CN101829232B - 治疗血栓闭塞性脉管炎的中药组合物的制备方法 - Google Patents

Abstract

治疗血栓闭塞性脉管炎的中药组合物的制备方法，它涉及中药组合物的制备方法。它解决了现有治疗脉管炎的中药制剂普遍存在成分多，成形困难及成本高的问题。中药组合物由黄芪、丹参、肉桂、川芎、党参、玄参、当归、乳香、鸡血藤、没药、甘草和金银花制成。方法1：为称取原料；当归、川芎和肉桂混合并加水浸泡，提取挥发油，回收挥发油提取物，再将药渣、药液与黄芪、党参、玄参、鸡血藤、甘草和金银花混合并加水提取；浓缩清膏；β-环糊精包合；包合物、粉碎成细粉的丹参、乳香和没药加入清膏中搅拌。方法2：称取原料，加水提取，浓缩清膏。本发明的中药组合物药物成分少，成形容易，添加的辅料量少，成本低，方法简单，原料易得。

Description

治疗血栓闭塞性脉管炎的中药组合物的制备方法

技术领域

本发明涉及中药组合物的制备方法。

背景技术

血栓闭塞性血管炎，是一种动脉和静脉都被侵犯，进行缓慢、周期性加剧的疾病，在我国的华北、东北一带较多见，祖国医学中称此病为脱骨疽或十趾零落。

临床上将本病的发展过程分三期：

初期(局部缺血期)：患肢麻木、发凉、怕冷、沉重，足趾有针样痛、小腿肌肉出现痉挛性疼痛、间歇性跛行、患肢动脉搏动微弱或消失、可游走性浅静脉炎，全身症状不显著。

中期(营养障碍期)：患肢麻木、发凉、怕冷、间歇性跛行加重，并有静息痛。患肢皮肤常呈潮红色、紫红色或苍白色、足部皮肤干燥、脱皮、趾甲生长缓慢、增厚变形、汗毛脱落、小腿肌肉有萎缩现象、患肢动脉搏动消失。可有情绪不安，头晕腰痛，筋骨松软之症。

后期(坏死期)：患肢由于严重的血液循环障碍，发生溃疡或坏死，大多数局限在足趾或足部，向上蔓延至踝关节或小腿者很少见。疼痛剧烈难忍，患者常抱膝而坐，捶胸顿足，号啕大叫，痛不欲生。坏疽的足趾脱落后，常遗留溃疡而经久不愈合。全身常伴有发热、口干、食欲减退、失眠、便秘、尿黄赤等症状。

西医治疗脉管炎主要以抗炎、镇痛的西药为主，西药确实可以改善病情，且起效快，对疼痛的缓解效果也较好，但是抗炎效果差、副作用较大，不能彻底治愈脉管炎，找不准病因、病机，往往用药时好转，一旦停药就会重新出现原来的症状。西医、西药的治疗无法从全身的症状入手，因为脉管炎不是一个局部疾病，全身的血管众多，一根出现问题就会引起全身的不适，所以要运用中医理论和中药进行全身的调理和治疗。

中医认为本病是由于素体肝脾肾亏虚，加上精神刺激，情志内伤，感受寒湿之邪，过食辛辣、外伤等刺激，致经络瘀阻，血脉不通，阳气不能温达四末，肢端无血供养，以至缺血性坏死。

目前，治疗脉管炎的中药制剂，普遍存在成分较多，含有名贵中药，成本高，而且中药制剂的成分多，浓缩难，导致中药制剂成形困难，如要成形则需要加入大量的辅料，增加成本，同时也增加了患者的服药剂量。

发明内容

本发明的目的是为了解决现有治疗脉管炎的中药制剂普遍存在成分多，成形困难及成本高的问题，而提供治疗血栓闭塞性脉管炎的中药组合物的制备方法。

治疗血栓闭塞性脉管炎的中药组合物按重量份数比由2～7份的黄芪、2～7份的丹参、2～8份的肉桂、1～6份的川芎、1～6份的党参、1～6份的玄参、2～7份的当归、0.5～4份的乳香、2～10份的鸡血藤、0.5～4份的没药、0.5～4份的甘草和2～10份的金银花制成。

