CN101774935A - 利用模拟移动床分离提纯l-鸟氨酸的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明属于生物制药领域,公开了利用模拟移动床分离提纯L-鸟氨酸的方法。该方法是将L-鸟氨酸发酵液首先利用超滤法去除菌体及固形物;再将料液进入模拟移动床系统吸附、洗杂、洗脱L-鸟氨酸、收集洗脱液及柱子再生;收集的洗脱液经浓缩、脱色、盐酸调节pH4.5-5.0、结晶、干燥得到L-鸟氨酸盐酸盐晶体。采用本方法分离提纯的L-鸟氨酸得率高,纯度高,成本低,环保,适于工业化生产。

Description

利用模拟移动床分离提纯L-鸟氨酸的方法
技术领域
本发明属于生物制药领域,涉及一种利用模拟移动床从发酵液中分离提纯L-鸟氨酸的方法。
背景技术
L-鸟氨酸是一种重要的非蛋白质组成氨基酸,也是生物合成L-精氨酸的前体。L-鸟氨酸在人体内起着非同寻常的作用,尿素的形成必须有L-鸟氨酸的参与,L-鸟氨酸的缺乏可能会给生命带来危险。现今L-鸟氨酸在医药和食品工业中应用广泛,主要用于急慢性肝炎、肝性脑病等疾病的治疗(GB1020492,1966)、病人机体的恢复、运动饮料、防治良性的囊肿和恶性肿瘤(CA2404275,2001)等方面。
目前,国内外对L-鸟氨酸制备方法的报道主要有化学法、酶转化法、微生物发酵法。化学法主要是碱水解L-精氨酸和丙烯酸跟氰化钠合成DL-鸟氨酸,另外化学法需要大量有机溶剂,对环境污染严重;酶转化法以L-精氨酸为原料,发酵培养细胞菌体,利用所产生的酶催化转化为L-鸟氨酸;微生物发酵法生产L-鸟氨酸,主要使用价格低廉的原料,进行液体深层发酵,直接产生L-鸟氨酸,现在发酵水平相对较国外而且低,但随着菌种和工艺技术研究的深入,其发酵产量也将不断的提高。
上述方法获得的L-鸟氨酸发酵液中杂质多,分离提纯困难。一些文献报道了利用传统的离子交换技术分离发酵液中的L-鸟氨酸,这种方法分离提纯的L-鸟氨酸收率低,水和洗脱剂消耗大,树脂再生需要消耗大量的酸碱,使整个分离提纯成本较高。因此需要开发高效的分离提纯工艺,以实现L-鸟氨酸的工业化生产。
发明内容
本发明的目的在于提供一种超滤膜与模拟移动床相结合的分离提纯L-鸟氨酸的方法。
本发明的目的可以通过下列技术措施来达到:
利用模拟移动床从发酵液中分离提纯L-鸟氨酸的方法,该方法包括以下步骤:
a.L-鸟氨酸发酵液首先利用超滤法去除菌体及固形物,得进料液;
b.步骤a得到的进料液进入模拟移动床系统吸附、洗杂、洗脱L-鸟氨酸、收集洗脱液及柱子再生;
c.步骤b收集的洗脱液经浓缩、脱色、盐酸调节pH4.5-5.0、结晶、干燥得到L-鸟氨酸盐酸盐晶体。
步骤c洗脱液经浓缩后的蒸馏水还可用于步骤b操作的洗杂工序。
所述的利用模拟移动床从发酵液中分离提纯L-鸟氨酸的方法,其中超滤膜采用截流分子量为1万-15万道尔顿的陶瓷膜,超滤系统操作压力为0.3-0.4MPa,操作温度为50-70℃;陶瓷膜优选二氧化钛陶瓷膜。
