CN101822221A - 大蒜胚性悬浮培养系体胚诱导出芽用的培养基 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种大蒜胚性悬浮培养系体胚诱导出芽用的培养基。是将6-苄基嘌呤6-BA、激动素KT、吲哚乙酸IAA、蔗糖和琼脂溶解于基本培养基B5中，调整pH值至5.8-6.0制成；其各组份的用量为：以1L基本培养基B5加入量计：B5 1L，6-BA 2mg，KT 0.1mg，IAA 0.01mg，蔗糖30g，琼脂6g。积极效果是：利用本培养基可以利大蒜胚性悬浮培养系体胚高频率诱导出芽，实现了大蒜植株再生。克服了大蒜悬浮培养难以成系、体细胞胚(简称体胚)难诱导、体胚难出芽的难题，实现了高频率再生植株诱导的技术。
Description
技术领域
本发明属于大蒜组织培养技术，具体是一种大蒜胚性悬浮培养系体胚诱导出芽用的培养基。特别适用于从大蒜悬浮培养得到体胚诱导出芽。
背景技术
大蒜(Allium sativumL.)是无性繁殖植物，具有较高的食用及药用价值，利用生物工程技术改良其品质.抗病虫性等性状现已引起广泛的重视，这些生物技术应用的关键环节是建立一个大蒜细胞组织培养、增殖的有效植株再生体系。悬浮培养技术可以在短时间内培养出大量同质的试验材料，大幅度提高试验效率，为大蒜生物工程提供理想的试验材料。张毅等利用大蒜悬浮培养提取大蒜次生代谢物质有过报道(1993)；但利用大蒜悬浮培养技术，建立悬浮培养系及有效植株高频率再生体系尚未报道。
发明内容
本发明的目的是解决大蒜悬浮培养系在固体培养上增殖诱导得到的体胚难出芽的技术难题，提供一种大蒜胚性悬浮培养系体胚诱导出芽用的培养基。
本发明的技术方案如下：一种大蒜胚性悬浮培养系体胚诱导出芽用的培养基，是将6-苄基嘌呤6-BA、激动素KT、吲哚乙酸IAA、蔗糖和琼脂溶解于基本培养基B5中，调整PH值至5.8-6.0制成；其各组份的用量为：以1L基本培养基B5加入量计：
B5 1L
6-BA 2mg
KT 0.1mg
IAA 0.01mg
蔗糖 30g
琼脂 6g。
上述原料中，B5为基本培养基，提供培养组织生长发育所需的无机营养元素和部分有机营养元素；6-BA、KT、IAA是植物生长调节剂，具有促进培养物愈伤组织形成和发育的作用；蔗糖提供培养组织生长发育所的碳素营养；琼脂的主要作用是固化培养基，起支撑作用。
上述各组份的用量是发明人在理论分析的基础上进行大量试验摸索总结得出的，按上述比例配制培养基，具有促使大蒜胚性悬浮培养系形成体细胞胚高频率诱导出芽的效果。
上述培养基的制作方法是将6-BA、KT、IAA、蔗糖溶解于B5，搅拌均匀，PH值调整为5.8-6.0之间即。
本发明的积极效果是：利用本培养基可以利大蒜胚性悬浮培养系体胚高频率诱导出芽，实现了大蒜植株再生。克服了大蒜悬浮培养难以成系、体细胞胚(简称体胚)难诱导、体胚难出芽的难题，实现了高频率再生植株诱导的技术。
具体实施方式：
以下通过实施例和对照例进一步阐述本发明的有益效果：
实施例1：
B5 1L
6-BA 2mg
KT 0.1mg
IAA 0.01mg
蔗糖 30g
琼脂 6g
实施例2：
B5 1L
6-BA 5mg
KT 1mg
IAA 0.01mg
蔗糖 30g
琼脂 6g
对照例1：
B5 1L
6-BA 2mg
IAA 0.01mg
蔗糖 30g
琼脂 6g
对照例2：
B5 1L
IAA 0.01mg
蔗糖 30g
琼脂 6g
试验方法及结果：
将上述实施例的培养基用于大蒜胚性悬浮培养系得到的体胚进行再生芽的诱导试验：
材料：大蒜徐州白蒜茎尖分生组织悬浮培养诱导出的体胚。
方法：将大蒜徐州白蒜茎尖分生组织诱导出胚性愈伤组织经悬浮培养后，将诱导出的体胚转移到装有上述固体培养20ml(PH5.5)的三角瓶中，培养条件为27±1℃，每日12h，1000lx光照。
结果：将上述增殖得到的胚性愈伤组织连同体胚一起转移到上述4种实施例中培养基上进行芽的诱导。接种4周以后观察，接种在实施例2和对照例2上的体胚不能进一步发育，很快丧失胚性，失去发芽能力，其丛生芽的诱导率为零。接种在对照例1上的细胞团其丛生芽的诱导率较低，只有9％，且丛生芽细小，质量不好。接种在本实施例1上的细胞团78％形成了丛生芽，每一块细胞团可形成5-10个丛芽。芽的形成过程为胚状体先形成胚芽鞘，从胚芽鞘中抽出真叶，发育成小苗。
综合以上分析，得出大蒜悬浮系体胚诱导出芽的最佳培养基为：
B5 1L
6-BA 2mg
KT 0.1mg
IAA 0.01mg
蔗糖 30g
琼脂 6g。
Claims (1)
1.一种大蒜胚性悬浮培养系体胚诱导出芽用的培养基，是将6-苄基嘌呤6-BA、激动素KT、吲哚乙酸IAA、蔗糖和琼脂溶解于基本培养基B5中，调整PH值至5.8-6.0制成；其各组份的用量为：以1L基本培养基B5加入量计：
B5 1L
6-BA 2mg
KT 0.1mg
IAA 0.01mg
蔗糖 30g
琼脂 6g。
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Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN101822221A (zh) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103004596A (zh) * | 2012-12-17 | 2013-04-03 | 南京工业大学 | 一种利用间歇浸没培养方式快速获得大蒜种苗的方法 |
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2010
- 2010-05-06 CN CN 201010169625 patent/CN101822221A/zh active Pending
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 《全国作物细胞工程与分子技术育种学术研讨会论文集》 20031231 张允刚等, 大蒜悬浮培养及有效植株再生 155-159 1 , 2 * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103004596A (zh) * | 2012-12-17 | 2013-04-03 | 南京工业大学 | 一种利用间歇浸没培养方式快速获得大蒜种苗的方法 |
| CN103004596B (zh) * | 2012-12-17 | 2014-07-16 | 南京工业大学 | 一种利用间歇浸没培养方式快速获得大蒜种苗的方法 |
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