制备治疗血栓闭塞性脉管炎的中药组合物的方法按以下步骤进行：一、按重量份数比称取2～7份的黄芪、2～7份的丹参、2～8份的肉桂、1～6份的川芎、1～6份的党参、1～6份的玄参、2～7份的当归、0.5～4份的乳香、2～10份的鸡血藤、0.5～4份的没药、0.5～4份的甘草和2～10份的金银花，然后将称取的丹参、乳香和没药粉碎成细粉备用；二、将称取的当归、川芎和肉桂混合并加4倍量的水浸泡2h，然后水蒸气蒸馏法提取挥发油8h，回收挥发油提取物，再将药渣、药液与称取的黄芪、党参、玄参、鸡血藤、甘草和金银花混合并加8倍量的水，提取两次每次2h，分次过滤，然后合并滤液；三、将滤液浓缩成相对密度为1.10～1.15的清膏，向清膏中加无水乙醇至含醇量为70％，静置24h后取上清液回收无水乙醇，然后浓缩成相对密度为1.25～1.35的清膏；四、在60℃下将步骤二中挥发油提取物与β-环糊精按体积比1∶8进行包合，2h后得挥发油包合物；五、将挥发油包合物、粉碎成细粉的丹参、乳香和没药加入清膏中搅拌，即完成治疗血栓闭塞性脉管炎的中药组合物的制备。

制备治疗血栓闭塞性脉管炎的中药组合物的方法按以下步骤进行：一、按重量份数比称取2～7份的黄芪、2～7份的丹参、2～8份的肉桂、1～6份的川芎、1～6份的党参、1～6份的玄参、2～7粉的当归、0.5～4份的乳香、2～10份的鸡血藤、0.5～4份的没药、0.5～4份的甘草和2～10份的金银花，混合并加8倍量的水，提取两次每次2h，分次过滤，然后合并滤液；二、将滤液浓缩成相对密度为1.10～1.15的清膏，向清膏中加无水乙醇至含醇量为70％，静置24h后取上清液回收无水乙醇，然后浓缩成相对密度为1.25～1.35的清膏，即完成治疗血栓闭塞性脉管炎的中药组合物的制备。

本发明中治疗血栓闭塞性脉管炎的中药组合物，是以中医理论为基础进行的中药复方配伍，相对于现有治疗脉管炎的中药制剂来说，本发明中药物成分少，成形容易，添加的辅料量少，成本低；本发明中治疗血栓闭塞性脉管炎的中药组合物从引起脉管炎的病因、病机入手，根本地解决了上述西医、西药治疗脉管炎的弊端；本发明中治疗血栓闭塞性脉管炎的中药组合物具有活血祛瘀，益气通络，止痛的作用，适用于治疗血栓闭塞性脉管炎，动脉硬化症，静脉曲张等周围血管病，且经过临床应用，证实治疗血栓闭塞性脉管炎具有很好的效果。

本发明制备治疗血栓闭塞性脉管炎的中药组合物的方法简单，原料易得，成本低；本发明中两种制备方法制备得到的治疗血栓闭塞性脉管炎的中药组合物均又治疗血栓闭塞性脉管炎的作用。

具体实施方式

本发明技术方案不局限于以下所列举具体实施方式，还包括各具体实施方式间的任意组合。

具体实施方式一：本实施方式治疗血栓闭塞性脉管炎的中药组合物按重量份数比由2～7份的黄芪、2～7份的丹参、2～8份的肉桂、1～6份的川芎、1～6份的党参、1～6份的玄参、2～7份的当归、0.5～4份的乳香、2～10份的鸡血藤、0.5～4份的没药、0.5～4份的甘草和2～10份的金银花制成。

本实施方式治疗血栓闭塞性脉管炎的中药所用到的中药饮片成分由黄芪、丹参、肉桂、川芎、党参、玄参、当归、乳香、鸡血藤、没药、甘草和金银花组成。

本实施方式中黄芪的作用是补气升阳，益卫固表，利水消肿，托疮生肌；丹参的作用是活血调经，凉血消痈，安神；肉桂的作用是补火助阳，散寒止痛，温经通脉；川芎的作用是活血行气，祛风止痛。党参的作用是益气，生津，养血；玄参的作用是清热凉血，滋阴解毒；当归的作用是补血，活血，调经，止痛，润肠；乳香的作用是活血行气止痛，消肿生肌；鸡血藤的作用是行气补血，调经，舒筋活络；没药的作用是活血止痛，消肿生肌；甘草的作用是生肌止痛，疗诸痈肿疮疡；金银花金银花的作用是清热解毒，疏散风热。

