CN101829290A - 一种治疗糖尿病周围神经病变的药物及其制备方法 - Google Patents
一种治疗糖尿病周围神经病变的药物及其制备方法 Download PDFInfo
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Abstract
一种治疗糖尿病周围神经病变的药物及其制备方法,属于中药技术领域。其主要是由苍术、薏苡仁、山药、葛根、红景天、昆布和桔梗按一定重量配比制备而成。本发明中药组合物具有益气运脾,祛痰化瘀和络的功效,对防治糖尿病周围神经病变有良好的效果,可明显减轻糖尿病周围神经病变的程度,具有改善微循环和血流变,缓解疼痛麻木等症状,调节机体免疫等功能,且安全未见毒副作用;本发明的制备方法工艺简单,易于工业化推广;通过本发明制得的颗粒剂、片剂或胶囊剂既保持了汤剂的一些特色,又具有携带、服用方便,性质稳定,不易变质等优点。
Description
技术领域
本发明属于中药技术领域,具体涉及一种治疗糖尿病周围神经病变的药物及其制备方法。
背景技术
糖尿病是一种常见的内分泌代谢疾病,随着社会经济的发展,人们生活方式的改变及人口老龄化,糖尿病的发病率在全球范围内呈逐年升高的趋势,已成为继心血管和肿瘤之后,第三位威胁人们健康和生命的疾病。糖尿病周围神经病变(Diabetic Peripheral Neuropathy,DPN)是糖尿病最严重和常见的慢性并发症和致残的主要原因之一。据统计糖尿病周围神经病变在糖尿病患者中的发病率为60%~90%。在所有非外伤性低位截肢手术中糖尿病患者占40%~60%,且病情迁延难愈,致残率和病死率高,治疗困难。如何利用中医药的优势干预糖尿病的进程、延缓并及时治疗糖尿病周围神经病变及其他并发症的出现,是迫切需要解决的一个科技问题。
由于糖尿病周围神经病变发病原因和病理机制尚未完全阐明,所以目前国内外尚无特效的治疗方法,西医对糖尿病周围神经病变的治疗除控制血糖外,多采用B族维生素、血管扩张剂、镇痛药及抗氧化、补充神经营养因子等对症治疗,但效果多不甚理想。因此不断努力地探索糖尿病周围神经病变治疗的新方法、新药物,是社会的迫切需要,具有显著的现实意义。
发明内容
针对现有技术存在的问题,本发明的目的在于设计提供一种更为有效治疗治疗糖尿病周围神经病变的中药组合物,并提供了该中药组合物的制备方法。
所述的一种治疗糖尿病周围神经病变的药物,其特征在于包括下述重量份的原料药制成:苍术15~21份、薏苡仁12~18份、山药12~18份、葛根12~18份、红景天9~15份、昆布6~12份和桔梗3~9份。
所述的一种治疗糖尿病周围神经病变的药物,其特征在于包括下述重量份的原料药制成:苍术16~20份、薏苡仁13~17份、山药13~17份、葛根13~17份、红景天10~14份、昆布7~11份和桔梗4~8份。
所述的一种治疗糖尿病周围神经病变的药物,其特征在于包括下述重量份的原料药制成:苍术17~19份、薏苡仁14~16份、山药14~16份、葛根14~16份、红景天11~13份、昆布8~10份和桔梗5~7份。
所述的一种治疗糖尿病周围神经病变的药物的制备方法,其特征在于包括以下工艺步骤:
1)称取各原料药苍术、薏苡仁、山药、葛根、红景天、昆布和桔梗,备用;
