CN101669950A - 苦豆碱在制备治疗溃疡性结肠炎药物中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及苦豆碱在制备治疗溃疡性结肠炎药物中的应用。本发明人发现苦豆碱具有治疗溃疡性结肠炎的作用，可用于制备治疗溃疡性结肠炎的药物。为了使苦豆碱更好地发挥其治疗溃疡性结肠炎的作用，本发明还提供了一种苦豆碱的结肠靶向制剂，该制剂由片芯和包裹在片芯外的阻滞层构成，片芯和阻滞层的质量比为1∶1～1∶0.4；其中，所述片芯由分别占片芯总质量10～70％的苦豆碱、10～80％的瓜尔胶和5～30％的糊精组成，所述阻滞层为瓜尔胶。本发明所述的靶向制剂可在结肠部位特异性溶解并释放出苦豆碱，使苦豆碱以较高浓度分散于整个结肠，有效提高苦豆碱治疗溃疡性结肠炎的效果。

Description

苦豆碱在制备治疗溃疡性结肠炎药物中的应用

技术领域

本发明涉及医药领域，具体涉及苦豆碱在制药中的新用途。

背景技术

溃疡性结肠炎(Ulcerative colitis，UC)发生于结肠部位，是一种原因不明的慢性非特异性自身免疫性疾病，与遗传、免疫、感染、环境等多种因素有关，其主要症状为腹泻、粘液脓血便、腹痛和里急后重等，主要病理特点为结肠粘膜慢性炎症及溃疡形成。流行病学表明，UC的年发病率为2～20/10万，患病率为50～100/10万，好发于15～30岁人群。近年来随着生活水平的提高、饮食结构及生活方式的改变，UC在我国的发病率有逐年上升的趋势。由于UC病程长，病变范围广，严重影响患者生活质量，且长期患者中有5～10％发生癌变，临床上至今尚无有效的治疗措施，被世界卫生组织列为现代难治病之一。

目前治疗UC的西药主要有柳氮磺胺类、糖皮质激素类药物以及免疫抑制剂，这些药物效果都不够理想，且副作用较大。柳氮磺胺吡啶是目前临床最常用的药物，适用于轻、中度及慢性UC患者，一般用法为口服，4g/d，服后大部分在小肠不吸收，而被大肠菌群代谢成磺胺吡啶(SP)与5-氨基水杨酸(5-ASA)，后者可通过干扰炎症递质-前列腺素的合成而发挥对UC的治疗作用。柳氮磺胺吡啶治疗UC的有效率较低，服药4g/d以内，有效率不及50％，但副作用可达37.5％，且复发率为33％。该药疗效及副作用与用量成正比，约有10-15％患者因皮疹、胃肠不适等副作用而停药。

苦豆碱(aloperine)是从豆科植物苦豆草(Sophora alopecuroides L.)的种子及地上部分提取的有效单体成分，其化学结构如式(1)所示。该化合物为无色棱柱状结晶，熔点71～73℃，旋光度[α]D+86.59&ordm，具有明显的抗炎、抗变态反应、抗病毒、清热、止痛、杀虫、镇痛、镇静、降温、抗菌、抗癌及抗心律失常等作用。文献研究表明苦豆碱对花生四烯酸(AA)诱导的兔血小板聚集有极强的抑制作用，对血小板PG代谢有抑制作用，并能明显抑制TXA2，并将其降解为TXB2，此作用可能和其对血小板聚集的抑制有关，对AA诱导的血小扳聚集有较强的选择性抑制作用，苦豆碱(aloperine)对多种致炎剂引起的急性炎症和III、IV型变态反应及佐剂关节炎均有显著的抑制作用，其抗炎、抗变态反应作用不依赖于垂体一肾上腺皮质系统，主要与其抑制WBC游走，稳定溶酶体膜，促进自由基清除，抑制PG、组胺、淋巴因子等炎症介质的台成或释放及致炎活性有关。苦豆碱有抑制巨噬细胞产生白细胞介素-1的作用，并能直接抑制小鼠脾细胞增殖反应，同时也抑制脾细胞对刀豆蛋白A诱导的T细胞增殖反应，也明显降低脾细胞产生白细胞介素-2的能力，同样抑制细菌脂多糖诱导的B淋巴细胞增殖反应。目前尚无苦豆碱用于治疗UC的报道。