具体实施方式二：本实施方式与具体实施方式一不同的是治疗血栓闭塞性脉管炎的中药组合物按重量份数比由2份的黄芪、2份的丹参、2份的肉桂、1份的川芎、1份的党参、1份的玄参、2份的当归、0.5份的乳香、2份的鸡血藤、0.5份的没药、0.5份的甘草和2份的金银花制成。其它与具体实施方式一相同。

具体实施方式三：本实施方式与具体实施方式一不同的是治疗血栓闭塞性脉管炎的中药组合物按重量份数比由7份的黄芪、7份的丹参、8份的肉桂、6份的川芎、6份的党参、6份的玄参、7份的当归、4份的乳香、10份的鸡血藤、4份的没药、4份的甘草和10份的金银花制成。其它与具体实施方式一相同。

具体实施方式四：本实施方式与具体实施方式一不同的是治疗血栓闭塞性脉管炎的中药组合物按重量份数比由3～5份的黄芪、3～5份的丹参、4～6份的肉桂、2～5份的川芎、2～5份的党参、2～5份的玄参、3～5份的当归、1～3份的乳香、4～8份的鸡血藤、1～3份的没药、1～3份的甘草和4～8份的金银花制成。其它与具体实施方式一相同。

具体实施方式五：本实施方式与具体实施方式一不同的是治疗血栓闭塞性脉管炎的中药组合物按重量份数比由4份的黄芪、4份的丹参、5份的肉桂、3份的川芎、3份的党参、3份的玄参、4份的当归、2份的乳香、6份的鸡血藤、2份的没药、2份的甘草和6份的金银花制成。其它与具体实施方式一相同。

具体实施方式六：本实施方式制备治疗血栓闭塞性脉管炎的中药组合物的方法按以下步骤进行：一、按重量份数比称取2～7份的黄芪、2～7份的丹参、2～8份的肉桂、1～6份的川芎、1～6份的党参、1～6份的玄参、2～7份的当归、0.5～4份的乳香、2～10份的鸡血藤、0.5～4份的没药、0.5～4份的甘草和2～10份的金银花，然后将称取的丹参、乳香和没药粉碎成细粉备用；二、将称取的当归、川芎和肉桂混合并加4倍量的水浸泡2h，然后水蒸气蒸馏法提取挥发油8h，回收挥发油提取物，再将药渣、药液与称取的黄芪、党参、玄参、鸡血藤、甘草和金银花混合并加8倍量的水，提取两次每次2h，分次过滤，然后合并滤液；三、将滤液浓缩成相对密度为1.10～1.15的清膏，向清膏中加无水乙醇至含醇量为70％，静置24h后取上清液回收无水乙醇，然后浓缩成相对密度为1.25～1.35的清膏；四、在60℃下将步骤二中挥发油提取物与β-环糊精按体积比1∶8进行包合，2h后得挥发油包合物；五、将挥发油包合物、粉碎成细粉的丹参、乳香和没药加入清膏中搅拌，即完成治疗血栓闭塞性脉管炎的中药组合物的制备。

本实施方式制备治疗血栓闭塞性脉管炎的中药所用到的中药饮片成分为黄芪、丹参、肉桂、川芎、党参、玄参、当归、乳香、鸡血藤、没药、甘草和金银花。

本实施方式中清膏的相对密度均是在60℃下测得。

本实施方式中制备治疗血栓闭塞性脉管炎的中药组合物的质量控制，对所得组合物中的丹参、肉桂、川芎、当归、玄参、甘草定性鉴别方法：

a、取试样适量，研细，加无水乙醇回流提取，提取液挥发至小体积，作为供试品溶液；另取桂皮醛对照品，加乙醇制成每1mg含1μl桂皮醛的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录IVB)试验，吸取上述两种溶液各适量，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为17∶3的石油醚(60～90℃)和乙酸乙酯的混合溶剂为展开剂，展开，取出，晾干，喷以二硝基苯肼乙醇试液；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

