CN101697998B

CN101697998B - 一种治疗咽喉肿痛、疮疡热疖的珍黄片及其制备方法

Info

Publication number: CN101697998B
Application number: CN2009101468639A
Authority: CN
Inventors: 王天亮; 樊雪君; 王永华
Original assignee: TIANYITANG GROUP CO Ltd ZHEJIANG
Current assignee: Zhejiang Tianyi Pharmaceutical Co., Ltd.
Priority date: 2009-06-13
Filing date: 2009-06-13
Publication date: 2012-01-11
Anticipated expiration: 2029-06-13
Also published as: CN101697998A

Abstract

本发明提供了治疗咽喉肿痛、疮疡热疖的珍黄片的制备方法，它是用珍珠、人工牛黄、三七、黄芩提取物、冰片、猪胆粉、薄荷油制成。与现有技术相比，本发明制剂改进了原处方、工艺的不足，不仅延长了药物的保质期、提高疗效，而且更适合工业化批量生产。本发明制剂具有清热解毒、消肿止痛的功效，临床应用于咽喉肿痛、疮疡热疖；其疗效显著，使用方便，质量稳定可控，值得临床推广应用。

Description

一种治疗咽喉肿痛、疮疡热疖的珍黄片及其制备方法

技术领域：

本发明涉及一种功能清热解毒、消肿止痛，用于咽喉肿痛、疮疡热疖的珍黄片及其制备方法，属于中药制药技术领域。

背景技术：

珍黄片由珍珠、牛黄、三七、黄芩提取物、冰片、薄荷油、猪胆粉组成。

珍黄片处方中的牛黄清热解毒，清心化痰开窍，现代药理证实其含有胆酸及脱氧胆酸等成份，能降低中枢神经系统的兴奋，从而产生镇静、镇痛作用，对火热内生，风热外扰所致的咽喉肿痛、口舌生疮、痈肿疔毒等疾病有明显的治疗效果；三七能止血、散瘀、定痛，与牛黄合用、共奏清热解毒，消肿上痛之功效；珍珠能解毒生肌，对咽喉、口舌肿痛糜烂等症有促进愈合作用；黄芩提取物所含的黄芩甙元及黄芩甙元及黄芩甙均能抵制过敏性浮肿及炎症，抵制过敏性介质的释放，显示出广谱的抗菌消炎作用；冰片具有开窍散郁、清热止痛、防腐之功，可用于痈肿疮疔、喉痹、咽痛、口疮、牙齿肿痛等多种火热所致病症；猪胆粉清热、润燥、解毒，冰片与猪胆粉有抑菌作用，对肿痛，热毒的清除具有促进作用；薄荷油能疏风热、利头目，既增强了主药的功效，又能进一步消除体内尚遗留的火热之邪，诸药合用相辅相成，具有清热解毒，消肿止痛之效。

药理实验表明，珍黄片具有抗炎、镇痛、抗菌等作用。

中医辨证肺胃实热、热毒蕴结证引起的咽喉疼痛(如急性咽炎)、浅表软组织感染(疖肿)是一种常见病，属祖国医学“肺胃实热、热毒蕴结证”范畴。珍黄片治疗中医辨证属肺胃实热、热毒蕴结之咽喉肿痛、疮疡热疖安全有效。临床研究表明：急性咽炎显效率60.42％，总有效率97.10％；疖肿显效率5.88％，总有效率98.3％。

本申请人于2003年曾申请过2个与珍黄片相关的专利，一个名称为“一种中药片的制备方法”，申请号为“200310107862.6”；另一个名称为“珍黄软胶囊及其制备方法”，申请号为“200310107863.0”。

“一种中药片的制备方法”主要对制粒时的乙醇用量、加入冰片和薄荷油后的密闭时间以及包衣材质提出了专利申请。由于该技术方案本身并不成熟，存在一些不足，主要体现如下：1、用乙醇手工制粒生产效率低，不适合批量生产；2、压片前加入薄荷油，影响素片成形，使压出的素片硬度低，废片率高；3、用玉米朊、羟丙基甲基纤维素包衣的技术落后；4、猪胆汁不易保存，使用不方便。

