212>PRT
<213>智人
<400>339
Arg Ser Asp Gly Leu Leu Gln Leu Trp Lys Lys Lys Cys Cys Ile Leu
1               5                   10                  15
Thr Glu Glu Gly Leu Leu Leu Ile Pro Pro Lys
            20                  25
 
<210>340
<211>26
<212>PRT
<213>智人
<400>340
Ser Asp Gly Leu Leu Gln Leu Trp Lys Lys Lys Cys Cys Ile Leu Thr
1               5                   10                  15
Glu Glu Gly Leu Leu Leu Ile Pro Pro Lys
            20                  25
 
<210>341
<211>25
<212>PRT
<213>智人
<400>341
Asp Gly Leu Leu Gln Leu Trp Lys Lys Lys Cys Cys Ile Leu Thr Glu
1               5                   10                  15
Glu Gly Leu Leu Leu Ile Pro Pro Lys
            20                  25
 
<210>342
<211>24
<212>PRT
<213>智人
<400>342
Gly Leu Leu Gln Leu Trp Lys Lys Lys Cys Cys Ile Leu Thr Glu Glu
1               5                   10                  15
Gly Leu Leu Leu Ile Pro Pro Lys
            20
 
<210>343
<211>23
<212>PRT
<213>智人
<400>343
Leu Leu Gln Leu Trp Lys Lys Lys Cys Cys Ile Leu Thr Glu Glu Gly
1               5                   10                  15
Leu Leu Leu Ile Pro Pro Lys
            20
 
<210>344
<211>22
<212>PRT
<213>智人
<400>344
Leu Gln Leu Trp Lys Lys Lys Cys Cys Ile Leu Thr Glu Glu Gly Leu
1               5                   10                  15
Leu Leu Ile Pro Pro Lys
            20
 
<210>345
<211>21
<212>PRT
<213>智人
<400>345
Gln Leu Trp Lys Lys Lys Cys Cys Ile Leu Thr Glu Glu Gly Leu Leu
1               5                   10                  15
Leu Ile Pro Pro Lys
            20
 
<210>346
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>346
Leu Trp Lys Lys Lys Cys Cys Ile Leu Thr Glu Glu Gly Leu Leu Leu
1               5                   10                  15
Ile Pro Pro Lys
            20
 
<210>347
<211>19
<212>PRT
<213>智人
<400>347
Trp Lys Lys Lys Cys Cys Ile Leu Thr Glu Glu Gly Leu Leu Leu Ile
1               5                   10                  15
Pro Pro Lys
 
<210>348
<211>18
<212>PRT
<213>智人
<400>348
Lys Lys Lys Cys Cys Ile Leu Thr Glu Glu Gly Leu Leu Leu Ile Pro
1               5                   10                  15
Pro Lys
<210>349
<211>17
<212>PRT
<213>智人
<400>349
Lys Lys Cys Cys Ile Leu Thr Glu Glu Gly Leu Leu Leu Ile Pro Pro
1               5                   10                  15
Lys
 
<210>350
<211>16
<212>PRT
<213>智人
<400>350
Lys Cys Cys Ile Leu Thr Glu Glu Gly Leu Leu Leu Ile Pro Pro Lys
1               5                   10                  15
 
<210>351
<211>15
<212>PRT
<213>智人
<400>351
Cys Cys Ile Leu Thr Glu Glu Gly Leu Leu Leu Ile Pro Pro Lys
1               5                   10                  15
 
<210>352
<211>14
<212>PRT
<213>智人
<400>352
Cys Ile Leu Thr Glu Glu Gly Leu Leu Leu Ile Pro Pro Lys
1               5                   10
 
<210>353
<211>13
<212>PRT
<213>智人
<400>353
Ile Leu Thr Glu Glu Gly Leu Leu Leu Ile Pro Pro Lys
1               5                   10
 
<210>354
<211>12
<212>PRT
<213>智人
<400>354
Leu Thr Glu Glu Gly Leu Leu Leu Ile Pro Pro Lys
1               5                   10
 
<210>355
<211>11
<212>PRT
<213>智人
<400>355
Thr Glu Glu Gly Leu Leu Leu Ile Pro Pro Lys
1               5                   10
 
<210>356
<211>10
<212>PRT
<213>智人
<400>356
Glu Glu Gly Leu Leu Leu Ile Pro Pro Lys
1               5                   10
 
<210>357
<211>18
<212>PRT
<213>智人
<400>357
Glu Pro Pro Val Lys Leu Lys Glu Leu His Phe Ser Asn Met Lys Thr
1               5                   10                  15
Val Asp
 
<210>358
<211>17
<212>PRT
<213>智人
<400>358
Pro Pro Val Lys Leu Lys Glu Leu His Phe Ser Asn Met Lys Thr Val
1               5                   10                  15
Asp
 
<210>359
<211>16
<212>PRT
<213>智人
<400>359
Pro Val Lys Leu Lys Glu Leu His Phe Ser Asn Met Lys Thr Val Asp
1               5                   10                  15
 
<210>360
<211>15
<212>PRT
<213>智人
<400>360
Val Lys Leu Lys Glu Leu His Phe Ser Asn Met Lys Thr Val Asp
1               5                   10                  15
 
<210>361
<211>14
<212>PRT
<213>智人
<400>361
Lys Leu Lys Glu Leu His  Phe Ser Asn Met Lys Thr Val Asp
1               5                   10
 
<210>362
<211>13
<212>PRT
<213>智人
<400>362
Leu Lys Glu Leu His Phe Ser Asn Met Lys Thr Val Asp
1               5                   10
 