b、取试样适量，研细，加乙醚超声处理，滤过，滤液蒸干，残渣加少量乙醇溶解，作为供试品溶液；另取川芎、当归对照药材适量，同法制成川芎、当归对照药材溶液；照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录IVB)试验，吸取供试品溶液及对照药材溶液各适量，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为4∶1的正己烷和乙酸乙酯的混合溶剂为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

c、取试样适量，研细，加碳酸氢钠溶液超声处理，离心，取上清液调节pH值至2～3，用乙醚振摇提取，提取液挥干，残渣加少量甲醇溶解，作为供试品溶液；另取阿魏酸对照品、藁本内酯对照品，加甲醇制成每1ml各含1mg阿魏酸的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录IVB)试验，吸取上述溶液各适量，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为4∶1∶1∶0.1的环己烷、二氯甲烷、乙酸乙酯和甲酸的混合溶剂为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

d、取试样适量，研细，加乙醚回流提取，滤过，滤液挥干，残渣加少量乙酸乙酯溶解，作为供试品溶液；另取欧当归内酯A对照品，加乙酸乙酯制成每1ml含0.1mg欧当归内酯A的溶液(置棕色量瓶中)，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录IVB)试验，吸取上述溶液各适量，分别点于同一硅胶GF₂₅₄薄层板上，以体积比为3∶1的正己烷和乙酸乙酯的混合溶剂为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(254nm)下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

e、取鉴别b项下的供试品溶液；另取丹参对照药材适量，同法制成对照药材溶液；再取丹参酮II A对照品，加乙酸乙酯制成每1ml含2mg丹参酮II A的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录IVB)试验，吸取上述溶液各适量，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为4∶1的石油醚(60～90℃)和乙酸乙酯的混合溶剂为展开剂，展开，取出，晾干；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；在与对照品色谱相应的位置上，显相同的暗红色斑点；

f、取试样适量，研细，加水超声处理后，离心，取上清液调pH值2，用乙酸乙酯振摇提取，提取液浓缩至小体积，作为供试品溶液；另取原儿茶醛对照品，加乙醇制成每1ml含1mg原儿茶醛的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录IVB)试验，吸取上述溶液各适量，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为8∶1∶1的三氯甲烷、丙酮和甲酸混合后的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以3％三氯化铁溶液，加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

g、取试样适量，研细，加甲醇浸泡后超声处理，滤过，滤液蒸干，残渣加适量水溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取，提取液蒸干，残渣加少量甲醇使溶解，作为供试品溶液；另取玄参对照药材适量，同法制成对照药材溶液；再取哈巴俄苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg哈巴俄苷的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录IVB)试验，吸取上述溶液各适量，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为12∶4∶1的三氯甲烷、甲醇和水混合后的下层溶液为展开剂，置用展开剂预饱和15分钟的展开缸内，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

h、取试样适量，研细，加正丁醇适量超声处理并时时振摇，滤过，滤液蒸干，残渣加水适量使溶解，再调节pH值至2～3，用乙酸乙酯振摇提取，提取液蒸干，残渣加少量甲醇使溶解，作为供试品溶液；另取甘草苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg甘草苷的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录IVB)试验，吸取上述溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为10∶2∶0.1三氯甲烷、甲醇和甲酸的混合溶剂为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

具体实施方式七：本实施方式与具体实施方式六不同的是步骤一中按重量份数比称取5份的黄芪、5份的丹参、4份的肉桂、3份的川芎、3份的党参、3份的玄参、4份的当归、2份的乳香、8份的鸡血藤、2份的没药、3份的甘草和7份的金银花。其它步骤及参数与具体实施方式六相同。

具体实施方式八：本实施方式与具体实施方式六不同的是步骤五中搅拌后所得治疗血栓闭塞性脉管炎的中药组合物，然后加入辅料可制成片剂、胶囊剂、丸剂、茶剂或颗粒剂；其中制成片剂所需辅料为糊精、微晶纤维素、微粉硅胶、羧甲基淀粉钠、硬脂酸镁和滑石粉；制成胶囊剂所需辅料为淀粉和糊精；制成丸剂所需辅料为淀粉；制成茶剂所需辅料为茶叶；制成颗粒剂所需辅料为糊精和蔗糖。其它步骤及参数与具体实施方式六相同。