发明内容

本发明的目的是提供苦豆碱在制药中的新用途。

本发明的另一目的是一种苦豆碱的结肠靶向制剂。

实现上述目的的具体方案是：

苦豆碱在制备治疗溃疡性结肠炎药物中的应用。

本发明人发现苦豆碱具有治疗溃疡性结肠炎的作用，可用于制备治疗溃疡性结肠炎的药物。

为了使苦豆碱更好地发挥其治疗溃疡性结肠炎的作用，本发明还提供了一种苦豆碱的结肠靶向制剂，该制剂由片芯和包裹在片芯外的阻滞层构成，片芯和阻滞层的质量比为1∶1～1∶0.4；所述片芯由分别占片芯总质量10～70％的苦豆碱、10～80％的瓜尔胶和5～30％的糊精组成，所述阻滞层为瓜尔胶。

本发明所述制剂的制备方法，该方法由以下步骤组成：

取瓜尔胶和糊精，过80目筛；取苦豆碱溶于适量溶剂，加入片芯配方量的瓜尔胶和糊精混匀制成软材，制粒，压片，最后按阻滞层配方量取瓜尔胶包衣；所述的溶剂为水、浓度为5～20％(w/v)的可溶性淀粉溶液或浓度为10～80％(v/v)的乙醇溶液。

本发明所述制剂为水凝胶骨架双层片，其阻滞层为可生物降解的瓜尔胶，可被结肠内特有的细菌所分泌的糖苷酶分解。所述制剂口服后其表面遇消化液湿润而发生水化作用形成水凝胶层，由于凝胶的屏障效应，从而控制药物释放，减少苦豆碱在上消化道的吸收；到达结肠后，阻滞层被结肠内的特有的糖苷酶降解，在病变区直接释放出苦豆碱，并使苦豆碱以较高浓度分散于整个结肠，有效提高苦豆碱治疗溃疡性结肠炎的效果。

为了更好地理解本发明，下面将通过药理实验进一步阐明本发明所具有的技术效果。

(一)苦豆碱治疗溃疡性结肠炎小鼠实验

1材料与方法

1.1材料

1.11实验动物

清洁级雌性8-9周龄C57BL/6小鼠，16-18g，南方医科大学实验动物中心(动物合格证号：SCXK-2006-0015)。动物购回后，22℃±1℃恒温饲养，自由进食和饮水。

1.12药物

葡聚糖硫酸钠(DSS)分子量5000，(批号：LOT023k0632，Amersham Biosciences PharmaciaBiotech，Sweden)；苦豆碱(宁夏盐池制药厂，批号：070506)；阳性对照药：柳氮磺胺嘧啶(上海福达制药有限公司，批号：070404)；Enzyine Linked Immunosorbent Assay SIgA，haptoglobin Kit，Hematoxylin，eosin(Sigma Chemical Co)；其它试剂均为国产分析纯

