CN101773553B - 一种天葵提取物及其制备方法和应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种天葵提取物，该提取物中含有唐松草酚定、格列风内酯和紫草氰苷。另外还公开了该天葵提取物的制备方法，取天葵鲜品或干品，切碎，用提取溶媒进行提取，所得提取液除去溶剂后得到天葵提取物。该天葵提取物在制备预防和治疗白内障药物中的应用。本发明的天葵提取物以及天葵提取物纯化物的制备纯化过程简单易行，且作为制备预防和治疗白内障药物的原料，效果显著。本发明的突出进步和显著效果还在于天葵是西南、华东、东北等地常见易得的中草药，成本低廉，为社会提供了一种具有明确预防和治疗白内障的天然药物。

Description

一种天葵提取物及其制备方法和应用

技术领域

本发明涉及一种天然草药提取物，特别涉及一种天葵提取物，以及该天葵提取物的制备方法和在制备预防和治疗白内障药物上的应用。本发明所说的天葵，特指学名为毛茛科天葵属植物天葵(Semiaguilegia adoxoides(DC.)Makino)的全草。

背景技术

白内障是由各种因素使得晶状体变混浊的一种眼病，这是由于晶状体混浊而引起光散射的结果，使之在局部出现视觉障碍，因为该光散射导致无能力在视网膜上形成正常的图像。

按其病因，白内障可分为下列几类：先天性白内障、老年性白内障、并发性白内障、创伤性白内障、糖尿病性白内障、及其它等等，除此之外，已知的还有放射性的白内障和玻璃工人白内障等，所有这些构成了严重眼病，随之这些眼病发生的同时又由于晶状体的混浊而引起视力下降。

尽管白内障的详细病因仍属未知，但已有人认为氧化损伤是导致白内障的主要因素之一。流行病学调查表明，日常摄入抗氧化剂VitC、VitE和胡萝卜素或补充多种维生素的老年人群，白内障发生的危险降低。同时也有证据指出，晶状体老化与自由基有关，急剧的氧化应力导致细胞机能障碍，细胞代谢过程和外部因子均可使细胞不断形成自由基，如羟基自由基、超氧阴离子和过氧自由基等，这些自由基会毒害细胞，特别是富含不饱和脂肪酸的细胞膜对氧化反应敏感。有研究认为UVB(户外紫外线)和可见光能诱发晶状体产生自由基，是导致老年性白内障的主要因素。已知晶状体内也有捕捉自由基的系统，如抗坏血酸、VitE、SOD(超氧化物歧化酶)和GSH(谷胱甘肽)及GSH-Px(谷胱甘肽过氧化酶)等抗氧化剂，但随年龄老化，当自由基与抗氧化系统之间失衡时便产生氧化应力攻击细胞膜，使脂质过氧化，损伤DNA和细胞内蛋白质，导致晶状体混浊。晶状体的抗氧化系统虽然可延伸到老年，但晶状体增加了对氧化作用的敏感度，它的部分蛋白质变得较易攻击，同时它的部分抗氧化系统不太稳定。有人推测晶状体内的抗氧化系统分布不均衡，致使一些细胞比另一些细胞更易受攻击(眼科新进展.2005，2，190-193.)。由此看出即便氧化损伤会导致白内障的许多细节仍未澄清，但已经基本证实了游离基分子和活泼氧化物(如过氧化物、过氧化氢、氢氧化物游离基)均与诱发白内障有关。

