CN101792401B - 一种具有抗肿瘤活性的联苯化合物及其制备方法 - Google Patents

一种具有抗肿瘤活性的联苯化合物及其制备方法 Download PDF

Info

Publication number
CN101792401B
CN101792401B CN2010101378391A CN201010137839A CN101792401B CN 101792401 B CN101792401 B CN 101792401B CN 2010101378391 A CN2010101378391 A CN 2010101378391A CN 201010137839 A CN201010137839 A CN 201010137839A CN 101792401 B CN101792401 B CN 101792401B
Authority
CN
China
Prior art keywords
compound
benzyloxy
methylamine
dimethoxy
methoxyl group
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Fee Related
Application number
CN2010101378391A
Other languages
English (en)
Other versions
CN101792401A (zh
Inventor
贺浪冲
张�杰
张彦民
贺怀贞
王嗣岑
李西玲
卢闻
王红英
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Xian Jiaotong University
Original Assignee
Xian Jiaotong University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Xian Jiaotong University filed Critical Xian Jiaotong University
Priority to CN2010101378391A priority Critical patent/CN101792401B/zh
Publication of CN101792401A publication Critical patent/CN101792401A/zh
Priority to PCT/CN2010/079868 priority patent/WO2011120314A1/zh
Priority to PCT/CN2010/079862 priority patent/WO2011120313A1/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN101792401B publication Critical patent/CN101792401B/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C231/00—Preparation of carboxylic acid amides
    • C07C231/14—Preparation of carboxylic acid amides by formation of carboxamide groups together with reactions not involving the carboxamide groups
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C235/00—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by oxygen atoms
    • C07C235/42—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by oxygen atoms having carbon atoms of carboxamide groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings and singly-bound oxygen atoms bound to the same carbon skeleton
    • C07C235/44—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by oxygen atoms having carbon atoms of carboxamide groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings and singly-bound oxygen atoms bound to the same carbon skeleton with carbon atoms of carboxamide groups and singly-bound oxygen atoms bound to carbon atoms of the same non-condensed six-membered aromatic ring
    • C07C235/46—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by oxygen atoms having carbon atoms of carboxamide groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings and singly-bound oxygen atoms bound to the same carbon skeleton with carbon atoms of carboxamide groups and singly-bound oxygen atoms bound to carbon atoms of the same non-condensed six-membered aromatic ring having the nitrogen atoms of the carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C235/00—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by oxygen atoms
    • C07C235/70—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by oxygen atoms having carbon atoms of carboxamide groups and doubly-bound oxygen atoms bound to the same carbon skeleton
    • C07C235/84—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by oxygen atoms having carbon atoms of carboxamide groups and doubly-bound oxygen atoms bound to the same carbon skeleton with the carbon atom of at least one of the carboxamide groups bound to a carbon atom of a six-membered aromatic ring

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)

Abstract

本发明公开了一种具有抗肿瘤活性的联苯化合物及其制备方法，该联苯化合物在体外和体内都表现出抗肿瘤活性，其在体外对结直肠癌、肺癌、肝癌、乳腺癌或胰腺癌细胞系具有诱导凋亡和抑制增殖作用，在体内对肝癌和结直肠癌具有肿瘤抑制作用，能够应用于抗肿瘤药物的制备。本发明提供的联苯化合物的制备方法，具有原料来源易得，反应条件温和，反应过程操作简单，所用试剂便宜易得的优点。

