CN101732369A - 赶黄草提取物的新用途 - Google Patents
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Abstract
本发明属于药品领域,具体涉及赶黄草提取物的新用途。该新用途为赶黄草提取物在制备治疗酒精性肝病的药物中的用途,该提取物为赶黄草水提醇沉后的提取物,对酒精性肝病有明确的治疗作用。
Description
技术领域
本发明属于药品领域,具体涉及赶黄草提取物的新用途。
背景技术
赶黄草又名扯根菜、水泽兰、山珍珠等,据《天宝本草》、《救荒本草》等记载,赶黄草具有通络活血、祛瘀除湿、活血散瘀等作用。
据中国药品标准WS3-B-2526-97所公开的肝苏颗粒是以赶黄草为原料制备而得,其制备方法如下:取扯根菜1000g,切碎,加水煎煮三次,每次2小时,合并煎液,滤过,滤液浓缩成相对密度为1.15~1.18(60~65℃)的清膏,冷却,加乙醇使含醇量达60%,搅拌,静置,滤过,沉淀用60%乙醇洗涤三次,合并洗液与滤液,回收乙醇并浓缩成相对密度为1.30~1.32的稠膏,加适量蔗糖及淀粉,混匀,制颗粒,干燥,制成540g,即得。功能主治为降酶,保肝,退黄,健脾。用于慢性活动性肝炎、乙型肝炎,也可用于急性病毒性肝炎。
现有用于治疗酒精性肝病的药物有硫普罗宁、谷光甘肽、联苯双酯等。尚无相关报道显示赶黄草水提取物经过乙醇提取沉淀后具有治疗酒精性肝病的作用。
发明内容
本发明所解决的技术问题是提供赶黄草提取物的新用途。
具体地,是赶黄草提取物在制备治疗酒精性肝病的药物中的用途,其中,该赶黄草提取物是由下述方法制备而得:
A、将赶黄草加水煎煮后,煎液滤过,浓缩为相对密度为1.15~1.18(60~65℃)的清膏,冷却后,加入乙醇使含醇量达60%,静置;
B、静置后过滤,将沉淀用60%乙醇洗涤,合并洗液与洗液,浓缩成相对密度为1.30~1.32的稠膏即可。
作为对上述技术方案的改进,步骤A中加水煎煮的条件为加水煎煮三次,每次2小时。
还可以进一步将步骤B所述稠膏加入药学上可接受的辅料,按照常规方法制备成的制剂。适用的剂型有口服液、颗粒剂、片剂或胶囊剂等。
发明人通过赶黄草水提醇沉后的沉淀和滤液浓缩后的稠膏(以下简称赶黄草提取物)两个部位分别对酒精性肝病治疗作用的考察发现:赶黄草提取物对CCl4肝损伤模型和酒精肝损伤模型小鼠有治疗作用,可明显降低小鼠血清中ALT、AST的,同时也可降低CCl4和酒精对肝细胞造成的损伤,故赶黄草提取物对酒精性肝病具有治疗作用。而水提醇沉后的沉淀物无治疗效果。
显然,根据本发明的上述内容,按照本领域的普通技术知识和惯用手段,在不脱离本发明上述基本技术思想前提下,还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。
以下通过实施例形式的具体实施方式,对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。
具体实施方式
以下通过赶黄草提取物对酒精性肝病的治疗作用的临床前研究来说明本发明的有益效果
1实验材料
1.1试剂与药品
四氯化碳:上海试一化学试剂有限公司;乙醇:成都长联化工试剂有限公司;联苯双酯:浙江万邦药业有限公司;ALT/AST测试盒:上海荣盛生物技术有限公司。
1.2动物
昆明种健康小鼠,体重(20±2g),由四川省实验动物专委会养殖场提供。
1.3方法
1.3.1赶黄草提取物的制备