目前白内障的治疗主要包括手术治疗和药物治疗。手术治疗主要包括在眼球中拨开晶状体，及从眼球中摘除整个晶体，这就必然会造成角膜切口和结扎，以及晶状体内的手术创伤，同时也会出现严重的并发症，难以处理，直接影响治疗效果。目前治疗老年性白内障的药物主要有抗氧化类药物，如谷胱甘肽、牛磺酸等；营养类药物，如VitC、VitB₂。治疗糖尿病性白内障的药物主要有醛糖还原酶抑制剂，如索比尼尔(sorbinil)、PZG(pyrazinoylguanidine)；以及抗氧化类药物，如吡诺克辛钠、法可林等。然而，这些药物的投药治疗是不完全令人满意的，其部分原因是由于该类药品多为矿物或化学制品，生产工艺复杂，成本高，疗效不显著，治标不治本，且有副作用等。虽然中成药在治疗各种类型的白内障疾病上表现出巨大的优势，但使用的中成药多为复方，并多以调理为主，成分复杂，制备繁琐，作用效果慢。因此，探求使用方便，疗效好、作用快、副作用小、费用低的预防和治疗白内障药物是我们的研究方向。

天葵(Semiaquilegiaadoxoides(DC.)Makino)，又名千年耗子屎、夏无踪、蛇不见，毛茛科天葵属多年生草本植物，广泛分布于长江中下游(中药大词典，1977)。可用于治疗淋巴结核、痛肿疔疮、跌打损伤、毒蛇咬伤等症(中药草学，1976，260-261)。天葵主要含生物碱、内酯、香豆精类、酚性成分、氨基酸等成分(安徽农业科学，2006，2124，2126)。天葵作为中药使用的记载较多。作为单方使用，可用来治疗支气管淋巴结核、急性乳腺炎、乳痈等症；作为复方使用，可用来治疗尿路结石和疮痛肿毒。此外，据中国土农药志记载，天葵生物碱成分对蚜虫、红蜘蛛和稻螟具有一定的杀虫作用；将天葵子中的成分提取出来制成农药，发现它对小菜蛾和菜青虫具有很好的拒食作用，同时对菜青虫具有一定的胃毒作用，可作农药使用(安徽农业科学，2006，2124，2126)。但天葵用于预防和治疗白内障的研究和相关应用尚未见报道。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是，提供一种天葵提取物及其制备方法以及在制备预防和治疗白内障药物上的应用，为白内障疾病的预防和治疗提供了新的途径，且该原料易得，制备工艺简单，药用效果显著。

本发明的技术方案：为了解决上述技术问题，本发明了提供了一种天葵提取物，该提取物中含有唐松草酚定、格列风内酯和紫草氰苷。

该天葵提取物采用以下工艺制备：取天葵鲜品或干品，切碎，用提取溶媒进行提取，所得提取液除去溶剂后得到天葵提取物。

其中，提取溶媒为水、甲醇、乙醇、丙酮中的一种；或者水与甲醇、乙醇、丙酮中的一种的任意比例的混合溶剂。

提取方法为煎煮、冷浸、回流、超声提取、超临界流体萃取或微波提取。

提取液除去溶剂的方式采用减压蒸发、真空冷冻干燥或喷雾干燥。

本发明对所得的天葵提取物进行纯化处理，其步骤为：

A、用适量水分散；

B、非极性溶剂除去色素，该非极性溶剂为正己烷、环己烷、石油醚、乙醚、二氯甲烷或三氯甲烷；

C、用溶剂萃取，萃取液浓缩后除去该萃取用溶剂，得天葵提取物纯化物，该萃取用溶剂为三氯甲烷、乙酸乙酯或丁醇；或先浓缩，然后用溶剂提取，再除去该提取用溶剂，得天葵提取物纯化物，该提取用溶剂为乙酸乙酯、丁醇、丙酮、甲醇或乙醇。

天葵提取物的纯化处理步骤还可以为：

A、用适量甲醇溶解；

B、上经预处理好的大孔吸附树脂；

C、先用蒸馏水洗脱，然后用20％的甲醇或乙醇溶液洗脱，再用含甲醇或乙醇20％-90％的水溶液进行洗脱，收集洗脱液，除去溶剂，得天葵提取物纯化物。

天葵提取物的纯化处理步骤还可以为：

A、用适量粗硅胶或氧化铝拌样；

B、进行柱层析；

C、用有机溶剂洗脱，除色素，该有机溶剂为石油醚、乙醚、二氯甲烷中的一种或者任意两种或三种的混合溶剂，或石油醚、乙醚、二氯甲烷与三氯甲烷、乙酸乙酯、丙酮、甲醇、乙醇中的两种或两种以上的混合溶剂；