Description

一种具有抗肿瘤活性的联苯化合物及其制备方法
技术领域
本发明涉及生物医药技术领域，涉及一种抗肿瘤的化合物，特别涉及一种具有抗肿瘤活性的联苯化合物及其制备方法。
背景技术
恶性肿瘤是当前严重影响人类健康、威胁人类生命的主要疾病之一。世界卫生组织的统计资料显示，目前全世界每年约有一千万肿瘤患者，数百万人死于恶性肿瘤。恶性肿瘤已经成为仅次于心血管疾病的人类第二大杀手。肿瘤的化学治疗是肿瘤防治的三个基本手段之一，经过数十年的发展，用于肿瘤治疗的化疗药物研究取得了巨大的成功，得到了一大批具有不同作用机制的临床抗肿瘤药物。但是由于化疗药物本身不同程度的毒副作用以及肿瘤的耐药性的产生常常会使肿瘤的化学治疗达不到预期的效果。因此，新的抗肿瘤药物的研究与开发是目前药学领域的热点与难点问题之一。
发明内容
本发明解决的问题在于提供一种具有抗肿瘤活性的联苯化合物及其制备方法，该联苯化合物在体外和体内都表现出抗肿瘤活性，能够应用于抗肿瘤药物的制备。
本发明是通过以下技术方案来实现：
一种具有抗肿瘤活性的联苯化合物，其化学结构式为：
Figure GDA0000020368780000011
其中，R1、R2为单取代、双取代或三取代，取代基为氢、羟基、氨基、卤素中的一种或几种。
一种具有抗肿瘤活性的联苯化合物的制备方法，包括以下步骤：
1)异香草醛在铁粉催化作用下，与液溴反应得到2-溴代异香草醛；
2)将2-溴代异香草醛通过苄基保护反应，得到4-甲氧基-3-苄氧基-2-溴苯甲醛；
3)在PH为5～6条件下，用亚氯酸钠和过氧化氢的二元氧化体系，将4-甲氧基-3-苄氧基-2-溴苯甲醛氧化为4-甲氧基-3-苄氧基-2-溴苯甲酸；
4)将4-甲氧基-3-苄氧基-2-溴苯甲酸通过酰化反应生成4-甲氧基-3-苄氧基-2-溴苯甲酰氯，然后再与甲胺反应得到4-甲氧基-3-苄氧基-2-溴苯甲酰甲胺；
5)4-甲氧基-3-苄氧基-2-溴苯甲酰甲胺通过Ullmann反应得到苄基保护的联苯双酰胺化合物：5，5’-二甲氧基-6，6’-二苄氧基联苯-2，2’-二苯甲酰甲胺；
6)5，5’-二甲氧基-6，6’-二苄氧基联苯-2，2’-二苯甲酰甲胺通过催化氢化脱去苄基保护基，得到带有两个酚羟基的联苯双酰胺化合物：5，5’-二甲氧基-6，6’-二羟基联苯-2，2’-二苯甲酰甲胺；
7)5，5’-二甲氧基-6，6’-二羟基联苯-2，2’-二苯甲酰甲胺的1个酚羟基与含有卤素取代乙酰苯胺的化合物通过醚化反应，得到单羟基醚化的联苯化合物。
8)单羟基醚化的联苯化合物的另一个羟基与含有卤素取代乙酰苯胺的化合物通过醚化反应，得到目标化合物。
所述的氯乙酰取代苯胺的化合物为氯乙酰卤素取代苯胺、氯乙酰羟基取代苯胺或氯乙酰氨基取代苯胺的化合物。
所述的具有抗肿瘤活性的联苯化合物应用于抗肿瘤药物的制备。
所述是应用于抗结直肠癌、肺癌、肝癌、乳腺癌或胰腺癌药物的制备。
与现有技术相比，本发明具有以下有益的技术效果：
本发明提供的联苯化合物是一种新的具有抗肿瘤活性的化合物，其在体外对结直肠癌、肺癌、肝癌、乳腺癌或胰腺癌细胞系具有诱导凋亡和抑制增殖作用，在体内对肝癌和结直肠癌具有肿瘤抑制作用，可应用于抗肿瘤药物的制备。
本发明提供的联苯化合物的制备方法，具有原料来源易得，反应条件温和，反应过程操作简单，所用试剂便宜易得的优点。
附图说明
图1为具有抗肿瘤活性的联苯化合物的合成路线图；
其中，化合物1为异香草醛，化合物2为2-溴代异香草醛，化合物3为4-甲氧基-3-苄氧基-2-溴苯甲醛，化合物4为4-甲氧基-3-苄氧基-2-溴苯甲酸，化合物5为4-甲氧基-3-苄氧基-2-溴苯甲酰甲胺，化合物6为5，5’-二甲氧基-6，6’-二苄氧基联苯-2，2’-二甲酰甲胺，化合物7为5，5’-二甲氧基-6，6’-二羟基联苯-2，2’-二甲酰甲胺，化合物8为单羟基醚化的联苯化合物，化合物9为具有抗肿瘤活性的联苯化合物。
图中标注的反应条件具体为：
a为Fe，NaOAc，AcOH，Br2；b为BnCl，K2CO3；c为NaH2PO4，NaClO2，30％H2O2；d为SOCl2，DMF(cat)，CH2Cl2，CH2Cl2，30％CH3NH2；e为Cu，DMF；f为H2，Pd/C；g为K2CO3，CH3COCH3；h为K2CO3，CH3COCH3。
具体实施方式
本发明提供一种具有抗肿瘤活性的联苯化合物，该联苯化合物在体外和体内都表现出抗肿瘤活性，能够应用于抗肿瘤药物的制备。下面结合附图和实施例对本发明做详细说明，所述是对本发明的解释而不是限定。
本发明提供的具有抗肿瘤活性的联苯化合物，其化学结构式为：
Figure GDA0000020368780000031
其中，R1和R2可以相同或不同，R1、R2为苯环上的单取代、双取代或三取代，取代基为氢、羟基、氨基、卤素中的一种或几种。
下面结合图1所示的合成路线和具体的合成实施例来详细说明具有抗肿瘤活性的联苯化合物的制备方法。
实施例1结构式中R1、R2均为3-氯-4-氟的卤素的化合物，通过以下步骤制备：
2-氯-N-(3-氯-4-氟苯)乙酰胺的
1)异香草醛化(1)通过溴化反应制备合物2-溴代异香草醛(2)
将20.0g(0.132mol)异香草醛(1)、21.59g(0.263mol)乙酸钠和0.68g(0.012mol)的铁粉置于500mL三颈瓶中，加入120ml冰乙酸，室温搅拌30min；
