CN103013971A - 一种固定化酶及制备方法 - Google Patents
一种固定化酶及制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN103013971A CN103013971A CN2012105375090A CN201210537509A CN103013971A CN 103013971 A CN103013971 A CN 103013971A CN 2012105375090 A CN2012105375090 A CN 2012105375090A CN 201210537509 A CN201210537509 A CN 201210537509A CN 103013971 A CN103013971 A CN 103013971A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- solution
- enzyme
- immobilized enzyme
- carrier
- proportion
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Landscapes
- Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)
Abstract
本发明公开了一种固定化酶的制备方法，步骤为：(1)将聚乙烯醇加入水中，搅拌下，加入APTES，再滴加盐酸水溶液，搅拌，得到改性聚乙烯醇的溶液；(2)将改性聚乙烯醇溶液与壳聚糖溶液混合，搅拌，抽真空除去溶液中的气泡，得到均相的混合液，滴于氢氧化钠溶液中，固化，用蒸馏水洗至中性，过滤，得到复合小球载体；(3)将复合小球载体置于戊二醛-缓冲液溶液中，震荡活化得到活化后的载体小球；(4)将活化后的载体小球置于酶-缓冲液溶液中，震荡，得到的固定化酶小球；本发明的方法制备的固定化酶酶活高，热稳定性、重复使用性很好。在重复使用9次后，还能够保留80%以上的初始酶活。而且固定化酶颗粒直径有3-4mm，便于分离。
Description
技术领域
本发明属于材料改性及生物化工领域，涉及一种固定化酶及制备方法。
背景技术
固定化酶指经物理或化学方法处理后，使酶变成不易随水流失，即运动受限制，而又能发挥催化作用的酶制剂。与游离酶相比，固定化酶的优点有：可多次使用，且酶的稳定性高；反应后，固定化酶易与底物和产物分离；反应条件易于控制，有利于自动化生产。
壳聚糖是一种自然界中的天然多糖,其资源量仅次于自然界中含量最为丰富的纤维素。其化学名称为聚葡萄糖胺(1-4)-2-氨基-β-D葡萄糖，它是甲壳素的重要衍生物。而甲壳素主要来源于节肢动物、软体动物、环节动物、原生动物、腔肠动物、海藻及真菌等生物体，每年在地球上的自然生成量达十亿吨之多。由于壳聚糖的生物亲和性高、可用于化学修饰的基团多、亲水性强、易交联成形、无毒对环境友好等特点，它作为固定化酶载体的研究很早就引起了很多学者的重视。但是至今为止，由于合成的壳聚糖固定化酶的机械强度低，易磨损等特点，限制了其在实际生产中的应用。
聚乙烯醇是一种水溶性高分子材料，这种材料廉价易得。而且动物实验表明，其完全无害，无毒性，无刺激性并且有良好的生物相容性，能够在体内缓慢降解，广泛应用于制备止血纤维、人工皮肤，还可以用于代血浆、眼药膜等，也可以作为药物缓释载体材料制备靶向微球或者用来制备固定化酶载体。将酶包埋于聚乙烯醇小球中，制成固定化酶是现在常用的一种固定化酶方法。
聚乙烯醇与壳聚糖相比，有着机械强度高，耐磨性强的特点，但是壳聚糖又有着可修饰基团多的优点。所以，将这两种材料复合，形成一种兼有两者优点的复合材料，并将其用于固定化酶，受到了很多研究人员的关注。但是，迄今为止，文献报道的复合材料都是简单的物理作用力连接的，材料的机械强度、物理化学稳定性差。
发明内容
本发明的目的是克服现有技术的不足，提供一种酶载量高，稳定性好的固定化酶。
本发明的第二个目的是提供一种固定化酶的制备方法。
本发明的技术方案概述如下：
一种固定化酶的制备方法，包括如下步骤：
(1)按比例将10g平均聚合度为1750±50的聚乙烯醇加入100-150mL水中，搅拌下加热至75-85℃，保温1.5-2.5h，加入1-5mL 3-氨丙基三乙氧基硅烷，再滴加1-2mL、浓度为1mol/L盐酸水溶液，搅拌0.5-2.5h，得到改性聚乙烯醇的溶液；
