CN101766599A - 含有羟地吗啉或羟地吗啉药用复合物的药物组合物制剂 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种含有羟地吗啉或羟地吗啉药用复合物的药物组合物制剂。采用的技术方案是：将具有通式(I)结构的羟地吗啉或具有通式(II)结构的羟地吗啉药用复合物作为有效成分，与药学上可接受的药物载体形成的药物组合物制剂；其剂型是药学上所说的任何一种剂型，本发明还公开了该药物组合物制剂在治疗肝癌、肺癌及其他肿瘤中的应用。

Description

含有羟地吗啉或羟地吗啉药用复合物的药物组合物制剂

技术领域

本发明属于药学领域，尤其涉及以新颖的羟地吗啉或羟地吗啉药用复合物作为有效成分与药学上可接受的药物载体形成的药物组合物制剂，以及该药物组合物制剂在治疗肝癌、肺癌及其他肿瘤中应用。

背景技术

瑞香狼毒(Stellera chamaejasme L.)的甲醇提取物显示了较强的抗癌活性(中华肿瘤杂志1995年1月第17卷第1期)。瑞香狼毒可用于治疗肿瘤性疾病，临床报道其粗提物对治疗肺癌和肝癌等有效。冯威健等以小鼠白血病为活性指标，对瑞香狼毒进行了分离提取，得到了一种二萜活性成份，其中尼地吗琳具有较强的抗癌作用，其结构为：

尼地吗琳对常规使用的L-1210腹水型及实体瘤Lewis肺癌、B-16和结肠癌26显示较强的抗癌活性，尼地吗琳对体外培养的人白血病和胃癌具有明显的细胞生长抑制作用和克隆形成抑制作用，对小鼠体内体外抗癌活性均较强，表明其抗癌机制是通过对癌细胞的直接作用而发挥的。

但尼地吗琳的腹腔给药剂量超过0.05mg/kg时即出现毒性反应，说明其活性剂量与毒性剂量比较接近，治疗窗非常窄，临床应用安全性较差，对其它肿瘤细胞的抑制作用不明显。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是针对尼地吗啉治疗窗非常窄，临床应用安全性较差等技术问题，对尼地吗啉的化学结构进行修饰得到羟地吗啉，经过对羟地吗啉的安全性和有效性研究，均好于尼地吗啉，且抑瘤谱较尼地吗啉广、溶解度明显增加。从而提出一种新颖的以羟地吗啉或羟地吗啉药用复合物作为有效成分与药学上可接受的药物载体形成药物组合物制剂，该药物制剂可用于肺癌、肝癌及其他肿瘤的治疗。

本发明所要解决的技术问题是通过以下的技术方案来实现的：将具有通式(I)结构的羟地吗啉或羟地吗啉与不同碱基形成的具有通式(II)结构的羟地吗啉药用复合物作为有效成分和药学上可以接受的药物载体混合制成药物组合物制剂。

通式(II)中，B表示C₁-C₈的含氮有机碱或氨基酸。

所述的药学上可接受的药物载体是指药学领域的药物载体，药物载体选自：稀释剂；赋形剂；水；填充剂如淀粉、蔗糖、乳糖和/或微晶纤维素；崩解剂如羟甲基淀粉钠、羟丙纤维素、交联羧甲基纤维素、琼脂、碳酸钙和/或碳酸氢钠；粘合剂如纤维素衍生物、藻酸盐、明胶和/或聚乙烯吡咯烷酮；润湿剂如吐温和/或甘油；表面活性剂如十六烷醇和/或十二烷基硫酸钠；吸附载体如高岭土和/或皂粘土；润滑剂如滑石粉、硬脂酸钙或镁、微粉硅胶和/或聚乙二醇；增溶剂如聚氧乙烯醚蓖麻油，吐温和/或普流罗尼F-68；助溶剂如精氨酸、葡甲胺、二乙胺、乙二胺、尿素、烟酰胺、脯氨酸、葡萄糖和/或枸橼酸及其钠盐。另外还可以在组合物中加入其它辅剂如香味剂和/或甜味剂等。

本发明所述的药物组合物制剂，其剂型可以是药剂学上所说的任何一种剂型，包括片剂、胶囊剂、软胶囊剂、喷雾剂、凝胶剂、凝胶气雾剂、混悬剂、冲剂、贴剂、软膏、丸剂、散剂、乳剂、注射剂、输液剂、冻干注射剂、脂质体注射剂，靶向给药注射剂、栓剂、缓释制剂和控释制剂。

本发明所述的药物组合物制剂，优选的，羟地吗啉或羟地吗啉药用复合物与填充剂和/或崩解剂组配制成片剂或胶囊剂；或者是羟地吗啉或羟地吗啉药用复合物与填充剂和/或羟丙甲纤维素组配制成缓释制剂或者胶囊剂。

本发明所述的药物组合物制剂，优选的，羟地吗啉或羟地吗啉药用复合物与填充剂、羟丙甲基纤维酸酯、乙基纤维素、聚乙烯醇、甲基硅树脂、羟丙基纤维素、聚乙二醇-600、丙烯酸-甲基丙烯酯树脂、乙氧基乙基纤维素、甘油棕榈酸硬酯酸酯、聚磷酸钠-脱乙酰壳多糖和/或PEG1500制成缓释制剂或控释制剂。