搅拌完成后，在温度控制为23～25℃的条件下，滴加预先将7.0mL(0.14mol)液溴与30mL冰乙酸混合配制成的溶液，滴完后控温23～25℃继续搅拌3h；
然后加入250mL冰水，搅拌1h；过滤，固体蒸干，乙醇重结晶，得灰白色2-溴代异香草醛(2)固体产品24.59g，产率81％；
其理化性质为：mp 206-207℃；质谱为：EI-MS(m/z)：230.9([M+H]+)，核磁共振氢谱为：1H NMR(300MHz，CDCl3)；δppm 4.01(s，3H)，6.07(s，1H)，6.93(d，J＝8.5Hz，1H)，7.58(d，J＝8.5Hz，1H)，10.26(s，1H)。
2)2-溴代异香草醛(2)苄基保护反应制备化合物4-甲氧基-3-苄氧基-2-溴苯甲醛(3)
将6.90g(0.030mol)2-溴代异香草醛(2)悬浮于120mL无水乙醇中，然后加入12.44g(0.090mol)无水碳酸钾和5.20mL(0.045mol)氯化苄，于78℃加热回流反应4h；
待冷却至室温后过滤，滤液减压回收乙醇，然后加入140ml乙酸乙酯萃取：有机相依次用水、2mol/LNaOH溶液、2mol/L盐酸、饱和氯化钠水溶液洗涤，最后有机相再用无水硫酸钠干燥后减压蒸去溶剂，得淡黄色4-甲氧基-3-苄氧基-2-溴苯甲醛(3)粗品9.12g，产率95％；
其理化性质为：mp 79-81℃；质谱为：EI-MS(m/z)：320.9([M+H]+)；核磁共振氢谱为：1H NMR(300MHz，CDCl3)δppm 3.96(s，3H)，5.03(s，2H)，6.98(d，J＝9.2Hz，1H)，7.35-7.54(m，5H)，7.76(d，J＝8.4Hz，1H)，10.27(s，1H)。
3)4-甲氧基-3-苄氧基-2-溴苯甲醛(3)氧化制备化合物4-甲氧基-3-苄氧基-2-溴苯甲酸(4)
将9.60g(0.030mol)4-甲氧基-3-苄氧基-2-溴苯甲醛(3)溶于100mL四氢呋喃(THF)，然后加入40mL蒸馏水和2.16g(0.018mol，溶解后PH为5～6)NaH2PO4，室温搅拌均匀；
室温滴加预先将8.96g NaClO2(0.099mol)和6.8mL 30％H2O2(0.066mol)溶于25ml蒸馏水配成的溶液，滴完后再室温搅拌3h；
减压回收THF，然后加入160ml乙酸乙酯萃取，用2mol/L NaOH溶液洗至有机相无吸收；收集合并水相，并用浓盐酸酸化至PH为3～4，析出白色固体；过滤，烘干，得白色4-甲氧基-3-苄氧基-2-溴苯甲酸(4)固体产品9.37g，产率93％；
其理化性质为：mp 159-161℃；质谱为：EI-MS(m/z)：336.9([M+H]+)，核磁共振氢谱为：1H NMR(300MHz，CDCl3)δppm 3.94(s，3H)，5.03(s，2H)，6.93(d，J＝9.2Hz，1H)，7.37-7.56(m，5H)，7.87(d，J＝9.1Hz，1H)。
4)4-甲氧基-3-苄氧基-2-溴苯甲酸(4)通过两步反应制备化合物4-甲氧基-3-苄氧基-2-溴苯甲酰甲胺(5)
将5.04g(0.015mol)4-甲氧基-3-苄氧基-2-溴苯甲酸(4)溶于50mL二氯甲烷中，依次逐滴加入4.37mL(0.060mol)氯化亚砜和催化量的N，N-二甲基甲酰胺(DMF)，室温下搅拌反应3h；反应完全后，减压蒸除溶剂，将包含化合物4-甲氧基-3-苄氧基-2-溴苯甲酰氯的残余物溶于25mL无水二氯甲烷；
在冰浴条件下，将所得到的上述溶液逐滴加到10.31mL(0.090mmol)30％的甲胺水溶液中，滴加完成后室温反应4h；反应完全后，减压蒸除溶剂，用150mL乙酸乙酯萃取：然后依次用水、饱和碳酸氢钠溶液、饱和氯化钠水溶液洗涤有机相，最后有机相用无水硫酸钠干燥后减压蒸去溶剂，残留物经硅胶柱层析分离(洗脱剂按体积比为氯仿∶甲醇＝30∶1)得到白色固体4-甲氧基-3-苄氧基-2-溴苯甲酰甲胺(5)4.46g，产率85％；
其理化性质为：mp 142-144℃；质谱为：EI-MS(m/z)：350.9([M+H]+)，核磁共振氢谱为：1H NMR(300MHz，CDCl3)δppm 3.00(d，J＝4.3Hz，3H)，3.89(s，3H)，5.01(s，2H)，6.13(br，1H)，6.91(d，J＝7.2Hz，1H)，7.37-7.56(m，5H)，7.55(d，J＝7.0Hz，1H)。
5)4-甲氧基-3-苄氧基-2-溴苯甲酰甲胺(5)通过Ullmann反应去苄基保护基制备化合物5，5’-二甲氧基-6，6’-二苄氧基联苯-2，2’-二甲酰甲胺(6)
将3.49g(0.010mol)4-甲氧基-3-苄氧基-2-溴苯甲酰甲胺(5)溶于25mL无水N，N-二甲基甲酰胺，置于100mL三颈瓶中，加入6.40g(0.10mol)新处理(盐酸活化)的铜粉，在氮气保护下控温150～160℃回流4小时；
待冷却至室温后，过滤，滤液减压回收N，N-二甲基甲酰胺，加120mL氯仿萃取：再依次用2mol/L盐酸、饱和氯化钠水溶液洗涤有机相，并将有机相用无水硫酸钠干燥后减压蒸去溶剂，残留物经硅胶柱层析分离(洗脱剂按体积比为石油醚∶乙酸乙酯＝1∶1)得白色5，5’-二甲氧基-6，6’-二苄氧基联苯-2，2’-二甲酰甲胺(6)1.95g，产率72％；