取赶黄草1000g,切碎,加水煎煮三次,每次2小时,合并煎液,滤过,滤液浓缩成相对密度1.15~1.18(60~65℃)的清膏,冷却,加乙醇使含醇量达60%,搅拌,静置,滤过,沉淀用60%乙醇洗涤三次,合并洗液与滤液,回收乙醇并浓缩成相对密度为1.30~1.32的稠膏,即得。
药渣组为醇沉洗涤后的沉淀物。
1.3.2赶黄草提取物对CCl4诱导的小鼠肝损伤的作用
小鼠正常饲养2d,随机分成正常对照组、CCl4模型组、联苯双酯阳性对照组(100mg/kg)、赶黄草提取物低剂量组(8.35g生药/kg)、赶黄草提取物中剂量组(16.7g生药/kg)、赶黄草提取物高剂量组(25.05g生药/kg),药渣组(相当于16.7g生药/kg),每组10只。除正常组外其余各组小鼠腹腔注射0.1%CCl4花生油溶液10ml/kg,正常组小鼠同时腹腔注射等容积生理盐水,首次造模1h后给药。各给药组均以0.2ml/10g(体重)等容积灌胃给药,正常对照组给予等容积蒸馏水。连续给药第5天后进行第二次造模,方法同前。各组末次造模后15h再次给药,给药后1h眼眶取血,分离血清。用ALT/AST测试盒测定ALT、AST。
结果:赶黄草低、中、高剂量均可使小鼠CCl4肝损伤血清ALT、AST升高的水平降低,与模型组比较有极显著性差异(P<0.01),而药渣组对ALT、AST无影响。结果见表1。
表1赶黄草提取物对小鼠CC14肝损伤血清转氨酶的影响
组别 | 动物只数 | 剂量(g生药/kg) | ALT(U/L) | AST(U/L) |
正常对照组 | 10 | - | 53.63±16.21 | 32.56±9.72 |
组别 | 动物只数 | 剂量(g生药/kg) | ALT(U/L) | AST(U/L) |
CCl4模型组 | 10 | - | 128.28±65.42** | 265.52±54.36** |
赶黄草低剂量组 | 10 | 8.35 | 85.33±49.55▲▲ | 162.47±48.45▲▲ |
赶黄草中剂量组 | 10 | 16.7 | 82.81±35.67▲▲ | 88.17±32.58▲▲ |
赶黄草高剂量组 | 10 | 25.05 | 71.01±32.27▲▲ | 75.95±34.18▲▲ |
药渣组 | 10 | 16.7 | 123.22±57.69 | 261.43±27 |
联苯双酯组 | 10 | 100mg/kg | 78.62±25▲▲ | 73.24±27.28▲▲ |
与正常组比较:**P<0.01;与模型组比较:▲▲P<0.01
1.3.3赶黄草提取物对50%乙醇诱导的小鼠酒精肝病的作用
小鼠正常饲养2d,随机分成正常对照组、酒精模型组(50%乙醇)、联苯双酯阳性对照组(100mg/kg)、赶黄草提取物低剂量组(8.35g生药/kg)、赶黄草提取物中剂量组(16.7g生药/kg)、赶黄草提取物高剂量组(25.05g生药/kg),每组10只(由于药渣组在对小鼠CCl4肝损伤血清转氨酶的影响的考察中已发现无治疗效果,故未在本实验中考察其影响)。联苯双酯阳性对照组:ig联苯双酯+0.25m150%乙醇,各给药组均以0.2ml/10g(体重)灌胃赶黄草提取物+0.25m150%乙醇,正常对照组灌胃给予等容积蒸馏水,酒精模型组ig0.25m150%乙醇+0.2ml/10g(体重)蒸馏水,共10d。末次给药后禁食16h,称重,摘除眼球缺血,分离血清,测定ALT、AST;同时,颈椎脱臼处死小鼠,立即破腹取肝脏,用生理盐水冲洗干净,取肝脏左叶相同部位,用10%福尔马林溶液固定,石蜡包埋,HE染色,作病理检查。