1.2.2实验用药物剂量

成人以70kg体重计算，按照“人和动物间体表面积折算的等效剂量比率表”可算出以下各药小鼠的生物等效量。

苦豆碱成人每日用量：300mg

小鼠的生物等效量：300×0.0026×50≈39mg/kg

小鼠实验用药的大、中、小剂量分别设定为78、39、20mg/kg

SASP成人每日用量：4g

小鼠的生物等效量：4g×0.0026×50≈0.52g/kg

2.实验方法和结果

2.1观察苦豆碱对小鼠溃疡性结肠炎的作用

方法：C57BL/6小鼠48只，适应性喂养1周后，随机分为5组，每组10只，即正常组，模型组，SASP组，苦豆碱高、低剂量组。正常组给予蒸馏水7天，然后予饮用水10天，如此循环4次，常规饲料喂养；其余各组给予3％DSS蒸馏水溶液饮用7天，然后予饮用水饮用10天(此为一个循环)，如此循环4次诱导溃疡性结肠炎模型。于给DSS后第3天开始各治疗组灌胃给药，按0.1ml/10g体重灌服相应药液；模型对照组给予和正常组等量的蒸馏水，持续8周，于第4个循环末处死小鼠。

实验期间观察每周观察小鼠体重，计算摄食量、食物利用率，每笼饮水量，计算摄入的DSS，计算终体重与起始体重比值。观察小鼠外观，测定大便隐血，依据体重、粪便黏度、大便隐血计算疾病活动指数，评价其活动度，见表1。剖开腹腔，冰上分离全结肠，测定全结肠长度(回肠与结肠连接部至肛门)，称重，拍照，计算每份重量mg/长度mm比值；计算脾脏重量。部分组织用PBS快速清洗干净，-70℃保存，待用。去距肛门1cm处肠段制作标本，在10％中性福尔马林中过夜固定，石蜡包埋，连续切片(厚度3um)，进行HE、Aician Blue二种染色组织观察组织学变化。Scanning Electron Microscopy(SEM)观察肠粘膜超微结构，用改良的Cooper方法进行病理评分，见表2。

表1DAI评分标准

得分	大便性状	隐血或血便
			0	正常	阴性
1	软便	阴性
			2	软便	隐血阳性
3	腹泻	隐血阳性
			4	腹泻	血便

注：DAI为两项得分之和，总分为0～8分；正常粪便：硬度适中、丸状；软便：浆糊状但肛口无粪迹；腹泻：稀薄便且粘于肛周。

表2病理评分标准(改良的Cooper方法)

得分	病损分级	病变范围(％)
			0	隐窝无损害	0
1	隐窝囊状扩张	1～20
			2	丧失基底部1/3隐窝	21～40
3	丧失基底部2/3隐窝	41～60
			4	丧失全部隐窝，上皮层仍完整	61～80
5	丧失全部隐窝和上皮层	81～100

注：病理评分为两项得分之和，总分为0～10分

结果：除正常组外，其余各组均有不同程度的摄食减少。第一周各组小鼠体重差异无显著性(p＞0.05)，正常组小鼠各周体重逐渐增加，模型组小鼠体重略有下降，与正常组比较差异有显著意义(p＜0.01)；各用药组小鼠体重均有不同程度的增加，各治疗组体重增加率均小于正常组，但大于模型对照组，表明苦豆碱能抑制DSS致UC小鼠的体重下降。见表3-4。

自由饮用DSS开始各组小鼠开始出现大便松软，第5、6天多数小鼠出现大便隐血、腹泻。1个循环之后，模型组全部小鼠体重均明显下降，食欲减退，懒动，脱毛，大量血便，四个循环之后模型组仍腹泻，各别血便，体重较前三个循环有所回升，炎症呈现慢性化进程。治疗各组较模型组程度轻，个别出现腹泻、血便。正常组无上述异常变化。结果见表5-6。

小鼠剖腹后，观察模型组较正常组全结肠明显缩短，肠壁变厚，肠腔狭窄。全结肠长度测量结果揭示模型组较对照组明显缩短，脾脏系数较对照组增加，治疗各组较模型组程度轻。表明苦豆碱能较好地降低DSS致溃疡性结肠炎小鼠大肠重量长度比值，减少大肠肿胀、纤维化等，并能较好地抑制DSS致UC小鼠的脾脏系数，降低UC小鼠的免疫过度活化。结果见表7-8.