本发明所述的药物组合物制剂，优选的，羟地吗啉或羟地吗啉药用复合物与油相如大豆油、聚乙二醇400、棉籽油、花生油、麻油、玉米油和/或橄榄油混合，制成注射剂或口服乳剂；在所述的油相中还可加入增溶剂或潜溶剂或抗氧剂。

本发明的药用组合物制剂可通过口服或非肠胃给药的方式施用于需要这种治疗的患者。用于口服时，可将其制成常规的固体制剂如片剂、胶囊剂、粉剂或颗粒剂等，或制成液体制剂如水溶液或油悬浮剂或其它液体制剂如糖浆、口服液或酏剂等；用于肠胃外给药时，可将其制成注射用的溶液、粉剂、水溶液或油性悬浮剂等。优选的形式是片剂、包衣片剂、胶囊、颗粒剂、口服液和注射剂。

本发明中，羟地吗啉及羟地吗啉药用复合物的制备方法包括以下步骤：

1、将瑞香狼毒(Stellera chamaejasma L)干燥根部用有机溶剂提取，层析分离得到尼地吗啉(gnidimacrin)；也可直接采用市购的尼地吗啉制备；

2、尼地吗啉经结构修饰得到羟地吗啉(qidimacrin)

3、将羟地吗啉溶解在合适溶剂中，与含氮有机碱或氨基酸反应，将所制得的羟地吗啉药用复合物分离出来，也可以直接用来配制制剂。

以下示例性的介绍一种羟地吗啉的制备方法，但是并不限制羟地吗啉的制备，本领域的技术人员按照上述的制备原理，可以对尼地吗啉采取不同方法的结构修饰获得羟地吗啉，而本发明的意义也在于通过对尼地吗啉的化学结构进行修饰得到羟地吗啉，经过对羟地吗啉的安全性和有效性研究，均好于尼地吗啉，且抑瘤谱较尼地吗啉广、溶解度明显增加。从而将羟地吗啉或羟地吗啉药用复合物作为有效成分制备药物组合物制剂，用于治疗肝癌、肺癌及其他肿瘤。

示例性的羟地吗啉的制备方法如下：

1)将尼地吗啉、加甲醇、三乙胺和水的混合溶液溶解，将反应体系置于集热式恒温加热磁力搅拌器上剧烈搅拌，密闭反应体系，在干燥的氮气保护下，70℃下回流20小时后停止反应，将反应体系于50℃下减压浓缩蒸干得到棕黄色初产物，采用硅胶柱层析分离得到中间体1；

2)在中间体1加入四氢呋喃溶剂、乙酸酐和吡啶中，将反应体系置于集热式恒温加热磁力搅拌器上室温下密闭剧烈搅拌8小时后停止反应。45℃下减压旋出反应瓶中四氢呋喃，加入无水乙醚，室温下剧烈搅拌有大量白色固体析出，过滤干燥后得到中间体2；

3)在中间体2中，加溴化氢乙酸溶液和双氧水溶液，将反应体系密闭，置于集热式恒温加热磁力搅拌器上50℃剧烈搅拌2小时后停止反应，反应液在50℃下减压浓缩至油状棕黄色初产物，加入乙酸乙酯溶解，并用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤，分出有机相用无水硫酸镁干燥后浓缩，柱层析硅胶分离得到中间体3；

4)在中间体3中，加入氰化钠和DMSO溶剂溶解，密闭反应体系，在干燥的氮气保护下，将反应体系置于集热式恒温加热磁力搅拌器上剧烈搅拌，25℃下反应12小时后停止反应，将反应液加入乙酸乙酯和水，充分震荡分层后用分液漏斗分出有机相，并用去离子水洗有机相，分出有机相并用无水硫酸镁干燥后，滤液在50℃下减压浓缩，经柱层析硅胶分离得到中间体4；

5)在中间体4中，加入叠氮化钠、氯化锌和甲苯溶剂，密闭反应体系，在干燥的氮气保护下，滴加盐酸水溶液，将反应体系置于集热式恒温加热磁力搅拌器上剧烈搅拌，110℃下反应8小时后停止反应，将反应液在50℃下减压浓缩，经柱层析硅胶分离得到中间体5；

6)在中间体5中，加入二丁基氧化锡和无水甲醇，密闭反应体系，在干燥的氮气保护下，将反应体系置于集热式恒温加热磁力搅拌器上剧烈搅拌，70℃下回流8小时后停止反应，将反应液在50℃下减压浓缩，经柱层析硅胶分离得到具有通式(I)结构的羟地吗啉。

本发明药用组合物制剂的各种剂型的制备方法是，用羟地吗啉或羟地吗啉药用复合物为活性成分与以上所述的一种或多种药学上可接受的药物载体混合，然后将其制成所需的剂型。

片剂、胶囊剂、颗粒剂和粉末等的固形制剂中，通常可含有0.1～99％(w/w)的有效成分，优选的是0.1～50％(w/w)的有效成分。

除了预先溶解的注射剂之外，也可作成加有粉末或适当的添加剂的在使用时溶解的形态。这些注射液通常可含有0.01～50％(w/w)的有效成分、优选的是0.5～5％(w/w)的有效成分。