<210>363
<211>12
<212>PRT
<213>智人
<400>363
Lys Glu Leu His Phe Ser Asn Met Lys Thr Val Asp
1               5                   10
 
<210>364
<211>11
<212>PRT
<213>智人
<400>364
Glu Leu His Phe Ser Asn Met Lys Thr Val Asp
1               5                   10
 
<210>365
<211>10
<212>PRT
<213>智人
<400>365
Leu His Phe Ser Asn Met Lys Thr Val Asp
1               5                   10
 
<210>366
<211>18
<212>PRT
<213>智人
<400>366
Leu Glu Pro Pro Val Lys Leu Lys Glu Leu His Phe Ser Asn Met Lys
1               5                   10                  15
Thr Val
 
<210>367
<211>17
<212>PRT
<213>智人
<400>367
Leu Glu Pro Pro Val Lys Leu Lys Glu Leu His Phe Ser Asn Met Lys
1               5                   10                  15
Thr
 
<210>368
<211>16
<212>PRT
<213>智人
<400>368
Leu Glu Pro Pro Val Lys Leu Lys Glu Leu His Phe Ser Asn Met Lys
1               5                   10                  15
 
<210>369
<211>15
<212>PRT
<213>智人
<400>369
Leu Glu Pro Pro Val Lys Leu Lys Glu Leu His Phe Ser Asn Met
1               5                   10                  15
 
<210>370
<211>14
<212>PRT
<213>智人
<400>370
Leu Glu Pro Pro Val Lys Leu Lys Glu Leu His Phe Ser Asn
1               5                   10
 
<210>371
<211>13
<212>PRT
<213>智人
<400>371
Leu Glu Pro Pro Val Lys Leu Lys Glu Leu His Phe Ser
1               5                   10
 
<210>372
<211>12
<212>PRT
<213>智人
<400>372
Leu Glu Pro Pro Val Lys Leu Lys Glu Leu His Phe
1               5                   10
 
<210>373
<211>11
<212>PRT
<213>智人
<400>373
Leu Glu Pro Pro Val Lys Leu Lys Glu Leu His
1               5                   10
 
<210>374
<211>10
<212>PRT
<213>智人
<400>374
Leu Glu Pro Pro Val Lys Leu Lys Glu Leu
1               5                   10
 
<210>375
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>375
Ala Leu Lys Glu Gly Val Leu Glu Lys Arg Ser Asp Gly Leu Leu Gln
1               5                   10                  15
Leu Trp Lys Lys
            20
 
<210>376
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>376
Leu Lys Glu Gly Val Leu Glu Lys Arg Ser Asp Gly Leu Leu Gln Leu
1               5                   10                  15
Trp Lys Lys Lys
            20
 
<210>377
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>377
Lys Glu Gly Val Leu Glu Lys Arg Ser Asp Gly Leu Leu Gln Leu Trp
1               5                   10                  15
Lys Lys Lys Cys
            20
 
<210>378
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>378
Glu Gly Val Leu Glu Lys Arg Ser Asp Gly Leu Leu Gln Leu Trp Lys
1               5                   10                  15
Lys Lys Cys Cys
            20
 
<210>379
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>379
Gly Val Leu Glu Lys Arg Ser Asp Gly Leu Leu Gln Leu Trp Lys Lys
1               5                   10                  15
Lys Cys Cys Ile
            20
 
<210>380
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>380
Val Leu Glu Lys Arg Ser Asp Gly Leu Leu Gln Leu Trp Lys Lys Lys
1               5                   10                  15
Cys Cys Ile Leu
            20
 
<210>381
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>381
Leu Glu Lys Arg Ser Asp Gly Leu Leu Gln Leu Trp Lys Lys Lys Cys
1               5                   10                  15
Cys Ile Leu Thr
            20
 
<210>382
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>382
Glu Lys Arg Ser Asp Gly Leu Leu Gln Leu Trp Lys Lys Lys Cys Cys
1               5                   10                  15
Ile Leu Thr Glu
            20
 
<210>383
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>383
Lys Arg Ser Asp Gly Leu Leu Gln Leu Trp Lys Lys Lys Cys Cys Ile
1               5                   10                  15
Leu Thr Glu Glu
            20
 
<210>384
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>384
Arg Ser Asp Gly Leu Leu Gln Leu Trp Lys Lys Lys Cys Cys Ile Leu
1               5                   10                  15
Thr Glu Glu Gly
            20
 
<210>385
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>385
Ser Asp Gly Leu Leu Gln Leu Trp Lys Lys Lys Cys Cys Ile Leu Thr
1               5                   10                  15
Glu Glu Gly Leu
            20
 
<210>386
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>386
Asp Gly Leu Leu Gln Leu Trp Lys Lys Lys Cys Cys Ile Leu Thr Glu
1               5                   10                  15
Glu Gly Leu Leu
            20
 
<210>387
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>387
Gly Leu Leu Gln Leu Trp Lys Lys Lys Cys Cys Ile Leu Thr Glu Glu
1               5                   10                  15
Gly Leu Leu Leu
            20
 
<210>388
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>388
Leu Leu Gln Leu Trp Lys Lys Lys Cys Cys Ile Leu Thr Glu Glu Gly
1               5                   10                  15
Leu Leu Leu Ile
            20
 
<210>389
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>389
Leu Gln Leu Trp Lys Lys Lys Cys Cys Ile Leu Thr Glu Glu Gly Leu
1               5                   10                  15
Leu Leu Ile Pro
            20
<210>390
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>390
Gln Leu Trp Lys Lys Lys Cys Cys Ile Leu Thr Glu Glu Gly Leu Leu
1               5                   10                  15
Leu Ile Pro Pro
            20
 