(2)按比例将50mL所述改性聚乙烯醇溶液与50-250mL壳聚糖溶液混合，搅拌1-2h，抽真空除去溶液中的气泡，得到均相的混合液，将30mL所述均相混合液滴于100-150mL氢氧化钠溶液中，固化1-3h，用蒸馏水洗至中性，过滤，得到复合小球载体；
所述壳聚糖溶液是用下述方法制成：将1-4g脱乙酰度≥85%的壳聚糖加入100mL水中，在搅拌下加入1-3mL冰醋酸，继续搅拌2-3h，得到壳聚糖溶液；
所述氢氧化钠溶液是用下述方法制成：将6-12g氢氧化钠溶解于100mL水中，再加入20mL乙醇混合均匀；
(3)按比例将4g所述复合小球载体置于20-50mL、质量浓度为1%-5%的戊二醛-缓冲液溶液中，震荡活化1-5h，用缓冲液洗3-5次，除去未反应的戊二醛，得到活化后的载体小球；
(4)按比例将4g所述活化后的载体小球置于10-50mL、浓度为0.25-1.25mg/mL的酶-缓冲液溶液中，震荡10-20h，用缓冲液洗3-5次，除去未交联的酶，得到的固定化酶小球真空冻干；
所述缓冲液为pH=7.0的磷酸盐缓冲液。
步骤（1）优选为：按比例将10g平均聚合度为1750±50的聚乙烯醇加入125mL水中，搅拌下加热至80℃，保温2h，加入3mL 3-氨丙基三乙氧基硅烷，再滴加1.5mL、浓度为1mol/L盐酸水溶液，搅拌1.5h，得到改性聚乙烯醇的溶液。
步骤（2）优选为：按比例将50mL所述改性聚乙烯醇溶液与150mL壳聚糖溶液混合，搅拌1.5h，抽真空除去溶液中的气泡，得到均相的混合液，将30mL所述均相混合液滴于125mL氢氧化钠溶液中，固化2h，用蒸馏水洗至中性，过滤，得到复合小球载体；
所述壳聚糖溶液是用下述方法制成：将3g脱乙酰度≥85%的壳聚糖加入100mL水，在搅拌下加入2mL冰醋酸，继续搅拌2.5h，得到壳聚糖溶液；
所述氢氧化钠溶液是用下述方法制成：将9g氢氧化钠溶解于100mL水中，再加入20mL乙醇，混合均匀。
所述步骤（3）优选为：按比例将4g所述复合小球载体置于35mL、质量浓度为3%的戊二醛-缓冲液溶液中，震荡活化3h，用缓冲液洗4次，除去未反应的戊二醛，得到活化后的载体小球。
步骤（4）优选为：按比例将4g所述活化后的载体小球置于30mL、浓度为0.75mg/mL的酶-缓冲液溶液中，震荡10h，用缓冲液洗4次，除去未交联的酶，得到的固定化酶小球真空冻干；
所述缓冲液为pH=7.0的磷酸盐缓冲液。
所述酶为过氧化氢酶、纤维素酶、木瓜蛋白酶或糖化酶。
上述方法制备的固定化酶。
本发明的方法制备的固定化酶与比未改性的材料负载酶后得到的固定化酶活提高约10%以上。实验得到固定化酶的热稳定性、重复使用性很好。在重复使用9次后，还能够保留80%以上的初始酶活。而且固定化酶颗粒直径有3-4mm，便于分离。
具体实施方式
为了更好的理解本发明，下面结合实施例对本发明做进一步描述，本发明的保护不限于此。
实施例1
(1)按比例将10g平均聚合度为1750±50的聚乙烯醇加入125mL水中，搅拌下加热至80℃，保温2h，加入3mL 3-氨丙基三乙氧基硅烷（APTES），再滴加1.5mL、浓度为1mol/L盐酸水溶液，搅拌1.5h，得到改性聚乙烯醇的溶液；
(2)按比例将50mL所述改性聚乙烯醇溶液与150mL壳聚糖溶液混合，搅拌1.5h，抽真空除去溶液中的气泡，得到均相的混合液，将30mL所述均相混合液滴于125mL氢氧化钠溶液中，固化2h，用蒸馏水洗至中性，过滤，得到复合小球载体；
所述壳聚糖溶液是用下述方法制成：将3g脱乙酰度≥85%的壳聚糖加入100mL水中，在搅拌下加入2mL冰醋酸，继续搅拌2.5h，得到壳聚糖溶液；
所述氢氧化钠溶液是用下述方法制成：将9g氢氧化钠溶解于100mL水中，再加入20mL乙醇混合均匀；
（3）按比例将4g所述复合小球载体置于35mL、质量浓度为3%的戊二醛-缓冲液溶液中，震荡活化3h，用缓冲液洗4次，除去未反应的戊二醛，得到活化后的载体小球。
(4)按比例将4g所述活化后的载体小球置于30mL、浓度为0.75mg/mL的过氧化氢酶-缓冲液溶液中，震荡10h，用缓冲液洗4次，除去未交联的酶，得到的固定化酶小球真空冻干；
所述缓冲液为pH=7.0的磷酸盐缓冲液。