其理化性质为：mp 176-180℃；质谱为：EI-MS(m/z)：540.1([M]+)，核磁共振氢谱为：1H NMR(300MHz，CDCl3)δppm 2.65(d，J＝4.6Hz，6H)，3.87(s，6H)，4.73(d，J＝10.9Hz，1H)，4.82(d，J＝10.8Hz，1H)，6.94-7.19(m，12H)，7.33(d，J＝8.4Hz，2H)。
6)化合物5，5’-二甲氧基-6，6’-二羟基联苯-2，2’-二甲酰甲胺(7)的制备
将3.11g(5.76mmol)化合物5，5’-二甲氧基-6，6’-二苄氧基联苯-2，2’-二甲酰甲胺(6)溶于100mL无水甲醇中，然后加入0.31g 10％的钯/碳催化剂(其中钯的质量比为10％)，氢气密闭体系中室温充分搅拌至无化合物(6)；
滤过钯/碳催化剂，依次用无水乙醇、二氯甲烷、乙酸乙酯、DMF洗涤钯/碳，减压蒸去溶剂得灰白色5，5’-二甲氧基-6，6’-二羟基联苯-2，2’-二甲酰甲胺(7)2.01g，产率97％；
其理化性质为：mp 166-168℃；质谱为：EI-MS(m/z)：360.1([M]+)，核磁共振氢谱为：1H NMR(300MHz，CDCl3)δppm 2.74(d，J＝4.2Hz，6H)，3.92(s，6H)，6.89(d，J＝8.4Hz，2H)，7.16(d，J＝8.5Hz，2H)。
7)5，5’-二甲氧基-6，6’-二羟基联苯-2，2’-二甲酰甲胺(7)羟基醚化制备化合物6-(2-(3-氯-4-氟-苯胺)-2-羰乙氧基)-6’-羟基-5，5’-二甲氧基-2，2’-二甲酰甲胺
将3.60g(10mmol)化合物5，5’-二甲氧基-6，6’-二羟基联苯-2，2’-二甲酰甲胺溶于(7)200mL无水丙酮中，加入4.15g(30mmol)无水碳酸钾，室温搅拌30分钟后，加入2.44g(11mmol)的2-氯-N-(3-氯-4-氟苯)乙酰胺，56℃加热回流反应8小时；
反应完全后，减压蒸除溶剂，残余物溶于250mL乙酸乙酯中，依次用2mol/L盐酸、饱和氯化钠水溶液洗涤有机相，最后有机相用无水硫酸钠干燥后减压蒸去溶剂，残留物经硅胶柱层析分离(洗脱剂按体积比为石油醚∶乙酸乙酯＝1∶1)得白色6-(2-(3-氯-4-氟-苯胺)-2-羰乙氧基)-6’-羟基-5，5’-二甲氧基-2，2’-二甲酰甲胺4.41g，产率83％；
8)6-(2-(3-氯-4-氟-苯胺)-2-羰乙氧基)-6’-羟基-5，5’-二甲氧基-2，2’-二甲酰甲胺(8)羟基醚化制备化合物6，6’-二(2-(3-氯-4-氟-苯胺)-2-羰乙氧基)-5，5’-二甲氧基-2，2’-二甲酰甲胺(9)
将5.31g(10mmol)化合物6-(2-(3-氯-4-氟-苯胺)-2-羰乙氧基)-6’-羟基-5，5’-二甲氧基-2，2’-二甲酰甲胺(8)200mL无水丙酮中，加入4.15g(30mmol)无水碳酸钾，室温搅拌30分钟后，加入2.44g(11mmol)的2-氯-N-(3-氯-4-氟苯)乙酰胺，56℃加热回流反应8小时；
反应完全后，减压蒸除溶剂，残余物溶于250mL乙酸乙酯中，依次用2mol/L盐酸、饱和氯化钠水溶液洗涤有机相，最后有机相用无水硫酸钠干燥后减压蒸去溶剂，残留物经硅胶柱层析分离(洗脱剂按体积比为石油醚∶乙酸乙酯＝1∶1)得白色6，6’-二(2-(3-氯-4-氟-苯胺)-2-羰乙氧基)-5，5’-二甲氧基-2，2’-二甲酰甲胺6.21g，产率85％；
其理化性质为：mp 129-131℃；质谱为：EI-MS(m/z)：733.2([M]+)，核磁共振氢谱为：1H NMR(300MHz，CDCl3)δppm 2.74(s，3H)，2.75(s，3H)，3.86(s，6H)，4.08(s，1H)，4.11(s，1H)，4.16(s，1H)，4.18(s，1H)，6.87(d，J＝7.8Hz，2H)，7.10(d，J＝7.9Hz，2H)，7.30(d，J＝8.7Hz，2H)，7.74(d，J＝6.3Hz，1H)，8.68(s，2H)。
所得联苯化合物6，6’-二(2-(3-氯-4-氟-苯胺)-2-羰乙氧基)-5，5’-二甲氧基-2，2’-二甲酰甲胺相当于图1所示的化合物(9)，其结构式如下：
Figure GDA0000020368780000081
实施例2结构式中R1为氢、R2为4-羟基的化合物，通过以下步骤制备：
步骤1)～6)与实施例1相同，也即从化合物异香草醛化(1)到化合物5，5’-二甲氧基-6，6’-二羟基联苯-2，2’-二甲酰甲胺(7)的制备步骤相同；之后在两个酚羟基醚化过程不同中，两个酚羟基先后与氯乙酰苯胺和氯乙酰4-羟基苯胺反应，具体为：
将3.60g(10mmol)化合物5，5’-二甲氧基-6，6’-二羟基联苯-2，2’-二甲酰甲胺溶于(7)200mL无水丙酮中，加入4.15g(30mmol)无水碳酸钾，室温搅拌30分钟后，加入1.86g(11mmol)的2-氯-N-(苯基)乙酰胺，56℃加热回流反应8小时；
反应完全后，减压蒸除溶剂，残余物溶于250mL乙酸乙酯中，依次用2mol/L盐酸、饱和氯化钠水溶液洗涤有机相，最后有机相用无水硫酸钠干燥后减压蒸去溶剂，残留物经硅胶柱层析分离(洗脱剂按体积比为石油醚∶乙酸乙酯＝1∶1)得白色6-(2-(苯胺)-2-羰乙氧基)-6’-羟基-5，5’-二甲氧基-2，2’-二甲酰甲胺4.02g，产率84％；