光镜下造模组小鼠结肠炎症存在，表现为慢性炎症。粘膜出现广泛坏死、糜烂，腺体明显萎缩，炎症细胞浸润全层，呈现以淋巴细胞为主的非特异性炎症，并可见到淋巴滤泡，治疗各组溃疡面及病变程度明显减轻。

模型组的DAI评分和病理评分与治疗各组有显著差异(p＜0.05)，苦豆碱高低剂量组与SASP组比较均无统计学差异(p＞0.05)，提示苦豆碱在较低剂量时就可以达到与SASP治疗溃疡性结肠炎的同等效果，且未见明显毒副作用，结果见表10。

表3苦豆碱对DSS致溃疡性结肠炎小鼠食量的影响(Mean±SD)

注：^*P＜0.05^*P＜0.05^**P＜0.01模型组与正常组比较；^▲P＜0.05^▲▲P＜0.01模型组与用药组比较。

从表3可知，除第一周、第二周、第五周外，模型组和用药组小鼠食量与正常组相比差异无显著性；模型组与用药组在第五周、第六周小鼠食量比较，个别组有显著性差异，其余个时间点模型组与用药组小鼠食量比较无显著性差异。上述结果表明苦豆碱对DSS致溃疡性结肠炎小鼠食量无明显影响。

表4苦豆碱对DSS致溃疡性结肠炎小鼠体重增长率的影响(Mean±SD)

注：^*P＜0.05^**P＜0.01模型组与正常组比较；^▲P＜0.05^▲▲P＜0.01模型组与用药组比较。

由表4可知，从第二周至第九周模型组小鼠体重增长率为负增长，与正常组小鼠相比有显著性差异。各用药组小鼠体重增长率均与模型组相比有显著性差异，表明苦豆碱能较好地抑制DSS致UC小鼠的体重下降。

表5苦豆碱对DSS致溃疡性结肠炎小鼠大便潜血的影响(Mean±SD)

注：^*P＜0.05^**P＜0.01模型组与正常组比较；^▲P＜0.05^▲▲P＜0.01模型细与用药组比较

由表5可知，从第二周至第九周模型组小鼠体重增长率为负增长，与正常组小鼠相比有显著性差异。各用药组小鼠体重增长率均与模型组相比有显著性差异，表明苦豆碱能较好地抑制DSS致UC小鼠的体重下降。

表6苦豆碱对DSS致溃疡性结肠炎小鼠大便粘度评分的影响(Mean±SD)

注：^*P＜0.05^**P＜0.01模型组与正常组比较；^▲P＜0.05^▲▲P＜0.01模型组与用药组比较

从第一周至第九周模型组小鼠大便粘度，与正常组小鼠相比有显著性差异。各用药组小鼠大便粘度均与模型组相比有显著性差异，表明苦豆碱能有效降低DSS致UC小鼠的大便粘度。

表7苦豆碱对DSS致溃疡性结肠炎小鼠大肠重量长度比的影响(Mean±SD)

^*P＜0.05^**P＜0.01模型组与正常组比较；^▲P＜0.05^▲▲P＜0.01模型组与用药组比较.

从上表可知，模型组与正常组小鼠相比，大肠重量长度比值有显著性差异。各用药组小鼠大肠重量长度比值与模型组相比有显著性差异，表明苦豆碱能较好地降低DSS致溃疡性结肠炎小鼠大肠重量长度比值，减少大肠肿胀、纤维化等。

表8苦豆碱对DSS致溃疡性结肠炎小鼠脾脏系数影响(Mean±SD)

^*P＜0.05^**P＜0.01模型组与正常组比较；^▲p＜0.05^▲▲P＜0.01模型组与用药组比较

2.2苦豆碱对小鼠溃疡性结肠炎中血浆结合珠蛋白、盲肠内容物sIgA的影响：

C57BL/6小鼠50只，适应性喂养1周后，随机分为5组，每组10只，即正常组，模型组，SASP组、苦豆碱高、低剂量组。造模及给药方法同前。实验第8周末，取血和小鼠盲肠内容物，采用ELISA检测血浆结合珠蛋白(haptoglobin，Hp)含量(南京建成生物科技)、盲肠内容物sIgA的含量(南京建成生物工程研究所)。具体步骤参照试剂盒操作说明。