<210>391
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>391
Leu Trp Lys Lys Lys Cys Cys Ile Leu Thr Glu Glu Gly Leu Leu Leu
1               5                   10                  15
Ile Pro Pro Lys
            20
 
<210>392
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>392
Trp Lys Lys Lys Cys Cys Ile Leu Thr Glu Glu Gly Leu Leu Leu Ile
1               5                   10                  15
Pro Pro Lys Gln
            20
 
<210>393
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>393
Lys Lys Lys Cys Cys Ile Leu Thr Glu Glu Gly Leu Leu Leu Ile Pro
1               5                   10                  15
Pro Lys Gln Leu
            20
 
<210>394
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>394
Lys Lys Cys Cys Ile Leu Thr Glu Glu Gly Leu Leu Leu Ile Pro Pro
1               5                   10                  15
Lys Gln Leu Gln
            20
 
<210>395
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>395
Lys Cys Cys Ile Leu Thr Glu Glu Gly Leu Leu Leu Ile Pro Pro Lys
1               5                   10                  15
Gln Leu Gln His
            20
 
<210>396
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>396
Cys Cys Ile Leu Thr Glu Glu Gly Leu Leu Leu Ile Pro Pro Lys Gln
1               5                   10                  15
Leu Gln His Gln
            20
 
<210>397
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>397
Cys Ile Leu Thr Glu Glu Gly Leu Leu Leu Ile Pro Pro Lys Gln Leu
1               5                   10                  15
Gln His Gln Gln
            20
 
<210>398
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>398
Ile Leu Thr Glu Glu Gly Leu Leu Leu Ile Pro Pro Lys Gln Leu Gln
1               5                   10                  15
His Gln Gln Gln
            20
 
<210>399
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>399
Leu Thr Glu Glu Gly Leu Leu Leu Ile Pro Pro Lys Gln Leu Gln His
1               5                   10                  15
Gln Gln Gln Gln
            20
 
<210>400
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>400
Thr Glu Glu Gly Leu Leu Leu Ile Pro Pro Lys Gln Leu Gln His Gln
1               5                   10                  15
Gln Gln Gln Gln
            20
 
<210>401
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>401
Glu Glu Gly Leu Leu Leu Ile Pro Pro Lys Gln Leu Gln His Gln Gln
1               5                   10                  15
Gln Gln Gln Gln
            20
 
<210>402
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>402
Glu Gly Leu Leu Leu Ile Pro Pro Lys Gln Leu Gln His Gln Gln Gln
1               5                   10                  15
Gln Gln Gln Gln
            20
 
<210>403
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>403
Gly Leu Leu Leu Ile Pro Pro Lys Gln Leu Gln His Gln Gln Gln Gln
1               5                   10                  15
Gln Gln Gln Gln
            20
 
<210>404
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>404
Leu Leu Leu Ile Pro Pro Lys Gln Leu Gln His Gln Gln Gln Gln Gln
1               5                   10                  15
Gln Gln Gln Gln
            20
 
<210>405
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>405
Leu Leu Ile Pro Pro Lys Gln Leu Gln His Gln Gln Gln Gln Gln Gln
1               5                   10                  15
Gln Gln Gln Gln
            20
 
<210>406
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>406
Leu Ile Pro Pro Lys Gln Leu Gln His Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln
1               5                   10                  15
Gln Gln Gln Gln
            20
 
<210>407
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>407
Ile Pro Pro Lys Gln Leu Gln His Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln
1               5                   10                  15
Gln Gln Gln Gln
            20
 
<210>408
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>408
Pro Pro Lys Gln Leu Gln His Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln
1               5                   10                  15
Gln Gln Gln Gln
            20
 
<210>409
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>409
Pro Lys Gln Leu Gln His Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln
1               5                   10                  15
Gln Gln Gln Gln
            20
 
<210>410
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>410
Lys Gln Leu Gln His Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln
1               5                   10                  15
Gln Gln Gln Pro
            20
 
<210>411
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>411
Gln Leu Gln His Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln
1               5                   10                  15
Gln Gln Pro Gly
            20
 
<210>412
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>412
Leu Gln His Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln
1               5                   10                  15
Gln Pro Gly Gln
            20
 
<210>413
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>413
Gln His Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln
1               5                   10                  15
Pro Gly Gln Gly
            20
 
<210>414
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>414
His Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln Pro
1               5                   10                  15
Gly Gln Gly Pro
            20
 
<210>415
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>415
Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln Pro Gly
1               5                   10                  15
Gln Gly Pro Ala
            20
 
<210>416
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>416
Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln Pro Gly Gln
1               5                   10                  15
Gly Pro Ala Glu
            20
 
<210>417
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>417
Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln Pro Gly Gln Gly
1               5                   10                  15
Pro Ala Glu Pro
            20
 
<210>418
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>418
Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln Pro Gly Gln Gly Pro
1               5                   10                  15
Ala Glu Pro Ser
            20
 
<210>419
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>419
Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln Pro Gly Gln Gly Pro Ala
1               5                   10                  15
Glu Pro Ser Gln
            20
 
<210>420
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>420
Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln Pro Gly Gln Gly Pro Ala Glu
1               5                   10                  15
Pro Ser Gln Pro
            20
<210>421
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>421
Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln Pro Gly Gln Gly Pro Ala Glu Pro
1               5                   10                  15
Ser Gln Pro Ser
            20
 
<210>422
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>422
Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln Pro Gly Gln Gly Pro Ala Glu Pro Ser
1               5                   10                  15
Gln Pro Ser Gly
            20
 
<210>423
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>423
Gln Gln Gln Gln Gln Gln Pro Gly Gln Gly Pro Ala Glu Pro Ser Gln
1               5                   10                  15
Pro Ser Gly Pro
            20
 