2)将所述重量配比的葛根、桔梗和山药加水进行回流提取,加水量为葛根、桔梗和山药三者重量的8~12倍,回流提取2~4次,每次1~2小时,得到的提取液加90~95%乙醇进行醇沉,回收乙醇,得到清膏1;
3)将所述重量配比的苍术、薏苡仁和红景天粉碎,用50~90%乙醇浸泡过夜后,加6~10倍上述浸泡液重量的50~90%乙醇进行渗漉提取,收集渗漉液,渗漉液在离心速度4000~6000转/分下进行离心,离心后去下清液,保留上清液,得到清膏2;
4)将所述重量配比的昆布加水进行回流提取,加水量为昆布重量的15~25倍,回流提取2~4次,每次1~2小时,得到的提取液加90~95%乙醇进行醇沉,回收乙醇,在40~50℃下干燥,得到昆布多糖粉末;
5)将上述得到的清膏1、清膏2和昆布多糖粉末混合均匀得到混合药液,然后按混合药液∶糊精∶乳糖三者的重量比1~3∶1∶1加入糊精和乳糖进行混合,混合后进行喷雾干燥,即制备成了本发明药物的活性组分。
所述的一种治疗糖尿病周围神经病变的药物的制备方法,其特征在于所述的步骤2)中加水量为9~11倍,回流提取2~3次,每次1.5~2小时。
所述的一种治疗糖尿病周围神经病变的药物的制备方法,其特征在于所述的步骤3)中用60~70%乙醇浸泡过夜后,加7~9倍重量的60~70%乙醇进行渗漉提取,离心速度4500~5500转/分。
所述的一种治疗糖尿病周围神经病变的药物的制备方法,其特征在于所述的步骤4)中加水量为18~20倍,回流提取3~4次,每次1~1.5小时,在45~50℃下干燥。
所述的一种治疗糖尿病周围神经病变的药物的制备方法,其特征在于所述的步骤5)中混合药液∶糊精∶乳糖三者的重量比为3∶1∶1。
所述的一种治疗糖尿病周围神经病变的药物的制备方法,其特征在于所述的步骤5)得到活性组分按照中药制剂常规加工方法制得颗粒剂、片剂或胶囊剂。
本发明通过中医药治疗糖尿病周围神经病变从整体入手,根据病因病机辨证论治。中药治疗糖尿病周围神经病变是多靶点的且药性温和,毒副作用小,作用时间长,无低血糖危险。还可以明显改善口渴、乏力倦怠、多汗、便秘、手足麻木或疼痛、失眠多梦、五心烦热等症状。糖尿病周围神经病变中医属“消渴”、“痹证”、“血痹”范畴,其基本病机为本虚标实,以脾虚失运为本,瘀血痰浊为标,导致络脉失和。脾虚失其运化,则气血生化乏源且不能通达于全身,使脾胃之阳气不能布散四肢,络脉失养,故使四肢发凉、麻木。脾主肌肉,糖尿病时脾气虚弱,故糖尿病周围神经病变的患者多有肢体麻木、肌肉萎缩、运动障碍等症状。脾虚气血生化乏源,导致气虚不能行血而致血瘀,血瘀又碍气行,进而气滞血瘀,脉络瘀阻,故见肢体刺痛麻木等证。糖尿病周围神经病变久病入络、久痛入络、久瘀入络致络脉失和。针对糖尿病周围神经病变的病机,我们采用运脾和络的方法,所谓运脾并非独立于中医治疗八法之外的一种治法,而是属于汗、和、下、消、吐、清、温、补中的和法,补中寓消,消中有补,补不碍滞,消不伤正者谓之“运”,运者有行、转、旋、动之义,皆动而不息之意,运与化是脾的功能,运者运其精微;化者化其水谷,故欲使脾健,则不在补而贵在运。和络属于八法的范畴,但又不完全等同于温、补、和三法,和络应包括补络、通络、活络以及一切利于络脉通畅的方法。