将4.78g(10mmol)化合物6-(苯胺)-2-羰乙氧基)-6’-羟基-5，5’-二甲氧基-2，2’-二甲酰甲胺(8)200mL无水丙酮中，加入4.15g(30mmol)无水碳酸钾，室温搅拌30分钟后，加入2.44g(11mmol)的2-氯-N-(4-羟基苯)乙酰胺，56℃加热回流反应8小时；
反应完全后，减压蒸除溶剂，残余物溶于250mL乙酸乙酯中，依次用2mol/L盐酸、饱和氯化钠水溶液洗涤有机相，最后有机相用无水硫酸钠干燥后减压蒸去溶剂，残留物经硅胶柱层析分离(洗脱剂按体积比为石油醚∶乙酸乙酯＝1∶1)得白色6-(2-(4-羟基苯胺)-2-羰乙氧基)-5，5’-二甲氧基-6’-苯胺-2-羰乙氧基)-2，2’-二甲酰甲胺5.59g，产率87％；
所得联苯化合物6-(2-(4-羟基苯胺)-2-羰乙氧基)-5，5’-二甲氧基-6’-苯胺-2-羰乙氧基)-2，2’-二甲酰甲胺相当于图1所示的化合物(9)，其结构式如下：
Figure GDA0000020368780000091
实施例3结构式中R1为3-氯-4-羟基、R2为3-氯-4-氟-5-氨基的化合物，通过以下步骤制备：
步骤1)～6)于实施例1相同，也即从化合物异香草醛化(1)到化合物5，5’-二甲氧基-6，6’-二羟基联苯-2，2’-二甲酰甲胺(7)的制备步骤相同；之后在两个酚羟基醚化过程不同中，两个酚羟基先后与2-氯-N-(3-氯-4-羟基苯)乙酰胺和2-氯-N-(3-氯-4-氟-5-氨基苯)乙酰胺反应，具体为：
将3.60g(10mmol)化合物5，5’-二甲氧基-6，6’-二羟基联苯-2，2’-二甲酰甲胺溶于(7)200mL无水丙酮中，加入4.15g(30mmol)无水碳酸钾，室温搅拌30分钟后，加入2.42g(11mmol)的2-氯-N-(3-氯-4-羟基苯)乙酰胺，56℃加热回流反应8小时；
反应完全后，减压蒸除溶剂，残余物溶于250mL乙酸乙酯中，依次用2mol/L盐酸、饱和氯化钠水溶液洗涤有机相，最后有机相用无水硫酸钠干燥后减压蒸去溶剂，残留物经硅胶柱层析分离(洗脱剂按体积比为石油醚∶乙酸乙酯＝1∶1)得白色6-(2-(3-氯-4-羟基-苯胺)-2-羰乙氧基)-6’-羟基-5，5’-二甲氧基-2，2’-二甲酰甲胺4.41g，产率81％；
将5.44g(10mmol)化合物6-(2-(3-氯-4-羟基-苯胺)-2-羰乙氧基)-6’-羟基-5，5’-二甲氧基-2，2’-二甲酰甲胺(8)200mL无水丙酮中，加入4.15g(30mmol)无水碳酸钾，室温搅拌30分钟后，加入2.61g(11mmol)的2-氯-N-(3-氯-4-氟-5-氨基苯)乙酰胺，56℃加热回流反应8小时；
反应完全后，减压蒸除溶剂，残余物溶于250mL乙酸乙酯中，依次用2mol/L盐酸、饱和氯化钠水溶液洗涤有机相，最后有机相用无水硫酸钠干燥后减压蒸去溶剂，残留物经硅胶柱层析分离(洗脱剂按体积比为石油醚∶乙酸乙酯＝1∶1)得白色6-(2-(3-氯-4-羟基-苯胺)-2-羰乙氧基)-5，5’-二甲氧基-6’-(2-(3-氯-4-氟-5-氨基苯)-2，2’-二甲酰甲胺6.27g，产率84％；
所得联苯化合物6-(2-(3-氯-4-羟基-苯胺)-2-羰乙氧基)-5，5’-二甲氧基-6’-(2-(3-氯-4-氟-5-氨基苯)-2，2’-二甲酰甲胺相当于图1所示的化合物(9)，其结构式如下：
Figure GDA0000020368780000111
联苯化合物的抗肿瘤活性验证实验
a、联苯化合物的体外抗肿瘤作用：
本发明提供的联苯化合物具有抗肿瘤作用，对肿瘤细胞有体外抑制增殖作用；在人非小细胞肺癌细胞(A549)，人结肠癌细胞(Caco-2)，人皮肤鳞癌细胞(A431)上具有细胞毒活性，可用于这些癌症的治疗；与阳性对照药塔斯品碱相比，个别化合物显示了更高的抑制肿瘤细胞增殖活性。
抗肿瘤验证采用MTT法检测待测联苯化合物对肿瘤细胞的生长抑制：
将处于对数生长期的人非小细胞肺癌细胞(A549)，人结肠癌细胞(Caco-2)，人皮肤鳞癌细胞(A431)，用0.25％的胰酶消化3～5分钟，吹打均匀后稀释成浓度为1×104～2×104个/mL的单细胞悬液，平行接种于96孔培养板中，每孔接种体积为200μL；于37℃、5％CO2培养箱中培养24小时；
然后以含0.25％DMSO(N，N-二甲基亚砜)的水溶液为阴性对照，以塔斯品碱作为阳性对照，待测样品加入4个不同浓度的塔斯品碱联苯衍生物(4×10-7mol/L；2×10-6mol/L；1×10-5mol/L；5×10-5mol/L)，每个浓度设5个复孔，继续培养48小时；
然后每孔均加入5mg/ml的MTT工作液10μL，混匀，37℃培养箱孵育4小时后取出，小心吸弃培养液，每孔加入150μl DMSO，振荡10min，酶联免疫检测仪测量各孔490nm处的紫外吸收值(OD值)，然后计算细胞抑制率，并根据抑制率求出IC50值；细胞抑制率的计算公式为：
抑制率％＝(阴性对照组OD值-用药组OD值)/阴性对照细胞OD值×100％
检测结果显示：与阴性对照相比，联苯化合物对上述3种肿瘤细胞均具有不同程度的体外抑制作用。
作为阳性对照药塔斯品碱对人非小细胞肺癌细胞(A549)，人结肠癌细胞(Caco-2)，人皮肤鳞癌细胞(A431)的半数抑制浓度(IC50)分别为：9.70μM，0.51μM，0.61μM；
待测联苯化合物对肿瘤细胞的抑制结果为：