“珍黄软胶囊及其制备方法”主要对制成软胶囊的原辅料配比及制备软胶囊的工艺进行的改进，而本专利申请的是片剂制备工艺，是两个完全不同的剂型，且两者的原料处方组成及配比不完全相同。

本发明的珍黄片及其制备方法，改进了原处方工艺的不足，不仅延长了药物的保质期、提高疗效，而且更适合工业化批量生产。

发明内容：

本发明的目的在于：提供一种治疗咽喉肿痛、疮疡热疖的珍黄片及其制备方法，本发明以纯中草药为原料，具有清热解毒、消肿止痛的功效，用于咽喉肿痛、疮疡热疖；其疗效显著，质量稳定，使用方便。

本发明提供了一种治疗咽喉肿痛、疮疡热疖的珍黄片的制备方法，其特征在于：珍黄片的原料药按照重量份计算是：珍珠10～12份、人工牛黄44～46份、三七89～91份、黄芩提取物55～57份、冰片2～3份、猪胆粉3～15份、薄荷油5～6份；制备方法包括下列步骤：冰片溶于薄荷油中，备用；三七粉碎成细粉，珍珠研磨或水飞成极细粉；将人工牛黄、黄芩提取物、猪胆粉与上述粉末混匀，以单糖浆为粘合剂制粒，加入冰片、薄荷油，制成片剂，包薄膜衣。

优选地，其中原料药按照重量份计算是：珍珠11.2份、人工牛黄45份、三七90份、黄芩提取物56.3份、冰片2.8份、猪胆粉8份、薄荷油5.6份。

优选地，制备方法中薄荷油在片剂成型后加入。

优选地，片剂成型后包疏油薄膜衣。

本发明还提供了按照上述任一项制备方法制得的具有治疗咽喉肿痛、疮疡热疖作用的珍黄片。

优选地，制备方法还包括下述检测方法：

每片含黄芩提取物以黄芩苷(C₂₁H₁₈O₁₁)计，不得少于3.0mg；以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇-0.4％磷酸(42∶58)为流动相，检测波长为280nm。理论板数按黄芩苷峰计算应不低于2500；精密称取经五氧化二磷减压干燥24小时的黄芩苷对照品适量，加70％乙醇制成每1ml含20μg的对照品溶液；取本品20片，精密称定，研细，精密称取约0.5g，置回流瓶中，精密加入70％乙醇100ml，密塞，称定重量，加热回流1小时，放冷，称定重量，用70％乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液3ml，置25ml量瓶中，加70％乙醇稀释至刻度，摇匀，制得供试品溶液；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定。

本发明人基于背景技术中描述的现有技术的上述缺陷，进行了广泛的研究探讨，对原处方及制备工艺进行了改进，主要创新如下：

1、压片后加入薄荷油，由于素片结构已成形，挥发油均匀分散在空隙之间，可使膜薄衣片硬度提高，裂片较少。

2、薄膜包衣粉采用疏油薄膜衣配方，调整羟丙甲纤维素和聚乙烯吡咯酮醋酸乙烯酯共聚物的配比，利于防止挥发油渗出。

3、猪胆粉为猪胆汁经干燥后制得，将原处方中的猪胆汁用猪胆粉代替；可在生产前将猪胆汁制成猪胆粉，不必在临用时采购猪胆汁；采用猪胆粉投料可缩短生产周期。

4、用单糖浆为粘合剂(全自动一步制粒)替代用乙醇手工制粒。

为了获得上述方案，申请人进行了一系列试验筛选研究，具体如下：

一、制备工艺研究

1、用猪胆粉代替猪胆汁的研究

(1)猪胆粉的量的选择

方法：取鲜猪胆5kg，除去杂质，用利刃划开，将胆汁过100目筛后置于洁净的不锈钢桶内。取5份，每份约100g，精密称定，烘干，精密称定，计算干燥后固形物含量。

结论：猪胆汁可按14％的固形物含量折算成猪胆粉。

(2)猪胆粉质量检测

方法：取鲜猪胆5份，分别除去杂质、取汁、烘干，检测牛羊胆薄层鉴别、还原糖、猪去氧胆酸含量、水分。

编号	1	2	3	4	5
						牛羊胆薄层鉴别	斑点符合	斑点符合	斑点符合	斑点符合	斑点符合
还原糖	显色符合	显色符合	显色符合	显色符合	显色符合
						水分	4.3％	3.6％	3.2％	5.3％	2.8％
猪去氧胆酸含量	17.8％	19.4％	20.3％	17.3％	19.7％
						结论	符合标准	符合标准	符合标准	符合标准	符合标准