本发明中药组合物具有益气运脾,祛痰化瘀和络的功效,对防治糖尿病周围神经病变有良好的效果,可明显减轻糖尿病周围神经病变的程度,具有改善微循环和血流变,缓解疼痛麻木等症状,调节机体免疫等功能,且安全未见毒副作用;本发明的制备方法工艺简单,易于工业化推广;通过本发明制得的颗粒剂、片剂或胶囊剂既保持了汤剂的一些特色,又具有携带、服用方便,性质稳定,不易变质等优点,既有造福于广大患者的社会效益,又有市场需求的经济效益,加之已有扎实的临床实验基础,其可行性大,具有较大的研究开发意义。
本发明中涉及的百分比均为重量百分比。
具体实施方式
以下通过试验例来进一步说明本发明。试验例中本发明的药物为运脾和络颗粒。
试验例:本发明药物的药效性试验
本试验例采用高脂高糖饮食(10%蔗糖,10%猪油,5%胆固醇)加小剂量链脲佐菌素(STZ)诱发糖尿病动物模型,具有典型的糖尿病周围神经病变的特点。观察运脾和络颗粒对糖尿病大鼠的糖代谢,脂代谢,血液流变学,坐骨神经传导速度及神经电生理,病理形态学,血浆β内啡肽(β-EP)、及全血5羟色胺(5-HT)、组氨(HA)等致痛因子,多元醇通路代谢,坐骨神经组织中胰岛素生长因子及蛋白非酶糖基化终产物受体表达,离体培养雪旺细胞分泌神经生长因子的影响。
1.造模和分组给药
选SD大鼠100只,雌雄各半,适应性喂养1周,各组造模前均由鼠尾静脉采血测正常空腹血糖值,随机分为模型组(88只)、正常组(12只),均采用常规饲料喂养,造模组大鼠高脂高糖(其中含10%蔗糖,10%猪油,5%胆固醇)喂养4周,诱发出胰岛素抵抗,继单次空腹注射低剂量STZ(以PH4.2的0.1mol/L的枸橼酸钠缓冲液配制成1%浓度)25mg/kg,正常对照组仅注射等量柠檬酸钠缓冲液。注射后4周末测血糖,凡血糖≥16.7mmoL/L被纳入实验,随机分为6组,即模型对照组、运脾和络颗粒高剂量组、运脾和络颗粒中剂量组、运脾和络颗粒低剂量组、消渴丸对照组、甲钴胺对照组。将运脾和络颗粒配成混悬液,每日分别按22.5g/kg、15g/kg、7.5g/kg给予运脾和络颗粒高、中、低剂量组灌胃(分别相当于成人剂量的15、10、5倍),消渴丸对照组2.5g/kg,甲钴胺对照组0.14mg/kg,模型对照组与正常对照组每日给予同体积的生理盐水灌胃,连续灌胃8周。
2.实验观察指标
(1)运脾和络颗粒对糖尿病大鼠糖代谢的影响
采用葡萄糖氧化酶法测定血糖、亲和层析法测定糖化血红蛋白,并作动态分析。用放免法测定血清胰岛素水平。
(2)运脾和络颗粒对糖尿病大鼠脂代谢的影响
采用胆固醇氧化酶法测血清胆固醇含量、磷酸甘油氧化酶法测甘油三酯含量,脂蛋白电泳法测血清高密度脂蛋白胆固醇浓度。
(3)运脾和络颗粒对糖尿病大鼠血液流变学各指标的影响
采用国产NXF-1型锥板式粘度仪测糖尿病大鼠血液流变学各指标。包括全血粘度(Va)和红细胞压积(Ht),血浆粘度(Vp)等。
(4)运脾和络颗粒对糖尿病大鼠神经功能及神经电生理的影响
摇尾试验:于灌胃8周后进行,用改良热痛阈测量法,将大鼠置固定架内露尾,尾尖置恒温水浴箱内入水2cm,初始水温36℃,然后以2℃/min的速度加热,记录鼠尾抬出水面时的温度,即为热痛阈值。
神经电生理:灌胃8周后,4%的戊巴比妥钠按25mg/kg大鼠的剂量腹壁下注射,完全麻醉后,暴露分离左侧坐骨神经,保持肢体温度在37℃左右,采用肌电图机测定感觉传导速度(SCV)及运动传导速度(MNCV)、感觉潜伏期(SL)。