结果：模型组小鼠血浆结合珠蛋白含量，与正常组小鼠相比有差异性(P＜0.05)。各用药组小鼠血浆结合珠蛋白含量与模型组相比有显著性差异(P＜0.05，P＜0.01)，表明苦豆碱能较好地降低DSS致UC小鼠血浆结合珠蛋白含量。模型组小鼠盲肠内容物sIgA，与正常组小鼠相比有显著性差异(P＜0.05)。各用药组小鼠小鼠盲肠内容物sIgA与模型组相比有显著性差异(P＜0.01)，表明苦豆碱能较好地维持DSS致UC小鼠的盲肠内容物sIgA的含量。结果见表9～10。

表9苦豆碱对DSS致溃疡性结肠炎小鼠血浆结合珠蛋白的影响(Mean±SD)

注：^*P＜0.05模型组与正常组比较；^▲P＜0.05^▲▲P＜0.01模型组与用药组比较。

表10苦豆子对DSS致溃疡性结肠炎小鼠盲肠内容物sIgA的影响(Mean±SD)

Note：^*P＜0.05模型组与正常组比较；^▲▲P＜0.01模型组与用药组比较

3.结论：

1.DSS可致小鼠慢性溃疡性结肠炎形成。该模型组织学改变与人类相似，我们的实验结果与文献报道一致。

2.给小鼠高、低剂量的苦豆碱，连续9周，可显著改善DSS诱导的溃疡性结肠炎的病理损害，其效果与SASP效果无显著性差异(p＜0.05)苦豆碱高低剂量组与SASP组比较均无统计学差异(p＞0.05)，提示苦豆碱在较低剂量时就可以达到与SASP治疗溃疡性结肠炎的同等效果，且未明显毒副作用发生。

二、苦豆碱结肠定位释放水凝胶骨架片的研制

(一)苦豆碱投料方式的比较

1、干燥工艺：

设备：烘箱，粉碎机

方法：取苦豆碱200g放入不锈钢烘盘，温度60℃，分别于干燥后48h、72h、96h、120h观察苦豆碱变化。结果见表11。

表11、苦豆碱不同时间干燥后性状比较

2、溶解工艺：分别取苦豆碱200g溶于100ml、150ml纯化水、20％可溶性淀粉、50％乙醇中，超声1min，搅拌。

结果：苦豆碱在5min-8min内全部溶解，无沉淀。

结论：采用烘干法投料烘干时间长，损耗大，苦豆碱粉易粘结，不适合中试、大生产。将苦豆碱制备成溶液，溶解性好，无损耗，与瓜儿胶、糊精混合制粒，软材粘性适中，成粒较好，容易干燥。

(二)不同制备工艺引湿性试验比较

实验材料：

苦豆碱微丸：取苦豆碱11g，用纯化水溶解。取瓜儿胶和糊精，过80目筛，混匀，加入到上述苦豆碱水溶液中制软材，快速过22目筛，60℃烘干，得颗粒制成微丸。

苦豆碱骨架片颗粒：苦豆碱微丸加0.5％的硬脂酸镁，压片9mm浅凹冲压片芯(片重0.2g)制成颗粒。

苦豆碱骨架片：颗粒再用11mm冲浅凹冲压瓜尔胶衣(每片包衣量为0.08g)按实施例2制备。

实验分组：

1：包衣前的苦豆碱微丸；

2：包衣后的苦豆碱微丸；

3：苦豆碱骨架片颗粒；

4：苦豆碱骨架片。

吸湿率测定：在已恒重的称量瓶底部放入厚约2mm的颗粒，精密称重后置于表2所列的分别装有不同浓度硫酸或不同盐的过饱和溶液干燥器内(称量瓶打开)，于25℃恒温培养箱中保持7天，即达平衡，再精密称重，按下式计算吸湿百分率，结果见表12。