化合物(6，6’-二(2-(3-氯-4-氟-苯胺)-2-羰乙氧基)-5，5’-二甲氧基-2，2’-二甲酰甲胺)对人非小细胞肺癌细胞(A549)，人结肠癌细胞(Caco-2)，人皮肤鳞癌细胞(A431)的半数抑制浓度(IC50)分别为：13.07μM，3.47μM，15.03μM；
化合物(6-(2-(3-氯-4-氟-苯胺)-2-羰乙氧基)-6’-羟基-5，5’-二甲氧基-2，2’-二甲酰甲胺)对人非小细胞肺癌细胞(A549)，人结肠癌细胞(Caco-2)，人皮肤鳞癌细胞(A431)的半数抑制浓度(IC50)分别为：73.51μM，20.33μM，217.42μM；
化合物(6-(2-(3-氯-4-氟-苯胺)-2-羰乙氧基)-5，5’-二甲氧基-6’-(2-吗啡-4-乙氧基)-2，2’-二甲酰甲胺)对人非小细胞肺癌细胞(A549)、人结肠癌细胞(Caco-2)和人皮肤鳞癌细胞(A431)的半数抑制浓度(IC50)分别为：194.39μM，33.14μM，25.06μM；
虽然与阳性对照相比，联苯化合物的半数抑制浓度(IC50)是高于塔斯品碱的，但是与阴性对照相比，其抑制肿瘤细胞增殖的效果还是非常明显的。
b、联苯化合物的体内抗肿瘤作用：
1)溶液及试药的配制
(1)0.4％台盼蓝溶液
精密称取台盼蓝4g，加少量三蒸水研磨，加三蒸水至100mL，滤纸过滤，得4％台盼蓝母液，4℃保存。使用时，用PBS稀释至0.4％。
(2)供试液的配制
称取11号，加入已灭菌的0.5％CMC-Na生理盐水溶液，超声15分钟，配制成浓溶液的溶液，稀释至所需浓度，用前摇匀。
2)SPF级动物房的消毒及饲养管理
洁净动物房设在空气过滤十万级环境中，放置层流架作为裸鼠的饲养条件。启用前，先用2％新洁而灭全面擦拭，然后按消毒区域的容积用高锰酸钾15g/m2加福尔马林15mL混和熏蒸。最后经紫外灯照射，细菌培养阴性才能使用。启用后常规消毒为：进动物房前后紫外灯照射30min，每2周用2％新洁而灭擦拭墙壁、天花板，每一个月用过氧乙酸喷射消毒。每三个月用甲醛和高锰酸钾熏蒸一次，每三个月将层流架的过滤材料拆下进行清洗。
每天饲喂全价营养饲料，饮水、垫料及鼠笼均用双层包布包装高压蒸汽灭菌消毒。经缓冲室紫外灯照射后去除外层包布，进入动物房。
进室前需风淋并用新洁而灭常规泡手、消毒、穿无菌衣、带袜的无菌裤、戴口罩、帽子，并戴无菌手套。每次操作完毕，用新洁而灭抹台面及地面。常规每周换两次笼具，投放3～4天的饲料与饮水。
3)接种
用0.25％胰蛋白酶消化待接种的不同种类的肿瘤细胞，台盼蓝染色后计活细胞数，稀释于无菌生理盐水中，使细胞密度为2.5×107·mL-1，每只裸鼠皮下接种0.2mL于右前肢腋下。
4)分组给药
待移植肿瘤组织体积达到100mm3时，随机分组，每组6只荷瘤裸鼠。其中阴性对照组为0.5％CMC-Na生理盐水组(已灭菌)，每只裸鼠给药0.2mL；阳性对照组为吉非替尼组，给药剂量为50mg·kg-1；联苯化合物组给药剂量分为大剂量15mg·kg-1，中剂量10mg·kg-1，小剂量5mg·kg-1，各组均灌胃给药。每天给药一次，连续给药14天。肿瘤体积和裸鼠体重每3天测一次。用游标卡尺测量肿瘤长径a(mm)及相垂直的短径b(mm)，并用公式V(mm3)＝(a×b2)×1/2计算体积。给药过程中注意观察小鼠有无体重下降、排稀便、拒食等现象并随时记录小鼠的异常情况。
5)结果观察与疗效评价
疗程结束之次日，将各组裸鼠逐个称体重，断颈处死，解剖，逐只剥取肿瘤，称量瘤重，并检查肿瘤有无坏死、感染，各个脏器有无异常等情况。，记算平均瘤重及肿瘤抑制率。
肿瘤抑制率(％)＝(对照组平均瘤重-实验组平均瘤重)/对照组平均瘤重×100％
联苯化合物(6-(2-(3-氯-4-氟-苯胺)-2-羰乙氧基)-5，5’-二甲氧基-6’-((2-(3-氯-4-氟-苯胺)-2，2’-二甲酰甲胺)抗肿瘤(裸鼠7721肝癌细胞)作用动物实验结果，如表1所示：
表1抗肝癌模型对照结果
Figure GDA0000020368780000141
表1的结果显示，联苯化合物对于构建的肝癌小鼠体内的肿瘤实体具有明显的抑制作用，抑瘤率达到了41.46％～52.20％，并且抑瘤效果表现为非剂量依赖。
联苯化合物(6-(2-(3-氯-4-氟-苯胺)-2-羰乙氧基)-5，5’-二甲氧基-6’-((2-(3-氯-4-氟-苯胺)-2，2’-二甲酰甲胺)抗肿瘤(裸鼠HT-29结肠癌细胞)作用动物实验结果，如表2所示：
表2抗结肠癌模型对照结果
Figure GDA0000020368780000142
表2的结果显示，联苯化合物对于构建的结肠癌小鼠体内的肿瘤实体具有明显的抑制作用，抑瘤率达到了7.33％～24.44％，而且大剂量的联苯化合物的抑瘤率与阳性对照的吉非替尼效果相当。
结合上述联苯化合物对体外肿瘤细胞系的抑制作用，以及联苯化合物对体内构建的肿瘤模型的抑制效果，可以得出，本发明提供的联苯化合物是一种能够抑制肿瘤的化合物，可用于抗肿瘤药物的制备。
c、本发明所述的抗肿瘤的药物的制备为：
所述的具有抗肿瘤活性的联苯化合物或其药物可接受的盐、衍生物、前药或立体异构体，应用于抗肿瘤的药物的制备；
或者具有抗肿瘤活性的联苯化合物或其药物可接受的盐、衍生物、前药或立体异构体作为药物组合物之一，结合药物可接受的赋形剂或稀释剂应用于抗肿瘤的药物的制备。
应用于抗肿瘤的药物的制备时，通过制药领域常用的手段可以制备成多种剂型，可以是口服剂型和注射剂，包括胶囊剂、片剂、颗粒剂、分散片、软胶囊、注射液、注射用冻干粉或注射用无菌分装粉。