固定化酶小球酶的负载量为2.35mg酶/g载体。使用改性材料得到的固定化酶酶活比使用未改性材料得到的固定化酶酶活高11%以上。
固定化酶具有很好的热稳定性、重复实用性，而且对温度、pH的敏感性也有所降低。各项性能均优于未改性载体得到的固定化酶。
固定化酶颗粒直径有3-4mm，便于分离。
实施例2
(1)按比例将10g平均聚合度为1750±50的聚乙烯醇加入100mL水中，搅拌下加热至80℃，保温2h，加入3mL APTES，再滴加1.5mL、浓度为1mol/L盐酸水溶液，搅拌1.5h，得到改性聚乙烯醇的溶液；
(2)按比例将50mL所述改性聚乙烯醇溶液与50mL壳聚糖溶液混合，搅拌1.5h，抽真空除去溶液中的气泡，得到均相的混合液，将30mL所述均相混合液滴于125mL氢氧化钠溶液中，固化2h，用蒸馏水洗至中性，过滤，得到复合小球载体；
所述壳聚糖溶液是用下述方法制成：将4g脱乙酰度≥85%的壳聚糖加入100mL水中，在搅拌下加入2mL醋酸，继续搅拌2.5h，得到壳聚糖溶液；
所述氢氧化钠溶液是用下述方法制成：将6g氢氧化钠溶解于100mL水中，再加入20mL乙醇混合均匀；
（3）按比例将4g所述复合小球载体置于35mL、质量浓度为3%的戊二醛-缓冲液溶液中，震荡活化3h，用缓冲液洗4次，除去未反应的戊二醛，得到活化后的载体小球。
(4)按比例将4g所述活化后的载体小球置于30mL、浓度为0.75mg/mL的糖化酶-缓冲液溶液中，震荡15h，用缓冲液洗4次，除去未交联的酶，得到的固定化酶小球真空冻干；
所述缓冲液为pH=7.0的磷酸盐缓冲液。
固定化酶小球酶的负载量为2.51mg酶/g载体。使用改性材料得到的固定化酶酶活比使用未改性材料得到的固定化酶酶活高13%以上。
固定化酶具有很好的热稳定性、重复实用性，而且对温度、pH的敏感性也有所降低。各项性能均优于未改性载体得到的固定化酶。
固定化酶颗粒直径有3-4mm，便于分离。
实施例3
(1)按比例将10g平均聚合度为1750±50的聚乙烯醇加入140mL水中，搅拌下加热至75℃，保温2.5h，加入1mL APTES，再滴加2mL、浓度为1mol/L盐酸水溶液，搅拌2.5h，得到改性聚乙烯醇的溶液；
(2)按比例将50mL所述改性聚乙烯醇溶液与50mL壳聚糖溶液混合，搅拌2h，抽真空除去溶液中的气泡，得到均相的混合液，将30mL所述均相混合液滴于100mL氢氧化钠溶液中，固化3h，用蒸馏水洗至中性，过滤，得到复合小球载体；
所述壳聚糖溶液是用下述方法制成：将1g脱乙酰度≥85%的壳聚糖加入100mL水中，在搅拌下加入1mL冰醋酸，继续搅拌2h，得到壳聚糖溶液；
所述氢氧化钠溶液是用下述方法制成：将10g氢氧化钠溶解于100mL水中，再加入20mL乙醇混合均匀；
(3)按比例将4g所述复合小球载体置于20mL、质量浓度为5%的戊二醛-缓冲液溶液中，震荡活化1h，用缓冲液洗5次，除去未反应的戊二醛，得到活化后的载体小球；
(4)按比例将4g所述活化后的载体小球置于10mL、浓度为1.25mg/mL的纤维素酶-缓冲液溶液中，震荡10h，用缓冲液洗3次，除去未交联的酶，得到的固定化酶小球真空冻干；
所述缓冲液为pH=7.0的磷酸盐缓冲液。
固定化酶小球酶的负载量为2.13mg酶/g载体。使用改性材料得到的固定化酶酶活比使用未改性材料得到的固定化酶酶活高10%以上。
固定化酶具有很好的热稳定性、重复实用性，而且对温度、pH的敏感性也有所降低。各项性能均优于未改性载体得到的固定化酶。
固定化酶颗粒直径有3-4mm，便于分离。
实施例4
(1)按比例将10g平均聚合度为1750±50的聚乙烯醇加入150mL水中，搅拌下加热至85℃，保温1.5h，加入5mL APTES，再滴加1mL、浓度为1mol/L盐酸水溶液，搅拌0.5h，得到改性聚乙烯醇的溶液；
(2)按比例将50mL所述改性聚乙烯醇溶液与250mL壳聚糖溶液混合，搅拌1h，抽真空除去溶液中的气泡，得到均相的混合液，将30mL所述均相混合液滴于150mL氢氧化钠溶液中，固化1h，用蒸馏水洗至中性，过滤，得到复合小球载体；
所述壳聚糖溶液是用下述方法制成：将4g脱乙酰度≥85%的壳聚糖加入100mL水中，在搅拌下加入3mL冰醋酸，继续搅拌3h，得到壳聚糖溶液；
所述氢氧化钠溶液是用下述方法制成：将12g氢氧化钠溶解于100mL水中，再加入20mL乙醇混合均匀；