<210>424
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>424
Gln Gln Gln Gln Gln Pro Gly Gln Gly Pro Ala Glu Pro Ser Gln Pro
1               5                   10                  15
Ser Gly Pro Ala
            20
 
<210>425
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>425
Gln Gln Gln Gln Pro Gly Gln Gly Pro Ala Glu Pro Ser Gln Pro Ser
1               5                   10                  15
Gly Pro Ala Val
            20
 
<210>426
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>426
Gln Gln Gln Pro Gly Gln Gly Pro Ala Glu Pro Ser Gln Pro Ser Gly
1               5                   10                  15
Pro Ala Val Ala
            20
 
<210>427
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>427
Gln Gln Pro Gly Gln Gly Pro Ala Glu Pro Ser Gln Pro Ser Gly Pro
1               5                   10                  15
Ala Val Ala Ser
            20
 
<210>428
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>428
Gln Pro Gly Gln Gly Pro Ala Glu Pro Ser Gln Pro Ser Gly Pro Ala
1               5                   10                  15
Val Ala Ser Leu
            20
 
<210>429
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>429
Pro Gly Gln Gly Pro Ala Glu Pro Ser Gln Pro Ser Gly Pro Ala Val
1               5                   10                  15
Ala Ser Leu Glu
            20
 
<210>430
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>430
Gly Gln Gly Pro Ala Glu Pro Ser Gln Pro Ser Gly Pro Ala Val Ala
1               5                   10                  15
Ser Leu Glu Pro
            20
 
<210>431
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>431
Gln Gly Pro Ala Glu Pro Ser Gln Pro Ser Gly Pro Ala Val Ala Ser
1               5                   10                  15
Leu Glu Pro Pro
            20
 
<210>432
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>432
Gly Pro Ala Glu Pro Ser Gln Pro Ser Gly Pro Ala Val Ala Ser Leu
1               5                   10                  15
Glu Pro Pro Val
            20
 
<210>433
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>433
Pro Ala Glu Pro Ser Gln Pro Ser Gly Pro Ala Val Ala Ser Leu Glu
1               5                   10                  15
Pro Pro Val Lys
            20
 
<210>434
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>434
Ala Glu Pro Ser Gln Pro Ser Gly Pro Ala Val Ala Ser Leu Glu Pro
1               5                   10                  15
Pro Val Lys Leu
            20
 
<210>435
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>435
Glu Pro Ser Gln Pro Ser Gly Pro Ala Val Ala Ser Leu Glu Pro Pro
1               5                   10                  15
Val Lys Leu Lys
            20
 
<210>436
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>436
Pro Ser Gln Pro Ser Gly Pro Ala Val Ala Ser Leu Glu Pro Pro Val
1               5                   10                  15
Lys Leu Lys Glu
            20
 
<210>437
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>437
Ser Gln Pro Ser Gly Pro Ala Val Ala Ser Leu Glu Pro Pro Val  Lys
1               5                   10                  15
Leu Lys Glu Leu
            20
 
<210>438
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>438
Gln Pro Ser Gly Pro Ala Val Ala Ser Leu Glu Pro Pro Val  Lys  Leu
1               5                   10                  15
Lys Glu Leu His
            20
 
<210>439
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>439
Pro Ser Gly Pro Ala Val Ala Ser Leu Glu Pro Pro Val Lys Leu Lys
1               5                   10                  15
Glu Leu His Phe
            20
 
<210>440
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>440
Ser Gly Pro Ala Val Ala Ser Leu Glu Pro Pro Val Lys Leu Lys Glu
1               5                   10                  15
Leu His Phe Ser
            20
 
<210>441
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>441
Gly Pro Ala Val Ala Ser Leu Glu Pro Pro Val Lys Leu Lys Glu Leu
1               5                   10                  15
His Phe Ser Asn
            20
 
<210>442
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>442
Pro Ala Val Ala Ser Leu Glu Pro Pro Val Lys Leu Lys Glu Leu His
1               5                   10                  15
Phe Ser Asn Met
            20
 
<210>443
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>443
Ala Val Ala Ser Leu Glu Pro Pro Val Lys Leu Lys Glu Leu His Phe
1               5                   10                  15
Ser Asn Met Lys
            20
 
<210>444
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>444
Val Ala Ser Leu Glu Pro Pro Val Lys Leu Lys Glu Leu His Phe Ser
1               5                   10                  15
Asn Met Lys Thr
            20
 
<210>445
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>445
Ala Ser Leu Glu Pro Pro Val Lys Leu Lys Glu Leu His Phe Ser Asn
1               5                   10                  15
Met Lys Thr Val
            20
 
<210>446
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>446
Ser Leu Glu Pro Pro Val Lys Leu Lys Glu Leu His Phe Ser Asn Met
1               5                   10                  15
Lys Thr Val Asp
            20
 
<210>447
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>447
Leu Glu Pro Pro Val Lys Leu Lys Glu Leu His Phe Ser Asn Met Lys
1               5                   10                  15
Thr Val Asp Cys
            20
 
<210>448
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>448
Glu Pro Pro Val Lys Leu Lys Glu Leu His Phe Ser Asn Met Lys Thr
1               5                   10                  15
Val Asp Cys Val
            20
 
<210>449
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>449
Pro Pro Val Lys Leu Lys Glu Leu His Phe Ser Asn Met Lys Thr Val
1               5                   10                  15
Asp Cys Val Glu
            20
 
<210>450
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>450
Pro Val Lys Leu Lys Glu Leu His Phe Ser Asn Met Lys Thr Val Asp
1               5                   10                  15
Cys Val Glu Arg
            20
 