D、用有机溶剂冲洗，收集冲洗液，除去溶剂，得天葵提取物纯化物，该有机溶剂为丙酮、甲醇、乙醇中的一种；或石油醚、乙醚、二氯甲烷、三氯甲烷与丙酮、甲醇、乙醇的两种或两种以上的混合溶剂；或三氯甲烷、乙酸乙酯与丙酮、甲醇、乙醇的两种或两种以上的混合溶剂。

本发明还提供了天葵提取物在制备预防和治疗白内障药物中的应用。

本发明通过将天葵提取物或者对天葵提取物经纯化处理，再与药用载体或添加剂混合制成滴眼剂、眼膏剂、眼用凝胶剂。

本发明的天葵提取物以及天葵提取物纯化物的制备纯化过程简单易行，且作为制备预防和治疗白内障药物的原料，效果显著。经体外醛糖还原酶抑制活性筛选结果，表明天葵提取物或进一步纯化物均表现出较好的抑制醛糖还原酶(AR)的活性；其中活性成分主要集中于乙酸乙酯和正丁醇部位，其IC₅₀分别为22.17μg/mL和28.41μg/mL。2.实验性D-半乳糖所致白内障大鼠模型实验结果，表明天葵提取物或进一步纯化物能明显抑制大鼠白内障晶状体浑浊度的发生与发展，同时能明显提高D-半乳糖所致白内障晶状体及血清中SOD活性，降低MDA含量，具有明显的抗氧化作用，作用效果与阳性对照药相当或胜过。本发明的药物可制备的剂型可以是但不限于滴眼剂、眼膏剂、眼用凝胶剂等制药上的常用制剂中的任意一种，可根据需要灵活应用。本发明的突出进步和显著效果还在于天葵是西南、华东、东北等地常见易得的中草药，制作工艺简单，成本低廉，为社会提供了一种具有明确预防和治疗白内障的天然药物。

具体实施方式

本发明所述的天葵活性提取物及进一步纯化物、特征性成分鉴别、相关药理活性以及药用制剂的制备是按如下实施例所表示的方法进行。所涉及到的方法是本领域的技术人员能够掌握和运用的技术手段。但是，以下实施例不得理解为任何意义上的对本发明权利要求的限制。

本发明的实施例1：天葵提取物样品的制备

取天葵鲜品或干品，切碎，用水、甲醇、乙醇、丙酮中的一种；或者水与甲醇、乙醇、丙酮中的一种的任意比例的混合溶剂作为提取溶媒进行提取，所采用的提取方法为煎煮、冷浸、回流、超声提取、超临界流体萃取或微波提取，所得提取液采用减压蒸发、真空冷冻干燥或喷雾干燥的方法除去溶剂后得到天葵提取物。具体原料及其重量，所用提取溶媒，采用的提取方法，去除溶剂方法等如表1所示。

表1天葵提取物样品的制备方法

本发明的实施例2：天葵提取物中特征性活性成分的鉴别

1、唐松草酚定的TLC鉴别

分别称取实施例1中样品TK1～TK13约1g置20mL具塞三角瓶中，加入甲醇20.00mL，超声提取30min，取出，滤过，滤液水浴浓缩至5 mL，分别作为供试品TK1～TK6溶液。另取唐松草酚定对照品，加甲醇制成浓度为1mg/mL的溶液，作为对照品溶液。按照《中国药典》2005年版一部附录VIB薄层色谱法，分别吸取供试品溶液10μL，对照品溶液2μL，点于同一硅胶GF254薄层板上，以正丁醇-冰醋酸-水(7∶1∶2)溶液为展开剂，二次展开，取出晾干，在紫外灯下检视(365nm)，各供试品色谱中，在与对照品色谱相对应的位置上，分别有相同颜色的斑点。