(3)按比例将4g所述复合小球载体置于50mL、质量浓度为1%的戊二醛-缓冲液溶液中，震荡活化5h，用缓冲液洗3次，除去未反应的戊二醛，得到活化后的载体小球；
(4)按比例将4g所述活化后的载体小球置于50mL、浓度为0.25mg/mL的木瓜蛋白酶-缓冲液溶液中，震荡20h，用缓冲液洗5次，除去未交联的酶，得到的固定化酶小球真空冻干；
所述缓冲液为pH=7.0的磷酸盐缓冲液。
固定化酶小球酶的负载量为1.58mg酶/g载体。使用改性材料得到的固定化酶酶活比使用未改性材料得到的固定化酶酶活高14%以上。
固定化酶具有很好的热稳定性、重复实用性，而且对温度、pH的敏感性也有所降低。各项性能均优于未改性载体得到的固定化酶。
固定化酶颗粒直径有3-4mm，便于分离。
实验中，酶的固定化量是根据酶溶液使用前后总酶蛋白的差值来计算的，酶液中的酶含量使用考马斯亮蓝法检测。
实验证明，本发明制备的固定化酶在重复使用9次后，还能够保留80%以上的初始酶活。
Claims (7)
1.一种固定化酶的制备方法，其特征是包括如下步骤：
(1)按比例将10g平均聚合度为1750±50的聚乙烯醇加入100-150mL水中，搅拌下加热至75-85℃，保温1.5-2.5h，加入1-5mL 3-氨丙基三乙氧基硅烷，再滴加1-2mL、浓度为1mol/L盐酸水溶液，搅拌0.5-2.5h，得到改性聚乙烯醇的溶液；
(2)按比例将50mL所述改性聚乙烯醇溶液与50-250mL壳聚糖溶液混合，搅拌1-2h，抽真空除去溶液中的气泡，得到均相的混合液，将30mL所述均相混合液滴于100-150mL氢氧化钠溶液中，固化1-3h，用蒸馏水洗至中性，过滤，得到复合小球载体；
所述壳聚糖溶液是用下述方法制成：将1-4g脱乙酰度≥85%的壳聚糖加入100mL水中，在搅拌下加入1-3mL冰醋酸，继续搅拌2-3h，得到壳聚糖溶液；
所述氢氧化钠溶液是用下述方法制成：将6-12g氢氧化钠溶解于100mL水中，再加入20mL乙醇混合均匀；
(3)按比例将4g所述复合小球载体置于20-50mL、质量浓度为1%-5%的戊二醛-缓冲液溶液中，震荡活化1-5h，用缓冲液洗3-5次，除去未反应的戊二醛，得到活化后的载体小球；
(4)按比例将4g所述活化后的载体小球置于10-50mL、浓度为0.25-1.25mg/mL的酶-缓冲液溶液中，震荡10-20h，用缓冲液洗3-5次，除去未交联的酶，得到的固定化酶小球真空冻干；
所述缓冲液为pH=7.0的磷酸盐缓冲液。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征是所述步骤（1）为：按比例将10g平均聚合度为1750±50的聚乙烯醇加入125mL水中，搅拌下加热至80℃，保温2h，加入3mL 3-氨丙基三乙氧基硅烷，再滴加1.5mL、浓度为1mol/L盐酸水溶液，搅拌1.5h，得到改性聚乙烯醇的溶液。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征是所述步骤（2）为：按比例将50mL所述改性聚乙烯醇溶液与150mL壳聚糖溶液混合，搅拌1.5h，抽真空除去溶液中的气泡，得到均相的混合液，将30mL所述均相混合液滴于125mL氢氧化钠溶液中，固化2h，用蒸馏水洗至中性，过滤，得到复合小球载体；
所述壳聚糖溶液是用下述方法制成：将3g脱乙酰度≥85%的壳聚糖加入100mL水，在搅拌下加入2mL冰醋酸，继续搅拌2.5h，得到壳聚糖溶液；
所述氢氧化钠溶液是用下述方法制成：将9g氢氧化钠溶解于100mL水中，再加入20mL乙醇，混合均匀。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征是所述步骤（3）为：按比例将4g所述复合小球载体置于35mL、质量浓度为3%的戊二醛-缓冲液溶液中，震荡活化3h，用缓冲液洗4次，除去未反应的戊二醛，得到活化后的载体小球。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征是所述步骤（4）为：按比例将4g所述活化后的载体小球置于30mL、浓度为0.75mg/mL的酶-缓冲液溶液中，震荡10h，用缓冲液洗4次，除去未交联的酶，得到的固定化酶小球真空冻干；
所述缓冲液为pH=7.0的磷酸盐缓冲液。