甩尾反射潜伏期(TFL):灌胃8周后测定TFL。以强光聚焦点为热辐射源,大鼠尾部远端1/3处腹侧皮肤为辐射面,辐射面积为4mm×6mm,照射开始时计时,至大鼠甩尾为终点。
(5)运脾和络颗粒对糖尿病大鼠血浆β-EP,及全血5-HT、HA等致痛因子的影响
放免法测定血浆β-EP,采用荧光分光光度法测定大鼠全血5-HT、HA。
(6)运脾和络颗粒对糖尿病大鼠坐骨神经的病理形态学的影响
灌胃8周后处死大鼠,取大鼠的坐骨神经,10%福尔马林溶液固定,蜡块包埋,连续切片,厚度为4μm,HE染色,Luxol固兰,Weil髓鞘染色和Bielschowsky轴突染色做光镜观察。
(7)运脾和络颗粒对治疗糖尿病大鼠周围神经病变作用机制的影响
①多元醇通路的影响
采用荧光法测定红细胞醛糖还原酶活性,采用气相色谱法测红细胞山梨醇含量。参照Sima方法[3]测定坐骨神经Na+-K+-ATP活性。黄嘌呤氧化酶法测定血清超氧化物岐化酶(SOD),化学比色法测定血清丙二醛(MDA)。
②坐骨神经组织中胰岛素生长因子(IGF)及蛋白非酶糖基化终产物受体(RAGE)表达的影响
采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法测定糖尿病大鼠坐骨神经IGF-mRNA及RAGEmRNA表达的变化。
③离体培养坐骨神经雪旺细胞,观察运脾和络颗粒对雪旺细胞分泌神经生长因子的影响
先用75%的酒精消毒大鼠一侧下肢3次,然后切取1cm长一段坐骨神经,放入加10%小牛血清的组织培养液中(DMEM)。在放大16倍手术显微镜下,清除神经外膜及周围神经结缔组织,仔细地将神经分成单束,然后将约12~16个单束,剪成长约0.5mm大小的组织块,放入含有0.25%胰蛋白酶(2ml)和0.03%胶原蛋白酶中消化,消化条件为37℃水浴,时间为80~90分钟。原代雪旺细胞以3.0×105个/孔密度接种于涂有Poly-Lysine的96孔培养板中,每孔100μl。培养48小时后,进行药物干预分组实验,各组分别设8个复孔,空白对照孔加入100μl10%血清DMEM培养液。终止前4h,每孔加入MTT溶液(5mg/ml)15μl,继续培养4h后吸掉上清,用DMSO溶解结晶。然后将培养板放在Multiskan MK3酶标仪上,采用实验波长570nm,参考波长630nm,测定每孔OD值。培养24h、48h、72h后,采用RT-PCR法,半定量分析雪旺细胞神经生长因子(NGF)mRNA含量的变化。
试验结论:将和络颗粒的含药血清按大剂量,中剂量,小剂量分成三组,另取一空白组做比较。结果显示,与空白对照组比较,大、中,小剂量和络颗粒含药血清均可提高雪旺细胞的增殖指数,且以中剂量增长为最快,大剂量可因浓度过高而对细胞有直接毒性作用,致使其增值活性明显低于中,小剂量组。以上研究结果表明,不同剂量浓度的和络颗粒含药血清均可以促进雪旺细胞的迁移和增殖能力,对于周围神经的损伤有一定的再生和修复效果,且小剂量条件下即可发挥作用。
以下通过实施例来进一步说明本发明药物的制备方法。
实施例1
1)称取葛根15g、桔梗6g和山药15g加水进行回流提取,加水量为葛根、桔梗和山药三者重量的8倍,回流提取2次,第一次回流提取2小时,第二次回流提取1.5小时,得到的提取液加90%乙醇进行醇沉,回收乙醇,达到清膏1;