2、薄荷油加入方法比较

在制药领域中，在制备含挥发油的片剂时常在压片前将挥发油加入颗粒中。目前珍黄片也一直延续了这种制备方法。但本发明人发现由于珍黄片的原料药含较多的挥发油，若直接加入压片前的颗粒中，压制成的素片硬度较低，易出现松片现象，现行的制备珍黄片的方法正是使得珍黄片存在这种缺点。

在压片前的颗粒中，若发挥油含量超过0.6％时，直接压片几乎是不可能(发挥油吸附在颗粒表面，易松片，硬度小于2kg，达不到包衣时对硬度的要求)。通常的做法是加入吸收剂，把挥发油吸收后再混合压片。也可以用β-环糊精包合发挥油后加入，混匀后压片。

珍黄片中挥发油含量约2.5％，若用吸收剂或β-环糊精包合，辅料用量大，且制备工艺复杂。

因此本发明人在此基础上尝试将素片压制成形后再加入挥发油，意外地发现这种做法能很好地改善松片的现象，较大提高硬度。其原理可能是由于片形结构已稳定，挥发油吸附在空隙中，因此硬度有较大提高。

项目	硬度1	硬度2	硬度3
				压片前加挥发油	1.8kg	1.5kg	1.7kg
压片后加挥发油	4.2kg	5.4kg	4.8kg

3、薄膜包衣粉的选择

胃溶型薄膜包衣粉有多种型号，依据珍黄片中含有挥发油的特点，调整羟丙甲纤维素和聚乙烯吡咯酮醋酸乙烯酯共聚物的配比。本发明人经研究确定了珍黄片特定的薄膜包衣粉配方(型号XLEWG，B-08099，购自温州小伦包衣有限公司)，经24个月稳定性对比试验，采用本发明筛选的薄膜包衣粉即疏油薄膜包衣粉利于防止挥发油渗出。

包衣时：设定进、出风温度为98℃、45℃，设定包衣锅转速为3～4转/分，喷头流量为“1.4～1.6”。

项目	6个月	12个月	18个月	24个月
					普通胃溶型包衣粉	包衣色未变	包衣色未变	包衣色浅	包衣色浅
疏油胃溶型包衣粉	包衣色未变	包衣色未变	包衣色未变	包衣色未变

注：包衣色变浅是由于片内挥发油渗出所致。

4、崩解时限的比较

将压片前加入挥发油，采用原薄膜包衣粉制成为的片称为“原工艺”；将压片后加入挥发油，采用疏油薄膜包衣粉制成为的片称为“新工艺”；比较二种不同工艺制备的珍黄片的崩解时限，结果见下表：

项目序号	1	2	3	4	平均
						原工艺	34	29	26	32	30.25
新工艺	27	34	28	39	32.00

结论：二种工艺制备的珍黄片，对崩解时限无明显影响。

5、以单糖浆为粘合剂的制粒参数研究

物料温度为46℃进行设备预热，达到温度后将三七与猪胆汁细粉、珍珠粉、人工牛黄、黄芩提取物等一起移入制粒机内。

取纯化水加热溶解蔗糖，制成单糖浆(用量约为粉未重量的3％)，设定喷枪内层压力1.0～1.5bar，外层压力2.0～3.0bar，控制流速为14～25Hz进行制粒。

二、药理试验

1.抗炎作用

1.1对角叉菜胶致大鼠足趾的影响取雄性大鼠40只，体重150～180g，随机分成4组，每组8只，分组及剂量见表1(剂量以每ml含生药量计，其中0.87g/ml为临床用量浓度)。连续给药四天，每天3次，末次给药后30min，于大鼠左足趾腱膜下注射1％角叉菜胶0.05％，每隔1h用毛细管放大测量装置，测大鼠后肢踝关节固定位置以下部分体积，以用药前后之差值为肿胀度，连续测定6次，进行组间t检验，结果：珍黄片高剂量各次测定均有明显的抗炎作用，中剂量2h有效，低剂量不明显，见表1。