2、格列风内酯和紫草氰苷的TLC鉴别

分别称取实施例1中样品TK1～TK13约1g置20mL具塞三角瓶中，加入甲醇20.00mL，超声提取30min，取出，滤过，滤液水浴浓缩至5mL，分别作为供试品TK1～TK6溶液。另取格列风内酯、紫草氰苷对照品，加甲醇制成浓度为1mg/mL的溶液，作为对照品溶液。按照《中国药典》2005年版一部附录VIB薄层色谱法，分别吸取供试品溶液10μL，对照品溶液2μL，点于同一硅胶GF254薄层板上，以氯仿-甲醇-水(7∶3∶1)溶液为展开剂，二次展开，取出晾干，在紫外灯下检视(254nm)，各供试品色谱中，在与对照品色谱相对应的位置上，分别有相同颜色的斑点。

本发明中的天葵提取物的成分并不局限于上述的三种活性成分。

本发明的实施例3：天葵提取物样品的进一步纯化

1、取天葵提取物(TK5)适量，用适量水分散溶解，用石油醚反复萃取多次，水层再依次用乙酸乙酯、正丁醇反复萃取，分别回收溶剂得乙酸乙酯部分(TK5A)和正丁醇部分(TK5B)以及水部分(TK5C)。

2、取天葵提取物(TK1)适量，用少量的甲醇溶解，上已预处理好的D-101大孔树脂柱上，先用蒸馏水洗脱，再用20％的乙醇洗脱，再用50％的乙醇洗脱，收集50％的乙醇洗脱液，回收溶剂即得进一步纯化样品(TK1A)。

3、取天葵提取物(TK1)适量，用少量的甲醇溶解上已预处理好的D-101大孔树脂柱上，先用蒸馏水洗脱，再用20％的乙醇洗脱，再用75％的乙醇洗脱，收集75％的乙醇洗脱液，回收溶剂即得进一步纯化样品(TK1B)。

4、取天葵提取物(TK1)适量，用少量的甲醇溶解上已预处理好的D-101大孔树脂柱上，先用蒸馏水洗脱，再用20％的乙醇洗脱，再用95％的乙醇洗脱，收集95％的乙醇洗脱液，回收溶剂即得进一步纯化样品(TK1C)。

5、取天葵提取物(TK1)适量，用少量的甲醇溶解上已预处理好的AB-8大孔树脂柱上，先用蒸馏水洗脱，再用20％的乙醇洗脱，再用50％的乙醇洗脱，收集50％的乙醇洗脱液，回收溶剂即得进一步纯化样品(TK1D)。

6、取天葵提取物(TK1)适量，用少量的甲醇溶解上已预处理好的D-201大孔树脂柱上，先用蒸馏水洗脱，再用20％的乙醇洗脱，再用50％的乙醇洗脱，收集50％的乙醇洗脱液，回收溶剂即得进一步纯化样品(TK1E)。

7、取天葵提取物(TK1)适量，用少量的甲醇溶解上已预处理好的D-301大孔树脂柱上，先用蒸馏水洗脱，再用20％的乙醇洗脱，再用50％的乙醇洗脱，收集50％的乙醇洗脱液，回收溶剂即得进一步纯化样品(TK1F)。

8、取天葵提取物(TK1)适量，用少量的甲醇溶解上已预处理好的D-101大孔树脂柱上，先用蒸馏水洗脱，再用20％的甲醇洗脱，再用50％的甲醇洗脱，收集50％的甲醇洗脱液，回收溶剂即得进一步纯化样品(TK1G)。

9、取天葵提取物(TK2)适量，加适量甲醇溶解，用粗硅胶拌样，上样至样品与硅胶重量比1∶25的硅胶柱上，先用石油醚洗脱，除去色素，再用石油醚∶乙酸乙酯(1∶100)洗脱，收集洗脱液，得进一步纯化样品(TK2A)。