2)称取苍术18g、薏苡仁15g和红景天12g,进行粉碎,过10目筛,用70%乙醇浸泡过夜后,加8倍上述浸泡液重量的70%乙醇进行渗漉提取,收集渗漉液,在5000转/分下高速离心后,得到清膏2;
3)称取昆布9g,加水进行回流提取,加水量为昆布重量的20倍,回流提取2次,每次1小时,得到的提取液加90%乙醇进行醇沉,回收乙醇,40℃下干燥,得到昆布多糖粉末;
4)将上述得到的清膏1、清膏2和昆布多糖粉末混合均匀得到混合药液,然后按混合药液∶糊精∶乳糖三者的重量比3∶1∶1加入糊精和乳糖进行混合,混合后进行喷雾干燥,即制备成了本发明药物的活性组分,在按常规的中药制剂加工方法制的颗粒剂、片剂或胶囊剂等。
实施例2
1)称取葛根12g、桔梗3g和山药12g加水进行回流提取,加水量为葛根、桔梗和山药三者重量的10倍,回流提取3次,每次1.5小时,得到的提取液加95%乙醇进行醇沉,回收乙醇,达到清膏1;
2)称取苍术15g、薏苡仁12g和红景天9g,进行粉碎,过10目筛,用50%乙醇浸泡过夜后,加6倍上述浸泡液重量的60%乙醇进行渗漉提取,收集渗漉液,在4000转/分下离心后,得到清膏2;
3)称取昆布6g,加水进行回流提取,加水量为昆布重量的15倍,回流提取3次,每次1.5小时,得到的提取液加95%乙醇进行醇沉,回收乙醇,45℃下干燥,得到昆布多糖粉末;
4)将上述得到的清膏1、清膏2和昆布多糖粉末混合均匀得到混合药液,然后按混合药液∶糊精∶乳糖三者的重量比2∶1∶1加入糊精和乳糖进行混合,混合后进行喷雾干燥,即制备成了本发明药物的活性组分,在按常规的中药制剂加工方法制的颗粒剂。
实施例3
1)称取葛根18g、桔梗6g和山药15g加水进行回流提取,加水量为葛根、桔梗和山药三者重量的12倍,回流提取4次,每次2小时,得到的提取液加95%乙醇进行醇沉,回收乙醇,达到清膏1;
2)称取苍术18g、薏苡仁15g和红景天15g,进行粉碎,过10目筛,用90%乙醇浸泡过夜后,加10倍上述浸泡液重量的90%乙醇进行渗漉提取,收集渗漉液,在6000转/分下高速离心后,得到清膏2;
3)称取昆布12g,加水进行回流提取,加水量为昆布重量的25倍,回流提取4次,每次2小时,得到的提取液加95%乙醇进行醇沉,回收乙醇,45℃下干燥,得到昆布多糖粉末;
4)将上述得到的清膏1、清膏2和昆布多糖粉末混合均匀得到混合药液,然后按混合药液∶糊精∶乳糖三者的重量比1∶1∶1加入糊精和乳糖进行混合,混合后进行喷雾干燥,即制备成了本发明药物的活性组分,在按常规的中药制剂加工方法制的颗粒剂。
实施例4
1)称取葛根16g、桔梗8g和山药16g加水进行回流提取,加水量为葛根、桔梗和山药三者重量的9倍,回流提取3次,每次1小时,得到的提取液加95%乙醇进行醇沉,回收乙醇,达到清膏1;
2)称取苍术20g、薏苡仁16g和红景天16g,进行粉碎,过10目筛,用90%乙醇浸泡过夜后,加9倍上述浸泡液重量的90%乙醇进行渗漉提取,收集渗漉液,在5000转/分下高速离心后,得到清膏2;
3)称取昆布10g,加水进行回流提取,加水量为昆布重量的20倍,回流提取3次,每次2小时,得到的提取液加95%乙醇进行醇沉,回收乙醇,45℃下干燥,得到昆布多糖粉末;