另外，经口给药的悬浮剂、糖浆剂等的剂型，通常可含0.5～10％(w/w)的有效成分。

本发明化合物优选的给药量，可根据使用的化合物的种类、配合的组合物种类、适用频度和应该治疗的特定部位、病情的轻重、患者的年龄、医生的诊断、肿瘤的种类等而变化，但作为大致目标，例如每天成人的给药量，在经口给药时，可在0.01～200mg范围内，另外，在非经口给药时，在静脉注射时，优选的是每天在0.01～50mg范围内。另外，给药次数，根据给药方法和症状而不同，但1天是1～3次。另外，也可使用隔日给药、隔二日给药等间歇给药等给药方法。

具体实施方式

下面的实施例可以使本专业技术人员更全面地理解本发明，但不以任何方式限制本发明。

实施例1 羟地吗啉的制备

羟地吗啉的结构式如下：

制备方法如下：

取一个干燥的50ml的茄型瓶，加入磁力搅拌棒、尼地吗啉1.548g(2mmol)、加甲醇∶三乙胺∶水(v∶v∶v)＝5∶1∶1共21ml溶液溶解，将反应体系置于集热式恒温加热磁力搅拌器上剧烈搅拌，密闭反应体系，在干燥的氮气保护下，70℃下回流20小时后停止反应，将反应体系于50℃下减压浓缩蒸干得到棕黄色初产物，采用硅胶柱层析分离得到中间体1，共0.46g，收率40.6％，mp 150～152℃。

取一个干燥的50ml的茄型瓶，加入磁力搅拌棒、0.452g(0.8mmol)中间体1后，加入四氢呋喃溶剂10ml，乙酸酐1ml，吡啶1ml，将反应体系置于集热式恒温加热磁力搅拌器上室温下密闭剧烈搅拌8小时后停止反应。45℃下减压旋出反应瓶中四氢呋喃，加入无水乙醚20ml，室温下剧烈搅拌有大量白色固体析出，过滤干燥后得到中间体2，共0.62g，收率95.1％，mp 156～158℃。

取一个干燥的50ml的茄型瓶，加入磁力搅拌棒、0.41克(0.5mmol)中间体2，加30％溴化氢乙酸溶液15ml，30％双氧水溶液2ml，将反应体系密闭，置于集热式恒温加热磁力搅拌器上50℃剧烈搅拌2小时后停止反应，反应液在50℃下减压浓缩至油状棕黄色初产物，加入乙酸乙酯30ml溶解，并用饱和碳酸氢钠水溶液50毫升*3洗涤三次，分出有机相用无水硫酸镁干燥后浓缩，柱层析硅胶分离得到中间体3，共0.30克，收率67.3％。

取一个干燥的50ml的茄型瓶，加入磁力搅拌棒、0.27g(0.3mmol)中间体3，加入氰化钠0.18g(0.36mmol)，加DMSO溶剂5ml溶液溶解，密闭反应体系，在干燥的氮气保护下，将反应体系置于集热式恒温加热磁力搅拌器上剧烈搅拌，25℃下反应12小时后停止反应，将反应液加入20ml乙酸乙酯，25ml水，充分震荡分层后用分液漏斗分出有机相，并分别用25ml、25ml、10ml去离子水洗有机相，分出有机相并用无水硫酸镁干燥后，滤液在50℃下减压浓缩，经柱层析硅胶分离得到中间体4，共0.19g，收率72.8％，mp 162～166℃。

取一个干燥的50ml的茄型瓶，加入磁力搅拌棒、0.17克(0.2mmol)中间体4、叠氮化钠0.14g(0.21mmol)、氯化锌0.27g(0.2mmol)，加入甲苯溶剂20ml后，密闭反应体系，在干燥的氮气保护下，滴加30％盐酸水溶液1毫升，将反应体系置于集热式恒温加热磁力搅拌器上剧烈搅拌，110℃下反应8小时后停止反应，将反应液在50℃下减压浓缩，经柱层析硅胶分离得到中间体5，共0.16g，收率87.6％，mp 192～194℃。

取一个干燥的25ml的茄型瓶，加入磁力搅拌棒、0.14g(1.6mmol)中间体5、二丁基氧化锡0.08g，加入无水甲醇10ml，密闭反应体系，在干燥的氮气保护下，将反应体系置于集热式恒温加热磁力搅拌器上剧烈搅拌，70℃下回流8小时后停止反应，将反应液在50℃下减压浓缩，经柱层析硅胶分离得到羟地吗啉，共0.04g，收率36.5％，mp 189～191℃。