吸湿曲线的绘制：以上表中的吸湿率为纵坐标，相对湿度(RH％)为横坐标作图(图1)，计算临界相对湿度。

表12苦豆碱不同制剂的引湿性试验比较

结果表明，微丸包衣前后吸湿率无明显改变，放置7天后最高吸湿率达33.25％，临界相对湿度(CRH)为41％，吸湿性较强，因此微丸生产时对环境湿度要求高；采用本工艺制备的骨架片颗粒和片放置7天后最高吸湿率达23.54％，CRH为67％，吸湿性大大降低，有利于生产、储存。

(三)苦豆碱骨架片物理性状的考察

按实施例2工艺制备苦豆碱片070201和070202两批，采用固定漏斗法测定休止角，片重差异、硬度和脆碎度依据中国药典2005版附录要求测定。

结果表明，苦豆碱颗粒流动性好，可压性好。所制得片片重、硬度、脆碎度符合规定。结果见表13。

表13

批号	颗粒休止角	片外观	片重差异	硬度Kg	脆碎度％
						070201	28	光滑有光泽，无裂片	符合规定	5.2	0.81
070202	25	光滑有光泽，无裂片	符合规定	5.6	0.65

(四)γ-闪烁扫描法确定苦豆碱水凝胶骨架片在人体内释药部位研究

1材料

苦豆碱，由宁夏盐池制药厂提供，批号：20070212；光子发射计算机断层照相机(SPECT)旋转型的γ照相机，广州医学院肿瘤医院；高锝[＜99m＞Tc]酸钠注射液，南方医院核医学科提供。

2实验方法

2.1样品制备

按实施例5工艺制备苦豆碱颗粒，按“放射性物品管理和使用办法要求”，将高锝[^99mTc]酸钠注射液用食盐吸收。称好每片颗粒重量，先将50％颗粒放入单冲压片机，然后再加入一定量的含高锝[^99mTc]酸钠注射液食盐，最后加入剩余颗粒，压片，在片芯外压0.1g瓜儿胶，即得。每片含^99mTc 1.5MBq，试验前1小时制备。

2.2志愿者状况

男性健康志愿者2名，经体检无任何疾病，胃肠道功能正常，无烟酒嗜好。受试前一周未服用任何药物。试验前，志愿者被明确告知该试验可能发生的不良反应并自愿签署知情同意书。

2.3测定方法

志愿者禁食12h后口服含^99mTc 1.5MBq苦豆碱水凝胶骨架片1片，200mL温水送下。服药后立即进行监测，仰卧于SPECT机探头前并于不同时间拍摄照片、记录药片在胃肠道转运过程、崩解部位和时间。志愿者在药片胃排空后统一进低脂肪餐。

3结果

实验结果表明，苦豆碱水凝胶骨架片在2名志愿者体内的崩解部位均为升结肠，药片崩解时间为7～8h(图2所示)。志愿者1在约4h时，药片到达回盲部；在约5h时，药片到达升结肠；在约7h时，药片开始崩解，崩解部位为升结肠。志愿者2在约5h时，药片到达回盲部；在约7h时，药片到达升结肠；在约8h时，药片开始崩解，崩解部位为升结肠。采用放射同位素示踪技术表明苦豆碱水凝胶骨架片能够达到结肠定位释放，靶向明确。

(五)苦豆碱水凝胶骨架片制备工艺稳定性考察

按上述实施例2方案制备三批自制苦豆碱水凝胶骨架片(070301，070302，070303)，测定苦豆碱在含有4％大鼠结肠液中的释放，溶出介质和方法与实验(四)第2.2节描述的溶出介质和方法相同。

从表14可以看出，三批苦豆碱水凝胶骨架片批间差异较小，工艺稳定性较好。

表14Release(％)