10、取天葵提取物(TK2)适量，加适量甲醇溶解，用粗硅胶拌样，上样至样品与硅胶重量比1∶30的硅胶柱上，先用三氯甲烷洗脱，除去色素，再用三氯甲烷∶甲醇(7∶3)洗脱，收集洗脱液，得进一步纯化样品(TK2B)。

11、取天葵提取物(TK2)适量，加适量甲醇溶解，用中性氧化铝拌样，上样至样品与氧化铝重量比1∶30的氧化铝柱上，先用石油醚洗脱，除去色素，再用乙醇洗脱，收集洗脱液，得进一步纯化样品(TK2C)。

本发明中所采用的大孔吸附树脂类型可以是D-101，D-201，D-301，AB-8，但不限于以上大孔吸附树脂类型中的任意一种。

本发明的实施例4：天葵提取物及进一步纯化物体外醛糖还原酶抑制活性测定

1、醛糖还原酶提取

参照文献(J.Med.Chem，1996，39：4396-4405)报道的醛糖还原酶(AR)提取分离方法进行，所有步骤在＜4℃和5mmol/L 2-巯基乙醇条件下进行。取新鲜的牛眼睛，用手术刀取出晶状体，用生理盐水淋洗后加50％甘油置于-70℃冰箱保存待用。取牛晶状体50～100g，在3倍体积磷酸盐缓冲液(pH6.8)中匀浆，以20000g离心30min，去除不溶解物质。上清液中加入饱和硫酸铵溶液至40％饱和度，间歇搅拌20min，以15000g离心25min，去除不溶解物质。上清液中再加人饱和硫酸铵溶液使硫酸铵饱和度增加至50％，间歇搅拌20min，以15000g离心25min，去除不溶解物质。再增加上清液的硫酸铵饱和度至70％，以15000g离心25min。所得沉淀用磷酸盐缓冲液复溶，在4L的同一缓冲液中透析过夜，所得酶液冷冻保藏待用。

2、抑制剂对醛糖还原酶抑制活性测定酶的活力

用试验条件下单位时间转化NADPH为NADE⁺的量来计算，1单位酶活力(U)定义为在试验条件下，酶催化氧化1μmol NADPH为NADP⁺。反应体系总体积0.5mL，包括pH 6.2，67mmol/L的钠钾磷酸缓冲液、5mmol/L的2-巯基乙醇、0.6mmol/L的硫酸锂、5 mmol/L的DL-甘油醛、0.12mmoL/L的NADPH和1mg/mL的酶，37℃水浴10min后取出测试，测试时间记录3min。实验管加上述所有试剂，空白管以重蒸水代替DL-甘油醛。用光径1cm石英比色杯在紫外分光光度计下记录NADPH在340nm处吸光值的下降来表示AR活性。抑制剂用DMSO溶解，但溶剂量在测试的反应体积中不能超过1％。取不同浓度抑制剂作为样品组，其他试剂加入顺序方法同空白组。

3、样品的活性测试结果

取实施例1和实施例3中样品所得活性测试结果如表2所示。

表2天葵提取物及进一步纯化物对醛糖还原酶的半数抑制浓度

由表2可知，天葵提取物或其纯化物各样品几乎都能抑制醛糖还原酶(AR)的活性，其抑制作用与提取物浓度之间存在一定的剂量-效应关系，其中活性成分主要集中与乙酸乙酯和正丁醇部位，其IC₅₀分别为22.17和28.41μg/mL，表现出较好的醛糖还原酶(AR)抑制活性，具有进一步开发研究的价值。