6.根据权利要求1或5所述的方法，其特征是所述酶为过氧化氢酶、纤维素酶、木瓜蛋白酶或糖化酶。
7.权利要求1-6之一的方法制备的固定化酶。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN2012105375090A CN103013971A (zh) | 2012-12-12 | 2012-12-12 | 一种固定化酶及制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN2012105375090A CN103013971A (zh) | 2012-12-12 | 2012-12-12 | 一种固定化酶及制备方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN103013971A true CN103013971A (zh) | 2013-04-03 |
Family
ID=47963086
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN2012105375090A Pending CN103013971A (zh) | 2012-12-12 | 2012-12-12 | 一种固定化酶及制备方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN103013971A (zh) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105146745A (zh) * | 2013-10-18 | 2015-12-16 | 贵州中烟工业有限责任公司 | 一种固定化的过氧化氢酶烟用添加剂及其制备方法和应用 |
| CN109439189A (zh) * | 2018-11-21 | 2019-03-08 | 中国船舶重工集团公司第七二五研究所 | 一种防污酶在无机涂层表面的固定化方法 |
| CN109619352A (zh) * | 2019-01-21 | 2019-04-16 | 宁夏大学 | 一种黑、红枸杞复合发酵饮料及其制备方法 |
| CN109762805A (zh) * | 2018-12-30 | 2019-05-17 | 江苏一鸣生物股份有限公司 | 一种固定化胰蛋白酶的方法 |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1948474A (zh) * | 2006-11-08 | 2007-04-18 | 浙江大学 | 一种壳聚糖纳米纤维复合膜固定化酶的制备方法 |
-
2012
- 2012-12-12 CN CN2012105375090A patent/CN103013971A/zh active Pending
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1948474A (zh) * | 2006-11-08 | 2007-04-18 | 浙江大学 | 一种壳聚糖纳米纤维复合膜固定化酶的制备方法 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| JINJIN ZANG ET AL: "A facile method to prepare chemically crosslinked and efficient polyvinyl alcohol/chitosan beads for catalase immobilization", 《CATALYSIS COMMUNICATIONS》, vol. 27, 5 July 2012 (2012-07-05) * |
| 秦胜利 等: "壳聚糖/聚乙烯醇微球固定化酯酶的研究", 《中国酿造》, no. 9, 30 September 2011 (2011-09-30) * |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105146745A (zh) * | 2013-10-18 | 2015-12-16 | 贵州中烟工业有限责任公司 | 一种固定化的过氧化氢酶烟用添加剂及其制备方法和应用 |