Time	2	4	6	8	12	16	18	24
									70301	0	8.5	10.6	13.6	41.2	72.6	84.6	98.6
70302	0	9.6	11.6	14.8	40.9	74.9	85.9	96.7
									70303	0	9.2	11.8	15.3	42.8	71.5	83.8	98.8

(六)苦豆碱水凝胶骨架片稳定性考察

参照中国药典2005版药物稳定性试验原则进行，取本发明苦豆碱水凝胶骨架片(070304，按实施例1方法制备)样品在温度40℃、相对湿度为RH75％的条件下放置六个月，于6个月后检测药片物理性状和溶出度(按前述方法、溶出介质进行)。结果见表15、16。

表15

表16Release(％)

Time	2	4	6	8	12	16	18	24
									070304-0	0	8.8	11.6	14.6	42.2	73.6	82.6	96.6
070304-6	0	9.2	12.6	13.8	42.9	72.9	83.9	97.7

结果表明，由加速稳定性试验结果可见，片物理性状、苦豆碱含量、溶出度放置6个月与0个月比较没有显著性差异，表明该制剂较稳定。

结论：通过上述试验表明，苦豆碱微丸靶向性差，烘干工艺不合理，易吸湿，给生产、包装、储存带来了较大难度；苦豆碱水凝胶骨架片制备方法简便，投料合理，体内、外释放表明苦豆碱水凝胶骨架片靶向性好，工艺重现性高，产品稳定性大大提高。

(八)苦豆碱水凝胶骨架片不同辅料筛选试验：

1材料

(1)以瓜尔胶为骨架材料制备水凝胶骨架片(即本发明制剂)：配方为苦豆碱8g，瓜尔胶10g和糊精2g，共制成100片。

(2)以羟丙基甲基纤维素为骨架材料制备水凝胶骨架片：配方为苦豆碱8g，羟丙基甲基纤维素10g和糊精2g，共制成100片。

2片芯的溶胀和溶蚀测定

以900mLph6.8的磷酸钠缓冲液为介质，转速为150r·min^-1，温度(37±0.5)℃，分别于30、60、90、120、180、240min作上述实验取样。将已称重的样品(w₀)置于溶出溶出杯中，分别于相应时间点将样品取出，用滤纸吸去多余水分后称重(w₁)，置60℃电热恒温箱中至恒重，移至干燥器中降至室温后称重(w₂)。每一时间点均采用新的样品。按下列公式计算

％Remaining(剩余量)＝100-ES

结果如图3和4所示。就在ph6.8磷酸盐缓冲介质中的溶胀情况而言，以瓜尔胶为骨架材料的水凝胶片和以羟丙基甲基纤维素为骨架材料的水凝胶片相比无明显差异；但溶蚀剩余量方面，前者明显较高，表明瓜尔胶能在磷酸盐缓冲液中形成粘性强度高的凝胶层，而相同含量的羟丙基甲基纤维素不能克服其溶蚀，凝胶强度低。由此可知，以羟丙基甲基纤维素为骨架材料在胃肠道蠕动等机械运动下不能形成高强度的凝胶而使药物释放。

附图说明

图1是苦豆碱不同制剂的吸收率随相对湿度变化的曲线图，其中

表示苦豆碱微丸包衣前的吸湿率，表示苦豆碱微丸包衣后的吸湿率，

表示苦豆碱骨架片颗粒的吸湿率，

表示苦豆碱骨架片的吸湿率。

图2是不同制剂中苦豆碱的释放度曲线图，其中

表示苦豆碱微丸，

表示本发明制剂。

图3是不同骨架材料的苦豆碱水凝胶骨架片的溶胀情况曲线图。

图4是不同骨架材料的苦豆碱水凝胶骨架片的溶蚀剩余量曲线图。

具体实施方式

例1

制剂配方：

苦豆碱(12.5％)            2.5g

瓜儿胶(60％)              12g

糊精(27.5％)              5.5g

总计                      100片

方法：取苦豆碱2.5g，用5％的可溶性淀粉溶液溶解。取瓜儿胶和糊精，过80目筛混匀，加入到上述可溶性淀粉溶液中制软材，快速过22目筛，60℃烘干，得颗粒。加0.5％的硬脂酸镁，压片9mm浅凹冲压片芯(片重0.2g)，再用11mm冲浅凹冲压瓜尔胶衣(每片包衣量为0.1g)。