<210>451
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>451
Val Lys Leu Lys Glu Leu His Phe Ser Asn Met Lys Thr Val Asp Cys
1               5                   10                  15
Val Glu Arg Lys
            20
<210>452
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>452
Lys Leu Lys Glu Leu His Phe Ser Asn Met Lys Thr Val Asp Cys Val
1               5                   10                  15
Glu Arg Lys Gly
            20
 
<210>453
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>453
Leu Lys Glu Leu His Phe Ser Asn Met Lys Thr Val Asp Cys Val Glu
1               5                   10                  15
Arg Lys Gly Lys
            20
 
<210>454
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>454
Lys Glu Leu His Phe Ser Asn Met Lys Thr Val Asp Cys Val Glu Arg
1               5                   10                  15
Lys Gly Lys Tyr
            20
 
<210>455
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>455
Glu Leu His Phe Ser Asn Met Lys Thr Val Asp Cys Val Glu Arg Lys
1               5                   10                  15
Gly Lys Tyr Met
            20
 
<210>456
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>456
Leu His Phe Ser Asn Met Lys Thr Val Asp Cys Val Glu Arg Lys Gly
1               5                   10                  15
Lys Tyr Met Tyr
            20
 
<210>457
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>457
His Phe Ser Asn Met Lys Thr Val Asp Cys Val Glu Arg Lys Gly Lys
1               5                   10                  15
Tyr Met Tyr Phe
            20
 
<210>458
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>458
Phe Ser Asn Met Lys Thr Val Asp Cys Val Glu Arg Lys Gly Lys Tyr
1               5                   10                  15
MetTyr Phe Thr
           20
 
<210>459
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>459
Ser Asn Met Lys Thr Val Asp Cys Val Glu Arg Lys Gly Lys Tyr Met
1               5                   10                  15
Tyr Phe Thr Val
            20
 
<210>460
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>460
Asn Met Lys Thr Val Asp Cys Val Glu Arg Lys Gly Lys Tyr Met Tyr
1               5                   10                  15
Phe Thr Val Val
            20
 
<210>461
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>461
Met Lys Thr Val Asp Cys Val Glu Arg Lys Gly Lys Tyr Met Tyr Phe
1               5                   10                  15
Thr Val Val Met
            20
 
<210>462
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>462
Lys Thr Val Asp Cys Val Glu Arg Lys Gly Lys Tyr Met Tyr Phe Thr
1               5                   10                  15
Val Val Met Ala
            20
 
<210>463
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>463
Thr Val Asp Cys Val Glu Arg Lys Gly Lys Tyr Met Tyr Phe Thr Val
1               5                   10                  15
Val Met Ala Glu
            20
 
<210>464
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>464
Val Asp Cys Val Glu Arg Lys Gly Lys Tyr Met Tyr Phe Thr Val Val
1               5                   10                  15
Met Ala Glu Gly
            20
 
<210>465
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>465
Asp Cys Val Glu Arg Lys Gly Lys Tyr Met Tyr Phe Thr Val Val Met
1               5                   10                  15
Ala Glu Gly Lys
            20
 
<210>466
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>466
Cys Val Glu Arg Lys Gly Lys Tyr Met Tyr Phe Thr Val Val Met Ala
1               5                   10                  15
Glu Gly Lys Glu
            20
 
<210>467
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>467
Val Glu Arg Lys Gly Lys Tyr Met Tyr Phe Thr Val Val Met Ala Glu
1               5                   10                  15
Gly Lys Glu Ile
            20
 
<210>468
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>468
Glu Arg Lys Gly Lys Tyr Met Tyr Phe Thr Val Val Met Ala Glu Gly
1               5                   10                  15
Lys Glu Ile Asp
            20
 
<210>469
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>469
Arg Lys Gly Lys Tyr Met Tyr Phe Thr Val Val Met Ala Glu Gly Lys
1               5                   10                  15
Glu Ile Asp Phe
            20
 
<210>470
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>470
Lys Gly Lys Tyr Met Tyr Phe Thr Val Val Met Ala Glu Gly Lys Glu
1               5                   10                  15
Ile Asp Phe Arg
            20
 
<210>471
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>471
Gly Lys Tyr Met Tyr Phe Thr Val Val Met Ala Glu Gly Lys Glu Ile
1               5                   10                  15
Asp Phe Arg Cys
            20
 
<210>472
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>472
Lys Tyr Met Tyr Phe Thr Val Val Met Ala Glu Gly Lys Glu Ile Asp
1               5                   10                  15
Phe Arg Cys Pro
            20
 
<210>473
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>473
Tyr Met Tyr Phe Thr Val Val Met Ala Glu Gly Lys Glu Ile Asp Phe
1               5                   10                  15
Arg Cys Pro Gln
            20
 
<210>474
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>474
Met Tyr Phe Thr Val Val Met Ala Glu Gly Lys Glu Ile Asp Phe Arg
1               5                   10                  15
Cys Pro Gln Asp
            20
 
<210>475
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>475
Tyr Phe Thr Val Val Met Ala Glu Gly Lys Glu Ile Asp Phe Arg Cys
1               5                   10                  15
Pro Gln Asp Gln
            20
 
<210>476
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>476
Phe Thr Val Val Met Ala Glu Gly Lys Glu Ile Asp Phe Arg Cys Pro
1               5                   10                  15
Gln Asp Gln Gly
            20
 
<210>477
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>477
Thr Val Val Met Ala Glu Gly Lys Glu Ile Asp Phe Arg Cys Pro Gln
1               5                   10                  15
Asp Gln Gly Trp
            20
 