| CN109439189A (zh) * | 2018-11-21 | 2019-03-08 | 中国船舶重工集团公司第七二五研究所 | 一种防污酶在无机涂层表面的固定化方法 |
| CN109439189B (zh) * | 2018-11-21 | 2020-12-18 | 中国船舶重工集团公司第七二五研究所 | 一种防污酶在无机涂层表面的固定化方法 |
| CN109762805A (zh) * | 2018-12-30 | 2019-05-17 | 江苏一鸣生物股份有限公司 | 一种固定化胰蛋白酶的方法 |
| CN109619352A (zh) * | 2019-01-21 | 2019-04-16 | 宁夏大学 | 一种黑、红枸杞复合发酵饮料及其制备方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN102172498B (zh) | 一种三维多孔壳聚糖/明胶微球及其制备方法和在肝细胞培养中的应用 | |
| EP2659883A1 (en) | Microcapsule preparation of alginate-chitosan acyl derivatives, preparation and application thereof | |
| CN101497880B (zh) | 一种改进pva固定化微生物的新方法 | |
| CN103013971A (zh) | 一种固定化酶及制备方法 | |
| CN104226268A (zh) | 改性纤维素/氧化石墨烯复合微球及其制备方法 | |
| CN102814199B (zh) | 用于贵金属催化剂原位固载的磁性聚合物微球的制备方法 | |
| CN102964610A (zh) | 聚多巴胺改性海藻酸微球的制备方法 | |
| CN106582465A (zh) | 一种采用一步法制备壳聚糖/海藻酸钠天然高分子核‑壳微球的方法 | |
| CN101343369A (zh) | 双醛淀粉交联壳聚糖磁性微球及其制备方法 | |
| CN103131692B (zh) | 以改性核桃壳为载体的固定化脂肪酶的制备方法 | |
| CN106279727B (zh) | 一种壳聚糖微球的制备方法 | |
| CN108948415A (zh) | 一种多孔纤维素微球载体的制备方法 | |
| CN101748113B (zh) | 磁性壳聚糖复合微球制备固定化葡萄糖异构酶的方法 | |
| CN101857684A (zh) | 一种甲壳素水凝胶及其制备方法和应用 | |
| CN106009002A (zh) | 一种壳聚糖/蒙脱土纳米复合水凝胶及其制备方法 | |
| CN104624130A (zh) | 一种制备再生甲壳素微球的方法 | |
| CN104841386A (zh) | 一种复合型高吸油树脂的制备方法 | |
| CN114014979B (zh) | 一种再生纤维素凝胶微球的制备方法 | |
| CN102952792A (zh) | 凹凸棒土负载海藻酸钠固定β-葡萄糖苷酶的制备方法 | |
| CN102794161B (zh) | 一种血液灌流用多孔纤维素微球吸附剂及其制备方法 | |
| CN104387712A (zh) | 一种具有超顺磁性的纳米复合载体及其制备方法 | |
| CN102453707A (zh) | 一种固定化纤维素酶的制备方法 | |
| CN102250867B (zh) | 一种聚乙烯醇固定化微生物颗粒及其制备方法 | |
| CN112175228A (zh) | 一种高比表面积壳聚糖微球制备方法 | |
| CN106399291A (zh) | 一种半乳糖基接枝改性的海藻酸盐微球及应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C02 | Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001) | ||
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Application publication date: 20130403 |