元素分析实测值：C，58.52；H，7.66；N，8.66。

分子式(C₃₁H₄₈N₄O₁₀)计算值：C，58.48；H，7.60；N，8.80。

质谱MS(EI，70ev)m/z(％)：637(M+1)。

红外IR(KBr)cm^-1：3432，3335，3266，2998，1659，1374，1148，856。

核磁共振氢谱¹H-NMR(CDCl₃)δ：15.1(s，1H)，4.59(d，J＝3.0Hz，1H)，4.02-3.86(m，1H)，3.90(d，J＝11Hz，1H)，3.85(d，J＝7.4Hz，1H)，3.81(t，J＝11Hz，1H)，3.76(d，1H)，3.70(d，J＝10.0Hz，1H)，3.65(t，J＝10.0Hz，1H)，3.35(s，1H)，3.22(d，J＝3.0Hz，1H)，3.03(d，J＝12.6Hz，1H)，2.74-2.36(m，4H)，2.66(dd，J＝12.6Hz，1H)，2.42(d，J＝15Hz，1H)，2.33(m，1H)，2.05-1.56(m，18H)，2.01(d，J＝7.4Hz，1H)，1.68(s，3H)，1.64(m，1H)，1.35(d，J＝7.5Hz，3H)，1.16(d，J＝7.5Hz，3H)。

核磁共振氢谱检测氢数为48，核磁共振碳谱检测碳数为31，结构分析与目标产物一致。

本实施例公开了一种羟地吗啉的制备方法，但是并不限制羟地吗啉的制备，本领域的技术人员可以根据羟地吗啉的结构，通过对尼地吗啉采取不同方法的结构修饰来获得具有通式(I)结构的羟地吗啉，本发明的意义在于通过对尼地吗啉的化学结构进行修饰得到羟地吗啉，而且经过对羟地吗啉的安全性和有效性研究，均好于尼地吗啉，且抑瘤谱较尼地吗啉广、溶解度明显增加。

实施例2 羟地吗啉片剂

配方：羟地吗啉        8g

      微晶纤维素      30g

      乳糖            5g

      羧甲基淀粉钠    0.5g

      滑石粉          0.3g

制备：分别取羟地吗啉、微晶纤维素、乳糖、羧甲基淀粉钠和滑石粉分别过100目筛混合均匀，压片，即得。

实施例3 羟地吗啉片剂

配方：羟地吗啉        16g

      微晶纤维素      35g

      乳糖            5g

      羧甲基淀粉钠    0.5g

      滑石粉          0.3g

制备：分别取羟地吗啉、微晶纤维素、乳糖、羧甲基淀粉钠和滑石粉分别过100目筛混合均匀，压片，即得。

实施例4 羟地吗啉胶囊

配方：羟地吗啉                  8g

      微晶纤维素                10g

      乳糖                      30g

      羧甲基淀粉钠              0.5g

      2％羟丙基甲基纤维素水溶液 适量

      滑石粉                    0.3g

制备：分别取羟地吗啉、微晶纤维素、乳糖和羧甲基淀粉钠分别过100目筛混合均匀，以2％羟丙基甲基纤维素水溶液为粘合剂制软材，过20目筛制湿颗粒，制湿颗粒于50～60℃干燥，干颗粒过20目筛整粒，与滑石粉混匀，装胶囊，即得。

实施例5 羟地吗啉胶囊

配方：羟地吗啉                  16g

      微晶纤维素                35g

      乳糖                      5g

      羧甲基淀粉钠              0.5g

      2％羟丙基甲基纤维素水溶液 适量

      滑石粉                    0.3g

制备：分别取羟地吗啉、微晶纤维素、乳糖和羧甲基淀粉钠分别过100目筛混合均匀，以2％羟丙基甲基纤维素水溶液为粘合剂制软材，过20目筛制湿颗粒，制湿颗粒于50～60℃干燥，干颗粒过20目筛整粒，与滑石粉混匀，装胶囊，即得。

实施例6 羟地吗啉缓释制剂

配方：羟地吗啉                  16g

      羟丙基甲基纤维素K15M      20g

      羟丙基甲基纤维素K4M       10g

      微晶纤维素                5g

      2％羟丙基甲基纤维素水溶液 适量

      滑石粉                    0.3g

制备：分别取羟地吗啉、羟丙基甲基纤维素K15M、羟丙基甲基纤维素K4M、微晶纤维素分别过100目筛混合均匀，以2％羟丙基甲基纤维素水溶液为粘合剂制软材，过20目筛制湿颗粒，制湿颗粒于50～60℃干燥，干颗粒过20目筛整粒，与滑石粉混匀，压片，即得。

实施例7 羟地吗啉缓释制剂

配方：羟地吗啉                  32g

      羟丙基甲基纤维素K15M      20g

      羟丙基甲基纤维素K4M       10g

      乳糖                      5g

      2％羟丙基甲基纤维素水溶液 适量

      滑石粉                    0.3g

制备：分别取羟地吗啉、羟丙基甲基纤维素K15M、羟丙基甲基纤维素K4M和乳糖分别过100目筛混合均匀，以2％羟丙基甲基纤维素水溶液为粘合剂制软材，过20目筛制湿颗粒，制湿颗粒于50～60℃干燥，干颗粒过20目筛整粒，与滑石粉混匀，压片，即得。