具体实施方式九：本实施方式制备治疗血栓闭塞性脉管炎的中药组合物的方法按以下步骤进行：一、按重量份数比称取2～7份的黄芪、2～7份的丹参、2～8份的肉桂、1～6份的川芎、1～6份的党参、1～6份的玄参、2～7份的当归、0.5～4份的乳香、2～10份的鸡血藤、0.5～4份的没药、0.5～4份的甘草和2～10份的金银花，混合并加8倍量的水，提取两次每次2h，分次过滤，然后合并滤液；二、将滤液浓缩成相对密度为1.10～1.15的清膏，向清膏中加无水乙醇至含醇量为70％，静置24h后取上清液回收无水乙醇，然后浓缩成相对密度为1.25～1.35的清膏，即完成治疗血栓闭塞性脉管炎的中药组合物的制备。

本实施方式中清膏的相对密度均是在60℃下测得。

本实施方式中制备治疗血栓闭塞性脉管炎的中药组合物中的黄芪甲苷和绿原酸采用高效液相色谱法进行测定含量：

1、黄芪甲苷的测定

色谱条件与系统适应性试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水(体积比为32∶68)为流动相；蒸发光散射检测器检测；理论板数按黄芪甲苷峰计算应不低于4000；

对照品溶液的制备：精密称取黄芪甲苷对照品适量，以甲醇适量溶解，定容，即得；

供试品溶液的制备：取组合物适量，研细，置索氏提取器中，加甲醇冷浸过夜后提取，提取液回收溶剂并浓缩至干，残渣加适量水微热溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取，提取液用氨试液洗涤，弃氨试液，正丁醇液蒸干，残渣以适量水溶解并通过D101型大孔吸附树脂柱，分别以水、40％乙醇、70％乙醇洗脱，收集70％乙醇洗脱液，蒸干，残渣加甲醇溶解并定容，即得；

测定法：分别精密吸取对照品和供试品溶液各适量，注入高效液相色谱仪，测定，即得。

2、绿原酸的测定

色谱条件与系统适应性试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-0.4％磷酸溶液(体积比为13∶87)为流动相；检测波长为327nm；理论板数按绿原酸峰计算应不低于1000；

对照品溶液的制备：精密称取绿原酸对照品适量，置棕色量瓶中，以50％甲醇适量溶解，定容，即得；

供试品溶液的制备：取组合物适量，研细，用50％甲醇适量提取，取适量提取液定容至棕色量瓶中，即得；

测定法：分别精密吸取对照品和供试品溶液各适量，注入高效液相色谱仪，测定，即得。

具体实施方式十：本实施方式与具体实施方式九不同的是步骤一中按重量份数比称取6份的黄芪、4份的丹参、5份的肉桂、3份的川芎、4份的党参、3份的玄参、4份的当归、2份的乳香、9份的鸡血藤、3份的没药、2份的甘草和8份的金银花。其它步骤及参数与具体实施方式九相同。

具体实施方式十一：本实施方式与具体实施方式九不同的是步骤二中所得治疗血栓闭塞性脉管炎的中药组合物，然后加入辅料可制成片剂、胶囊剂、丸剂、茶剂、颗粒剂或滴丸剂；其中制成片剂所需辅料为糊精、微晶纤维素、微粉硅胶、羧甲基淀粉钠、硬脂酸镁和滑石粉；制成胶囊剂所需辅料为淀粉和糊精；制成丸剂所需辅料为淀粉；制成茶剂所需辅料为茶叶；制成颗粒剂所需辅料为糊精和蔗糖；制成滴丸剂所需辅料为聚乙二醇、硬脂酸、甘油明胶、硬脂酸纳、单硬脂酸甘油酯和蜂蜡。其它步骤及参数与具体实施方式九相同。