软材：粘性适中，易过筛成粒。

颗粒：浅黄色，色泽均匀，干燥后颗粒较好，粗细颗粒适中。

压片：外观色泽均匀，无裂片，包衣完整。

例2

制剂配方：

苦豆碱(55％)            11g

瓜儿胶(40％)            8g

糊精(5％)               9.5g

总计                    100片

方法：取苦豆碱11g，用纯化水溶解。取瓜儿胶和糊精，过80目筛，混匀，加入到上述苦豆碱水溶液中制软材，快速过22目筛，60℃烘干，得颗粒。加0.5％的硬脂酸镁，压片9mm浅凹冲压片芯(片重0.2g)，再用11mm冲浅凹冲压瓜尔胶衣(每片包衣量为0.08g)。

软材：粘性较大，易成粒。

颗粒：浅黄色，色泽均匀，干燥后颗粒较好。

压片：外观色泽均匀，无裂片，包衣完整。

例3

制剂配方：

苦豆碱(70％)            14g

瓜儿胶(18％)            3.6g

糊精(12％)              2.4g

总计                100片

工艺制备：取苦豆碱18g，用80％乙醇溶解。取瓜儿胶和糊精，过80目筛，混匀，加到上述苦豆碱80％乙醇溶液为中制软材，快速过22目筛，60℃烘干，加0.5％的硬脂酸镁，压片9mm浅凹冲压片芯(片重0.2g)，再用11mm冲浅凹冲压瓜尔胶衣0.2g(每片包衣量为0.2g)。

软材：较粘，软材较硬，过筛较难、成粒好。

颗粒：深黄色，色泽均匀，干燥后颗粒较好。

压片：外观色泽均匀，无裂片，包衣完整。

例4

制剂配方：

苦豆碱(60％)        12g

瓜儿胶(30％)        6g

糊精(10％)          2g

总计                100片

方法：取苦豆碱12g，用10％乙醇溶解。取瓜儿胶和糊精，过80目筛，混匀，加入到上述含苦豆碱的10％乙醇溶液中制软材，快速过22目筛，60℃烘干，得颗粒。加0.5％的硬脂酸镁，压片9mm浅凹冲压片芯，每片片重0.2g，再用11mm冲浅凹冲压按每个片芯包衣0.18g瓜尔胶的比例包衣。

软材：粘性大，软材较硬，成粒好。

颗粒：黄色，色泽均匀，干燥后颗粒较好。

压片：外观色泽均匀，无裂片，包衣完整。

Claims (3)

1、苦豆碱在制备治疗溃疡性结肠炎药物中的应用。

2、一种苦豆碱的结肠靶向制剂，该制剂由片芯和包裹在片芯外的阻滞层构成，片芯和阻滞层的质量比为1∶1～1∶0.4；其中，所述片芯由分别占片芯总质量10～70％的苦豆碱、10～80％的瓜尔胶和5～30％的糊精组成，所述阻滞层为瓜尔胶。

3、权利要求2所述制剂的制备方法，该方法由以下步骤组成：

取瓜尔胶和糊精，过80目筛；取苦豆碱溶于适量溶剂，加入片芯配方量的瓜尔胶和糊精混匀制成软材，制粒，压片，最后按阻滞层配方量取瓜尔胶包衣；所述的溶剂为水、浓度为5～20％(w/v)的可溶性淀粉溶液或浓度为10～80％(v/v)的乙醇溶液。

Images