实施例8 羟地吗啉缓释胶囊

配方：羟地吗啉                  16g

      羟丙基甲基纤维素K15M      20g

      羟丙基甲基纤维素K4M       10g

      微晶纤维素                5g

      2％羟丙基甲基纤维素水溶液 适量

      滑石粉                    0.3g

制备：分别取羟地吗啉、羟丙基甲基纤维素K15M、羟丙基甲基纤维素K4M和微晶纤维素分别过100目筛混合均匀，以2％羟丙基甲基纤维素水溶液为粘合剂制软材，过20目筛制湿颗粒，制湿颗粒于50～60℃干燥，干颗粒过20目筛整粒，与滑石粉混匀，装胶囊，即得。

实施例9 羟地吗啉缓释胶囊

配方：羟地吗啉                  32g

      羟丙基甲基纤维素K15M      20g

      羟丙基甲基纤维素K4M       10g

      微晶纤维素                5g

      2％羟丙基甲基纤维素水溶液 适量

      滑石粉                    0.3g

制备：分别取羟地吗啉、羟丙基甲基纤维素K15M、羟丙基甲基纤维素K4M和微晶纤维素分别过100目筛混合均匀，以2％羟丙基甲基纤维素水溶液为粘合剂制软材，过20目筛制湿颗粒，制湿颗粒于50～60℃干燥，干颗粒过20目筛整粒，与滑石粉混匀，装胶囊，即得。

实施例10 羟地吗啉缓释微囊的制备

配方：羟地吗啉结晶粉    8g

      乙基纤维素        0.8g

      聚乙烯醇          0.5g

      醋酸乙酯          适量

制备：取羟地吗啉结晶粉，混悬于乙基纤维素的醋酸乙酯溶液中，再将此混悬溶液搅拌分散于聚乙烯醇的水溶液中，加适量水稀释，在不断搅拌下蒸发除去醋酸乙酯，即得羟地吗啉微囊(直径0.6-0.8mm)。

实施例11 羟地吗啉缓释微囊

配方：羟地吗啉       8g

      乙基纤维素     2g

      二氯甲烷       适量

      1％明胶水溶液  适量

制备：取羟地吗啉和乙基纤维素溶于适量二氯甲烷中，将此溶液分散于1％明胶水溶液中，连续搅拌2h，蒸发除去溶剂，即得。微囊直径140-300μm。

实施例12 羟地吗啉缓释片

配方：羟地吗啉        24g

      硬酯酸镁        25.5g

      甲基硅树脂      5g

      乙基纤维素      20g

      羟丙基纤维素    20g

      甲苯            适量

制备：取羟地吗啉与25g硬酯酸镁混合，加甲基硅树脂溶于25ml甲苯溶液，研和，通过30目筛制粒，50℃干燥；另取乙基纤维素(粒度为30-80目)与羟丙基纤维素(粒度为30-100目)，加于上述颗粒中，再加0.5g硬酯酸镁做润滑剂，充分混匀后压片而制得。

实施例13 丙烯酸甲基丙烯酸酯共制羟地吗啉缓释片：

配方：羟地吗啉                 32g

      聚乙二醇-600             30g

      乙基纤维素               30g

      丙烯酸-甲基丙烯酯树脂    40g

制备：将聚乙二醇-600和乙基纤维素熔融后，分别倒入加热板上的陶瓷碟(温度分别控制在75℃、85℃和90℃各10分钟)中混合，加入丙烯酸-甲基丙烯酯树脂，搅拌10分钟。然后，在保温下加入羟地吗啉再搅拌10分钟，使药物分布均匀。将此混合物趁热倒在玻璃板上，降温并保持在0℃，使其凝结。将每块凝结的固体转入陶瓷研钵内研磨15分钟，过筛收集粒度小于420μm的粉粒。常规压片法将其压成片。体外溶出试验表明，药物自片剂内溶出速度受硬度影响较小。硬度可能使片剂骨架内的孔道密度和孔道曲率改变，从而影响了释药速率。采用固体分散技术制粒和药物微粉化可获得相近的释药速率。进行固体分散时采用较高的温度(90℃)使聚合物内药物高度分散并获得较大的表面积，因而显著地增大了单位时间内释药速率。

实施例14 羟地吗啉骨架缓释片

配方：羟地吗啉         32g

      甘油-硬脂酸酯    30g

      微晶纤维素       40g

      硬脂酸镁         5g

制备：羟地吗啉以甘油-硬脂酸酯为骨架材料，微晶纤维素为致孔导剂，可用熔融法和溶媒蒸发法制得。

(1)熔融法：将甘油-硬脂酸酯在65℃水上熔融，边搅拌边慢慢加入羟地吗啉与微晶纤维素的混合物(已过60目筛)。在继续搅拌下让其慢慢冷却。刮下凝结物，过14目筛制粒，加硬脂酸镁压片。

(2)溶媒蒸发法：将甘油-硬脂酸酯溶于60℃的乙醇中，加入药物与微晶纤维素的混合物，充分搅匀，蒸去溶媒。干块粉碎、制粒、压片。

体外溶出试验表明，此两种处方制备的缓释片在一段时间内呈控制药物溶出的骨架型缓释、释药速率随处方中微晶纤维素与甘油-硬脂酸酯添加量的配比增大而加快；以溶媒蒸发法制备的缓释片比熔融法制备的释药较快。