实验：

试验动物：昆明种小鼠，购自吉林大学实验动物中心，体重18～22g，雌雄兼用；Wistar大鼠，购自吉林大学实验动物中心，体重280～350g，雌雄兼用；

受试药物：本发明中治疗血栓闭塞性脉管炎的中药组合物的两种工艺提取物：具体实施方式七中的制备方法所得为1号工艺组，具体实施方式十中的制备方法所得为2号工艺组；

受试药物样品的配制：分别称取10g 1号和2号工艺组制备的中药组合物，放入乳钵中加入10倍量的水混匀，配制成药物混悬液；

给药剂量：按动物体表面积折算法计算，即小鼠用量＝人用药量×0.0026，大鼠用量＝人用药量×0.018。

1、本发明中治疗血栓闭塞性脉管炎的中药组合物对小鼠耳廓肿胀炎症模型的影响：

取昆明种小鼠40只，雌雄各半，体重18～22g，称重后随机分为4组，每组10只，即空白对照组、1号工艺组、2号工艺组和阿司匹林阳性对照组；空白组灌胃给予等体积生理盐水；阿司匹林阳性对照组，每日灌胃0.26g/kg；1号和2号工艺组分别灌胃给予相应的受试药物，连续给药5天。于末次给药后立即用20％豆油合剂涂于小鼠左耳前后，致炎后4小时，处死小鼠，于双耳片对称处的打孔器打下圆耳片，在分析天平上称重，以左、右耳片重量差作为肿胀度；实验结果如表1所示，1号和2号工艺组对小鼠耳廓肿胀炎症效果较好。

表1

组别	剂量(g/kg)	动物数(n)	耳肿胀率(％)
				空白对照组	等体积生理盐水	10	90.08±25.40
阳性对照组	0.26	10	50.99±31.08*
				1号	2.57	10	43.25±26.43*
2号	2.57	10	40.78±22.56*

注：与空白对照组比较*p＜0.05。

2、本发明中治疗血栓闭塞性脉管炎的中药组合物对大鼠足跖肿胀炎症模型的影响：

取Wistar大鼠40只，雌雄各半，体重280～350g，称重后随机分为4组，每组10只，即空白对照组、1号工艺组、2号工艺组和阿司匹林阳性对照组；空白组灌胃给予等体积生理盐水；阿司匹林阳性对照组，每日灌胃0.26g/kg；1号和2号工艺组分别灌胃给予相应的受试药物，连续给药5天；于末次给药后，在大鼠右后足跖上标记，以毛细管放大法测定其容积，并立即于足掌向踝关节方向皮下注射1.0％琼脂0.1ml，分别在致炎后半小时、1小时、2小时、4小时、6小时重复测定每鼠足跖容积；实验结果如表2所示，1号和2号工艺组对大鼠足跖肿胀炎症效果较好。

表2

注：与空白对照组比较*p＜0.05。

3、本发明中治疗血栓闭塞性脉管炎的中药组合物对大鼠棉球肉芽肿炎症模型的影响：

取Wistar大鼠40只，雌雄各半，体重280～350g，称重后随机分为4组，每组10只，即空白对照组、1号工艺组、2号工艺组和阿司匹林阳性对照组；空白组灌胃给予等体积生理盐水；阿司匹林阳性对照组，每日灌胃0.26g/kg；1号和2号工艺组分别灌胃给予相应的受试药物；将无菌棉球(20mg)置入大鼠鼠蹊部皮下，连续给药7天后，打开原切口，取出棉球肉芽肿组织，取出周围结缔组织放烘箱(70℃)烘干至恒重，立即于分析天平上称重；实验结果如表3所示，1号和2号工艺组对大鼠棉球肉芽肿炎症效果较好。

表3

组别	剂量(g/kg)	动物数(只)	肉芽肿重量(mg)
				空白对照组	等体积生理盐水	10	71.73±20.22
阳性对照组	0.26	10	53.27±11.18*
				1号	2.57	10	54.42±10.72*
2号	2.57	10	55.30±10.15*

注：与空白对照组比较*p＜0.05。

4、本发明中治疗血栓闭塞性脉管炎的中药组合物对醋酸致小鼠疼痛模型的影响：

取昆明种小鼠40只，雌雄各半，体重18～22g，称重后随机分为4组，每组10只，即空白对照组、1号工艺组、2号工艺组和复方曲马多阳性对照组；空白组灌胃给予等体积生理盐水；阳性对照组，每日口服39mg/Kg；1号和2号工艺组分别灌胃给予相应的受试药物；给药30分钟后，每鼠腹腔注射0.6％醋酸生理盐水溶液0.2ml/只，观察致痛后15分钟内出现扭体反应的最早时间及扭体次数；实验结果如表4所示，1号和2号工艺组对醋酸致小鼠疼痛效果较好。