所述的利用模拟移动床从发酵液中分离提纯L-鸟氨酸的方法,其中模拟移动床系统由7-20根离子交换柱串联组成,模拟移动床系统分为吸附区、洗杂区、洗脱区和再生清洗区四个区;吸附区有3~8柱,洗杂区有1~3柱,洗脱区有2~6柱,再生清洗区有1~3柱;进料液入口与萃余液出口位于吸附区,洗杂剂入口与洗杂液出口位于洗杂区,洗脱剂入口与萃取液(即洗脱液,下同)出口位于洗脱区,再生剂入口与出口位于再生区;将进料液入口、洗脱剂入口、萃取液出口及萃余液出口沿着料液流动方向分别进行周期性切换,收集洗脱液;
周期性切换是指通过调节进料液、洗杂剂、洗脱剂、再生剂的流量,使得各区的第一根柱子处理完全后,同时切换进入下一区,成为下一区的最后一根柱子,执行下一区流程。
所述的利用模拟移动床从发酵液中分离提纯L-鸟氨酸的方法,其中离子交换柱填料为苯乙烯系强酸性阳离子交换树脂JK006;每根柱子的填料量1000~1500mL。
所述的利用模拟移动床从发酵液中分离提纯L-鸟氨酸的方法,其中进入模拟移动床系统的进料液中L-鸟氨酸浓度为20-30g/L,pH为1.5-2.5;洗脱剂为pH10-14的氨水溶液,洗杂剂和再生剂均为中性去离子水;以柱子直径为70mm计,进料液流量20-30mL/min,洗脱剂流量10-20mL/min,洗杂剂流量为50-60mL/min,再生剂流量为70-80mL/min,切换时间为2-4h。
所述的利用模拟移动床从发酵液中分离提纯L-鸟氨酸的方法,其中模拟移动床系统工作温度15-40℃。
本发明方法中所用的L-鸟氨酸发酵液优选采用谷氨酸棒杆菌(Corynebacteriumglutamicum)ATCC 13232液体深层发酵得到的L-鸟氨酸发酵液,或者粪肠球菌(Enterococcus faecalis)CGMCC NO.1786酶转化L-精氨酸发酵得到的L-鸟氨酸发酵液,或者固定化粪链球菌(fecal streptococcus)ATCC8043、粪产碱杆菌(Alcaligenes faecalis)ATCC21400、格氏沙雷氏菌(Serratia grimesii)等细胞酶法转化L-精氨酸发酵得到的L-鸟氨酸发酵液。
本发明提及的细菌均为现有技术公开。采用细菌发酵制备得到的L-鸟氨酸发酵液均可采用本发明所述的分离提纯方法。
模拟移动床系统通常包括恒流泵、带夹套离子交换柱、控制阀、pH计、温度计。
L-鸟氨酸的溶解度太大,因此让其成盐酸盐的形式进行结晶。采用盐酸进行pH调节的同时也与L-鸟氨酸形成盐酸盐。
离子交换柱高径比可以是3~5∶1(为方便操作过程中的参数控制,实际操作时可限定为同一高径比);
“各区第一根柱子处理完全”是指吸附区第一根柱子吸附饱和,洗杂区第一根柱子杂质完全洗掉;洗脱区第一根柱子L-鸟氨酸完全被洗脱;再生区第一根柱子离子交换树脂完全被再生,能满足下一轮吸附。
“各区第一根柱子”是指各区液体入口处的柱子。
“周期性切换”的时机是预先采用各区单柱实验确定切换时间,即在模拟移动床的其他实验条件确定后(如树脂类型、装填量、高径比、系统温度等一致,各区液体的类型、pH、各区柱子数量等明确),在相同时间内,调节各区流速,使得各区第一根柱子处理完全,进行切换。