实施例15 羟地吗啉缓释片

配方：羟地吗啉                          32g

      乙氧基乙基纤维素(含乙氧基12％)    5g

      甲苯-二氯甲烷的溶液               2.5g

      二甲基聚硅氧烷甲苯溶液            2.5g

      淀粉                              30g

      甘油棕榈酸硬酯酸酯                0.3g

      滑石粉                            0.5g

      微晶纤维素                        40g

制备：取羟地吗啉、乙氧基乙基纤维素(含乙氧基12％)溶于(1∶1)甲苯-二氯甲烷的溶液与含二甲基聚硅氧烷的甲苯溶液，加压蒸干溶剂，与淀粉，甘油棕榈酸硬酯酸酯，滑石粉、微晶纤维素，常法制成片剂即得。

实施例16 羟地吗啉控释颗粒

配方：羟地吗啉                       16g

      聚磷酸钠                       14g

      醋酸乙酯                       200ml

      聚磷酸钠-脱乙酰壳多糖的盐酸液  适量

      纯化水                         20ml

制备：取羟地吗啉与聚磷酸钠分散于醋酸乙酯中，加入水，以500r/min速度搅拌得凝聚颗粒，分离、干燥，经12～20目筛得颗粒，再分散于聚磷酸钠-脱乙酰壳多糖的盐酸液(0.3％～0.9％，质量/体积)中，用转速1400r/min搅拌20～90min，分离出包衣颗粒，用水洗涤、干燥，即得羟地吗啉的聚磷酸钠-脱乙酰壳多糖包衣控释颗粒。

实施例17 羟地吗啉控释片

片芯配方：  羟地吗啉        16g

            淀粉            20g

            十二烷基硫酸钠  0.2g

            10％的淀粉浆    7g

            滑石粉          0.2g

包衣液配方：醋酸纤维素      8.5g

            PEG1500         1.5g

            聚山梨醇80      0.05g

            丙酮            200ml

制备：(1)取羟地吗啉、淀粉、十二烷基硫酸钠，混匀用10％的淀粉浆制粒(40目)，于70～80℃干燥，加入滑石粉混合压制成直径100mm的片芯。

(2)取醋酸纤维素、PEG1500、聚山梨醇80，用丙酮溶解配成包衣液。

(3)取上述片芯置微型包衣锅内滚动，喷包衣液于流动片床上，吹热风干燥，再喷雾、干燥，如此反复操作至每片包衣层重25～30mg时，取出干燥即得。

实施例18 羟地吗啉药用复合物注射剂

配方：羟地吗啉    8g

      精氨酸      2g

      无水乙醇    20ml

      氯化钠      适量

      注射用水    适量

制备：将羟地吗啉、精氨酸溶于无水乙醇中，减压蒸发除去乙醇，加入氯化钠和注射用水混匀成澄清透明溶液，经0.22μm微孔滤膜过滤，分装封口，与100℃流通蒸汽灭菌30分钟，每支含羟地吗啉8mg。

实施例19 羟地吗啉注射剂

配方：羟地吗啉          8g

      聚氧乙烯蓖麻油    2g

      无水乙醇          20ml

      氯化钠            适量

      注射用水          适量

制备：将羟地吗啉溶于无水乙醇，加入聚氧乙烯蓖麻油混匀，减压蒸发除去乙醇，加入适量氯化钠和注射用水混匀成澄清透明溶液，经0.22μm微孔滤膜过滤，分装封口，与100℃流通蒸汽灭菌30分钟，每支含羟地吗啉8mg。

实施例20 羟地吗啉药用复合物注射剂

配方：羟地吗啉    8g

      乙二胺      0.2g

      氯化钠      适量

      注射用水    适量

制备：将羟地吗啉溶于乙二胺水溶液中，混匀，再加入适量氯化钠和注射用水混匀成澄清透明溶液，经0.22μm微孔滤膜过滤，分装封口，与100℃流通蒸汽灭菌30分钟，每支含羟地吗啉8mg。

实施例21 羟地吗啉对小鼠移植性肿瘤肉瘤S180的抑制作用

实验方法：昆明种健康小鼠，体重18～22g，均为雄性，无菌条件下吸取传代7天的小鼠肉瘤S₁₈₀腹水，用生理盐水稀释成密度为4×10⁷cells/ml^-1的肿瘤细胞悬液，混合均匀，每只小鼠0.2ml接种于右前肢腋窝皮下。将接种后24h的小鼠随机分成6组，分别给予不同药物，各组均给药7天，第8天解剖，称量小鼠及瘤块重量，计算抑瘤率及体重变化情况，结果见表1。

按公式：

抑瘤率％＝(空白对照组平均瘤重-受试样品组平均瘤重)/空白对照组×100％

计算各组抑瘤率，并用SPSS进行统计学分析；

表1 羟地吗啉对小鼠移植性肿瘤肉瘤S180的抑制作用

^*与空白组比较p＜0.05  ^**与空白组比较p＜0.01；

结果表明，羟地吗啉对实体瘤S180有明显的抑制作用(P＜0.01)。

实施例22 羟地吗啉对小鼠移植性肿瘤肝癌H22的抑制作用

实验方法：昆明种健康小鼠，体重18～22g，均为雄性，无菌条件下吸取传代7天的小鼠肝癌H22腹水，用生理盐水稀释成密度为4×10⁷cells/ml^-1的肿瘤细胞悬液，混合均匀，每只小鼠0.2ml接种于右前肢腋窝皮下。将接种后24h的小鼠随机分成6组，分别给予不同药物，各组均给药7天，第8天解剖，称量小鼠及瘤块重量，计算抑瘤率及体重变化情况，结果见表2.