<210>478
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>478
Val Val Met Ala Glu Gly Lys Glu Ile Asp Phe Arg Cys Pro Gln Asp
1               5                   10                  15
Gln Gly Trp Asn
            20
 
<210>479
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>479
Val Met Ala Glu Gly Lys Glu Ile Asp Phe Arg Cys Pro Gln Asp Gln
1               5                   10                  15
Gly Trp Asn Ala
            20
 
<210>480
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>480
Met Ala Glu Gly Lys Glu Ile Asp Phe Arg Cys Pro Gln Asp Gln Gly
1               5                   10                  15
Trp Asn Ala Glu
            20
 
<210>481
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>481
Ala Glu Gly Lys Glu Ile Asp Phe Arg Cys Pro Gln Asp Gln Gly Trp
1               5                   10                  15
Asn Ala Glu Ile
            20
 
<210>482
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>482
Glu Gly Lys Glu Ile Asp Phe Arg Cys Pro Gln Asp Gln Gly Trp Asn
1               5                   10                  15
Ala Glu Ile Thr
            20
<210>483
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>483
Gly Lys Glu Ile Asp Phe Arg Cys Pro Gln Asp Gln Gly Trp Asn Ala
1               5                   10                  15
Glu Ile Thr Leu
            20
 
<210>484
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>484
Lys Glu Ile Asp Phe Arg Cys Pro Gln Asp Gln Gly Trp Asn Ala Glu
1               5                   10                  15
Ile Thr Leu Gln
            20
 
<210>485
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>485
Glu Ile Asp Phe Arg Cys Pro Gln Asp Gln Gly Trp Asn Ala Glu Ile
1               5                   10                  15
Thr Leu Gln Met
            20
 
<210>486
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>486
Ile Asp Phe Arg Cys Pro Gln Asp Gln Gly Trp Asn Ala Glu Ile Thr
1               5                   10                  15
Leu Gln Met Val
            20
 
<210>487
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>487
Asp Phe Arg Cys Pro Gln Asp Gln Gly Trp Asn Ala Glu Ile Thr Leu
1               5                   10                  15
Gln Met Val Gln
            20
 
<210>488
<211>20
<212>PRT
<213>智人
<400>488
Phe Arg Cys Pro Gln Asp Gln Gly Trp Asn Ala Glu Ile Thr Leu Gln
1               5                   10                  15
Met Val Gln Tyr
            20

Claims (45)