在交待了柱子的填料体积,控制流量方便操作。也可以换算成流速,如所用柱子的直径是70mm,截面积就是38.48cm2,即10mL/min转换为流速是0.2599cm/min,其他流速可以分别计算。
本发明的有益效果:
1、经超滤法处理的L-鸟氨酸发酵液几乎没有固形物,通过萃余液回收利用,确保在模拟移动床系统中树脂高吸附效率。
2、利用模拟移动床系统分离L-鸟氨酸,实现了分离过程自动化和连续化,提取收率及产品纯度显著提高。
3、树脂的利用率高,洗脱剂的消耗少,省去了树脂再生的酸碱消耗,提取成本降低。
4、减少了离子交换工艺的酸碱废液排放,步骤c获得的洗脱液经浓缩后的蒸馏水还可用于b操作的洗杂工序,节约成本,改善生产环境,实现了廉价、清洁生产,大大提高收率。
5、本方法克服用了传统方法处理L-鸟氨酸发酵液过程中周期长、消耗大、成本高等缺点,为实现发酵法生产L-鸟氨酸的工业化奠定基础。
附图说明
图1是本发明采用的14柱模拟移动床系统操作示意图。
具体实施方式
以下通过实施例对本发明作进一步的阐述。
一般说明:
实施例中采用的L-鸟氨酸发酵液可通过下列方法制备得到:
谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)ATCC 13232液体深层发酵制备L-鸟氨酸。
种子培养基:葡萄糖25g,酵母膏l0g,(NH4)2SO4 15g,MgSO4·7H2O 2.5g,KH2PO41g,K2HPO4·3H2O 0.5g,NaH2PO4·2H2O 0.5g,CaCO3 10g,加水至1000mL,pH7.0-7.2,0.1Mpa灭菌10min。
发酵培养基:葡萄糖60g,酵母膏30g,(NH4)2SO4 50g,MgSO4·7H2O 2.50g,KH2PO41g,K2HPO4·3H2O 0.5g,Na2HPO4·2H2O 0.50g,CaCO3 10g,FeSO4·7H2O 36.6mg/L,MnSO4·H2O 22.38mg/L,ZnSO4·7H2O 17.8mg/L,Biotin 0.05mg/L,VB1 0.05mg/L,加水至1000mL,pH7.0-7.2,0.1Mpa灭菌10min。
种子培养:培养基初始pH 7.0;装液量为容器体积的10%;转速为200r/min;培养温度为28℃,培养时间10h。
发酵培养:发酵培养基初始pH 7.2;装液量为发酵罐体积的16%;接种量为发酵培养基体积的5%;转速为200r/min;发酵温度为30℃,发酵周期为72h,收集发酵液用于分离提纯L-鸟氨酸。
可用于发酵制备L-鸟氨酸发酵液的细菌及发酵方法在现有技术中均有记载,利用这些细菌如粪肠球菌(Enterococcus faecalis)CGMCC NO.1786、粪链球菌(fecalstreptococcus)ATCC8043、粪产碱杆菌(Alcaligenes faecalis)ATCC21400、解蛋白弧菌(Vibrio proteolyticus)、中间气单胞菌(Aeromonas mdeia)、栖息微球菌(Micrococcussedentarius)、格氏沙雷氏菌(Serratia grimesii)等发酵制备得到的L-鸟氨酸发酵液同样也可以采用本发明方法分离提纯L-鸟氨酸。