4)将上述得到的清膏1、清膏2和昆布多糖粉末混合均匀得到混合药液,然后按混合药液∶糊精∶乳糖三者的重量比3∶1∶1加入糊精和乳糖进行混合,混合后进行喷雾干燥,即制备成了本发明药物的活性组分,在按常规的中药制剂加工方法制的片剂。
Claims (9)
1.一种治疗糖尿病周围神经病变的药物,其特征在于包括下述重量份的原料药制成:苍术15~21份、薏苡仁12~18份、山药12~18份、葛根12~18份、红景天9~15份、昆布6~12份和桔梗3~9份。
2.如权利要求1所述的一种治疗糖尿病周围神经病变的药物,其特征在于包括下述重量份的原料药制成:苍术16~20份、薏苡仁13~17份、山药13~17份、葛根13~17份、红景天10~14份、昆布7~11份和桔梗4~8份。
3.如权利要求1所述的一种治疗糖尿病周围神经病变的药物,其特征在于包括下述重量份的原料药制成:苍术17~19份、薏苡仁14~16份、山药14~16份、葛根14~16份、红景天11~13份、昆布8~10份和桔梗5~7份。
4.如权利要求1或2或3所述的一种治疗糖尿病周围神经病变的药物的制备方法,其特征在于包括以下工艺步骤:
1)称取各原料药苍术、薏苡仁、山药、葛根、红景天、昆布和桔梗,备用;
2)将所述重量配比的葛根、桔梗和山药加水进行回流提取,加水量为葛根、桔梗和山药三者重量的8~12倍,回流提取2~4次,每次1~2小时,得到的提取液加90~95%乙醇进行醇沉,回收乙醇,得到清膏1;
3)将所述重量配比的苍术、薏苡仁和红景天粉碎,用50~90%乙醇浸泡过夜后,加6~10倍上述浸泡液重量的50~90%乙醇进行渗漉提取,收集渗漉液,渗漉液在离心速度4000~6000转/分进行离心,离心后去下清液,保留上清液,得到清膏2;
4)将所述重量配比的昆布加水进行回流提取,加水量为昆布重量的15~25倍,回流提取2~4次,每次1~2小时,得到的提取液加90~95%乙醇进行醇沉,回收乙醇,在40~50℃下干燥,得到昆布多糖粉末;
5)将上述得到的清膏1、清膏2和昆布多糖粉末混合均匀得到混合药液,然后按混合药液∶糊精∶乳糖三者的重量比1~3∶1∶1加入糊精和乳糖进行混合,混合后进行喷雾干燥,即制备成了本发明药物的活性组分。
5.如权利要求4所述的一种治疗糖尿病周围神经病变的药物的制备方法,其特征在于所述的步骤2)中加水量为9~11倍,回流提取2~3次,每次1.5~2小时。
6.如权利要求4所述的一种治疗糖尿病周围神经病变的药物的制备方法,其特征在于所述的步骤3)中用60~70%乙醇浸泡过夜后,加7~9倍重量的60~70%乙醇进行渗漉提取,离心速度4500~5500转/分。
7.如权利要求4所述的一种治疗糖尿病周围神经病变的药物的制备方法,其特征在于所述的步骤4)中加水量为18~20倍,回流提取3~4次,每次1~1.5小时,在45~50℃下干燥。
8.如权利要求4所述的一种治疗糖尿病周围神经病变的药物的制备方法,其特征在于所述的步骤5)中混合药液∶糊精∶乳糖三者的重量比为3∶1∶1。
9.如权利要求4所述的一种治疗糖尿病周围神经病变的药物的制备方法,其特征在于所述的步骤5)得到活性组分按照中药制剂常规加工方法制得颗粒剂、片剂或胶囊剂。
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