表1 对角叉菜胶致大白鼠足趾肿胀的影响n＝8

*P＜0.05 **P＜0.01 ***P＜0.001

1.2对二甲苯致小鼠耳廓炎症的影响

取28±2g雄性小鼠，60只，随机分成五组，每组12只。对照组给等体积生理盐水，阳性对照组给乙酰水杨酸，给药体积为0.15ml/10g。实验前16小时先给药一次，次日再给药一次，第二次给药后30分钟，每鼠左耳涂二甲苯30ul致炎，致炎后1.5h，将小鼠处死，剪下二耳，用8mm打孔器取下二耳同一部位的圆片，精密称重，以左右耳重量差为肿胀度，与对照组比较，结果见表2。

表2外用对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响(X±SD，n＝10)

注：与对照组比较 ***P＜0.001 **P＜0.01 *P＜0.05

结果表明：珍黄片对二甲苯引起的小鼠耳廓炎症有显著的抑制作用。

2.热板法镇痛试验

取小鼠雌性60只，每次一只放在热板(事先已将热板温度调在55±1℃)上，小鼠自放在热板上至出现舔后足所需时间(秒)作为该鼠的痛阈值，即痛反应潜伏期。凡舔后足时间小于5秒或大于30秒或跳跃者弃之不用。将合格的小鼠随机分成5组，重复测其正常痛阈值，取两次正常痛阈值的平均值，作为该鼠给药前的痛阈值(痛反应潜伏期)。于实验前16小时先给药一次(脚底给药)，实验日再给药一次，给药体积为0.15ml/10g。于给药后30min、60min、90min分别测小鼠的痛阈值(痛反应潜伏期)。如60秒钟仍无反应，将小鼠取出，以免烫伤，其痛阈以60秒计算。结果见表3。

表3 珍黄片对小鼠的镇痛试验(热板法)(X±SD，n＝10)

注：与对照组比较 **P＜0.01 *P＜0.05

结果表明：珍黄片对热板致痛有较好的镇痛作用。

三、临床研究

本发明的珍黄片，具有清热解毒、消肿止痛功效，用于咽喉肿痛、疮疡热疖的治疗。采用平行、随机、阳性对照的研究方法，入选患者随机分入试验组(本发明的新工艺制备的珍黄片)或对照组I(中药成方制剂工艺制备的珍黄片)或对照组II(200310107862.6工艺制备的珍黄片)，试验组与对照组病例比为3∶1∶1，结果如下：

1.一般资料：治疗组360例，对照组I 120例，对照组II 120例；男325例，女275例，两个对照组分别与治疗组比较X²＝0.060，P＞0.05，X²＝0.051，P＞0.05；年龄最大59岁，最小19岁，平均36.4岁，其中小于30岁145例，31～40岁161例，41～50岁155例，51～60岁139例两组比较，X²＝0.1493，P＞0.05。

珍黄片口服，一次2片，一日3次；外用，取药粉碎，用米醋或冷开水调成糊状，敷患处。三组在用药期间，均停止使用其它内服药。

2.观察指标

(1)患病部位疼痛、压痛及肿胀的程度，功能受限的范围，肌肉痉挛的状况。(2)血、尿、大便常规，肝肾功能及心电图检查。(3)皮肤过敏及肠胃反应。(4)精神和神经系统的变化情况。

3.病情程度评估

(1)症状：咽痛咽干、吞咽困难、疖肿色红、灼热疼痛(数量、面积、疼痛)、发热、口渴、多饮、头痛、便秘、小便黄赤、咽部红肿、咳嗽等。

(2)症状及体征以半定量积分法表示，主症轻度为2分、中度为4分、重度为6分、症状消失为0分；次症轻度为1分、中度为2分、重度为3分、症状消失为0分。病情程度分为轻、中、重三度：1～10分为轻度，11～14分为中度，15分以上为重度。

4.疗效判断标准

(1)临床治愈：症状和体征完全消失，治疗后总积分减少大于95％。

(2)显效：症状和体征明显好转，治疗后总积分减少大于70％。

(3)有效：症状和体征改善，治疗后总积分减少大于30％。

(4)无效：症状和体征无明显改善，治疗后总积分减少小于30％。

5.治疗结果

5.1研究结果表明：治疗组的治愈率为8.36％，显效率为36.8％；对照组I治愈率为5.0％，显效率28.3％；对照组II治愈率为5.83％，显效率30.0％。分别将两个对照组与试验组进行统计学意义上的比较。