实施例1
上述L-鸟氨酸发酵液首先利用超滤法(15万道尔顿的二氧化钛陶瓷膜超滤,超滤操作压力为0.38MPa,操作温度为55℃)去除菌体及固形物,得超滤液(即进料液,下同);
结合图1,模拟移动床系统依次分为吸附区、洗杂区、洗脱区和再生清洗区四个区;进料液入口与萃余液出口位于吸附区,洗杂剂入口与洗杂液出口位于洗杂区,洗脱剂入口与萃取液(即洗脱液,下同)出口位于洗脱区,再生剂入口与出口位于再生区;模拟移动床系统采用14柱,其中吸附区有6柱,洗杂区有2柱,洗脱区有4柱,再生清洗区有2柱。离子交换柱填料为苯乙烯系强酸性阳离子交换树脂JK006,填料量1200mL,柱子的直径70mm,高径比5∶1。模拟移动床系统工作温度20℃。将进料液入口、洗脱剂入口、萃取液出口及萃余液出口沿着料液流动方向分别进行周期性切换,收集洗脱液。周期性切换是指通过调节进料液、洗杂剂、洗脱剂、再生剂的流量,使得各区的第一根柱子处理完全后,切换进入下一区,成为下一区的最后一根柱子,执行下一区流程。
取80L进料液(其中L-鸟氨酸的浓度为25.1g/L,pH控制在2.0)以25mL/min的流量从进料液入口进入模拟移动床系统;洗脱剂为0.5mol/L的氨水溶液,洗脱剂流量15mL/min;洗杂剂和再生剂均为中性去离子水,洗杂剂流量为50mL/min,再生剂流量为72mL/min,每2.9小时将进料液入口、洗脱剂入口、萃取液出口及萃余液出口沿着料液流动方向分别进行周期性切换(在此流速下,各区第一根柱子在此时间均能够处理完全)。
进料液经吸附、洗杂、洗脱、收集萃取液,柱子再生;
萃取液(洗脱液)经浓缩、脱色、盐酸调节pH4.5、结晶、干燥得到L-鸟氨酸盐酸盐晶体2.24千克,纯度为98.8%,收率为86.4%。洗脱液经浓缩后的蒸馏水还可用于洗杂工序。
实施例2:
上述L-鸟氨酸发酵液首先利用超滤法(15万道尔顿的二氧化钛陶瓷膜超滤,超滤操作压力为0.38MPa,操作温度为58℃)去除菌体及固形物,得超滤液(即进料液);
结合图1,模拟移动床系统依次分为吸附区、洗杂区、洗脱区和再生清洗区四个区;进料液入口与萃余液出口位于吸附区,洗杂剂入口与洗杂液出口位于洗杂区,洗脱剂入口与萃取液出口位于洗脱区,再生剂入口与出口位于再生区;模拟移动床系统采用14柱,其中吸附区有6柱,洗杂区有2柱,洗脱区有4柱,再生清洗区有2柱。离子交换柱填料为苯乙烯系强酸性阳离子交换树脂JK006,填料量1200mL,柱子的直径70mm,高径比5∶1。模拟移动床系统工作温度25℃。将进料液入口、洗脱剂入口、萃取液出口及萃余液出口沿着料液流动方向分别进行周期性切换,收集洗脱液。周期性切换是指通过调节进料液、洗杂剂、洗脱剂、再生剂的流量,使得各区的第一根柱子处理完全后,切换进入下一区,成为下一区的最后一根柱子,执行下一区流程。