Claims (4)

1.一种具有抗肿瘤活性的联苯化合物，其特征在于，其化学结构式为：
Figure FDA0000059140240000011
其中，R1、R2为单取代或三取代，取代基为氢、羟基、氨基、卤素中的一种或几种；
或者，R1、R2为双取代，取代基为氢、羟基、氨基中的一种或几种。
2.一种具有抗肿瘤活性的联苯化合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)异香草醛在铁粉催化作用下，与液溴反应得到2-溴代异香草醛；
2)将2-溴代异香草醛通过苄基保护反应，得到4-甲氧基-3-苄氧基-2-溴苯甲醛；
3)在PH为5～6条件下，用亚氯酸钠和过氧化氢的二元氧化体系，将4-甲氧基-3-苄氧基-2-溴苯甲醛氧化为4-甲氧基-3-苄氧基-2-溴苯甲酸；
4)将4-甲氧基-3-苄氧基-2-溴苯甲酸通过酰化反应生成4-甲氧基-3-苄氧基-2-溴苯甲酰氯，然后再与甲胺反应得到4-甲氧基-3-苄氧基-2-溴苯甲酰甲胺；
5)4-甲氧基-3-苄氧基-2-溴苯甲酰甲胺通过Ullmann反应得到苄基保护的联苯双酰胺化合物：5，5’-二甲氧基-6，6’-二苄氧基联苯-2，2’-二苯甲酰甲胺；
6)5，5’-二甲氧基-6，6’-二苄氧基联苯-2，2’-二苯甲酰甲胺通过催化氢化脱去苄基保护基，得到带有两个酚羟基的联苯双酰胺化合物：5，5’-二甲氧基-6，6’-二羟基联苯-2，2’-二苯甲酰甲胺；
7)5，5’-二甲氧基-6，6’-二羟基联苯-2，2’-二苯甲酰甲胺的1个酚羟基与氯乙酰取代苯胺的化合物通过醚化反应，得到单羟基醚化的联苯化合物；
8)单羟基醚化的联苯化合物的另一个羟基与氯乙酰取代苯胺的化合物通过醚化反应，得到目标化合物；
所述的氯乙酰取代苯胺的化合物为氯乙酰羟基取代苯胺或氯乙酰氨基取代苯胺的化合物。
3.权利要求1所述的具有抗肿瘤活性的联苯化合物应用于抗肿瘤药物的制备。
4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述是应用于抗结直肠癌、肺癌、肝癌、乳腺癌或胰腺癌药物的制备。
CN2010101378391A 2010-04-02 2010-04-02 一种具有抗肿瘤活性的联苯化合物及其制备方法 Expired - Fee Related CN101792401B (zh)