本发明的实施例5：天葵提取物及进一步纯化物不同药物制剂的制备

1、天葵提取物滴眼液的制备

物料配比如下：

TK13                5g

硼酸                12.0g

硼砂                0.2g

氯化钠              5.4g

5％苯扎溴胺         1.0ml

亚硫酸钠            1.0g

氢氧化钠(1mol/L)    适量

注射用水            加至1000ml

制成1000ml的滴眼液

制法：按照上述处方，取天葵提取物(TK13)用注射用水加热溶解，过滤，然后将硼酸、硼砂、氯化钠、5％苯扎溴胺、亚硫酸钠溶于滤液中，用氢氧化钠调节pH7.0，加入注射用水至全量，加热灭菌，冷却，过滤，分装即得。

2、天葵提取物进一步纯化物滴眼液的制备

物料配比如下：

TK5B    2g

硼酸                 12.0g

硼砂                 0.2g

氯化钠               5.4g

5％苯扎溴胺          1.0ml

亚硫酸钠             1.0g

氢氧化钠(1mol/L)     适量

注射用水             加至1000ml

制成1000ml的滴眼液

制法：按照上述处方，取天葵提取物(TK5B)用注射用水加热溶解，过滤，然后将硼酸、硼砂、氯化钠、5％苯扎溴胺、亚硫酸钠溶于滤液中，用氢氧化钠调节pH7.0，加入注射用水至全量，加热灭菌，冷却，过滤，分装即得。

3、天葵提取物眼膏的制备

物料配比如下：

TK2         10g

凡士林      80.0g

液态石蜡    10.0g

羊毛脂      10g

            制成110g膏剂

制法：取天葵提取物(TK2)用注射用水5-10ml加热溶解，过滤，然后将凡士林、液态石蜡、羊毛脂加入充分研磨，即得。

4、天葵提取物进一步纯化物眼膏的制备

物料配比如下：

TK5A       4g

凡士林     80.0g

液态石蜡   10.0g

羊毛脂     10g

           制成110g膏剂

制法：取天葵提取物(TK1B)用注射用水5-10ml加热溶解，过滤，然后将凡士林、液态石蜡、羊毛脂加入充分研磨，即得。

本发明的天葵提取物或其纯化物可以通过与药用载体或添加剂混合制成滴眼剂、眼膏剂、眼用凝胶剂等常用制剂。

本发明的实施例6：天葵提取物及进一步纯化物对实验性D-半乳糖所致白内障大鼠的防治作用

1、材料与仪器

1.1实验动物3W龄健康SD大鼠，雌雄各半，体重50-65g，合格证号：SCXK(黔)2002-0001，由贵阳医学院实验动物中心提供。

1.2天葵提取物及纯化品滴眼液取TK13、TK2和TK5A、TK5B样品照实施例5中的滴眼液制备方法制备滴眼液。

1.3试剂D-半乳糖(瑞兴科技有限公司，进口分装)。吡诺克辛钠滴眼液。托吡卡胺滴眼液；

1.4仪器紫外可见分光光度计(日本岛津)，YZ-5E型裂隙灯显微系统(苏州医疗器械厂)、低温高速离心机、超净工作台、手术显微镜等。

2、方法

2.1实验分组及给药

经裂缝灯显微镜检查，取双侧晶状体均无白内障的大鼠110只，随机分成11组：正常组、生理盐水对照组、天葵滴眼液预防组、天葵滴眼液治疗组、阳性药吡诺克辛钠治疗组，每组10只。动物分笼饲养，所有动物自由摄食标准饲料，并无菌操作腹腔注射50％D-半乳糖灭菌溶液，每日一次，注射量为10g·kg^-1·d^-1。滴眼液预防组在给予50％D-半乳糖的同时用滴眼液滴注双眼，每日两次，每次每眼2-3滴。注射50％D-半乳糖28天后，滴眼液治疗组、吡诺克辛钠治疗组及生理盐水对照组分别用相应的试剂滴双眼，每日两次，每次每眼2-3滴。

2.2晶体检查及混浊分期

于实验开始后第10、20、28d分别以托吡卡胺滴眼液点眼散瞳后，用裂隙灯显微镜观察晶体的变化并作文字记录、绘图。参考黄秀榕(中华眼科杂志，1987，5，29)等的分期标准，将晶体混浊分为0-V期。