5.2将治疗组与对照组I进行单项疗效比较

*共观察病例479例，其中试验组359例(其中急性咽炎240例、疖肿119例)；对照组120例I(其中急性咽炎80例、疖肿40例)。

6.安全性观察

在临床研究过程中，对治疗组中的36例在用药前后作了血常规、大小便常规、肝肾功能和心电图等检测，结果均在正常范围内，全部病例在治疗过程中，未有肠道反应、精神及神经系统的异常表现。说明本发明制备方法制得的珍黄片无明显毒性反应和副作用，安全可靠。

四、含量测定方法学研究

1.色谱分析条件

色谱柱为Agilent SB C18(250mm×4.6mm 5μm)，甲醇-0.4％磷酸(42∶58)为流动相；检测波长为280nm，流速为1.0ml/min，柱温：250℃，进样量10μl。在此条件下供试品中黄芩苷成分能与其他成分达到较好分离。

2.检测波长的确定

取黄芩苷对照品液，在200～400nm范围内扫描，结果280nm处有最大吸收。

3.标准曲线的制备

精密称取五氧化二磷减压干燥24小时的黄芩苷对照品适量，加70％乙醇制成每1ml含10.14μg及101.4μg的溶液，作为对照品溶液(1)及(2)。

精密吸取对照品液(1)1、5、10μl及对照品液(2)2、5、10、15μl，按上述色谱条件测定峰面积，以进样量(μg)对峰面积(A)进行线性回归，求得回归方程：y＝3337.7x-11.25，γ＝1.0000。黄芩苷在0.01014～1.52100μg范围内呈良好的线性关系。

4.提取条件比较

通过选择不同的提取方法、溶剂及时间，其余同正文中提取方法，各自制得供试品溶液，进样测定，选择提取条件。

取样品，研细，精密称取0.5g，置100ml量瓶中(或精密加入提取溶剂100ml)，加入提取溶剂适量，超声处理(或加热回流)，放冷，加入提取溶剂至刻度(或用提取溶剂补足重量)，摇匀，滤过，精密量取续滤液3ml，置25ml量瓶中，加入提取溶剂稀释至刻度，摇匀。

加热回流提取较完全，且用50％乙醇、70％乙醇加热回流1小时所得含量结果均在误差范围内，故选择提取溶剂70％乙醇，加热回流1小时。

5.空白试验

对缺黄芩提取物空白对照样品按供试品溶液制备方法同样制得空白对照液，进样测定。结果表明，缺黄芩提取物空白对照对黄芩苷峰无干扰，证明按本方法测定的黄芩苷成分有专属性。

6.精密度试验

取同一供试品溶液，重复进样5次，RSD＝0.7％(n＝5)。

7.稳定性试验

取同一供试品溶液，间隔一定时间测定一次，RSD＝0.7％(n＝5)，结果显示供试品溶液在48小时内基本稳定。

8.重现性试验

取同一批号样品6份，分别依本法处理进行测定，结果黄芩苷平均含量36.2mg/g，RSD＝1.5％(n＝6)。

9.回收率试验

精密称取已知含量的样品适量，精密加入一定量的黄芩苷对照品，依本法进行含量测定并计算回收率，结果平均回收率为101.75％，RSD＝0.9％。

具体实施方式

本发明的实施例1：

取珍珠11.2份、人工牛黄45份、三七90份、黄芩提取物56.3份、冰片2.8份、猪胆粉8份、薄荷油5.6份。

冰片2.8份溶于5.6份薄荷油中，备用；三七90份粉碎成细粉，珍珠11.2份研磨或水飞成极细粉；将人工牛黄45份、黄芩提取物56.3份、猪胆粉8份与上述粉末混匀；以3％单糖浆为粘合剂，设定物料温度为46℃，设定喷枪内层压力1.0～1.5bar、外层压力2.0～3.0bar，控制流速为14～25Hz进行制粒；加入适量硬脂酸镁和滑石粉，压片，喷入溶有冰片的薄荷油，混匀，密闭24小时；设定进、出风温度为98℃、45℃，设定包衣锅转速为3～4转/分，喷头流量为“1.4～1.6”包薄膜衣，即得。