按公式：

抑瘤率％＝(空白对照组平均瘤重-受试样品组平均瘤重)/空白对照组×100％

计算各组抑瘤率，并用SPSS进行统计学分析；

表2 羟地吗啉对小鼠移植性肿瘤肝癌H22的抑制作用

^*与空白组比较p＜0.05  ^**与空白组比较p＜0.01；

结果表明，羟地吗啉对肝癌H22有明显的抑制作用(P＜0.01)；

实施例23 羟地吗啉对小鼠移植性肿瘤lewis肺癌的抑制作用

实验方法：C57小鼠健康小鼠，体重18～22g，均为雄性，选一健康的荷lewis肺癌瘤的小鼠(肿瘤生长必须良好)，剥取瘤块后用研磨器将其制备成瘤细胞悬液，过200目细胞筛，计瘤细胞数，用生理盐水稀释到2×10⁶cells/0.2ml/20g，接种C57小鼠前肢腋窝皮下。将接种后24h的小鼠随机分成6组，分别给予不同药物，各组均隔日给药14天，第15天解剖，称量小鼠及瘤块重量，计算抑瘤率及体重变化情况，结果见表3.

按公式：

抑瘤率％＝(空白对照组平均瘤重-受试样品组平均瘤重)/空白对照组×100％

计算各组抑瘤率，并用SPSS进行统计学分析；

表3羟地吗啉对小鼠移植性肿瘤lewi s肺癌的抑制作用

*与空白组比较p＜0.05  **与空白组比较p＜0.01；

羟地吗啉对Lewis肺癌有明显的抑制作用(P＜0.01)；

实施例24 羟地吗啉对异种移植于裸小鼠人肝癌SMMC-7721和肺癌A549有明显的抑制作用。

试验方法：取生长旺盛期的瘤组织剪切成1.5mm³。左右，在无菌条件下，接种于裸小鼠右侧腋窝皮下。裸小鼠移植瘤用游标卡尺测量移植瘤直径，待肿瘤生长至100-300mm³后将动物随机分组。使用测量瘤径的方法，动态观察被试物抗肿瘤的效应。肿瘤直径的测量次数为每周2次，每次测量时同时称鼠重。实验组每周静脉给药3次，阳性对照组每周静脉给药3次，阴性对照组同时给等量生理盐水。结果见表4、5。

肿瘤体积(tumor volume，TV)的计算公式为：

TV＝1/2×a×b²

其中a、b分别表示长宽。根据测量的结果计算出相对肿瘤体积(relative tumorvolume，RTV)，计算公式为：RTV＝V_t/V₀。其中V₀为分笼给药时(即d₀)测量所得肿瘤体积，V_t为每一次测量时的肿瘤体积。抗肿瘤活性的评价指标为相对肿瘤增殖率T/C(％)，计算公式如下：

$T/C(\%)=\frac{T_{\mathrm{RTV}}}{C_{\mathrm{RTV}}}\×100$

T_RTV：治疗组RTV；C_PTV：阴性对照组RTV。

表4 羟地吗啉对异种移植于裸鼠人肝癌SMMC-7721的抑制作用

	羟地吗啉(QDML)	环磷酰胺(CTX)	紫杉醇(THS)
				剂量(mg·kg-1)	1	15	25
给药途径	iv	iv	ip
				相对肿瘤增殖率T/C(％)	36.32～50.87	48.3.39～60.24	48.30～55.32

表5 羟地吗啉对异种移植于裸鼠人肺癌A549的抑制作用

	羟地吗啉(QDML)	环磷酰胺(CTX)	紫杉醇(THS)
				剂量(mg·k-1)	1	15	25
给药途径	iv	iv	ip
				相对肿瘤增殖率T/C(％)	21.20～48.56	58.25～73.71	58.25～66.37

体内实验表明：对异种移植裸鼠人肝癌SMMC-7721和人肺癌A549均有明显的抑制作用(P＜0.01)，优于环磷酰胺和紫杉醇。

实施例25 对环磷酰胺致免疫功能低下小鼠免疫器官质量的影响

取昆明种小鼠50只，雌雄各半，随机分为5组，每组10只，分为生理盐水对照组，环磷酰胺(CTX)模型组和QDML低、中、高剂量组，静脉给药，每天1次，连续7d，除生理盐水组外，其它各组小鼠于给药的第1、2d再腹腔注射环磷酰胺，剂量为40mg/kg.于末次给药后1h，脱颈椎处死小鼠，摘除胸腺和脾脏称其质量，以胸腺质量m₁与脾脏质量m₂(mg)与体质量m₀(g)之比作为胸腺指数或脾脏指数，结果见表6。

表6对环磷酰胺致免疫功能低下小鼠免疫器官重量的影响(x±s)

^△P＜0.05，^△△P＜0.01compared with NS group；^*P＜0.05，^***P＜0.001compared with model group