取80L进料液(其中L-鸟氨酸的浓度为23.5g/L,pH控制在2.0)以20mL/min的流量从进料液入口进入模拟移动床系统;洗脱剂为0.5mol/L的氨水溶液,洗脱剂流量12mL/min;洗杂剂和再生剂均为中性去离子水,洗杂剂流量为50mL/min,再生剂流量为75mL/min,每3.5小时将进料液入口、洗脱剂入口、萃取液出口及萃余液出口沿着料液流动方向分别进行周期性切换(在此流速下,各区第一根柱子在此时间均能够处理完全)。
进料液经吸附、洗杂、洗脱、收集萃取液(洗脱液);
萃取液(洗脱液)经浓缩、脱色、盐酸调节pH4.5、结晶、干燥得到L-鸟氨酸盐酸盐晶体2.13千克,纯度为99.2%,收率为88.1%。洗脱液经浓缩后的蒸馏水还可用于洗杂工序。
实施例3:
上述L-鸟氨酸发酵液首先利用超滤法(5万道尔顿的二氧化钛陶瓷膜超滤,超滤操作压力为0.35MPa,操作温度为60℃)去除菌体及固形物,得超滤液(即进料液);
结合图1,模拟移动床系统依次分为吸附区、洗杂区、洗脱区和再生清洗区四个区;进料液入口与萃余液出口位于吸附区,洗杂剂入口与洗杂液出口位于洗杂区,洗脱剂入口与萃取液出口位于洗脱区,再生剂入口与出口位于再生区;模拟移动床系统采用14柱,其中吸附区有6柱,洗杂区有2柱,洗脱区有4柱,再生清洗区有2柱。离子交换柱填料为苯乙烯系强酸性阳离子交换树脂JK006,填料量1200mL,柱子的直径70mm,高径比5∶1。模拟移动床系统工作温度25℃。将进料液入口、洗脱剂入口、萃取液出口及萃余液出口沿着料液流动方向分别进行周期性切换,收集洗脱液。周期性切换是指通过调节进料液、洗杂剂、洗脱剂、再生剂的流量,使得各区的第一根柱子处理完全后,切换进入下一区,成为下一区的最后一根柱子,执行下一区流程。
取80L进料液(其中L-鸟氨酸的浓度为27.6g/L,pH控制在2.5)以25mL/min的流量从进料液入口进入模拟移动床系统;洗脱剂为0.8mol/L的氨水溶液,洗脱剂流量12mL/min;洗杂剂和再生剂均为中性去离子水,洗杂剂流量为50mL/min,再生剂流量为72mL/min,每3.2小时将进料液入口、洗脱剂入口、萃取液出口及萃余液出口沿着料液流动方向分别进行周期性切换(在此流速下,各区第一根柱子在此时间均能够处理完全)。
进料液经吸附、洗杂、洗脱、收集萃取液(洗脱液);
萃取液(洗脱液)经浓缩、脱色、盐酸调节pH4.5、结晶、干燥得到L-鸟氨酸盐酸盐晶体2.54千克,纯度为98.5%,收率为88.8%。洗脱液经浓缩后的蒸馏水还可用于洗杂工序。
实施例4:
上述L-鸟氨酸发酵液首先利用超滤法(5万道尔顿的二氧化钛陶瓷膜超滤,超滤操作压力为0.36MPa,操作温度为60℃)去除菌体及固形物,得超滤液(即进料液);