1.调节肥大细胞活化的肽，所述肽包含对应以下结构域的至少一部分的氨基酸序列：
(i)Src同源3(SH3)结构域，或
(ii)pleckstrin同源(PH)结构域。
2.如权利要求1所述的肽，所述肽包含SEQ ID NO：7所示的氨基酸。
3.如权利要求1所述的肽，所述肽包含SEQ ID NO：8或SEQ ID NOs：14-273中任一所示的氨基酸。
4.如权利要求1所述的肽，所述肽包含SEQ ID NO：11或SEQ ID NO：12所示的氨基酸。
5.如权利要求1所述的肽，所述肽包含SEQ ID NO：10或SEQ IDNOs：274-488中任一所示的氨基酸。
6.抑制或预防个体中肥大细胞活化的方法，所述方法包括给予所述个体治疗有效量的蛋白，所述蛋白包含以下中的至少一种：
(i)Src同源2(SH2)结构域，
(ii)Src同源3(SH3)结构域，
(iii)pleckstrin同源(PH)结构域，
(iv)权利要求1-5中任一项所述的肽。
7.如权利要求6所述的方法，其中所述肥大细胞活化为IgE介导的。
8.如权利要求6所述的方法，其中所述肥大细胞活化为非IgE介导的。
9.治疗或预防个体中超敏疾病或病症的方法，所述方法包括向所述个体给予治疗有效量的蛋白，所述蛋白包含以下中的至少一种：
(i)Src同源2(SH2)结构域，
(ii)Src同源3(SH3)结构域，
(iii)pleckstrin同源(PH)结构域，
(iv)权利要求1-5中任一项所述的肽。
10.如权利要求9所述的方法，其中所述超敏疾病或病症包括肥大细胞活化。
11.如权利要求9或10所述的方法，其中所述超敏疾病或病症包括炎性反应。
12.如权利要求9至11中任一项所述的方法，其中所述超敏疾病或病症选自过敏反应、药物反应、皮肤变应性、湿疹、变应性鼻炎、荨麻疹、特应性皮炎、变应性接触过敏、食物变应性、变应性结膜炎、昆虫毒液变应性以及呼吸疾病和病症。
13.如权利要求12所述的方法，其中所述呼吸疾病或病症选自哮喘、变应性哮喘、内源性哮喘、职业性哮喘、急性呼吸窘迫综合征(ARDS)以及慢性阻塞性肺病(COPD)。
14.调节个体中免疫反应的方法，所述方法包括向所述个体给予治疗有效量的蛋白，所述蛋白包含以下中的至少一种：
(i)Src同源2(SH2)结构域，
(ii)Src同源3(SH3)结构域，
(iii)pleckstrin同源(PH)结构域，
(iv)权利要求1-5中任一项所述的肽。
15.如权利要求6至14中任一项所述的方法，其中所述蛋白为NEDD9。
16.如权利要求6至14中任一项所述的方法，其中所述蛋白为PHLDA1。
17.抑制或预防个体中肥大细胞活化的方法，所述方法包括给予所述个体治疗有效量的肽，所述肽包含对应以下结构域的至少一部分的氨基酸序列：
(i)Src同源3(SH3)结构域，或
(ii)pleckstrin同源(PH)结构域。
18.治疗或预防个体中超敏疾病或病症的方法，所述方法包括给予所述个体治疗有效量的肽，所述肽包含对应以下结构域的至少一部分的氨基酸序列：
(i)Src同源3(SH3)结构域，或
(ii)pleckstrin同源(PH)结构域。
19.如权利要求18所述的方法，其中所述超敏疾病或病症包括肥大细胞活化。
20.如权利要求18或19所述的方法，其中所述超敏疾病或病症包括炎性反应。
21.如权利要求18至20中任一项所述的方法，其中所述超敏疾病或病症选自过敏反应、药物反应、皮肤变应性、湿疹、变应性鼻炎、荨麻疹、特应性皮炎、变应性接触过敏、食物变应性、变应性结膜炎、昆虫毒液变应性以及呼吸疾病和病症。
22.如权利要求21所述的方法，其中所述呼吸疾病或病症选自哮喘、变应性哮喘、内源性哮喘、职业性哮喘、急性呼吸窘迫综合征(ARDS)以及慢性阻塞性肺病(COPD)。
23.调节个体中免疫反应的方法，所述方法包括向所述个体给予治疗有效量的肽，所述肽包含对应以下结构域的至少一部分的氨基酸序列：
(i)Src同源3(SH3)结构域，或
(ii)pleckstrin同源(PH)结构域。
24.如权利要求17至23中任一项所述的方法，其中所述肽包含SEQID NO：7所示的氨基酸序列。
25.如权利要求17至23中任一项所述的方法，其中所述肽包含SEQID NO：8所示的氨基酸序列。
26.如权利要求17至23中任一项所述的方法，其中所述肽包含SEQID NO：11所示的氨基酸序列。
27.如权利要求17至23中任一项所述的方法，其中所述肽包含SEQID NO：12所示的氨基酸序列。
28.抑制肥大细胞活化的方法，所述方法包括抑制
(i)NEDD9蛋白Src同源3(SH3)结构域
(ii)PHLDA1蛋白pleckstrin同源(PH)结构域
之一或二者与肥大细胞受体的结合。
29.治疗或预防个体中超敏疾病或病症的方法，所述方法包括抑制
(i)NEDD9蛋白Src同源3(SH3)结构域
(ii)PHLDA1蛋白pleckstrin同源(PH)结构域
之一或二者与肥大细胞受体的结合。
30.如权利要求28或29所述的方法，其中所述抑制包括给予包含对应NEDD9蛋白Src同源3(SH3)结构域或PHLDA1蛋白pleckstrin同源(PH)结构域的至少一部分的氨基酸序列的肽。
31.如权利要求30所述的方法，其中所述对应NEDD9蛋白Src同源3(SH3)结构域的至少一部分的肽包含SEQ ID NO：7或SEQ ID NO：8所示的氨基酸序列。
32.如权利要求30所述的方法，其中所述对应PHLDA1蛋白pleckstrin同源(PH)结构域的至少一部分的肽包含选自SEQ ID NO：10、SEQ ID NO：11和SEQ ID NO：12的氨基酸序列。
33.包含
(i)Src同源2(SH2)结构域，
(ii)Src同源3(SH3)结构域，
(iii)pleckstrin同源(PH)结构域，
(iv)权利要求1-5中任一项所述的肽
中的至少一种的蛋白在制备用于治疗超敏疾病或病症的药物中的用途。
34.如权利要求33所述的用途，其中所述蛋白为NEDD9。
35.如权利要求33所述的用途，其中所述蛋白为PHLDA1。
36.包含对应
(i)Src同源3(SH3)结构域，或
(ii)pleckstrin同源(PH)结构域
的至少一部分的氨基酸序列的肽在制备治疗超敏疾病或病症的药物中的用途。
37.如权利要求36所述的用途，其中所述肽包含选自SEQ ID NO：7、SEQ ID NO：8、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：12的氨基酸序列。
38.如权利要求33至37中任一项所述的用途，其中所述超敏疾病或病症选自过敏反应、药物反应、皮肤变应性、湿疹、变应性鼻炎、荨麻疹、特应性皮炎、变应性接触过敏、食物变应性、变应性结膜炎、昆虫毒液变应性以及呼吸疾病和病症。
39.如权利要求38所述的用途，其中所述呼吸疾病或病症选自哮喘、变应性哮喘、内源性哮喘、职业性哮喘、急性呼吸窘迫综合征(ARDS)以及慢性阻塞性肺病(COPD)。
40.鉴定调节包含Src同源2(SH2)结构域、Src同源3(SH3)结构域或pleckstrin同源(PH)结构域中的至少一种的蛋白的活性的试剂的方法，所述方法包括：
(a)使候选试剂与所述蛋白在适合于允许所述候选试剂与所述蛋白相互作用的条件下接触；以及
(b)测定所述蛋白的活性。
41.筛选多种候选试剂以鉴定调节包含Src同源2(SH2)结构域、Src同源3(SH3)结构域或pleckstrin同源(PH)结构域中的至少一种的蛋白的活性的试剂的方法，所述方法包括：
(a)使多种候选试剂与所述蛋白在适合于允许所述候选试剂与所述蛋白相互作用的条件下接触；以及
(b)测定所述蛋白的活性。
42.如权利要求40或41所述的方法，其中所述蛋白为NEDD9或PHLDA1。
43.如权利要求40至42中任一项所述的方法，其中测定所述蛋白的活性包括测量肥大细胞活化的水平。
44.如权利要求40至43中任一项所述的方法，其中所述候选试剂为所述蛋白的激动剂。
45.如权利要求40至43中任一项所述的方法，其中所述候选试剂为所述蛋白的激动剂。
CN200880113181A 2007-08-24 2008-08-25 超敏反应调节剂 Pending CN101835799A (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
AU2007904591 2007-08-24
AU2007904591A AU2007904591A0 (en) 2007-08-24 Treatment and prevention of hypersensitivity reactions
PCT/AU2008/001250 WO2009026622A1 (en) 2007-08-24 2008-08-25 Modulators of hypersensitivity reactions