0期：晶体透明；I期：晶体周边皮质散在细小空泡；II期：晶体周边皮质成环状密集中等空泡；III期：除晶体四周皮质密集空泡外，部分皮质片状浑浊；IV期：晶体核及核周皮质浑浊；V期：晶体完全浑浊。治疗14天后再次用裂隙灯观察晶体的变化。

2.3晶状体及血清中SOD、MDA测定

于治疗14天后，裂隙灯检查完毕后，于股动脉取血，3000rpmin离心15min，分离血清，备用。同时摘除眼球，完整分离出晶状体，去净玻璃体，称取重量后迅速用4℃的生理盐水制备成10％的组织匀浆液，10000rpmin离心15min，取上清备用。MDA、SOD及蛋白的测定均按试剂盒测定说明书进行。

2.4统计学处理

实验数据以平均值±标准差表示，用SPSS软件处理。

3、结果

3.1大鼠晶状体混浊程度的比较

本实验成功建立了大鼠半乳糖性白内障模型，各组均发生不同程度的晶状体混浊。表3显示：注射D-半乳糖20天以后，除正常组外其余组晶体均出现不同程度的浑浊，而且28天后虽然停止了D-半乳糖的注射，大鼠白内障的程度还在继续加深。结果表明：天葵滴眼液预防和治疗组晶体的浑浊速度均较对照组慢、程度也较轻。天葵滴眼液预防及治疗组作用几乎与阳性对照组相当，其中TK5A及TK1B组的作用优于阳性对照组。

表3.半乳糖腹腔注射后各组大鼠晶体浑浊程度比较(n＝10)

3.2大鼠晶状体及血清中MDA、SOD的测定结果

表4各组白内障大鼠晶状体及血清中SOD活性和MDA含量的影响

与正常组比较：1)P＜0.001；与模型组比较：2)P＜0.01，3)P＜0.001；

由表4可知，模型组大鼠晶状体及血清中的MDA较正常组明显增高(P＜0.001)，而SOD明显下降(P＜0.001)。给药组与模型组相比，明显降低大鼠晶状体及血清中的MDA的含量，提高SOD的活性，其中滴眼液TK4组的效果强于滴眼液TK3组；天葵提取物纯化组比提取物组更效果明显，优于阳性对照组。表明天葵滴眼液能明显提高D-半乳糖所致白内障晶状体及血清中SOD活性，降低MDA含量，具有明显的抗氧化作用。

Claims (6)

1.天葵提取物在制备预防和治疗白内障药物中的应用，所述天葵为毛茛科天葵属植物天葵的全草，所述天葵提取物中含有唐松草酚定、格列风内酯和紫草氰苷。

2.如权利要求1所述的天葵提取物在制备预防和治疗白内障药物中的应用，天葵提取物的制备方法为：取天葵鲜品或干品，切碎，用提取溶媒进行提取，所得提取液除去溶剂后得到天葵提取物。

3.如权利要求2所述的天葵提取物在制备预防和治疗白内障药物中的应用，其特征在于所述的提取溶媒为水、甲醇、乙醇、丙酮中的一种；或者水与甲醇、乙醇、丙酮中的一种的任意比例的混合溶剂。

4.如权利要求2所述的天葵提取物在制备预防和治疗白内障药物中的应用，其特征在于所述的提取方法为煎煮、冷浸、回流、超声提取、超临界流体萃取或微波提取。

5.如权利要求2所述的天葵提取物在制备预防和治疗白内障药物中的应用，其特征在于所述的提取液除去溶剂的方式采用减压蒸发、真空冷冻干燥或喷雾干燥。

6.根据权利要求1-5任一项所述的天葵提取物在制备预防和治疗白内障药物中的应用，其特征在于：将天葵提取物与药用载体或添加剂混合制成滴眼剂、眼膏剂或眼用凝胶剂。