表6结果可见，QDML能增加小鼠免疫器官的质量，增加其指数，与空白对照组比较有显著差异(P＜0.05)；与环磷酰胺模型组相比各组胸腺指数或脾脏指数明显增加，有显著性差异(P＜0.01)。

实施例26 对环磷酰胺致免疫功能低下小鼠碳廊清能力的影响

昆明种小鼠50只，雌雄各半，随机分为5组，每组10只，分为生理盐水对照组，环磷酰胺模型组和QDML低、中、高剂量组，灌胃给药，每天1次，连续7天，给药的第2天，除生理盐水对照组外，其它各组小鼠腹腔注射环磷酰胺，剂量为100mg/kg.末次给药后1h，各组小鼠尾静脉注射按体积比1∶5稀释的印度墨汁(0.1mL/20g)，此后在第2min(t₁)和10min(t₂)分钟从眼眶后静脉丛取血，每次20μL，分别注入盛有2mL 0.001mg/mL Na₂CO₃溶液的试管摇匀，用721分光光度计于680nm处吸光度值A₁、A₂，并按公式计算吞噬指数(K)及校正吞噬指数(α).K＝(lgA₁-lgA₂)/(t₂-t₁)，A₁，A₂分别为t₁和t₂时刻的吸光度值；α＝W*׳√K/WLS W为小鼠质量，WLS为肝脾合重，结果见表2。

表7对环磷酰胺致免疫功能低下小鼠碳廊清能力的影响(x±s)

^△△P＜0.01，^△△△P＜0.001compared with NS group；^*P＜0.05，^**P＜0.01，^***P＜0.001compared with model group.

表7结果可见，QDML具有显著促进免疫功能低下小鼠碳廊清能力，对免疫功能低下小鼠具有免疫调节作用，与空白组比较差异显著(P＜0.01)，与环磷酰胺组比较差异非常显著(P＜0.001)。

Claims (9)

1.含有羟地吗啉或羟地吗啉药用复合物的药物组合物制剂，其特征在于：是将具有通式(I)结构的羟地吗啉或具有通式(II)结构的羟地吗啉药用复合物作为有效成分，与药学上可接受的药物载体混合制成的药物组合物制剂；

通式(II)中，B表示C₁-C₈含氮有机碱或氨基酸。

2.根据权利要求1所述的药物组合物制剂，其特征在于：所述的药学上可接受的药物载体选自稀释剂、赋形剂、水、填充剂、崩解剂、粘合剂、润湿剂、表面活性剂、吸附载体、润滑剂、增溶剂和/或助溶剂。

3.根据权利要求1或2所述的药物组合物制剂，其特征在于：药物组合物制剂的剂型包括片剂、胶囊剂、软胶囊剂、喷雾剂、凝胶剂、凝胶气雾剂、混悬剂、冲剂、贴剂、软膏、丸剂、散剂、乳剂、注射剂、输液剂、冻干注射剂、脂质体注射剂、靶向给药注射剂、栓剂、缓释制剂和控释制剂。

4.根据权利要求3所述的药物组合物制剂，其特征在于：是羟地吗啉或羟地吗啉药用复合物作为有效成分与填充剂和/或崩解剂制成片剂或胶囊剂；或者是羟地吗啉或羟地吗啉药用复合物作为有效成分与填充剂和/或羟丙甲纤维素制成缓释制剂；或者是羟地吗啉或羟地吗啉药用复合物作为有效成分与填充剂、羟丙甲基纤维酸酯、乙基纤维素、聚乙烯醇、甲基硅树脂、羟丙基纤维素、聚乙二醇-600、丙烯酸-甲基丙烯酯树脂、乙氧基乙基纤维素、甘油棕榈酸硬酯酸酯、聚磷酸钠-脱乙酰壳多糖和/或PEG1500制成缓释制剂或控释制剂。

5.根据权利要求3所述的药物组合物制剂，其特征在于：是羟地吗啉或羟地吗啉药用复合物作为有效成分与油相组合，制成注射剂或口服乳剂，所述的油相是大豆油、聚乙二醇400、棉籽油、花生油、麻油、玉米油和/或橄榄油。

6.根据权利要求5所述的药物组合物制剂，其特征在于：在油相中还可加入增溶剂或潜溶剂或抗氧剂。

7.根据权利要求2或4所述的药物组合物制剂，其特征在于：所述的填充剂是蔗糖、乳糖、微晶纤维素、糊精、淀粉和/或磷酸钙；所述的崩解剂是羟丙基甲基纤维素、羧甲基淀粉钠、交联聚维酮和/或交联羧甲基纤维素。

8.根据权利要求1所述的药物组合物制剂，其特征在于：所述的药物组合物制剂可通过口服或非肠胃给药的方式施用于患者；用于口服时，可将其制成常规的固体制剂或液体制剂，所述的固体制剂是片剂、胶囊剂、粉剂或颗粒剂，所述的液体制剂是水溶液、油悬浮剂、糖浆或酏剂；用于非肠胃给药时，可将其制成注射用的溶液、粉剂或油性悬浮剂等。

9.以上任意权利要求所述的药物组合物制剂在治疗肝癌、肺癌及肿瘤中的应用。