本发明的实施例2：

取珍珠10份、人工牛黄44份、三七89份、黄芩提取物55份、冰片2份、猪胆粉3份、薄荷油5份。

冰片2份溶于5份薄荷油中，备用；三七89份粉碎成细粉，珍珠1份研磨或水飞成极细粉；将人工牛黄44份、黄芩提取物55份、猪胆粉3份与上述粉末混匀；以3％单糖浆为粘合剂，设定物料温度为46℃，设定喷枪内层压力1.0～1.5bar、外层压力2.0～3.0bar，控制流速为14～25Hz进行制粒；颗粒成形符合要求后关闭加温系统，继续沸腾至颗粒冷至常温；将冰片加纯化水溶解作为喷液，设定喷枪内外层压力分别为2.0～3.0bar、3.0～4.0bar，流速30～40Hz进行喷雾，控制在10分钟内完成，全部喷完后继续流化2分钟；加入适量硬脂酸镁和滑石粉，压片，喷入溶有冰片的薄荷油，混匀，密闭24小时；设定进、出风温度为98℃、45℃，设定包衣锅转速为3～4转/分，喷头流量为“1.4～1.6”包薄膜衣，即得。

本发明的实施例3：

取珍珠12份、人工牛黄46份、三七91份、黄芩提取物57份、冰片3份、猪胆粉15份、薄荷油6份。

冰片3份溶于6份薄荷油中，备用；三七91份粉碎成细粉，珍珠12份研磨或水飞成极细粉；将人工牛黄46份、黄芩提取物57份、猪胆粉15份与上述粉末混匀；以3％单糖浆为粘合剂，设定物料温度为46℃，设定喷枪内层压力1.0～1.5bar、外层压力2.0～3.0bar，控制流速为14～25Hz进行制粒；加入适量硬脂酸镁和滑石粉，压片，喷入溶有冰片的薄荷油，混匀，密闭24小时；设定进、出风温度为98℃、45℃，设定包衣锅转速为3～4转/分，喷头流量为“1.4～1.6”包薄膜衣，即得。

Claims

1.一种治疗咽喉肿痛、疮疡热疖的珍黄片的制备方法，其特征在于：珍黄片的原料药按照重量份计算是：珍珠10～12份、人工牛黄44～46份、三七89～91份、黄芩提取物55～57份、冰片2～3份、猪胆粉3～15份、薄荷油5～6份；制备方法包括下列步骤：冰片溶于薄荷油中，备用；三七粉碎成细粉，珍珠研磨或水飞成极细粉；将人工牛黄、黄芩提取物、猪胆粉与上述粉末混匀，以单糖浆为粘合剂制粒，压片，喷入溶有冰片的薄荷油，包疏油薄膜衣，即得。

2.按照权利要求1所述一种治疗咽喉肿痛、疮疡热疖的珍黄片的制备方法，其特征在于其中原料药按照重量份计算是：珍珠11.2份、人工牛黄45份、三七90份、黄芩提取物56.3份、冰片2.8份、猪胆粉8份、薄荷油5.6份。

3.按照权利要求1-2任一项制备方法制得的具有治疗咽喉肿痛、疮疡热疖作用的珍黄片。

4.按照权利要求1或2所述一种治疗咽喉肿痛、疮疡热疖的珍黄片的制备方法，其特征在于还包括下述检测方法：

每片含黄芩提取物以黄芩苷C₂₁H₁₈O₁₁计，不得少于3.0mg；以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以42∶58的甲醇-0.4％磷酸为流动相，检测波长为280nm。理论板数按黄芩苷峰计算应不低于2500；精密称取经五氧化二磷减压干燥24小时的黄芩苷对照品适量，加70％乙醇制成每1ml含20μg的对照品溶液；取本品20片，精密称定，研细，精密称取约0.5g，置回流瓶中，精密加入70％乙醇100ml，密塞，称定重量，加热回流1小时，放冷，称定重量，用70％乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液3ml，置25ml量瓶中，加70％乙醇稀释至刻度，摇匀，制得供试品溶液；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定。