结合图1,模拟移动床系统依次分为吸附区、洗杂区、洗脱区和再生清洗区四个区;进料液入口与萃余液出口位于吸附区,洗杂剂入口与洗杂液出口位于洗杂区,洗脱剂入口与萃取液出口位于洗脱区,再生剂入口与出口位于再生区;模拟移动床系统采用14柱,其中吸附区有6柱,洗杂区有2柱,洗脱区有4柱,再生清洗区有2柱。离子交换柱填料为苯乙烯系强酸性阳离子交换树脂JK006,填料量1200mL,柱子的直径70mm,高径比5∶1。模拟移动床系统工作温度25℃。将进料液入口、洗脱剂入口、萃取液出口及萃余液出口沿着料液流动方向分别进行周期性切换,收集洗脱液。周期性切换是指通过调节进料液、洗杂剂、洗脱剂、再生剂的流量,使得各区的第一根柱子处理完全后,切换进入下一区,成为下一区的最后一根柱子,执行下一区流程。
取80L进料液(其中L-鸟氨酸的浓度为25.5g/L,pH控制在2.5)以20mL/min的流量从进料液入口进入模拟移动床系统;洗脱剂为0.9mol/L的氨水溶液,洗脱剂流量12mL/min;洗杂剂和再生剂均为中性去离子水,洗杂剂流量为50mL/min,再生剂流量为75mL/min,每3.5小时将进料液入口、洗脱剂入口、萃取液出口及萃余液出口沿着料液流动方向分别进行周期性切换(在此流速下,各区第一根柱子在此时间均能够处理完全)。
进料液经吸附、洗杂、洗脱、收集萃取液(洗脱液);
萃取液(洗脱液)经浓缩、脱色、盐酸调节pH4.5、结晶、干燥得到L-鸟氨酸盐酸盐晶体2.30千克,纯度为99.1%,收率为87.6%。洗脱液经浓缩后的蒸馏水还可用于洗杂工序。
实施例5:
上述L-鸟氨酸发酵液首先利用超滤法(1万道尔顿的二氧化钛陶瓷膜超滤,超滤操作压力为0.34MPa,操作温度为65℃)去除菌体及固形物,得超滤液(即进料液);
结合图1,模拟移动床系统依次分为吸附区、洗杂区、洗脱区和再生清洗区四个区;进料液入口与萃余液出口位于吸附区,洗杂剂入口与洗杂液出口位于洗杂区,洗脱剂入口与萃取液出口位于洗脱区,再生剂入口与出口位于再生区;模拟移动床系统采用14柱,其中吸附区有6柱,洗杂区有2柱,洗脱区有4柱,再生清洗区有2柱。离子交换柱填料为苯乙烯系强酸性阳离子交换树脂JK006,填料量1200mL,柱子的直径70mm,高径比5∶1。模拟移动床系统工作温度25℃。将进料液入口、洗脱剂入口、萃取液出口及萃余液出口沿着料液流动方向分别进行周期性切换,收集洗脱液。周期性切换是指通过调节进料液、洗杂剂、洗脱剂、再生剂的流量,使得各区的第一根柱子处理完全后,切换进入下一区,成为下一区的最后一根柱子,执行下一区流程。
取80L进料液(其中L-鸟氨酸的浓度为22.7g/L,pH控制在1.9)以25mL/min的流量从进料液入口进入模拟移动床系统;洗脱剂为0.9mol/L的氨水溶液,洗脱剂流量15mL/min;洗杂剂和再生剂均为中性去离子水,洗杂剂流量为55mL/min,再生剂流量为78mL/min,每2.5小时将进料液入口、洗脱剂入口、萃取液出口及萃余液出口沿着料液流动方向分别进行周期性切换(在此流速下,各区第一根柱子在此时间均能够处理完全)。
进料液经吸附、洗杂、洗脱、收集萃取液(洗脱液);
萃取液(洗脱液)经浓缩、脱色、盐酸调节pH4.5、结晶、干燥得到L-鸟氨酸盐酸盐晶体2.08千克,纯度为99.4%,收率为89.2%。洗脱液经浓缩后的蒸馏水还可用于洗杂工序。