结果:普通光镜检查:正常对照组肝细胞切片具有正常的多边形细胞形状和结构,胞浆丰富,细胞核圆形,肝小叶类圆形;酒精组病理切片见肝细胞明显肿胀,细胞内可见数量较多而不等、大小不一的脂肪滴,细胞核由于脂肪滴的挤压而偏向细胞边缘,肝小叶中央呈现片状或点状坏死;赶黄草组切片见肝细胞有肿胀现象,亦有脂肪滴,但肿胀程度及脂肪滴空泡程度明显比酒精组轻,肝细胞脂肪变较轻,脂肪滴小,偶然也可见到少量的肝小叶中央点状坏死。
电镜检查观察:正常对照组切片中,肝细胞胞质内含丰富的细胞器和包含物,核膜清晰而规则,核仁大而明显,电子密度均匀,线粒体形状正常,胞质内无脂肪滴沉积,粗面内质网分布规律;酒精组肝细胞切片,体积肿大,细胞核边缘不规则,核仁不显,线粒体明显肿胀,其粗面内质网明显扩张,出现断裂,胞质内可见到多量大小不一的脂肪滴沉积;赶黄草组肝细胞较规则,细胞核仁清晰,有少量的线粒体出现肿胀变形,粗面内质网未见明显的扩张和断裂,少见细胞质内脂肪滴沉积。
赶黄草低、中、高剂量均可使小鼠酒精肝损伤血清ALT、AST升高的水平降低。与模型组比较有极显著差异(P<0.01)。结果见表2。
表2赶黄草提取物对小鼠50%乙醇诱导小鼠肝损伤血清转氨酶的影响
组别 | 动物只数 | 剂量(g生药/kg) | ALT(U/L) | AST(U/L) |
正常对照组 | 10 | - | 61.52±14.78 | 47.14±12.23 |
酒精模型组 | 10 | - | 130.09±45.58** | 203.06±44.57** |
赶黄草低剂量组 | 10 | 8.35 | 98.15±44.23▲▲ | 174.97±46.42▲▲ |
赶黄草中剂量组 | 10 | 16.7 | 96.71±37.66▲▲ | 99.32±40.04▲▲ |
赶黄草高剂量组 | 10 | 25.05 | 83.05±35.77▲▲ | 93.20±25.52▲▲ |
联苯双酯组 | 10 | 100mg/kg | 85.66±26.89▲▲ | 96.80±31.43▲▲ |
与正常组比较:**P<0.01;与模型组比较:▲▲P<0.01
1.3.4结论
本实验结果显示赶黄草提取物对CCl4肝损伤模型和酒精肝损伤模型小鼠均有明显作用,可明显降低小鼠血清中ALT、AST,同时也可降低CCl4和酒精对肝细胞造成的损伤。而药渣组对ALT、AST无影响。因此赶黄草提取物对酒精性肝病具有治疗作用。
Claims (4)
1.赶黄草提取物在制备治疗酒精性肝病的药物中的用途,其特征在于:所述赶黄草提取物是由下述方法制备而得:
A、将赶黄草加水煎煮后,煎液滤过,浓缩为相对密度为1.15~1.18(60~65℃)的清膏,冷却后,加入乙醇使含醇量达60%,静置;
B、静置后过滤,将沉淀用60%乙醇洗涤,合并洗液与滤液,浓缩成相对密度为1.30~1.32的稠膏即可。
2.根据权利要求1所述的赶黄草提取物在制备治疗酒精性肝病的药物中的用途,其特征在于:所述步骤A中加水煎煮的条件为加水煎煮三次,每次2小时。
3.根据权利要求1所述的赶黄草提取物在制备治疗酒精性肝病的药物中的用途,其特征在于:将步骤B所述稠膏加入药学上可接受的辅料,按照常规方法制备成的制剂。
4.根据权利要求3所述的赶黄草提取物在制备治疗酒精性肝病的药物中的用途,其特征在于:所述制剂为口服液、颗粒剂、片剂或胶囊剂。
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