CN101735998A - 水溶性聚乙烯醇纤维的生物制备方法 - Google Patents

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Abstract

水溶性聚乙烯醇纤维的生物制备方法属于生物化学领域，尤其涉及一种水溶性水溶性聚乙烯醇纤维的生物制备方法。本发明提供一种制备简单、产品质量高、方法实用的水溶性聚乙烯醇纤维的生物制备方法。本发明是采用如下技术方案，本发明包括以下步骤：(1)将水溶性聚乙烯醇纤维、海藻酸钠、丙烯酞胺与水相混合，水浴加热至溶化，然后静置降至常温成为水溶性聚乙烯醇纤维溶液；(2)将酶/微生物悬浮液与所述的水溶性聚乙烯醇纤维溶液以一定比例相混合；(3)将饱和硼酸溶液加入氯化钙和N，N’－亚甲基双丙烯酞胺制备交联剂溶液；(4)将第3步制备的混合溶液滴加到冷却的交联剂溶液中，使其形成白色球型颗粒，然后用生理盐水洗涤。

Description

水溶性聚乙烯醇纤维的生物制备方法
技术领域：
本发明属于生物技术领域，尤其涉及一种水溶性水溶性聚乙烯醇纤维的生物制备方法。
背景技术：
水溶性聚乙烯醇纤维在加热后溶于水，在其水溶液中加入添加剂后发生凝胶化，或在低温下(-10℃)冷冻形成凝胶，从而将微生物包埋固定在凝胶网络中。常用的添加剂有硼酸和硼砂，在水溶性聚乙烯醇纤维水溶液中加入硼酸或硼砂，通过化学反应形成凝胶，其制作步骤为：(1)将水溶性聚乙烯醇纤维与水以1∶5～1∶10比例相混合，水浴加热至水溶性聚乙烯醇纤维溶化，然后静置降至常温。(2)将离心后酶/微生物悬浮于0.9％NaCl溶液中，酶/微生物湿重与NaCl溶液的重量比为1∶1～1∶2。将此酶/微生物悬浮液与水溶性聚乙烯醇纤维溶液以一定比例相混合。(3)用注射器将混合溶液滴加到冷却的饱和硼酸溶液中，形成直径几毫米的白色球型颗粒。(4)将颗粒在饱和硼酸溶液中浸泡一段时间，然后用生理盐水洗涤。
但目前这种水溶性聚乙烯醇纤维固定化方法中存在的主要问题是：其一，水溶性聚乙烯醇纤维是一种高粘性物质，并且水溶性聚乙烯醇纤维与硼酸反应较慢，滴下时间相差不大的两液滴相碰时会粘结在一起，并逐步溶合成一团，即水溶性聚乙烯醇纤维颗粒有非常强的附聚倾向，使水溶性聚乙烯醇纤维凝胶成球困难；其二，水溶性聚乙烯醇纤维与硼酸进行反应固定时，硼酸上的三个经基只部分地进行了反应，反应后形成的高聚物凝胶上还残留有亲水性的轻基，使得固定化颗粒在应用中存在很大的水溶膨胀性，随着使用时间的增长，强度大大减弱，在实际应用中极为不利。
发明内容
本发明的目的就在于克服现有技术存在的上述不足，而提供一种制备简单、产品质量高、方法实用的水溶性聚乙烯醇纤维的生物制备方法。
为了实现上述目的，本发明是采用如下技术方案，本发明包括以下步骤：
(1)将水溶性聚乙烯醇纤维、海藻酸钠、丙烯酞胺与水相混合，水浴加热至溶化，然后静置降至常温成为水溶性聚乙烯醇纤维溶液；其中，水溶性聚乙烯醇纤维加入量为15～30％；海藻酸钠加入量为0.1～3.0％；丙烯酞胺加入量为0.2～10％；其余量为水；
(2)将酶/微生物悬浮液与所述的水溶性聚乙烯醇纤维溶液以一定比例相混合；
(3)将饱和硼酸溶液加入1～3％氯化钙和0.1～2.0％的N，N’一亚甲基双丙烯酞胺制备交联剂溶液；
(4)用注射器或滴管将第3步制备的混合溶液滴加到冷却的交联剂溶液中，使其形成白色球型颗粒，并在其中浸泡若干小时，然后用生理盐水洗涤。
本发明的有益效果：
本发明的水溶性聚乙烯醇纤维的生物制备技术，可以使固定化颗粒制备简单，颗粒的机械强度明显提高，使用寿命延长。
具体实施方式：
实施例1
本发明包括以下步骤：
(1)将15g水溶性聚乙烯醇纤维、1.0g海藻酸钠、5.0g丙烯酞胺与100mL水相混合，水浴加热至溶化，然后静置降至常温；
(2)纤维素酶湿重5g，悬浮于10mL 0.9％NaCl中，与12.5mL上述溶液相混合。
(3)将饱和硼酸溶液加入1％CaCl2和0.5％的N，N’一亚甲基双丙烯酞胺制备成都交联剂溶液；
(4)用0.40mm ID的注射器将(2)中的混合液滴加到冷却的交联剂溶液中，使其形成2mm直径的白色球型小珠，并在其中浸泡20h，然后用生理盐水洗涤。
实施例2
制备步骤：
(1)将20g水溶性聚乙烯醇纤维、1.0海藻酸钠、4.0丙烯酞胺与100mL水相混合，水浴加热至溶化，然后静置降至常温；
(2)丝抱酵母细胞湿重5g，悬浮于12mL 0.9％NaCl中，与10mL上述溶液相混合。
(3)将饱和硼酸溶液加入2％CaCl2和0.8％的N，N’一亚甲基双丙烯酞胺制备成都交联剂溶液；
(4)用胶皮吸管将(2)中的混合液滴加到冷却的交联剂溶液中，使其形成3mm直径的白色球型小珠，并在其中浸泡24h，然后用生理盐水洗涤。

Claims (2)

1.水溶性聚乙烯醇纤维的生物制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)将水溶性聚乙烯醇纤维、海藻酸钠、丙烯酞胺与水相混合，水浴加热至溶化，然后静置降至常温成为水溶性聚乙烯醇纤维溶液；其中，水溶性聚乙烯醇纤维加入量为15～30％；海藻酸钠加入量为0.1～3.0％；丙烯酞胺加入量为0.2～10％；其余量为水；
(2)将酶/微生物悬浮液与所述的水溶性聚乙烯醇纤维溶液以一定比例相混合；
(3)将饱和硼酸溶液加入1～3％氯化钙和0.1～2.0％的N，N’一亚甲基双丙烯酞胺制备交联剂溶液；
(4)用注射器或滴管将第3步制备的混合溶液滴加到冷却的交联剂溶液中，使其形成白色球型颗粒，并在其中浸泡若干小时，然后用生理盐水洗涤。
2.根据权利要求1所述的水溶性聚乙烯醇纤维的生物制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)将15g水溶性聚乙烯醇纤维、1.0g海藻酸钠、5.0g丙烯酞胺与100mL水相混合，水浴加热至溶化，然后静置降至常温；
(2)纤维素酶湿重5g，悬浮于10mL 0.9％NaCl中，与12.5mL上述溶液相混合；
(3)将饱和硼酸溶液加入1％CaCl2和0.5％的N，N’一亚甲基双丙烯酞胺制备成都交联剂溶液。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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CN104846625A (zh) * 2015-04-16 2015-08-19 青岛大学 一种耐盐、耐洗涤剂海藻纤维的制备方法

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