Claims (8)

1.利用模拟移动床从发酵液中分离提纯L-鸟氨酸的方法,其特征在于该方法包含下列步骤:
a.L-鸟氨酸发酵液首先利用超滤法去除菌体及固形物,得进料液;
b.步骤a得到的进料液进入模拟移动床系统吸附、洗杂、洗脱L-鸟氨酸、收集洗脱液及柱子再生;
c.步骤b收集的洗脱液经浓缩、脱色、盐酸调节pH4.5-5.0、结晶、干燥得到L-鸟氨酸盐酸盐晶体。
2.根据权利要求1所述的利用模拟移动床从发酵液中分离提纯L-鸟氨酸的方法,其特征在于:超滤膜采用截流分子量为1万-15万道尔顿的陶瓷膜,超滤系统操作压力为0.3-0.4MPa,操作温度为50-70℃;陶瓷膜优选二氧化钛陶瓷膜。
3.根据权利要求1所述的利用模拟移动床从发酵液中分离提纯L-鸟氨酸的方法,其特征在于:模拟移动床系统由7-20根离子交换柱串联组成,模拟移动床系统分为吸附区、洗杂区、洗脱区和再生清洗区四个区;吸附区有3~8柱,洗杂区有1~3柱,洗脱区有2~6柱,再生清洗区有1~3柱;进料液入口与萃余液出口位于吸附区,洗杂剂入口与洗杂液出口位于洗杂区,洗脱剂入口与萃取液出口位于洗脱区,再生剂入口与出口位于再生区;将进料液入口、洗脱剂入口、萃取液出口及萃余液出口沿着料液流动方向分别进行周期性切换,收集洗脱液;
周期性切换是指通过调节进料液、洗杂剂、洗脱剂、再生剂的流量,使得各区的第一根柱子处理完全后,同时切换进入下一区,成为下一区的最后一根柱子,执行下一区流程。
4.根据权利要求1所述的利用模拟移动床从发酵液中分离提纯L-鸟氨酸的方法,其特征在于离子交换柱填料为苯乙烯系强酸性阳离子交换树脂JK006。
5.根据权利要求4所述的利用模拟移动床从发酵液中分离提纯L-鸟氨酸的方法,其特征在于:每根柱子的填料量1000~1500mL。
6.根据权利要求1所述的利用模拟移动床从发酵液中分离提纯L-鸟氨酸的方法,其特征在于:进入模拟移动床系统的进料液中L-鸟氨酸浓度为20-30g/L,pH为1.5-2.5;洗脱剂为pH10-14的氨水溶液,洗杂剂和再生剂均为中性去离子水;以柱子直径为70mm计,进料液流量20-30mL/min,洗脱剂流量10-20mL/min,洗杂剂流量为50-60mL/min,再生剂流量为70-80mL/min,切换时间为2-4h。
7.根据权利要求1所述的利用模拟移动床从发酵液中分离提纯L-鸟氨酸的方法,其特征在于:模拟移动床系统工作温度15-40℃。
8.根据权利要求1所述的利用模拟移动床从发酵液中分离提纯L-鸟氨酸的方法,其特征在于L-鸟氨酸发酵液是采用谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)ATCC13232液体深层发酵得到的L-鸟氨酸发酵液或粪肠球菌(Enterococcus faecalis)CGMCCNO.1786酶转化L-精氨酸发酵或固定化粪链球菌(fecal streptococcus)ATCC8043、粪产碱杆菌(Alcaligenes faecalis)ATCC21400、格氏沙雷氏菌(Serratia grimesii)细胞酶法转化L-精氨酸发酵得到的L-鸟氨酸发酵液。
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Cited By (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102775321A (zh) * 2012-07-05 2012-11-14 广东肇庆星湖生物科技股份有限公司 一种l-鸟氨酸盐酸盐的提纯方法
CN102824758A (zh) * 2012-08-24 2012-12-19 安徽丰原发酵技术工程研究有限公司 一种用模拟移动床色谱分离扑热息痛的系统和方法
CN103059105A (zh) * 2012-12-28 2013-04-24 三达膜科技(厦门)有限公司 硫酸粘菌素的提取方法
CN104592047A (zh) * 2014-12-24 2015-05-06 三达膜科技(厦门)有限公司 一种缬氨酸的分离提纯方法
CN104744277A (zh) * 2015-02-12 2015-07-01 新疆阜丰生物科技有限公司 一种利用模拟移动床及流化床提取三支链氨基酸的方法
CN105175275A (zh) * 2015-07-01 2015-12-23 山东民强生物科技股份有限公司 一种l-鸟氨酸的分离纯化方法
CN105732436A (zh) * 2016-04-20 2016-07-06 上海化工研究院 从高丰度15n同位素标记l-精氨酸发酵液中提取高丰度l-精氨酸-15n4的方法
CN105749584A (zh) * 2014-12-15 2016-07-13 中粮集团有限公司 一种模拟移动床分离物质的方法
CN106631852A (zh) * 2016-09-30 2017-05-10 南京工业大学 一种从l‑鸟氨酸发酵液中提取l‑鸟氨酸盐酸盐的方法
CN103922953B (zh) * 2014-04-20 2017-06-13 厦门世达膜科技有限公司 一种鸟氨酸的生产工艺
CN109381890A (zh) * 2017-08-10 2019-02-26 南京凯通粮食生化研究设计有限公司 脱色去离子同时分离混合物的装置及运行方法
CN110465114A (zh) * 2019-08-23 2019-11-19 内蒙古金达威药业有限公司 一种模拟移动床连续层析色谱系统及其应用以及纯化辅酶q10的方法