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN101835799A true CN101835799A (zh) 2010-09-15

Family

ID=40386555

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN200880113181A Pending CN101835799A (zh) 2007-08-24 2008-08-25 超敏反应调节剂

Country Status (9)

Country Link
US (1) US20100233199A1 (zh)
EP (1) EP2195332A4 (zh)
JP (1) JP2010537952A (zh)
KR (1) KR20100080769A (zh)
CN (1) CN101835799A (zh)
AU (1) AU2008291682B2 (zh)
CA (1) CA2697413A1 (zh)
NZ (1) NZ583429A (zh)
WO (1) WO2009026622A1 (zh)

Families Citing this family (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US9353165B2 (en) * 2012-07-25 2016-05-31 Grifols, S.A. Purification of cell culture derived alpha1 protease inhibitor
EP3747425A1 (en) * 2015-07-16 2020-12-09 Nuritas Limited Anti-inflammatory peptides, and uses thereof
EP3118216A1 (en) 2015-07-16 2017-01-18 Nuritas Limited Cellular growth and proliferation promoting peptides, and uses thereof
CN105907760A (zh) * 2016-05-31 2016-08-31 东北师范大学 靶向沉默TKS4的shRNA

Family Cites Families (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4946773A (en) * 1985-12-23 1990-08-07 President And Fellows Of Harvard College Detection of base pair mismatches using RNAase A
EP0750630A4 (en) * 1994-03-11 1998-01-07 Ariad Pharma Inc METHOD AND MATERIALS FOR IDENTIFYING INHIBITORS OF MOLECULAR INTERACTIONS, WHICH ARE BROUGHT BY THE SH3 DOMAINS
WO2003068808A1 (en) * 2002-02-13 2003-08-21 Garvan Institute Of Medical Research Novel protein complexes and uses therefor
US20070248588A1 (en) * 2002-09-11 2007-10-25 Genetech, Inc. Novel Compositions and Methods for the Treatment of Immune-Related Diseases
US20070010434A1 (en) * 2002-09-16 2007-01-11 Genetech, Inc. Novel compositions and methods for the treatment of immune related diseases
US20060263774A1 (en) * 2002-11-01 2006-11-23 Genentech, Inc. Compositions and methods for the treatment of immune related diseases
JP2005139164A (ja) * 2003-11-10 2005-06-02 Toudai Tlo Ltd 神経障害及び神経変性疾患を治療するための薬学的組成物
US20070110760A1 (en) * 2005-01-14 2007-05-17 Monroe John G Methods and compositions targeting viral and cellular ITAM motifs, and use of same in identifying compounds with therapeutic activity
WO2007030594A2 (en) * 2005-09-07 2007-03-15 Board Of Regents, The University Of Texas System Methods of using and analyzing biological sequence data

Also Published As

Publication number Publication date
AU2008291682A1 (en) 2009-03-05
EP2195332A1 (en) 2010-06-16
JP2010537952A (ja) 2010-12-09
AU2008291682B2 (en) 2012-09-13
EP2195332A4 (en) 2013-03-06
CA2697413A1 (en) 2009-03-05
KR20100080769A (ko) 2010-07-12
US20100233199A1 (en) 2010-09-16
NZ583429A (en) 2012-08-31
WO2009026622A1 (en) 2009-03-05

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US8871205B2 (en) Methods and compositions for the treatment of immune disorders
CN101218254A (zh) 白介素-17f抗体及其它il-17f信号传递拮抗剂和它们的用途
AU2014296288A1 (en) Compositions and methods for modulating thermogenesis using PTH-related and EGF-related molecules
US20100266579A1 (en) Treatment of inflammatory diseases
WO2007004692A1 (ja) 非小細胞肺がんの予防・治療剤および診断薬
CN101835799A (zh) 超敏反应调节剂
JP2017505763A (ja) 生物学的材料およびその治療用途
US20070117138A1 (en) Splice variant cannabinoid receptor (cb1b)
CN103382220A (zh) 具有抗感染、抗肿瘤活性的细胞因子fam19a4及其应用
US10925933B2 (en) Method of preventing rheumatoid arthritis comprising administering polynucleotide encoding SSU72
WO2006118328A1 (ja) 脱顆粒抑制剤
US7390625B2 (en) Apoptosis-associated protein and use thereof
US7626007B2 (en) Transcription factor regulating TNF-α
EP1357129A2 (en) Novel physiologically active peptide and use thereof
WO2001046415A1 (fr) Polypeptides de type tachykinine et utilisation associee
US20070065819A1 (en) Novel fprl1 ligands and use thereof
JP4530631B2 (ja) 新規タンパク質および癌の予防・治療剤
JP2006320201A (ja) 気分障害又は関連障害による疾患症状を改善させる方法
JP2006288387A (ja) 気分障害又は関連障害による疾患症状を改善させる方法
US20030119024A1 (en) Genes and proteins associated with T cell activation
JP2003292455A (ja) 血管新生阻害剤
EP3321280A1 (en) Immune modulators for reducing immune-resistance in melanoma and other proliferative diseases
JP2010208980A (ja) Ｉｄ２及び／又はＩｄ３の発現を抑制するための発現抑制剤、及びその利用
WO2003018776A9 (en) IDENTIFICATION OF THE IκBNS PROTEIN AND ITS PRODUCTS
JP2006166703A (ja) 軟骨分化制御遺伝子

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C02 Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001)
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication

Application publication date: 20100915