表4

组别	剂量(g/kg)	动物数(只)	15分钟扭体次数(次)
				空白对照组	等体积生理盐水	10	31.01±9.32
阳性对照组	0.039	10	12.93±10.67*
				1号	2.57	10	18.06±9.26*
2号	2.57	10	19.22±10.37*

注：与空白对照组比较*p＜0.05。

5、本发明中治疗血栓闭塞性脉管炎的中药组合物对热板小鼠疼痛模型的影响：

取昆明种小鼠40只，雌性，体重18～22g，称重后随机分为4组，每组10只，即空白对照组、1号工艺组、2号工艺组和复方曲马多阳性对照组；空白组灌胃给予等体积生理盐水；阳性对照组，每日口服39mg/Kg；1号和2号工艺组分别灌胃给予相应的受试药物；给药15分钟、30分钟、60分钟、120分钟及240分钟重复测定痛阈值(出现舔后足时间)；实验结果如表5所示，1号和2号工艺组热板小鼠疼痛效果较好。

表5

注：与对照组比较*p＜0.05。

本发明中两种制备方法制备得到的治疗血栓闭塞性脉管炎的中药组合物的临床实验：

全部病例100人，均为住院和门诊观察的病人，其中初期症状患者46例，中期症状患者50例，后期症状患者4例(症状表现见背景技术中所述内容)，将其均匀平分为1号和2号两组，使两组病例的症状无显著差异；药物：本发明中具体实施方式六中的制备方法所得为1号药物，用于1号组；具体实施方式八中的制备方法所得为2号药物，用于2号组；1号药物一日三次，一次3-4片；2号药物一日三次，一次2-3片；疗程均为15～20天；

1号和2号两组疗程结束后的结果：初期症状患者46例中全部治愈；中期症状患者50例中有42例治愈，8例症状好转，仅表现为患肢发凉；后期症状患者4例中有3例症状好转，表现为溃疡或坏死症状消失，新生组织健康，痛苦减轻，另外1例表现为炎症消失；可见本发明中两种制备方法制备得到的治疗血栓闭塞性脉管炎的中药组合物均又治疗血栓闭塞性脉管炎的作用。

具体实施方式七的实验结果与具体实施方式六的实验结果基本相同，具体实施方式十的实验结果与具体实施方式九的实验结果基本相同。

Claims (2)

1.治疗血栓闭塞性脉管炎的中药组合物的制备方法，其特征在于制备治疗血栓闭塞性脉管炎的中药组合物的方法按以下步骤进行：一、按重量份数比称取2～7份的黄芪、2～7份的丹参、2～8份的肉桂、1～6份的川芎、1～6份的党参、1～6份的玄参、2～7份的当归、0.5～4份的乳香、2～10份的鸡血藤、0.5～4份的没药、0.5～4份的甘草和2～10份的金银花，然后将称取的丹参、乳香和没药粉碎成细粉备用；二、将称取的当归、川芎和肉桂混合并加4倍量的水浸泡2h，然后水蒸气蒸馏法提取挥发油8h，回收挥发油提取物，再将药渣、药液与称取的黄芪、党参、玄参、鸡血藤、甘草和金银花混合并加8倍量的水，提取两次，每次2h，分次过滤，然后合并滤液；三、将滤液浓缩成相对密度为1.10～1.15的清膏，向清膏中加无水乙醇至含醇量为70％，静置24h后取上清液回收无水乙醇，然后浓缩成相对密度为1.25～1.35的清膏；四、在60℃下将步骤二中挥发油提取物与β-环糊精按体积比1∶8进行包合，2h后得挥发油包合物；五、将挥发油包合物、粉碎成细粉的丹参、乳香和没药加入清膏中搅拌，即完成治疗血栓闭塞性脉管炎的中药组合物的制备。

2.根据权利要求1所述的治疗血栓闭塞性脉管炎的中药组合物的制备方法，其特征在于步骤一中按重量份数比称取5份的黄芪、5份的丹参、4份的肉桂、3份的川芎、3份的党参、3份的玄参、4份的当归、2份的乳香、8份的鸡血藤、2份的没药、3份的甘草和7份的金银花。