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1367244A (zh) * 2000-10-27 2002-09-04 味之素株式会社 通过发酵生产l-精氨酸的微生物和方法
CN1594282A (zh) * 2004-07-15 2005-03-16 武汉武大弘元股份有限公司 L-鸟氨酸盐酸盐的制备方法
CN1908177A (zh) * 2006-08-29 2007-02-07 张鹏 酶转化生产l—鸟氨酸的方法
CN101323866A (zh) * 2007-06-14 2008-12-17 上海聚瑞生物技术有限公司 一种微生物发酵生产l-鸟氨酸的方法

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1367244A (zh) * 2000-10-27 2002-09-04 味之素株式会社 通过发酵生产l-精氨酸的微生物和方法
CN1594282A (zh) * 2004-07-15 2005-03-16 武汉武大弘元股份有限公司 L-鸟氨酸盐酸盐的制备方法
CN1908177A (zh) * 2006-08-29 2007-02-07 张鹏 酶转化生产l—鸟氨酸的方法
CN101323866A (zh) * 2007-06-14 2008-12-17 上海聚瑞生物技术有限公司 一种微生物发酵生产l-鸟氨酸的方法

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
万红贵: "连续制备色谱及其在氨基酸工业中的应用", 《食品与发酵工业》 *

Cited By (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102775321A (zh) * 2012-07-05 2012-11-14 广东肇庆星湖生物科技股份有限公司 一种l-鸟氨酸盐酸盐的提纯方法
CN102824758A (zh) * 2012-08-24 2012-12-19 安徽丰原发酵技术工程研究有限公司 一种用模拟移动床色谱分离扑热息痛的系统和方法
CN102824758B (zh) * 2012-08-24 2015-01-07 安徽丰原发酵技术工程研究有限公司 一种用模拟移动床色谱分离扑热息痛的系统和方法
CN103059105A (zh) * 2012-12-28 2013-04-24 三达膜科技(厦门)有限公司 硫酸粘菌素的提取方法
CN103922953B (zh) * 2014-04-20 2017-06-13 厦门世达膜科技有限公司 一种鸟氨酸的生产工艺
CN105749584B (zh) * 2014-12-15 2017-11-07 中粮集团有限公司 一种模拟移动床分离物质的方法
CN105749584A (zh) * 2014-12-15 2016-07-13 中粮集团有限公司 一种模拟移动床分离物质的方法
CN104592047A (zh) * 2014-12-24 2015-05-06 三达膜科技(厦门)有限公司 一种缬氨酸的分离提纯方法
CN104744277A (zh) * 2015-02-12 2015-07-01 新疆阜丰生物科技有限公司 一种利用模拟移动床及流化床提取三支链氨基酸的方法
CN105175275A (zh) * 2015-07-01 2015-12-23 山东民强生物科技股份有限公司 一种l-鸟氨酸的分离纯化方法
CN105175275B (zh) * 2015-07-01 2017-03-01 山东民强生物科技股份有限公司 一种l‑鸟氨酸的分离纯化方法
CN105732436A (zh) * 2016-04-20 2016-07-06 上海化工研究院 从高丰度15n同位素标记l-精氨酸发酵液中提取高丰度l-精氨酸-15n4的方法
CN106631852A (zh) * 2016-09-30 2017-05-10 南京工业大学 一种从l‑鸟氨酸发酵液中提取l‑鸟氨酸盐酸盐的方法
CN109381890A (zh) * 2017-08-10 2019-02-26 南京凯通粮食生化研究设计有限公司 脱色去离子同时分离混合物的装置及运行方法
CN110465114A (zh) * 2019-08-23 2019-11-19 内蒙古金达威药业有限公司 一种模拟移动床连续层析色谱系统及其应用以及纯化辅酶q10的方法
CN110465114B (zh) * 2019-08-23 2021-08-20 内蒙古金达威药业有限公司 一种模拟移动床连续层析色谱系统及其应用以及纯化辅酶q10的方法

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Application publication date: 20100714

Assignee: Nanjing Siddartha medical science and Technology Co.,Ltd.

Assignor: Nanjing Tech University

Contract record no.: 2017320000159

Denomination of invention: Method for separating and purifying L-ornithine by using simulated moving bed

Granted publication date: 20130529

License type: Exclusive License

Record date: 20170711