Priority Applications (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN2010101378391A CN101792401B (zh) 2010-04-02 2010-04-02 一种具有抗肿瘤活性的联苯化合物及其制备方法
PCT/CN2010/079868 WO2011120314A1 (zh) 2010-04-02 2010-12-16 一种作为抗肿瘤药物的联苯化合物及其制备方法
PCT/CN2010/079862 WO2011120313A1 (zh) 2010-04-02 2010-12-16 一种具有抗肿瘤活性的联苯化合物及其制备方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN2010101378391A CN101792401B (zh) 2010-04-02 2010-04-02 一种具有抗肿瘤活性的联苯化合物及其制备方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN101792401A CN101792401A (zh) 2010-08-04
CN101792401B true CN101792401B (zh) 2011-11-16

Family

ID=42585345

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN2010101378391A Expired - Fee Related CN101792401B (zh) 2010-04-02 2010-04-02 一种具有抗肿瘤活性的联苯化合物及其制备方法

Country Status (2)

Country Link
CN (1) CN101792401B (zh)
WO (1) WO2011120313A1 (zh)

Families Citing this family (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2011120314A1 (zh) * 2010-04-02 2011-10-06 西安交通大学 一种作为抗肿瘤药物的联苯化合物及其制备方法
CN101792401B (zh) * 2010-04-02 2011-11-16 西安交通大学 一种具有抗肿瘤活性的联苯化合物及其制备方法
CN102010347B (zh) * 2010-11-19 2014-08-06 西安交通大学 一种作为抗肿瘤药物的联苯化合物及其制备方法
CN103772228B (zh) * 2014-01-16 2016-01-20 华东理工大学 联苯双酰胺类化合物及其制备和用途

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5932617A (en) * 1998-02-06 1999-08-03 Woundfast Pharmaceuticals Inc. Wound-treating composition and method
CN1800187A (zh) * 2006-01-13 2006-07-12 贺浪冲 塔斯品碱的制备方法以及在制备治疗肿瘤药物中的应用
CN101735100A (zh) * 2009-12-04 2010-06-16 西安交通大学 一种塔斯品碱联苯衍生物及其制备方法

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101234951B (zh) * 2008-02-04 2010-06-02 厦门大学 联苯类化合物及其制备方法和应用
CN101654401B (zh) * 2008-08-18 2013-06-05 中国人民解放军军事医学科学院毒物药物研究所 不对称联苯类化合物、含有它的药物组合物及其用途
CN101792401B (zh) * 2010-04-02 2011-11-16 西安交通大学 一种具有抗肿瘤活性的联苯化合物及其制备方法

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5932617A (en) * 1998-02-06 1999-08-03 Woundfast Pharmaceuticals Inc. Wound-treating composition and method
CN1800187A (zh) * 2006-01-13 2006-07-12 贺浪冲 塔斯品碱的制备方法以及在制备治疗肿瘤药物中的应用
CN101735100A (zh) * 2009-12-04 2010-06-16 西安交通大学 一种塔斯品碱联苯衍生物及其制备方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN101792401A (zh) 2010-08-04
WO2011120313A1 (zh) 2011-10-06

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN101580477B (zh) 脱氢枞胺衍生物及其在杀菌抗肿瘤药物中的应用
CN101104618B (zh) 长链烷基小檗碱盐衍生物、合成方法及用途
CN101792401B (zh) 一种具有抗肿瘤活性的联苯化合物及其制备方法
CN101967135B (zh) 一种4-芳基香豆素类化合物的制备方法
CN103044395B (zh) 含有地氯雷他定结构的氨基酸类衍生物、其制备方法和用途
CN108864088B (zh) 具有抗细菌活性的新型异喹啉药物分子的制备方法
CN101012213A (zh) 一类染料木素的衍生物及其制法和用途
CN102666530A (zh) 二氯乙酸伊马替尼及含有相同成分的抗癌药剂
CN101735100B (zh) 一种塔斯品碱联苯衍生物及其制备方法
CN102911118B (zh) 一类苯并氮杂卓类衍生物及其制备方法和用途
CN103864765B (zh) 含有五元杂环的苯并氮杂卓类衍生物、其制备方法和用途
CN103965175B (zh) 4‑(取代苯氨基)喹唑啉类化合物、其制备方法及应用
CN102010347B (zh) 一种作为抗肿瘤药物的联苯化合物及其制备方法
CN104292199B (zh) 含苄基哌嗪的染料木素衍生物制法及其对胃黏膜保护应用
CN101974016A (zh) 酰胺类化合物及其制备方法和用途
CN102942529A (zh) 4-(4-取代哌嗪)-5,6,7-三烷氧基喹唑啉类化合物及其制备方法和应用
CN106432076B (zh) 一种环丙沙星c3酰胺衍生物及其制备方法和应用
CN102746212B (zh) β-榄香烯吲哚衍生物及其制备和应用
CN104926804B (zh) 一类具有抗肿瘤作用的化合物、其制备方法和用途
CN103435560A (zh) 一类带柔性侧链的苊并[1,2-b]喹喔啉衍生物的合成及其应用
CN102786458B (zh) 吡咯甲酰胺衍生物、其制备方法和用途
CN103351383B (zh) 5-氟尿嘧啶氮氧自由基抗肿瘤药物
CN101787029A (zh) 长链烷基黄连碱卤酸盐衍生物、合成方法及用途
CN103880793B (zh) 含呋喃亚胺类化合物及其制备方法和用途
CN106117176B (zh) 二氢双苯并恶庚衍生物及其组合物与应用

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20111116

Termination date: 20150402

EXPY Termination of patent right or utility model